Конъюгация гликозаминогликанов с аминами и карбоновыми кислотами тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.03, кандидат химических наук Лукина, Елена Сергеевна

• Лукина, Елена Сергеевна
• кандидат химических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат химических наук Лукина, Елена Сергеевна

Список принятых сокращений

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР. КИСЛЫЕ ГЛИКОЗАМИНОГЛИКАНЫ И ИХ ХИМИЧЕСКАЯ МОДИФИКАЦИЯ

1.1. Структура, свойства и применение гликозаминогликанов

1.2. Комплексные соединения

1.3. Химическая модификация

1.3.1. Сульфатированные и десульфатированные гликозаминогликаны

1.3.2. Сложные эфиры гликозаминогликанов со спиртами и карбоновыми кислотами

1.3.3. Нитропроизводные гликозаминогликанов

1.4. Амиды гликозаминогликанов

1.4.1. Карбодиимидная конъюгация

1.4.2. Образование амидов через сукцинимидные эфиры

ГЛАВА 2. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ >

2.1. Конъюгация гликозаминогликанов с фармакозначимыми аминами '

2.1.1. Конъюгаты гиалуроновой кислоты

2.1.2. Конъюгаты хондроитинсульфатов

2.1.3. Конъюгаты гепарина

2.2.Конъюгация гликозаминогликанов с фармакозначимыми карбоновыми кислотами

2.3. Исследование биологической активности конъюгатов

2.3.1. Биодеградируемость конъюгатов гиалуроновой кислоты

2.3.2. Анальгезирующая активность конъюгатов гликозаминогликанов с 4-аминоантипирином

2.3.3. Противовоспалительная активность конъюгатов гликозаминогликанов с таурином и ибупрофеном

2.3.4. Противосвертывающие свойства конъюгатов гликозаминогликанов

2.3.5. Противоопухолевая активность конъюгатов гликозаминогликанов

2.3.6. Антиметастатическое действие конъюгатов гликозаминогликанов

ГЛАВА 3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

3.1. Методики аналитических реакций

3.2. Получение гликозаминогликанов

3.2.1. Гиалуроновая кислота (НА) и хондроитинсульфаты (CS)

3.2.2. Дерматансульфат (DS)

3.2.3. Гепарин (HEP) 79 3.3 Конъюгаты гиалуроновой кислоты с аминами

3.4. Аддукт гиалуроновой кислоты с EDC,

3.5. Конъюгаты 3a-3d и 5 - продукты гидридного восстановления

3.6. Конъюгаты хондроитинсульфатов и дерматансульфата с аминами

3.7. Аддукт хондроитинсульфатов с EDC

3.8. Конъюгаты 10a,10b,10d,10g,10h,10j и 9 - продукты гидридного восстановления

3.9. Конъюгаты гепарина с аминами . 83 ЗЛО. Аддукт гепарина с EDC

3.11. Конъюгаты 12a,12b,12e,12f и 14 - продукты гидридного восстановления

3.12. Конъюгаты гепарина с карбоновыми кислотами через диаминовые спейсеры

3.12.1. Конъюгат с гидразином-ибупрофеном

3.12.2. Конъюгат с гексаметилендиамином-цефазолином

3.12.3. Конъюгат с 0,Ь-лизином-цефазолином

3.12.4. Конъюгат с 0,Ь-лизином-«-аминобензойной кислотой

3.12.5. Конъюгат с Б,Ь-лизином-ибупрофеном

3.13. Конъюгат гиалуроновой кислоты с гидразином-ибупрофеном

3.14. Конъюгат хондроитинсульфатов с 0,Ь-лизином-ибупрофеном

ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Конъюгация гликозаминогликанов с аминами и карбоновыми кислотами»

Гиалуроновая кислота, гепарин и хондроитинсульфаты - кислые гликозаминогликаны из класса гетерополисахаридов входят в состав внеклеточного матрикса и выполняют важные функции в живом организме. Создание биосовместимых полимеров медицинского назначения -перспективная область исследований, одним из приоритетных направлений которой является разработка природных, полусинтетических и композиционных материалов на основе гликозаминогликанов. Данное направление особо значимо для хирургии, где требуется устранение дефектов тканей и органов и ускорение процессов репарации и регенерации. Гликозаминогликаны участвуют практически во всех процессах обмена соединительной ткани и могут оказывать модулирующее влияние на дифференциацию её клеточных элементов. На основе гликозаминогликанов создан ряд лекарственных препаратов для хирургии, лечения ожоговой болезни, трофических язв и артритов различной этиологии. |

В последние годы внимание исследователей привлекают химически модифицированные гликозаминогликаны в качестве неиммуногенных биосовместимых материалов с новыми, полезными для медицины свойствами. Химическая модификация низкомолекулярными фармакофорами может придать гликозаминогликанам дополнительные полезные свойства: антимикробные, противовирусные, противовоспалительные, анальгезирующие, анестезирующие и др., при этом могут значительно измениться физико-химические и биологические свойства полисахаридов. Это позволит существенно расширить области применения Автор выражает глубокую благодарность директору ИНК РАН, член-корр. РАН Усеину Меметовичу Джемилеву за неоценимую помощь в постановке данной работы и содействие в процессе ее выполнения. производных гликозаминогликанов как в качестве самостоятельных лекарственных препаратов, так и в качестве адъювантов.

Особый интерес представляют конъюгаты гликозаминогликанов с биологически активными соединениями. Такого рода модифицированные гликозаминогликаны с пролонгированным терапевтическим эффектом направленного действия относятся к лекарственным препаратам нового поколения.

