Разработка иммунодиагностических тест-систем с использованием золотых наночастиц и фаговой библиотеки антител тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.04, кандидат биологических наук Видяшева, Ирина Викторовна

• Видяшева, Ирина Викторовна
• кандидат биологических наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Видяшева, Ирина Викторовна

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. Анализ литературы и постановка задач исследования.

1.1. Структурная организация и основные функции антител.

1.2. Методы получение антител in vivo и in vitro.

1.2.1 Получение поликлональных антител.

1.2.1.1. Адъюванты.

1.2.1.2. Носители.

1.2.1.3. Использование наночастиц золота в качестве носителей антигенов и адъюванта.

1.2.2. Получение моноклональных антител.

1.2.3. Фаговый дисплей на основе нитевидных бактериофагов.

1.2.3.1. Нитевидные фаги.

1.2.3.2. Получение мини-антител с использованием комбинаторных фаговых библиотек.

1.3. Применение антител в исследовательских, аналитических и терапевтических целях.

1.3.1 Использование антител в диагностических целях.

1.3.2. Клиническое применение антител.

1.4. Постановка задач исследования.

Глава 2. Материалы и методы.

2.1. Реактивы и материалы.

2.2. Оборудование.

2.3. Среды, буферные растворы и микроорганизмы, использованные в работе.

2.4. Получение коллоидного золота.

2.5. Получение конъюгатов антигенов с коллоидным золотом.

2.6. Получение перитонеальных макрофагов:.

2.7. Измерение дыхательной активности клеток.

2.8. Иммунизация животных и получение антител.

2.9. Аффинная селекция мини-антител из фаговой библиотеки.

2.10. Световая микроскопия бактерий.

2.11. Электронная микроскопия бактерий.

2.12. Дот-иммуноанализ фаговых антител.

2.13. Получение антифаговых антител.

2.14. Подсчет клеток в камере Горяева.

Глава 3. Результаты и обсуждение собственных исследований.

3.1. Разработка метода идентификации возбудителя туберкулёза с применением антител и коллоидного золота.

3.1.1. Основные современные методы диагностики и дифференциальной диагностики туберкулёза.

3.1.2. Изучение взаимодействия туберкулина и его конъюгатов с клетками иммунной системы.

3.1.3. Применение поликлональных антител и мини-антител для идентификации возбудителя туберкулёза, с использованием световой и электронной микроскопии.

3.2. Изучение иммуностимулирующего действия золотых наночастиц, конъюгированных с вирусом трансмиссивного гастроэнтерита.

3.2.1. Антигенные свойства вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней.

3.2.2. Методы диагностики трансмиссивного гастроэнтерита.

3.2.3. Изучение влияния конъюгатов коллоидного золота с вирусом трансмиссивного гастроэнтерита свиней на дыхательную активность перитонеальных клеток мышей.

3.2.4. Получение поликлональных антител на вирус трансмиссивного гастроэнтерита свиней.

3.3. Биоимиджинг опухолевых клеток с использованием фаговых антител и наночастиц золота.

3.3.1. Современные методы диагностики и лечения опухолей с помощью коллоидных частиц.

3.3.2. Получение мини-антител на клетки СПЭВ и кроличьих антифаговых антител.

3.3.3. Синтез нанооболочек и их конъюгация с антителами.

3.3.4. Биоспецифическое мечение клеток СПЭВ.

3.3.5. Исследование мечения клеток конъюгатами нанооболочек методом дот-анализа.

3.3.6. Темнопольная микроскопия клеток СПЭВ с использованием конъюгатов мини-антител с нанооболочками.

3.4. Получение мини-антител к поверхностным антигенам Агозр1гШит ЬгаэИепБе Эр245 и их использование для детекции микробных клеток.

3.4.1. Краткая характеристика бактерий рода АговртПит.

3.4.2. Использования фагового дисплея антител для получения мини-антител против целых бактериальных клеток.

3.4.3. Получение мини-антител на поверхностные антигены А. ЬгаэНепБе Бр245.

3.4.4. Использование фаговых антител для исследования и детекции бактериальных клеток.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка иммунодиагностических тест-систем с использованием золотых наночастиц и фаговой библиотеки антител»

Последние десятилетия стали периодом интенсивного развития и внедрения иммунодиагностических тест-систем с использованием новых материалов и систем регистрации. Их явные преимущества заключаются не только в высокой чувствительности и специфичности, но и в простоте применения и учета результатов, что существенно расширяет возможности их использования. Иммунодиагностические тест-системы могут быть эффективно применены как для идентификации разнообразных биологических соединений, так и для изучения их физико-химических и биохимических свойств. Традиционно биологическими компонентами, используемыми для специфического связывания при детекции клеток, являются антитела. Получение и выбор подходящих антител - необходимый этап успешного проведения иммуноанализа.

Антитела (АТ) представляют собой сывороточные гликопротеины н глобулиновой фракции и относятся к классу иммуноглобулинов В организме животных АТ вырабатываются в ответ на проникновение антигена (АГ) лимфоцитами и плазматическими клетками лимфатических узлов, селезенки и костного мозга. Способность АТ узнавать и с высокой аффинностью связываться с определенными участками АГ (антигенными детерминантами) даже в сложной смеси соединений сделала АТ ключевыми объектами в широком диапазоне приемов обнаружения антигенов [1].

АТ широко используются в исследовательских, аналитических и терапевтических целях, для определения биологически активных веществ [2], локализация очагов опухолевого роста [3], в онкологии [4], в терапевтических целях для нейтрализации токсинов. С помощью АТ к групповым АГ крови оценивают совместимость крови донора и реципиента. АТ применяют для идентификации возбудителей различных заболеваний и для идентификации АГ в судебно-медицинской практике [2]. АТ находят применение в исследованиях для выделения (иммуноаффинная хроматография) и характеристики биомолекул [3].

Традиционно используются специфические поли- и моноклональные антитела. Однако, применение как поликлональных антител (пАТ), так и моноклональных антител (мАТ) имеет ряд недостатков. В последние десятилетия для повышения специфичности АТ и снижения их себестоимости активно развивают технологию фагового дисплея АТ.

Существуют ситуации, когда иммунизация животных по какой-либо причине невозможна или не удается обойти их толерантность к выбранному АГ. Для разрешения этой проблемы в настоящее время предложены методы молекулярного клонирования фрагментов генов-АТ [4]. Одним из таких методов является техника фагового дисплея АТ. К достоинствам метода фагового дисплея можно отнести возможность отбора клонов-продуцентов мини-антител т уИго, минуя стадию иммунизации животных, возможность получения АТ к аутоантигенам, токсинам и слабоиммуногенным соединениям, отсутствие необходимости использования лабораторных животных и сокращение времени получения индивидуальных клонов до 1014 дней по сравнению с несколькими месяцами в случае гибридомной технологии.

Получение АТ к низкомолекулярным и низкоиммуногенным АГ остается одной из самых актуальных задач современной иммунохимии. Тест-системы на основе АТ являются весьма удобным (зачастую единственным) средством мониторинга в разнообразных объектах таких веществ, как антибиотики, гормоны, витамины, нейромедиаторы, пестициды и др. Кроме того, АТ к отдельным участкам биомакромолекул (гаптенам) являются незаменимым инструментом в исследованиях их структуры и топографии. Традиционно такая задача решается с использованием химического присоединения гаптена к белковому носителю, применением адъювантов и напряженных схем иммунизации животных полученным конъюгатом. Однако при этом образуются АТ как против гаптена, так и против иммунодетерминантных участков носителя. Поэтому весьма актуальным является разработка новых носителей (систем доставки) и адъювантов, включая частицы нанометровых размеров. Данная работа, в частности, посвящена изучению биохимических и иммунологических процессов, происходящих в ответ на применение наноразмерных частиц золота в качестве носителей антигенов. Это связано с тем, что уникальные свойства наноструктурированных объектов создают весьма благоприятную основу для конструирования новых типов лекарственных форм и диагностических систем.

Целью диссертационной работы было усовершенствование и развитие методов получения антител к разнообразным антигенам in vitro путем селекции антител из комбинаторной фаговой библиотеки и in vivo с использованием их конъюгатов с наночастицами золота и изучение механизмов взаимодействия полученных конъюгатов с фагоцитирующими клетками иммунной системы с последующим конструированием на этой основе диагностических тест-систем.

