Оптимизация диагностики и терапии уретрита, вызванного Mycoplasma genitalium, у мужчин. тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.10, кандидат медицинских наук Бурцев, Олег Анатольевич

• Бурцев, Олег Анатольевич
• кандидат медицинских наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Бурцев, Олег Анатольевич

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Роль Mycoplasma genitalium в развитии уретритов человека

1.1.1. Биология М. genitalium

1.1.2. Патогенез микоплазменной инфекции для человека

1.2. Методы лабораторной диагностики микоплазменной инфекции

1.2.1. Культуральный метод

1.2.2. Метод клеточных культур

1.2.3. Серологические методы

1.2.4. Иммуннологический метод

1.2.5.Методы амплификации нуклеиновых кислот

1.2.5.1.Метод полимеразной цепной реакции

1.2.5.2. ПЦР в «режиме реального времени»

1.2.5.3. НАСБА «в реальном времени»

1.2.5.4. Метод транскрипционно-опосредованной амплификации

1.2.5.5. Сравнительный анализ методов лабораторной диагностики микоплазменной инфекции

1.3. Клинические проявления уретрита, ассоциированного с

Mycoplasma genitalium, у мужчин

1.4. Особенности современной терапии уретритов, ассоциированных с М. genitalium

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Клиническая характеристика пациентов и методы клинико-инструментального обследования

2.2. Лабораторные методы исследования

2.2.1. Микроскопическое исследование материала

2.2.2. Молекулярно-биологическое исследование материала 50 2.2.2.1 Метод ПЦР «в реальном времени»

2.2.2.2. Метод количественной оценки содержания М^епНаИит

2.2.2.3. Метод НАСБА «в реальном времени»

2.2.2.4. Использование метода ПЦР для определения мутаций в гене 238 рРНК , ассоциированных с устойчивостью к джозамицину

2.2.2.5. Метод прямого секвенирования 58 2.3.Этиотропная терапия пациентов с уретритом 59 2.4. Статистическая обработка полученных результатов

ГЛАВА 3. КЛИНИКО - ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ОБСЛЕДОВАННЫХ ПАЦИЕНТОВ

3.1. Социально - демографическая характеристика обследованных пациентов

3.2. Характеристика сексуального поведения обследованных пациентов

3.3. Клинические особенности течения уретритов, вызванных Mycoplasma genitalium, Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, у мужчин

3.4. Клинические и лабораторные маркеры уретритов у мужчин, вызванных Mycoplasma genitalium, Chlamydia trachomatis,

Neisseria gonorrhoeae

ГЛАВА 4. УРЕТРИТ У МУЖЧИН, ВЫЗВАННЫЙ MYCOPLASMA GENITALIUM: КЛИНИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ И ОПТИМИЗАЦИЯ МЕТОДОВ ДИАГНОСТИКИ

4.1. Результаты клинических исследований особенностей течения уретрита, вызванного Mycoplasma genitalium, у мужчин

4.2. Сравнение диагностической значимости методов ПЦР «в реальном времени» и НАСБА «в реальном времени», используемых для выявления Mycoplasma genitalium у пациентов с уретритами

4.2.1. Идентификация Mycoplasma genitalium в клиническом материале (уретральный мазок или первой порции мочи) методами ПЦР«в реальном времени»,

НАСБА «в реальном времени»

4.2.2. Сравнение аналитической чувствительности методов ПЦР «в реальном времени» и НАСБА «в реальном времени» при идентификации

Mycoplasma genitalium в клиническом материале

ГЛАВА 5. ТЕРАПИЯ УРЕТРИТА, ВЫЗВАННОГО MYCOPLASMA GENITALIUM, У МУЖЧИН: МОНИТОРИНГ КЛИНИКО-ЛАБОРАТОРНЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ.

5.1. Динамика клинических проявлений и лабораторных показателей при лечении джозамицином уретрита, ассоциированного с Mycoplasma genitalium, у мужчин

5.2. Изучение скорости элиминации Mycoplasma genitalium в зависимости от бактериальной нагрузки при терапии джозамицином уретрита мужчин, вызванного микоплазменной инфекцией

ГЛАВА 6. МОНИТОРИНГ БАКТЕРИАЛЬНОЙ НАГРУЗКИ ПРИ ЭРАДИКАЦИИ MYCOPLASMA GENITALIUM И ФОРМИРОВАНИЕ РЕЗИСТЕНТНОСТИ У ПАЦИЕНТОВ С НЕГОНОКОККОВЫМИ УРЕТРИТАМИ ПРИ ТЕРАПИИ ДЖОЗАМИЦИНОМ

6.1. Определение взаимосвязи формирования антибиотической резистентности и бактериальной нагрузки М. genitalium, установленной до лечения джозамицином

6.2. Использование метода ПЦР для определения в 23S рРНК гене мутаций, которые коррелируют с устойчивостью Mycoplasma genitalium к макролидам

6.3. Анализ последовательности 23S-p РНК, выделенной из джоз-амицин-резистентных изолятов Mycoplasma genitalium

ГЛАВА 7. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Оптимизация диагностики и терапии уретрита, вызванного Mycoplasma genitalium, у мужчин.»

Актуальность проблемы

Инфекции урогенитального тракта представляют серьезную проблему для здравоохранения и создают основную угрозу репродуктивному здоровью населения (А.А. Кубанова с соавт., 1999; Ю.К. Скрипкин с соавт., 1999; В.А. Аковбян, 2000; В.И. Кисина с соавт., 2004; В.А. Аковбян, 2007; В.И. Кисина с соавт., 2008). Среди заболеваний мочеполовых путей человека наиболее распространены уретриты. Уретрит — это воспалительное заболевание слизистой оболочки уретры, инфицированной микроорганизмами и/или вирусами (O.JI. Иванов с соавт., 2004; P.J. Horner et al., 2001; C.S. Bradshaw et al., 2006; M.C. Nogales et al., 2007; M. Shahmanesh et al., 2009). У большинства больных классические клинические проявления уретрита сопровождаются дизурией и выделениями из уретры, но 20% мужчин имеют асимптомно протекающий уретрит, что снижает мотивацию к своевременному обращению к врачу и приводит к хронизации воспалительного процесса. Длительное течение и прогрессирование уретрита может приводить к возникновению различных осложнений, таких как орхит, везикулит, эпидидимит, простатит с последующим развитием вторичного бесплодия (В.А. Аковбян, 2007). В зависимости от обнаружения Neisseria gonorrhoeae в клиническом материале, полученном у больного, уретрит принято делить на гонококковый (ГУ) и негонококковый (НГУ) (В.А. Аковбян, 2007; В.И. Кисина, с соавтор., 2008). Диагноз НГУ подразумевает наличие определенной клинической картины (дизурия и/или выделения из уретры) и /или присутствие полиморфноядерных лейкоцитов (ПМЯЛ) (в уретральных мазках или первой порции мочи (ППМ). В связи с тем, что заболевание может протекать без клинических проявлений объективным критерием уретрита является определение количества ПМЯЛ более 4 в поле зрения в мазках, полученных из уретры (Аковбян В.А., 2007; P.J. Horner et al., 2001; М. Shahmanesh et al., 2009). 7

Медико-социальная значимость данной проблемы определяется тем, что НГУ наиболее часто встречаются у молодых людей: преимущественно в возрасте 20 - 24 лет, на втором месте по частоте — возрастная группа 15 — 19 лет, на третьем - возрастная группа 25 -29 лет. Эпидемиологическое и клиническое значения НГУ заключаются в повышении риска заболевания ВИЧ инфекцией, генитальным герпесом, сифилисом, развитием осложнений (простатит, эпидимит) (В.В. Чеботарев, 1999; В.А. Молочков с соавт., 2006; J. Paavonen, W. Eggert-Kruse, 1999; J.N. Krieger, D.E. Riley, 2004; K.E. Miller, 2006; P. J. Horner, 2007).

