Применение живого эквивалента кожи в комплексном лечении больных венозными трофическими язвами (клиническое исследование) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.17, кандидат медицинских наук Гасанов, Имам Кадирович

• Гасанов, Имам Кадирович
• кандидат медицинских наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Гасанов, Имам Кадирович

Введение.

Глава 1. Современные методы лечения больных венозными трофическими язвами (обзор литературы).

1.1. Этиология и патогенез венозных трофических язв.'.

1.2. Основные принципы лечения венозных трофических язв.

1.3. Клеточные технологии в лечении ран.

Глава 2. Материал и методы исследования.

2.1. Описание живого эквивалента кожи.

2.2. Общая характеристика клинических групп больных.

2.3. Характеристика методов лечения.

2.4. Характеристика методов исследования.

2.4.1. Клинические методы исследования.

2.4.2. Методы оценки состояния трофических язв.

2.4.3. Бактериологический метод исследования.

2.4.4. Цитологический метод исследования.

2.4.5.Ультразвуковое дуплексное сканирование вен нижних конечностей.

2.5. Статистический анализ результатов исследования.

Глава 3. Результаты местного применения живого эквивалента кожи в комплексном консервативном лечении больных венозными трофическими язвами.

3.1. Результаты клинических и планиметрических методов исследования.

3.2. Результаты бактериологического метода исследования.

3.3. Результаты цитологического метода исследования.

Глава 4. Результаты местного применения живого эквивалента кожи в комплексном хирургическом лечении больных венозными трофическими язвами.

4.1. Оперативная коррекция венозного кровотока.

4.2. Результаты клинических и планиметрических методов исследования.

4.3. Результаты бактериологического метода исследования.

4.4. Результаты цитологического метода исследования.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Применение живого эквивалента кожи в комплексном лечении больных венозными трофическими язвами (клиническое исследование)»

Актуальность темы

Трофические язвы являются тяжелым осложнением хронической венозной недостаточности (ХВН) нижних конечностей и встречаются у 2 % взрослого населения индустриально развитых стран. В возрастной группе старше 65 лет частота венозных трофических язв достигает 3-6%. Частота возникновения трофических язв находится в прямой зависимости от длительности заболевания и степени декомпенсации венозного кровообращения. Спустя 10 лет от начала заболевания трофические язвы возникают у каждого второго больного ХВН. В России до 3-4% граждан страдают открытыми и рецидивирующими трофическими язвами [3, 35, 36, 64].

Трофические язвы в значительной мере снижают качество жизни больных. До 90% больных венозными трофическими язвами испытывают бытовые неудобства, 80% больных беспокоит боль в области язвы, более 74% больных страдают нарушением спа, а 27% больных перестают общаться с друзьями и коллегами [64].

Таким образом, венозные трофические язвы являются причиной физических страданий и создают серьезный психологический дискомфорт.

Лечение трофических язв нижних конечностей приводит к значительным экономическим затратам. При этом имеют место затраты не только медицинского характера. Реальные экономические потери общества возрастают за счет утраты трудоспособности пациента и исключения из производства лиц ухаживающих за данными больными [28, 64].

Учитывая вышеизложенное, лечение трофических язв представляет собой не только актуальную медицинскую, но и значимую социально-экономическую проблему.

Эффективным способом устранения регионарных гемодинамических и трофических нарушений в конечности вызванных ХВН является хирургическое вмешательство [35, 36, 64, 71, 72]. Однако в отношении времени проведения хирургического вмешательства при «открытой» трофической язве у хирургов существуют различные точки зрения [17, 22, 26, 35, 36, 64, 71, 72]. Наличие «активной» трофической язвы, по мнению некоторых специалистов, является противопоказанием к операции, в связи с высоким риском развития гнойно-некротических осложнений [22, 35, 72]. По мнению других специалистов, коррекцию венозного кровотока необходимо выполнять не дожидаясь заживления трофической язвы [26, 36, 71].

Следует учитывать, что чем радикальнее операция, тем она травматичнее, следовательно, тем выше риск гнойно-некротических осложнений. Чрезмерной радикальности в данном случае предлагается предпочитать этапность [41, 64]. Планируя объем оперативного вмешательства следует хорошо понимать, что при тяжелых нарушениях трофики кожи первоочередной задачей является коррекция флебогемодинамических нарушений, направленных на предотвращение прогрессирования и рецидирования трофической язвы [35, 64]. Но в ряде случаев, проведение оперативного лечения может быть сопряжено с повышенным риском, или даже невозможно, в связи с наличием у пациентов тяжелой сопутствующей системной патологии [28, 36, 64].

В современном представлении комплексное лечение больных венозными трофическими язвами включает в себя: лечебно-охранительный режим, системную фармакотерапию, хирургическую коррекцию венозного кровотока, эластичную компрессию. Важную роль также играет местное лечение, одним из основных задач которого является стимуляция регенераторных процессов в области язв [17, 22, 28].

За последние десятилетия количество препаратов для местного лечения трофических язв существенно увеличилось, но сроки заживления язв у большинства пациентов составляют около 2-3 месяцев, а у ряда больных они не заживают годами [22]. Поэтому по настоящее время проблема поиска более эффективных способов заживления трофических язв остается актуальной.