В ходе реализации данной цели были получены результаты, научная новизна которых заключается в следующем:

- впервые получены поликлональные антитела на туберкулин и вирус трансмиссивного гастроэнтерита свиней с использованием в качестве носителя наночастиц золота;

- изучено влияния коллоидного золота и его конъюгатов с вирусом трансмиссивного гастроэнтерита и туберкулином на дыхательную активность перитонеальных клеток мышей;

- впервые получены мини-антитела на целые клетки Azospirillum brasilense Sp245 с использованием овечьей фаговой библиотеки;

- разработаны методики для экспресс-диагностики возбудителя туберкулёза, биоимиджинга опухолевых клеток и детекции А. brasilense Sp245.

Практическая значимость работы определяется усовершенствованием технологии получения АТ к низкоиммуногенным АГ с использованием адыовантных свойств наночастиц КЗ, получением экспериментальных свидетельств эффективности применения конъюгатов золотых наночастиц при вакцинации животных; разработкой иммунологических тест- систем для обнаружения, идентификации и изучения микроорганизмов, количественного биоимиджинга опухолевых клеток.

На защиту выносятся следующие основные положения:

1. Использование коллоидного золота в качестве носителя антигенов и адъюванта обеспечивает получение in vivo поликлональных антител против туберкулина и вируса трансмиссивного гастроэнтерита; полученные антитела могут быть использованы в диагностических целях.

2. Взаимодействие функционализованных золотых наночастиц с клетками ретикулоэндотелиальной системы приводит к их проникновению в.фагоцитирующие клетки, вызывает стимулирование ' дыхательной активности макрофагов и усиливает выработку цитокинов.

3. Полученные при помощи фаговой библиотеки мини-антитела к растворимым (туберкулин) и корпускулярным (СПЭВ, A. brasilense) антигенам обладают высокой специфичностью и чувствительностью и могут быть использованы для создания иммунологических тест-систем.

Работа выполнена в лаборатории иммунохимии ИБФРМ РАН по планам НИР в рамках следующих бюджетных тем: «Комплексный иммунохимический анализ антигенных структур, определяющих ассоциативные взаимодействия микроорганизмов с растениями» (№ гос. регистрации 01200606177, научный руководитель - д.х.н. проф. С.Ю. Щеголев) и «Комплексный иммунохимический анализ эктосимбиотических растительно-микробных систем» (№ гос. регистрации 01200904388, научный руководитель - д.х.н. проф. С.Ю. Щеголев).

Частично данная работа получила финансовую поддержку Российского фонда фундаментальных исследований (гранты №№ 07-04-00301-а и 09-02-12442-офим) и программы фундаментальных исследований Президиума РАН «Фундаментальные науки - медицине».

Личный вклад диссертанта и результаты, полученные совместно с другими исследователями:

Экспериментальные результаты, представленные в диссертации, получены лично автором в сотрудничестве, главным образом, с д.б.н. С.А. Староверовым. На защиту вынесены только те положения и результаты экспериментов, в получении которых роль автора была определяющей.

Эксперименты по оценке эффективности мечения клеток конъюгатами наночастиц золота были выполнены совместно с к.ф.-м.н. В.А. Ханадеевым. Эксперименты по изучение поверхностных структур азоспирилл - совместно с д.б.н. О.И. Гулий. Препараты флагеллина и липополисахарида» азоспирилл были получены и любезно предоставлены к.б.н. Г.Л. Бурыгиным.

Апробация результатов

Основные результаты диссертации представлялись автором на следующих научных конференциях: Int. School' for Junior Scientists and Students on Optics, Laser Physics and Biophysics (Saratov, Russia, Sept. 23-26, 2008, Sept. 21-24, 2009); 5-й Московский межд. конгр. "Биотехнология: состояние и перспективы развития" (Москва, Россия, 16-20 марта 2009); межд. конф., посвященная 80-летию Самарской НИВС Россельхозакадемии "Актуальные проблемы ветеринарной науки в агропромышленном комплексе" (Самара, Россия, 16-17 сент. 2009); 2-я всеросс. научн. конф. с межд. участием "Нанотехнологии в онкологии 2009" (Москва, Россия, 9-10 окт. 2009); межд. раб. совещ. "Инновационные подходы в профилактике, диагностике и лечении зооантропонозных и метаболических болезней животных и человека в Саратовской области" (Саратов, Россия, 16-17 пояб. 2009); межд. научн.-практ. конф. "Вавиловские чтения - 2009" (Саратов, Россия, 25-26 нояб. 2009); 14-я Пущинская межд. школа-конф. молодых ученых: "Биология — наука XXI века" (Пущино, Россия, 19-23 апр. 2010); межд. научн. конф. "Биотехнология начала III тысячелетия" (Саранск, Россия, 26-28 мая 2010); научн.-практ. конф. "Инновации РАН - 2010" (Казань, Россия, 1-4 июня 2010); XII Intern. Conf. on Laser Applications in Life Sciences (Oulu, Finland, June 9-11 2010); V всеросс. конф. молодых ученых "Стратегия взаимодействия микроорганизмов и растений с окружающей средой" (Саратов, Россия, 28 сент. — 1 окг. 2010).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 18 печатных работ, в том числе 6 статей, три из которых - в рецензируемых журналах из списка ВАК.

Структура и объём работы. Диссертация состоит из введения, основной части, содержащей 3 главы, заключения и списка использованных литературных источников (275 наименований). Работа изложена на 159 страницах, иллюстрирована 42 рисунками и включает 2 таблицы.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Видяшева, Ирина Викторовна

На основании полученных данных мы предложили варианты иммунологических тест-систем для детекции и изучения микроорганизмов. В рамках работы были получены данные о возможности применения конъюгатов золотых наночастиц при вакцинации животных. Результаты, полученные в данной работе, могут найти применение в таких областях, как иммуноанализ, ветеринария, фототермальная терапия и биоимиджинг. На основании данных исследований можно сделать следующие ВЫВОДЫ:

1. Установлено, что использование частиц коллоидного золота в качестве носителя для туберкулина и ТГС при иммунизации животных приводит к получению эффективного иммунного ответа за счет проявления адъювантных свойств самих золотых наночастиц.

2. Обнаружено, что при взаимодействии с клетками ретикулоэндотелиальной системы туберкулин, конъюгированный с золотыми наночастицами, проникает в перитонеальные клетки и усиливают их митохондриальное дыхание.

3. Введение комплекса наночастиц золота с вирусом ТГС в организм подопытного животного увеличивает титр антител, полученных к вводимому антигену, а также усиливает выработку интерферона.

4. Впервые полученные мини-антитела на туберкулин, целые клетки А. brasílense Sp245 и клетки линии СПЭВ, показали высокую чувствительность и специфичность в микроскопических и твердофазных методах иммуноанализа.

5. На основе антител из фаговой библиотеки и иммунозолотых маркеров разработаны иммунологические тест-системы для диагностики возбудителя туберкулёза, биоимиджинга опухолевых клеток и детекции A. brasilense Sp245.

БЛАГОДАРНОСТИ

Считаю приятным долгом выразить глубокую признательность директору ИБФРМ РАН заведующему лабораторией иммунохимии д.х.н профессору Сергею Юрьевичу Щёголеву и научному руководителю д.б.н. Льву Абрамовичу Дыкману за постоянную помощь и полезные советы при выполнении и оформлении диссертации.

Я хочу выразить свою искреннюю благодарность сотрудникам Лаборатории иммунохимии и Лаборатории нанобиотехнлогии ИБФРМ РАН - д.б.н. Староверову С.А., д.б.н. Богатыреву В.А., д.ф.-.м.н. Хлебцову Н.Г., к.ф.-.м.н. Хлебцову Б.Н., к.б.н. Бурыгину Г.Л., к.ф.-м.н. Мельникову А.Г., к.ф.-м.н. Ханадееву В.А. и сотрудникам других лабораторий ИБФРМ д.б.н. Соколову О.И., д.б.н. Игнатову О.В., д.б.н. Гулий О.И., к.б.н. Соколовой М.К., к.х.н. Бурову A.M. за содействие и поддержку при выполнении и оформлении данной работы.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ И ВЫВОДЫ

Из данных литературного обзора и оригинальных исследований можно сделать вывод о широких перспективах применения пАТ, полученных с помощью КЗ и мини-АТ из фаговой библиотеки. В данной работе мы попытались подробно рассмотреть и усовершенствовать данные технологии получения АТ, а также сравнить их по чувствительности и специфичности. Были также проведены исследования посвященные взаимодействию КЗ и конъюгатов АГ - КЗ с иммунной системой организма.

В результате проведенных исследований хочется отметить, что КЗ за счет проникновения во внутриклеточное пространство частично снимает токсический эффект, оказываемый туберкулином на перитонеальные макрофаги крыс. Это способствует более активному развитию гуморальной • реакции и выработке АТ на туберкулин. Поэтому КЗ, можно использовать как носитель для получения АТ на вещества, обладающие токсическим, -эффектом.

