Восстановление эпителиальных тканей с использованием криоконсервированных жизнеспособных дермотрансплантатов и живого эквивалента кожи тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.27, доктор медицинских наук Ивашкин, Александр Николаевич

• Ивашкин, Александр Николаевич
• доктор медицинских наук
• 2009

Оглавление диссертации доктор медицинских наук Ивашкин, Александр Николаевич

Введение

Глава 1; Современные методы лечения раневых дефектов. Использование дермотрансплантатов в клинической практике (обзор литературы).

1.1. Структурно - функциональная характеристика нормальной ко- 16 жи.

1.2. Регенерация кожи. Характеристика межклеточных клеточно - 25 матриксных взаимодействий в процессе нормального заживления кожных ран.

1.3. Особенности патогенеза трофических язв и длительно незажи- 34 вающих ран.

1.4. Принципы лечения трофических язв и длительно незаживаю- 44 щих ран.

1.5. Использование кожных трансплантатов в клинической практике 50 и методы их хранения.

1.6. Живой эквивалент кожи. Реконструкция эпителиальных тканей 68 с использованием клеточных технологий.

Глава 2; Материалы и методы исследования.

2.1. Источники получения кожи и методика хранения жизнеспособ- 80 ных дермотрансплантатов.

2.2. Описание препарата «живой эквивалент кожи». Информация о 91 методе.

2.3. Характеристика клинических групп больных.

2.4. Клинические и лабораторные методы исследования.

2.4.1. Клинические методы исследования.

2.4.2.Динамическое измерение площади раневой поверхности.

2.4.3. Бактериологические исследования.

2.4.4. Цитологические, морфологические и иммуногистохимиче- 108 ские исследования.

2.4.5. рН -метрия ран.

2.5. Статистическая обработка результатов исследования.

Глава 3. Межклеточные и клеточно-матриксные взаимодействия при репарации раневых дефектов кожных покровов.

3.1. Особенности репаративных процессов в длительно незаживаю- 113 щих ранах и трофических язвах.

3.2. Межклеточные и клеточно-матриксные взаимодействия в ране- 126 вых дефектах кожных покровов при использовании криоконсерви-рованных жизнеспособных аллодермотрансплантатов.

Глава 4. Результаты использования криоконсервированных жизнеспособных аллодермотрансплантатов.

4.1. Результаты применения криоконсервированных жизнеспособ- 140 ных аллодермотрансплантатов в местном лечении длительно незаживающих ран.

4.2 Результаты применения криоконсервированных жизнеспособ- 160 ных аллодермотрансплантатов в местном лечении трофических язв.

Глава 5. Результаты использования криоконсервированных жизнеспособных аутодермотрансплантатов.

5.1. Результаты применения «утильных» криоконсервированных 182 жизнеспособных аутодермотрансплантатов при травматических отрывах конечностей.

5.2. Результаты применения криоконсервированных жизнеспособ- 196 ных аутодермотрансплантатов при лечении скальпированных и рвано - ушибленных ран.

5.3. Использование криоконсервированных жизнеспособных ауто- 205 дермотрансплантатов при этапном закрытии раневых дефектов.

Глава 6. Живой эквивалент кожи в местном лечении раневых дефектов.

6.1. Результаты применения живого эквивалента кожи в лечении ра- 227 невых дефектов.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Восстановление эпителиальных тканей с использованием криоконсервированных жизнеспособных дермотрансплантатов и живого эквивалента кожи»

Актуальность исследования: На протяжении всей истории медицины перед практикующими врачами стоит проблема лечения раневых дефектов, причем, как непосредственно после повреждения кожных покровов, так и через различные интервалы времени. Эта проблема остается чрезвычайно актуальной на фоне все возрастающего бытового травматизма, распространения локальных вооруженных конфликтов, природных и техногенных катастроф. Также необходимо учитывать ухудшение экологической обстановки, старение населения, «болезни цивилизации» (сердечно-сосудистые нарушения, метаболические расстройства, аллергизация и сенсибилизация населения, способствующие изменению иммунореактивных и неспецифических факторов защиты макроорганизма, появление все большего числа антибиотико-устойчивых микроорганизмов).

Рост числа ожогов и ран является общемировой тенденцией. Так, в» США ежегодно ожоги получает более 1,25 миллиона, человек, и не менее 6,5 млн. страдают хроническими ранами и язвами; которые являются следствием метаболических расстройств, сосудистой недостаточности. Лечение таких больных дорого, трудоемко и малоэффективно. На лечение одного больного в США тратится 10,0 тыс. - 15,0 тыс. долларов, используется около 5% коечного фонда американских госпиталей, а рынок лечения в 2000 году оценивался более 932 млн. долларов. Наша страна не является исключением. Еще в 1982 году Лунич В.Л. и Соскин Л.С. писали про трофические язвы и длительно незаживающие раны: «.Эта патология встречается у 2-5% взрослого населения, характеризуется длительностью и упорством течения, склонностью к рецидивам и приводит к полной или частичной потере трудоспособности в большей степени, чем туберкулез, сахарный диабет, ревматизм и травмы вместе взятые».

Применяемые в настоящее время традиционные методы лечения дают положительный эффект приблизительно в,75% — 80% случаев. При этом длительность лечения составляет, в среднем, 1,5-2 месяца, и не всегда происходит полная реэпителизация раневого дефекта. Достаточно часто развиваются рецидивы. Так, например, трофические язвы, возникшие на фоне варикозной болезни нижних конечностей, при оперативном методе лечения дают рецидивы в 4,8% - 31,6% случаев, при консервативном - в 15% - 80% и приводят к ухудшению качества жизни пациентов вплоть до получения инвалидности в 10-30% наблюдений (Charles Н., 2004; Welch H.J., 2004).

Такой разброс в данных не случаен, так как, не смотря на давность существования проблемы и многочисленные исследования, по настоящее время не определен четко даже временной фактор, по окончании которого длительно незаживающая рана считается трофической язвой. Некоторые исследователи называют срок 1,5 месяца, другие - 4-6 месяцев (Григорян А.В. и соавт., Васютков В.Я., Проценко Н.В., Лаврова О.Д., Цахаев А.Н.). Также нигде не уточняется, по истечении, какого времени рана становится длительно незаживающей. Все это приводит к сложностям не только в статистических исследованиях, но и в лечении пациентов.

Достигнутые в последние десятилетия успехи в области изучения молекулярных основ патологических процессов делают возможным не только понимание причин развития, но и позволяют активно влиять на течение и исход многих заболеваний. Определенные успехи имеются в исследовании и лечении ран. Создание новых, современных методов лечения основывается на активном вмешательстве в ход раневого процесса при помощи биологически активных веществ и активизации нормальных репаративных процессов.

Наиболее перспективным подходом к проблеме лечения ран и ожогов является биотехнологический, позволяющий значительно расширить арсенал методов лечения и улучшить результаты. Существующий спектр современных биотехнологических подходов и приемов достаточно широк. Однако, разработка и широкое клиническое внедрение отечественного, доступного для реального использования метода продолжает оставаться актуальным, так как существующие методы и средства местного лечения раневых дефектов, особенно у пациентов в тяжелом состоянии или в пожилом возрасте на фоне тяжелой сопутствующей патологии, не дают стойкого положительного эффекта и достаточно дороги. Одними из наиболее перспективных оказались биологические и биосинтетические средства, основанные на использовании аллогенных клеток и тканей. Несмотря на широкий выбор современных лекарственных средств и перевязочных материалов, в клинической практике нет искусственного покрытия, которое по своим физиологическим свойствам приближалось бы к коже человека (Бурмистров В.Н., 1986, Киселев И.В., 2000).

Во всех развитых странах мира сегодня успешно функционируют Банки тканей. В США в 1950 году для целей реконструктивной и пластической хирургии был организован Военно-морской банк органов и тканей. В настоящее время в США действует Ассоциация тканевых Банков, объединяющая региональные Банки различных тканей (на сегодняшний день по стране их насчитывается более тысячи) единой компьютерной сетью. Система Банков выполняет важные мобилизационные функции. Такие запасы позволяют, в частности, временно замещать пораженные кожные покровы (например при ожогах) на этапах эвакуации пострадавших или позволяют закрывать раневой дефект в период лечения. В настоящее время в США производится более 100000 трансплантаций аллогенной кожи, 500000 - аллогенной кости, 50000 - аллогенной роговицы ежегодно. В ходе оказания помощи пострадавшим от террористического акта в г.Нью-Иорке (11.09.2001г.) было использо

2 2 вано около 14 м донорской кожи и 200 м выделено в качестве неприкосновенного запаса на случай чрезвычайных ситуаций. Самый крупный Банк тканей создан в 304 армейском госпитале в Пекине (Китай). В нем хранится бол лее 200 м аллодермотрансплантатов. В голландском городе Beverwijk находится Европейский банк кожи, который обеспечивает практически все крупные ожоговые центры Старого Света (Васильев А.В., 2004).

В зарубежных банках кожи используется технология хранения кожи в глицерине, что не обеспечивает сохранения ее жизнеспособности при длительном хранении (Kearney J.N, 1998). Преимущества использования жизнеспособных дермотрансплантатов становятся более очевидны при лечении больных пожилого и старческого возраста, раненых и пострадавших в тяжелом состоянии, пациентов с тяжелой сопутствующей патологией, для которых любое оперативное пособие может привести к значительному ухудшению состояния и необратимым последствиям.

В нашей стране аллогенные ткани для лечения ран практически не применяются. Также отсутствуют структуры (Банки кожи), предназначенные для хранения тестированных запасов аллогенных тканей, отсутствуют доступные технологии заготовки, хранения и использования аллогенной кожи, хотя спрос на данные материалы есть. Годовые потребности только Московского ожогового центра НИИ скорой помощи им. Н.В.Склифосовского превышают 30 м ежегодно, а таких центров и специализированных отделений в нашей стране насчитывается не менее семидесяти (Васильев А.В., 2004).

Рост числа травм и ожогов, увеличение количества больных с трофическими язвами* и длительно незаживающими ранами, старение населения обуславливают необходимость поиска новых малотравматичных и относительно недорогих методов для местного лечения ран, что определяет актуальность данной проблемы. В связи с этим коллектив кафедры военно-полевой (военно-морской) хирургии Государственного института усовершенствования врачей МО РФ совместно с сотрудниками лаборатории проблем клеточной пролиферации Института биологии развития им. Н.К.Кольцова РАН на протяжении последних лет проводит научные исследования в сфере разработки и создания биологических и биосинтетических покрытий. Цель работы: Улучшить результаты лечения обширных раневых дефектов (в том числе, у пациентов с травматическими отрывами конечностей и открытыми переломами костей), длительно незаживающих ран и трофических язв путем разработки, обоснования и внедрения в клиническую практику современной технологии заготовки, хранения и использования криоконсервированных жизнеспособных дермотрансплантатов и живого эквивалента кожи.

Задачи исследования:

1. Провести морфологическое и иммуногистохимическое исследование клеточного и стромального компонентов длительно незаживающих ран и трофических язв различного генеза для выявления характерных особенностей и общих закономерностей их развития в зависимости от давности существования.

2. Изучить динамику репаративных процессов, а также механизмы, регулирующие межклеточные и клеточно-матриксные взаимодействия в процессе репарации в длительно незаживающих ранах и трофических язвах, при использовании криоконсервированных жизнеспособных аллодермотрансплан-татов.

3. Оценить клинические результаты при использовании криоконсервированных жизнеспособных аллогенных дермотрансплантатов для лечения* длительно -существующих ран и трофических язв, обосновать показания и противопоказания к применению разработанного метода.

4. Обосновать показания, оценить результаты применения криоконсервированных жизнеспособных аутологичных дермотрансплантатов при лечении пострадавших с травматическими отрывами конечностей (с дефицитом кожных покровов на пострадавшем сегменте) путем забора жизнеспособной кожи с ампутированного сегмента (в случае невозможности реимплантации), выявить противопоказания и осложнения, наметить методы профилактики.