Во многих случаях, в местном лечении трофических язв нижних конечностей, хорошие результаты дает применение биотехнологических раневых покрытий [5, 25, 112]. Данный класс раневых покрытий является самым современным и, по-видимому, самым перспективным [4, 5, 7, 25, 112]. Одним из таких раневых покрытий является разработанный в Институте биологии развития РАН им. Н.К. Кольцова живой эквивалент кожи, представляющий собой трехмерную гелевую структуру, включающую культивированные живые аллогенные фибробласты и кератиноциты. Исследования по применению живого эквивалента кожи для лечения больных с глубокими ожогами ограниченной площади и с раневыми дефектами кожных покровов показали хорошие результаты [5, 7, 25] однако, для лечения венозных трофических язв живой эквивалент кожи ранее не применялся. В доступной литературе также не найдено аргументированной информации, отражающей преимущества и недостатки живого эквивалента кожи в комплексном лечении больных ХВН нижних конечностей, осложненной трофическими язвами в сравнении с традиционными подходами. Кроме того отсутствуют сведения об особенностях трансплантации живого эквивалента кожи больным трофическими язвами в зависимости от исходной клинико-морфологической ситуации.

Вышеизложенное определило цель и задачи исследования.

Цель работы

Улучшение результатов комплексного' лечения больных венозными трофическими язвами путем рационализации хирургической тактики и применения живого эквивалента.

Задачи исследования

1. Определить клинические критерии готовности венозных трофических язв к трансплантации живого эквивалента кожи.

2. Разработать методы комплексного оперативного и консервативного лечения больных венозными трофическими язвами с использованием живого эквивалента кожи.

3. Оценить результаты разработанных методов комплексного лечения' больных венозными трофическими язвами.

Научная новизна

В лечении больных венозными трофическими язвами применен живой эквивалент кожи.

Изучена клинико-морфологическая картина заживления венозных трофических язв при применении живого эквивалента кожи.

Усовершенствована методика субфасциальной перевязки перфорантных вен у больных венозными трофическими язвами.

Разработаны методы комплексного оперативного и консервативного лечения больных венозными трофическими язвами с применением живого эквивалента кожи.

Практическая значимость

Полученные клинико-морфологические данные, свидетельствуют о том, что внедрение разработанной технологии в клиническую практику, позволит улучшить результаты лечения трофических язв у больных хронической венозной недостаточностью нижних конечностей и сократить сроки пребывания пациентов в стационаре и в период амбулаторного лечения.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту

1. После трансплантации живого эквивалента кожи происходит активизация регенераторных процессов, которые приводят к восстановлению эпителиального покрова трофических язв.

2. Применение живого эквивалента кожи сокращает сроки заживления трофических язв по сравнению с традиционными методами лечения.

3. Оптимальным является комплексный метод лечения трофических язв у больных хронической венозной недостаточностью нижних конечностей, включающий предоперационную подготовку язвенных дефектов, хирургическую коррекцию венозного кровотока и применение в послеоперационном периоде для местного лечения трофических язв живого эквивалента кожи.

Апробация диссертации

Материалы диссертации доложены и обсуждены на: юбилейной Всеармейской научно-практической конференции, посвященной 90-летию 2 Центрального военного клинического госпиталя им. П.В. Мандрыка (Москва, 2009);

- научно-практической конференции «Современные технологии лечения раненых в локальных конфликтах» (Балашиха, 2009);

- межкафедральном совещании кафедр хирургии и военно-полевой хирургии Федерального государственного образовательного учреждения послевузовского профессионального и дополнительного профессионального образования «Государственный институт усовершенствования врачей Минобороны России» (Москва, 2009).

Работа выполнена па базе хирургических отделений городской клинической больницы № 29 им. Н.Э. Баумана (ГКБ № 29) г. Москвы, являющейся клинической базой кафедры хирургии ФГОУ ПП и ДПО «Государственный институт усовершенствования врачей Минобороны России».

Результаты исследования внедрены в учебный процесс кафедры хирургии ФГОУ ПП и ДПО «Государственный институт усовершенствования врачей Минобороны России», в лечебную работу хирургических отделений ГКБ № 29 г. Москвы.

По теме диссертации опубликованы 4 работы, из них одна - в журнале, рекомендованном экспертным советом ВАК по медицине для опубликования результатов исследований по кандидатским и докторским диссертациям, одна работа принята в печать.

Объём и структура диссертации

Заключение диссертации по теме «Хирургия», Гасанов, Имам Кадирович

ВЫВОДЫ

1. Критериями готовности трофических язв к трансплантации живого эквивалента кожи являются:

- очищение язв от нежизнеспособных тканей и уменьшение экссудации;

- заполнение язвенных дефектов грануляционной тканью;

- уменьшение бактериальной обсемененности язв менее 10э микробных тел на 1 г ткани.

2. Разработанный метод комплексного хирургического лечения больных венозными трофическими язвами предусматривает предоперационную подготовку язвенных дефектов, хирургическую коррекцию венозного кровотока и применение в послеоперационном периоде для местного лечения трофических язв живого эквивалента кожи.

3. При невозможности хирургической коррекции венозного кровотока в связи с особенностями нарушения венозной гемодинамики или при отказе больных от оперативного вмешательства методом выбора является комплексное консервативное лечение, включающее применение системной фармакотерапии, эластичную компрессию, физиотерапию, соблюдение лечебно-охранительного режима и местное лечение с применением живого эквивалента кожи.