Использование мини-АТ и пАТ позволяет обнаружить клетки микобактерий при световой микроскопии как полиморфные палочки, • окрашенные в красный цвет, что в дальнейшем может позволить обнаруживать микобактерии в различных объектах окружающей среды и быть хорошим дополнением к имеющимся уже методам окраски. Кроме того, используя специфические АТ, данным методом можно в дальнейшем проводить дифференциальную диагностику микобактерий.

Конъюгаты КЗ с вирусом ТГС обладают более высокой иммуномодулирующей активностью по сравнению с неконъюгированным вирусом. По-видимому, иммуностимулирующее действие данного комплекса связано с активацией фагоцитирующих клеток, что приводит к улучшению презентации антигена антителообразующим клеткам. Наиболее интересным аспектом проявления антигенами иммуногенных свойств при их иммобилизации на золотых наночастицах является то, что наночастицы. золота выступают и в роли адъюванта, и в роли носителя, т.е. представляют гаптен Т-клеткам. Было обнаружено влияние наночастиц золота, конъюгированных с антигеном, на активацию Т-клеток. Этот факт показывает принципиальную возможность целенаправленно активировать Т-клетки, с последующей активацией макрофагов и • уничтожением возбудителя. Результаты, представленные в настоящем исследовании, возможно, послужат основой для создания антивирусных вакцин с использованием в качестве носителя антигена и адъюванта золотых наночастиц.

Одним из этапов работы стало получение мини-АТ на поверхностные структуры клеток СПЭВ, получение конъюгатов мини-АТ с коллоидным золотом, и применение данных нанокомплексов для мечения опухолевых клеток. На основе полученных нами нанокомплексов был разработан и программно реализован простой алгоритм обработки темнопольных фотографий животных клеток, меченых конъюгатами золотых НО; на основе программы анализа изображений 1та§е1 Метод позволяет количественно' оценить эффективность мечения и вычислить параметр эффективности-мечения.

Часть работы была посвящена получению рекомбинаторных фаговых АТ на антигены клеточной стенки типового штамма А. ЬгазИете Бр245 и возможности их применения для изучения поверхностных антигенов клеточных структур и детекции клеток с помощью микроскопии и метода электрооптического анализа клеточных суспензий. В результате проведённых исследований было установлено, что на основе мини-АТ и КЗ можно разработать эффективный инструмент для изучения клеточной поверхности бактерий.

При взаимодействии клеток А. ЪгазИете Бр245 с мини-АТ на ЛПС и с мини-АТ на флагеллин, установлено, что происходит значительное изменение величины ЭО-сигнала. Мы полагаем, что полученные результаты могут быть использованы для создания быстрого теста детекции микробных клеток и оценки экспонированноети тех или иных антигенных детерминант в составе клеточной поверхности бактерий. Кроме того, по аналогичной методике нами были получены мини-АТ на штаммы-деструкторы глифосфата: Acinetobacter Sp К7 и Agrobacterium Sp КЗ, использованные для идентификации и мониторинга численности этих бактерий в лабораторных и полевых условиях.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Видяшева, Ирина Викторовна, 2011 год

1. Ройт А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология. М.: Мир, 2000. - 592 с.

2. Галактионов В.Г. Иммунология. М.: Академия, 2004.-528 с.

3. Биотехнология: учеб. пособие для вузов в 8 кн. / под ред. Егорова Н.С., Самуилова В.Д. Кн. 1: Егоров Н.С, Олескин А.В., Самуилов В.Д. Проблемы и перспективы. М.: Высш. шк., 1987. - 159 с.

4. Биотехнология: учеб. пособие для вузов в 8 кн. / под ред. Егорова Н.С., Самуилова В.Д. Кн. 3: Бутенко Р.Г., Гусев М.В., Киркин А.Ф. Клеточная инженерия. М.: Высш. шк., 1987. - 127 с.

5. Овчинников Ю.А. Биоорганическая химия. М.: Просвещение, 1987. - 815 с.

6. Петров Р.В. Иммунология. М.: Медицина, 1982. - 368 с.

7. Иммунологические методы / под ред. Фримеля Г. М.: Мир, 1987. - 472 с.

8. Антитела. Методы / под ред. Кэтти Д. М.: Мир, 1991. - 287 с.

9. Воробьев А.А., Васильев Н.Н. Адъюванты. М.: Медицина, 1969. - 206 с.

10. Stewart-Tull D.E.S. Freund-type mineral oil adjuvant emulsions // In: The Theory and Practical Application of Adjuvants / Ed. Stewart-Tull D.E.S. N-Y.: Wiley, 1995.-P. 1-19. ,

11. Freund J. The effect of paraffin oil and mycobacteria on antibody formation and sensitization: A review // Am. J. Clin. Pathol. 1951. - V. 21. - P. 645-656.

12. Freund J., Casals J., Hosmer E.P. Sensitization and antibody formation after injection of tubercle bacilli and paraffin oil // Proc. Soc. Exp. Biol. 1937. - V. 37. -P. 509-513.

13. Herbert W.J. Mineral-oil adjuvants and the immunization of laboratory animals // In: Handbook of Experimental Immunology / Ed. Weir D.M. Oxford: Blackwell Scientific Publications, 1978. - P. A3.l-A3.15.

14. Moncada C., Torres V., Israel Y. Simple method for the preparation of antigen emulsions for immunization // J. Immunol. Meth. 1993. - V. 162. - P. 133-140.

15. Altman A., Dixon F.J. Immunomodifiers in vaccines // Adv. Vet. Sci. Comp. Med. 1989. - V. 33. - P. 301-343.

16. Rudbach J.A., Johnson D.A., Ulrich J.T. Ribi adjuvants: Chemistry, biology and utility in vaccines for human and veterinary medicine // In: The Theory and Practical Application of Adjuvants / Ed. Stewart-Tull D.E.S.-N-Y.: Wiley, 1995. -P. 287-313.

17. Johnson A.G. Molecular adjuvants and immunomodulators: New approaches to immunization // Clin. Microbiol. Rev. 1994. - V. 7. - P. 277-289.

18. Morrison D.C. Diversity of mammalian macromolecules which bind to^ bacterial lipopolysaccharides // In Cellular and Molecular Aspects of Endotoxin Reactions / Eds. Nowotny A., Spitzer J.J., Ziegler E.J.-Amsterdam: Elsevier, 1990: -P. 183-189.

19. Unanue E.R., Allen P.M. The basis for the immunoregulatory role- of macrophages and other accessory cells // Science. 1987. - V. 236. - P. 551-557.

20. Warren H.S., Vogel F.R., Chedid L.A. Current status of immunological adjuvants // Ann. Rev. Immunol. 1986.,- V. 4. - P. 369-388.

21. Nicklas W. Aluminum salts // Res. Immunol. 1992. - V. 143. - P. 489-493.

22. Brewer J.M., Conacher M., Hunter C.A., Mohrs M., Brombacher F., Alexander J. Aluminum hydroxide adjuvant initiates strong antigen-specific Th2 responses in the absence of IL-4 or IL-13-mediated signaling // J. Immunol. 1999. - V. 163. -P. 6448-6454.

23. Cooper P.D., McComb C., Steele E.J. The adjuvanticity of Algammulin, a new vaccine adjuvant// Vaccine. 1991. - V. 9. - P. 408-415.

24. Leibl H., Tomasits R., Bruhl P., Kerschbaum A., Eibl M.M., Mannhalter J.W. Humoral and cellular immunity induced by antigens adjuvanted with colloidal iron hydroxide // Vaccine. 1999. - V. 17. - P. 1017-1023.

25. Староверов С.А., Семенов С.В., Сидоркин В.А. Влияние поверхностно активных веществ и витаминов на формирование иммунного ответа // Ветеринария. 2003. - № 4. - С. 38-40.

26. Староверов С.А., Семенов С.В., Сидоркин В.А. Адъювантные свойства воднодисперсных растворов неионогенных поверхностно активных веществ и витаминов // Ветеринария. 2003. - № 10. - С. 30-31.

27. Del G.G. New carriers and adjuvants in the development of vaccines // Curr. Opin. Immunol. 1992. - V. 4. - P. 454-459.

28. Nesmeyanov V.A., Golovina T.V., Valyakina T.I., Andronova T.M., Ivanov V.T. Cellular and molecular mechanisms of biological activity of muramyl peptides // In Immunotherapy of Infections / Ed. Masihi N.-N-Y.: Marcel Dekker, 1994. P. 213"223.