На долю НГУ у мужчин приходится до 65% случаев воспалительных заболеваний урогенитального тракта. Согласно данным государственной статистики в мире выявляется 50 млн. случаев НГУ в год. В России ежегодно регистрируется около 350000 случаев НГУ (В.А. Аковбян, 2007; В.И. Кисина с соавтор., 2008). По данным зарубежных исследователей заболеваемость НГУ в 2,5-3 раза превышает таковую гонореей. Более точные эпидемиологические характеристики НГУ ограничены тем, что часть из них протекает бессимптомно и, как следствие, не регистрируется. НГУ — это группа заболеваний, объединенных общими клиническими проявлениями, но вызываемых различными возбудителями. Большое значение в развитии НГУ имеют облигатные патогены Chlamydia trachomatis, Trichomonas vaginalis, Herpes Simplex Virus типов 1 и 2, Mycoplasma genitalium, а также условно-патогенная микрофлора (например, Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum, Gardnerella vaginalis) (В.А. Аковбян, 2007; В.И. Кисина, с соавтор., 2008; R.L. Cook et al., 2005; C.S. Bradshaw et al., 2006; T. Yoshida et al, 2007). В 30-80% случаев при НГУ выделяют или С. trachomatis, или М. genitalium (М. Shahmanesh et al., 2009). Доля случаев у больных НГУ, вызванных М. genitalium, составляет от 6 до 50% (X. Хандсфилд, 2004; W. Heying, 2001). Имеется большое количество сообщений зарубежных исследователей о том, что уретрит, вызванный М. genitalium, может протекать в острой, персистирующей или рецидивирующей форме (P.J. Horner et al., 2001; J.S. Jensen, 2004; C.S. Bradshaw et al., 2006; Shahmanesh et al., 2009), однако в России, подобные исследования не проводились.

Учитывая, что возбудители уретрита, относящиеся к разным таксономическим группам (вирусы, бактерии, простейшие), чувствительны к различным антибиотическим препаратам, а клиническая картина НГУ не имеет специфических признаков, позволяющих установить этиологию патогена, то ключевым звеном, которое определяет тактику ведения пациентов, является лабораторная диагностика инфекционных агентов. В настоящее время М. genitalium - это один из мало изученных возбудителей уретрита у мужчин. Именно поэтому вопросы диагностики и этиотропной терапии с учетом чувствительности М. genitalium к антибактериальным препаратам являются актуальной проблемой современной медицины.

Однако бактериологические методы диагностики (микроскопические, культуральные) не позволяют выявлять M.genitalium (J.S. Jensen, 2004; M.R.H. Nusbaum et al., 2004; F. Bally., Troillet N., 2006; W.H. Gübelin et al, 2006): в связи с чрезвычайно малыми размерами патогене не обнаруживается при световой микроскопии и относится к разряду труднокультивируемых (в связи с низкой скоростью деления клеток, высокие требования к составу питательных сред). Серологические методы не применяются для диагностики микоплазенной инфекции, т.к. М. genitalium обладает низкими иммуногенными свойствами, а кроме того, несет родовые антигены, встречающиеся у других представителей молликут, способных к колонизации организма человека.

В нашей стране диагностика уретрита современными высоко технологичными методами пока не регламентирована нормативными документами, и поэтому требуется тщательное изучение всех аспектов их применения для диагностики микроорганизма и интеграции полученных результатов в алгоритм клинико-лабораторного обследования (Г.А. Дмитриев, 2004; A.M. Савичева, 2007).

Лабораторная диагностика М. genitalium осуществляется путем применения методов исследования, основанных на амплификации нуклеиновых кислот 9

МАНК), обладающих специфичностью, высокой аналитической чувствительностью, унифицированным протоколом лабораторного анализа, объективностью интерпретации полученных результатов и быстротой выполнения исследования. В последние годы среди МАНК наибольшее развитие получила полимеразная цепная реакция (ПЦР). Данный метод направлен на выявление ДНК или РНК возбудителя. Использование технологии флуоресцентно-меченных зондов позволило разработать тесты МАНК нового поколения с детекцией и анализом результатов в режиме реального времени («ПЦР в реальном времени»), а также принципиально новые методы, которые направлены на выявление РНК патогенов (например, реакция транскрипционной амплификации «НАСБА в реальном времени»).

Аналитическая чувствительность как «ПЦР в реальном времени», так и «НАСБА в реальном времени» во многом зависит от вида клинического материала, взятого для исследования (моча или отделяемое уретры). Показано, что использование клинического материала, полученного неинвазивным путем (моча), является таким же чувствительным, как и использованием уретральных проб (J.S. Jensen et al., 2004). Кроме того, неинвазивный способ получения клинического материала значительно облегчает проведение скрининговых исследований.

Этиотропное лечение уретритов, вызванных М. genitalium, — сложная и трудная задача, основанная на применении антибактериальных препаратов различных групп. В настоящее время опубликованы единичные работы, посвященные антибиотикотерапии уретритов, вызванных M.genitalium. Это связано с тем, что количество штаммов М. genitalium, доступных для изучения их чувствительности к антибиотикам ограничено, т.к. не все штаммы М. genitalium могут культивироваться на искусственных питательных средах. При этом полученные данные весьма противоречивы, что подчеркивает необходимость дальнейшего изучения этого микроорганизма и поиска эффективных вариантов терапии. По данным N. Dupin и его коллег (2003) исчезновение M.genitalium из уретры всегда сопровождается разрешением

10 уретрита и, наоборот, рецидив заболевания может быть связан с использованием препаратов, недостаточно активных в отношении данного возбудителя. Препаратом выбора при инфицировании M.genitalium традиционно считается азитромицин, который назначается 5-дневным курсом. Однако участившиеся случаи клинических неудач при применении азитромицина диктуют необходимость поиска альтернативных режимов терапии (C.S. Bradshaw et al., 2006).

Одним из таких препаратов может являться 16-членный макролидный антибиотик джозамицин (Вильпрафен®), обладающий высокой активностью в отношении M.genitalium in vitro (С.М. Bebear et al., 2000). Достоинствами препарата также являются хороший профиль безопасности, низкий риск лекарственных взаимодействий (C.B. Моисеев, 2005).

Актуальность настоящего исследования обусловлена необходимостью объективной оценки эффективности использования современных молекулярно-биологических методов, направленных на идентификацию M. genitalium в рамках алгоритма ведения пациентов с НГУ.

Таким образом, своевременная диагностика уретрита, ассоциированного с M.genitalium, служит основанием для раннего начала антибактериальной терапии, а также для информирования пациентов об особенностях распространения заболевания, последствиях для репродуктивного здоровья обоих половых партнеров.

Целью настоящего исследования явилось изучение клинических проявлений, оптимизация методов диагностики и совершенствование лечения уретрита, вызванного Mycoplasma genitalium, у мужчин.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ:

1. Изучить этиологическую структуру уретритов у мужчин и определить частоту выявляемости уретрита, вызванного Mycoplasma genitalium.

2. Изучить клинические особенности течения уретрита, вызванного Mycoplasma genitalium, у мужчин, включая хронические формы заболевания.Изучить динамику клинических проявлений и лабораторных маркеров уретритов в процессе лечения.

3. Определить диагностическое значение применения двух молекулярно-биологических методов - ПЦР в реальном времени и НАСБА в реальном времени для идентификации М. genitalium.

4. Сравнить диагностическое значение различных видов клинического материала (уретральный соскоб или первая порция мочи), используемого для идентификации М. genitalium и оценить возможность использования неинвазивной методики забора материала.

5. Разработать алгоритм ведения мужчин с уретритом, вызванным Mycoplasma genitalium, и изучить его эффективность с учетом динамики клинических проявлений и элиминации ДНК и РНК Mycoplasma genitalium в процессе терапии.

Научная новизна работы.

На основании комплексного клинико-лабораторного обследования пациентов с уретритами определена их этиологическая структура и частота выявления М. genitalium. Определены особенности клинического течения поражений урогенитального тракта, ассоциированных с М. genitalium. При этом показано, что уретрит, вызванный М. genitalium, протекает преимущественно в острой форме, однако не имеет специфических клинических признаков и проявлений. Впервые проведена детальная клиническая и лабораторная характеристика пациентов как в процессе лечения, так и на разных сроках после окончания терапии.

Проведена сравнительная оценка идентификации М. genitalium в двух видах клинического материала (уретральный соскоб и первая порция мочи) при использовании двумя принципиально разными методами амплификации нуклеиновых кислот: ПЦР в реальном времени и НАСБА в реально времени.

Впервые оценена возможность использования независимых молекулярно-биологических методов диагностики «НАСБА в реальном времени» и «ПЦР в реальном времени», позволяющих достоверно установить наличие инфекции по двум типам генетического материала ДНК и РНК при асимптомном и хроническом течении заболевания.

Разработан патогенетически-обоснованный, высокоэффективный метод контроля эффективности терапии НГУ, обусловленного М. genitalium, с учетом клинических проявлений и характера течения инфекционного процесса.

Впервые описаны генетические маркеры, обеспечивающие резистентность к джозамицину.

