Значение апоптотической активности опухолевых клеток костного мозга у больных множественной миеломой для прогноза течения и оценки эффективности терапии тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.21, кандидат медицинских наук Чубукина, Жанна Викторовна

• Чубукина, Жанна Викторовна
• кандидат медицинских наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Чубукина, Жанна Викторовна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Историческая справка. Современные представления о множественной миеломе.

1.2. Ролыдитокинов в патогенезе ММ.

1.3. Противоопухолевый иммунитет при ММ.

1.4. Роль процесса апоптоза в патогенезе ММ.

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТ, МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ОБСЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Клинико-гематологическая характеристика больных.

2.2. Характеристика контрольной группы.

2.3. Материал исследования.

2.4. Методы исследования.

ГЛАВА 3. КЛЕТОЧНЫЙ, ГУМОРАЛЬНЫЙ ИММУНИТЕТ

И ФАГОЦИТОЗ У БОЛЬНЫХ ММ.

3.1. Состояние клеточного иммунитета у больных ММ.

3.1.1. Особенности субпопуляционного состава мононуклеарных клеток периферической крови больных ММ.

3.1.2. Особенности субпопуляционного состава мононуклеарных клеток костного мозга больных ММ.

3.2. Состояние гуморального звена иммунитета у больных ММ.

3.2.1. Содержание сывороточных иммуноглобулинов у больных ММ.

3.2.2. Содержание циркулирующих иммунных комплексов у больных множественной миеломой.

3.3. Исследование фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови больных ММ.

ГЛАВА 4. ОСОБЕННОСТИ АПОПТОТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА БОЛЬНЫХ

МНОЖЕСТВЕННОЙ МИЕЛОМОЙ.

4.1. Относительное содержание плазматических клеток костного мозга у больных ММ.

4.2. Апоптотическая активность плазматических клеток костного мозга у больных ММ.

4.3. Fas-рецепторный путь апоптоза ПК.

4.4. Цитокинопосредованный путь апоптоза ПК.

4.4.1.Продукция ФНОа мононуклеарными клетками костного мозга больных ММ.

4.4.2. Продукция ИЛ-1(3 мононуклеарными клетками костного мозга больных ММ.

4.4.3. Продукция ИЛ-8 мононуклеарными клетками костного мозга больных ММ.

4.5. Анализ величины экспрессии FasR/CD95 на ПК и продукции цитокинов апоптогенного ФНОа и антиапоптотических ИЛ-1 (3 и ИЛ-8 у больных множественной миеломой.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Значение апоптотической активности опухолевых клеток костного мозга у больных множественной миеломой для прогноза течения и оценки эффективности терапии»

Множественная миелома (ММ) - это лимфопролиферативное заболевание, морфологическим субстратом которого являются плазматические клетки различной степени зрелости, продуцирующие моноклональный иммуноглобулин. Значительная часть симптомов данного заболевания обусловлена пролиферацией опухолевых клеток в костном мозге с последующим вытеснением элементов нормального кроветворения (Alexanian R. et al., 1994; Бессмельцев С.С. и соавт., 2007).

Активность патологического процесса обусловлена как биологией опухолевых плазматических клеток (ПК), так и их взаимоотношением с микроокружением (стромой костного мозга), клетками иммунной системы. Многообразие клинических проявлений ММ связано и с нарушениями цитокинового статуса. Показано, что цитокины, выполняющие функции медиаторов межклеточных взаимодействий и продуцируемые мононуклеарными (МНК) и самими опухолевыми клетками, контролируют опухолевый рост: одни - стимулируют остеокласты костного мозга, пролиферацию опухолевых клеток и угнетают процесс их апоптоза (программированной клеточной гибели), тогда как другие - ингибируют рост патологических клеток, индуцируя в них процессы апоптоза, и стимулируют цитотоксические Т-лимфоциты (ЦТЛ) и естественные киллерные клетки (NK-клетки) противоопухолевого иммунитета (Кетлинский С.А., 2004; Richardson P.G. et al., 2004). Это показывает, что взаимоотношения «опухоль-иммунная сиситема» многогранны и сложны и далеко не на все вопросы есть ответы.

Несмотря на значительный прогресс, достигнутый в терапии ММ, заболевание до сих пор остается неизлечимым. Отсутствуют точные прогностические факторы, способные предопределить характер течения и выживаемость больных. Это обстоятельство диктует необходимость поиска новых критериев прогноза наряду с известными (уровень содержания (32-м,

ЛДГ, ИЛ-6, хромосомные аберрации и др.), которые позволили бы уже на первом этапе диагностики прогнозировать течение ММ с целью определения терапевтической тактики (Бессмельцев С.С. и соавт., 2009).

Любой вид специфической терапии зачастую ведет к развитию резистентности, представляющей собой невосприимчивость опухолевых клеток к целому ряду препаратов, и активизации новых опухолевых клонов, скорость пролиферации которых опережает цитостатический эффект используемых препаратов. Исследования последних лет показали, что противоопухолевая терапия, независимо от конкретного механизма действия каждого из препаратов, реализуется путем индукции апоптоза патологических клеток. Полагают, что одним из важнейших механизмов устойчивости является подавление апоптоза. Изучение этого процесса, включая влияние цитокинов и экспрессии рецепторов апоптоза, позволит получить наиболее четкие представления относительно механизмов гибели опухолевых клеток и установить, могут ли быть использованы характеристики апоптотической активности опухолевых клеток на этапе первичной диагностики заболевания для выработки адекватной лечебной тактики.