29. Arnon R., Levi R. Synthetic recombinant vaccine induces anti-influenza long-term immunity and cross-strain protection // In: Novel Strategies in Design and Production of Vaccines / Eds. Cohen S., Shafferman A.-N-Y.: Plenum Press, 1996.- P. 23-29.

30. Ковалев И.Е., Полевая О.Ю. Биохимические основы иммунитета к низкомолекулярным химическим соединениям. М.: Наука, 1985. - 304 с.

31. Иванов В.Т., Вольпина О.М., Андронова Т.М. Пептидные антигены и адъюванты в синтетических вакцинах // Ж. Всес. хим. о-ва им. Д.И. Менделеева. 1988. - Т. 33. - С. 523-530.

32. Arnon R., Horwitz R.J. Synthetic peptides as vaccines // Curr. Opin. Immunol.- 1992.-V. 4.-P. 449-453.

33. Ben-Yedidia Т., Arnon R. Design of peptide and polypeptide vaccines // Curr. Opin. Biotechnol. 1997. - V. 8. - P. 442-448.

34. Harris W.J., Cunniugham С. Antibody therapeutics. Berlin: Springer-Verlag, 1995.- 150 p.

35. Marco M.-P., Gee S., Hammock B.D. Immunochemical techniques for enviromental analysis // Trends in Anal. Chem. 1995. - V. 14. - P. 415-425.

36. Bangham A.D., Standish M.M., Watkins J.S. Diffusion of univalent ions across the lamellae of swollen phospholipid // J. Mol. Biol. 1965. - V.13. - P. 238-252.

37. Papahajopoulos D., Kimelberg H.K. Phospholipid vesicles (liposomes) as models for biological membranes // Progr. Surface Sci. 1973. - V. 4. - P. 141-232.

38. Das P.K., Ghosh P., Bachhawat B.K., Das M.K. Liposomes as earner for production of sugar specific antibodies: Preparation of antigalactosyl antiserum // Immunol. Commun. 1982. - V. 11. - P. 17-24.

39. Марголис Л.Б., Бергельсон Л.Д. Липосомы и их взаимодействие с клетками. М.: Наука, 1984. - 240 с.

40. Liposomes, a practical approach / Ed. New R.R.C. Oxford: IRL Press, 1992.390 p. /

41. Ефременко В.И. Липосомы (получение, свойства, аспекты применения в биологии и медицине). Ставрополь: НИПЧИ, 1999. - 236 с.

42. Allison А.С., Gregoriadis G. Liposomes as immunological adjuvants // Recent Results Cancer Res. 1976. - V. 56. - P. 58-64.

43. Foldvari M., Moreland A. Clinical observations with topical liposome-encapsulated interferon alpha for the treatment of genital papillomavirus infections // J. Liposome Res. 1997. - V. 7. - P. 155-126.

44. Cordeiro C, Wiseman D.J. Antibacterial Efficacy of gentamicin encapsulated in pH-sensitive liposom against an in vivo Salmonella enterica serovar Typhimurium intracellular infection model // Antimicrob. Agents Chemother. -2000.-V. 44.-P. 533-539.

45. Beaulac C., Sachetelli S., Lagace J. In vitro bactericidal efficacy of sub-MIC concentrations of liposome- encapsulated antibiotic against Gram-negative and Gram-positive bacteria // J. Antimicrob. Chemother. 1998. - V. 41. - P. 35-41.

46. Schiffelers R., Storm G. Liposome-encapsulated aminoglycosides in preclinical and clinical studies // J. Antimicrob. Chemother. 2001. - V. 48. - P. 333344.

47. Торчилин В.П., Клибанов A.JI. Липосомы как средства направленного транспорта лекарств // Журнал Всесоюзного химического общества им. Д.И.Менделеева. 1987. - Т 32. - С. 502-513.

48. Sanchex Y., Ionescu-Matiu I., Dreesman G. R. Humoral and cellular immunity to hepatitis В virus-derived antigens: Comparative activity of Freund's complete adjuvant, alum and liposomes // Infect. Immun. 1980. - V. 30. - P. 728-733.

49. Desiderio J.V., Campbell S.G. Immunization against experimental murine salmonellosis with liposome-associated O-antigen // Infect. Immun. 1985. - V. 48.-P. 658-663.

50. Eldridge J.H., Staas J.K., Meulbroek J.A., McGhee J.R., Tice T.R., Gilley R.M. Biodegradable microspheres as a vaccine delivery system // Mol. Immunol. 1991. - V. 28. - P. 287-294.

51. Khlebtsov B.N., Kovler L.A., Bogatyrev V.A., Khlebtsov N.G., Shchyogolev S.Yu. Studies of phospatidilcholine vesicles by spectroturbidimetry and dynamic light scattering methods // J. Quant. Spectr. Radiat. Transfer. 2003. - V. 79 - 80. -P. 829-838.

52. Shiosaka S., Kiyama H., Wanaka A., Tohyama M. A new method for produsing a specific and high titer antibody against glutamate using colloidal gold as a carrier// Brain Research. 1986. - V. 382. - P. 399-403.

53. Shiosaka S., Kohno J., Kiyama H., Tohyama M., Shiotani Y. Antibody specific to low-molecular weight substance and method of producing the same by using colloidal gold metal as carrier // European Patent № 0232717, 1987.

54. Ottersen O.P., Storm-Mathisen J. Localization of amino acid neurotransmitters by immunocytochemistry // Trends in Neurosci. 1987. - V. 10. - P. 250-255.

55. Tomii A., Masugi F. Production of anti-platelet-activating factor antibodies by the use of colloidal gold as earner // Jpn. J. Med. Sci. Biol. 1991. - V. 44. - P. 7580.

56. Tatsumi N, Terano Y, Hashimoto K, Hiyoshi M, Matsuura S. An anti-platelet activating factor antibody and its effects on platelet aggregation // Osaka City Med. J. 1993.-V. 39.-P. 167-174.

57. Moffett J.R., Espey M.G., Namboodiri M.A.A. Antibodies to quinolinic acid and the determination of its cellular-distribution within the rat immune-system // Cell and Tissue Res. 1994. - V. 278. - P. 461-469.

58. Chen J., Zou F., Wang N., Xie S., Zhang X. Production and application of LP A polyclonal antibody // Bioorg. Med: Chem. Lett. 2000. - V. 10. - P. 1691-1693.

59. Оленина JI.B., Колесанова Е.Ф., Гервазиев Ю.В., Зайцева И.С., Кураева Т.Е., Соболев Б.Н., Арчаков А.И. Получение антипептидных антител к участкам связывания белка Е2 вируса гепатита С с CD81 // Мед. иммунол.2001. Т. 3.-С. 231.

60. Загоскина Т.Ю. Теоретические и прикладные аспекты конструирования твердофазных иммунохимических тест-систем для диагностики бруцеллеза // Дис. докт. мед. наук. Владивосток, 2003.

61. Pow D.V., Crook D.K. Extremely high titre polyclonal antisera against small neurotransmitter molecules: Rapid production, characterisation and use in light and electron-microscopic immunocytochemistry // J. Neurosci. Meth. 1993. - V. 48. -P. 51-63.

62. Baude A., Nusser Z., Molnar E., Mcllhinney R.A.J., Somogyi P. Highresolution immunogold localization of AMPA type glutamate receptor subunits atsynaptic and non-synaptic sites in rat hippocampus // Neurosci. 1995. - V. 69. - P. 1031-1055.

63. Pickard L., Noel J., Henley J.M., Collingridge G.L., Molnar E. Developmental changes in synaptic AMPA and NMDA receptor distribution and AMPA receptor subunit composition in living hippocampal neurons // J. Neurosci. 2000. - V. 20. -P. 7922-7931.

64. Schell M.J., Molliver M.E., Snyder S.H. D-serine, an endogenous synaptic modulator: Localization to astrocytes and glutamate-stimulated release // PNAS. -1995.-V. 92. P. 3948-3952.

65. Schell M.J., Cooper O.B., Snyder S.H. D-aspartate localizations imply neuronal and neuroendocrine roles // PNAS. 1997. - V. 94. - P. 2013-2018.

66. Eliasson M.J.L., Blackshaw S., Schell M.J., Snyder S.IT. Neuronal nitric oxide synthase alternatively spliced forms: Prominent functional localizations in the brain//PNAS. 1997. -V. 94. - P. 3396-3401.

67. Staimer N., Gee S.J., Hammock B.D. Development of a sensitive enzyme immunoassay for the detection of phenil-ß-D-thioglucoronide in human urine // Fresenius J. Anal. Chem. 2001. - V. 369. - P. 273-279.