Впервые описаны мутации устойчивости к макролидам, расположенные в пептидилтрансферазном центре в V домене 23 S рРНК и коррелирующая с резистентностью к джозамицину у М. genitalium. Точечная мутация A2062G, как и другая мутация A2059G (нумерация по E.coli), ответственная за резистентность к джозамицину, выявлены ш vivo. Практическая значимость.

Показана высокая диагностическая эффективность НАСБА при детекции инфекционного агента в клиническом материале, полученном неинвазивным путем (моча), у пациентов с уретритом, вызванным М. genitalium.

Применение разработанного алгоритма клинико-лабораторного обследования пациентов и терапии уретрита, вызванного М. genitalium, позволяет достоверно выявлять инфекционный агент, в том числе в случаях мало - и асимптомного течения заболевания, своевременно назначать адекватную терапию на ранних стадиях патологического процесса и контролировать эффективность лечения.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту.

1. Этиологическая структура НГУ у мужчин репродуктивного возраста на современном этапе характеризуется сочетанием патогенных или условно-патогенных возбудителей, среди которых особое значение отводится М. genitalium. Уретрит, вызванный М. genitalium, преимущественно протекает в форме острого уретрита, однако не имеет специфических клинических признаков и проявлений.

2. Диагностическая чувствительность методов «НАСБА в реальном времени» составляет 100% и не зависит от вида клинического материала, взятого для исследования (моча или отделяемое уретры), что особенно важно при асимптомных и хронических случаях заболевания.

3. Применение комплексного клинико-лабораторного обследования больных позволяет повысить точность дифференциальной диагностики НГУ. С учетом отсутствия патогномоничных признаков инфекции и с целью выбора наиболее эффективной схемы лечения это позволяет значительно снизить вероятность получения дискордантных результатов, в короткие сроки выявить возбудителя.

4. Использование двух молекулярно-биологические методов позволяет достоверно установить наличие инфекции и оценить эффективность проведенной терапии.

Внедрение в практику

Результаты исследований и разработанные рекомендации внедрены в практическую работу Консультативно-диагностического центра ФГУ «ГНЦДК», ФГУЗ КБ№84 ФМБА России. Разработанный алгоритм ведения мужчин больных уретритом с применением методов амплификации нуклеиновых кислот для идентификации этиологического агента рекомендован для использования в практической работе дерматовенерологов, урологов, репродуктологов, т.к. данный алгоритм позволяет оптимизировать диагностику НГУ, вызванного М.genitalium, у мужчин.

Апробация работы

Основные результаты работы проведенного исследования доложены и обсуждены на X Всероссийской конференции дерматовенерологов (Москва, 2006); Шестой Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Генодиагностика инфекционных болезней — 2007» (Москва, 2007); 23-я IUSTI Европейская конференция о инфекциях, передаваемые половым путем, и ВИЧ/СПИД (Дубровник, Хорватия, 2007); 11-ый IUSTI Всемирного конгресса Африки (Кейптаун, ЮАР, 2009)

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 8 печатных работ, из них в рецензируемых научных изданиях — 2. Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, 5 глав, содержащих результаты соответствующих исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы. Диссертация изложена на 174 страницах машинописного текста, иллюстрирована 31 таблицами и 17 рисунками. Библиографический указатель включает 209 источника, из которых 54 отечественных и. 155 зарубежных авторов.

Заключение диссертации по теме «Кожные и венерические болезни», Бурцев, Олег Анатольевич

выводы

1. Изучена этиологическая структура уретритов у мужчин, при этом установлено, что доля случаев гонококкового и негонококкового уретрита составила 10,7% и 89,3%, соответственно от общей доли случаев уретрита. Частота выявления С. trachomatis и М. genitalium от общего количества уретритов составила 40,6% и 18,8%, соответственно, а доля от общего числа негонококковых уретритов - 45,5% и 21,1%, соответственно. Доля уретритов, вызванных М. genitalium, составила 38,6% от всех негонококковых нехламидийных уретритов, при этом частота выявляемое™ М. genitalium как моноинфекции составила 82,4%, в ассоциации с С. trachomatis - 3,9% и в ассоциации с условно-патогенными микроорганизмами -13,7%.

2. Изучены клинические особенности течения уретрита, вызванного М. genitalium, у мужчин, при этом установлено, что инфицирование M.genitalium в 93,9% случаев приводит к развитию воспалительного процесса, - не имеющего специфических клинических признаков - и проявлений, но сопровождающегося выраженной клинической картиной, характеризующейся уретральными выделениями преимущественно слизисто-гнойного характера (89,1%); дизурией (34,7%); гиперемией наружного отверстия уретры (58,7%); зудом/жжением в области наружного отверстия мочеиспускательного канала (82,6%).

3. Определено диагностическое значение методов молекулярно-биологической диагностики, основанных на разных принципах амплификации нуклеиновых кислот, для идентификации М. genitalium. Сопоставление результатов, полученных методами «НАСБА в реальном времени» и «ПЦР в реальном времени», показало высоко статистически значимые различия между ними при анализе образцов уретральных мазков и 111 IM (г=0,6727 и г=0,5658, соответственно при р<0,05), что подтвердило более высокую аналитическую чувствительность метода «НАСБА в реальном времени» вне зависимости от типа клинического материала и с любой инфекционной нагрузкой.

132

4. Определено диагностическое значение различных видов клинического материала (уретральный мазок или ППМ), используемого для идентификации М. gemtalium. Установлена высоко статистически значимая степень совпадения результатов при идентификации М^епЫаНит в первой порции мочи с результатами исследования уретральных мазков (г=0,7522 и г=0,6862, соответственно при р<0,05) обоими молекулярно-биологическими, что позволяет использовать для диагностики М. genitalium, клинический материал, полученный не инвазивным путем (первая порция мочи). 5. На основе результатов динамического наблюдения пациентов в процессе терапии установлено, что нормализация клинических проявлений инфекции сопровождалась нормализацией микроскопических (снижение количества ПМЯЛ) и молекулярно-биологических маркеров инфекции (исчезновение ДНК и РНК М^епкаНшп. Разработан надежный алгоритм контроля эффективности терапии уретрита, вызванного М. genitalium, у мужчин по результатам исследования двух типов клинического материала на наличие двух типов нуклеиновых кислот возбудителя методами ПЦР и НАСБА в реальном времени.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В настоящем исследовании впервые в практике лабораторного исследования на М^епИаИит предложена достаточно строгая микробиологическая оценка эффективности лечения - исследовали оба типа нуклеиновых кислот возбудителя и два типа клинического материала. Обнаружение любого из маркеров М^епИаНит (ДНК или рРНК) в уретральном мазке или ППМ рассматривалось в пользу продолжающейся инфекции.

При обследовании больных инфицированных М. genitalium сравнивали результаты исследования клинического материала (уретральный мазок и ППМ) методами «ПЦР в реальном времени» и «НАСБА в реальном времени» Сделан вывод, что исследование мочи является таким же чувствительным, как и с использованием уретральных мазков. Неинвазивный способ получения клинического материала (моча) предпочитается пациентами, что в значительной степени облегчает проведение исследований.

Проведено исследование, в котором сравнивались два метода «ПЦР в реальном времени» и «НАСБА в реальном времени», которые имеют разный принцип амплификации, и был сделан вывод, что метод «НАСБА в реальном времени» может быть использован как полезный диагностический метод для идентификации и оценки количественного содержания М^епИаНит. В рамках разработки и лабораторных испытаний нами было установлено, что с помощью «НАСБА в реальном времени» можно было обнаружить возбудитель как минимум в 10 раз меньшей концентрации, чем методом «ПЦР в реальном времени». В нашем исследовании именно методом «НАСБА в реальном времени» удалось подтвердить наличие возбудителя у одного из пациентов с рецидивом инфекции, у которого плотность обсемененности М^епНаИит была столь низка, что не обнаруживалась методом «ПЦР в реальном времени».

Корреляция между уровнем бактериальной нагрузки в материале из мочеиспускательного канала пациентов с клиническими проявлениями М^епНаНит-ассоциированного уретрита и пациентов без симптомов заболевания не установлена.

В текущем исследовании мы оценивали эффективность протокола лечения джозамицином на основании результатов динамического наблюдения клинических и лабораторных признаков уретрита, а также скорости элиминации возбудителя на основании результатов выявления генетического материала M.genitalium - ДНК и рибосомальных РНК (рРНК) непосредственно в процессе лечения. В результате проведения специфической терапии, направленной на эрадикацию возбудителя уретрита, вызванного M.genitalium, отмечено, что джозамицин является адекватным антибактериальным препаратом для терапии уретрита с высокой эффективностью и хорошей переносимостью. Эрадикация М. genitalium достигнута у 95,6% пациентов. Показана возможность возникновения джозамицин-резистентных изолятов М. genitalium.