5. Обосновать показания, оценить результаты применения криоконсервированных жизнеспособных аутологичных дермотрансплантатов при этапном закрытии обширных раневых дефектов, в том числе при открытых переломах костей, выявить противопоказания и осложнения, наметить методы профилактики.

6. Изучить динамику раневого процесса при использовании живого эквивалента кожи, обосновать показания, оценить результаты клинического применения, выявить противопоказания и осложнения.

7. Внедрить разработанный метод лечения обширных раневых дефектов, длительно незаживающих ран и трофических язв в клиническую практику.

Научная новизна

Установлено, что длительно незаживающие раны и трофические язвы, вне зависимости от факторов, обусловивших их развитие, характеризуются стереотипными изменениями со стороны состава воспалительного инфильтрата и внеклеточного матрикса: преобладанием клеток моноцитарно-макрофагального ряда в воспалительном инфильтрате в сочетании с недостаточным количеством Т-хелперов/Т-супрессоров; снижением содержания коллагена Ш типа, накоплением тенасцина и плазменной формы фибронек-тина, изменением типичной локализации ламинина, минимальным количеством миофибробластов в области раневого дефекта. Выявлены изменения со стороны медиаторных систем, регулирующих ход воспалительно-репаративной реакции: обнаружены повышенное накопление провоспали-тельных цитокинов (EL-lf3, MIP-loc/MIP-lp) и нарушение их нормального соотношения, отсутствие фиброгенных факторов роста (TGF-(3'i, bFGF) в сочетании с повышенной активностью матриксной металлопротеиназы - 9 в области раны.

Установлено, что данные изменения становятся выраженными в раневых дефектах, существующих более 3 месяцев. Данный интервал времени предлагается использовать для разделения определений «длительно незаживающая рана» и «трофическая язва».

Установлено, что после трансплантации криоконсервированных жизнеспособных дермотрансплантатов в ране происходит нормализация экспрессии провоспалительных цитокинов, активизация продукции факторов роста, снижение активности матриксной металлопротеиназы - 9. Это способствует формированию нормального внеклеточного матрикса, провизиональ-ноЙ1базальной мембраны и заживлению ран. Выявлены особенности репара-тивных процессов после трансплантации криоконсервированных жизнеспособных дермотрансплантатов - сохранение в течение всего процесса заживления раны инфильтрации моноцитами/макрофагами и минимального количества миофибробластов, поэтому заживление раны происходит без контракции и формирования рубца.

Разработана современная отечественная технология заготовки, хранения и клинического применения криоконсервированных жизнеспособных дермотрансплантатов (как аллогенных, так и аутологичных) с использованием оригинального консерванта «Криодерм». Данная технология позволяет максимально поддерживать жизнеспособность и морфо-функциональные свойства дермотрансплантатов и подразумевает использование нескольких температурных режимов хранения дермотрансплантатов.

Доказана высокая клиническая эффективность модифицированного отечественного живого-эквивалента кожи, разработанного в Институте биологии развития им. Н.К.Кольцова РАН. С учетом накопленного опыта в гель, содержащий фибробласты, была заключена биологически нетоксичная сетка, которая придает всей конструкции прочность, предотвращает горизонтальную контракцию геля и облегчает процесс трансплантации.

Практическая значимость:

Результаты исследований могут служить основой для разработки принципов и подходов широкого применения жизнеспособных криоконсервированных алло(ауто)дермотрансплантатов в клинической практике и военной медицине в целом. Данная технология и консервант «Криодерм» могут быть использованы при развертывании в нашей стране Банков кожных и клеточных трансплантатов. Применение новых биотехнологических методов воостановления кожного покрова позволяет выйти на более высокий уровень лечения, снизить летальность и инвалидизацию больных, сократить сроки лечения в стационарах и амбулаторных условиях, в целом поменять взгляды клиницистов на давно устоявшиеся принципы лечения длительно незаживающих ран, трофических язв И; обширных раневых дефектов. Особенно в тех случаях, когда тяжесть состояния больного или наличие сопутствующей патологии не позволяют проводить активную хирургическую тактику.

Результаты данной работы могут быть использованы в отделениях гнойной хирургии и травматологии как в больницах, так и в поликлиниках.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Длительно незаживающие раны и трофические язвы характеризуются похожими патологическими особенностями состава воспалительного инфильтрата и нарушениями в соотношении компонентов внеклеточного мат-рикса (соотношение провоспалительных цитокинов, дефицит фиброгенных факторов роста, дисбаланс в системе матриксных металлопротеиназ и их ингибиторов). Это препятствует репарации, создавая самоподдерживающуюся систему, функционирующую по принципу «порочного круга». Учитывая, что данные патологические изменения наиболее выражены для ран, существующих более 3 месяцев, целесообразно данный интервал времени использовать для разделения определений «длительно незаживающая рана» и «трофическая язва».

2. Закрытие длительно существующего раневого дефекта жизнеспособными криоконсервированными аллодермотрансплантатами приводит к восстановлению систем, регулирующих межклеточные и клеточно-матриксные взаимодействия в длительно существующих раневых дефектах. Происходит активизация репаративных процессов, которые приводят к восстановлению эпителиального покрова.

3. Результаты лечения пострадавших с дефицитом кожных покровов при травматических отрывах конечностей (в случае невозможности реимпланта-ции) могут быть улучшены путем использования криоконсервированных жизнеспособных аутодермотрансплантатов, заготовленных по разработанной методике с ампутированного сегмента.

4. Учитывая, что у пациентов с обширными раневыми дефектами крайне сложно добиться одновременной готовности раны к кожной пластике на всей площади, дефекта, целесообразно производить во время плановой операции аутодермопластики забор аутодермотрансплантатов «с запасом» и хранить излишки аутологичной кожи по разработанной методике. Это позволяет, по мере необходимости, производить повторную пластику жизнеспособной ау-тологичной кожи не занимая операционную и не травмируя дополнительно больного.

5. Использование разработанного живого эквивалента кожи позволяет улучшить результаты местного лечения раневых дефектов, особенно в тех случаях, когда тяжесть состояния больного или наличие сопутствующей патологии не позволяют проводить активную хирургическую тактику.

Работа выполнена на кафедре военно-полевой хирургии Государственного института усовершенствования врачей МО РФ, в лаборатории проблем клеточной пролиферации Института биологии развития им. Н.К. Кольцова РАН (руководители - д.б.н. Терских В.В., д.б.н. Васильев А.В.). Морфологические исследования проведены и консультированы в лаборатории клеточной и молекулярной патологии Московской Медицинской Академии им. И.М. Сеченова (заведующий - д.м.н. Иванов А.А.).

Апробация диссертационного материала: Материалы диссертации доложены и обсуждены на:

• 69 заседании секции военно-полевой хирургии Хирургического общества г.Москвы и Московской области.- М., 2000;

• Всеармейской научно-практической конференции «Особенности оказания медицинской помощи, лечения раненых и больных с боевой хирургической и терапевтической травмой в локальных войнах и вооруженных конфликтах». - СПб, 2000;

• Научно-практической конференции «Актуальные вопросы оказания медицинской помощи в городской многопрофильной клинической больнице», посвященной 125-летию городской клинической больницы №29 «Утоли моя печали».- М., 2000;

• Международном российско-германском симпозиуме «Хирургия повреждений мирного и военного времени».- М., 2001;

• П Конференции молодых ученых России с международным участием «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины» .- М., 2001;

18-м Европейском Конгрессе патологов.- Берлин, Германия, 2001; Всероссийской научной конференции «Актуальные проблемы современной тяжелой травмы», поев. 70- летию кафедры ВПХ ВМА. - СПб., 2001; Северо - кавказкой научно- практической конференции, посвященной 20-летию кафедры военно-полевой хирургии Ростовского государственного медицинского университета «Достижения и проблемы современной военно-полевой и клинической хирургии».- г.Ростов - на - Дону, 2002; Международном хирургическом конгрессе «Актуальные проблемы современной хирургии».- М., 2003;

Международной конференции «Хирургические инфекции: профилактика и лечение».- М., 2003;

Всероссийской конференции хирургов «Совершенствование специализированной медицинской помощи в многопрофильном стационаре» поев. 80-летнему юбилею профессора Петрова В.П.- М., 2003; 14 - международной конференции российского общества ангиологов и сосудистых хирургов. «Новые тенденции в сосудистой хирургии и флебологии». -г.Ростов-на Дону, 2003;

4 международном конгрессе по пластической реконструктивной и эстетической хирургии (IVICPRAS). - Ярославль, 2003;

Международной конференции «Хирургические инфекции: профилактика и лечение». - М., 2003;

Конференции посвященной 300-летию ГВКГ им. Н.Н. Бурденко «Ведущий многопрофильный госпиталь страны: основные функции, достижения и направления развития».- М., 2006;

3-м международном конгрессе «Современные технологии в травматологии и ортопедии».- М., РУДН.- 2006;

6 всеармейской международной конференции «Инфекции в хирургии мирного и военного времени».- М., 2006;

• Ш Международном салоне вооружения и военной техники «МВСВ-2008»

Оказание медицинской помощи подразделениями военно-полевой медицины в условиях полевого госпиталя». - М., 2008.

Внедрение результатов исследования.

Результаты исследования внедрены в учебный процесс кафедры военно-полевой (военно-морской) хирургии Государственного института усовершенствования врачей МО РФ, в лечебную работу отделения гнойной хирургии, травматологических отделений ГКБ №29 им. Н.Э.Баумана г.Москва, ГКБ г.Мытищи (Московская область).

По теме диссертации опубликовано 42 работы в центральной печати и региональных сборниках, в том числе опубликовано два учебно-методических пособия и две монографии:

• Хрупкин В.И., Ханевич М.Д., Щелоков A.JL, Ивашкин А.Н. Осложненные формы хронической венозной недостаточности нижних конечностей: М. «МедЭкспертПресс»; Петрозаводск: из-во «ИнтелТек».2003.-176 с.

• Хрупкин В.И., Ивашкин А.Н., Зубрицкий В.Ф., Артемьев А.А., Фоминых Е.М. Дерматопластика раневых дефектов: М.: Гэотар-Медиа,2009.-193 с.

Материалы диссертации использовались при организации первой в Российской Федерации и в странах СНГ «Медицинской лаборатории тканевых трансплантатов (банка кожных и тканевых трансплантатов)» на базе СПК Главного военного клинического госпиталя им. Н.Н. Бурденко МО РФ в соответствии с «Решением межведомственного совещания.» от 24.07.2004 г., утвержденного начальником ГВМУ МО РФ и директором Института биологии развития им. Н.К. Кольцова РАН.

Объём и структура работы: Диссертационная работа изложена на 312 страницах машинописного текста и состоит из введения, 6 глав, заключения, выводов, практических рекомендаций, указателя литературы (145 отечественных и 204 зарубежных источника). Работа иллюстрирована 27 таблицами и 81 рисунком.

Заключение диссертации по теме «Хирургия», Ивашкин, Александр Николаевич

выводы

1. Длительно незаживающие раны и трофические язвы характеризуются схожими патологическими особенностями состава воспалительного инфильтрата, нарушениями в соотношении компонентов внеклеточного матрикса, изменениями со стороны медиаторных систем, регулирующих ход воспалительно-репаративной реакции, что препятствует репарации, создавая самоподдерживающуюся систему, функционирующую по принципу «порочного круга».

2. Выявленные патологические изменения окончательно сформировываются в ранах эпителиальных тканей, существующих более 3 месяцев. Целесообразно термин «длительно незаживающая рана» использовать для ран эпителиальных тканей, существующих менее 3 месяцев, при более длительном использовать определение «трофическая язва».

3. Закрытие длительно существующего раневого дефекта эпителиальных тканей (длительно незаживающие раны, трофические язвы) криоконсервированными жизнеспособными аллодермотрансплантатами приводит к восстановлению механизмов, регулирующих межклеточные и клеточно-матриксные взаимодействия. В течение всего процесса заживления сохраняется инфильтрация области раны клетками моноцитарно/макрофагального ряда и минимальное количество миофибробластов, поэтому заживление раны происходит без контракции и формирования рубца.

