Изменения параметров иммунитета у больных рассеянным склерозом в зависимости от вариантов течения и активности заболевания тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.46, кандидат биологических наук Калашникова, Анастасия Андреевна

• Калашникова, Анастасия Андреевна
• кандидат биологических наук
• 2002

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Калашникова, Анастасия Андреевна

СОДЕРЖАНИЕ.2.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.4.

ВВЕДЕНИЕ.6.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ИММУННЫЙ СТАТУС БОЛЬНЫХ РАССЕЯННЫМ СКЛЕРОЗОМ

1.1. Субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови.11.

1.2. Особенности продукции цитокинов и рецепторов к ним.16.

1.2.1. Продукция цитокинов в ЦНС. 16.

1.2.2. Продукция цитокинов клетками периферической крови.36.

1.3. Процессы апоптоза клеток ЦНС и периферической крови.42.

1.4. Пролиферативная активность лимфоцитов периферической крови.46.

1.5. Аутоантитела в ликворе и в периферической крови больных РС.48.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.53.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ. ИЗМЕНЕНИЯ ПАРАМЕТРОВ ИММУНИТЕТА В ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ БОЛЬНЫХ РС С ПРОГРЕДИЕНТНЫМ И РЕМИТТИРУЮЩИМ ТЕЧЕНИЕМ ЗАБОЛЕВАНИЯ.

3.1. Параметры клеточного иммунитета.62.

3.2. Активность апоптотических процессов.68.

3.3. Изменения цитокинового звена иммунитета.70.

3.4. Изменения пролиферативной активности лимфоцитов.75.

3.5. Аутоантитела к основному белку миелина в сыворотке больных РС.76.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изменения параметров иммунитета у больных рассеянным склерозом в зависимости от вариантов течения и активности заболевания»

Актуальность темы.

Рассеянный склероз (РС) является хроническим прогрессирующим заболеванием центральной нервной системы аутоиммунной природы и характеризуется образованием очагов демиелинизации в белом веществе головного мозга и в спинном мозге (Гусев Е.И., Демина Т.Л., Бойко А.Н., 1997). Чаще развивается ремиттирующая форма рассеянного склероза (около 90% больных) с чередованием периодов обострений и ремиссий, со временем приобретающая вторичнопрогрессирующее течение. Реже заболевание носит первичнопрогрессирующий характер (в 10-15% случаев).

При РС ключевым моментом в развитии патологического процесса является миграция активированных аутореактивных лимфоцитов через гематоэнцефалический барьер с последующим развитием иммунного ответа на антигены миелиновой оболочки нервных волокон, включающим синтез специфических антител, продукцию провоспалительных цитокинов как антигенпрезентирующими клетками, так и Т-лимфоцитами, активацию макрофагов, результатом чего является разрушение миелиновой оболочки нейрона с последующим фагоцитозом его фрагментов. Процессы демиелинизации приводят к нарушению проведения нервного импульса (ЬавБшап Н., 1995).

Предшествующая обострению рассеянного склероза активация Т-лимфоцитов периферической крови проявляется в экспрессии на поверхности клеток активационных маркеров, дальнейшей пролиферации Т-клеток, активной продукции ими провоспалительных цитокинов, которые, в свою очередь, стимулируют экспрессию молекул антигенпредставления

HLA DR, костимуляторных молекул) на В-клетках и Т-хелперах (Ярилин А.А., 1999).

Решающее значение в иммунопатогенезе рассеянного склероза имеют провоспалительные цитокины, стимулирующие развитие иммунного ответа. В их синтезе участвуют моноциты, NK-клетки, В- и Т-лимфоциты. Повышение продукции провоспалительных цитокинов (IL-1, TNFa, IFNy) предваряет развитие клинической симптоматики (Perez-Vicente et al., 1996, Hillert J. et al., 2001, Losy J. et al, 2001; и др.), что позволяет использовать их для мониторинга состояния пациентов.

В качестве естественных антагонистов Т-хелперов 1 и провоспалительных цитокинов часто выступают Т-хелперы 2 и, синтезируемые ими, противовоспалительные цитокины (IL-4, IL-10), способные подавлять воспалительный процесс. Увеличение продукции противовоспалительных цитокинов во время обострения, особенно IL-10, носит протективный характер, поскольку восстанавливает баланс активационных и супрессорных иммунных реакций. Вместе с тем, данные об изменении продукции некоторых других цитокинов, в том числе IL-4, противоречивы и нуждаются в уточнении (Sellebjerg F. et al., 1996; van Boxel-Dezaire A. et all, 1997).

Действие провоспалительных цитокинов в очагах демиелинизации проявляется в активации глиальных клеток, моноцитов, и стимуляции экспрессии клетками молекул, опосредующих апоптотические процессы (Fas-антигена, FasL, TNF-R1). В экспрессии этих молекул участвуют все клетки, вовлеченные в демиелинизирующий процесс, что обуславливает дуализм апоптотических процессов в патогенезе PC. С одной стороны, апоптотическими механизмами могут элиминироваться клоны аутореактивных клеток, с другой стороны, процессы апоптоза могут приводить к гибели олигодендроцитов (Segal. В.М., Cross А.Н., 2000).

Значительная роль апоптоза в развитии РС определяет интерес к изучению баланса экспрессии Рав-антигена и РаэЬ клетками, участвующими в воспалении, прежде всего, СБ4+ и СБ8+ лимфоцитами. В этой же связи представляет интерес активность экспрессии ПМР-Ш иммунокомпетентными клетками периферической крови, в частности, моноцитами.

Несмотря на активное изучение иммунопатогенеза РС многие ключевые моменты до настоящего времени остаются неясными. В связи с тем, что в последние годы отмечается тенденция к «омоложению» возраста больных РС, приводящая к их ранней инвалидизации, увеличению частоты заболеваемости, расширению территории распространения рассеянного склероза, особую актуальность приобретает уточнение механизмов развития иммунопатологического процесса, характерных для различных стадий заболевания и периодов клинических проявлений.