Впервые в мире выявлена и описана точечная мутация для М. genitalium, приводящая к устойчивости к 16-членным макролидам, A2062G (нумерация по E.coli).

В заключение необходимо отметить, что урогенитальные инфекции действительно являются серьезной проблемой в урологии, андрологии, дерматовенерологии, репродуктологии, и формирование единых подходов к диагностике и лечению пациентов позволит избежать диагностических ошибок и неоправданного назначения антибактериальных препаратов. Вместе с тем правильная постановка диагноза и своевременно начатое адекватное лечение позволят не только предотвратить формирование осложнений, но и сохранить репродуктивное здоровье.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Бурцев, Олег Анатольевич, 2011 год

1. Аковбян В.А. Рациональная терапия инфекций, передающихся половым путем / В.А. Аковбян // Consilium medicum. 2000. - Т.2. -№4. -С. 159-161.

2. Аковбян В.А. Негонококковые уретриты у мужчин: этиология, особенности диагностики и лечения / В.А. Аковбян // Справочник поликлинического врача. 2007. - №9. - С.58-62

3. Бенькович A.C. Инфекции, вызываемые Mycoplasma genitalium: клинические проявления, особенности диагностики и терапии /A.C. Бенькович, Е.В. Шипицына, A.M. Савичева и др.// Клиническая дерматология и венерология. 2008. - №3. - С.56-63.

4. Борхсениус С.Н. Микоплазмы. Молекулярная и клеточная биология, взаимодействие с иммунной системой млекопитающих, патогенность, диагностика / С.Н. Борхсениус, О.А.Чернова, В.М. Чернов и др.- М.: Наука, 2000.- 13с.

5. Вавилов A.M. Рациональная фармакотерапия заболеваний кожи и инфекций, передаваемых половым путем / A.M. Вавилов, В.А. Волнухин , A.A. Кубанова М.: Литтерра, 2007. - 512 с.

6. Веселов A.B. Азитромицин: современные аспекты клинического применения / A.B. Веселов, P.C. Козлов // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2006. - Т. 8.- С. 1-4

7. Воробьева Н.Е. Динамика выявления Chlamydia trachomatis в ходе лечения урогенитальной хламидийной инфекции доксициклином (Юнидоксом Солютаб®) / Н.Е. Воробьева, Е.В Шипицына., Е.В. Соколовский и др.// Трудный пациент. 2006. - №5. - С.31-34.

8. Герасимова Н.М. Урогенитальные инфекции как междисциплинарная проблема. Современные подходы к диагностике и лечению / Н.М. Герасимова, Н.П. Евстигнеева, Ю.Н. Кузнецова// Вестник последипломного медицинского образования. 2009. -№1. - С. 16-19

9. Глик Б. Молекулярная биотехнология. Принципы и применение / Б. Глик, Дж. Пастернак М.: Мир. - 2002. - 589 с.

10. Гомберг М.А. Лечение уретритов, вызванных Mycoplasma genitalium / М.А. Гомберг, A.M. Соловьев, И.Н. Анискова и др. // Лечащий врач. — 2007. Т.7. -С.21-26

11. Государственный доклад «О состоянии здоровья населения Российской Федерации в 1999 году». -М.: 2000.

12. Дмитриев Г. А. Качество лабораторной диагностики инфекций, передаваемых половым путем / Г.А. Дмитриев // Consilium Medicum.-2005.-Т.7.-№3 .-С. 197-200.

13. Забиров К.И. Уретриты, простатит, эпидидимит // Инфекции передаваемые половым путем / Под ред. В.А. Аковбяна, В.И. Прохоренкова, Е.В. Соколовского: Учебное пособие для системы послевузовского профобразования врачей. М.: Медиа Сфера, 2007. — 613с.

14. Здоровье населения России и деятельность учреждений здравоохранения в 2000 году (статистические материалы) МЗ РФ.- М. -2001.- С. 55-56.

15. Иванов М.К. Особенности количественного анализа методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени / М.К. Иванов,

16. B.Д. Порываев, Е.В. Кандрушин // Новости "Вектор-Бест". 2008. - №4.1. C.12-17

17. Иванов О.Л. Негонококковые уретриты: эпидемиология, диагностика и терапия / О.Л. Иванов, A.A. Халдин, A.A. Фадеев // РМЖ.-2004.-Т.12.-№4.-С.165-166.

18. Кисина В.И. Критерии выбора рекомендованных и альтернативных методов лечения урогенитальных инфекций / В.И. Кисина, В.П. Ковалык, Г.Л. Колиева // Трудный пациент. 2005. - № 2. - С. 1-4.

19. Кисина В.И. Современные подходы к диагностике и лечению негонококковых уретритов / В.И. Кисина, Е.В. Ширшова, К.И. Забиров и др.// Consilium Medicum. 2005. - Том 7. - С. 32-34.

20. Кисина В.И. Клинические синдромы, ассоциированные с генитальными микоплазмами: диагностика и лечение / В.И.Кисина, Е.В. Ширшова, К.И. Забиров и др. // Вестник дематологии и венерологии. -2004.-№5.-С. 16-23.

21. Кубанова А.А. Некоторые механизмы патогенеза репродуктивных нарушений у мужчин с урогенитальным хламидиозом и микоплазмозом / А.А. Кубанова, К.И. Забиров, М.М. Васильев и др. // Вестн последиплом мед образования. 1999. - Спец. Вып.: С.53-54.

22. Локшин К.Л. Негонококковые уретриты у мужчин // Трудный пациент. -2009.-№3.-С. 29-32.

23. Лопаткин Н.А. Урология / Н.А. Лопаткин: Национальное руководство.- М: ГЭОТАР-Медиа, 2009. 1024с.

24. Моисеев С.В. Джозамицин: отличительные особенности и перспективы применения / С.В. Моисеев // Клиническая фармакология и терапия. 2005.- Т.14. С.1-4.

25. Молочков В.А. Инфекции, передаваемые половым путем. Клиника, диагностика, лечение / В.А. Молочков, О.Л. Иванов, В.В. Чеботарев. М.: Медицина, 2006.- 632 с.

26. Мол очков В. А. Хронический уретрогенный простатит / В. А. Молочков, И.И. Ильин М.: Медицина, 1999. - 325с.

27. Немченко О.И. Урогенитальный микоплазмоз (обзор литературы) / О.И. Немченко, Е.В. Уварова // ИППП. 2007. - № 1. - С. 26-32

28. Ноников В.Е. Микоплазменные инфекции / В.Е. Ноников, М.Г. Воробьева // Consilium medicum. 2006. - №10. - С.10-13.

29. Прилепская В.Н. К вопросу о роли микоплазм в урогенитальной патологии/ В .Н. Прилепская, В.И. Кисина, Е.В. Соколовский и др. // Гинекология. 2007. - Т.9. - №1.-С.31-38.

30. Рахматулина М.Р. Новые возможности терапии урогенитальных инфекционных заболеваний / М.Р. Рахматулина // Фарматека. 2007. -№10. - С.26-31.

31. Рентой A.M. Контроль и ведение заболеваний, передаваемых половым путем, в Великобритании и в Российской Федерации: сходства и различия / A.M. Рентой // ИППП. 1999. - № 5. - С. 27-33.

32. Решетников О.В. Современные представления о Mycoplasma genitalium / O.B. Решетников, A.A. Хрянин // Русский Медицинский Журнал. 2008. -Т.16.- № 19.- С.1236-1239

33. Савичева A.M. Этиологическая диагностика терапия репродуктивно значимых инфекций / A.M. Савичева // Трудный пациент.- 2007. Т.5.-№1.- С.21-28.

34. Савичева A.M. Генитальные микоплазмы — проблемы диагностики и лечения / A.M. Савичева, Е.В. Шипицына, М.А. Башмакова // Клиническая дерматология и венерология. 2008а. -№ 6. — С. 80-90.

35. Савичева A.M. Инфекция, вызванная Mycoplasma genitalium: клиника, диагностика, лечение/ А .М. Савичева, Е.В. Шипицына, A.C. Бенькович и др. // Гинекология. 20086. - №1. - С.25-29.

36. Савичева A.M. Генитальные микоплазмы / A.M. Савичева, Шипицына Е.В. // Врач. 2009.- №1. - С. 67-71

37. Сидоренко C.B. Молекулярные основы резистентности к антибиотикам / C.B. Сидоренко, В.И. Тишков // Успехи биологической химии. 2004. -Т.44. - С.263-306

38. Скрипкин Ю.К. Роль дерматовенерологических учреждений в организации лечебной помощи и борьбы с распространением болезней, передаваемых половым путем / Ю.К. Скрипкин, A.A. Кубанова, М.В. Яцуха // Кожные и венерические болезни. 1999. — Т.1. — 763-782.