Целыо настоящего исследования явилось изучение апоптоза клеток опухолевого клона костного мозга и иммунных механизмов его реализации у больных множественной миеломой и определение значения апоптотической активности для прогноза течения заболевания и оценки эффективности специфической терапии.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить апоптотическую активность плазматических клеток костного мозга у больных с впервые выявленной множественной миеломой, рецидивом заболевания и достигших ремиссии.

2. Исследовать функциональную способность клеток костного мозга больных множественной миеломой продуцировать цитокины, ингибирующие и стимулирующие апоптоз опухолевых клеток.

3. Оценить экспрессию апоптогенного рецептора Fas/CD95 на опухолевых плазматических клетках больных множественной миеломой.

4. Изучить состояние клеточного и гуморального иммунитета, фагоцитарную активность нейтрофилов у больных множественной миеломой.

5. Выявить наиболее значимые критерии прогноза течения заболевания и оценки эффективности терапии на основании установленных закономерностей.

Научная новизна исследования. Впервые на репрезентативном клиническом материале выявлены особенности апоптотической активности опухолевых клеток костного мозга больных множественной миеломой.

Доказана зависимость эффективности специфической терапии от степени исходной апоптотической активности опухолевых плазматических клеток у больных множественной миеломой: высокий уровень спонтанного апоптоза свидетельствует о неблагоприятном течении заболевания, а низкий — определяет положительный ответ на терапию.

Установлено, что показатель спонтанной апоптотической активности опухолевых клеток костного мозга больных множественной миеломой может быть использован в качестве прогностического критерия.

Показано, что в период манифестации и рецидива заболевания определяется высокая спонтанная продукция антиапоптотических цитокинов ИЛ-ip и ИЛ-8 и низкая продукция апоптогенного ФНОа мононуклеарными клетками костного мозга и сниженная экспрессия CD95 на плазматических клетках, тогда как в период ремиссии определяется высокая продукция

ФНОа и высокая экспрессия CD95 на плазматических клетках при нормальной продукции ИЛ-ip и ИЛ-8.

Практическая значимость. Предложен метод определения апоптотической активности опухолевых клеток костного мозга больных множественной миеломой, по связыванию аннексина V с фосфатидилсерином цитоплазматической мембраны, который может использоваться в качестве критерия прогнозирования ответа на специфическое лечение. Исследование апоптоза опухолевых клеток костного мозга больных множественной миеломой позволяет своевременно выявить химиорезистентность к проводимой терапии.

Мониторинг цитокинпродуцирующей функции клеток костного мозга и экспрессии CD95 на плазматических клетках больных, достигших ремиссии, является методом раннего выявления рецидива.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Эффективность индуцированного специфической терапией апоптоза клеток опухолевого клона зависит от спонтанной апоптотической активности клеток: изначально более низкая апоптотическая активность плазматических клеток костного мозга у больных множественной миеломой является показателем эффективности специфической терапии и более благоприятного течения заболевания, и, напротив, высокая активность спонтанного апоптоза плазматических клеток - прогностически неблагоприятным признаком. Определение исходного апоптоза плазматических клеток костного мозга у больных может быть использовано как предиктор эффективности специфической терапии.

2. Способность клеток костного мозга продуцировать цитокины ИЛ-ip и ИЛ-8, подавляющие процесс апоптоза опухолевых клеток, существенно различается в зависимости от периода заболевания: значительно повышена у больных с впервые выявленной ММ и с рецидивом, тогда как у больных с ремиссией она не превышает значений нормы. Для больных, достигших ремиссии, характерна высокая продукция апоптогенного цитокина ФНОа.

3. У больных, ответивших на терапию полной клинико-гематологической ремиссией, наблюдается преобладание процесса апоптоза плазматических клеток над их пролиферацией, чему соответствует высокий уровень ФНОа и высокая экспрессия рецептора апоптоза Fas/CD95.

Апробация и внедрение результатов исследования. Основные положения диссертационной работы представлены на научно-практической конференции «Актуальные вопросы гематологии и трансфузиологии» (2004, СПб), на XI и XIII Всероссийских научных Форумах с международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» (2006 и 2009 гг), на Всероссийской научно - практической конференции с международным участием «Высокотехнологичные методы диагностики и лечения заболеваний сердца, крови и эндокринных органов» (2008 г, СПб); на совместной конференции Рабочей Группы ЕВМТ по Педиатрии и 3-ем Международном Симпозиуме по трансплантации гемопоэтических стволовых клеток памяти P.M. Горбачевой (2009 г, СПб).

В работу лаборатории иммунногематологии РосНИИГТ внедрен метод оценки апоптоза клеток по связыванию аннексина V с фосфатидилсерином цитоплазматической мембраны, с помощью проточной цитометрии. Разработанный метод прогнозирования эффективности терапии по оценке апоптотической активности клеток опухолевого клона костного мозга больных ММ внедрен в клиническую практику гематологической клиники института.

По результатам работы написана и издана новая медицинская технология «Прогностическое значение клинических признаков и некоторых лабораторных показателей при множественной миеломе», 2010 г.

Новые научные данные об апоптотической активности плазматических клеток больных ММ используются в учебном процессе на курсах повышения квалификации врачей-гематологов и врачей-лаборантов на кафедре клинической лабораторной диагностики СПб МАЛО.