В связи с вышеизложенным была сформулирована цель исследования:

Выявить наиболее значимые показатели иммунитета, отражающие характер течения и активность иммунопатологического процесса при рассеянном склерозе.

Для достижения цели были сформулированы следующие задачи исследования:

1. Изучить субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови больных РС с прогредиентным и ремиттирующим течением заболевания во время обострения и ремиссии, оценить экспрессию иммунокомпетентными клетками активационных маркеров и костимуляторных молекул.

2. Охарактеризовать активность процессов апоптотической гибели клеток иммунной системы путем определения экспрессии Раз-антигена и БавЬ на СБ4+ и СБ8+ лимфоцитах, ТИР-Ш на моноцитах больных РС.

3. Выявить особенности продукции цитокинов и их рецепторов клетками периферической крови в зависимости от варианта течения заболевания.

4. Изучить пролиферативную активность лимфоцитов больных РС на разных этапах болезни в ответ на стимуляцию митогенами и специфическим антигеном.

Научная новизна.

Впервые получены результаты, выявляющие особенности развития иммунопатологического процесса при ремиттирующем и прогредиентном течение РС.

Изучены особенности экспрессии НЬАОЯ и костимуляторных молекул (С040 и С040Ь) лимфоцитами периферической крови больных РС с различными вариантами течения болезни, а так же характер экспрессии молекул (Раз-антиген, РавЬ, ТЫР-Ш), опосредующих элиминацию активированных клонов клеток.

Впервые проведено комплексное исследование изменений продукции цитокинов и экспрессии их рецепторов клетками периферической крови больных рассеянным склерозом с прогредиентным и ремиттирующим течением заболевания, как во время обострения, так и в ремиссию.

Сравнительный анализ показателей клеточного и гуморального иммунитета и активности заболевания позволил оценить наблюдаемые изменения как способствующие развитию патологического процесса, так и протективные для пациентов.

Практическая значимость

Полученные сведения об изменениях субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови больных PC, активности экспрессии ими активационных маркеров, продукции цитокинов и их рецепторов в зависимости от формы заболевания могут быть использованы как дополнительные дифференциально-диагностические критерии при уточнении типа течения PC.

Оценка изменений субпопуляционного состава лимфоцитов, спонтанной продукции провоспалительных цитокинов (TNFa, IFNy), спонтанной пролиферативной активности клеток позволяет прогнозировать развитие клинических симптомов обострения и может быть использована для мониторирования состояния пациентов с ремиттирующим PC.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. В периферической крови пациентов с рассеянным склерозом независимо от варианта течения заболевания сохраняется постоянная напряженность иммунитета, которая проявляется в высокой продукции провоспалительных цитокинов и активной экспрессии молекул, участвующих в представлении антигена Т- и В-лимфоцитами.

2. У больных с прогредиентным течением рассеянного склероза в периферической крови преобладают признаки развития иммунного ответа по Т-хелперному 1 пути, в то время, как у больных с ремиттирующим PC отмечаются признаки разаития иммунного ответа по Т-хелперному 2 пути.

3. При выходе пациентов в ремиссию возрастает экспрессия ILIO Т-хелперами, отмечается активация процессов, направленных на элиминацию аутореактивных клонов (увеличение количества CD8+CD95+ и CD14+TNF-R1+ клеток).

Заключение диссертации по теме «Клиническая лабораторная диагностика», Калашникова, Анастасия Андреевна

ВЫВОДЫ.

1. В периферической крови пациентов с рассеянным склерозом независимо от варианта течения заболевания сохраняется постоянная напряженность иммунитета, которая проявляется в активной экспрессии молекул HLADR зрелыми Т-клетками, костимуляторных молекул CD40 и CD40L В- и Т-лимфоцитами, в высокой продукции провоспалительных цитокинов (IFNy, TNFcc, IL-6).

2. У больных с лрогредиентным течением рассеянного склероза отмечается снижение количества зрелых Т-лимфоцитов (CD3+), достоверное увеличение количества клеток не экспрессирующих кластеры дифференцировки основных субпопуляций лимфоцитов, что связано с нарушением ресинтеза поверхностных маркеров. В этой группе больных отмечается наиболее активная экспрессия HLADR Т-клетками.

3. У пациентов с ремиттирующим PC отмечается значительное повышение экспрессии IL-4R В-клетками и увеличение субпопуляции В-лимфоцитов. Во время обострения отмечается максимальное количество CD40+ В-клеток, а также снижение количества цитотоксических (CD8+) лимфоцитов, повышение иммунорегуляторного индекса; повышение спонтанной пролиферации лимфоцитов и нестимулированной продукции провоспалительных цитокинов (TNFa, IFNy, IL-6) in vitro.

4. При выходе пациентов с ремиттирующим течением РС в ремиссию возрастает экспрессия 1Ь-10 Т-хелперами, отмечается активация процессов, направленных на элиминацию аутореактивных клонов специфических цитотоксических лимфоцитов и активированных моноцитов (увеличения количества СБ8+С095+ и СВ14+Т№Ч11+ клеток).

5. Увеличение количества №С-клеток в периферической крови пациентов с ремиттирующим РС во время ремиссии имеет протективное значение, поскольку эти клетки активно экспрессируют БазЬ, участвуя в элиминации активированных клеток периферической крови, но не проникают в очаги демиелинизации.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.

1. Иммунологические обследования пациентов с рассеянным склерозом должны проводиться в динамике. При оценке иммунограмм больных РС необходимо учитывать результаты предыдущих исследований, сопоставляя полученные данные, в первую очередь, с иммунологическими показателями пациента во время стойкой ремиссии.