68. Деменев B.A., Щинова M.A., Иванов Л.И., Воробьева Р.Н., Здановская Н.И., Небайкина Н.В. Совершенствование методических подходов к конструированию вакцины против клещевого энцефалита // Вопросы вирусологии. 1996. - Т. 41. - С. 107-110.

69. Деменев В.А., Щинова М.А., Иванов Л.И., Воробьева Р.Н., Здановская Н.И., Небайкина Н.В. Способ получения вакцины против клещевого энцефалита на основе растворимого антигена // Патент РФ № 94016771/13, 1997.

70. Kayed R., Head E., Thompson J.L., Mclntire T.M., Milton S.C., Cotman C.W., Glabe C.G. Common structure of soluble amyloid oligomers implies common mechanism of pathogenesis // Science. 2003. - V. 300. - P. 486-489.

71. Kowalczyk D.W., Ertl H.C.J. Immune responses to DNA vaccines // Cell. Mol. Life Sci. 1999.-V. 55.-P. 751-770.

72. Hasan U.A., Abai A.M., Harper D.R., Wren B.W., Morrow W.J.W. Nucleic acid immunization: Concepts and techniques associated with third, generation vaccines // J. Immunol. Meth. 1999. - V. 229. - P. 1-22.

73. Зеленин A.B. Генная терапия на границе третьего тысячелетия // Вестник РАН. 2001. - Т. 71. - С. 387-395.

74. Liu М.А., Hillerman M.R., Kurth R. DNA vaccines: A new era in vaccinology // Ann. N-Y. Acad. Sci. 1995. - V. 772. - P. 1-294.

75. Gurunathan S., Klinman D.M., Seder R.A. DNA vaccines: Immunology, application, and optimization // Annu. Rev. Immunol. 2000. - V. 18. - P. 927-974.

76. Cui Z., Mumper R.J. The effect of co-administration of adjuvants with a nanoparticle-based genetic vaccine delivery system on the resulting immune responses // Eur. J. Pharm. Biopharm. 2003. - V. 5. - P. 11-18.

77. Chen D., Payne L.G. Targeting epidermal Langerhans cells by epidermal powder immunization // Cell Res. 2002. - V. 12. - P. 97-104.

78. Chen D., Zuleger C., Chu Q., Maa Y.F., Osorio J., Payne L.G. Epidermal powder immunization with a recombinant HIV gpl20 targets Langerhans cells and induces enhanced immune responses // AIDS Res. Hum. Retroviruses. 2002. - V. 18.-P. 715-722.

79. Dean H.J., Fuller D., Osorio J.E. Powder and particle-mediated approachas for delivery of DNA and protein vaccines into the epidermis // Сотр. Immun. Microbiol. Infect. Dis. 2003. - V. 26. - P. 373-388.

80. Thomas M., Klibanov A.M. Conjugation to gold nanoparticles enhances polyethylenimine's transfer of plasmid DNA into mammalian cells // PNAS. -2003.-V. 100.-P. 9138-9143.

81. Дыкман JI.A., Сумарока M.B., Староверов С.А., Зайцева И.С., Богатырев-В.А. Иммуногенные свойства коллоидного золота // Известия АН, Сер. биол. -2004.-Т. 31.-С. 86-91.

82. Kohler G., Milstein C. Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predetermined specificity // Nature. 1975. - V. 256. - P. 495-497.

83. Calfre G., Milstein C. Preparation of monoclonal antibodies, strategies and procedures // Meth. Enzymol. 1981.- V. 73. - P. 3-45.

84. Кеннет Р.Г., Мак-Керн Т.Д., Бехтол К.Б. Моноклональные антитела: Гибридомы: Новый уровень биологического анализа. М.: Медицина, 1983. -416 с.

85. Coding J.L. Antibody production by hybrydomas // J. Immunol. Meth. 1980. -V. 39.-P. 285-308.

86. McCafferty J., Griffiths A.D., Winter G., Chiswell DJ. Phage antibodies: Filamentous phage displaying antibody variable domains // Nature. 1990. - V. 348.-P. 552-554.

87. Smith G.P. Filamentous phage fusion: Novel expression vectors that display cloned antigens on the surface of the viron // Science. 1985. - V. 228. - P. 13151317.

88. Щелкунов C.H. Генетическая инженерия. Учеб. пособие: В 2 ч. Новосибирск: Изд-во Новосиб. ун-та, 1994 1997.

89. Лурия С., Дарнелл Дж., Балтимор Д., Кэмпбелл Э. Общая вирусология. М.: Мир, 1981.680 с.

90. Amersdorfer P., Marks J.D. Phage libraries for generation of anti- botulinum scFv antibodies //Meth. Mol. Biol. 1999. - V. 145. - P. 219-240.

91. Winter G., Griffiths A.D., Hawkins R.E., Hoogenboom H.R. Making antibodies by phage display technique // Ann. Rev. Immunol. 1994. - V. 12. - P. 433-455.

92. Smith G.P., Petrenko V.A. Phage display // Chem. Rev. 1997. - V. 97. - P. 391-410.

93. Willats W.G.T. Phage display: Practicalities and prospects // Plant Mol. Biol. -2002.-V. 50.-P. 837-854.

94. Yau K.Y.F., Lee H., Hall J.C. Emerging trends in the synthesis and improvement of hapten-specific recombinant antibodies // Biotechnol. Adv. 2003. -V. 21.-P. 599-637.

95. Molloy P.E., Harris W.J., Strachan G., Watts C., Cunniugham C. Production of soluble single-chain T-cell receptor fragments in Escherichia coli trxB mutants //J. Mol. Immunol. 1998. - V. 35. - P. 73-81.

96. Yu B., Ni M., Li W.H., Lei P., Xing W., Xiao D.W., Huang Y., Tang Z.J., Zhu H.F., Shen G.X. Human scFv antibody fragments specific for hepatocellular carcinoma selected from a phage display library // World J Gastroenterol. 2005. -V. 11.-P. 3985-3989.

97. Krag D.N., Shukla G.S., Shen G.P., Pero S., Ashikaga T., Fuller S., Weaver D.L., Burdette-Radoux S., Thomas C. Selection of tumor-binding ligands in cancer patients with phage display libraries // Cancer Res. 2006. - V. 66. - P. 7724-7733.

98. Smith A., Hudson R., Malatesti N., Savoie H., Boyle R.W., Greenman J. Development and characterization of novel photosensitizer: scFv conjugates for use in photodynamic therapy of cancer // Immunology. 2007. - V. 120. - P. 512517.

99. Garen A., Cai X. Anti-melanoma antibodies from melanoma patients immunized with genetically modified autologous tumor cells: Selection of specific antibodies from single-chain Fv fusion phage libraries // Med. Sci. 1995. - V. 92. -P. 6537-6541.

100. Sergeeva A., Kolonin M.G., Molldrem J.J., Pasqualini R., Arap W. Display technologies: application for the discovery of drug and gene delivery agents // Adv. Drug Deliv. Rev. 2006. - V. 58. - P. 1622-1654.

101. Liu В., Marks J.D. Applying phage antibodies to proteomics: Selecting single chain Fv antibodies to antigens blotted on nitrocellulose // Anal. Biochem. 2000. -V. 286.-P. 119-128.

102. Stich N., Gandhum A., Matyushin V., Raats J., Mayer C., Alguel Y., Schalkhammer T. Phage display antibody-based proteomic device using resonanace-enhanced detection // J. Nanosci. Nanotechnol. 2002. - V. 2. - P. 375381.

103. Coons A.H., Creech H.J., Jones R.N. Immunological properties of an antibody containing a fluorescent group // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1941. - V. 47. - P. 200-202.

104. Coons A.H., Kaplan M.H. Localisation of antigen in tissue cells // J. Exp. Med. 1950. -V. 91. - P. 1-13.

105. Barnard G.J.R., Collins W.P. The development of luminescence immunoassays // Med. Lab. Sci. 1987. - V. 44. - P. 249-256.

106. Yalow R.S., Berson S.A. Assay of plasma insulin in human subjects by immunological methods //Nature. 1959. - V. 184. - P. 1648-1649.

107. Nakane Р.К., Priece C.B.J. Enzyme-labelled antibodies: Preparation and application for the localization of antigens // J. Histochem. Cytochem. 1966. - V. 14.-P. 929-931.

108. Engvall E., Perlmann P. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA): Quantitative assay of immunoglobulin G // J. Immunochem. 1971. - V. 8. - P. 871-874.

109. Van Weemen B.K., Schuurs A.H.W.M. Immunoassay using antigen-enzyme conjugate//FEBS Lett. 1971. - V. 15. - P. 232-236.