По материалам диссертации опубликовано 7 научных работ, из них 4 — в журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Личный вклад автора. Автором лично выполнены все исследования по изучению апоптотической активности опухолевых клеток костного мозга, состоянию клеточного, цитокинового и гуморального звена иммунитета, фагоцитоза у всех обследованных больных и доноров. Проведен клинико-лабораторный анализ, статистическая обработка и обобщение полученных результатов исследования.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 134 страницах машинописного текста и состоит из введения, 5-и глав, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, который включает 154 источник. Диссертация иллюстрирована 18 рисунками и 21 таблицей.

Заключение диссертации по теме «Гематология и переливание крови», Чубукина, Жанна Викторовна

ВЫВОДЫ

1. Апоптотическая акивность опухолевых клеток костного мозга у больных ММ позволяет с высокой степенью достоверности оценить эффективность проводимой терапии и прогнозировать течение заболевания.

2. Больные с впервые выявленной ММ и с рецидивом по апоптотической активности опухолевых ПК делятся на две группы: у 40% пациентов она ниже среднего уровня (от 7,8 до 15,7%), тогда как у остальных -значительно выше (от 29,3 до 47,3%). Установлено, что у больных с низким уровнем спонтанного апоптоза опухолевых клеток специфическая терапия эффективна, индуцированная апоптотическая активность повышается в 4 раза по сравнению с исходной. У больных с высоким показателем спонтанного апоптоза под воздействием индукционной терапии увеличение апоптотической активности отсутствует.

3. Высокая спонтанная продукция антиапоптотических цитокинов ИЛ-1(3 и ИЛ-8 наблюдается только у больных с впервые выявленной ММ и с рецидивом, тогда как для больных с ремиссией характерна высокая продукция апоптогенного цитокина ФНОа. У преобладающего большинства больных ММ, достигших ремиссии, определяется выраженная экспрессия Fas-антигена на плазматических клетках, в то время как при впервые выявленном заболевании или рецидиве она в 3 раза ниже.

4. Особенностями клеточного иммунитета больных ММ являются изменение соотношения основных иммунорегуляторных субпопуляций МНК периферической крови и повышение содержания активированных Т-лимфоцитов CD3+/DR+ и CD3+/CD16+56+. Эти же клетки повышены и среди МНК костного мозга.

5. У всех больных ММ резко подавлен гуморальный иммунитет, что характеризуется снижением содержания В-лимфоцитов более чем в 3 раза по сравнению с нормой и количества нормальных иммуноглобулинов всех классов. Фагоцитарная активность нейтрофилов периферической крови у больных в активной фазе заболевания значительно угнетена: в 2 раза снижен фагоцитарный индекс, подавлены поглотительная и переваривающая функции фагоцитов, процесс фагоцитоза является незавершенным.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Исследование исходной апоптотической активности опухолевых клеток костного мозга больных множественной миеломой необходимо использовать в качестве критерия прогноза и оценки эффективности лечения.

2. Изучение характера апоптотической активности опухолевых клеток костного мозга следует проводить при поступлении больных в стационар и в процессе проведения специфической терапии с целью своевременного выявления резистентности.

3. Рекомендуется проводить мониторинг экспрессии Fas-R/CD95 на плазматических клетках и цитокинпродуцирующей функции мононуклеарных клеток костного мозга с целью раннего выявления рецидива.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Чубукина, Жанна Викторовна, 2010 год

1. Абасова С.Г., Липкин В.М. и др. Система FAS-FASL в норме и патологии // Вопр. биол., мед.,фарм. химии. 1999. № 3. стр. 3-17.

2. Акимов А.А., Иванов С.Д., Хансон К.П. Апоптоз и лучевая терапия злокачественных новообразований // Вопросы онкологии. 2003 №1 стр. 9-59

3. Андреева Н.Е., Чернохвостова Е.В. Иммуноглобулинопатии. М.: Медицинга, 1985. - 187с.

4. Антонов В.Г., Козлов В.К. Патогенез онкологических заболеваний: иммунные и биохимические феномены и механизмы. Внеклеточные и клеточные механизмы общей иммунодепрессии и иммунной резистентности // Цитокины и воспаление. 2004. Т. 3. - № 1. - С. 12-15.

5. Бережная Н.М. Система интерлейкинов и рак. Киев, 2000. - 224с.

6. Бережная Н.М., Городецкий Б.А. Интерлейкин-2 и злокачественные новообразования. Киев, 1992. - 185с.

7. Бессмельцев С.С., Абдулкадыров К.М. Множественная миелома. — СПб: Диалект, 2004. 448с.

8. Бойчук С.В., Мустафин И.Г. Fas-рецептор и его роль при атопических заболеваниях // Иммунология 2001. №3. стр.24-29.

9. Бортникова О.Г., Вагнер В.П. Исследование процесса при апоптоза различной патологии // Медицинская иммунология. 2007. Т.9, - №2-3. - С.121-122.

10. Владимирская Е.Б. Механизмы апоптотической смерти клеток // Гематология и трансфузиология, 2002. т.47. стр. 35-40.

11. Владимирская Е.Б. Апоптоз и его роль в регуляции клеточного равновесия // Клиническая лабораторная диагностика 2002. № 11 стр. 25-32.

12. Волкова М.А. Клиническая онкогематология: Руководство для врачей //М.: Медицина. 2001. С. 317.