4. У пострадавших с травматическими отрывами конечностей и дефицитом кожных покровов в случае невозможности реимплантации необходимо производить заготовку криоконсервированных жизнеспособных аутодермотрансплантатов с ампутированного сегмента. Это позволяет снизить сроки лечения на 12,6+4,2 дней, уменьшить частоту повторных хирургических обработок на 11,6%, не производить плановую аутодермопластику.

5. У пострадавших со скальпированными (рвано-ушибленными) ранами конечностей в случае значительного загрязнения раны следует произвести иссечение поврежденной загрязненной кожи с ее последующей обработкой, криоконсервированием и использованием по разработанной методике. При использовании данного подхода у 71,5% пострадавших аутодермопластика в плановом порядке не выполнялась и общая длительность лечения меньше на 9,3+2,3 дня.

6. У пациентов с обширными раневыми дефектами эпителиальных тканей крайне сложно добиться одновременной готовности раны к кожной пластике на всей площади дефекта, поэтому целесообразно во время плановой операции аутодермопластики производить забор аутодермотрансплантатов «с запасом» и хранить излишки аутологичной кожи по разработанной методике. Это позволяет производить первичную аутодермопластику в ранние сроки, по мере необходимости производить повторную пластику криоконсервированных жизнеспособных аутодермотрансплантатов, не занимая операционную и не травмируя дополнительно больного.

7. У пострадавших с открытыми инфицированными переломами нижних конечностей на фоне выраженных трофических расстройств кожных покровов необходимо производить остеосинтез аппаратами внешней фиксации и одновременно заготовку криоконсервированных жизнеспособных аутодермотрансплантатов. Это позволяет производить первичную аутодермопластику в ранние сроки и сократить сроки пребывания пациентов в стационаре на 12,7+5,3 дней.

8. Использование разработанного живого эквивалента кожи позволяет улучшить результаты местного лечения раневых дефектов эпителиальных тканей, особенно в тех случаях, когда тяжесть состояния пострадавшего или наличие сопутствующей патологии не позволяют проводить активную хирургическую тактику. Интенсивность уменьшения площади раневой поверхности приближается к нормальным значениям и составляет 4,2+0,2% в сутки.

Практические рекомендации. По забору и использованию криоконсервированных жизнеспособных дермотрансплантатов.

1. Забор кожи производится в течение 17 часов после смерти донора, но рекомендуется уменьшение этого интервала времени. Взятие кадаверной кожи осуществляется при помощи.электродерматома, с толщиной лоскута около 0,3 мм, с соблюдением правил асептики и антисептики. Обработка кожных покровов трупа перед взятием аллодермотрансплантата и забор дер-мотрансплантата проводится по стандартной методике.

2. Забор кожи рекомендуется осуществлять с переднебоковой поверхности туловища и конечностей, что связано с удобством обработки этих участков и забора кожных трансплантатов. Полученные биоптаты, с соблюдением правил асептики, переносятся в почкообразный тазик со стерильным раствором Хенкса. Избыток дермы удаляется и. в обязательном порядке производится перфорация лоскута. Дермотрансплантаты необходимо тщательно промыть в стеклянном флаконе с раствором Хэнкса, содержащим 2000 ед/мл пенициллина и 1 мг/мл стрептомицина, путем интенсивного взбалтывания-содержимого флакона. Затем дермотрансплантаты переносятся в стеклянные флаконы с консервантом «Криодерм» в соотношении 1:2. Флакон герметично закрывается и помещается в морозильную камеру с температурным режимом -18°С. Срок хранения - до 10 суток - связан с максимальным сроком хранения жизнеспособной кожи при данном температурном режиме хранения.

3. Размораживание консервированных дермотрансплантатов производить в герметично закрытых флаконах в водяной бане или под проточной водой при температуре +38°С.+42°С до полного исчезновения кристаллов льда, непосредственно перед проведением трансплантации.

4. Подготовка раневой поверхности к дермотрансплантации производится по общепринятой методике. При необходимости выполняется этапная неI крэктомия. Нет необходимости добиваться идеальной подготовки раны и полного очищения раневой поверхности, можно производить аллодермопластику на рану, где сохраняются незначительные участки некрозов. Лизиро-вавшиеся на этих местах участки дермотрансплантатов удаляются на перевязках, и в дальнейшем производится повторная пластика на эти участки.

5. Непосредственно перед проведением дермотрансплантации раневую поверхность, с которой удалены основные массивы некротизированных тканей, обрабатваются 3% раствором перекиси водорода, производится'осушение ран стерильными марлевыми салфетками. После этого производится наложение аллодермотрансплантата. Укладывать дермотрансплантат на рану следует без напряжения и без наложения дермотрансплантатов друг на друга, выкроенный лоскут не должен значительно выступать за края раны. Дермотрансплантат фиксируется к ране стерильной асептической атравматической сеткой, далее - стерильная, марля, пропитанная мазями на водорастворимой основе («Левосин», «Левомеколь»). Затем накладывается асептическая повязка. Если аппликация лоскута производится вблизи сустава; то рекомендуется произвести его иммобилизацию.

6. Первую перевязку необходимо выполнять на 1-е сутки. При* этом произвести удаление всех слоев повязки до атравматической сетки. Следует проявлять осторожность, так как фиксация дермотрансплантата на ране еще достаточно слабая. Произвести туалет раны 3% раствором перекиси водорода через атравматическую сетку. Затем наложить повязку с мазью «Левомеколь» или 0,06% гипохлоритом натрия. У больных с трофическими язвами на фоне варикозной болезни нижних конечностей, при отсутствии противопоказаний, в обязательном порядке произвести эластическую компрессию пораженной конечности.

7. Атравматическая сетка должна отторгнуться самостоятельно, как правило, на.3-5 сутки после дермотрансплантации, вместе с частичным отторжением эпидермиса, который сходит в виде тонкой белесовато-прозрачной пленочки. Нужно произвести удаление свободно снимаемого эпидермиса, специально снимать нет необходимости. Стерильную атравматическую сетку рекомендуется наложить снова и применять на дальнейших перевязках с целью дополнительной защиты-дермотрансплантата от механических повреждений при перевязках. Аллодермотрансплантат остается на месте пластики в течение нескольких дней или недель, пока не появятся признаки его нежизнеспособности. При необходимости производится повторная пластика. Как правило, чем длительнее существовал дефект и (или) чем больше площадь дефекта, тем больше требуется повторных наложений криоконсервированных жизнеспособных дермотрансплантатов.

Практические рекомендации по использованию «живого эквивалента кожи».

1. Внешне живой эквивалент кожи представляет собой гелеобразную субстанцию розового цвета, включающую синтетическую сетчатую основу. Поставляется» в чашках Петри диаметром 9 см в стерильной упаковке. Транспортировка осуществляется в термоизолирующих контейнерах. Условия хранения: в термостате при температуре от+26 до +37°С. Срок годности в указанных условиях составляет 48 часов. Критерии готовности-раневой поверхности аналогичны требованиям, предъявляемым к раневой поверхности перед аутодермопластикой.

2. Трансплантация производится простым одномоментным перенесением

2 2 трансплантата на рану из расчета 1 см трансплантата на 1 см раны. Ввиду использования в составе живого эквивалента кожи аллогенных клеток и специфичных механизмов восстановления кожного покрова после его трансплантации (постепенное замещение трансплантата собственными тканями рецепиента), ширина раневого дефекта не должна превышать 10 см.

3. Перед трансплантацией раны обрабатываются физиологическим раствором с гентамицином (0,16 мг/мл), а затем осушиваются стерильными салфетками. Применение перекиси водорода и любых растворов антисептиков запрещается. Трансплантат аккуратно переносится пинцетом на рану поверхностью, обращенной к, дну чашки Петри, в которой осуществляется, его транспортировка. После перенесения трансплантата на рану его перемещение по раневой поверхности не желательно.

4. Сверху на трансплантат накладывают в один слой перевязочное средство "Jelonet" (парафинизированная марля) так, чтобы захватывалось не менее 1-2 см от краев раны. Затем сверху без нажима накладывают 4-6 слойную сухую марлевую салфетку и производят бинтование. Повязка не должна быть давящей, так как это может повлечь продавливание трансплантата через "Jelonet" и его впитывание в повязку. При необходимости повязка фиксируется трубчатым бинтом.

5. Первая перевязка осуществляется на 5-е сутки после трансплантации. При обильном промокании повязки гнойным отделяемым перевязка производится немедленно. Последующие перевязки производятся по той же схеме (на 5-е сутки от предыдущей) при отсутствии признаков инфекционных раневых осложнений.

6. Признаками присутствия трансплантата на ране являются:

A) наличие налета по типу белой дымки;

Б) наличие тонкой корочки от серого до коричневого цвета, не плотно спаянной с подлежащими тканями:

B) наличие нежного, тонкого, не стратифицированного эпителия (по типу эпителия, наблюдаемого при краевой эпителизации).

Признаками лизиса трансплантата является не только его видимое отсутствие на ране, но также его разрыхление и приобретение им жидкой консистенции. В последнем случае остатки трансплантата смешиваются с раневым отделяемым. При этом такое раневое отделяемое характеризуется коричневым или розоватым цветом (что обусловлено включением в его состав остатков трансплантата) и отличается от гнойного отделяемого меньшей вязкостью и тянучестью, т.е., является более жидким.

7. На первой перевязке трансплантат легко раним. Производят послойное снятие повязки, не снимая "Jelonet". Затем производят удаление перевязочного средства "Jelonet", для чего производят его отделение, одновременно придерживая браншами ножниц сетчатый эндопротез.

8. Как правило, к моменту первой перевязки коллагеновый гель с клетками: проседает через сетчатый эндопротез, который в результате оказывается как бы лежащим на поверхности трансплантата: В этом случае производят аккуратное удаление сетчатого эндопротеза- путем; накручивания сетчатого эндопротеза на пинцет,, стараясь не захватить трансплантат. В случае, если сетчатый' эндопротез. плотно впаян в структуру трансплантата, его удаление производят на последующих перевязках.

9. На первой и второй перевязке, в случае определения признаков присутствия трансплантата, раны без обработки закрывают перевязочным средством "Jelonet", поверх которого накладывают марлевую салфетку, пропитанную физиологическим; раствором; с гентамицином(0,16 мг/мл). В; случае нат личия признаковшачинающегося лизиса трансплантата (разрыхление и приобретение им жидкой консистенции), перед наложением: "Jelonet" стерильными: сухими; салфетками-производят 1-3 легких промокательных движения до легкого подсушивания раны.

10. После формирования тонкого эпителия; видимого глазом, возможно применение салфеток с мазями на водорастворимой основе непосредственно поверх трансплантата.

11. Если на первой перевязке и в последующие 10 суток трансплантат визуально не определяется, производится повторная трансплантация. Если же в течение этих 10 суток наблюдается выраженная краевая^эпителизация раны и повторная трансплантация не требуется, то на последующих перевязках поверх перевязочного средства "Jelonet" накладывают 1-2 слойную салфетку с мазью на водорастворимой основе.

12. Наличие вязкого отделяемого белого, желтого или зеленого цвета свидетельствует о гнойном расплавлении трансплантата и требует туалета раны, с применением соответствующих средств на, усмотрение хирурга. Повторная трансплантация в этом случае производится только * после получения - результатов посева с раны и более качественной подготовки раневой поверхности.

Список литературы диссертационного исследования доктор медицинских наук Ивашкин, Александр Николаевич, 2009 год

1. Адамян А.А., Добыш С.В. и др. Биологически активные перевязочные средства в комплексном лечении гнойно-некротических ран //Методические рекомендации №2000/156 /Под ред. Федоров В;Д;, Чиж И.М.- М.,2000.-39 с.

2. Алексеев^ А.А., Пальцын А.А., Крутиков М.Г. и др. Лечение ожоговых ран с применением раневых покрытий "АКТИВТЕКС" // Учебное пособие для врачей. М.: РМАПО, 2000.- 13 с.

3. Арьев Т.Я. Термические поражения. Л.:Медицина,. 1966. - 704 с.