В этой связи исследование конъюгации гликозаминогликанов с фармакологически значимыми амино- и карбоксисодержащими соединениями, изучение структуры и свойств полученных конъюгатов представляется актуальной задачей.

В результате проведенных исследований были разработаны эффективные методы конъюгации гиалуроновой кислоты, хондроитинсульфатов и гепарина по карбоксильным группам с фармакозначимыми аминами и карбоновыми кислотами. Синтезированы новые конъюгаты гиалуроновой кислоты, хондроитинсульфатов и гепарина взаимодействием с аминосодержащими соединениями в водной среде в присутствии 1 -этил-3-[3-(диметиламино)пропил]карбодиимида. Получены новые конъюгаты гликозаминогликанов с карбоксилсодержащими фармакофорами через диаминовые спейсеры и TV-гидроксисукцинимидные эфиры. Предложены аналитические и спектральные методы определения содержания звеньев с амидными, изоуреидокарбонильными, изоуреидофениламидными и олигомерными ариламидными группами в модифицированных гликозаминогликанах. На основании данных спектроскопии ЯМР выявлено экранирующее влияние магнитно-анизотропных ароматических колец ариламидных групп на метальные протоны ацетамидных групп в соседних N-ацетилглюкозамино- и N-ацетилгалактозаминопиранозильных звеньях гиалуроновой кислоты и, соответственно, хондроитинсульфатов, что использовано при определении конверсии С02Н-групп в ариламидные. Изучена биодеградируемость конъюгатов гиалуроновой кислоты под действием фермента гиалуронидазы. Выявлены анальгезирующее действие конъюгатов гликозаминогликанов с 4-аминоантипирином, противовоспалительная активность конъюгатов гликозаминогликанов с таурином и противоопухолевые свойства конъюгата гепарина с таурином.

Работа выполнялась в Институте нефтехимии и катализа РАН при финансовой поддержке Отделения химии и наук о материалах РАН по программе «Биомолекулярная и медицинская химия» (проекты «Полусинтетические биополимеры медицинского назначения на основе модифицированных гликозаминогликанов», 2005 г. и «Модифицированные гликозаминогликаны как потенциальные лекарственные средства для химиотерапии ВИЧ-инфекции и опухолевых заболеваний», 2006 г.).

Автор выражает благодарность ft» f С» 11» с. Понеделькипой < Ирине Юрьевне за научно-методическое руководство и постоянную помощь при выполнении работы. * v

Заключение диссертации по теме «Органическая химия», Лукина, Елена Сергеевна

выводы

1. Исследована модификация природных гликозаминогликанов -гиалуроновой кислоты, гепарина и хондроитинсульфатов с фармакозначимыми аминосодержащими соединениями, обладающими противовоспалительными, антимикробными и анестезирующими свойствами, в присутствии водорастворимого 1-этил-3-[3-(диметиламино)пропил]карбодиимида. Разработаны эффективные методы конъюгации, аналитические и спектральные методы идентификации и количественного определения модифицированных (ариламидных и изоуреидокарбонильных) звеньев в конъюгатах гликозаминогликанов с аминами. Выявлен ценный для количественного определения ариламидных звеньев экранирующий магнитно-анизотропный эффект ароматического кольца ариламидной группы модифицированного звена на метальные протоны ацетамидной группы соседнего TV-ацетиламинопиранозильного звена гиалуроновой кислоты и хондроитинсульфатов.

2. Синтезированы новые конъюгаты гликозаминогликанов с высоким содержанием амидных звеньев. Установлено, что в зависимости от природы амина и соотношения реагентов конъюгаты гиалуроновой кислоты включают звенья с амидными (5-83%) и изоуреидокарбонильными группами (0-50%). В структуру производных гепарина входят звенья с амидными (36-100%), изоуреидокарбонильными (0-30%) или (для конъюгатов с аминофенолами) изоуреидофениламидными группами (11-72%). Конъюгаты хондроитинсульфатов содержат звенья с амидными (19-100%) и изоуреидокарбонильными группами (0-60%). В состав конъюгатов дерматансульфата входят фрагменты с амидными (26-75%) и изоуреидокарбонильными (0-50%) группами. Конъюгаты гепарина и хондроитинсульфатов с и-аминобензойной кислотой содержат звенья с олигомерными фениламидными группами.

3. Сочетанием дополнительно функционализированных диаминами природных гликозаминогликанов и iV-гидроксисукцинимидных эфиров фармакозначимых карбоновых кислот синтезированы новые конъюгаты гепарина с я-аминобензойной кислотой (32% модифицированных звеньев), ибупрофеном (46-85%) и антибиотиком цефазолином (5-10%), а также конъюгаты гиалуроновой кислоты и хондроитинсульфатов с ибупрофеном (64 и 80% соответственно).

4. Изучена ферментативная биодеградируемость конъюгатов гиалуроновой кислоты и установлена ее зависимость от природы и содержания модифицированных звеньев. Показано, что биодеградируемость конъюгатов с содержанием амидных звеньев до 30% такая же, как у природной гиалуроновой кислоты, тогда как с дальнейшим увеличением конверсии карбоксильных групп биодеградируемость снижается, особенно для конъюгатов с изоуреидокарбонильными группами.

5. Выявлены анальгезирующее действие конъюгатов гликозаминогликанов с 4-аминоантипирином, противовоспалительная активность конъюгатов гиалуроновой кислоты и гепарина с таурином и конъюгата гепарина с ибупрофеном, а также противоопухолевые свойства конъюгата гепарина с таурином.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Лукина, Елена Сергеевна, 2007 год

1. Vercruysse К.Р., Prestwich G.D. Hyauronate derivatives in drug delivery.// Therapeutic Drug Carrier Systems. - 1998. - Vol. 15. - № 5. - P. 513-555.