39. Скрипкин Ю.К. Лечение джозамицином больных урогенитальным хламидиозом / Ю.К. Скрипкин, М.Г. Пашинян // Вестник дерматологии и венерологии. 2000. - № 2. - С.49-50.

40. Соколовский Е.В. Современная программа клинико-лабораторной диагностики и лечения гонококковой инфекции / Под редакцией Е.В. Соколовского, A.M. Савичевой, М. Домейка и др.- М.,Медицина. 2007. -82 с.

41. Страчунский Л.С. Макролиды в современной клинической практике / Л.С. Страчунский, С.Н. Козлов Смоленск: Русич; 1998. - 302 с

42. Страчунский Л.С. Современная антимикробная химиотерапия / Л.С. Страчунский, С.Н. Козлов: Руководство для врачей. М.: Боргес; 2002 -432с

43. Танахо Э. Урология по Дональду Смиту : Пер. с англ. / Э. Танахо, Дж. Маканинч -М., Практика, 2005.- 819 с.

44. Тимощук Г.И. Лабораторные методы диагностики инфекций, передаваемых половым путем / Г.И. Тимощук, И.А. Туркина. Кемерово. 2008.-51с

45. Ушкалова Е.А. Место джозамицина в лечении урогенитальных инфекций, вызываемых внутриклеточными возбудителями / Е.А. Ушкалова // Венерология. 2006. - №4. - С. 14-19.

46. Федеральное руководство по использованию лекарственных средств (формулярная система) / Под ред. А.Г. Чучалина, Ю.Б. Белоусова, В.В. Яснецова. Вып. VII. - М.: ЭХО, 2006. - 996 с.

47. Халдин A.A. Современное состояние проблемы негонококковых уретритов и перспективы их терапии / A.A. Халдин // Российский журнал кожных и венерических болезней. 2004. - №3. - С.42-45.

48. Хандсфилд X. Заболевания, передающиеся половым путем: Цветной атлас-справочник. М.: ООО «Бином-Пресс», 2004.- 296 с.

49. Хрянин A.A. Частота выявления Mycoplasma genitalium у мужчин и эффективность однократного применения Сумамеда (азитромицина) в лечении микоплазменной инфекции / A.A. Хрянин, О.В. Решетников // Клин, дерматол. -2005. Т. 4. - С. И 5-119.

50. Чеботарев В.В. Урогенитальный хламидиоз: современные проблемы диагностики, патогенеза, лечения /В.В. Чеботарев //Журн. дерматовен. и косметол. 1999. - №2. - С.5-10.

51. Щелкунов С.Н. Генетическая инженерия — Новосибирск: Сиб. унив. изд-во. 2004. — 496 с

52. Anagrius C. Klamydialiknande symptom kan ha annan bakgrund -Mycoplasma genitalium en viktig och vanlig STD / C. Anagrius, B. Lore // Läkartidningen. - 2002. - Vol. 99. - P. 4854-4859.

53. Anagrius C. Mycoplasma genitalium: prevalence, clinical significance, and transmission / C. Anagrius, B. Lore', J.S. Jensen // Sexually Transmitted Infections. 2005. - Vol.81. - P. 458-462.

54. Aujard Y. Ureaplasma urealyticum and Mycoplasma hominis infections in newborns: personal data and review of the literature / Y. Aujard, L. Maury, C. Doit et al. II Arch Pediatr. 2005. - Vol.12. Suppl. 1. - S12-18.

55. Bally F. Diagnosis and treatment of urethritis / F. Bally, N. Troillet // Rev Med Suisse. 2006. - Vol. 11. - P.2282- 2284.

56. Baseman J.B. Interplay between mycoplasmas and host target cells / J.B. Baseman, M. Lange, N.L. Criscimagna et al. II Microb Pathog. 1995. - Vol.19. — P.105-116.

57. Baseman J.B. Diagnostic assessment of Mycoplasma genitalium in culture-positive women / J.B. Baseman, M. Cagle, J.E. Körte et all I J Clin Microbiol. -2004.-Vol. 42.-P. 203-211.

58. Björnelius E.Clinical aspects of Mycoplasma genitalium infection / E.Bjömelius // Thesis for doctoral degree (Ph.D) Stockolm. - 2010. - 42 p.

59. Björnelius E. Mycoplasma genitalium in non-gonococcal urethritis — a study in Swedish male STD patients / E. Björnelius, P. Lidbrink, J.S. Jensen // Journal of STD & AIDS. 2000. - Vol. 11. - P. 292-296.140

60. Björnelius E. Antibiotic treatment of symptomatic Mycoplasma genitalium infection in Scandinavia: a controlled clinical trial / E. Björnelius, C. Anagrius, G. Bojs et al. II Sexually Transmitted Infections. 2008. - Vol.84. - P.72-76.

61. Björnelius E. Conjuctivitis associated with Mycoplasma genitalium infection / E. Björnelius, P. Lidbrink, J.S. Jensen // Clinical Infectious Diseases. 2004. -Vol. 2.-P. 134—136.

62. Blaylock M.W. Determination of infectious load of Mycoplasma genitalium in clinical samples of human vaginal cells / M.W. Blaylock, O. Musatovova, J.G. Baseman, J.B. Baseman // J Clin Microbiol. 2004. - Vol.42. - P. 746-752.

63. Bradshaw C.S. Azithromycin failure in Mycoplasma genitalium urethritis / C.S. Bradshaw, J.S. Jensen, S.N. Tabrizi et al. II Emerg Infect Dis. 2006. - Vol. 12.-P. 1149-1152.

64. Bradshaw C.S. Persistence of Mycoplasma genitalium following azithromycin therapy / C.S. Bradshaw, M.Y. Chen, C.K. Fairley // PLoS ONE-2008.-Vol.3.-e3618.http://www.pubmedcentral.nih.gov/articlerender.fcgi?artid=2572837

65. Bradshaw C.S .Mycoplasma genitalium in men who have sex with men at male-only saunas / C.S. Bradshaw, C.K. Fairley, N.A. Lister et al. II Sexually Transmitted Infections. 2009. - Vol.85. - P. 432-435

66. Brown D.R. Revised minimal standards for description of new species of the class Mollicutes (division Tenericutes) / D.R. Brown, R.F. Whitcomb, J.M. Bradbury II Int J Syst Evol Microbiol. 2007. - Vol. 57. - P.2703-2719.

67. Busolo R. Detection of Mycoplasma genitalium and Chlamydia trachomatis DNAs in male patients with urethritis using the polymerase chain reaction / R.

68. Busolo, D. Camposampiero, G. Bordignon et al. II The New Microbiologica. -1997. Vol.20. — P. 325-32.

69. Bustin S.A. Quantification of mRNA using real-time reverse transcription PCR (RT-PCR): trends and problems / S.A. Bustin // Journal of Molecular Endocrinology. 2002. - Vol. 29. - P.23-39.

70. Centers of Disease Control and Prevention. Sexually Transmitted Diseases Treatment Guidelines, 2006. MMWR. 2006. - Vol.55. — P.l-93.

71. Centers for Diseases Control and Prevention. MMWR Increases in gonorrhea eight western states, 2000-2005 // Morb Mortal Wkly Rep. - 2007. -Vol.56. - P.222-225.

72. Chandeying V.The prevalence of urethral infections amongst asymptomatic young men in Hat Yai, southern Thailand / V. Chandeying, S. Skov, P. Duramad et al. II Journal of STD & AIDS. 2000. - Vol.11. - P. 402-405.

73. Clausen H.F.Serological investigation of Mycoplasma genitalium in infertile women / H.F. Clausen, J. Fedder, M. Drasbek et al. II Hum Reprod. 2001. -Vol.16.-P. 1866-1874.

74. Cohen C.R. Association between Mycoplasma genitalium and acute endometritis / C.R. Cohen, L.E. Manhart, E.A. Bukusi et al. II Lancet. 2002. -Vol.359.-P. 765-766.

75. Cohen C.R. Detection of Mycoplasma genitalium in women with laparoscopically diagnosed acute salpingitis / C.R. Cohen, N.R. Mugo, S.G. Astete et al. //Sexually Transmitted Infections. 2005. - Vol.81. - P. 463-466.