2. Клинико-лабораторными маркерами развития обострения рассеянного склероза являются: повышение иммунорегуляторного индекса; увеличение содержания в сыворотке и спонтанной продукции №N7, ТЫБа, 1Ь-6; повышение экспрессии НЬАОЯ Т-клетками (СБЗ+НЬАОК+), увеличение спонтанной пролиферации лимфоцитов.

3. Снижение иммунорегуляторного индекса до нормальных значений, повышение количества В-лимфоцитов и №С-клеток в периферической крови, снижение спонтанной пролиферации лимфоцитов свидетельствуют о выходе пациента с РС в ремиссию.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Калашникова, Анастасия Андреевна, 2002 год

1. Аутеншлюс А.Н., Панкратов Е.В. Способ определения активности патологического процесса у больных рассеянным склерозом // Пат. 2116651.- 1998.-бюл. №21.

2. Бисага Г.Н., Калинина Н.М., Акимов С.Б., Давыдова Н.И. Иммунопатогенетические различия ремиттирующего и прогредиентного рассеянного склероза. // Иммунология. 2000. - №3. -С.41-43.

3. Гусев Е.И., Беляева И.А., Чехонин В.П., Демина Т.Л. Клинико-иммунохимическая характеристика ремиттирующего течения PC // Вестн. РАМН. 1999. - № 7. - С. 40-45.

4. Гусев Е.И. Неврология и нейрохирургия. М., 2000. - 418 с.

5. Гусев Е.И., Демина Т.Л., Бойко А.Н. Рассеянный склероз. М., 1997. -463 с.

6. Демина Т.Л. Бойко А.Н. Особенности клиники и иммунопатогенеза рассеянного склероза и неврологических проявленй СПИДа. // В: Актуальные проблемы неврологии. 1989. - С. 214-217.

7. Кетлинский С.А., Калинина Н.М. Иммунология для врача. С-Пб., -1998.-С. 117.

8. Крыжановский Г.Н., Магаева C.B. Нейроиммунопатология. М., 1997. - 68 с.

9. Кучиескене Д.И. Клиническое значение определения антител к ОБМ у больных PC, ретробульбарным невритом и их здоровых родственников: Автореф. дис. канд. мед. наук: 14.00.13. М., 1992. -24 с.

10. Ю.Ланг Н.Р. Стимуляция лимфоцитов. М.: Медицина, 1976. - 288 с.11 .Ройт А., Бростофф Д., Мейл Д. Иммунология: пер. с англ. М. - 2000. -С. 118.

11. Фримель Г. Иммунологические методы. М., 1987. - 303 с.

12. Чекнев С.Б. Патогенез рассеянного склероза: иммуностимуляция илииммунодефицит. // Иммунология. 1994. - 2, 9-17.

13. Чехонин В.П., Турина О.И., Дмитриева Т.Б. и др. Основной белок миелина: Строение, свойства, функции, роль в диагностике демиелинизирующих заболеваний // Вопросы мед. химии. 2000. - № 6.-С. 13.

14. Ярилин А.А. Основы иммунологии. 1999. - 607 с.

15. Achiron A., Miron S., Zeitun I. et al. Cytokine production is increased in multiple sclerosis patients // Eur. Cytokine Netw. 1998. - Vol.9, N 3. - P. 501.

16. Aderka D., Le J., Vilcek J. IL-6 inhibits lipopolysaccharide-induced tumor necrosis factor production in cultured human monocytes, U937 cells, and in mice // J. Immunol. 1989. - Vol.143. - P. 3517-3523.

17. Akdis C.A., Blaser K. IL-10-induced anergy in peripheral T-cell and reactivation by microenviromental cytokines: two key steps ion specific immunotherapy // FASEB J. 1999. - Vol. 13. - P. 603-609.

18. Alderson M.R., Tough T.W., Davis-Smith T. et al. Fas ligand mediates activation-induced cell death in human T cell lymphocytes // J. ExP. Med. -1995.- Vol.181.-P.71.

19. Amano Y., Lee S., Allison A. Inhibition of glucocorticoids of the formation of interleukin-lb and interleukin-6: mediation by decreased mRNA stability // Mol. Pharmacol. 1992. - Vol.43. - P.176-182.

20. Arnason B. 1995. The role of cytokines in multiple sclerosis // Neurology. -Vol.45, suppl.6. P. 54.

21. Assoian R.K., Fleuurdelys B.E., Stevenson H.C. et al. Expression and secretion of type P transforming growth factor by activated human macrophages // Prac. Natl. Acad. Sci. USA. 1987. - Vol. 84. - P. 60206024.

22. Bacrwald K.D., Popko B. Effects of interferon-gamma in cultured human glial cells // J. Neurochem. 1997. - Vol. 69. - P.37

23. Badovinac V., Mostrarica S.M., Stosic-Grujicic S. et al. The effects of recombinant interleukin-lR antagonist (rlL-lra) on the adoptive transfer of experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) in rats // Neuroimmunology. 1995. - Vol. 1. - P. 13.

24. Balashov K., Smith D., Khonry S. Increased IL-12 production in progressive multiple sclerosis: induction activated CD4+ T-cells via CD40L // Proc. Nat. Acad. Sci. 1997. - Vol. 83. - P. 2462-2468.

25. Balashov K.E., Comabella M., Ohashi T. et al. Defective regulation of IFNy and IL-12 by endogenous IL-10 in progressive multiple sclerosis // Neurology. 2000. - Vol.55, N2. - P. 192-198.

26. Balashov K.E., Rottman J.B., Weiner H.L., Hancock W.W. CCR5+ and CXCR3+ T cells are increased in multiple sclerosis and their ligands MIP-la and IP-10 are expressed in demyelinating brain lesions // Proc. Natl. Acad. Sci. 1999. - Vol.96. - P.6873-6878.

27. Barkhof F., Frequin S.T., Hommes O.R. A correlative traid of gadolinium-DTPA MRI, EDSS and high-dose intravenous methylprednisolone // Neurology. 1992. - Vol.42. - №1. - P.63-67.