13. Вуд М.Э. Банн П.А. Секреты гематологии и онкологии: Пер с англ./ Под ред. Ю.Н.Токаревой, А.Е.Бухны. М.: БИНОМ, 1997. - 560 с.

14. Гапонова Т.В., Менделеева Л.П., Мисюрин А.В. и соавт. Экспрессия опухолеассоциированных генов у больных мнолжественной миеломой// Онкогематология.- 2009 Т. 2. - С. 52 - 57.

15. Гематология: новейший справочник / под общ. Редакцией К.М.Абдулкадырова. М.: Изд-во Сова, 2004. - С. 287-292, С. 349 - 367

16. Голенков А.К., Шабалин В.Н. Множественная миелома. СПб.: Гиппократ, 1995.-с. 144.

17. Грачева Л.А. Цитокины в онкогематологии. М.: Алтус, 1996. 234с.

18. Григорьева Т.Ю., Никонова М.Ф., Ярилин А.А. Различная чувствительность к индукции апоптоза Т-лимфоцитов // Иммунология.2002. -№4. -с.200-203.

19. Заботина Т.Н. Прогностическое значение экспрессии белков-регуляторов апоптоза на различных этапах дифференцировки клеток крови человекам // Медицинская иммунология. 2006. Т.8, - №2 - 3. -С.337-338.

20. Заботина Т.Н. Соколовская А.А., Кадагидзе З.Г., Барышников АЛО. Спонтанный и индуцированный апоптоз у больныхлимфопролиферативными заболеваниями // Клиническая иммунология. 2003. №1. - С.23-25.

21. Заботина Т.Н., Бокин И.И., короткова О.В. и др. Изучение цитотоксического потенциала эффекторных лимфоцитов онкологических больных // Медицинская иммунология. 2009. - T.l 1, -№ 4-5. - С.428.

22. Земсков В.М., Земсков A.M., Караулов С.П. Клиническая Иммунология. М.: Марис, 2000. - 397 с.

23. Кадалидзе З.Г., Славина Е.Г. Иммунологические подходы к использованию цитокинов в комплексном лечении злокачественных новообразований // Вопросы онкологии. 1995. - Т. 41. - №2. - С.45 -46.

24. Казакова Н.Н., Савченко А.А. и соавт. Особенности состояния иммунного статуса в зависимости от стадии рака желудка // Медицинская иммунология. 2009. Т. 11, - № 4-5. - С.429.

25. Камалов З.С., Курьязов Б.Н., Арипова Т.У. и др. Прогностическая ценность определения цитокинов TNFa, IL-1J3 и IL-4 в сыворотке крови больных раком прямой кишки до и после операции // Медицинская иммунология. 2006. Т.8, - №2 - 3. - С.338.

26. Капулер О.М., Нелюбин Е.В., Сибиряк С.В. Апоптоз лимфоцитов при псориазе // Медицинская иммунология 2006. т.8. №4. стр. 531-538.

27. Кетлинский С.А., Калинина Н.М. Иммунология для врача.- СПб: Гиппократ, 1998,- 156с.

28. Кетлинский С.А., Симбирцев А.С. Цитокины // СПб: ООО «Издательство Фолиант», 2008. 552 с.

29. Константинова Н.А. Основные физико-химические параметры, определяющие патогенетические свойства циркулирующих иммунных комплексов: Автореф. дис. докт. мед. наук. М. - 1986.

30. Лысюк Е.Ю., Логачева Н.П., Полосухина Е.Р. и др. Экспрессия апоптотических биомаркеров BCL-2, ВАХ и CD95 на В-клеточных субпопуляциях при лимфопролиферативных заболеваниях // Медицинская иммунология. 2002. Т.4, - №2. - С.301-302.

31. Москалева Е.Ю., Северин С.Е. Возможные механизмы адаптации клетки к повреждениям, индуцирующим программированную клеточную гибель. Связь с патологией. // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 2006.- №2. С. 2 — 14.

32. Погорелов В.М., Козинец Г.И. Морфологические маркеры пролиферации и апоптоза опухолевых клеток // Гематология и трансфузиология. 2008. - Т.53. - № 4. - С. 15 - 19.

33. Поспелова Т.И., Скворцова Н.В., Нечунаева И.Н. Результаты лечения множественной миеломы препаратом бортезомиб/Юнкогематология. 2009. — Т.2. С.35 —41.

34. Потапнев М.П. Апоптоз клеток иммунной системы и его регуляция цитокинами//Иммунололгия 2002. №4. стр. 237-242.

35. Потапнев М.П. В лимфоциты. Цитокинообразующая функция // Иммунология. 1994.- № 4. - С.4 - 8.

36. Рукавицин О.А., Поп В.П. Хронические лейкозы. М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2004. — 240 с.

37. Седова М.С., Булгакова В.А., Сенцова Т.Б., Балаболкин И.И. Определение активности маркеров апоптоза при проведении специфической иммунотерапии у детей с бронхиальной астмой // Медицинская иммунология. 2007. Т.9, - №2-3. - С. 186.

38. Симбирцев А.С. Цитокины новая система регуляции защитных реакций организма // Цитокины и воспаление. - 2004. - № 1. - С. 3 — 6.

39. Скулачев В.П. Явления запрограммированной смерти. Митохондрии, клетки и органы: роль активных форм кислорода //Соросовский образовательный журнал. 1999. №9 стр. 13-23.