76. Cohen C.R. Mycoplasma genitalium infection and persistence in a cohort of female sex workers in Nairobi, Kenya / C.R. Cohen, M. Nosek, A. Meier et al // Sexually Transmitted Infections. 2007. - Vol.34. - P. 274-279.

77. Colombo U. Rokitamycin in the treatment of female genital Chlamydia and Mycoplasma infections. Comparative study vs josamycin / U. Colombo, G. Pifarotti, M. Amidani et al. II Minerva Ginecol. 1998. - Vol.50. - P. 491 -497.

78. Cook R.L. Systematic Review: noninvasive testing for Chlamydia trachomatis and Neisseria gonorrhoeae / R.L. Cook, S.L. Hutchison, L. Ostergaard et al. II Ann. Intern. Med.- 2005.- Vol.142.- P.914-925.

79. Dallo S.F. Intracellular DNA replication and long-term survival of pathogenic mycoplasmas / S.F. Dallo, J.B. Baseman // Microbiol Pathol. 2000. -Vol. 29.-P. 301-309.

80. De Barbeyrac B. Detection of Mycoplasma pneumonia and Mycoplasma genitalium in clinical samples by polymerase chain reaction / B. De Barbeyrac,

81. C. Bernet-Poggi, F. Febrer et al. II Clinical Infectious Diseases. 1993. — Vol.l7(Suppl):S83-89.

82. Deguchi T. Mycoplasma genitalium: another important pathogen of nongonococcal urethritis / T. Deguchi, S. Maeda // J Urol. 2002. - Vol. 167.-P.1210-1217.

83. Depardieu F. Mutation in 23S rRNA Responsible for Resistance to 16-Membered Macrolides and Streptogramins in Streptococcus pneumonia / F. Depardieu, P. Courvalin // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 2001. -Vol.45. -P.319-323.

84. Duffy L.B. Comparative potency of gemifloxacin, new quinolones, macrolides, tetracycline and clindamycin against Mycoplasma spp. / L.B. Duffy,

85. D. Crabb, K. Searcey et al. II J. Antimicrob. Chemother. 2000. -Vol.45(Suppl.).- P.129-133.

86. Dupin N. Detection and quantification of Mycoplasma genitalium in male patients with urethritis / N. Dupin, G. Bijaoui, M. Schwarzinger et ah II Clinical Infectious Diseases. 2003. - Vol.37. - P. 602-605.

87. Dutro S.M. Development and performance of a microwell-plate-based polymerase chain reaction assay for Mycoplasma genitalium / S.M. Dutro, J.K. Hebb, C.A. Garin et al. II Sexually Transmitted Infections. 2003. - Vol. 30. -P.756—763.

88. Eastick K. A novel polymerase chain reaction assay to detect Mycoplasma genitalium / K. Eastick, J.P. Leeming, E.O. Caul et al. II Mol Pathol. 2003. -Vol. 566. - P. 25—28.

89. European STD guidelines // Journal of STD & AIDS. 2001. - Vol. 12. -Suppl. №.3. — P.63-68.

90. Falk L. Tetracycline treatment does not eradicate Mycoplasma genitalium / L. Falk, H. Fredlund, J.S. Jensen // Sexually Transmitted Infections. 2003. -Vol.79. -P.318-319.

91. Falk L. Signs and symptoms of urethritis and cervicitis among women with or without Mycoplasma genitalium or Chlamydia trachomatis infection / L. Falk, H. Fredlund, J.S. Jensen // Sexually Transmitted Infections 2005. - Vol.81. - P. 73-78

92. Fräser C.M. The minimal gene complement of Mycoplasma genitalium / C.M. Fräser, J.D. Gocayne, O. White et al. II Science. 1995. - Vol. 270. - P. 397-403.

93. Gambini D. Mycoplasma genitalium in males with nongonococcal urethritis: prevalence and clinical efficacy of eradication / D. Gambini, I. Decleva, L. Lupica et al II Sexually Transmitted Infections. 2000. Vol.27. - P.226-229.

94. Gübelin W.H. Molecular detection of Mycoplasma genitalium in men and pregnant women / W.H. Gübelin, M. Angélica, T. Martinez et al. II Rev Chil Infect.-2006.-Yol.23.- P. 15-19.

95. Hamasuna R. Antibiotic susceptibility testing oí Mycoplasma genitalium by TaqMan 5' nuclease real-time PCR / R. Hamasuna, Y. Osada, J.S. Jensen // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 2005.-Vol.49.- P.4993-4998

96. Hannan P. Comparative susceptibilities of various AIDS-associated and human urogenital tract mucoplasmas and strains of Mycoplasma pneumoniae to 10 classes of antimicrobial agent in vitro / P.Hannan // J Med Microbiol. 1998.-Vol.47. -P.l 115-1122.

97. Hanno P.M. Clinical Manual of Urology / P.M. Hanno, S.B. Malkowicz, A.J. Wein (ed.) // 3rd Edition. N.Y.: McGraw-Hill. - 2001. - 293 p.

98. Hansen J.L. The structures of four macrolide antibiotics bound to the large ribosomal subunit / J.L. Hansen, J.A. Ippolito, N. Ban et al. II Molecular Cell. -2002.-Vol.10.-P.l 17-128.

99. Heying W. Detection of new mycoplasma species and other pathogenic mycoplasmas in patients with nongonococcal urethritis / W. Heying, S. Meiqin, L. Weihong et al. II Int J STD & AIDS.-2001.-Vol. 12 suppl 2.- P. 107.

100. Hjorth S.V. Sequence-based typing of Mycoplasma genitalium reveals sexual transmission / S.V. Hjorth, E. Bjornelius, P. Lidbrink et al. II J. Clin. Microbiol. 2006. - Vol.44. - P. 2078-2083.

101. Horner P. Asymptomatic men: should they be tested for urethritis? / P. Horner // Sex Transm Inf 2007. Vol. 83. - P. 81-84.

102. Horner P.J. Association of Mycoplasma genitalium with acute nongonococcal urethritis / P.J. Horner, C.B. Gilroy, B.J. Thomas et al. II Lancet. -1993. Vol.342. — P.582—585.

103. Horner P.J. Role of Mycoplasma genitalium and Ureaplasma urealyticum in acute and chronic nongonococcal urethritis / P. Horner, B. Thomas, C.B. Gilroy et al. II Clinical Infectious Diseases. 2001. - Vol.32. - P. 995-1003.

104. International committee on systematic bacteriology. Subcommittee on the taxonomy of Mollicutes. Revised minimum standards for description of new species of the class Mollicutes (division Tenericutes). II Int J Syst Bacteriol 1995.-Vol.45.-P. 605-612.

105. Iser P. Symptoms of non-gonococcal urethritis in heterosexual men: a case control study / P. Iser, T.R.H. Read, S. Tabrizi et al II Sexually Transmitted Infections.- 2005. Vol.81. - P. 163-165.

106. Janier M. Male urethritis with and without discharge: A clinical and microbiological study / M. Janier, F. Lassau, I. Casin et al II Sexually Transmitted Infections. 1995. - Vol. 22. -P.244-252.

107. Jensen J.S. Mycoplasma genitalium — the aetiologic agent of urethritis and other sexually transmitted diseases / J.S. Jensen // J Eur Acad Dermatol Venereol. 2004. - Vol. 18. - P. 1-11.

108. Jensen J.S. Mycoplasma genitalium infections /J.S. Jensen // Danish Med. Bulletin.- 2006. Vol. 53.- P. 1-27.

109. Jensen J.S. Mycoplasma genitalium: a cause of male urethritis? / J.S. Jensen, R. Orsum, B. Dohn et al. II Genitourin. Med. 1993. - Vol.69. — P.265-269.

110. Jensen J.S. Intracellular location of Mycoplasma genitalium in cultured Vero cells as demonstrated by electron microscopy / J.S Jensen, J.Blom, K.Lind // Int J Exp Pathol. 1994. - Vol. 75. - P. 91-98.

111. Jensen J.S. Isolation of Mycoplasma genitalium strains from the male urethra / J.S. Jensen, H.T. Hansen, K. Lind // J Clin Microbiol. 1996. - Vol. 34. -P. 286-291.

112. Johannisson G. Occurrence and treatment of Mycoplasma genitalium in patients visiting STD clinics in Sweden / G. Johannisson, Y. Enström, G.B. Löwhagen et al II Journal of STD & AIDS . 2000. - Vol.11. -P.324-326.

113. Johansson K-E. Molecular biology and pathogenicity of Mycoplasmas / K-E. Johansson, B. Pettersson // Taxonomy of Mollicutes- NY: Kluwer Academic/Plenum. 2002. P. 1-30.