4. Батаков А.Н., Саевиц Н.В Лечение трофических язв нижних конечностей фетальными тканями человека// Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.-1998:-приложение 1- С.168.5: Блохин Н.Н. Кожная пластика. М.: Медгиз, 1955. - 226 с.

5. Братусь В. Д. Хирургическое лечение термических ожогов.- Киев, Гос-медиздат.-1963.-С.309-331.

6. Богданец Л.И., Девятых Е.А., Пашкин И.И., Кузнецов А.Н., Березина С.С. Роль рН среды в заживлении венозных трофических язв //Мат. международного хирургического конгресса «Новые технологии в хирургии».- Рос-тов-на-Дону.-2005.- С.265.

7. Богданец Л.И., Девятых Е.А., Пашкин И.И., Кузнецов А.Н., Колокольчи-кова Е.Г. Влияние уровня рН поверхности трофических язв на процесс заживления //Актуальные вопросы современной хирургии. Сборник научных трудов.- Астрахань.- 2006.- С. 192-193.

8. Будай А.С. Мед как мощное средство в лечении долго незаживающих ран //Врачебное дело.-1945.-№11-12.-С. 617.

9. Бурков В.И. Лечение инфицированных и длительно незаживающих ран и язв раствором соляной кислоты // Хирургический архив:-1960;-№4.-С.111-112.

10. Бурмистров:ВАллодермопластика при лечении обожженных// В кн.: Ожоги/ Под ред. Вихриева Б.С. и Бурмистрова В.М.- Д.: Медицина, 1986.-С. 142-153.

11. Васютков В.Я., Проценко Н.В. Трофические язвы стопы и голени.-М.:Медицина, 1993. 160 с.

12. Васильев А.В., Терских В.В. Действие эпидермального фактора роста на регенерацию эпидермиса in vitro // Доклады Академии Наук.-1994.- Т.334, N 5.-С. 660-662.

13. Васильев А. В;, Волошин А. В., Терских В: В. Роль фидерных клеток в прикреплении и росте кератиноцитов человека и крысы// Цитология.- 1991.-№33.-С. 84-89.

14. Васильев А.В., Логинов Л.П., Смирнов С.В. и др. Применение выращенных аллогенных эпидермальных пластов для лечения обожжённых // Травматология и ортопедия;.- 1994. №4. - С. 34-39.

15. Васильев А.В., Иванов А.А., Федоров Д.Н. Роль EGF-стимулированного эпидермиса в регуляции заживления ран // Архив патологии. —2002.-№1-С. 11-14.

16. Васильев А.В., Воротеляк Е.А., Киселев И.В., Терских В.В. Реконструкция эпителиальных тканей с использованием клеточных технологий // Вестник Российской АМН.- 2008.- №2.- С. 45-53.

17. Вишневский А.В. Новокаиновая блокада как метод воздействия на трофику тканей//Врачебное дело.-1955.-№Г.-С.1.

18. Воротеляк Е.А., Крохина Т.Б., Цитрин Е.Б., Васильев А.В., Терских В.В., Хрущов Н.Г. Нестин-положительные клетки базального слоя-эпидермиса человека в культуре //Доклады РАН'.- 2004.- Т. 394.- С. 555-557.

19. Воротеляк Е.А., Васильев А.В., Цитрин Е.Б., Терских В.В. Кератиноциты человека, длительно сохраняющие метку в культуре // Докл. РАН.- 2005.-Т. 402.-С. 418-420.

20. Воротеляк Е.А., Сатдыкова.Г.П., Васильев А.В., Терских В.В. Электронно-микроскопическое исследование мигрирующих колоний кератиноцитов // Изв. РАН. Серия биологическая.- 1996.- №4.-С. 485-489.

21. Воротеляк Е.А., Сатдыкова Г.П., Самарова А.И. и др. Распределение ДНК синтезирующих клеток в мигрирующих колониях эпидермальных кератиноцитов человека//Докл. РАН.- 1997.- Т. 354.- С. 829-831.

22. Воротеляк Е. А., Самарова А.В., Васильев- А.В., Терских В.В. Действие эпидермального фактора роста на миграцию клеток А-431 // Изв. РАН: Серия биологическая. 1997.- Т. 6.-С. 734—740.

23. Воротеляк Е.А., Шихвердиева А.Ш., Васильев А.В., Терских В.В. Фиб-робласты стимулируют эпителизацию коллагенового геля // Изв. РАН. Серия биологическая. 2002.- Т. 4.- С. 421-426.

24. Воротеляк Е.А., Леонова О.Г., Шинин В.В. и др. Рост эпидермальных кератиноцитов человека на коллегановом геле // Докл. РАН.- 1999.- Т.369.- С. 695-697.

25. Воротеляк Е.А., Чермных Э.С., Ткаченко С.Б., Васильев А.В., Терских В.В. Экспрессия и функция гена рбЗ в эпителиальных клетках // Известия РАН. Серия биологическая.- 2007.- № 4.- С. 389-393

26. Григорян А.В., Гостищев В.К., Толстых П.И. Трофическая язва.- М.: Медицина, 1972.-207 с.

27. Гостищев В.К., Хохлов A.M. и др. Использование низкочастотного ультразвука в лечение трофических язв//Вестник хирургии.-1983.-№3.-С.92-95

28. Гостищев В.К. Оперативная гнойная хирургия.- М.: Медицина, 1996.416 с.

29. Гостищев В.К. Инфекции в хирургии: Руководство для врачей,- М:: FO-ЭТАР МЕД, 2007,- 768 с.

30. Гришин И.Н. Сравнительная оценка консервирующих жидких сред в гистохимическом освещении// Матер. IV всесоюзной конф. «Трансплантация органов и тканей»,-М., 1966.-С. 472.

31. Директива начальника Главного военно-медицинского управления МО РФ ДМ-9, от 20 марта 1996 г «Об организаций заготовки и трансплантации донорских органов в военных лечебных учреждениях».- 24 с.

32. Джанелидзе ЮЛО. Свободная пересадка кожи. М.: Медгиз, 1952.- 66 с.

33. Жиляев Е.Г., Хрупкин В.И., Марахонич Л.А. и др. Применение воздушных плазменных потоков в военно-полевой хирургии и медицине катаст-роф//Военно-медицинский журнал.-1998.-№7.- С.55-61.

34. Заготовка и применение аллотрансплантатов кожи при лечении обширных ожогов//Пособие для врачей,- Нижний Новгород, 1998. С. 3-10, 18-20.

35. Заготовка, хранение и применение жизнеспособных кожных аллотранс-плантантов при лечении обширных глубоких ожогов // Методические рекомендации,- М., 2004.-10 с.

36. Иванов В.В., Овчаров С.Э. рН -метрия в процессе лечения венозных язв голени. М., 1992. - 8с. - Рукопись представлена Моск. Мед.стомат. инст. им. Н.А. Семашко.

37. Иванов А.А., Федоров Д.Н., Васильев А.В. и др. Роль EG F стимулированного эпидермиса в регуляции заживления ран // Арх. пат. 2002. - Т.1.-С.11-14.

38. Исаев Ю.И., Волкова Н.А., Гальченко С.Е. Криобиологические подходы к созданию покрытий для ран // Мат. Международной конф. «Достижения и перспективы развития криобиологии и криомедицины».- Харьков, 1988.-С.109.

39. Истомина И.С. Комплексное лечение хронической венозной недостаточности.// Мат. практ. конф. «Актуальные вопросы физиотерапии и традиционной медицины».- М., 2005. С.39-52.

40. Калинин М.Р. Комплексное лечение язв и длительно незаживающих ран нижних конечностей у больных сахарным диабетом: Дис.канд. мед. наук.-Москва, 1999. 179 с.

41. Катаев А.А., Попов С.М. Комплексное лечение больных с трофическими язвами, инфицированными и длительно незаживающими ранами// Вопросы клинической медицины: Сборник научных трудов. Пермь, 1995.- С. 177178.

42. Кириенко А.И., Кошкина В.М., Богачева В.Ю Амбулаторная ангиология. Руководство для врачей.- М.: Литтерра, 2007.- 328 с.

43. Кирпатовский В.И. Основные проблемы криоконсервации органов// Итоги науки и техники: Сборник научных трудов. М., 1987.- Т.8. - С. 140181.

44. Кирпатовский В.И. Механизмы развития1 и принципы профилактики низкотемпературного повреждения консервированных почек: Автореф. дис. д-ра мед. наук.- М., 1994. 41 с.

45. Kиceлeв^ И.В. Медико-биологическая оценка жизнеспособности крио-консервированной кожи: Дис.канд. мед. наук.- М., 2000.- 146 с.

46. Коваленко П.П. Консервирование и аллотрансплантация кожи// Тез.докладов УП всесоюзной конф. по пересадке органов и тканей «Трансплантация тканей в восстановительной хирургии».- Ростов-на-Дону, 1976.-С.86-87.

47. Колосов Н.Г. Использование фетальных клеток и тканей в лечение поверхностных ран и трофических язв// Бюллетень экспериментальной биологии шмедицины.- 1998.- приложение 1.- С. 128-129.

48. Кузин М.И., Аничков М.Н., Золотаревский В.Д. и др. Патогенез и лечение длительно незаживающих язв при заболеваниях сосудов конечностей.// Хирургия.- 1979.- №3.- С. 24-31.

49. Кузин М.И., Костюченко Б.М. Лечение в управляемой абактериальной среде гнойной хирургической инфекции// Тез. Докл. «XXX Всесоюзный съезд хирургов».- Минск, 1981. С.21-22.

50. Кузин М.И., Шимкевич Л.Л. Патогенез раневого процесса//В кн.: Раны и раневая инфекция. Москва,1990. - С.113-114.

51. Кудрявцев Б.П., Чернецов А.А., Марахонич Л.А. Клинико-морфологическая характеристика результатов применения плазменного потока воздуха для лечения огнестрельных ранений конечностей // Медицина катастроф.- 1998.-№1.- С. 65-66.

52. Кусаинов М.И. Результаты аллопластики в лечении гнойных ран и трофических язв// Медицина и экология.-1998,- №4.-С.48-50.

53. Колосов Н.Г. Использование фетальных клеток и тканей в лечение поверхностных ран и трофических язв // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1998. Приложение 1. - С. 128-129.

54. Лаврова О.Д. Итоги и сравнительные данные лечения длительно незаживающих ран и язв по материалам института// Горьковский НИИ восстановительной хирургии, ортопедии и травматологии: Труды.- Горький,1956.- С.68-78.

55. Лечение трофических язв венозной этиологии: Пособие для врачей. Под. ред. В.С.Савельева.- М.: НЦССХ им. А.Н.Бакулева, 2000. 22 с.

56. Липницкий Е.М. Лечение трофических язв нижних конечностей.- Ml:-Медицина, 2001.-160 с.

57. Лисин С.В., Зверев А.А., Латонов В.В., Поляев А.Ю. // Отдаленные результаты хирургического лечения IV степени хронической артериальной недостаточности нижних конечностей. // Хирургия. 2007. - №6 - С. 56-61.

58. Логинов Л.П. Особенности свободной пересадки кожи при травматических дефектах // Мат. конф. «Пластическая хирургия при ожогах и ранах». -М., 1994.-С. 49-51.

59. Онучин Е.Г, Лечение трофических язв различной этиологии и длительно незаживающих ран с использованием низкоинтенсивного некогерентного красного света и фотосенсобилизатора - метиленового синего: Дис. . канд. мед. наук. - Н. Новгород, 1992; - 119 с.

60. Осинцев Е.Ю., Пути улучшения результатов свободной аутодермопластики раневых дефектов мягких тканей.//Межвузовский сборник научных трудов. Саратов, 1996. - С. 170-171.

61. Ошибки, опасности и осложнения в хирургии вен: Руководство для врачей. Под ред. чл.-кор. РАМН проф. Шевченко Ю.Л.- СПб., Питер.- 1999.-320 с.