40. Сорока Н.Ф., Свирновский А.И., Рекун А.Л. Апоптоз лимфоцитов периферической крови у больных системной красной волчанкой; патогенетические и клинические аспекты // Научно-практическая ревматология 2006 № 4. стр. 44-46.

41. Стадник Е.А., Зуева Е.Е., Сологуб Г.Н. Связь иммунологических и генетических маркеров с ответом на терапию больных В-ЛПЗ // Медицинская иммунология. — 2006. Т.6. - С. 21 — 25.

42. Стахеева М.Н., Чердынцева Н.В., Сломинская Е.М., Гарбуков Е.Ю. и др. Показатели апоптоза, пролиферации и продукции цитокинов мононуклеарными клетками периферической крови у больных РМЖ // Медицинская иммунология. 2007. Т.9, - №2-3. - С.289.

43. Сухина И.А., Никитин В.Ю., Цыган В.Н., и др. NK и NKT клетки как иммунологические маркеры прогрессироваания хронического гепатита С // Медицинская иммунология. 2007. Т.9, - №2-3. - С.237 - 248.

44. Тотолян А.А., Фрейдлин И.С. Клетки иммунной системы I И,- СПб: Наука, 1999,- 231с.

45. Фильченков А.А. Терапевтическое использование модуляторов апоптоза в онкологической практике //Труды научно-практической конференции «Онкология -XXI» Киев, 9-10 октября 2003. стр 48.

46. Фильченков А.А., Бутенко З.А. Механизмы регуляции апоптоза и антиапоптотическое действие онкогенных вирусов. // Биополимеры и клетка. 2000. №16. стр. 122-157.

47. Фрейдлин И.С. Система мононуклеарных фагоцитов. Москва: Медицина, 1984.-271с.

48. Фрейдлин И.С., Тотолян А.А. Клетки иммунной системы III-IV.- СПб: Наука, 2001.-390с.

49. Шардаков В.И., Загоскина Т.П. Роль иммунной системы и ее оценка у онкологических больных // Пособие для врачей. Киров, 2000. — 21 с.

50. Хаитов P.M., Пинегин Б.В., Истамов Х.И. Экологическая иммунология. Москва: Изд-во ВНИРО, 1995. - 218 с.

51. Ярилин А.А. Апоптоз и его место в иммунных процессах // Иммунология. 1996. №6 стр. 10-23.

52. Ярилин А.А. Основы иммунологии // Учебник. М.: Медицина, 1999. -608 с.

53. Яхнина Е.И. и соавт. Доброкачественная форма хронического лимфолейкоза. // Тер. Арх. 1997. - Т.69. - № 7. - С. 11-17.

54. Adams J.M., Cory S. The Bcl-2 protein family: arbiters of cell survival // Science. 1998. - Vol. 282. - P. 1322 - 1326.

55. Almasan A, Ashkenazi A. Apo2L/TRAIL: apoptosis signaling, biology, and potential for cancer therapy//Cytokine Growth Factor Rev.- 2003.- Vol.4. — P.337—348.

56. Alyea EP, Soiffer RJ, Canning C, et al. Toxicity and efficacy of defined doses of CD4+ donor lymphocytes for treatment of relapse after allogeneic bone marrow transplant//Blood.- 1998.-Vol. 91.-P. 3671

57. Amundson S.A., Myers T.G., Fornace A.J. Role for p53 in growth arrest and apoptosis: putting on the brakes after genotoxic stress // Oncogene. 1998. -Vol. 17.-P. 3287-3299.

58. Arends MJ, Wyllie AH. Apoptosis: mechanisms and roles in pathology//Int Rev Exp Pathol.- 1991. Vol.32. -P.223-254.

59. Ashkenazi A., Dixit V. Apoptosis control by death and decoy receptors // Science. 1998.-Vol. 281.-P. 1305 - 1308.

60. Attal M, et al. A prospective, randomized trial of autologous bone marrow transplantation and chemotherapy in multiple myeloma. Intergroupe Francais du Myelome//N Engl J Med. 1996. - Vol.335. -P. 91-97.

61. Attal M, et al. Single versus double autologous stem-cell transplantation for multiple myeloma //N Engl. J. Med. 2003. - Vol. 349. - P.2495-2502.

62. Attal M, Flarousseau JL. et al. A prospective, randomized trial of autologous bone marrow transplantation and chemotherapy in multiple myeloma. Intergroupe Fran?ais du Муё1оте/Я Med.- 1996.- Vol. 335.- P. 91 -97.

63. Badros A, et al. Improved outcome of allogeneic transplantation in high-risk multiple myeloma patients after nonmyeloablative conditioning // J. Clin. Oncol. 2002. Vol. 20. -P. 1295-1303.

64. Baker S., Reddy E. Modulation of life and death TNF receptor superfamily // Oncogene. 1998. - Vol. 17. - P3261 - 3270.

65. Bataille R, Barlogie B, Lu ZY, et al. Biologic effects of antiinterleukin-6 murine monoclonal antibody in advanced multiple myeloma//Blood . -1995.-Vol.86.- P.685.

66. Blagosklonny M. Cell death beyond apoptosis // Leukemia. — 2000. — Vol. 14. P. 1502- 1518.

67. Cavo M, et al. Superiority of thalidomide and dexamethasone over vincristine-doxorubicin dexamethasone (VAD) as primary therapy in preparation for autologous transplantation for multiple myeloma // Blood. -2005.-Vol. 106.-P. 35-39.