4. Трансплантация живого эквивалента кожи на трофические язвы оказывает существенное влияние на раневой процесс в виде активизации процессов регенерации и эпителизации язвенных дефектов, что приводит к сокращению сроков заживления трофических язв.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Трансплантация производится простым одномоментным перенесением живого эквивалента кожи на язвенную поверхность из расчета 1 см2 трансплантата на 1 см2 раны. Ввиду использования в составе живого эквивалента кожи аллогенных клеток и специфичных механизмов восстановления кожного покрова после его трансплантации (постепенное замещение трансплантата собственными тканями реципиента) ширина раневого дефекта не должна превышать 10 см.

2. Перед трансплантацией живого эквивалента кожи язвы обрабатываются изотоническим раствором нетрия хлорида. Применение растворов антисептиков в связи с их цитотоксическим действием не рекомендуется. Трансплантат аккуратно переносится пинцетом на язву поверхностью обращенной к дну чашки Петри, в которой осуществляется его транспортировка. После перенесения трансплантата на язву, его перемещение по язвенной поверхности не желательно.

3. Сверху на трансплантат накладывают раневое покрытие так, чтобы захватывалось не менее 1-2 см от краев раны. Затем сверху без нажима накладывают сухую марлевую салфетку и производят бинтование. Повязка не должна быть давящей, так как это может повлечь продавливание трансплантата через раневое покрытие и его впитывание в повязку.

4. Первая перевязка осуществляется на 4-5-е сутки после трансплантации. При обильном промокании повязки гнойным отделяемым перевязка производится немедленно. Последующие перевязки при отсутствии признаков местных инфекционных осложнений производятся по той же схеме, что и первая.

5. Признаками присутствия трансплантата на язве следует считать:

- наличие налета по типу белой дымки;

- наличие тонкой корочки от серого до коричневого цвета не плотно спаянной с подлежащими тканями;

- наличие нежного тонкого не стратифицированного эпителия (по типу эпителия наблюдаемого при краевой эпителизации).

6. Признаками лизиса трансплантата является не только его видимое отсутствие на ране, а также его разрыхление и приобретение им жидкой консистенции. При этом такое раневое отделяемое характеризуется коричневым или розоватым цветом (что обусловлено включением в его состав остатков трансплантата) и отличается от гнойного отделяемого меньшей вязкостью и тягучестью, т. е. является более жидким.

7. Как правило, к моменту первой перевязки коллагеновый гель с клетками проседает через сетчатый эндопротез, который в результате оказывается как бы лежащим на поверхности трансплантата. В этом случае производят аккуратное удаление сетчатого эндопротеза путем его накручивания на пинцет, стараясь без захвата трансплантата. В случае если сетчатый эндопротез плотно впаян в структуру трансплантата, его удаление производят на последующих перевязках.

8. На первой и второй перевязке в случае определения признаков присутствия трансплантата, язвы без обработки закрывают раневым покрытием, поверх которого накладывают марлевую салфетку. При наличии признаков начинающегося лизиса трансплантата (разрыхление и приобретение им жидкой консистенции) перед наложением раневого покрытия стерильными сухими салфетками производят 2-3 легких промокательных движения до легкого подсушивания раны и применяют антибактериальные мази на гидрофильной основе.

9. После формирования тонкого эпителия, видимого глазом, возможно применение салфеток с антибактериальными мазями на гидрофильной основе.

10. Если на первой перевязке и в последующие 5 суток трансплантат на трофической язве визуально не определяется, производится повторная трансплантация.

11. Наличие вязкого отделяемого белого, желтого или зеленого цвета свидетельствует о гнойном расплавлении трансплантата и требует хирургической обработки язвы с применением растворов антисептиков и антибактериальных мазей. Повторная трансплантация в этом случае производится только после получения результатов посева с язвы и более качественной подготовки язвенной поверхности.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Гасанов, Имам Кадирович, 2010 год

1. Адамян А.А., Добыш С.В. Биологически активные перевязочные средства в комплексном лечении гнойно-некротических ран // Методические рекомендации №2000 / 156 / Под ред. В.Д. Федорова, И.М. Чиж. М., 2000.-39 с.

2. Богданец Л.И. Стратегия и тактика лечения трофических язв венозного генеза: Дис. . д-ра мед. наук. М., - 2009. - 254 с.

3. Васютков В.Я., Проценко Н.В. Трофические язвы стопы и голени,- М.: Медицина, 1993.- 160 с.

4. Васильев А.В., Логинов Л.П., Смирнов С.В. и др. Применение выращенных аллогенных эпидермальных пластов для лечения обожжённых // Травматология и ортопедия. 1994. - №4. - С. 34-39.

5. Васильев А.В., Иванов А.А., Федоров Д.Н. Роль EGF-стимулированного эпидермиса в регуляции заживления ран // Архив патологии. — 2002. -№1 -С.11-14.

6. Васильев А.В., Воротеляк Е.А., Киселев И.В. и др. Реконструкция эпителиальных тканей с использованием клеточных технологий // Вестник Российской АМН. 2008. - №2. - С. 45-53.

7. Воротеляк Е.А., Крохина Т.Б., Цитрин Е.Б и др. Нестин-положительные клетки базального слоя эпидермиса человека в культуре // Докл. РАН.2004. Т. 394. - С. 555-557.