28. Barna B.P., Estes M.L. Human astrocyte growth regulation: IL-4 sensitivity and receptor expression // J. Neuroimmun. 1995. - Vol. 60. - P.75-81.

29. Baron W., Metz B., Hoekstra D., de Vries H. PDGF and FGF-2 signaling in oligodendrocyte progenitor cells: regulation of proliferation anddifferentiation by multiple intracellular signaling pathways // Mol. Cell Neurosis. 2000. - Vol. 15. - P. 314-329.

30. Beck J., Rondot P., Catinot L. et al. Increased production tumor necrosis factor precedes clinical manifestation in multiple sclerosis: do cytokines trigger off exacerbations? // Acta Neurol. Scand. 1988. - Vol.78. - P.318.

31. Becker S., Riecks M., Epplen C., Kabelitz D., h #p. yS-T-cells and activation patterns in relapsing-remitting multiple sclerosis. // Multiple sclerosis: clinical and ladoratory rsearch. 1997. - Vol.3 - №5. - P.l 16.

32. Beniac D.R., Wood D.D., Palaniyar N. Interaction between levels of proinflammatory cytokines production and serum concentration of neurospecific proteins as a marker of BBB damage in MS. // J. Struct. Biol.- 2000 Vol.129, N 1. - P.80-95.

33. Bertolotto A., Iudicello M., Manzardo E. et al. TNFa mRNA in peripheral blood mononuclear cells of relapsing-remitting MS patients correlates with clinical activity // Europ. J. of Neurol. 1996. - Vol.3, suppl. 4. - P.36-38.

34. Bonetti B., Raine C.S. Multiple sclerosis: oligodendrocytes display cell death-related molecules in situ but do not undergo apoptosis // Ann. Nevrol.- 1997.-Vol.42.-P. 74-84.

35. Bongioanni P., Lombardo F., Moscato G. et al. T-cell interleukin-6 receptor binding in interferon-beta-lb-treated multiple sclerosis patients // Eur. J. Neurol. 2000. - Vol. 7, N 6. - P. 647-653.

36. Boyum A. Separation of leukocytes from blood and bone morrow // Scand. S. Clin. Lab. Investig. 1968. - Vol.76. -P.1092-1097.

37. Brokstad K.A., Page M., Nyland H. Cytokine profile of maltiple sclerosis patientis // Acta Neurol. Scand. 1994. - Vol. 89, N 6. - P. 407-411.

38. Campbell L.L., Stalder A.K., Pagenstecher Y.A.A., Asensio V.C. Transgenic models to study the actions of cytokines in the CNS. // Neuroimmunomodulation. 1998. - Vol.5, N 3-4. - P. 126-135.

39. Cannella B., Raine C.S. The adhesion molecule and cytokine profile of maltiple sclerosis lesions // Ann. Neurol. 1995. - Vol. 37. - P. 424-435.

40. Chabot S., Yong V.W. Interferon beta-lb increases interleukin-10 in a model of T cell microglia interaction // Neurology. - 2000. - Vol.55, N10. -P. 1497-1505.

41. Chabot S., Williams G., Yong V.W. Microglia production of TNF-a is induced by activated T-lymphocytes involvement of VLA-4 and inhibition by interferonp-lb // J. Clin. Invest. 1997. -Vol. 100. - P. 604-608.

42. Chalon M.P., Sindic C.J.M., Laterre E.C. Serum and CSF levels of soluble interleukin-2 receptors in MS and other neurological diseases: a reappraisal // Acta Neurol. Scand. 1993. - Vol. 87. - P.77-82.

43. Chechonin V.P, Deomina T.L., Beliaeva I.A. et al. Interaction between levels of pro-inflammatory cytokines production and serum concentration of neurospecific proteins as a marker of BBB damage in MS // Multiple sclerosis. 1997. - Vol. 2. - P.133.

44. Chofflon, Roth S., Juillard C. Tumor necrosis factor production capacity in multiple sclerosis // Europ. Cytokine Network. 1997. - Vol.8, N3. - P.253-257.

45. Chung I.Y., Benveniste E.N. Tumor necrosis factor-a production by astrocytes. Induction by lypopolysaccharide, IFNy and IL-1 (3 // J. Immunol. 1990. -Vol. 144. - P. 2999-3007.

46. Comi, M., Leone M., Bonissoni S., et al. Defective T cell Fas function in patients with multiple sclerosis // Neurology. 2000. - Vol.55, N 7. - P. 921-927.

47. Czlonkowska A., Paz A., Fiszer U., Zaborski J., Czlonkowski A. Phenotyping analysis of leukocytes in patients with multiple sclerosis // Multiple sclerosis: clinical and laboratory research. 1997. - Vol. 3, N 5. -P.110.

48. D'Souza S.D., Bonetti B., Balasingam V. et al. Multiple sclerosis: Fas signaling in oligodendrocyte cell death // J. Exp. Med. 1996. - Vol. 184. -P. 2361-2370.

49. Dayer J.M., Burger D. Interleukin-1, tumor necrosis factor and their specific inhibitors // Eur. Cytokine Netw. 1994 - Vol.5, N6. - P.563-571.

50. Dinarello C.A. The role of interleukin-1 in disease // New Advances on Cytokines.-NewYork, 1992.-P. 303-313.

51. Dinarello C.A. The biological properties of interleukin-1 // Eur. Cytokine Netw. Vol.5, N6. - 1994. - P.517-531.

52. Djordjevic D., Jovicic A., Kataranovski M. et al. Interleukin-10- possible immunomodulatory role in multiple sclerosis patients // Multiple sclerosis: clinical and laboratory research. 1997. - Vol. 3, N 5. - P.314.

53. Dowling P., Shang G., Raval S. et al. Involvement of the CD95 (APO-l\Fas) receptorMigand system in multiple sclerosis brain. // J. Exp.Med. -1996. Vol.184.-P. 1513-1518.