68. Chauhan D, Pandey P, Hideshima T, et al. SHP2 mediates the protective effect of interleukin-6 against dexamethasone-induced apoptosis in multiple myeloma cells//J Biol Chem.-2000.- Vol. 275. P. 27845 -27850.

69. Chen Q, Gong B, Mahmoud-Ahmed A, et al. Apo2L/TRAIL and Bcl-2-related proteins regulate type I interferon-induced apoptosis in multiple myeloma//Blood.- 2001. Vol.98. -P.2183-2192.

70. Chen Q, Ray S, Hussein MA, Srkalovic G, Almasan A. Role of Apo2L/TRAIL and Bcl-2-family proteins in apoptosis of multiple myeloma//Leuk Lymphoma.- 2003.-Vol.44.- P.1209-1214.

71. Child JA, et al. High-dose chemotherapy with hematopoietic stem-cell rescue for multiple myeloma // N Engl J Med. 2003. - Vol. 348. - P. 1875-1883.

72. Choi SJ, Cruz JC, Craig F, et al. Macrophage inflammatory protein 1-alpha is a potential osteoclast stimulatory factor in multiple myeloma//Blood . -2000.-Vol. 96.-P. 671 -675.

73. Cory S, Adams JM. The bcl2 family: regulators of the cellular life-or-death switch//Nat Rev Cancer.- 2002.- Vol.2. P.647-656.

74. Coultas L., Strasser A. The role of the bcl-2 protein family in cancer // Seminars Cancer Biol.-2003.- Vol. 13. P. 115 - 123.

75. Criteria for the classification of monoclonal gammopathies, multiple myeloma and related disorders : A report of the International Myeloma Working Group // Br J Haematol. 2003. Vol. 121. - P. 749-757.

76. Dalton WS. Mechanisms of drug resistance in hematologic malignancies//Semin Hematol. 1997. -Vol. 34.-P. 3 -8/

77. Danial NN, Korsmeyer SJ. Cell death: critical control points//Cell. -2004. -Vol.116.- P.205-219.

78. Debatin K., Stahnke K., Fulda S. Apoptosis in hematological disorders // Seminars Cancer Biol.-2003. Vol. 13.-P. 149- 158.

79. Di Ceiie P.F., Mariani S., Riera L., et al. Interleukin-8 induces the accumulation of B-cell chronic lymphocytic leukemia cells by prolonging survival in an autocrine fashion // Blood. 1996. - Vol.87. - P. 4382-4389

80. Dispenzieri A., Kyle R.A. // Best. Pract. Res. Clin. Haematol. 2005. - Vol. 18.-P. 553-568.

81. Downey G/ Mechanisms of leukocyte motility and chemotaxis // Curr. Opin. Immunol. 1994. - Vjl. 6. - P. 113 - 124.

82. Dunican A., Grutkosky P., Leuenroth S. et al. Neutrophils regulate their own apoptosis via preservationof CXC receptors // J Surg Res. 2000. Vol. 90. -P. 32-38.

83. Durie BG, Salmon SE. A clinical staging system for multiple myeloma. Correlation of measured myeloma cell mass with presenting clinical features, response to treatment, and survival // Cancer. 1975. Vol. 36. - P. 842-854.

84. Durie B.G.M., stoek-Novack D., Salmon S.E. et al. Prognostic value of pretreatment serum betar microglobulin in myeloma: a South-West Oncology Group study // Blod. 1990. - Vol. 75. - P. 823 - 830.

85. Finlay C., Hinds P.W., Tan Т.Н. et al. Activating mutations for transformation by p53 produce a gene product that forms a hsc700-p53 complex with an altered half-life // Mol. Cell. Biol. 1988. -Vol. 8. - P. 531 -539.

86. Fonseca R, et al. Clinical and biologic implications of recurrent genomic aberrations in myeloma // Blood. 2003. Vol. 101. - P. 4569-4575.

87. French A.R., Yokoyama W.M. Natural killer cells and viral infections // Curr. Opin. Immunol.-2003.-Vol. 15.-P. 45-51.

88. Gazitt Y., Rotenberg M.L., Hilsenbeck S.G. et al. Bcl-2 overexpression is assotiated with resistance to paclitaxel, but not gemcitabine, in multiple myeloma cells // Int. J. Oncol.- 1998. -Vol. 13.- P. 839-848.

89. Gazitt Y., Thomas C. et al. Bcl-2 overexpression is assotiated with to dexamethasone, but not melphalan, in multiple myeloma cells // Int. J. Oncol.-1998.-Vol. 13.- P. 397-405.

90. Giaccia A.J., Kastan M.B. The complexity of p53 modulation: emerging patterns from divergent signals // Genes. Dev. 1998. Vol. 12. - P. 2973 -2983.

91. Greipp PR, et al. International staging system for multiple myeloma // J Clin Oncol. 2005. - Vol. 23. - P. 3412-3420.

92. Gross A., McDonnell J.M., Korsmeyer S.J. Bcl-2 family members and the mitochondria in apoptosis // Genes Dev. 1999. - Vol. 13. - P.l 899 - 1911.

93. Hansen R., Oren M. P53: from inductive signal to cellular effect // Curr. Opin. Cenet. 1997. - Vol. 7. - P. 46 - 51.

94. Harris C.C. Structure and function of p53 tumor suppressor gene: clues for rational cancer therapeutic strategies // J. Natl. Cancer Inst. 1996. - Vol. 88. -P. 1442- 1455.