8. Воротеляк Е.А., Васильев А.В., Цитрин Е.Б и др. Кератиноциты человека, длительно сохраняющие метку в культуре // Докл. РАН.2005. Т. 402. - С. 418-420.

9. Воротеляк Е.А., Сатдыкова Г.П., Васильев А.В и др. Электроино-микроскопическое исследование мигрирующих колоний кератиноцитов // Изв. РАН. Серия биологическая. 1996. - №4. - С. 485-489.

10. Воротеляк Е.А., Сатдыкова Г.П., Самарова А.И. и др. Распределение ДНК синтезирующих клеток в мигрирующих колониях эпидермальных кератиноцитов человека // Докл. РАН. - 1997. - Т. 354. - С. 829-831.

11. Воротеляк Е. А., Самарова А.В., Васильев А.В и др. Действие эпидермального фактора роста на миграцию клеток А-431 // Изв. РАН. Серия биологическая. 1997. Т. 6. - С. 734-740.

12. Воротеляк Е.А., Шихвердиева А.Ш., Васильев А.В., Терских В.В. Фибробласты стимулируют эпителизацию коллагенового геля // Изв. РАН. Серия биологическая. 2002. - Т. 4. - С. 421-426.

13. Воротеляк Е.А., Леонова О.Г., Шинин В.В. и др. Рост эпидермальных кератиноцитов человека на коллегановом геле // Докл. РАН. — 1999. — Т. 369.-С. 695-697.

14. Воротеляк Е.А., Чермных Э.С., Ткаченко С.Б и др. Экспрессия и функция гена рбЗ в эпителиальных клетках // Известия РАН. Серия биологическая. 2007. - №4. - С. 389-393.

15. Габибуллаев А.Ф. Эффективность увлажняющих раневых покрытий в лечении трофических язв у геронтологических больных: Дис. . канд. мед. наук. М., - 2008. - 149 с.

16. Гостищев В.К. Оперативная гнойная хирургия. М.: Медицина, 1996. -416 с.

17. Гостищев В.К. Инфекции в хирургии: Руководство для врачей. М.: ГОЭТАР-МЕД, 2007. - 768 с.

18. Далгатов Г.Д. Проблема тканевой оксигенации в лечении гнойных ран: Дис. . д-ра мед. наук. М., - 2001. - 210 с.

19. Джитава И.Г. Лечение трофических язв нижних конечностей: Дис. . канд. мед. наук. М., 1994. - 123 с.

20. Дибиров М.Д. Трофические язвы. М.: НовЛек-М, 2007. - 303 с.

21. Иванов А.А., Федоров Д.Н., Васильев А.В. и др. Роль EG F стимулированного эпидермиса в регуляции заживления ран // Арх. пат. -2002.-Т.1.-С. 11-14.

22. Ивашкин А.Н. Использование криоконсервированных жизнеспособных аллодермотрансплантантов в лечении длительно незаживающих ран и трофических язв: Дис. . канд. мед. наук. М., - 2001. - 122 с.

23. Ивашкин А.Н. Восстановление эпителиальных тканей с использованием криоконсервированных жизнеспособных дермотрансплантатов и живого эквивалента кожи: Дис. . д-ра мед. наук. М., - 2009. - 312 с.

24. Истомина И.С. Комплексное лечение хронической венозной недостаточности // Мат. практ. конф. «Актуальные вопросы физиотерапии и традиционной медицины». М., 2005. - С. 39-42.

25. Калинин М.Р. Комплексное лечение язв и длительно незаживающих pan нижних конечностей у больных сахарным диабетом: Дис. . канд. мед. наук. -М., 1999.- 179 с.

26. Кириенко А.И., Кошкина В.М., Богачева В.Ю. Амбулаторная ангиология. Руководство для врачей. М.: Литтерра, 2007. - 328 с.

27. Киселев И.В. Медико-биологическая оценка жизнеспособности криоконсервированной кожи: Дис. . канд. мед. наук. М., 2000 - 146 с.

28. Колосов Н.Г. Использование фетальных клеток и тканей в лечении поверхностных ран и трофических язв // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 1998. — приложение 1. С. 128-129.

29. Кохан Е.П., Заварина И.К. Избранные лекции по ангиологии М.: Наука, 2000.- 178 с.

30. Кузин М.И., Аничков М.Н., Золотаревский В.Д. и др. Патогенез и лечение длительно незаживающих язв при заболеваниях сосудов конечностей // Хирургия. 1979. - №3. - С. 24-31.

31. Кусаинов М.И. Результаты аллопластики в лечении гнойных ран и трофических язв // Медицина и экология. 1998. - №4. - С.48-50.

32. Лечение трофических язв венозной этиологии: Пособие для врачей. Под. ред. B.C. Савельева. М.: НЦССХ им. А.Н. Бакулева, 2000. - 22 с.

33. Липницкий Е.М. Лечение трофических язв нижних конечностей. М.: Медицина, 2001. - 160 с.

34. Малахов С.Ф., Терских В.В., Баутин Е.А. и др. Аутотрансплантация выращенных вне организма кератиноцитов с целью лечения обширных ожогов // Вестник хирургии. 1993. - Т. 152. - С. 59-62.

35. Назаренко Г.И., Сугурова И.Ю., Глянцева С.П. Рана, повязка, больной.-М.: Медицина, 2002. 472 с.