2. Laurent T.C., Fraser R.E. Hyaluronan // The FASEB J. 1992. - Vol. 6 - P. 2398-2404.

3. Carbohydrate analysis. A practical approach. / Edited by M.F. Chaplin, J.F. Kennedy. Oxford, Washington DC: IRL Press, 1986.

4. Sugahara K., Schwartz N., Dorfman A. Biosynthesis of hyaluronic acid by Streptococcus. II J. Biol. Chem. 1979. - Vol. 254. - № 14. - P. 6252-6261.

5. Van de Rijn I. Streptococcal hyaluronic acid: proposed mechanisms of degree and loss of synthesis during stationary phase. II J. Bacteriol. 1983. -Vol. 156. -№ 3. - P. 1059-1065.

6. Abetamann V., Kern H. F., Elsaesser H.-P. Differential expression of thehyaluronan receptors CD44 and RHAMM in human pancreatic cancer cells. // Clin. Cancer Res. 1996. - Vol. 2. - P. 1607-1618.

7. Scott J.E., Heatley F., Moorcroft D., Olavesen A.H. Secondary structures of hyaluronate and chondroitin sulphates. A 1H n.m.r. study of NH signals in dimethyl sulphoxide solution. // Biochem. J. 1981. - Vol. 199. - P. 829832.

8. Scott J.E., Heatley F. Detection of secondary structure in glycosaminoglycans via the !H n.m.r. signal of the acetamido NH group. // Biochem. J. 1982. - Vol. 207. -P. 139-144.

9. Scott J.E., Heatley F. Secondary structure of of Hyaluronate in solution. //

10. Biochem. J. 1984. - Vol. 220. - P. 197-205.

11. Scott J.E., Heatley F., Wood B. Comparison of Secondary Structures in Water of Chondroitin-4-sulfate and Dermatan sulfate: Implications in the Formation of Tertiary Structures. // Biochemistry. 1995. - Vol. 34. - P. 15467-15474.

12. Coster L, Hernnas J, Malmstrom A. Biosynthesis of dermatan sulphate proteoglycans. The effect of beta-D-xyloside addition on the polymer-modification process in fibroblast cultures. // Biochem J. 1991. - Vol. 276.- № 2. P. 533-539.

13. Scott J.E. Supramolecular organization of axtracellular matrix glycosaminoglycans in vitro and in the tissues. // The FASEB J. 1992. -Vol.6.-P. 2639-2645.

14. Casu В., Choay J., Ferro D.R., Gatti J., Jacquinet J.-C., Petitou M., Provasoli A., Ragazzi M., Sinay P., Torri G. Controversial glycosaminoglycan conformation. // Nature. 1986. - Vol. 322. - № 6076. - P. 215-216.

15. Ferro D.R., Provasoli A., Ragazzi M. Conformer populations of L-iduronic acid residues in glycosaminoglycan sequences. // Carbohydr. Res. 1990. -Vol. 195,-№2.-P. 157-167.

16. Hagner-McWhirter A., Lindhal U., Li J. Biosynthesis of heparin/heparan sulphate: mechanism of epimerization of glucuronyl C-5. // Biochem. J. 2000. V. 347. P. 69-75.

17. Lindahl U., Backstron G., Thunberg L., Leder I.G. Evidence for a 3-0-sulfated D-glucosamine residue in the antithrombin-binding sequence of heparin. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1980.-Vol. 77.-№ 11.-P. 65516555.

18. Lindahl U., Lidholt K., Spillman D., Kjellen L. More to "heparin" than anticoagulation. // Thrombosis Res. 1994. - Vol. 75. - P. 1-32.

19. Sanderson P.N., Huckerby T.N., Nieduszynski I.A. Conformational equilibria of alpha-L-iduronate residues in disaccharides derived from heparin. //Biochem. J. 1987. - Vol. 243. - P. 175-181.

20. Mulloy В., Forster M.J., Jones Ch., Davies D.B. N.m.r. and molecular-modeling studies of the solution conformation of heparin. // Biochem. J. -1993.-Vol. 293.-P. 849-858.

21. Mikhailov D., Mayo K.H., Vlahov I., Toida Т., Perlin A., Linhardt R.J. NMR solution confonnation of heparin-derived tetrasaccharide. // Biochem. J. 1996. - Vol. 318. - P. 93-102.

22. Mikhailov D., Linhardt R. J., Mayo K.H. NMR solution conformation of heparin-derived hexasaccharide. // Biochem. J. 1997. - Vol. 328. - P. 5161.

23. Hricovini M., Guerrini M., Bisio A. Structure of heparin-derived tetrasaccharide complexed to the plasma protein antithrombin derived from NOEs, J-coupling and chemical shifts. // Eur. J. Biochem. 1999. - Vol. 261.-P. 789-801.

24. Mulloy В., Forster M.J. Conformation and dynamics of heparin and heparan sulfate. // Glycobiology. 2000. - Vol. 10.-№ 11.-P. 1147-1156.

25. Cavalieri F., Chiessi E., Paci M., Paradossi G., Flabiani A., Cesaro A.11

26. Conformational dynamics of hyaluronan in solution. С NMR study of oligomers // Macromolecules. 2001. - Vol. 34. - P. 99-109.

27. Hricovini M., Guerrini M., Bisio A., Petitou M., Torri G., Casu B. Conformation of heparin pentasaccharide bound to antithrombin III. // Biochem. J. 2001. - Vol. 359. - P. 265-272.