110. Егоров A.M., Осипов А.П., Дзантиев Б.Б., Гаврилова E.M. Теория и практика иммуноферментного анализа. М.: Высш. шк., 1991. - 288 с.

111. Лефковитс И., Пернис Б. Иммунология. Методы исследований. М.: Мир, 1983.-349 с.

112. Waldmann Т. Monoclonal antibodies in diagnosis and therapy // Science. -1991.-V. 252,-P. 1657-1662.

113. Дыкман Л.А., Богатырев B.A., Щёголев С.Ю., Хлебцов Н.Г. Золотые наночастицы: синтез, свойства, биомедицинское применение. М: Наука, 2008.- 319 с.

114. Oldham R.K. Monoclonal antibodies in cancer therapy // J. Clin. Oncol. -1983.-V. 1.-P. 582-590.

115. Nadler L., Stashenko P, Hardy R, Kaplan W.D., Button L.N., Kufe D.W., Antman K.H., Schlossman S.F. Serotherapy of a patient with a monoclonal antibody directed against a human lymphoma-associated antigen // Cancer Res. -1980: V. 40. - P. 3147-3154.

116. Rosenberg S., Terry W. Passive immunotherapy of cancer in animals and man // Adv Cancer Res. 1977. - V. 25. - P. 323-388.

117. Ritz J, Schlossman S. Utilization of monoclonal antibodies in treatment of leukemia and lymphoma // Blood. 1982. - V. 59. - P. 1-11.

118. Dillman R., Shawler D., Sobol R., Collins H.A., Beauregard J.C., Wormsley S.B., Royston I. Murine monoclonal antibody therapy in two patients with chronic lymphocytic leukemia // Blood. 1982. - V. 59. - P. 1036-1045.

119. Dillman D. Monoclonal antibodies for treating cancer // Ann. Intern. Med. -1989.-V. 111.-P. 592-603.

120. Dillman R. Antibodies as cytotoxic therapy // J. Clin. Oncol. 1994. - V. 12. -P. 1497-1515.

121. Giles F., Estey E., O'Brien S. Gemtuzumab ozogamicin in the treatment of acute myeloid leukemia // Cancer. 2003. - V. 98. - P. 2095-2104.

122. Carter P. Improving the efficacy of antibody-based cancer therapies // Nat. Rev. Cancer.-2001.-V. l.-P. 118-129.

123. Stern M., Herrmann R. Overview of monoclonal antibodies in cancer therapy: present and promise // Crit. Rev. Oncol. Hematol. 2005. - V. 54. - P. 11-29.

124. Hamilton A., Piccart M. The contribution of molecular markers to the prediction of response in the treatment of brest cancer: a review of the literature on Her-2, p53 and Bcl-2 // Ann. Oncol. 2000. - V. 11. - P. 647-663.

125. Насонов E.JI. Применение инфликсимаба (моноклональные антитела к фактору некроза опухоли) в ревматологии: новые данные // РМЖ. 2004. - Т. 12.-С. 1123-1127.

126. Насонов E.JI. Новые направления терапии ревматоидного артрита: перспективы применения моноклональных антител к В-лимфоцитам (ритуксимаб) // РМЖ. 2006. - Т. 14. - С. 1778-1782.

127. Соловьев С.К., Котовекая М.А., Насонов E.JI. Ритуксимаб в лечении системной красной волчанки //РМЖ. 2005. - Т. 13. - С. 1731-1735.

128. Кочергин Н.Г., Кондратов Г.В., Румянцева Е.Е. Опыт применения инфликсимаба при псориазе // Тезисы, научных трудов I Российского конгресса дерматовенерологов, Санкт-Петербург, 2003. С. 54-55.

129. Nestle F.O., Kaplan D.H., Barker J. Mechanisms of disease: psoriasis // N. Engl. J. Med. 2009. - V. 361. - P. 496-509.

130. Деев C.M., Лебеденко E.H: Современные технологии создания неприродных антител для клинического применения // Acta naturae. 2009. -№1.- С. 32-49.

131. Miller R., Maloney D., Warnke R, Levy R. Treatment of B-cell lymphoma with monoclonal anti-idiotype antibody // N. Engl. J. Med. 1981. - V. 306. - P. 517-522.

132. Hurvitz S., Timmerman J. Current status of therapeutic vaccines for non-Hodgkin's lymphoma // Curr. Opin. Oncol. 2005. - V. 17. - P. 432-440; .

133. Dillman R. Radiolabeled anti-CD20 monoclonal« antibodies for the treatment of B-cell lymphoma // J. Clin. Oncol: 2002. - V. 20. - P. 3545-3557.

134. Hudis C. Trastuzumab-mechanism of action and use in clinical practice // N. Engl. J. Med. 2007. - V. 357. - P.39-51.

135. Sandler A., Gray R., Perry M., Brahmer J., Schiller J.H., Dowlati A., Lilenbaum R., Johnson D.H. Paclitaxel-carboplatin alone or with bevacizumab for non-small-cell lung cancer // N. Engl. J. Med. 2006. - V. 355. - P. 2542-2550.

136. Miller K., Wang M., Gralow J., Dickler M., Cobleigh M., Perez E.A., Shenkier T., Cella D., Davidson N.E. Paclitaxel plus bevacizumab versus paclitaxel alone for metastatic breast cancer // N. Engl. J. Med. 2007.;- V. 357.,- , , P. 2666-2676.

137. Dillman R., Dillman J., Halpern S., Clutter M. Toxicities and side effects associated with intravenous infusions of murine monoclonal antibodies // J. Biol. Response Mod. 1986. - V. 5. - P. 73-84.

138. Bulow J.F.M. von, Dobereiner J. Potential for nitrogen fixation in maize genotypes in Brazil // PNAS. 1975. - V. 72. - P. 2389-2393.

139. Frens G. Controlled nucleation for the particle size in monodisperse gold suspension //Nature Phys. Sci. 1973. - V. 241. - P. 20-22.

140. Khlebtsov N.G., Bogatyrev V.A., Dykman L.A., Melnikov A.G., Spectral extinction of colloidal gold and its biospecific conjugates // J. Coll. Interf. Sci. -1996.-V. 180.-P. 436-445.

141. Пастер Е.У., Овод B.B., Позор B.K., Вихоть H.E. Иммунология: Практикум. Киев: Вища шк., 1989. - 304 с.

142. Bernas Т., Dobrucki J.W. The role of plasma membrane in bioreduction of two tetrazolium salts, MTT, and CTC // Arch. Biochem. Biophys. 2000. - V. 380. -P. 108-116. :,

143. Медицинские лабораторные технологии. Справочник. Т. 2 / Под ред. Карпищенко А.И. -Санкт-Петербург: Интермедика, 2002. 600 с.

144. Дыкман JI.A., Богатырев В.А. Коллоидное золото в твердофазных методах анализа // Биохимия. 1997. - Т. 62. - С. 411-418.

145. Charlton К.А., Moyle S., Porter A.J.R., Harris W.J. Analysis of the diversity of a sheep antibody repertoire as revealed from a bacteriophage display libraiy // J. Immunol. 2000. - V. 164. - P. 6221-6229.

146. Oliver H. Lowry, Nira J. Rosebrough, A. Lewis Farr, and Rose J. Randall Protein measurement with the Folin phenol reagent // J. Biol. Chem. 1951. - V. 193.-P. 265-275.

147. Vergne I., Chua J., Singh S.B, Deretic V. Cell biology of mycobacterium tuberculosis phagosome // Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 2004. - V. 20.,- P. 367394.

148. Kusner D.J. Mechanisms of mycobacterial persistence in tuberculosis // Clin. Immunol. 2005. - V. 114. - P. 239-247.

149. Houben E.N, Nguyen L, Pieters J. Interaction of pathogenic mycobacteria with the host immune system // Curr. Opin. Microbiol. 2006. - V. 9 - P.76-85.

150. Othieno C., Hirsch C.S., Hamilton B.D., Wilkinson K. Interaction of Mycobacterium tuberculosis-Induced Transforming Growth Factor bl and Interleukin-10 // Infection and immunity. 1999. - V. 67. - P. 5730-5735.

151. Caccamo N., Meraviglia S., Mendola C., Guggino G., Dieli F. Phenotypical and Functional Analysis of Memory and Effector Human CD8 T Cells Specific for Mycobacterial Antigens // The Journal of Immunology. 2006. - V. 177. - P. 17801785.

152. Geluk A., Lin M.Y., Meijgaarden K., Leyten E., Franken K., Ottenhoff T., Klein M. T-Cell Recognition of the FIspX Protein of Mycobacterium tuberculosis.