36. Никитин Г.Д., Карташев И.П., Рак А.В. и др. Пластическая хирургия хронических и нейротрофических язв // «Русская графика» ООО «Сюжет» СПб., - 2001 г. - 189 с.

37. Ошибки, опасности и осложнения в хирургии вен: Руководство для .врачей. Под ред. Ю.Л. Шевченко. СПб., Питер. - 1999. -320 с.

38. Пальцев М.А., Аничков Н.М. Патологическая анатомия. М.: Медицина, 2001. - 680 с.

39. Пальцев М.А., Иванов А.А. Межклеточные взаимодействия. М.: Медицина. - 1995. - 224 с.

40. Парамонов Б.А., Порембский Я.О., Яблонский В.Г. Ожоги: Руководство для врачей. СПб.: СпецЛит, 2000. - 480 с.

41. Пожарицкая М.М., Руднева Е.В., Попкова Н.А. и др. Применение клеточных технологий для повышения эффективности хирургического лечения парадонтита // Пародонтология. 2004. — №3. — С. 3-10.

42. Раны и раневая инфекция. Руководство для врачей: Под ред. М.И. Кузина. М.: Медицина, 1990. - 592 с.

43. Роговая О.С., Васильев А.В., Киселев И.В. и др. Использование фибробластов человека, выращенных на микроносителях, для формирования эквивалента соединительной ткани // Онтогенез. — 2004. — Т. 35.-С. 105-109.

44. Руднева С.П., Голубков С.П., Гаряев А.А. и др. Контракция коллагенового геля фибробластами эмбриона человека: влияние факторов роста клеток // Биол. мембраны. — 1990. — №7. С. 1283-1288.

45. Сергеев Н.А. Комплексное лечение венозных трофических язв нижних конечностей: Дис. . д-ра мед. наук. -М., -2007. -211 с.

46. Смирнов С.В., Киселев И.В., Васильев А.В. и др. Современные методы клеточной терапии при лечении ожогов // Хирургия. 2003. - №12. - С. 58-62.

47. Смирнов С.В., Киселев И.В., Роговая О.С. и др. Восстановление кожного покрова путем трансплантации выращенных кератиноцитов // Бюл. экспер. биол. 2003. - Т. 135. - С. 711-713.

48. Смирнов С.В., Киселев И.В., Хватов В.Б. и др. Заготовка хранение и применение жизнеспособных кожных аллотрансплантатов при лечении обширных глубоких ожогов // Методические рекомендации (№43). М., НИИ СП им. Н.В. Склифосовского, 2004. - 10 с.

49. Соколов В.П. Комплексное лечение трофических язв нижних конечностей, вяло гранулирующих и длительно незаживающих ран // Лазерная медицина. 1999. -№1. - С. 38-39.

50. Терских В.В., Васильев А.В. Стволовые клетки эпидермиса // Известия РАН, Серия биологическая. 2001. - №6. - С. 738-744.

51. Терских В.В., Васильев А.В., Воротеляк Е.А. Структурно-функциональные единицы эпидермиса // Известия РАН, Серия биологическая. 2003. - №6. - С. 645-649.

52. Терских В.В., Васильев А.В., Воротеляк Е.А. Стволовые клетки: эволюция концепции // Вестник дерматологии. 2005. - №2. - С. 4-8.

53. Терских В.В., Васильев А.В. Апоптоз и дифференциация эпидермальных кератиноцитов // Онтогенез. 2005. - №36. - С. 85-89.

54. Терских В.В., Васильев А.В., Воротеляк Е.А. Ниши стволовых клеток // Известия РАН. Серия биологическая. 2007. - №3. - С. 261-272.

55. Терских В.В., Васильев, А.В. Воротеляк Е.А. Поляризация и асимметричное деление стволовых клеток // Цитология. 2007. - Т. 49, №11.-С. 933-938.

56. Терских В.В., Воротеляк Е.А, Васильев А.В. Сохранение генетической информации в стволовых клетках // Генетика. 2008. — Т. 44, №3. - С. 305-308.

57. Федоров Д.Н. Межклеточные и клеточно-матрикспые взаимодействия при репарации длительно незаживающих ран: Дис. . канд. мед. наук. -М., 2002.- 107 с.

58. Федоров Д.Н., Васильев А.В., Иванов А.А. Морфологическая и иммуногистохимическая характеристика репаративных процессов в длительно незаживающих ранах // Архив патологии. 2002. - №1. - С. 8-11.

59. Флебология: Руководство для врачей / Савельев B.C., Гологорский В.А., Кириенко А.И. и др.: Под ред. B.C. Савельева. М.: Медицина, 2001. -664 с.

60. Фоминых Е.М. Использование криоконсервированных жизнеспособных аллодермотрансплантатов и гелевых повязок в комплексном лечении обширных и длительно незаживающих ран (клиническое исследование): Дис. . канд. мед. наук. М., 2003. - 158 с.

61. Ханевич М.Д., Хрупкин В.И., Щёлоков АЛ. и др. Осложненные формы хронической венозной недостаточности нижних конечностей. М.: МедЭкспертПресс; Петрозаводск: ИнтелТек, 2003. - 176 с.

62. Хрупкин В.И., Низовой А.В., Леонов С.В. и др. Использование фибробластов для лечения гранулирующих ран // Воеп.-мед. журн. -1998.-№1.-С. 38-42.