54. Femstein G.Z., X. Wang, F.C. Barone. IL-Ira production in central nervous system in multiple sclerosis // Multiple sclerosis. 1998. - Vol.4, N.6. -P.313.

55. Fishman S., Hobbs K. IL-lra stimulates production of IL-4 // Cytokines / Ed by A. Mire-Sluis, R. Thorpe. 1998. - Chapter 7. - P.103-115.

56. Fleisher B., Marquardt P., Poser S., Kreth H.W. Phenotypic markers and functional characteristics of T-lymphocyte clones from cerebrospinal fluid in multiple sclerosis. // J. Neuroimmunol. 1984. - Vol. 7. - P. 151-162.

57. Fluckiger G. Interleukin-10 // Cytokines / Ed by A. Mire-Sluis, R. Thorpe. 1998. - Chapter 18. - P.234-237.

58. Gata J.M., Dinca L. Dinamics of CD4, CD8 and CD4 subpopulations during relaps versus remitting in MS patients // Multiple sclerosis: clinical and laboratory research 1999. - Vol. 7, N 4. - P.514.

59. Gehr G., Gentz R., Brockhaus M. et al. Both tumor necrosis factor receptor types mediate proliferative signals in human mononuclear cells activation // J. immunol. 1992. - Vol.149. - P.911-917.

60. Gerosa F., Paganin C., Peritt D. et al. Interleukin-12 primes human CD4 and CD8 T-cell clones for high production of both interferon-y and interleukin-10 // J. Exp. Med. 1996. - Vol. 183. - P. 2559-2569.

61. Goldman M., Stordeur P. Interleukin-10 as an anti-stress cytokine // Eur. Cytokine Netw. 1997. - Vol. 8, N.3. - P. 301-302.

62. Hafler D.A., Hemler M.E. Christenson L. et.al. Investigation of in vivo activated T cells in multiple sclerosis and inflammatory central nervous system diseases. // Clin. Immunol. Immunopatol. 1985. - Vol. 37. - P. 163-171.

63. Haggiag S., Chebat J., Revel M. Induction of myeline gene expression in cell culture by IL-6rReceptor-IL-6 chimera // Multiple sclerosis: clinical and laboratory research. 1999. - Vol.5. - P. 53.

64. Haviv R., Stein R. Neuronal expression of TNF-R. 11 J. Neurosci. Res . -1998.-Vol. 52.-P. 380-389.

65. Hayashi T., Morimoto C., Burks J.S. et al. Dual label immunocytochemistry of the active multiple sclerosis lesions: major histocompatibility complex and activation antigens. // Ann. Neurol. - 1988. -Vol. 24.-P. 523-531.

66. Hillert J., W.-X. Huang Y.-P. Jin.Cytokine network analysis in multiple sclerosis. Journal of neurological sciences // Abstract of the XVII world congress of neurology. London, 2001. - Vol.187, suppl.l. - P. 269.

67. Hohlfeld R., Lucas K. Cytokine networks in multiple sclerosis //Neurology.- 1994. Vol.45, suppl.6. — P. 1.

68. Inoges S., Merino J., Bandres E. et al. Cytokin flow cytometry differentiates the clinical status of multiple sclerosis patients // Clin, and Exper. Immunol.- 1999. -Vol.115, №3.-P.521-535.

69. Jander S., Stoll G. Differential induction of IL-12 IL-18 and IL-lbeta converting enzyme mRNA in experimental autoimmune encephalomyelitis of the Lewis rat // J. Neuroimmunol. 1998. - Vol.91. - P. 93.

70. Jeannin P., Delneste Y., Seveso M. et al. IL-12 synergizes with IL-2 and other stimuli in inducing IL-10 production by human T cells // J. Immunol. -1996.-Vol. 156.-P. 3159-3165.

71. Johnson D., Sato S., Quarles R.H. et al. Quantitation of myelin-associated glycoprotein in human nervous tissue from controls and multiple sclerosis patients. // Neurochem. 1986. - Vol. 46. - P. 1086-1093.

72. Joyce D.A., Steer J.H. Tumor necrosis factor a and interleukin-la stimulate late shedding of p75 TNF receptor but not p55 TNF receptor from human monocytes // J. of interferon and cytokine research. 1995. - Vol.15. - P. 947-954.

73. Ju S.-T., Panka D.J., Cui H. Fas (CD95)Fas-L interactions required for programmed cell death after T cell activation // Nature. 1995. - Vol. 373. - P. 444.

74. Jurewicz A., Matysiak M., Walczak A. et all. Signal transduction pathways in glial cells after TNF stimulation // Multiple sclerosis: clinical and laboratory research. 1999. - Vol.5. - P.24.

75. Jurewicz A.M., Walczak A.K., Selmaj K.W. Glial cells in multiple sclerosis: phenotype and cytokine profile // Multiple sclerosis: clinical and laboratory research. 1999. - Vol.5. - P.28.

76. Kishimoto T. The biology of interleukin-6 // Blood. 1989. - Vol.74. - P.l.

77. Kohno K., Kataoka J., Ontsuki T. et al. IFN-gamma-inducing factor (IGIF) is a costimulatory factor on the activation of Thl but not Th2 cells and exerts its effects independently of IL-1 // J. Immunol. 1997. - Vol.158. - P. 1541.

78. Kouwenhoven M, Teleshova N., Ozenci V. et al. Monocytes in multiple sclerosis: phenotype and cytokine profile // J. Neuroimmun. 2001. - Vol. 112, N1-2.-P. 197-205.

79. Kraus J., Fischer O., Kuehne B.S. et al. Diurnal changes of common immunological markers in the serum of MS patients and healthy donors -preliminary results // Abstract of the XVII world congress of neurology. -London, 2001. Vol.187, suppl.l. - P. 273.