28. Nieduszynski I.A. Conformation of the mucopolysaccharides. // Biochem. J. 1973.-Vol. 135.-P. 729-733.

29. Scott J.E., Tigwell M.J. Periodate Oxidation and Shapes Glycosaminoglycuronans in Solution. // Biochem. J. 1978. - Vol. 173. -P. 103-114.31 .Машковский М.Д. Лекарственные средства. М.: Новая волна. 2005. С. 478.

30. Johns D.B., Rodgers K.E., Donahue W.D. Reduction of adhesion formation by postoperative administration of ionically cross-linked hyaluronic acid. // Fertil. Steril. 1997. - Vol. 68. - № 1. - P. 37-42.

31. Kyotaro H. Hair nourishing cosmetic. //Пат. JP 63215617. 1988*.

32. Imperatori D. Promo I. Compound for protecting nourishing and treatinghair, scalps eyelashes and nails. //Пат. ЕР 0378519. 1990*.

33. Gazzani G. Composition having hair stimulation activity. // Пат. ЕР 297455. 1989*.

34. Damian J.G. Hyaluronic acid-urea pharmaceutical compositions utilized for treatment of diseases of cutis // Пат. US 5631242. 1997*.

35. Falk R.E. et al. Formulations containing hyaluronic acid // Пат. US 6114314.2000*.

36. Самойленко И.И., Самойленко О.И. Улучшенная медицинская форма человеческого интерферона: суппозитории. // Пат. РФ 2142898. Б.И. № 11 (2000).

37. Самойленко И.И., Самойленко О.И., Хорошева Т.В., Мордвинцева Э.Ю., Хмеленко Т.И. Вводимая перорально, ректально или интравагинально композиция, содержащая живые бактерии. // Пат. РФ 2182008. Б.И. № 6 (2002).

38. Ceschel G.C., Maffei P., Lombardi B.S., Ronchi C., Rossi C. Development of a mucoadhesive dosage form for vaginal administration. // Drug Dev. lnd. Pharm. 2001. - Vol. 27. - № 6. - P. 541-547.

39. Matsumoto Y., Yamamoto I., Watanabe Y., Matsumoto M. Enhancing effect of viscous sodium hyaluronate solution on the rectal absorption of morphine. // Biol. Pharm. Bull. 1995. - Vol. 18. - № 12. - P. 1744-1749.

40. Moor A.R., Willoughby D.A. Hyaluronan as a drug delivery system for diclofenac: a hypothesis for mode of action. II Int. J. Tissue React. 1995. -Vol. 17.-№4.-P. 153-156.

41. Барабаш JI.C., Барабаш H.A., Журавлева И.Ю. Биопротезы клапанов сердца: проблемы и перспективы. Кемерово. 1995.

42. Бычков С.М. Новые данные о гепарине. // Вопросы медицинской химии. -1981.-№6.-С. 726-735.

43. Lapierre F., Holme К., Lam L. Chemical modification of heparin that diminish anticoagulant but preserve its heparanase-inhibitory, angiostatic, anti-tumor and anti-metastatic properties. // Glycobiology. 1996. - Vol. 6. -№ 3. - P. 355-366.

44. Rider C.C. Chemical modification of heparin that diminish anticoagulant but preserve its heparanase-inhibitory, angiostatic, anti-tumor and anti-metastatic properties. // Glyconj. J. 1997. - Vol. 14. - № 5. -P. 639-642.

45. Harrop H.A., Rider C.C. Heparin and its derivatives bind to H1V-1 recombinant envelop glycoproteins, rather than to recombinant HIV-1 receptor, CD4.II Glycobiology.- 1998.-Vol. 8.-№2.-P. 131-137.

46. Яжебински Дж., Тонска С. О некоторых комплексных соединениях гепарина. Гравиметрическое и колориметрическое определениямукополисахарида в виде комплексов с некоторыми красителями. // Acta. Pol Pharm. 1986. - Vol. 43. - № 5. - P. 454-460.

47. Понеделькина И.Ю., Карабанов Ю.Р., Башкатов С.А., Джемилев У.М., Вахитов В.А., Давлетов Э.Г., Гатауллин Н.Г., Костромина Л.Е., Ижбульдин Р.И., Чемерис А.В., Щекин С.В. Способ формирования гепаринизированной поверхности. // Пат. РФ 2155593. № 25 (2000).

48. Понеделькина И.Ю., Сибагатуллин Н.Г., Башкатов С.А., Джемилев У.М., Плечев В.В., Гатауллин Н.Г., Абу Хашум Маджид М., Суфиярова Р.Ш., Парфенова Т.И. Способ получения протезов кровеносных сосудов. // Пат. РФ 2241414. № 34 (2004).

49. Diakun G.P., Edwards Н.Е., Allen J.C., Phillips G.O., Gundall R.B. A simple purpose-built fluorimeter for the titrimetric assay of glycosaminoglycans. II Anal Biochem. 1979. - Vol. 94. - P. 378-382.

50. Mabe P., Valiente A., Soto V., Cornejo v., Raimann E. Evaluation of reliability for urine mucopolysaccharidosis screening by dimethylmethylene blue and Berry spot tests. // Clin. Chim. Acta. 2004. - Vol. 345. - № 1. -P. 135-140.

51. Tadashi U., Yoshiaki Т., Shinji N. Water insoluble biocompatible hyaluronic and polyion complex and method of making the same. // Пат. ЕР 0544259A1. 1992*.