63. Чиссов В.И., Решетов И.В., Сергеева Н.С. и др. Клеточные технологии в замещении тканевых дефектов в онкологии // Вестник РАМН. 2006. — №6. - С. 34-38.

64. Щёлоков A.JI. Осложненные формы хронической венозной недостаточности нижних конечностей (патогенез, диагностика, лечение, профилактика): Дис. . д-ра мед. наук. М., 2004. — 265 с.

65. Яблоков Е.Г., Кириенко А.И., Богачев В.Ю. Хроническая венозная недостаточность. М., 1999. — 128 с.73. 80 лекций по хирургии. Под ред. B.C. Савельева. - М.: Литтерра, 2008. -912 с.

66. Abe R., Shimizu Т., Ohkawara A. et al. Enhancement of macrophage migration inhibitory factor (MIF) expression in injured epidermis and cultured fibroblasts // Biochem. & Biophys. Act. 2000. - Vol. 150. - P. 1 -9.

67. Aktas G., Kayton R. Ultrastructural immunolocalization of basic fibroblast growth factor in fibroblasts and extracellular matrix // Histochem. Cell Biol. — 2000. Vol. 113. - P. 227-233.

68. Andersen J.L., Ehlers N. Chemotaxis of human keratocytes is increased by PDGF-BB, EGF, TGF-a, aFGF, IGF-I and TGF-P // Curr. Eye Res. 1998. -Vol. 17.-P. 79-87.

69. Aubock J., Irschick E., Romani N. et al. Rejection, after a slightly prolonged survival time, of Langerhans cell-free allogeneic cultured epidermis used for wound coverage in humans // Transplantation. 1988. - Vol. 45. — P. 730737.

70. Bata-Csorgo Z., Cooper K.D., Ting K.M. et al. Fibronectin and a5 integrin regulate keratinocyte cell cycling // J. Clin. Invest. 1998. - Vol. 101. - P. 15090-1518.

71. Ben-Bassat H., Strauss N., Ron M. et al. Transplantation performance of human skin cryopreserved by programmed or stepwise freezing and stored at-80 degrees С or -180 degrees С // J. Burn Care Rehabil. 1996. - V. 17, N5. -P. 421-428.

72. Borradori L., Sonnenberg A. Structure and function of hemidesmosomes: More than simple adhesion complexes // J. Invest. Dermatol. 1999. -Vol.112.-P. 411-418.

73. Bugge Т.Н., Flick M.J., Danton M.J.S. et al. Urokinase-type plasminogen activator is effective in fibrin clearance in the absence of its receptor or tissue-type plasminogen activator // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. - Vol. 93. -P. 5899-5904.

74. Castagnoli C., Trombotto C., Ariotti S. et al. Expression and role of IL-15 in post-burn hypertrophic scars // J. Invest. Dermatol. 1999. - Vol. 113. - P. 238-245.

75. Campos M., Szerenyi K., Lee M. et al. Keratocyte loss after corneal deepithelialization in primates and rabbits // Arch. Ophthalmol. 1994. - Vol. 112.-P. 254-260.

76. Cao Y., Zhou H., Tao J. et al. Keratinocytes induce local tolerance to skin graft by activating interleukin-10-secreting T cells in the context of costimulation molecule b7-hl // Transplantation. 2003. - Vol. 75. - P. 1390-1396.

77. Chang P., Rosenquist M.D., Lewis R.W. et al. A study of functional viability and metabolic degeneration of human skin stored at 4 degrees С // J. Burn Care Rehabil. 1998. - V. 19, N 1, Pt. 1.-P. 25-28.

78. Cook H., Stephens Ph., Davies J.K. et al. Defective ECM reorganization by chronic wound fibroblasts is associated with alterations in TIMP-1, TIMP-2 and MMP-2 activity // J. Invest. Dermatol. 2000. - Vol. 115. - P. 225-233.

79. Compton C.C, Regatier S, Seller G.R. et al. Human Merkel cells regeneration in skin derived from cultured keratinocyte growth // Lab. Invest. 1990. Vol. 62.-P. 233-241.

80. DiPersio C.M., Hodivala-Dilke K.M., Jaenisch R. et al. a3pl integrin is required for normal development of the epidermal basement membrane // J.Cell. Biol. 1997. - Vol. 137. - P. 729-742.

81. Fahy O., Porte H., Senechal S. et al. Chemokine-induced cutaneous inflammatory cell infiltration in a model of Hu-PBMC-SCID mice grafted with human skin // Am. J. Pathol. 2001. - Vol. 158. - P. 1053-1063.

82. Falanga V. Chronic wounds pathophysiologyc and experimental considerations // J. Invest. Dermatol. - 1993. - Vol. 100. - P. 721-725.

83. Falanga V., Margolis D., Alvarez O. et al. Rapid healing of venous ulcers and lack of clinical rejection with an allogeneic cultured human skin equivalent // Arch. Dermatol. 1998. - Vol. 134. - P. 293-300.,

84. Frazier K., Williams S., Kothapalli D. et al. Stimulation of fibroblast cell growth, matrix production and granulation tissue formation by connective tissue growth factor // J.Invest. Dermatol. 1996. - Vol. 107. - P. 404-411.

85. Fahmy F.S., Navsaria H.A., Frame J.D. et al. Skin graft storage and keratinocyte viability // Br.J. Plast. Surg. 1993. - V. 46, N4. - P. 292-295.