80. Lamers K.J., van Engelen B.G., Gabreels F.J. Variants of immune disorders in various forms of multiple sclerosis // Acta Neurol. Scand. 1995. - Vol. 92, N3.-P. 247-251.

81. Lassman H. Blood-brain barrier and cell adhesion molecules // J. Neuroimmunology. 1995. - Vol. 34, suppl. 1. - P. 312-318.

82. Lassman H. Mechanisms of demyelination in multiple sclerosis // Multiple sclerosis: clinical and laboratory research. 1999. - Vol.5. - P.2.

83. Lily O., Vincent A., Lourence N., Palace J. Serum autoantibodies against a neuronal cell line correlate with disability in MS. // J. neurol. scien. 2001. -Vol.187, suppl.l.-P. 265.

84. Lindberg R, De Groot C J.A., Montagne L. et al. Matrix Metalloproteinases, but not their endogenous ingibitors TIMPs and CSF cells of MS patients // J. neurol. scien. 2001. - Vol.187, suppl.l. - P. 263.

85. Lindberg R. Matrix Metalloproteinases in the brain tissue and CSF of MS // J. neurol. scien. 2001. - Vol.187, suppl.l. -P.262.

86. Lindsay R.M. Role of neurotrophins and trk receptor in the development and mainte-nance of sensory neurons: an overview // Philos. Trans. R. Soc. Lond. B. Biol. Sci. 1996. - Vol. 351. - P.60.

87. Link J., Sodderstorm, T. Olsson B. Hojeberg. Increased TGFJ3, IL-4 and IFNy in multiple sclerosis // Ann. Neurol. 1994. - Vol.36. - P.379.

88. Lissyani N.I. Variants of immune disorders in various forms of multiple sclerosis. // Multiple sclerosis: clinical and laboratory research. 1997. -Vol.3, N5.-P. 64.

89. Loddick S.A., Wong M., Bongiorno P.B. et al. Endogenous interleukin-1 receptor antagonist is neuroprotective // J. Biochem. and Biophys. Res. Commun. 1997. - Vol. 234, N 1. - P.211-215.

90. Losy J., Niezgoda A. Increase of IL-18 in patients with multiple sclerosis and its relation to brain MRI activity // J. neurol. scien. 2001. - Vol.187, suppl. 1. — P. 273.

91. Malyark M., Smith M.F., Abel A.A. et all. The differential production of three forms of IL-IRa by human neutrophils and monocytes // J. Immunol. -1998. Vol. 4. - P.2004-2010.

92. Manual of flow cytometry // Abstract of the X world congress of laboratory reseurch. 1999. - Mainz. - P.72.

93. Marin V., Bensa P., Kaplanski G. Augmented expression of TNFa and lymphotoxin in mononuclear cells in MS and optic neuritis. // Eur. Cytok. Netw. 1998. - Vol.9, N.3. - P. 501.

94. Marz P., Cheng J.-G., Gadient R.A. et al. Sympathetic neurons can produce and respond to interleukin 6 // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998. -Vol.95.-P. 3251-3256.

95. Massaro A.R., Soranzo C., Carvenale A. et al. The ciliary neurothrophic factor (CNTF) in CSF from multiple sclerosis patients // Neuroimmunology. 1995. - Vol.1. - P. 12.

96. Matsuda M., Tsukada N, Miyagi K., Yanagisawa N. Increased levels of soluble tumor necrosis factor receptor in patients with multiple sclerosis and HTLV-1-associated myelopathy // J. Neuroinnunol. 1994. - Vol. 52. -P. 33.

97. Micallef M.J., Ontsuki T., Kohno K. et al. IFN-gamma-inducing factor enhances Thl cytokine production by stimulated human T cells: synergism with IL-12 for IFN-gamma production // Eur. J. Immunol. -1996.-Vol.26.-P. 1647.

98. Miron S., Noy S., Rotestein Z., Achiron A. Concomitant analysis of TNF-a and IL-6 increase the sensitivity and improve the defection of ralapses in multiple sclerosis // Multiple sclerosis. 1997. - Vol. 2. - P. 314.

99. Miron S., Zeitun I., Barak Y. et al. TNF-a and IL-6 serum levels as markers of relapse detection in multiple sclerosis patients // Eur. Cytokine Netw. 1998. - Vol.9, N3. - P. 337.

100. Moller P., Koretz K., Leithauser F. et al. Expression APO-1 (CD95), a member of the NGF\TNF receptor superfamily, in normal and neoplastic colon epithelium // Int. J. Cancer. 1994. - Vol. 57. - P. 371-377.

101. Multiple sclerosis / Ed by W. Donald Paty, C.George. Philadelphia, 1998. - 648 p.

102. Navicas V., He B., Link J. et al. Angmented expression of TNFa and lymphotoxin in mononuclear cells in MS and optic neuritis // Braine. -1996.-Vol.119.-P. 213.

103. Norton W.T., Cammer WIsolation and characterization of myelin // Myelin / Ed by P. Morell. New York, 1984. - P. 147-195.

104. Ohta M., Ohta K., Ma J. Clinical and analytical evalution of enzyme immunoassay for myelin basic protein in cerebrospinal fluid. // Clin Chem, 2000. Vol. 46, N 9. - P. 1326-1330.

105. Olsson I., Gatanaga T., Guluberg U. et al. Tumor necrosis factor (TNF) binding proteins (soluble TNF-receptor forms) with possible roles in inflammation and malignancyEur // Cytok. Netw. 1993. - Vol.4. - P. 169.

106. Olsson T., Wang W.Z., Hojeberg B. et al. Lymphocytes in MS determined by antigen-induced secretion of interferon gamma // J. Clin. Invest. 1990. - Vol.86. - P.981.