52. Denuziere D., Ferrier 0., Damour 0., Domard A. Chitosan-chondroitin sulfate and chitosan-hyaluronate polyelectrolyte complexes: biological properties. // Biomaterials. 1998. - Vol. 19. - P. 1275-1285.

53. Denuziere A., Ferrier D., Domard A. Chitosan-chondroitin sulfate and chitosan-hyaluronate polyelectrolyte complexes. Physico-chemical aspects. // Carbohydr. Polym. 1996. - Vol. 29. - P. 317-323.

54. Denuziere A., Ferrier D., Damour 0. Interaction between chitosan and glycosaminoglycans (chondroitin sulfate and hyaluronic acid): physicochemical and biological studies. // Ann. Pharm. Fr. 2000. - Vol. 58. -№ l.-p. 47-53.

55. Kofuji K., Ito Т., Marata Y., Kawashima S. Effect of chondroitin sulfate on the biodegradation and drug release of chitosan gel beads in subcutaneous air pouches of mice. //Biol. Pharm. Bull. 2002. - Vol. 25. - № 2. - P. 268271.

56. Baumann H., Keller R. Partially cationized cellulose for non-thrombogenic membrane in the presence of heparin and endothelial-cell surface-heparansulfate. II J. Membr. Sci. 1991.-Vol. 61.-P. 253-268.,

57. Xinghang M., Fazal M.S., Wan K.S. Heparin binding on poly(L-lysine)-immobilized surface. II J. Colloid Interface Sci. 1991. - Vol. 147. -№ 1. -P. 251-261.

58. Scott J.E. The precipitation of polyanions by long-chain aliphatic ammonium salts. I I Biochem. J. 1961. - Vol. 81. - P. 418-424.

59. Стейси M., Баркер С. Углеводы живых тканей. Пер. с англ. М: Мир, 1965. (Stacey М., Barker S. Carbohydrates of living tissues. D. Van Nostrand Company LTD, London, 1964.)

60. You N., Oya Т., Sato I. Chemically modified hyaluronic acid or salts thereof, and a process for producing thereof. // Пат. US 6673919. 2004*.

61. Warren C., Manley G. Chemically modified hyaluronic acid or salts thereof, and a process for producing thereof. // Clin. Chim. Acta. 1981. - Vol. 116.3. P. 369-380.

62. Szejtli J., Dosa E. Local anaesthetic salts of chondroitinsulfate compounds. //Пат. US 4105760.1978*.

63. Glass J.R., Dickerson K.T., Stecker K., Polarek J.W. Characterization of a hyaluronic acid Arg-Gly-Asp peptide cell attachment matrix. // Biomaterials. - 1996. - Vol. 17. - P. 1101-1109.

64. Keuren J.F., Wielders S.J., Driessen A., Verhoever M., Hendriks M., Lindhout T. Covalently-bound heparin makes collagen thromboresistant. // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 2004. - Vol. 24. - № 3. - P. 613-617.

65. Jiang В., Drouet E., Milas M., Rinaudo M. Study on TEMPO-mediated selective oxidation of hyaluronan and the effects of salt on the reaction kinetics. // Carbohydr. Res. 2000. - Vol. 327. - P. 455-461.

66. Crescenzi V., Francescangeli A., Renier D., Bellini D. New hyaluronan chemical derivatives. Regioselectively C(6) oxidized products // Macromolecules. 2000. - Vol. 34. - P. 6367-6372.

67. Cera C., Terbojevich M., Cosani A., Palumbo M. Antracycline antibiotics supported on water-soluble polysaccharides: Synthesis and physicochemical characterization. II Int. J. Biol. Macromol. 1988. - Vol. 10.-P. 66-73.

68. Barbucci R., Cialdi G., Magnani A. Novel heparin-like sulphated polysaccharides. // Пат. WO 39525751. 1995*.

69. Magnani A., Albanese A., Lamponi S., Barbucci R. Blood-interaction performance of differently sulphated hyaluronic acids. // Thromb. Res. -1996. Vol. 81. - № 3. - P. 383-395.

70. Cen L., Neoh K.G., Li Y., Kang E.T. Assessment of in vitro bioactivity of hyaluronic acid and sulfated hyaluronic acid functionalized electroactive polymer. // Biomacromolecules 2004. - Vol. 5. - № 6. - P. 2238-2246.

71. Chen G., Ito Y., Imanishi Y., Magnani A., Lamponi S., Barbucci R. Photoimmobilization of sulfated hyaluronic acid for antithrombogenciti. // Bioconj. Chem. 1997. - Vol. 8. - № 5. - P. 730-734.

72. Nadkarni V.D., Toida T.G., Van C.L., Schubert R.L, Weiler J.M., Hansen K.P., Caldwell E.O., Linhart R.J. Preparation and biological activity of N-sulfonated chondroitin and dermatan sulfate derivatives. // Carbohydr. Res. 1996.-Vol. 290.-P. 87-96.

73. Maruyama Т., Toida Т., Imanari Т., Yu G., Linhard R. Conformational changes and anticoagulant activity of Chondroitin Sulphate Following its O-sulfonation. // Carbohydr. Res. 1998. - Vol. 306. - P. 35-43.

74. Yates E.A., Santini F., Guerrini M., Naggi A., Torri G., Casu B. // 'H and 13C NMR spectral assignments of the major sequences of twelve systematically modified heparin derivatives. // Carbohydr. Res. 1996. -Vol. 294.-P. 15-27.

75. Toida Т., Maruyama Т., Ogita Y. Preparation and anticoagulant activity of fully O-sulphonated glycosaminoglycans. I I Int. J. Biol. Macromol. 1999. -Vol. 26.-№4.-P. 233-241.