86. Fusenig N.E. Epithelial mesenchymal interactions regulate keratinocyte growth and differentiation in vitro. In: Leigh I., Lane В., Watt F., eds. // The Keratinocyte handbook. - Cambridge. - 1994. - P. 71-94.

87. Gentilhomme E., Neveux Y., Lebeau J. et al. Modulation of a fibrotic process induced by TGF-pi in dermal equivalents // Cell Biol. & Toxicology. 1999. -Vol. 15.-P. 229-238.

88. Ghazizadeh S., Taichman L. B. Multiple classes of stem cells in cutaneous epithelium: a lineage analysis of adult mouse skin // EMBO J. 2001. - Vol. 20. - P. 1215-1222.

89. Green H., Kehinde O., Thomas J. Growth of cultured human epidermal cells into multiple epithelia suitable for grafting // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1979. Vol. 76. - P. 5665-5668.

90. Green H. Regeneration of the skin after grafting of epidermal cultures // Lab. Invest. 1989. - Vol. 60. - P. 583-584.

91. Greenhalgh D.G. The role of apoptosis in wound healing // IJBCB. 1998. -Vol. 30.-P. 1019-1030.

92. Greenleaf G., Hansbrough J.F., Curent trends in the use of allograft skin for patients with bums and reflections on the future of skin banking in the United States // J. Bum Care Rehabil. 1994. - V. 15, N5. - P.428-431.

93. Hakkinen L., Westermarck J., Kahari V.M. et al. Human granulation-tissue fibroblasts show enhanced proteoglycan gene expression and altered response to TGF-J31. // J. Dent. Res. 1997. - Vol. 75.-P. 1767-1778.

94. Hill E., Boontheekul Т., Mooney D.J. Regulating activation of transplanted cells controls tissue regeneration // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2006. - Vol. 103.-P. 2494-2499.

95. Khouw I.M.S.L., Van Wachem P.B., Plantings J.A. et al. TGF-p and bFGF affect the differentiation of proliferating porcine fibroblasts into myofibroblasts in vitro // Biomater. 1999. - Vol. 20. - P. 1815-1822.

96. Kontio R., Salo A., Suuronen R. et al. Fibrous wound repair associated with biodegradable poly-L/D-lactide copolymer implants: study of the expression of tenascin and cellular fibronectin // J. Mater. Science. 1998. - Vol. 9. - P. 603-609.

97. Lang E., Schaefer B.M., Eickhoff U. et al. Rapid normalization of epidermal integrin expression after allografting of human keratinocytes // J. Invest. Dermatol. 1996. - Vol. 107. - P. 423-427.

98. Latijnhouwers M., Bergers M., Ponec M. et al. Human epidermal keratinocytes are a source of Tenascin-C during wound healing // J. Invest. Dermatol. 1997. - Vol. 108. - P. 776-785.

99. Latijnhouwers M.A.H.E., Bergers M., Veenhuis R.Th., et al. Tenascin-C degradation in chronic wounds is dependent on serine proteinase activity // Arch. Dermatol. Res. 1998. - Vol. 290. - P. 490-496.

100. Legrand C., Gilles C., Zahm J.-M. et al. Airway epithelial cell migration dynamics: MMP-9 role in cell-extracellular matrix remodeling // J. Cell Biol. 1999. - Vol. 146. - P. 517-529.

101. Li A., Pouliot N., Redvers R. et al. Extensive tissue-regenerative capacity of neonatal human keratinocytes stern cells and their progeny // J. Clin. Invest. — 2004. Vol. 113. - P. 390-400.

102. Liancun W., Pierce G.F., Galiano R.D. et al. Keratinocyte growth factor induces granulation tissue in ischemic dermal wound: importance of epithelial-mesenchymal cell interactions // Arc. Surg. 1996. - Vol. 131. - P. 660-666.

103. Liu J.Y., Hafner J., Dragieva G. et al. Autologous cultured keratinocytes on porcine gelatin rnicrobeads effectively heal chronic venous leg ulcers // Wound Repair Regen. 2004. - Vol. 12. - P. 148-156.

104. Maas-Szabowski N., ShimotoyodomeA., Fusenig N. E. Keratinocyte growth regulation in fibroblast cocultures via a double paracrine mechanism // J. Cell Sci.- 1999.-Vol. 112.-P. 1843-1853.

105. Makhluf H.A., Stepniakowska J., Hoffman S. et al. IL-4 upregulates Tenascin synthesis in scleroderma and healthy skin fibroblasts // J.Invest. Dermatol. 1996. - Vol. 107. - P. 856-859.

106. Mater K., Ehrhard G., Frever J. Antibacterical activity of cultured human keratinocytes // Arch. Dermatol. Res. 1992. - Vol. 284. - P. 119-121.

107. Malakhov S.V., Paramonov B.A., Vasiliev A.V. et al. Preliminary report of the clinical use of cultured allogeneic keratinocytes // Bums. 1994. - Vol. 20.-P. 463-466.

108. Moller-Pedersen Т., Li H.F., Petroll W.M. et al. Confocal microscopic characterization of wound repair after photo re frative keratectomy // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1998. - Vol. 39. - P. 487-501.

109. Moulin V., Auger F.A., Garrel D. et al. Role of wound healing myofibroblasts on re-epithelialization of human skin // Burns. 2000. - Vol. 26. - P. 3-12.