153. Correlates with Latent M. tuberculosis Infection but Not with M. bovis BCG Vaccination // Infection and immunity. 2007. - V. 75. - P. 2914-2921.

154. Waters W.R., Palmer M.V., Thacker T.C., Bannantine J.P., Vordermeier H.M. Early Antibody Responses to Experimental Mycobacterium bovis Infection of Cattle // Clinical and Vaccine Immunology. 2006. - V. 13. - P. 648-654.

155. Waters W.R., Palmer M.V., Thacker T.C., Payeur J.B., Harris N.B.Immune Responses to Defined Antigens of Mycobacterium bovis in Cattle Experimentally Infected with Mycobacterium kansasii // Clinical and Vaccine Immunology. -2006.-V. 13.-P. 611-619.

156. Stead W.W. Genetics and resistance to tuberculosis // Ann. Int. Med. 1992. -V. 116.-P. 937-994.

157. Lalvani A. Diagnosing tuberculosis infection in the 21st century: new tools to tackle an old enemy // Chest. 2007. -V. 131. - P. 1898-1906.

158. Huebner R.E., Schein M.F., Bass J.B. The tuberculin skin test // Clin. Infect. Dis. 1993. - V. 17. - P. 968-975.

159. Reischl U., Naumann L. Molecular biology methods in detection of mycobacterium. Improved and newly developed test systems for the diagnosis of mycobacterium // Fortschr. Med. 1996. - V. 114. - P. 237-241.

160. Stein M., Sela-Razon В., Linder I., Somekh E. The effect of open heart surgery on tuberculin skin test reactivity // Ann. N. Y. Acad. Sci: -2007. -V. 1109. -P. 229-234.

161. Ozekinci Т., Ozbek E., Celik Y. Comparison of tuberculin skin test and a specific T-cell-based test, T-Spot.TB, for the diagnosis of latent tuberculosis infection // J. Int. Med. Res. 2007. -V. 35. - P. 696-703.

162. Kuwabara S. Amino acid sequence of tuberculin active protein from Mycobacterium tuberculosis I/ J. Biol. Chem. 1975. - V. 250. -P. 2543-2568.

163. Borm P.J.A., Mtiller-Schulte D. Nanoparticles in drug delivery and environmental exposure: same size, same risks // Nanomedicine. 2006. - V. 2. - P. 235-249.

164. Paciotti F.G., Kingston D.G.I., Tamarkin L. Colloidal gold nanoparticles: a novel nanoparticle platform for developing multifunctional tumor-targeted drug delivery vectors // Drug Dev. Res. 2006. - V. 67. - P. 47-54.

165. Oldenburg S.J., Averitt R.D., Westcott S.L., Halas N. Nanoengineering of optical resonances // Chem. Phys. Lett. -1998. -V. 288. -P. 243-247.

166. Хлебцов Б.Н., Ханадеев B.A., Богатырев B.A., Дыкман JI.A., Хлебцов Н.Г. Использование золотых нанооболочек в твёрдофазном иммуноанализе // Российские нанотехнологии. -2008. -Т. 3. С. 66-79.

167. Люминесцентная микроскопия: Учебное пособие для проведения курсов обучения: «Культуральные методы диагностики туберкулеза», «Выявление туберкулеза методом микроскопии». М.-Тверь: ООО «Издательство «Триада», 2008. - 36 с.

168. Денскевич A.C. Инфекционные болезни свиней. Алма-Ата.: Кайнар, 1977. - 77 с.

169. Белоусова Р.В., Третьякова И.В. Ветеринарная вирусология. М.: Колос, 2007. - 93 с.

170. Конопаткина A.A. Эпизоотология и инфекционные болезни сельскохозяйственных животных. М.: Колос, 1984. - 87 с.

171. Жаров A.B. Паталогическая анатомия с/х животных. М.: Колос, 1999.56 с.

172. Сергеев В.А., Водяников В.И., Земляков Р.Н., Сосницкая Г.Н. Специфическая профилактика и вирусоносительство при трансмиссивном гастроэнтерите свиней // Ветеринария. 2007. - № 4. - С. 15-18.

173. Салимов В.А. Практикум по паталогической анатомии животных. М.: Колос, 2003. - 37 с.

174. Пузанкова О.С., Байбиков Т.З., Николаева К.П., Кукушкин С.А. Методика выявления антител к вирусу трансмиссивного гастроэнтерита свиней в реакции нейтрализации на панелях. Владимир: ФГУ «Федеральный центр охраны здоровья животных», 2004. 57 с.

175. Дыкман Л.А., Богатырев В.А. Наночастицы золота: получение, функционализация, использование в биохимии и иммунохимии // Успехи химии. 2007. - Т. 76. - С. 199-213.

176. Patra Н.К., Banerjee S., Chaudhuri U., Lahiri P., Dasgupta A.K. Cell selective response to gold nanoparticles // Nanomedicine: Nanotechnology, Biology and Medicine.- 2007. V. 3. - P. 111-119.

177. Han G., Ghosh P., Rotello V.M. Functionalized gold nanoparticles for drug delivery //Nanomedicine. 2007. - V. 2. - P.l 13-123.

178. Gosh P., Han G., De M., Kim C.K., Rotello V.M. Gold nanoparticles in delivery applications // Advanced Drug Delivery Reviews.-2008.-V. 60 P. 13071315.

179. Patra C.R., Bhattacharya R., Wang E., Lau S. Targeted delivery of gemcitabine to pancreatic adenocarcinoma using cetuximab as a targeting agent // Cancer Res. -2008. -V. 68. V. 6. - P. 1970-1971.

180. Wang Z., Liu D., Sun L. Functional gold nanoparticle-peptide complexes as cell-targeting agents // Langmuir. 2008. - V. 24. - P. 10293-10297.

181. Nativo P., Prior I.A., Brust M. Uptake and intracellular fate of Surface-Modified Gold Nanoparticles // Acsnano. 2008. - V. 2. - № 8. - P. 1639-1644.

182. Mandal D., Maran A., Yaszemski M.J., Bolander M.E., Sarkar G. Cellular uptake of gold nanoparticles directly cross-linked with carrier peptides by osteosarcoma cells // J. Mater Sci. Mater Med. 2009 - V. 20. - P. 347-350.

183. Ren J., Xie C., He H. Nonbleaching fluorescence of gold nanoparticles and its applications in cancer cell imaging // Anal. Chem. 2008. - V. 80. - P. 5951-5957.

184. Fujimoto J.G. Optical coherence tomography for ultrahigh resolution in vivo imaging // Nat. Biotechnol. 2003. - V. 21. - P. 1361-1367.

185. Palmer G.M., Zhu Ch., Breslin T.M., Xu F., Gilchrist K.W, and Ramanujam N. Comparison of multiexcitation fluorescence and diffuse reflectance spectroscopy for the diagnosis of breast cancer // IEEE Trans. Biomed. Eng. -2003.-V. 50.-P. 1233-1242.

186. Lee T.M., Oldenburg A.L., Sitafalwalla Sh., Marks D.L., Luo W., Toublan F. J.-J., Suslick K.S., Boppart S.A. Engineered microsphere contrast agents for optical coherence tomography // Opt. Lett. 2003. - V. 28. - P. 1546-1548.

187. El-Sayed I.H., Huang X., El-Sayed M.A. Surface plasmon resonance scattering and absorption of anti-EGFR antibody conjugated gold nanoparticles in cancer diagnostics: applications in oral cancer // Nano Lett. 2005. - V. 5. - P. 829834.

188. Huang X., El-Sayed I.H., Qian W., El-Sayed M.A. Cancer cell imaging and photothermal therapy in the near-infrared region by using gold nanorods // J. Am. Chem. Soc. 2006. - V. 128. - P. 2115-2120.

189. Durr N.J., Larson T., Smith D.K., Korgel B.A., Sokolov K., Ben-Yakar A. Two-photon luminescence imaging of cancer cells using molecularly targeted gold nanorods // Nano Lett. 2007. - V. 7. - P. 941-945.

190. Agrawal A., Huang S., Wei A., Lin H., Lee M.H., Barton J.K., Drezek R.A., Pfefer T.J. Quantitative evaluation of optical coherence tomography signal enhancement with gold nanoshells // J. Biomed. Opt. 2006. - V. 11.- P.0411211-6.

191. Troutman T.S., Barton J.K., Romanowski M. Optical coherence tomography with plasmon resonant nanorods of gold // Opt. Lett. 2007. - V. 32. - P. 14381440.

192. Huang Y., Swarup V.P., Bishnoi S.W. Rapid Raman imaging of stable, functionalized nanoshells in mammalian cell cultures // Nano Lett. 2009. - V. 9. -P. 2914-2920.