76. Bossennec V., Petitou M., Perly B. 'H-n.m.r. investigation of naturally occurring and chemically oversulphated dermatan sulphates. Identificationof minor monosaccharide residues. // Biochem. J. 1990. - Vol. 267. - № 3. -P. 625-630.

77. Inoue Y., Nagasawa K. Selective N-desulfation of heparin with dimethyl sulfoxide containing water or methanol. // Carbohydr. Res. 1976. - Vol. 46. -№ 1.-Р. 87-95.

78. Baumann H., Scheen H., Huppertz В., Keller R. Selective N-desulfation of heparin with dimethyl sulfoxide containing water or methanol. // Carbohydr. Res. 1998. - Vol. 308. - P. 381-388.

79. Hara S., Yoshida K., Ishihara M. Process for producing desulfated polysaccharide, and desulfated heparin. // Пат. US 6545136 B. 2003*.

80. Hricovini M., Guerrini M., Torri G., Piani S., Ungarelli F. Conformational analysis of heparin epoxide in aqueous solution. An NMR Relaxation Study. // Carbohydr. Res. 1995. - Vol. 277. - P. 11-23.

81. Naggi A., Cristofano В., Bisio A., Torri G., Casu B. Generation of anti-factor Xa active, 3-O-sulfated glucosamine-rich sequences by controlled desulfation of oversulfated heparins. // Carbohydr. Res. 2001. - Vol. 336. -P. 283-290.

82. Santini F., Bisio A., Guerrini M. Modifications under basic conditions of the minor sequences of heparin containing 2,3 or 2,3,6 sulfated D-glucosamine residues. // Carbohydr. Res. 1997. - Vol. 302. - P. 103-108.

83. Benedetti L.M., Stella V.J., Topp E.M. Microspheres of hyaluronic acid esters fabrication methods and in vitro hydrocortisone release. // J. Controll. Rel. - 1990. - Vol. 13. - P. 33-41.

84. Kyyronen K., Hume L., Benedetti L., Urtti A., Topp E., Stella V. Methylprednisolone esters of hyaluronic acid in ophthalmic drug delivary: in vitro and in vivo release studies. //Int. J. Pharm. 1992. - Vol. 80. - P. 161.

85. Hume L., Topp E.M., Stella V. Steroid ester of hyaluronic acid in the treatment of rheumatoid arthritis. // Pharm. Res. 1990. - Vol. 7. - P. 174.

86. Hunt J.A., Joshi H.N., Stella V.J., Topp E.M. Diffusion and drug release in polymer films prepared from ester derivatives of hyaluronic acid. // J. Controll. Rel.- 1990,- Vol. 12.-P. 159-169.

87. Perbellini A., Ventura C. Use of retinoic esters of hyaluronic acid for the differentiation of totipotent stem cells. // Пат. WO 2004063364. 2004*.

88. You N., Oya Т., Sato I. Chemically modified hyaluronic acid or salts thereof, and a process for producing thereof. // Пат. US 6673919. 2004*.

89. Takehisa M., Minoo M., Katsukiyo S. Photcurable glycosaminoglycan derivatives, crosslinked glycosaminoglycans and method of production thereof. //Пат. US 5763504. 1998*.

90. Petitou M., Lormeau J.C., Choay J. Selective O-acylation of glycosaminoglycans for use in pharmaceuticals. // Пат. FR 2634485. 1990*.

91. Foley K.M., Amaya E., Griffin C.C. Heparin derivatives. // Пат. ЕР 0256880. 1988**.

92. Sportoletti G., Baglioni A. Glucosaminoglycanes modifies possedant une activite antipemique et pratiquement exempts dune activite antivite anticoagulation. // Пат. FR 8112070. 1981*.

93. Sportoletti G., Pagella P. Modified glucosaminoglucans having antithrombotic activity. //Пат. US 4717719.1988**.

94. Lopalco L., Ciccomascolo F., Lanza P., Zopetti G., Caramazza I., Leoni F., Beretta A., Siccardi A. Anti-HIV type 1 properties of chemically modified

95. Патент взят на сайте: http://www.espacenet.com.

96. Патент взят на сайте: http://www.usptogov/patft.heparins with diminished anticoagulant activity. // AIDS Res. Hum. Retroviruses. 1994. - Vol. 10. - № 7. - P. 87-93.

97. Francesco V., Aurelio R. Crosslinked carboxy polysaccharides. // Пат. ЕР 0341745В1. 1989*.

98. Maelson Т., Lindqvist B. Crosslinked hyaluronate gels, their use and method for producing them. // Пат. WO 9009401. 1990*.

99. Katukiyo S., Yoshio U., Kenkyush T. Crosslinked hyaluronic acid and its use.//Пат EP 0161887.1985*.lH.Tomihata K., Ikada Y. Crosslinking hyaluronic acid with water-soluble carbodiimide // J. Biomed. Mater. Res. 1997. - Vol. 37. - № 2. - P. 243251.

100. Del Soldato P., Torri G., Bolla M., Mazzoni G., Monopoli A., Naggi A. Nitro-derivatives of low molecular weight heparin. // Пат. EP ,1340771. 2003*.

101. Bolla M., Monopoli A., Del Soldato P., Torri G., Naggi A., Cacu B. Nitro-derivatives ofepoxyheparin. //Пат. EP 1340772 Al. 2003*.

102. Moczar E., Hornebeck W. A lipophilic heparin derivative protects elastin against degradation by leucocyte elastase. // Int. J. Biol. Macromol. 1991. -Vol. 13.-№4.-P. 261-262.