110. Moulin V., Castilloux G., Auger F.A. et al. Modulated response to cytokines of human wound healing myofibroblasts compared to dermal fibroblasts // Exp. Cell. Res. 1998. - Vol. 238. - P. 283-293.

111. Nagaoka Т., Kaburagi Y., Hamaguchi Y. et al. Delayed wound healing in the absence of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) or L-selectin expression // Am. J. Pathol. 2000. - Vol. 157. - P. 237-247.

112. Nugent M.A., Iozzo R.V. Fibroblast growth factor 2 (FGF-2) // IJBCB. -2000.-Vol. 32.-P. 115-120.

113. Pimay J.P., Vandenvelde C., Duinslaeger L. et al. HIV transmission by transplaniation of allograft skin: a review of the literature // Burns. 1997. -Vol. 23, N1,-P. 1-5.

114. Pilcher B.K., Sudbeck B.D., Dumin J.A. et al. Collagenase-1 and collagen in epidermal repair // Arch. Dermatol. Res. -1998. Vol. 290. - P. 37-46.

115. Reed M.J., Ferara N.S., Vernon R.B. Impaired migration, integrin function and actin cytoskeletal organization in dermal fibroblasts from a subset of aged human donors // Mech. Ageing and Development. 2001. - Vol. 122. - P. 1203-1220.

116. Rheinwald J.G., Green H. Serial cultivation of strains of human epidermal keratinocytes: The formation of keratinizating colonies from single ceils // Cell 1975. Vol. 6. - P. 331-344.

117. Rouabhia M. Skin regeneration after heterologous epidermal substitute grafting // Ann. Bums Fire Disasters. 1997. - Vol. 10. - P. 98-104.

118. Prunieras M., Regnier M., Schlotterer M. Nouveau procece de culture des cellules epidermiques humaines sur derme bomologue ou heterologue: Preparation de greffons recombines // Ann. Chir. Plast. 1979. - Vol. 24. - P. 357-362.

119. Sato Т., Kirimura Y., Mori Y. The co-culture of dermal fibroblasts with human epidermal keratinocytes induces increased prostaglandin E2 production and cyclooxygenase-2 activity in fibroblasts // J.Invest. Dermatol. 1997. - Vol. 109. - P. 334-339.

120. Schaffer M., Barbul A. Lymphocyte function in wound healing and following injury // Br. J.Surg. 1998. - Vol. 85. - P. 444-460.

121. Shah M., Revis D., Herrick S. et al. Role of elevated plasma TGF-pl levels in wound healing//Am. J. Pathol. 1999. - Vol. 154.-P. 1115-1124.

122. Singer A.J., Clark R.A.F. Cutaneous wound healing // New Engl. J. Med. -1999.-Vol. 341.-P. 738-746.

123. Smimov S.V., Vasiliev A.V., Paramonov B.A. et al. Seven year experience in the treatment of burn patients with allogenic cultured keratinocytes // Ann. Burns Fire Disasters.- 1999. - Vol. 12. - P. 212-216.

124. Stetler-Stevenson W.G. Matrix metalloproteinases in angiogenesis: a moving target for therapeutic intervention // J.Clin. Invest. 1999. - Vol. 103. - P. 1237-1241.

125. Streit M., Velasco P., Riccardi L. et al. Thrombospondin-1 suppresses wound healing and granulation tissue formation in the skin of transgenic mice // The EMBO Journal. 2000. - Vol. 19. - P. 3272-3282.

126. Stociim D. L. Stem cells in regenerative biology and medicine // Wound Repair Regen.- 2001. Vol. 9. - P. 429-442.

127. Spence R.J., Wond L. The enhancement of wound healing with human skin allograft // Surgical clinics of North America. 1997. - Vol. 77. - № 3. - P. 731-745.

128. Smirnov S.V., Vasiliev A.V., Paramonov B.A. et al. Seven-year experience in the treatment of bum patients with allogenic cultured keratinocytes // Annals of Bums and Fire disasters. 1999. - Vol. XII, N 4. - P. 212-216,

129. Terskikh V.V., Vasiliev A.V. Cultivation and transplantation of epidermal keratinocytes // Intern. Rev. Cytol. 1999. - Vol. 188. - P. 41-72.

130. Van de Berg J.S., Rudolph R., Hollan C. et al. Fibroblast senescence in pressure ulcers//Wound Repair Regen.-1998.-Vol. 6.-P. 38-49.

131. Zieske J.D., Guimaraes S.R., Hutcheon A.E. Kinetics of keratocyte proliferation in response to epithelial debridement // Exp. Eye Res. 2001. -Vol. 72.-P. 33-39.

132. Wainwright D., Madden M., JLuterman A. et al. Clinical evaluation of an acellular allograft dermal matrix in full-thickness burns // J. Bum Care Rehabil. 1996.-Vol. 17, N 2. - P.124-136.

133. Wilson S.E., He Y.-G., Weng J. et al. Epithelial injury induces keratocyte apoptosis: Hypothesized role for the interleukin-1 system in the modulation of corneal tissue organization and wound healing // Exp. Eye Res. 1996. - Vol. 62.-P. 325-338.

134. Wysocky A.B., Staiano-Coico L., Grinnell F. Wound fluid from chronic leg ulcers contains elevated levels of metalloproteinases MMP-2 and MMP-9 // J.Invest. Dermatol. 1993. - Vol. 101. - P. 64-68.