62. Ожоги у детей: Под ред. Карваял Х.Ф., Парке Д.Х.: Пер. с англ. -М.: Ме-дицииа.-1990.- С.238-249.

63. Пальцев,М:А., Аничков Н:М.Патологическая;анатомия. М.: Медицина, 2001.-680 с.

64. Пальцев М.А., Иванов А.А. Межклеточные взаимодействия. М.: Медицина. - 1995. - 224 с.

65. Парамонов Б.А., Порембский Я.О., Яблонский B.F. Ожоги: Руководство для врачей. СПб.: СпецЛит, 2000. - 480 с.

66. Пауков B.C., Салтыков Б.Б., Ермакова H;F., Шашлов С.В. Патогенетические аспекты хронического воспаления. // Арх. Патологии. —1998. №1. - С. 34-39.

67. Петров В.И; Свободная пересадка кожи (показания и техника). Л.: Медицина; 1964.-146 с.

68. Пекшев А.В.,Козлов Н.П., Вагапов А.Б. и др. «Плазон»- аппарат для* хирургии. и NO-терапии // Мат. научно-практ. конф. «NO- терапия: теоретические аспекты, клинический опыт и проблемы применения экзогенного оксида азота в медицине».- Mi, 2001;-С. 63-66.

69. Пожарицкая М.М., Руднева Е.В., Попкова Н.А. и др. Применение клеточных технологий для повышения эффективности хирургического лечения парадонтита // Пародонтология. 2004.-№ 3.- С. 3-10.

70. Раны и раневая инфекция. Руководство для врачей: Под ред. чл.-кор. АМН проф. Кузина М.И. М.: Медицина. - 1990. - 592 с.

71. Рэ. Л. Консервация жизни холодом: Пер с франц. М.: Госмедиздат, 1962. - 175 с.

72. Роговая О.С., Васильев А.В., Киселев И.В., Терских В.В. Использование фибробластов человека, выращенных на микроносителях, для формирования эквивалента-соединительной ткани// Онтогенез.- 2004.-Т. 35.-С. 105-109.

73. Руднева С.П, Голубков С.П., Гаряев А.А. и др. Контракция коллагеново-го геля фибробластами эмбриона человека: влияние факторов роста клеток // Биол. Мембраны.- 1990.- № 7. С. 1283-1288.

74. Савельев С.В., Думпе Э.П. Болезни магистральных вен. М.: Медицина,1972.- 440 с.

75. Сергеев I I. А. Комплексное лечение венозных трофических язв нижних конечностей // Вестник хирургии им. И.И. Грекова.- 2007.- №5.- С.52—56.

76. Сергиенко Н.Ф., Девятов А.С., Шаплыгин JI.B. и др. Лечение мочевых свищей с применением культуры аллогенных фибробластов // Урология,-1999.- Т. 121.- С. 44-47.

77. Серов В.В., Пауков B.C. Воспаление: Руководство для врачей. М.: Медицина. - 1995. 640 с.

78. Серов В;В., Шехтер А.Б. Соединительная ткань (функциональная морфология и общая патология). М.: Медицина. - 1981.- 312 с.

79. Синявский М.М. Трофические язвы нижних конечностей. — Минск,1973.- 231 с.

80. ЮГ. Слостин С.М. Плазменные потоки в комплексном лечении открытых переломов длинных трубчатых костей, осложненных раневой инфекцией: Дис.канд. мед. наук.-М., 1997.- 143 с.

81. Смит О. Биологическое действие замораживания и переохлаждения.- М:: Изд. иностр. литер., 1963.- 505 с.

82. Смирнов С.В., Киселев И.В., Васильев А.В., Терских,В.Б. Современные методы клеточной терапии при лечении-ожогов // Хирургия.- 2003.- №12.- С. 58-62.

83. Смирнов С.В., Киселев И.В., Роговая О.С. и др. Восстановление кожного покрова путем трансплантации выращенных кератиноцитов // Бюл. экспер. биол. 2003. - Т. 135.- С. 711-713.

84. Соколов В.П. Комплексное лечение трофических язв нижних конечностей, вяло гранулирующих и длительно незаживающих ран// Лазерная медицина.- 1999.-№1.-С.38-39.

85. Стручков В.И., Григорян А.В., Гостищев В:К. Гнойная рана.- М.: Медицина, 1975. 311 с

86. Стручков В.И:, Гостищев В.К. Хирургическая инфекция. Руководство для врачей.- М.: Медицина, 1984.- 560 с.

87. Султанов И.А Комплексное лечение трофических язв и длительно незаживающих ран лазерным излучением и полиферментными раневыми покрытиями: Автореф. дис. канд. мед. наук.- Таш. мед. институт, 1996,- 22 с.

88. Терских В.В., Васильев А.В. Эпидермальные кератиноциты человека и животных: Проблемы культивирования и трансплантации. М.: Наука, 1995. - 103 с.

89. В.В.Терских, А.В.Васильев Стволовые клетки эпидермиса // Известия РАН, Серия биологическая. 2001. - №6. - С. 738-744.

90. Терских В.В., Васильев А.В., Воротеляк Е.А. Структурно-функциональные единицы эпидермиса // Известия РАН, Серия биологическая. 2003. - № 6. - С. 645-649.

91. Терских В.В., Васильев* А.В., Воротеляк Е.А. Стволовые клетки: эволюция концепции // Вести дерматологии. 2005. - № 2. - С. 4-8.

92. Терских В.В., Васильев А.В. Апоптоз и дифференциация эпидермальных кератиноцитов // Онтогенез. 2005. - № 36. - С. 85-89.

93. Терских В.В., Васильев А.В., Воротеляк Е.А. Ниши стволовых клеток // Известия РАН. Серия биологическая. 2007. - № 3. - С. 261-272.

94. Терских В.В., Васильев, А.В. Воротеляк Е.А. Поляризация и асимметричное деление стволовых клеток // Цитология.-2007.-Т.49, №11.-С.933-938.

95. Терских В.В., Воротеляк Е.А, Васильев А.В. Сохранение генетической информации в стволовых клетках// Генетика. 2008. -Т.44, №3. - С.305-308.

96. Тимошевская И.Л. Клинико-иммунологические подходы к лечению трофических язв идлительно незаживающих ран: Дис.канд. мед. наук. Ростов на Дону, 1991.- 234 с.

97. Толстых П:И. Протеолитические ферменты в комплексном лечении трофических язв: Дис.канд. мед. наук.- Mi, 1970. 277 с.

98. Федоров Д.Н. Межклеточные и клеточно-матриксные взаимодействия при репарации длительно незаживающих ран: Дис.канд. мед. наук.- М., 2002. 107 с.

99. Федоров Д.Н., Васильев А.В., Иванов А.А. Морфологическая и иммуно-гистохимическая характеристика репаративных процессов в длительно незаживающих ранах// Архив патологии.-2002.-№1.-С. 8-11.

100. Фоминых Е.М. Использование криоконсервированных жизнеспособных аллодермотрансплантатов и гелевых повязок в комплексном лечении обширных и длительно незаживающих ран (клиническое исследование): Дис.канд. мед. наук.- М., 2003. 158 с.

101. Фрешни Р. Культура животных клеток. Методы: Пер с анг.- М., Мир, 1989.- 332 с.

102. Фучко В.И. О консервативном лечении трофических язв и длительно незаживающих ран // Клиническая хирургия. 1968. - № 5.-С. 61-62.

103. Хрупкин В.И., Жиляев Е.Г. Плазменные потоки в местном лечении рати раневых поверхностей // Медицина катастроф. 1999.- №1-2. - С. 45-49.

104. Хрупкин В.И., Низовой А.В., Леонов С.В. Использование фибробластов для лечения гранулирующих ран // Военно-медицинский журнал.-1998;-№!.-G.38-42. '

105. Хрупкин В.И;, Писаренко Л.Вг. Особенности комплексного лечения раневой- инфекции при тяжёлой сочетанной травме // Мат. III всеармейской конф. с международным участием «Инфекция в хирургии 1 проблема современной медицины». М;, 2002. - С. 24 -31.

106. Цахаев А.Н. Хирургическая тактика при длительно незаживающих ранах и язвах культей после первичных (предварительных) ампутаций: Дис.канд. мед. наук. Л., 1990.-146 с.

107. Цопов А.В. Свободная аутодермопластика трофических язв нижних конечностей у больных пожилого и старческого возраста// Реконструктивные и пластические операции в общехирургической клинике: Сборник статей. -Нижний Новгород, 1993. С.52. .

108. ЦоповгА^В; Свободная аутодермопластика//Анналы хирургии. 1998; -№5. - С.72-74.

109. Цуцаева А.А., Петренко Т.Ф. Криоконсервация культивируемых клеток животных// В кн.: Методы культивирования клеток.- Л.: Наука.- 1988.- С.63-69.

110. Чубарова А.С. Лечение больных хроническими пиококковыми язвами под ляписно-танниновой коркой//Вестник венерологии.- 1953.- №6.-С.31.

111. Хрупкин В.И., Низовой А.В„ Леонов С.В. и др. Использование фибробластов для лечения гранулирующих ран // Воен. мед. журн.- 1998.- №1.- С. 38-42.

112. Шехтер А.Б., Кабисов Р.К., Пекшев А.В, и др. Экспериментально-клиническое обоснование плазмодинамической терапии ран оксидом азота// Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.- 1998.- №8.-С. 210215.

113. Шехтер А.Б., Серов В.В. Воспаление, адаптивная регенерация и дисре-генерация (анализ межклеточных взаимодействий) // Арх. Патологии. — 1991. №7. - С.7 - 14.

114. Шумаков В.И. Механизмы адаптации трансплантированных органов// Вестник Российской Академии Наук.- Т.66.- N12.-1996.-C. 1072-1078.

115. Щелоков A.JI. Осложненные формы хронической венозной недостаточности нижних конечностей (патогенез, диагностика, лечение, профилактика): Дис.д-ра мед. наук.- М., 2004.- 265 с.

116. Яругский Е.Е. Термические ожоги. Ташкент: Медицина, 1987.-С. 119123.14580 лекций по хирургии.- под ред. B.C. Савельева.- М.: Литтерра, 2008.912 с.

117. Aktas G., Kayton R. Ultrastructural immunolocalization of basic fibroblast growth factor in fibroblasts and extracellular matrix // Histochem. Cell Biol. -2000. Vol.113. -P.227 - 233.

118. Andersen J.L., Ehlers N. Chemotaxis of human keratocytes is increased by PDGF-BB, EGF, TGF-a, aFGF, IGF-I and TGF-|3 // Curr. Eye Res. 1998. -Vol.17.-P.79-87.

119. Andersen J.L., Leder Т., Ehlers N. Keratinocyte migration and peptide growth factors: the effect of PDGF, bFGF, EGF, IGF-I, and TGF- (3 on human keratinocyte migration in a collagen gel // Curr. Eye Res. 1997. - Vol.16. - P.605 - 613.

120. Anselme K., Bacques C., Charriere G. et al. Tissue reaction to subcutaneous implantation of a collagen sponge/ A histological, ultrastractural, and immunological study // J. Biorned. Mater. Res. 1990. - Vol.24.- P. 689-703.

121. Aubock J., Irschick E., Romani N. et al. Rejection, after a slightly prolonged survival time, of Langerhans cell-free allogeneic cultured epidermis used for wound coverage in humans // Transplantation. 1988. - Vol. 45.- P. 730-737.

122. Bata-Csorgo Z., Cooper K.D., Ting K.M. et al. Fibronectin and a5 integrin regulate keratinocyte cell cycling // J. Clin. Invest. 1998. - Vol.101. - P.1509 -1518.

123. Banks-Schlegel S., Green H. Involucrin synthesis and tissue' assembly by keratinocytes in.natural and) cultured human epithelia // Cell Biol. 1981. - Vol. 90. - P. 732-737.

124. Barrandon Y., Green H. Three clonal types of keratinocyte with different capacities for multiplication // Proc. Natl. Acad. Sci. USA^ 1987. - Vol. 84.- P. 2302-2306.