103. Clayette P., Moczar E., Mabondzo A., Martin M., Toutain В., Marce D., Dormont D. Inhibition of human immunodeficiency virus infection by heparin derivatives. // AIDS Res. Hum. Retroviruses. 1996. - Vol. 12. - № l.-P. 63-69.

104. Kuo J., Swann D.A., Prestwich G.D. Chemical modification of hyaluronic acid by carbodiimides. // Bioconj. Chem. 1991. - Vol. 2. - № 4. - P. 232241.

105. Taylor R.L., Conrad H.E. Stoichiometric depolimerization of polyuronides and glycosaminoglycuronans to monosaccharides following reduction of their carbodiimide-activated carboxyl groups. // Biochemistry. 1972. -Vol. 11. -№ 8. - P. 1383-1388.

106. Mikolajczyk M., Kielbasinsky P. Recent development in the carbodiimide chemistry. // Tetrahedron. 1981. - Vol. 37. - P. 233-284.

107. Williams A., Ibrahim I.T. Carbodiimide chemistry. Recent advances. // Chem. Rev. 1981. - Vol. 6. - P. 589-636.

108. Nakajima N., Ikada Y. Mechanism of amide formation by carbodiimides for bioconjugation in aqueous media. // Bioconj. Chem. 1995. - Vol. 6. -P. 123-130.

109. Pouyani Т., Kuo J., Harbison G.S., Prestwich G.D. Solid-state NMR of acylureas derived from the reaction of hyaluronic acid with isotopically-labeled carbodiimides. // J. Am. Chem. Soc. 1992. - Vol. 114. - P. 59725976.

110. Inoe Y., Nagasawa K. Solid-state NMR of acylureas derived from the reaction of hyaluronic acid with isotopically-labeled carbodiimides. // Carbohydr. Res. 1982.-Vol. 111.-P. 113-125.

111. Pouyani Т., Prestwich G.D. Functionalized derivatives of hyaluronic acid oligosaccharides: Drug carriers and novel biomaterials. // Bioconj. Chem. -1994. Vol. 5. - № 4. - P. 339-347.

112. Bulpitt C.A., Sherwood Ch.H., Sadozai Kh.K. Tiol-modified hyaluronan. // Пат. US 6620927. 2003*.

113. Pumphrey C.Y., Theus A.M., Li Sh., Parrish R.S., Sanderson R.D. Neoglycancs, carbodiimide-modified glycosaminoglycans. // Cancer Res. -2002. Vol. 62. - P. 3722-3728.

114. Akima К., Iwata Y., Matsuo K., Watari N. Combination of hyaluronic acid with medicinal ingredient and production thereof. // Пат. ЕР 0506976 Bl. 1992*.

115. Danishefsky I., Siskovic E. Conversion of carboxyl groups of mucopolysaccharides into amides of amino acid esters. // Carbohydr. Res. -1971.-Vol. 16.-P. 199-201.

116. Calias P., Miller R. Conversion of carboxyl groups of mucopolysaccharides into amides of amino acid esters. // Пат. US 6610669. 2003*.

117. Prestwich G.D., Marecak D.M., Marecak J.F., Vercruysse K.P., Ziebell M.R. Controlled chemical modification of hyaluronic acid: Synthesis, application and biodegradation of hydrazide derivatives. II J. Controll. Rel. -1998.-Vol. 53.-P. 99-105.

118. Pouyani Т., Prestwich G.D. Functionalized derivatives of hyaluronic acid. //Пат. US 5616568. 1997*.

119. Pouyani Т., Prestwich G.D. Method for making Functionalized derivatives of hyaluronic acid. //Пат. US 5652347. 1997*.

120. Kirker K.R., Luo Y., Nielson J.H., Shelby J., Prestwich G.D. Glycosaminoglycan hydrogel films as bio-interactive dressings for wound healing. // Biomaterials. 2002. - Vol. 23. - № 17. - p. 3661-3671.

121. Shu X.Z., Liu Y., Roberts M.C., Prestwich G.D. Disulfide Cross-Linked Hyaluronan Hydrogels. // Biomacromolecules. ~ 2002. Vol. 3. - P. 13041311.

122. Pouyani Т., Harbison G.S., Prestwich G.D. Novel hydrogels of hyaluronic acid: Synthesis, surface and solid-state NMR. // J. Am. Chem. Soc. 1994. -Vol. 116.-№ 17.-P. 7515-7522.

123. Vercruysse K.P., Marecak D.M., Marecak J.F., Prestwich G.D. Synthesis and in vitro degradation of new polyvalent hydrazide cross-linked hydrogels of hyaluronic acid. // Bioconj. Chem. 1997. - Vol. 8. - № 5. - P. 686-694.

124. Chang Ch.H., Liu H.C., Lin C.C., Chou C.H., Lin F.H. Gelatin-chondroitin-hyaluronan tri-copolymer scaffold for cartilage tissue engineering. //Biomaterials. 2003. - Vol. 24. - P. 4853-4858.

125. Taguchi Т., Ikoma Т., Tanaka J. An improved method to prepare hyaluronic acid and type II collagen composite matrices. // J. Biomed. Mater. Res. 2002. - Vol. 61. - № 2. - P. 330-336.

126. Zhang L., Ma D., Wang F., Zhang Q. The modification of scaffold in building artificial dermis. // Artif. Cells Blood Substit. Immobil. Biotechnol. 2002. - Vol. 30. - № 4. - P. 319-332.