95. Hayashi N., Mita E. Fas sistem and apoptosis in viral hepatitis // J. Gastroenterol. Hepatol. 1997. - Vol. 12. - P. 223 - 226.

96. Hideshima T, et al. Molecular mechanisms mediating antimyeloma activity of proteasome inhibitor PS-341 //Blood. 2003. - Vol. 101.-P. 1530-1534.

97. Hollstein M., Sidransky D., Vogelstein B. p53 mutations in human cancers // Science. 1991. - Vol. 253. - P. 49 - 53.

98. Holmes W.E., Lee J., Kuang W.-J. et al. Structure and functional expression of human interleukin-8 (IL-8) in acute inflammation // Science. 1991.- Vol. 235.-P. 1278- 1280.

99. Hurada N., Hata PI., Yoshida M. et al. Expression of Bcl-2 family of proteins in fresh myeloma cells // Leukemia. 1998. - Vol. 12. - 1817-1820.

100. Hussein MA, Juturi JV, Lieberman I. Multiple myeloma: present and future //Curr Opin Oncol.- 2002. Vol. 14. -P. 31-35.

101. Ichikava A., Kinoshita Т., Watanabe T. et al. Mutations of the p53 gene as a prognostic factor in aggressive B-cell lymphoma // N. Eng. J. Med. 1997. — Vol. 337.-P. 529-534.

102. Johnson WJ, Kyle RA, Pineda AA, et al. Treatment of renal failure associated with multiple myeloma. Plasmapheresis, hemodialysis and chemotherapy//Arch Intern Med. -1990.-Vol.150.-P.863 -869.

103. Karadag A, Oyajobi BO, Apperley JF, et al, Human myeloma cells promote the production of interleukin 6 by primary human osteoblasts//FIaem.- 2000. Vol.108.-P.383 -390.

104. Kagi D., Ledermann В., Burki K., et al. Cytotoxicity madiated by T-cells and natural killler cells is greatly impaired in perforin-deficient mice //Nature. 1999.-Vol. 369.-P. 31-37.

105. Koch A., Polverini P., Kunkel S. et al. Interleukin-8 as a macrophage-derived mediator of angiogenesis // Science, 1992. Vol. 258. — P. 1798 -1801.

106. Kovalovich K., Li W. et al. Interliukin-6 protects againts Fas- mediated death by establishing a critical level of anti-apoptotic hepatic proteins FLIP, Bcl-2 and Bcl-xl // J. Biol. Chem. 2001. - Vol. 276. - P. 26605 - 26613.

107. Kyle, RA, et al., Review of 1027 patients with newly diagnosed multiple myeloma // Mayo Clin Proc. 2003. Vol. 78. - P. 21-33.

108. Laura Hernandez-Ruiz, Ines Gonzalez-Garcia, Carmen Castro et al. Inorganic polyphosphate and specific induction of apoptosis in human plasma cells // Iiaematologica. 2006. - Vol. 91. P. 1180-1186

109. Linden M, Kirchhof N, Carlson C, Van Ness B. Targeted overexpression of Bcl-XL in B-lymphoid cells results in lymphoproliferative disease and plasma cell malignancies/ZBlood. 2004,-Vol. 103. -P.2779-2786.

110. Lowe S.W., Ruley H.E., Jacks T. et al. p53-dependent apoptosis modulates the cytotoxicity of anticancer agents // Cell. 1993. - Vol. 74. - P. 957 - 967.

111. Majno G., Joris I. Apoptosis, oncosis, and necrosis // J Pathologica. 1995. -Vol. 146.-P. 3 - 15.

112. Migliorati CA, Siegel MA, Elting LS. Bisphosphonate-associated osteonecrosis: A long-term complication of bisphosphonate treatment // Lancet Oncol. 2006. - Vol. 7. - P. 508-514.

113. Milner J. Structures and functions of the tumor suppressor p53 // Pathoi. Biol. 1997. - Vol. 45. - P.797 - 803.

114. Morgan GJ, et al. Advances in oral therapy for multiple myeloma // Lancet Oncol. 2006.-Vol. 7.-P. 316-325.

115. Motomura S., Motoji Т., Takanashi M. et al. Inhibition of P-glycoprotein and recovery of drug sensitivity of human acute leukemia blast cells by multidrag resistance gene (mdrl) antisense oligonucleotides // Blood.- 1994. Vol. 91.-P. 3163-3174.

116. Mundy GR, Raisz LG, Cooper RA, et al. Evidence for the secretion of an osteoclast stimulating factor in myeloma//N Eng J Med.- 1974.- Vol. 291.- P. 1041 —1046.

117. Nigro J.M., Baker S.J., Preisinger A.C. et al. Mutations in the p53 gene occur in diverse human tumor types // Nature. 1989. Vol. 342. - P. 705 -708.

118. Niida S, Kaku M, Amano H, et al. Vascular endothelial growth factor can substitute for macrophage colony-stimulating factor in the support of osteoclastic bone resorption/Я Exp Med.-1999. Vol.190. -P. 293 -298.

119. Nor J.E., Chtistensen J., Lui J. et al. Up-regulation of BCL-2 in microvascular endothelial cells enhances intratumoral angiogenesis and accelerates tumor growth // Cancer Res. 2001. Vol. 61. - P. 2183-2188.