125. Ben-Bassat H., Strauss N., Ron M. et al. Transplantation performance of human skin cryopreserved by programmed or stepwise freezing and1 stored' at -80 degrees С or -180 degrees C//J. Burn Care Rehabil.- 1996.- V. 17, N5.- P:421-428.

126. Bell E., IvarssonB., Merrill C. Production of a tissue-like structure by contraction'of collagen lattices by human fibroblasts of different proliferate potential in vitro // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1979. Vol. 76. - P. 1274-1278.

127. Bissell M J., Hall G., Parry G. How does extracellular matrix direct gene expression // J. Theoret. Biol. 1982. - Vol. 99. - P.31 - 68.

128. Border W.A., Noble N.A. TGF-(3 in kidney fibrosis: A target for gene therapy // Kidney Int. 1997. - Vol.51. - P. 1388 - 1396.

129. Border W.A., Noble N.A. Transforming growth factor (3 in tissue fibrosis // New Engl. J. Med. 1994. - Vol.331. - P. 1286 - 1293.

130. Border W.A., Noble N.A., Yamamoto T. et al. Antagonists of transforming growth factor-(3: A novel approach to treatment of glomerulonephritis and prevention of glomerulosclerosis // Kidney Int. 1992. - Vol.41. - P.566 - 570.

131. Border W.A., Okuda S., Nakamura T. Extracellular matrix and glomerular diseases // Seminars in Nephrology. 1989. - Vol.9. - P.307 - 317.

132. Border W.A., Ruoslahty E. Transforming growth factor P in diseases: The dark side of tissue repair // J. Clin. Invest. - 1992. - Vol.90. - P.l - 7.

133. Borradori L., Sonnenberg A. Structure and function of hemidesmosomes: More than simple adhesion complexes // J. Invest. Dermatol. 1999. - Vol.112. -P.411-418.

134. Bondoc C.C., Burke J.F. Clinical experience with viable frozen human skin and a frozen skin bank// Arm. Surg.- 1971.- V. 174; N3.- P.371 -382.

135. Bruck J.C., Buttemeyer R., Grabosch A., Weyer A. Indication for and results of the application of glycerol-preserved homologous split-thickness skin following burns // Beitr. Orthop. Traumatol. 1990.- V.37, N9.- P.504-506.

136. Boyce S.T., Ham R.G. Cultivation, frozen storage, and clonal growth of normal human epidermal keratinocytes in serum-free media // J. Tissue Cult. Meth.-1985.- Vol. 9.- P. 83-93.

137. Bugge Т.Н., Flick M.J., Danton M.J.S. et al. Urokinase-type plasminogen activator is effective in fibrin clearance in the absence of its receptor or tissue-type plasminogen activator // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. - Vol.93. - P.5899 -5904.

138. Burgeson R.E. New collagen, new concepts // Ann. Rev. Cell Biol. 1988. -Vol.4.-P.551 -577.

139. Castagnoli C., Trombotto C., Ariotti S. et al. Expression and role of IL-15 in post-burn hypertrophic scars // J. Invest. Dermatol. 1999. - Vol.113. - P.238 -245.

140. Calimberti M., Bencini P.L., Ulcere deyri arti inferiori nella insufficienza venosa cronika // Minerva Chin.-1989.- Vol. 44.- № 12.- P. 1677-1679.

141. Compton C.C. Current concepts in pediatric burn care. The biology of cultured epithelial autografts: an eight-year study in pediatric burn patients // Eur. J. Pediatr. Surg. 1992. - Vol. 2. - P. 216-222.

142. Campos M., Szerenyi K., Lee M. et al. Keratocyte loss after corneal deepithe-lialization in primates and rabbits // Arch. Ophthalmol.- 1994.- Vol. 112.- P. 254260.

143. Cao Y., Zhou H., Tao J. et al. Keratinocytes induce local tolerance to skin graft by activating interleukin-10-secreting T cells in the context of costimulation molecule b7-hl // Transplantation. 2003. - Vol. 75. - P. 1390-1396.

144. Chang P., Rosenquist M.D., Lewis R.W., Kealey G.P. A study of functional viability and metabolic degeneration of human skin stored at 4 degrees С // J. Burn Care Rehabil. 1998.- V.19, N 1, Pt. 1.- P.25-28.

145. Chiquet-Ehrismann R. What distinguishes tenascin from fibronectin // FASEB J. 1990. - Vol. 04. - P. 2598 - 2604.

146. Cram A.E., Domayer M.A. Short-term preservation of human autografts // J. Trauma. 1983.- V.23, N10.- P.872-873.

147. Coffey R.J., Derynck R., Wilcox J.N. et al. Production and autoinduction of transforming growth factor in human keratinocytes // Nature (Lond.).- 1987.-V.328. P.817-820.

148. Cook H., Stephens Ph., Davies J.K. et al. Defective ECM reorganization by chronic wound fibroblasts is associated with alterations in TIMP-1, TIMP-2 and MMP-2 activity // J. Invest. Dermatol. 2000. - Vol. 115. - P.225 - 233.

149. Cotran R.S., Pober J.S. Effect of cytokines on vascular endothelium: their role in vascular immune injury//Kidney Int. -1989.-Vol.35.-P.969 975.

150. Contard P., Bartel R.L., Jacobs II L. et al. Cultured keratinocytes and fibroblasts in a three-dimensional mesh results in epidermal differentiation and formation of a basal lamina-anchoring zone // J.V. Invest Dermatol. 1993.- V.100, N 1. - P.35-39.

151. Compton C.C., Gill J.M., Bradford D.A. et al. Skin regeneration from cultured epithelial autografts on full- thickness burn wounds from 6 days to 5 years after grafting // Lab. Invest. 1989. - Vol. 60. - P. 600-612.

152. Compton C.C, Regatier S, Seller G.R., Landry D.B. Human Merkel cells regeneration in skin derived from cultured keratinocyte growth // Lab. Invest. 1990. -Vol. 62.- P. 233-241.

153. Crawford M. and Cotton R. Viability of skin biopsies stored at -700C // Am. J. Hum. Genet. 1992.- V.50, N4.- P.875-876.

154. Cuono C.B., Langdon M.D., Birchall N. et al. Composite autologous-allogeneic skin replacement: development and clinical application // Plast. Re-constr. Surg. 1987.- V.80, N6.- P.626-635.

155. DiPersio C.M., Hodivala-Dilke K.M., Jaenisch R. et al. a3(3l integrin is required for normal development of the epidermal basement membrane // J.Cell. Biol. 1997. - Vol.137. - P.729 - 742.

156. DiPietro L.A., Nissen N.N., Gamelli R.L. et al. Thrombospondin-1 synthesis and function in wound repair // Am. J.Pathol. 1996. - Vol.148. - P.1851 - 1860.

157. Fahy O., Porte H., Senechal S. et al. Chemokine-induced cutaneous inflammatory cell infiltration in a model of Hu-PBMC-SCID mice grafted with human skin // Am. J. Pathol. 2001. - Vol.158. - P. 1053 - 1063.

158. Falanga V. Chronic wounds pathophysiologyc and experimental considerations // J. Invest. Dermatol. - 1993. - Vol! 100. - P.721 - 725.

159. Falanga V., Margolis D., Alvarez O. et al. Rapid'healing of venous ulcers and lack of clinical rejection with an allogeneic cultured human skin equivalent // Arch. Dermatol: 1998. - Vol.134. - P.293 - 300.

160. Frazier К., Williams S., Kothapalli D. et al. Stimulation of fibroblast cell growth, matrix production and granulation tissue formation by connective tissue growth factor // J.Invest. Dermatol. 1996. - Vol.107. - P.404 -411.

161. Ding Y.L. Khun-Mao Khan. Advances in the treatment of burn wounds in China // Acta Chirurgiae Plasticae. 1989.- V.31, N2.- P.75-81.

162. Fahmy F.S., Navsaria H.A., Frame J.D. et al. Skin graft storage and keratino-cyte viability // Br.J. Plast. Surg. 1993.- V.46, N4.- P.292-295.

163. Fleischmajer R., Contard P., Schwartz E. et al. Elastin-associated micro fibrils (10 nm) inthree-dimentional fibroblast culture // J.Invest. Dermatol. 1991.-V.97, N6. - P.638-643.

164. Franzi А. Т., D'Anna F., Zicca A., Trabucchi E. Histological evaluation of human cultured epithelium before and after grafting // Bums.- 1992.- Vol. 18.-P. 26-31.

165. Freedlander E., Boyce S., Ghosh M. et al. Skin banking in the UK: the need of proper organization // Burns. 1998.- V.24, N 1.- P. 19-24.

166. Fusenig N.E. Epithelial mesenchymal interactions regulate keratinocyte growth and differentiation in vitro. In: Leigh' I., Lane В., Watt F., eds. // The Keratinocyte handbook. - Cambridge. - 1994. - P. 71-94.

167. Gabbiani G. The biology of the myofibroblast // Kidney Int. 1992. -Vol.41. -P.530 - 532.

168. Gabric M., Dekaris J., Suman Z., Karaman Z., Mravicic J. The Influence of Tissue Culture on Corneal Immunogenicity // Exp. Eye Res. 1999.- Vol. 68. - P. 277-289.

169. Gallico G.G., O'Connor N.E., Compt on C.C. et al. Permanent coverage of large burn wounds with autologous cultured human epithelium // N. Engl. J. Med. 1984. Vol. 311.-P. 448-454.

170. Ghazizadeh S., Taichman L. B. Multiple classes, of stem cells in cutaneous epithelium: a lineage analysis of adult mouse: skin // EMBO J. 2001. - Vol. 20; -P. 1215-1222.

171. Green H., Kehinde O., Thomas J. Growth of cultured human epidermal cells into multiple epithelia suitable for grafting // Proc. Natl: Acad: Sci. USA. 1979. -Vol. 76.- P. 5665-5668.

172. Green H. Regeneration of the skin after grafting of epidermal cultures // Lab; Invest. 1989. - Vol. 60. - P. 583—584.

173. Greenhalgh D.G. The role of apoptosis in wound healing // IJBCB. 1998. -Vol.30.-P.1019-1030.

174. Greenleaf G., Hansbrough J;F., Curent trends in the use of allograft skin for patients with burns and reflections on the future of skin banking in the United! States //J. Burn Care Rehabil.- 1994.- V. 15, N5.- P.428-431.

175. Grimaud J.A., LortatrJacob H. Matrix receptors to cytokines: From concept to control of tissue fibrosis dynamic // Path. Res. Pract. 1994. - Vol.190: - P. 883 -890.

176. Grinnel F., Ho G.H., Wysocky A. Degradation of fibronectin and vitronectin in chronic wound fluid: analysis by cell blotting, immunoblotting and cell adhesion assays // J. invest. Dermatol. 1992. - Vol. 98. - P.410 - 416.

177. Grinnell F. Fibroblasts, myofibroblasts and wound contraction // J.Cell. Biol. 1994. - Vol.l24. - P.401 - 404.

178. Grinnell F., Takashima A., Lamke-Seymour G. Morphological appearance of epidermal cells cultured on fibroblast -reorganized collagen gell // Cell Tissue Res. -1986.- Vol. 246.-P. 13-21.

179. Grinnell F. Fibroblast-collagen -matrix contraction: growths-factor signaling and mechanical loading //Trends Cell BioL-2000;-Vol; 10-P:362-365:

180. Haake A.R., Lane A.T. Retention of differentiated characteristics in human fetal keratinocytes in vitro. In Vitro Cell // Dev.Biol. 1989. - Vol. 25.- P. 592600.

181. Hakkinen L., Westermarck J., Kahari V.M., Laijava H. Human granulation-tissue fibroblasts show enhanced proteoglycan gene expression and altered response to TGF-pl. // J. Dent. Res. 1997. - VoL75. - P. 1767 -1778.

182. Hefton J.M., Finkelstein J., Madden M.R., Shires G.T. Grafting of burn patients with allografts of cultured epidermal,cells // Lancet. 1983.- Vol: 8347.- P. 428-430:

183. Hermans M.H.E. Clinical experience with glycerol-preserved donor skin treatment in partial thikcnes burns // Burns. 1989.- V. 15, N 1. - P.57-59.