114. Johnson R.E. Screening tests to detect Chlamydia trachomatis and Neisseria gonorrhoeae infections / R.E. Johnson, W.J. Newhall, J.R. Papp et al. //Morbid. Mortal. Weekly Reports.-2002.-Vol. 51.-P.1-38.

115. Judlin P. Genital mycoplasmas / P. Judlin // Gynecol Obstet Fertil. 2003. -Vol. 31.-P.954-955.

116. Jurstrand M. Detection of Mycoplasma genitalium in urogenital specimens by real-time PCR and by conventional PCR assay / M. Jurstrand, J.S. Jensen, H. Fredlund et al. II J Med Microbiol. 2005. - Vol.54. - P.23—29.

117. Kenny G.E. The Mycoplasmas / Eds Barile M.F., Rasin S. Academic Press 1998.- 698 P.

118. Khryanin A.A. Mycoplasma genitalium: rational method of treatment / A.A. Khryanin // Journal of European Academy of Dermatology and Venereology. -2003. Vol.17. - P. 416—417.

119. Kilic D. Prevalence and treatment of Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, and Mycoplasma hominis in patients with non-gonococcal urethritis / D. Kilic, M.M. Basar, S. Kaygusuz et al II Japan J Infect Dis. 2004. - Vol.57 . — P. 17-20.

120. Krieger J.N. Chronic prostatitis: Charlottesville to Seattle / J.N. Krieger , D.E. Riley// Journal of Urology. 2004.-Vol.172. - P.2557-2560.

121. Labro M.T. Interference of antibacterial agents with phagocyte functions: immunomodulation or «Immuno Fairy Tales»? / M.T. Labro // Clinical Microbiology Reviews. 2000. - Vol.13. - P. 615-650.

122. Lackey P.C. The etiology of nongonococcal urethritis / P.C. Lackey, D.M. Ennis, G.H. Cassell et al // Clinical Infectious Diseases. 1995. - Vol.21. — P. 759 (abstract 238).

123. Leclercq R. Mechanisms of resistance to macrolides and lincosamides: nature of the resistance elements and their clinical implications / R. Leclercq // Clinical Infectious Diseases. 2002. - Vol.34. -P.482-492.

124. Leone G. Molecular beacon probes combined with amplification by NASBA enable homogeneous, real-time detection of RNA / G. Leone, H. van Schijndel, B. van Gemen et al J I Nucleic Acids Res. — 1998. — Vol. 26. — P. 21502156.

125. Loens K. Detection of Mycoplasma pneumoniae by Real-Time Nucleic Acid Sequence-Based Amplification / K. Loens, M. Ieven, D. Ursi et al II J. Clin. Microbiol. 2003. - Vol. 41. - P. 4448^450.

126. Lluch-Senar M. A new promoterless reporter vector reveals antisense transcription in Mycoplasma genitalium / M. Lluch-Senar, M. Vallmitjana, E. Querol et al. II Microbiology. 2007. - Vol. 153. - P.2743-2752.

127. Maeda S. Detection of Mycoplasma genitalium in patients with urethritis / S. Maeda, M. Tamaki, M. Nakano et al. II Journal of Urology. 1998. - Vol.159. — P. 405-407.

128. Maeda S.I. Association of Mycoplasma genitalium persistence in the urethra with recurrence of nongonococcal urethritis / S.I. Maeda, M. Tamaki, K. Kojima et al. II Sexually Transmitted Infections. 2001. - Vol.28. - P.472-476.

129. Manhart L.E. Mucopurulent cervicitis and Mycoplasma genitalium / L.E. Manhart, C.W. Critchlow, K.K. Holmes et al. II Journal of Infectious Diseases -2003. Vol. 187. - P. 650-657

130. Manhart L.E. Expanding the Spectrum of Pathogens in Urethritis: Implications for Presumptive Therapy? / L.E. Manhart, M.R. Golden, J.M. Marrazzo //Clinical Infectious Diseases. 2007. - Vol. 45. - P. 872-874.

131. Manhart L.E. Mycoplasma genitalium among young adults in the United States: an emerging sexually transmitted infection / L.E. Manhart, K.K. Holmes, J.P. Hughes et al. II Am J Public Health. 2007. - Vol. 97. - P. 1118-1125.

132. McAdam A.J. Discrepant analysis: how can we test a test? / A.J. McAdam // J. Clin. Microbiol. 2000.- Vol.43.- P. 2027-2029.v

133. McSweeney L.A. Nuclear localization of the Escherichia coli cytolethal distending toxin CdtB subunit / L.A. McSweeney, L.A. Dreyfus // Cell Microbiol. 2004.- Vol. 6. - P. 447-458.

134. Mena L.A. A randomized comparison of azithromycin and doxycycline for the treatment of Mycoplasma genitalium-positive urethritis in men / L.A. Mena, T.F. Mroczkowski, M. Nsuami et al. II Clinical Infectious Diseases. 2009. -48.-P. 1649-1654.

135. Miller K.E. Diagnosis and treatment of Chlamydia trachomatis infection / K.E. Miller // Am Fam Physician.-2006.-Vol.73. P. 1411-1416.

136. Moi H. Mycoplasma genitalium is associated with symptomatic and asymptomatic non-gonococcal urethritis in men / H. Moi, N. Reinton, A. Moghaddam// Sexually Transmitted Infections. 2009. - Vol.85. - P. 15-18.

137. Morency P. Aetiology of urethral discharge in Bangui, Central African Republic / P. Morency, M. Dubois, G. Gresenguet et al. II Sexually Transmitted Infections. 2001. - Vol.77. -P.125-129.

138. Morozumi M. Emergence of macrolide-resistant Mycoplasma pneumoniae with a 23 S rRNA gene mutation / M. Morozumi, K. Hasegawa, R. Kobayashi et al. II Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 2005. - Vol.49. - P.2302-2306.

139. Morre S.A. Monitoring of Chlamydia trachomatis infections after antibiotic treatment using RNA detection by nucleic acid sequence based amplification / S.A. Morre, P. Sillekens , M.V. Jacobs et al. //Mol.Pathol. 1998. - Vol.51. - P. 149-154

140. M0ller B.R. Mycoplasma genitalium—a new challenge in sexually transmitted diseases / B.R. M0ller , N. Obel , T.R. M0ller // Ugeskr Laeger. -2005. Vol.167. - P.3291-3294.

141. Nusbaum M.R.H. Sexually transmitted infections and increased risk of co-infection with human immunodeficiency virus / M.R.H. Nusbaum, R.R. Wallace, L.M. Slatt et al. //JAOA.-2004.-Vol 104.- P.527-535.

142. Paavonen J. Chlamydia trachomatis: impact on human reproduction / J. Paavonen, W. Eggert-Kruse // Human Reproduction Update. 1999.-Vol. 5. -P.433-447.

143. Penna G.O. Gonorrhea / G.O. Penna , L.A. Hajjar , T.M. Braz // Rev Soc Bras Med Trop. 2000.-Vol. 33.- P.451-464.

144. Pereyre S. In vitro selection and characterization of resistance to macrolides and related antibiotics in Mycoplasma pneumoniae / S.Pereyre, C.Guyot, H.Renaudin et al. II Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 2004. -Vol. 48. -P. 460—465.

145. Pépin J. Etiology of urethral discharge in West Africa: the role of Mycoplasma genitalium and Trichomonas vaginalis / J. Pépin, F. Sobéla, S. Deslandes et al II Bull World Health Organ. 2001. - Vol. 79. - P. 118-126.

146. Pepin J. Mycoplasma genitalium: an organism commonly associated with cervicitis among west African sex workers / J. Pepin, A.C. Labbe, N. Khonde et al II Sexually Transmitted Infections. 2005. - Vol. 81. - P. 67-72.

147. Porse B. T. Sites of interaction of streptogramin A and B antibiotics in the peptidyl transferase loop of 23 S rRNA and the synergism of their inhibitory mechanisms / B.T. Porse, R. A. Garrett // J. Mol. Biol. 1999. - Vol.286. -P.375-387.

148. Razin S. Molecular biology and pathogenicity of Mycoplasmas / S. Razin, D. Yogev, Y. Naot // Microbiol Mol Biol Rev. 1998. - Vol. 62. - P. 10941156.

149. Riemersma W.A. Microbial Population Diversity in the Urethras of Healthy Males and Males Suffering from Nonchlamydial, Nongonococcal Urethritis / W.A. Riemersma, C.J C. Schee, W.I. Meijden et al. IIJ Clin Microbiol. 2003. -Vol.41.- P.1977-1986.