107. Ortiz-Arduan A., Danoff T.M., Kalluri R. et al. Regulation of Fas and Fas-L expression in cultured murine renal cells and in the kidney during endotoxemia // Am. J. Physiol. 1996. - Vol. 271. - P.l 193-1201.

108. Perez-Vicente J.A., Minguela A., Alvares-Lopez M.R. et al. Th2 cytokine patterns in multiple sclerosis // Europ. J. of immunol. 1996. -Vol.3, suppl. - P.4-47.

109. Poehlau D., Rieks M., Alberti T. et al. Th-1 and Th-2 type cytokine producting peripheral blood mononuclear cells of patients with relapsing-remitting multiple sclerosis // Multiple sclerosis. 1997. - Vol. 2. - P. 313.

110. Pouly S., Becher B., Blain M., Antel J.P. Interferon-g modulates human oligodendroglial susceptibility to Fas-mediated apoptosis // J. Neuropatol. Exp. Neurol. 2000. - Vol. 59. - P. 280-286.

111. Raine C.S., Bonetti B., Cannella B. Multiple sclerosis: expression of molecules of the tumor necrosis factor ligand and receptor families in relationship to demyelinated plaque // Rev. neurol. (Paris). 1998. - Vol. 154,N8-9.-P. 577-585.

112. Reunanen M.I. Lymphocyte stimulation and viral antibodies synthesis in cerebrospinal fluid of patients with multiple sclerosis // Acta Univ. Oui. -Neurologica. 1982. - Vol. 8. - P. 1-56.

113. Rieckmann P., Albrecht M., Kitze B. Cytokine mRNA levels in mononuclear blood cells from patients with multiple sclerosis // Neurology. 1994.-Vol.44.-P.1523.

114. Rieckmann P., Albrecht M., Kitze B. et al. Tumor necrosis factor-a messenger RNA expression in patients with MS is associated with disease activity // Ann. Neurol. 1995. - Vol.32. - P.82.

115. Rieckmann P., Martin S., Weichselbraun I. et al. Serial analysis of circulating adhesion molecules and TNF receptor in serum from patients with multiple sclerosis: cICAM is an indicator for relapse // Neurology. -1994.-Vol.44.-P. 2367.

116. Rieks M., Bode A., Schilling P. et al. Intracellular Thl- and Th2-type cytokines in patients with relapsing-remitting multiple sclerosis a longitudinal study // Euro P. J. of Neurol. - 1996. - Vol.3, suppl.4. - P.42-90.

117. Robinson D. Shibuya K., Mui A. et al. IGIF does not drive Thl development but synergizes with IL-12 for IFNgamma production and activates IRAK and NfkappaB // Immunity. 1997. - Vol.7. - P. 571.

118. Rodriguez C.F., Lucchinetti C.F. Is apoptotic death of the oligodendrocyte a creitical event in the pathogenesis of multiple sclerosis? //Neurology. 1999.-Vol. 53, N 6. - P.1409-1414.

119. Rose-John S., Marz P., Ficher M. et al. IL-6 and soluble IL-6 receptor are potent stimulators of hematopoietic and neuronal cells in vitro and in vivo // Eur. Cytok. Netw. 1998. - Vol.9, N.3. - P. 328.

120. Sabelko-Downes K.A., Cross A.H., Russell J.H. J Dual role for Fas Ligand in the initiation of and recovery from experimental allergic encephalomyeliti // Exp. Med. 1999. - Vol.18. - P. 1195-1205.

121. Sasaki H., Pollard R.B., Schmitt D., Suzuli F. Transforming growth factor pin the regulation of immune response // Clin. Immunol. Immunopathol. 1992. - Vol. 65. - P. 1-9.

122. Sawada M., Sazumura A., Hosoya H. et al. Interleukin-10 inhibits both the production of cytokines and expression of cytokines receptors in microglia // J. Neurochem. 1999. - Vol. 72. - P. 1466-1471.

123. Schneider H., Prossi F., Balschun D. et al. A neuromodulatory role of interleukin-ip in hippocampus // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998. -Vol.95. - P.7778-7783.

124. Scholz C., Kurt T., David E. Anderson, Gordon J. Freeman and David A. Hafler. Expansion of autoreactive T cells in multiple sclerosis is independent of exogenous B7 costimulation // J. Immunol. 1998. - Vol. 160.-P. 1532-1538.

125. Schonrock L.M., Galowski G., Rruck W. IL-6 expression in early multiple sclerosis lesions. // Multiple sclerosis: clinical and laboratory research. 1999. - Vol.5. - P.4.

126. Segal. B.M., Cross A.H. Fas(l) track to apoptosis in multiple sclerosis: TNF receptor may suppress or potentiate CNS demyelination // Neurology. 2000. - Vol. 55, N 7. - P. 906-907.

127. Sellebjerg F., Bendtzen K., Christiansen M., Frederiksen J. Cytokines and soluble IL-4 receptor in patients with acute optic neuritis and multiple sclerosis // Europ. J. Neurol. 1996. - Vol.3, suppl. 4. - P.31.

128. Sellebjerg F., Christiansen M., Nielsen P.M. Cytokines and apoptosis in patients with multiple sclerosis // Multiple Sclerosis: clinical and laboratory research. 1998. - Vol. 4, N 6. - P. 475-479.

129. Selmaj K., Raine C. Tumor necrosis factor mediates myelin and oligodendrocyte demage in vitro // Ann Neurol. 1988. - Vol. 23. - P. 33946.

130. Sharief M.K., Semra Y.K., Seidi O.A. The FLIP side of multiple sclerosis // J. neurol. scien. 2001. - Vol.187, suppl.l. - P. 252.

131. Shrikant P., Benveniste E.N. The central nervous system as an immunocompetent organ: role of glial cells in antigen presentation // J. Immunol.- 1996.-Vol. 157.-P. 1819-1822.

132. Sindic CJ., Van Laere V., Monteyne P. Cytokine mRNA expression in CSF and peripheral blood mononuclear cells in multiple sclerosis // Multiple sclerosis: clinical and laboratory research. 1997. - Vol.3, N.5. -P. 32.