184. Hermans. R.P., Hoekstra M.J., Kropman G.M., Koenderink J.J. The history and function of the Euro skin Bank // Annals of Burns and Fire Disasters.- 1996.-Vol.IX, N1.- P. 36-37.

185. Hill E., Boontheekul Т., Mooney D.J. Regulating activation of transplanted cells controls tissue regeneration // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 2006.- Vol. 103.-P. 2494-2499.

186. Horch R., Stark G.B., Kopp J., Spilker G. Cologne Burn Centre experiences with glycerol-preserved allogeneic skin: Part I: Clinical experiences and histological findings (overgraft and sandwich technique) // Burns.- 1994.- Vol.20, Suppl. 1. P.23-26.

187. Hynes R.O.* Molecular biology of fibronectin // Ann. Rev. Cell Biol. 1985. -Vol.1.-P.67-90.

188. Hufnagel В., Ninnemann J.L., Hettich R. Immunology of intermingled skin grafts in rats: preliminary results // Burns.- 1989;- Vol.15, N1.- P.31-35.

189. Ingham E., Matthews J.B., Kearney J.N., Gowland G. The effects of variation of cryopreservation protocols on the immunogenicity of allogeneic skin grafts // Cryobiology.- 1993.- Vol; 30, N5.- P.443-458.

190. Ito Y., Aten J., Bende R.J. et al. Expression of connective tissue growth factor in human renaMbrosis// Kidney Int. -1998; Vol:53. - P:853 - 861. .

191. Jacobson B.K., Cuono C.B.,.Kupper T.S., Baker C.C. Immunologic alterations following excisional wounding and immediate repairwithsyngeneicor al-logeneic skimgrafts//Jy Burn Care Rehabili- 1988;- VoK9, N4.- P:354-358.

192. Jones JiGIR:, Hop^son S;B., Goldfinger E.E. T^ hemidesmosomes II BioEssays. 1998. - Vol.20. - P:488 - 494. .

193. Kanitakis J., Escaich S., Trepo C., Thivolet J. Detection of human immunodeficiency virus-DNA and RNA in;the skin of HIV infected patiens using the polymerase chain reaction // J. Invest. Dermatol.- 1991.- Vol.97, N2.- P.91-96.

194. Kaiser H.W., Stark G.B., Kiopp J. et al. Cultured autologous keratinocytes in fibrin glue suspension, exclusively and combined with STS-allograft (preliminary clinical and histological report of a new technique)//Burns.- 1994.- Vol.20, N 1.-P.23-29.

195. Khouw I.M.S.L., Van Wachem P.B., Plantinga J.A. et al. TGF-p and bFGF affect the differentiation of proliferating porcine fibroblasts into myofibroblasts in vitro // Biomater. 1999. - Vol.20; - P; 1815 —1822.

196. Kirsner R.S., Falanga V., Kerdel F.A. et al. Skin grafts as pharmacological agents: pre-wounding of the donor site // Br. J. Dermatol.- 1996.- Vol. 135.- P. 292-296.

197. Konstantinow A., Muhlbauer W., Hartinger A., von Donnersmarck G.G. Skin banking: a simple method for cryopreservation of split-thickness skin and cultured human epidermal keratinocytes // Ann. Plast. Surg.- 1991,- Vol.26, N 1.- P.89-97.

198. Kontio R., Salo A., Suuronen R. et al. Fibrous wound-repair associated with biodegradable poly-L/D-lactide copolymer implants: study of the expression of tenascin and cellular fibronectin // J. Mater. Science: 1998. - Vol. 9. - P.603 -609.

199. Kowalczyk A.P. Desmosomes: intercellular adhesive junctions specialized for attachment of intermediate filaments // Intl. Rev. Cytol. 1999. - Vol. 185. - P. 237 - 302.

200. Kuhn K. The collagen family-variations in the molecular and supermolecular structure // Rheumatol. 1986. - Vol. 10. - P.29 - 69.

201. Kyriakides T.R., Tarn J.W.Y., Bornstein P. Accelerated wound healing in mice with a disruption of the thrombospondin-2 gene // J.Invest. Dermatol. 1999. -Vol. 113.-P. 782-787.

202. Ladin D.A., Hou Z., Patel D. et al. p53 and apoptosis alterations in keloids and keloid fibroblasts // Wound Repair Regen. 1998. - Vol. 6. - P.28 - 37.

203. Lang E., Schaefer B.M., Eickhoff U. et al. Rapid normalization of epidermal integrin expression after allografting of human keratinocytes // J. Invest. Dermatol. 1996. - Vol. 107. - P.423 - 427.

204. Latijnhouwers M., Bergers M., Ponec M. et al. Human epidermal keratino-cytes are a source of Tenascin-C during wound healing // J. Invest. Dermatol. -1997. Vol. 108. - P.776. - 785.

205. Latijnhouwers M.A.H.E., Bergers M., Veenhuis R.Th., et al. Tenascin-C degradation in chronic wounds is dependent on serine proteinase activity // Arch. Dermatol. Res. 1998. - Vol.290. - P.490 - 496.

206. Lavaud S., Poirier В., Mandet C. et al. Inflammation is probably not a prerequisite for renal interstitial fibrosis in normoglycemic obese rats // Am. J. Physiol. -2001. Vol. 280. - P. 683 - 694.

207. Legrand C., Gilles C., Zahm J.-M. et al. Airway epithelial cell migration dynamics: MMP-9 role in cell-extracellular matrix remodeling // J. Cell Biol. 1999. -Vol. 146.-P. 517-529.

208. Leigh I.M., Eady R.AJ., Heagerty A.H.M. et al. Type VII collagen is a normal component of epidermal basement membrane, which shows altered expression in recessive dystrophic epidermolysis bullosa // J.Invest. Dermatol. 1988. - Vol. 90.-P. 639-642.

209. Levenson S.M., Geever E.E., Crowley L.V. et al. The healing of rat skin? wounds // Ann. Surg. 1985. - Vol.161. - P.293 - 308.

210. Lerner A.B., Halaban R., Klaus S.N. et al. Transplantation of human melanocytes // J. Invest. Dermatol. 1987. - Vol. 89.- P. 219—224.

211. Li A., Pouliot N., Redvers R., Kaur P. Extensive tissue-regenerative capacity of neonatal human keratinocytes stern cells and their progeny // J. Clin. Invest.-2004.- Vol. 113.- P. 390-400.

212. Liancun W., Pierce G.F., Galiano R.D., Mustoe T.A. Keratinocyte growth factor induces granulation tissue in ischemic dermal wound: importance of epithelial-mesenchymal cell interactions // Arc. Surg. 1996. - Vol.131. - P.660 - 666.

213. Liancun W., Siddaqui A., Morris D.E. et al. TGF- (33 accelerates wound healing without alteration of scar prominence // Arc. Surg. 1997. - Vol.132. - P.753 -760.

214. Linna Т., Tervo Т. Real-time confocal microscopic observations on human corneal nerves and wound healing after excimer laser photorefractive keratectomy // Curr. Eye Res. 1997. - Vol.16. - P.640 - 649.

215. Liu J.Y., Hafner J., Dragieva G. et al. Autologous cultured keratinocytes on porcine gelatin rnicrobeads effectively heal chronic venous leg ulcers // Wound Repair Regen. 2004.- Vol. 12.- P. 148-156.

216. Loots M.A.M., Lamme E.N., Zeegelaar J. et al. Differences in cellular infiltrate and ECM of chronic diabetic and venous ulcers versus acute wounds // J.Invest. Dermatol. 1998. - Vol. 111. - P.850 - 857.

217. Maas-Szabowski N., ShimotoyodomeA., Fusenig N. E. Keratinocyte growth regulation in ftbroblast cocultures via a double paracrine mechanism // J. Cell Sci.- 1999. Vol. 112.- P. 1843-1853.

218. Mackie E.J. Tenascin-C // IJBCB. 1997. - Vol.29. - P. 1133 - 1137.

219. Madden M.R„ Finkelstein J.L., Staino CoicoL. et al. Grafting of cultured allogeneic epidermis on second- and third-degree burn wounds on 26 patients // J.Trauma.- 1986.- Vol. 26.- P. 955—962.

220. Makhluf H.A., Stepniakowska J., Hoffman S: et al. IL-4 upregulates Tenascin synthesis in scleroderma and healthy skin fibroblasts // J.Invest. Dermatol. 1996.- Vol.107. -P.856- 859.

221. Malinda K.M., Kleinman H.K. The Laminins // IJBCB. 1996. - Vol.28. -P.957 - 959.

222. Martin G.R. Laminin and other basement membrane components // Ann. Rev. Cell Biol. 1987. - Vol.3. - P.57 - 85.

223. Mater K., Ehrhard G., Frever J. Antibaclerical activity of cultured human keratinocytes // Arch. Dermatol. Res. 1992. - Vol. 284.- P. 119-121.

224. Marshall L., Chosh M.M., Boyce S.G. et al. Effect of glycerol on intracellular virus survival: implications for the clinical use of glycerol-preserved cadaver skin // Burns.- 1995.- Vol.21, N5.- P.356-361.

225. Malakhov S.V., Paramonov B.A., Vasiliev A.V., Terskikh V.V. Preliminary report of thie clinical use of cultured allogeneic keratinoc^es // Burns.- 1994.- Vol. 20.- P. 463—466.

226. Matsuka K., Hata Y., Yano K. et al. Epidermal cell viability in rat skin preserved at 4 degrees С // Ann. Plast. Surg.- 1993.- Vol.31, N4.- P.358-363.

227. May S.R., DcClement F.A. Skin Banking: Ш. Cadaveric allograft skin viability//J. Burn GareRehabil:-1981.-Vol.2, N2.-P. 128.

228. May S.R., DeGlement F.A. Skin banking methodology: An evaluation of package format, cooling and warming rates, and storage efficiency // Cryobiology. 1980.-Vol.17,N1.-P.33-45.

229. Munster A.M., Eurenius K., Katz R.M. et al. Cell-mediated immunity after thermal injury // Ann: Surg:- 1973.- Vol.177, N2: P. 139-143.

230. Miller A. Molecular packing in collagen fibrils In: Biochemistry of collage // New York. - 1976. - P.85- 136.

231. Miner J.H., Patton B.L. Laminin-ll^JBCB.-1999.-Vol.31.-P.811-816.

232. Mohri H. Fibronectin and integrins interactions // J: Invest. Med. 1996. -Vol.44. -P.429 - 441.

233. Moll I., Houdek P., Schmidt H., Moll R. Characterization of epidermal wound healing in a human skin organ culture model: Acceleration by transplanted kerati-nocytes // J! Invest. Dermatol. 1998. - Vol. 1 1 1 . - P.251 - 258.

234. Moller-Pederseri Т., Li H.F., Petroll W.M. et al. Confocal microscopic characterization of wound repair after photo re frative keratectomy //Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1998.- Vol. 39.-P. 487-501'.

235. Morykwas M.J., Stevenson-T.R., Marcelo C.L. et al. In vitro and in vivo testing of a collagen sheet to support keratinocyte growth for use as а Ьикт wound covering // J. Trauma. 1989.- Vol. 29.- P. 1163-1167.

236. Moulin V., Auger F.A., Garrel D., Germain L. Role of wound healing myofibroblasts on re-epithelialization of human skin // Burns. 2000. - Vol. 26. - P.3 -12.

237. Moulin V., Castilloux G., Auger F.A. et al. Modulated response to cytokines of human wound healing myofibroblasts compared to dermal fibroblasts // Exp. Cell. Res. 1998. - Vol.238. - P.283 - 293.

238. Mutsaers S.E., Bishop J.E., McGrouther G., Laurent G.J. Mechanism of tissue repair: from wound healing to fibrosis/ШВСВ. -1997.-Vol.29.-P.5- 17.

239. Nagaoka Т., Kaburagi Y., Hamaguchi Y. et al. Delayed wound healing in the absence of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) or L-selectin expression // Am. J. Pathol. 2000. - Vol.157. - P.237 - 247.