150. Ross J.D.C. Mycoplasma genitalium as a sexually transmitted infection: implications for screening, testing, and treatment / J.D.C. Ross, J.S. Jensen // Sexually Transmitted Infections. 2006. - Vol.82. - P. 269-271.

151. Ross J.D.C. Mycoplasma genitalium in asymptomatic patients: implications for screening / J.D.C. Ross, L. Brown , P. Saunders et al II Sexually Transmitted Infections. 2009. - Vol.85. - P. 436-437.

152. Rottem S. Interaction of mycoplasmas with host cells / S.Rottem // Physiol Rev. 2003. - Vol. 2003. - P. 417-432.152

153. Saini A.K. Nuclear localization and in situ DNA damage by Mycobacterium tuberculosis nucleoside-diphosphate kinase / A .K. Saini, K. Maithal, P. Chand et al IIJ Biol Chem. 2004. - Vol.279. - P. 50142-50149.

154. Schlünzen F. Structural basis for the interaction of antibiotics with the peptidyl transferase centre in eubacteria / F. Schlünzen, R. Zarivach, J. Harms et al //Nature. 2001. - Vol.413. - P. 814-821.

155. Shahmanesh M. Why common things are common: the tale of nongonococcal urethritis / M. Shahmanesh // Sexually Transmitted Infections. -2001.-Vol.77.-P. 139-140.

156. Shahmanesh M. 2009 European Guideline on the management of male nongonococcal urethritis / M. Shahmanesh, H. Moi, F. Lassau et al. II International Journal of STD & AIDS. 2009. - Vol. 20. - P. 458^164.

157. Simms I. Associations between Mycoplasma genitalium, Chlamydia trachomatis, and pelvic inflammatory disease / I. Simms, K. Eastick, H. Mallinson et al// Sexually Transmitted Infections. 2003. - Vol. 79. - P. 154156.

158. Skinner M. Comparative bioavailability of josamycin, a macrolide antibiotic, from a tablet and solution and the influence of dissolution on in vivo release / M. Skinner, I. Kanfer // Biopharm Drug Dispos. 1998. - Vol.19. - P. 21-29.

159. Soni S. The prevalence of urethral and rectal Mycoplasma genitalium and its associations in men who have sex with men attending a genitourinary medicine clinic / S. Soni, S. Alexander, N. Verlander et al. II Sex Transm Infect. 2010. -Vol.86.-P. 21-24

160. Stamm W.E. Chlamydia trachomatis infections of the adult / K.K. Holmes,i

161. P.F. Sparling, P.A. Mardh et al., eds. Sexually transmitted diseases. 3 ed. -New York, NY: McGraw-Hill, 1999. P.407-422.

162. Stein M.A. The evolving saga of Mycoplasma genitalium /M.A. Stei, J.B. Baseman // Clin Microbiol Newsl. 2006. - Vol. 28. - P. 41^18.

163. Svenstrup H.F. Adhesion and inhibition assay of Mycoplasma genitalium and M pneumoniae by immunofluorescence microscopy / H.F. Svenstrup, P.K. Nielsen, M. Drasbek et al J I J. Med. Microbiol. 2002— Vol. 51. - P. 361-373

164. Svenstrup H.F. Development of a quantitative real-time PCR assay for detection of Mycoplasma genitalium / H.F. Svenstrup, J.S. Jensen, E. Björnelius et al II J Clin Microbiol. -2005. Vol.43.-P.3121—3128.

165. Svenstrup H.F. Identification and characterization of immunogenic proteins of Mycoplasma genitalium / H.F. Svenstrup, J.S. Jensen, K. Gevaert et al II Clinical and Vaccine Immunolog. 2006. - Vol. 13. - P. 913-922.

166. Taylor S.N. Mycoplasma genitalium / S.N. Taylor // Curr Infect Dis Rep. -2005.-Vol.7.-P.453-457.

167. Taylor-Robinson D. Mycoplasma genitalium — an up-date / D. Taylor-Robinson// Journal of STD & AIDS. 2002. - Vol.13. - P. 145-151.

168. Taylor- Robinson D. Nongonococcal urethritis and antibiotic-resistant Mycoplasma genitalium infection / D. Taylor- Robinson // Clinical Infectious Diseases. 2008. - Vol. 47. - P. 1554-1555.

169. Taylor-Robinson D. Occurrence of Mycoplasma genitalium in different populations and its clinical significance / D. Taylor-Robinson, C.B. Gilroy, P.E. Hay // Clinical Infectious Diseases. 1993. - Vol.17,(suppl I):S66-68.

170. Taylor-Robinson D. The biology of Mycoplasma genitalium / D. TaylorRobinson, C.B. Gilroy, J.S. Jensen // Venereology. 2000. - Vol.13. - P.119-127.

171. Taylor-Robinson D. The role of Mycoplasma genitalium in non-gonococcal urethritis / D. Taylor-Robinson, P.J. Horner // Sexually Transmitted Infections. -2001. Vol.77. - P. 229-231.

172. Taylor-Robinson D. Detection of several Mycoplasma species at various anatomical sires of homosexual men / D. Taylor-Robinson, C.B. Gilroy, F.E.A. Keane // Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2003. - Vol.22. - P. 291-293.

173. Taylor-Robinson D. Mycoplasma genitalium in chronic non-gonococcal urethritis International / D. Taylor-Robinson, C.B. Gilroy, B.J. Thomas et al. II Journal of STD & AIDS. 2004. - Vol. 15. -P.21-25.

174. Totten P.A. Association of Mycoplasma genitalium with nongonococcal urethritis in heterosexual men / P.A. Totten, M.A. Schwartz, K.E. Sjostrom et al II J. Infect. Dis. 2001. - Vol.183. - P. 269-276.

175. Tully J.G. Mycoplasma genitalium, a new species from the human urogenital tract / J.G. Tully, D. Taylor-Robinson, D.L. Rose et al. II International Journal of Systematic Bacteriology. 1983. - Vol. 33. - P. 387-396.

176. Ueno P.M. Interaction of Mycoplasma genitalium with host cells: evidence for nuclear localization / P.M. Ueno, J. Timenetsky, V.E. Centonze et al .// Microbiology. 2008. - Vol. 154. - P. 3033-3041.

177. Uno M. Prevalence of Mycoplasma genitalium in asymptomatic men in Japan / M. Uno, T. Deguchi, A. Saito et al II Journal of STD & AIDS. 1997. -Vol.8. - P. 259-260.

178. Uuskula A. Atipical genital herpes: report of five cases / A. Uuskula, E. Raukas // Scand J Infect Dis. 2004. - Vol. 36. - P.37-39.

179. VanGuilder H.D.Twenty-five years of quantitative PCR for gene expression analysis / H.D. VanGuilder, K.E. Vrana, W.M. Freeman // BioTechniques. -2008.-Vol. 44. P.619-626.

180. Vester B. Macrolide resistance conferred by base substitutions in 23S rRNA / B. Vester, S. Douthwaite // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 2001. -Vol. 45.-P.1-12.

181. Wikstrom A. Mycoplasma genitalium: a common cause of persistent urethritis among men treated with doxycycline / A. Wikstrom, J.S. Jensen // Sexually Transmitted Infections. 2006. - Vol. 82. - P.276-279.

182. Wolff B.J. Detection of macrolide resistance in Mycoplasma pneumoniae by real-time PCR and high resolution melt analysis / B.J. Wolff, W.L. Thacker, S.B. Schwartz et al. // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 2008. - Vol.21. - P. 582-608.

183. Zdrodowska-Stefanow B. Mycoplasma hominis and Ureaplasma urealyticum infections in male urethritis and its complications / B. Zdrodowska-Stefanow, W.M. Klosowska, I. Ostaszewska-Puchalska et al II Adv Med Sei. -2006.-Vol.51.-P.254-257.

184. Zurawski D.V. OspF and OspCl are Shigella flexneri type III secretion system effectors that are required for postinvasion aspects of virulence / D.V. Zurawski, C. Mitsuhata, K. L. Mumy et al. II Infect Immun. 2006. - Vol.74. -P. 5964-5976.

185. Yokoi S.The role of Mycoplasma genitalium and Ureaplasma urealyticum Biovar 2 in postgonococcal urethritis / S. Yokoi, S. Maeda, Y. Kubota et al. II Clinical Infectious Diseases. 2007. - Vol. 45. - P. 866-871.

186. Yoshida T. Quantitative detection of Mycoplasma genitalium from first-pass urine of men with urethritis and asymptomatic men by real-time PCR / T. Yoshida, T. Deguchi, M. Ito et al. II J Clin Microbiol.-2002. Vol.40. - P. 14511455.