133. Sipe K.J., Srisawasdi D, Dantzer R, Kelley K.W. Weyhenmeyer J.A. An endogenous 55 kDa TNF receptor mediates cell death in neural cell line. // Brain Res. Mol. Brain. Res. 1998. - Vol. 38. - 222-232.

134. Sommer N. Heterogeneus cellular composition of cerebrospinal fluid in MS // Hemmer. 2001. - Vol.187, suppl.l. - P.268.

135. Spuler S., Yousry T., Scheller A. et al. Multiple sclerosis: prospective analysis of TNF-a and 55kDa TNF receptor in CSF and serum in correlation with clinical and MRI activity // Neuroimmunol. 1996. - Vol. 66.-P. 57.

136. Steinman L. Multiple sclerosis: a coordinated imunological attack against myelin in the central nervous system // Cell. 1996. - Vol.85. - P. 299-302.

137. Taga T., Kishimoto T., Akira S. Cytokine signal transduction // Cell. 1994. - Vol. 76. - P. 241-251.

138. Tanaka M., Suda T., Haze K. et al. Fas ligand in human serum // Nat. Med. 1996.-Vol. 2.-P. 317.

139. Thompson A.J., Brazil J., Feighery C. Multiple sclerosis: analysis of cellular composition of cerebrospinal fluid // Acta Neurol. Scand. 1985. -Vol. 72,N6.-P. 577-583.

140. Thomson A. The handbook of cytokines. London: Academic Press, 1994. 465 p.

141. Tjuvajev J. Gansbacher B., Beattie B. et al. RG-2 glioma growth attenuation and severe braine edema caused by local production of interleukin 2 and interferon-y // Cancer Res. 1995. - Vol. 55. - P. 19021910.

142. Traugott U., Lebon P. Multiple sclerosis: Involvement of interferons in lesion patogenesis // Ann. Neurol. 1988. - Vol. 24. - P. 243-251,

143. Traugott U. Multiple sclerosis: relevance of class I and class II MNC-expressing cells to lesion development // J. Neuroimmunol. 1987. -Vol.16.-P. 283-302.

144. Trinchieri G. Biological properties and therapeutic applications of interleukin-12 // Eur. Cytok. Netw. 1997. - Vol.8, N.3. - P. 305.

145. Van der Veen, Stohlman 11-10 expression in EAE // Cytokines / Ed by Mire-Sluis A., Thorpe R. 1998. - Chapterl8. - P.234-237.

146. Van Oosten B.W., Barkhof F., Von Blomberg B.M.E. Correlating cytokine production and MRI disease activity in MS patients // Europ. J. Neurol. 1996. - Vol.3, suppl.4. - P. 6.

147. Van Snick J. Interleukin-6 an overview // Annu Rev. Immunol. -1990. Vol.8. - P.253-278.

148. Walczak A., Mycko M., Selmaj L. Spontaneous apoptosis of lymphocytes in multiple sclerosis // Abstract of the XVII world congress of neurology. London, 2001. - Vol.187, suppl.l. - P. 272.

149. Wang X., Chen M., Wandinger K.P. et al. IL-12 production in peripheral blood mononuclear cells in an IL-10-dependent mechanism: relevance to IFN-beta-lb therapeutic effectc in multiple sclerosis patients // JJmmunol. -2000.-Vol.165, N 1.-P. 548-57.

150. Warren K.G. Catz I. Autoantibody in peritheral blood multiple sclerosis patients // J.Neuroimmunol. 1993. - Vol. 43, N 1. - P. 87-96.

151. Warren K.G. Catz I., Jobuson E., Mielke B. Anti-myelin basic protein and anti-proteolipid protein specific forms of multiple sclerosis // J.Neuroimmunol. 1994. - Vol.35, N 3. - P. 280-290.

152. Warren S. and Warren K.G. Epidemiological features of two immunologicaly distinct forms of multiple sclerosis: anti-myelin basic

153. MBP) associated MS vs anti-proteolipid (PLP) associated MS // Neuroimmunology. 1995, Vol. 43, suppl.l. - P.9.

154. Wildbaum G., Youssef S., Grabie N., Karin N. Neutralizing antibodies to IFN-gamma-inducing factor prevent experimental autoimmune encephalomyelitis // J. Immunol. 1998. - Vol.161. - P. 6368.

155. Windhagen A., Anderson D., Carrizosa A. et al IL-12 induces human T-cells secreting IL-10 with IFNy. // J. Immunol. 1996. - Vol. 157. -P. 1127-1131.

156. Windhagen A., Newcombe J., Dangond F. et al. Expression of costimulatory molecules B7-1 (CD80), B7-2 (CD86) and interleukin 12 cytokine in multiple sclerosis lesions // J. ExP. Med. 1995. - Vol. 19. - P. 783-1996.

157. Wood D.D., Bilbao J.M., O'Connors P. Acute multiple sclerosis (Marburg type) is associated with developmentally immatyre myelin basic protein // Ann Neurol. 1996. - Vol.40, N 1. - P. 18-24.

158. Xu X., Fu X.Y., Plate J., Chong A.S. IFN-gamma induced cell growth inhibition by Fas-mediated apoptosis: requirement of STAT1 protein for up-regulation of Fas and Fas-L expression // Cancer Res. 1998. - Vol. 58. - P. 2832-2837.

159. Zhang L., Wang C., Radvanyi L.G., Miller R.G. Early detection of apoptosis in defined lymphocytes popylation in vivo // Blood. 1993. -Vol.81.-P.3091-3096.

160. Zipp F., Weller M., Calabresi P. et al. Differential expression of soluble CD95 in subgroups of patients with multiple sclerosis // Multiple sclerosis: clinical and laboratory research. 1997. - Vol. 2. - P.312.