240. Nakayasu K. Stromal changes following removal of epithelium in rat cornea // Jpn. J. Ophthalmol.- 1988.- Vol. 32.- P. 113-125.

241. Nugent M.A., Iozzo R.V. Fibroblast growth factor 2 (FGF-2) // IJBCB. -2000.- Vol.32. -P. 115- 120.

242. Ninnemann J.L., Fisher J.C., Frank H.A. Prolonged survival of human skin allografts following thermal injury // Transplantation. 1979.- Vol.25, N1.- P.69.

243. O'Connor N.E., Mulliken J. В., Banks-Schlegel S. et al. Grafting of burns with cultured epithelium prepared from autologous epidermal cells // Lancet 1981.- Vol. 1 (8210).- P. 75-78.

244. Okada A., Tomasetto C., Lutz Y. et al. Expression of matrix metallopro-teinases during rat skin wound healing: Evidence that MT-1 MMP is stromal activator of pro-gelatinase A // J. Cell Biol. 1997. - Vol.137. - P.67 - 77.

245. Paavonnen К., Puolakkainen P., Jussila L. et al. VEGF Receptor-3 in lym-phangiogenesis in wound healing // Am. J. Pathol. 2000. - Vol. 156. - P. 1499 -1504.

246. Pimay J.P., Vandenvelde C., Duinslaeger L. et al. HIV transmission by trans-planiation of allograft skin: a review of the literature // Burns.- 1997.- Vol. 23, N 1.- P. 1-5.

247. Pilcher B.K., Sudbeck B.D., Dumin J'.A. et al. Collagenase-1 and collagen in epidermal repair//Arch. Dermatol. Res. -1998. Vol.290. - P.37-46.

248. Ponec M., Havekes L., Kempenaar J. et af. Calcium mediated regulation of the low density lipoprotein receptor and intracellular cholesterol synthesis in human epidermal keratinocytes //J.Cell. Pnysiol.- 1985.- Vol.125.- P. 98-106.

249. Prunieras M., Regnier M., Woodley D. Methods of cultivation of keratinocytes with an air-liquid interface // J. Invest. Dermatol.- 1983.- Vol. 81.- P. 28-33.

250. Raabe E.H., Yoshida K., Schwarting G.A. Differential laminin isoform expression in the developing rat olfactory system // Devel. Brain Res. 1997. -Vol.101-.-P.187-196.

251. Rabinovitz L, Mercurio A.M. The integrin a6(34 functions in carcinoma cell migration on laminin-1 by mediating the formation and stabilization of actin-containing motility structures //J.Cell. Biol.-1997.-Vol.l39.-P.1873-1884.

252. Raghunath M., Hopfner В., Aeschlimann D. et al. Cross-linking of the dermo-epidermal junction of skin regenerating from keratinocytes autografts // J. Clin. Invest. 1996. - Vol.98. - P. 1174 - 1184.

253. Reed M.J., Ferara N.S., Vernon R.B. Impaired migration, integrin function and actin cytoskeletal organization in dermal fibroblasts from a subset of aged human donors // Mech. Ageing and Development. 2001. - Vol.122. - P. 1203 -1220.

254. Regauer S., Seller G.R., Barrandon Y. et al. Epithelial origin of cutaneous anchoring fibrils //J. Cell Biol. 1990. - Vol.111.- P. 2109-2116.

255. Rheinwald J.G., Green H. Serial cultivation of strains of human epidermal keratinocytes: The formation of keratinizating colonies from single ceils // Cell 1975. Vol.6.- P. 331—344.

256. Roberts A.B., McCune B.K., Sporn M.B. TGF-0: regulation of extracellular matrix // Kidney Int. 1992. - Vol.41. - P.557 - 559.

257. Rochat A., Kobayashi K., Barrandon Y. Location of stem cells of human hair follicles by clonal analyses // Cell. 1994. - Vol. 76.- P. 1063—1073.

258. Rouabhia M. Skin regeneration after heterologous epidermal substitute grafting // Ann. Burns Fire Disasters.- 1997. Vol.10.- P. 98—104.

259. Prunieras M., Regnier M., Schlotterer M. Nouveau procece de culture des cellules epidermiques humaines sur derme homologue ou heterologue: Preparation de greffons recombines // Ann. Chir. Plast.- 1979. Vol.24.- P. 357-362.

260. Ruoslahti E. Fibronectin and its receptors // Ann. Rev. Biochem. 1988. -Vol.57.-P.375-413.

261. Sato Т., Kirimura Y., Mori Y. The co-culture of dermal fibroblasts with human epidermal keratinocytes induces increased prostaglandin E2 production and cyclooxygenase-2 activity in fibroblasts // J.Invest. Dermatol. 1997. - Vol.109. -P.334-339.

262. Schaffer M., Barbul A. Lymphocyte function in wound healing and following injury // Br. J.Surg. 1998. - Vol.85. - P.444 - 460.

263. Sheridan R., Mahe J., Walters P. Autologous skin banking // Burns.- 1998. -Vol. 24,N 1.- P.46-48.

264. Serini G., Bochaton-Piallat M.-L., Ropraz P. et al. The fibronectin domain ED-A is crucial for myofibroblastic phenotype induction by transforming growth factor-|3l // J. Cell. Biol. 1998. - Vol.142. - P.873 - 881.

265. Simeon A., Monier F., Emonard H. et al. Expression and activation of matrix metalloproteinases in wounds: Modulation by the tripeptide-copper complex Gly-cyl-L-Histidyl-L-Lysine-Cu2+ // J. Invest. Dermatol. 1999. V.112. - P.957 -964.

266. Singer A.J., Clark R.A.F. Cutaneous wound healing // New Engl. J. Med. -1999. Vol341. - P.738 - 746.

267. Stetler-Stevenson W.G. Matrix metalloproteinases in angiogenesis: a moving target for therapeutic intervention // J.Clin. Invest. 1999. - Vol.103. - P. 1237 -1241.

268. Streit M., Velasco P., Riccardi L. et al. Thrombospondin-1 suppresses wound healing and granulation tissue formation in the skin of transgenic mice // The EMBO Journal. 2000. - Vol.19. - P.3272 - 3282.

269. Stocum D. L. Stem cells in regenerative biology and medicine // Wound Repair Regen.- 2001'. Vol. 9. - P. 429-442.

270. Spence R.J., Wond L. The enhancement of wound healing with human skin allograft // Surgical clinics of North America.- 1997.- Vol. 77.- № 3.- P. 731-745.

271. Stark G.B., Kaiser H.W. Cologne Bum Centre experience with glycerol-preserved allogeneic skin: Part П: Combination with autologous cultured keratinocytes // Burns.- 1994.- Vol.20, Suppl. 1.- P.34-38.

272. Swift M.E., Kleinmann H.K., DiPietro L.A. Impaired wound repair and delayed angiogenesis in aged mice//Lab. Invest.-1999.-Vol.79.-P.1479- 1487.

273. Tarlton J.F., Bailey A J., Crawford E. et al. Prognostic value of markers of collagen remodeling in venous ulcers // Wound. Repair. Regen. 1999. - Vol.7. -P.347 - 355.

274. Taylor A.C., Gerstner R. Tissue survival after exposure to low temperature and the effectiveness of protective pretreatments. Evaluation by, growth in tissue cultures //J.cell. сотр. PhysioL.- 1955.- Vol. 46.- P.477-502.

275. Tanner J.C., Vandeput J., Jilley J.F. The mesh skin autograft // Plast. Reconstr. Surg.- 1964.- Vol. 34.- 287-292.

276. Teepe R. G.C., Kreis R.W., Koebrugge E.J. et al. The use of cultured auiolo-gous epidermis in the treatment of extensive burn wounds // J.Trauma 1990. Vol. 30.- P. 269-275.

277. Terskikh V.V., Vasiliev A.V. Cultivation and transplantation of epidermal keratinocytes // Intern. Rev. Cytol.- 1999.- Vol. 188.- P. 41-72.

278. Timpl R., Brown J.C. Supramolecular assembly of basement membranes // BioEssays. 1996. - Vol.18. - P.123 - 132.

279. Timple R. Macromolecular organization of basement membrane // Curr. Opin. Cell Biol. 1996. - Vol.8. - P.618 - 624.

280. Ure I., Partsch В., Wolff K., Petzelbauer P. Granulocyte/macrophage colony-stimulating factor increases wound-fluid interleukin-8 in normal subjects but does not accelerate wound healing // Br. J.Dermatol. 1998. - Vol.138. - P.277 - 282.

281. Van de Berg J.S., Rudolph R., Hollan C., Haywood-Reid P.L. Fibroblast senescence in pressure ulcers/AVound Repair Regen.-1998.-Vol.6.-P.38 49.

282. Van Baare J., Buitenwerf J., Hoekstra M.J., du Pont J.S. Virucidal effect of glycerol as used in donor skin preservation // Burns.- 1994. Vol. 20, N 1.- P.77-80.

283. Van Baare J., Ligtvoet E.E., Middelkoop E. Microbiological evaluation of glycerolized cadaveric donor skin // Transplantation.- 1998. Vol. 65, N7.- P.966-970. ;

284. Van Muijen G.N.P:, Warnaar S.O., Ponec M. Differentiationrelated changes of cytokeratin expression in cultured keratinocytes and in fetal, newborn, and adult epidermis//Exp. GemRes.- 1987.-Vol. 171.-РЗЗГ-345.

285. Von der Mark K., Von der Mark H., Goodman S. Cellular responses to extracellular matrix // Kidney Int. 1992! - Vol. 41. - P.632 - 640;

286. Wahl S.B. Transforming growth factor p: The good, the bad and the ugly // J.Exp. Med. - 1994. - Vol.180. - P. 1587 - 1590.

287. Wester R:C., Christoffel J., Hartway T. et al. Human cadaver skin viability for in vitro percutaneous absorption: storage and detrimental effects of heat-separation and freezing // Pharm. Res.- 1998. Vol. 15, N 1.- P.82-84.

288. White MJ., Whalen J.D., Gould J.A. et al. Procurement and transplantation of colonized cadaver skin // Am. Surg.- 1991. Vol. 57, N6.- P.402-427.

289. Wilke M.S., Furcht L.T. Human keratinocytes adhere to a unique heparin-binding peptide sequence within the triple helical region of type IV collagen // J.Invest, Dermatol. 1990; - Vol. 95. - P. 264-270.

290. Wilke M.S., Skubitz A.P.N. Human keratinocytes adhere to multiple distinct peptide sequences of laminin // J. Invest. Dermatol.- 1991. Vol. 97.- Pi 141-146.

291. Wilson S.E., He Y.- G., Weng J. et al. Epithelial injury induces keratocyte apoptosis: Hypothesized role for the interleukin-1 system in the modulation of corfneal tissue organization and wound healing // Exp. Eye Res.- 1996. Vol. 62.- P. 325—338.

292. Woodley D.T., Peterson H.D., Herzog S.R. et al. Burn wounds resurfaced by cultured epidermal autografts show abnormal reconstruction of anchoring fibrils // J.A.M.A. 1988. - Vol. 259.- P.2566—2571.

293. Woodly D,T., Briggaman R.A., Herzog S.R. et al. Characterization of "neo-dermis" formation beneath cultured human epidermal autografts transplanted on muscle fascia // J.Invest. Dermatol. 1990. - Vol.95.- P.20-26.

294. Wysocky A.B., Staiano Coico L., Grinnell F. Wound fluid from chronic leg ulcers contains elevated levels of metalloproteinases MMP-2 and MMP-9 // J.Invest. Dermatol. 1993. - Vol. 101. - P.64 - 68.

295. Wu J., Barisoni D., Armato U. An Investigation into the mechanisms by which human dermis dose not significantly contribute to the rejection of alloskin grafts // Burns.- 1995. Vol. 21, N 1. - P. 11-16.

296. Yang L., Qiu C.X., Ludlow A. et al. Active TGF-P in wound repair // Am. J.Pathol. 1999. - Vol. 154. - P. 105 - 111.