120. Oken MM, Pomeroy C, Weisdorf D, et al. Prophylactic antibiotics for the prevention of early infection in multiple myeloma//Am J Med. 1996. - Vol. 100.-P. 624-628.

121. Palumbo A, et al. Oral melphalan and prednisone chemotherapy plus thalidomide compared with melphalan and prednisone alone in elderly patients with multiple myeloma : Randomised controlled trial // Lancet. -2006.-Vol. 367. P. 825-831.

122. Prives C., Hall P. A. The p53 pathway // J. Pathol. 1999. - Vol, 187. P. 112-126.

123. Puthalakath H., Huang D., Reily L. et al. The proapoptotic activity of the Bcl-2 family member Bim // Mol. Cell. 1999. - Vol. 3. - P. 287 - 296.

124. Puthalakath H.,Huang D. Et al. The proapoptotic activity of the Bcl-2 family member Bim // Cell. 1999 Vol. 79. P. 189-192.

125. Richardson P.G., Anderson K.C. Multiple myeloma // Remedica publishing. London-Chicago. 2004.- P. 198

126. Richardson PG, et al. A randomized phase 2 study of lenalidomide therapy for patients with relapsed or relapsed and refractory multiple myeloma // Blood. 2006.-Vol. 108.-P. 3458-3464.

127. Richardson PG, et al. Bortezomib or high-dose dexamethasone for relapsed multiple myeloma // N Engl J. Med. 2005. - Vol. 352. - P. 2487-2498.

128. Robillard N., Bateller R. Phenotypic characterization of the human myeloma cellgrowth fraction //Blood. 2005/ - Vol. 105. - P. 4845 - 4848.

129. Ross D.D. Nevel mtchanisms of drug resistance in leukemia // Leukemia. 2000. Vol.14.-P. 467-473.

130. Schroeder H.W., Dighiero G. The pathogenesis of chronic lymphocytic leukemia: analysis of the antibody repertoire // Immunol. Today. 1994. - VI. 15.-P. 288-294.

131. Singhal S, et al. Antitumor activity of thalidomide in refractory multiple myeloma //N Engl. J. Med. 1999. - Vol. 341. - P. 1565-1571.

132. Singhal S, Mehta J, Desikan R, et al. Antitumor activity of thalidomide in refractory multiple myeloma//N Eng J Med. -1999.-Vol. 341. P. 1565 -1571

133. Smith D., Polverini P., Kunkel S. et al. Ingibition of IL-8 attenuatenangiogenesis in bronchogenic carcinoma // J.Exp. Med. 1994. - Vol. 179. i1. P. 1409- 1415.

134. Steele R.J., Thompson A.M., Hall P.A. et al. The p53 tumor suppressor gene // Br. J. Surg. 1998. - Vol. 85. - P. 1450 - 1467.

135. Thorberry N.A., Lasebnik Y., Caspases: enemies within// Science. 1998. Vol.281, p. 12-16.

136. Tricot G, et al. Graft-versus-myeloma effect: Proof of principle // Blood. -1996. Vol. 87. -P.l 196-1198.

137. Tu У., Xu F.H., Liu J. et al. Unregulated expression of Bcl-2 in multiple myeloma cells induced by exposure to doxorubicin, etoposide, and hydrogen peroxide//Blood. 1996.-Vol. 88. - P. 1805-1812.

138. Vacca A, Di Loreto M, Ribatti D, et al. Bone marrow of patients with active multiple myeloma: angiogenesis and plasma cell adhesion molecules LFA-1, VLA-4, LAM-1, and CD44 // J Hematol. 1995.- Vol. 50.- P. 9 -14.

139. Vacca A, Ribatti D, Roncali L, et al. Bone marrow angiogenesis and progression in multiple myeloma//Haematol. -1994. Vol. 87. - P. 503 -508.f,1. Nadl

140. Vonderheide RH, Hahn WC, SchulTze JL, Nadler LM. The telomerase catalytic subunit is a widely expressed tumor-associated antigen recognized by cytotoxic T lymphocytes//Immunity. 1999. - Vol. 10. - P. 673.

141. Waterhouse N., Green D. Mitochondria and apoptosis // J. Clin. Immunology. 1999. - Vol. 19. - P. 378 - 386.

142. Yu C., Sun K., Shei S. et al. Interleukin-8 modulates interleukin-1 beta, interleukin-6 and tumor necrosis faktor alfa release from normal human mononuclear cells // Immunopharmacology. - 1994. - Vol. 27. - P. 207 - 214.

143. Yue Т., Mckenna P., Gu J., Feurestein G. IL-8 is chemotactic for vaskular smooth muscle cells // Eur J. Pharmacol. 1993. Vol. 240. - P. 81-84.

144. Zhivotovsky В., Sten O. Defects in the apoptotic machinery of cancer cells: role in drug resistance // Seminars Cancer Biol. — 2003. — Vol. 13. — P. 125 — 134.

145. Zlotnik A. Chemokines and cancer // Int. J. Cancer. 2006. Vol. 119. - P. 2026 - 2029.

146. Zlotnik A., Yoshie O. Chemokines classification system and theirole in immunity // Immunity, 2000. Vol. 12. P. 121-127.

147. Zou H., Li Y., Wang X. An APAF-1 cytochrome -C multimetric omplex is a functional apoptosome that activates procaspase-9 // J. Biol. Chem. 1999.

148. Vol. 274.-P. 11549- 11556.