127. Laemmel E., Penhoat J. Heparin immobilized on proteins usable for arterial prosthesis coating: growth inhibition of smooth-muscle cells. // J. Biomed. Mater. Res. 1998. - Vol. 39. - № 3. - P. 446-452.

128. Hennink W.E., Feijen J., Ebert C.D., Kim S.W. Covalently bound conjugates of albumin and heparin: synthesis, fractionation and characterization. // Thromb. Res. 1983. - Vol. 29. - № 1. - P. 1-13.

129. Chandy Т., Das G.S., Wilson R.F. Rao G.H. Surface-immobilized biomolecules on albumin modified porcine pericardium for prevention thrombosis and calcification. // Int. J. Artif. Organs. 1999. - Vol. 22. - № 8.-P. 547-558.

130. Sakurai K., Miyazaki K., Kodera Y., Nishimura H., Shingi M., Inada Y. Anti-inflammatory activity of superoxide dismutase conjugated with sodium hyaluronate. // Glycoconj. J. 1997. - Vol. 14. - № 6. - P. 723-728.

131. Wang A., Cao Т., Tang H., Liang X., Salley S.O., Ng K.Y. In vitro haemocompatibility and stability of two types of heparin-immobilized silicon surfaces. // Colloid. Surf. Biointerfaces. 2005. - Vol. 43. - № 3. -P. 245-55.

132. Venkataramani E.S., Senatore F.A., Feola M.L., Tran R.M. Nonthrombogenic small-caliber human umbilical vein vascular prosthesis. // Surgery. 1986. - Vol. 6. - P. 735-741.

133. Zhao Y., Zhao R., Shangguan D., Xiong S., Liu G. Three novel high performance affinity chromatographic media for the separation of antithrombin III from human plasma. // Biomed. Chromatogr. 2001. - Vol. 15.-№8.-P. 487-492.

134. Akima K., Iwata Y., Matsuo K., Warari N. Compound for medicinal ingredient and hyaluronic acid and process for producing the same. // Пат US 5733891. 1998*.

135. Luo Y., Prestwich G.D. Hyaluronic acid N-hydroxysuccinimide: a useful intermediate for bioconjugation. // Bioconjug. Chem. - 2001. - Vol. 12.-P. 1085-1088.

136. Luo Y.K., Prestwich G.D. Synthesis and selective cytotoxicity of hyaluronic acid antitumor bioconjugate. // Bioconjug. Chem. - 1999. -Vol. 10.-P. 755-763.

137. Moon H.T., Lee Y. K., Han J. K., Byun Y. A novel formulation for controlled release of heparin-DOCA conjugate dispersed as nanoparticls in polyurethane film. // Biomaterials. 2001. - Vol. 22. - P. 281-289.

138. Byun Y.R., Moon H.T. Hydrophobic multicomponent heparin conjugates, a preparing method and a use thereof. // Пат. WO 0234312. 2002*.

139. Ионин Б.И., Ершов Б.А., Кольцов А.И. ЯМР-спектроскопия в органической химии. JL: Химия, 1983.

140. Jermyn М.А. Increasing the sensitivity of the anthrone method for carbohydrate // Anal Biochem. 1975. - Vol. 68. - P. 332-335.

141. Jacobson B.S., Fairman K.R. A colorimetric assay for carbodiimides commonly used in peptide synthesis and carboxyl group modification. // Anal. Biochem. 1980. - Vol. 106. - P. 114-117

142. Уайт А., Хендлер Ф., Смит Э., Хилл Р., Леман И. Основы биохимии. -Пер. с англ. М: Мир, 1981 (White A., Handler Ph., Smith Е., Hill R. Principles of biochemistry. McGraw-Hill, Inc., 1978.

143. Платэ H.A., Васильев A.E. Физиологически активные полимеры. -Химия: М., 1986. С.296.

144. Афиногенов Г.Е., Панарин Е.Ф. Антимикробные полимеры. -Гиппократ: СПб, 1993. С.264.

145. Кунафин М.С., Хасанов А.Г., Понеделькина И.Ю., Джемилев У.М. Способ защиты анастомозов при резекциях кишечника. Пат. РФ № 2192256. Б.И.№ 31 (2002).

146. Карабанов Ю.Р., Камалов А.Р., Понеделькина И.Ю., Башкатов С.А., Джемилев У.М. Способ профилактики реокклюзий при операциях на магистральных сосудах. Пат. РФ № 2185171. Б.И. № 20 (2002).

147. Тринус Ф.П., Мохорт Н.А., Клебанов Б.М. Нестероидные противовоспалительные средства. Киев: Здоровье, 1975. - С. 278.

148. Ghost А.К., Hirasawa N., Lee Y.S., Kim Y.S.Inhibition by acharan sulphate of angiogenesis in experimental inflammation models. // British J. Pharm. 2002. - Vol. 137. - P. 441-448.

149. Колла В.Э., Сыропятов Б .Я. Дозы лекартвенных средств и химических соединений для лабораторных животных. М.: Медицина. - 1998. С. 263.

150. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. Руководство. М.: Медицина.-1990. С. 384.

151. Методы химии углеводов: flep. с англ. М.: Мир, 1967. Под редакцией Н.А. Кочеткова (Methods in Carbohydrate Chemistry. New York, London: Academic Press, 1962-1965, Editors: R.L. Whistler, M.L. Wolfrom).

152. Кочетов Г.А. Практическое руководство no этимологии. M.: Высшая школа, 1980. - С. 204.

153. Сусленникова В.М., Киселева Е.К. Руководство по приготовлению титрованных растворов. Ленинград: Химия, 1978. - С 184.