193. Anker J.N., Hall W.P., Lyandres O., Shah N.C., Zhao J., van Duyne R.P. Biosensing with plasmonic nanosensors //Nat. Mater. 2008. - V. 7. - P. 442-453.

194. Nusz G.J., Marinakos S.M., Curry A.C., Dahlin A.F., Wax A., Chilkoti A. Label-free plasmonic detection of biomolecular binding by a single gold nanorod // Anal. Chem. 2008. - V. 80. - P. 984-989.

195. Stone J.W., Sisco P.N., Goldsmith E.C., Baxter S.C., Murphy C,J. Using Gold Nanorods to Probe Cell-Induced Collagen Deformation // Nano Lett. 2007. - V. 7. -P. 116-119. i

196. Yong K.T., Swihart M.T., Ding H., Prasad P.N.Preparation of gold nanoparticles and their applications in anisotropic nanoparticle synthesis and bioimaging // Plasmonics. 2009. - V. 4. - P.79-93.

197. Yang X., Skrabalak S.E., Li Z.Y., Xia Y., Wang L.V. Photoacoustic tomography of a rat cerebral cortex in vivo with Au nanocages as an optical contrast agent //Nano Lett. 2007. - V. 7. - P. 3798-3802.

198. Wu X., Liu H., Liu J. Immunofluorescent labeling of cancer marker Her2 and other cellular targets with semiconductor quantum dots // Nat. Biotechnol. 2003. -V. 21.-P. 41-46.

199. Sudimack J., Lee R.J. Targeted drug delivery via the folate receptor // Adv. Drug Deliv. Rev. 2000. - V. 41. - P. 147-162.

200. Fu K.5 Sun J., Bickford L.R., Lin A.W.H., Halas N.J., Yu Т.К., Drezek R.A. Measurement of immunotargeted plasmonic nanoparticles cellular binding: a key factor in optimizing diagnostic efficacy // Nanotechnology. 2008. - V. 19. - P. 045103(1-6).

201. Костеша H.B., Ламан А.Г., Шепеляковская A.O., Зайцева И.С., Орлов В.П., Дыкман Л.А., Бровко Ф.А., Соколов О.И. Селекция и характеристика фаговых мини-антител к актинам различного происхождения // Биохимия. -2005.-Т. 70.-С. 1070-1077.

202. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Молекулярное клонирование. М. Мир, 1984.-480 с.

203. Westcott S.L., Oldenburg S.J., Lee T.R., Halas, N.J. Formation and adsorption of clusters of gold nanoparticles onto functionalized silica nanoparticle surfaces // Langmuir. 1998. - V. 14. - P. 5396-5401. *

204. Хлебцов Б.Н., Ханадеев B.A., Хлебцов Н.Г. Коллективные плазмонные резонансы в монослое металлических наночастиц и нанооболочек //-Оптика и спектроскопия. 2008. - Т. 104, № 2. - С.324-337.

205. Loo С., Hirsch L., Lee М., Chang Е., West J., Halas N., Drezek R. Gold nanoshell bioconjugates for molecular imaging in living cells // Optics Letters. -2005. V. 30. - P. 1012-1014.

206. Khlebtsov B.N., Dykman L.A., Bogatyrev V.A., Zharov V.P., Khlebtsov N.G. A solid-phase dot assay using silica/gold nanoshells // Nanoscale Research Letters. 2007.-V. 2.-P. 6-11.i

207. Hawkes R., Niday E., Gordon J. A dot immunobinding assay for monoclonal and other antibodies // Analyt. Biochem. 1982. - V. 119. - P. 142-147.

208. Vaessen R.T.M.J., Kreike J., Groot G.S.P. Protein transfer to nitrocellulose filters. A simple method for quantitation of single proteins in complex mixtures // FEBS Lett. 1981. - V. 124. - P. 193-196.

209. Gupta Sh., Huda S., Kilpatrick P.K., Velev O.D. Characterization and optimization of gold nanoparticle-based silver-enhanced immunoassays // Anal. Chem. 2007. - V. 79. - P. 3810-3820.

210. Döbereiner J., Day J.M. Associative symbiosis in tropical grasses: characterization of microorganisms and dinitrogen-fixing sites // Proc. Intern. Symp. on N2-Fixation / Eds. Newton E., Nijman C.J. Washington: Pullman, 1976.-P. 518-538.

211. Eichhorn M. Offene Fragen bei der ^zosp/rzV/ww-Halbsymbiose mit Pflanzen // Biol. Rundsch. 1989. - Bd. 27. - S. 204-205.

212. Bashan Y., Holguin G. Azospirillum-plant relationships: environmental and physiological advances (1990-1996) // Can. J. Microbiol. 1997. - V. 43. - P. 103121.

213. Krieg N.R., Döbereiner J. Genus Azospirillum (Tarrand, Krieg and Döbereiner, 1979) // In: Bergey's Manual of Systematic Bacteriology / Eds. Krieg N.R., Holt J.G. Baltimore/London: Williams & Wilkins, 1984. - P. 94-104.

214. Smit G., Kijne J., Lugtenberg B. Roles of flagella, iipopolysaccharide, and Ca2+-dependent cell surface protein in attachment of Rhizobium leguminosarum biovar viciae to pea root hair tips // J. Bacteriol. 1989. - V. 171. - P. 569-572.

215. Wolpert J.S., Albertshen P. Host-symbiont interactions. 1. The lectins of legumes interact with the O-antigen containing lipopolisaccharides of their simbiont Rhizobia II Biochem. Biophys. Res. Comm. 1976. - V. 70. - P. 729-737.

216. Huber T.A., Agarwal A.K., Keister D.L. Extracellular polysaccharide composition, ex planta nitrogenase activity, and DNA homology in Rhizobium japonicum II J. Bacteriol. 1984.-V. 158.-P. 1168-1171.

217. Whatley M.H., Bodwin J.S., Lippincott B.B. Lippincott J.A. Role for Agrobacterium cell envelope lipopolisaccharides in infection site attachment // Infect. Immun. 1976. - V. 13. - P. 1080-1083.

218. Matthysse A.G., Wyman P.M., Holmes K.V. Plasmid-dependent attachment of Agrobacterium tumifaciens to plant tissue culture cells // Infect. Immun. 1978. -V. 22.-P. 516-522.

219. Lugtenberg В., van Aphen L. Molecular architecture and functioning of the outer membrane of Escherichia coli and other Gram-negative bacteria // Biochem. Biophis. Acta. 1983.-V. 737. - P. 51-115.

220. Громов Б.В. Строение бактерий. Л.: Изд-во Ленингр. ун-та, 1985. - 190 с.

221. Krishnaswamy S., Kabir М.Е., Miyamoto М., Furuichi Y., Komiyama Т. Cloning antifungal single chain fragment variable antibodies by phage display and competitive panning elution // Anal. Biochem. 2009. - V. 395. - P. 16-24.

222. Boulter-Bitzer J.I., Lee H., Trevors J.T. Single-chain variable fragment antibodies selected by phage display against the sporozoite surface antigen P23 of Cryptosporidium parvum II J. Parasitol. 2009. - V. 95. - P. 75-81.

223. Матора Л.Ю., Шварцбурд Б.И., Щеголев С.Ю. Иммунохимический анализ О-специфических полисахаридов почвенных азотфиксирующих бактерий Azospirillum brasilense // Микробиология. 1998. - Т. 67. - С. 815820.

224. Beatty J.D., Beatty B.G., Vlahos W.G. Measurement of monoclonal affinity by noncompetitive immunoassay // J. Immunol. Meth. 1987. - V. 100: - P. 173179.

225. Беляков А.Е., Матора Л.Ю., Бурыгин Г.Л. Получение и исследование гликозилированного флагеллина почвенных ассоциативных бактерий Azospirillum brasilense II Вестник Саратовского госагроуниверситета им. Н.И. Вавилова 2010. - № 9. - С. 3-6.

226. Fedonenko Y.P, Zatonsky G.V, Konnova S.A, Zdorovenko E.L, Ignatov V.V. Structure of the O-specific polysaccharide of the lipopolysaccharide of Azospirillum brasilense Sp245 // Carbohydr. Res. 2002. - V. 337. - P. 869-872.

227. Бунин В.Д., Игнатов O.B., Гулий О.И., Волошин А.Г., Дыкман-Л.А., О'Нейл Д., Ивницкий Д. Исследование электрофизических свойств клеток Listeria monocytogenes при взаимодействии с моноклональными антителами // Биофизика. 2005. - Т. 50. - С. 316-321.