Оценка мутагенного действия факторов окружающей среды микроядерным методом на клетки органов выделительной системы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.07, кандидат биологических наук Шереметьева, Светлана Михайловна

• Шереметьева, Светлана Михайловна
• кандидат биологических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Шереметьева, Светлана Михайловна

Введение.

Глава 1. Оценка генетического действия факторов окружающей среды на клетки органов выделительной системы обзор литературы).

Глава 2. Материалы и методы исследования

2.1. Объекты исследования.

2.2. Исследованные факторы.

2.3. Методы исследования.

2.3.1. Микроядерный тест на эпителиальных клетках мочевого пузыря экспериментальных животных

2.3.1.1. Приготовление суспензионных препаратов эпителиальных клеток мочевого пузыря после их фиксации в формалине.

2.3.1.2. Приготовление суспензионных препаратов эпителиальных клеток мочевого пузыря ex tempore.

2.3.2. Микроядерный тест на клетках коркового вещества почки экспериментальных животных.

2.3.3. Микроядерный тест на клетках костного мозга экспериментальных животных.

2.3.4. Микроядерный тест на эксфолиативных уротелиальных клетках человека.

2.3.5. Характеристика анализируемых цитогенетических и кариологических показателей в клетках органов животных и человека.

2.3.6. Протоколы учета результатов анализа.

2.3.7. Статистический анализ исследования.

Собственные исследования

Глава 3. Сравнительная оценка цитогенетических и других кариологических показателей в клетках органов выделительной системы контрольных животных.

Глава 4. Оценка временных и дозовых параметров цитогенетического и цитотоксического эффектов циклофосфамида в эпителиальных клетках мочевого пузыря мышей.

4.1. Зависимость цитогенетического и цитотоксического эффекта от длительности действия и дозы мутагена.

4.2. Зависимость цитогенетического и цитотоксического эффекта от времени после окончания воздействия.

Глава 5. Оценка цитогенетического и цитотоксического действия химических веществ на клетки выделительной системы экспериментальных животных микроядерным методом

5.1.Оценка цитогенетического и цитотоксического действия метиленового голубого на эпителиальные клетки мочевого пузыря крыс.

5.2,Оценка цитогенетического и цитотоксического действия профлавин ацетата в уротелиальных клетках мочевого пузыря крыс.

5.3. Оценка цитогенетического и цитотоксического эффектов диоксидина в клетках коркового вещества почки мышей.

5.4.0ценка цитогенетического действия диоксазида на эпителиальные клетки мочевого пузыря крыс.

5.5. Оценка цитогенетической активности диоксида азота в эпителиальных клетках мочевого пузыря крыс.

5.6. Оценка цитогенетического и цитотоксического эффектов изолированного и сочетанного действия солей цезия, стронция и у-излучения при различных сроках воздействия в эпителиальных клетках мочевого пузыря и почек мышей

Глава 6. Оценка цитогенетического и цитотоксического действия смесей химических соединений на клетки выделительной системы экспериментальных животных

6.1. Оценка цитогенетического и цитотоксического эффектов смеси РМ1 (продуктов химической нейтрализации люизита) в эпителиальных клетках мочевого пузыря мышей.

6.2. Оценка цитогенетического и цитотоксического эффектов смеси РМ2 (продуктов химической нейтрализации иприта) в эпителиальных клетках мочевого пузыря мышей.

6.3. Оценка цитогенетического и цитотоксического эффектов смеси продуктов химической нейтрализации совтола (ПХДС-Т) в эпителиальных клетках мочевого пузыря крыс.

Глава 7. Оценка цитогенетических и цитотоксических показателей в эксфолиативных уротелиальных клетках человека.

Глава 8. Обсуждение.

Выводы.

Список используемой литературы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Оценка мутагенного действия факторов окружающей среды микроядерным методом на клетки органов выделительной системы»

Своевременное и корректное выявление мутагенов для запрета или ограничения их использования - одна из основных задач гигиены окружающей среды [Сычева Л.П., Рахманин Ю.А. и соавт., 2005; Бочков Н.П., Чеботарев А.Н., 1989; Ревазова Ю.А., Журков B.C., 2001]. Это важно и для прогноза канцерогенной активности факторов, поскольку положительные результаты краткосрочных тестов анализа мутагенной активности химических соединений рассматривают в качестве прогностических показателей наличия у них канцерогенных свойств. Некоторые авторы считают, что генотоксические исследования могут стать альтернативой классическим методам оценки канцерогенной активности [Douglas G.K et al, 1988; Ashby J. et all, 1996]. Исследование канцерогенности одного химического соединения общепринятым методом требует проведения двухлетних дорогостоящих экспериментов, поэтому трудно представить, чтобы такие исследования приобрели массовый, опережающий характер. Подобное положение обязывает признать, что краткосрочные тесты для выявления мутагенных химических веществ играют роль своеобразной «просеивающей» программы для выявления потенциальных канцерогенов.

В ГУ НИИ экологии человека и гигиены окружающей среды им. А.Н.Сысина РАМН разработана система оценки мутагенного эффекта факторов окружающей среды с учетом органной специфичности, основой которой является полиорганный микроядерный тест [Сычева Л.П., 2002]. Он позволяет с большей долей вероятности, по сравнению с другими краткосрочными тестами, прогнозировать канцерогенные свойства исследуемого фактора и определять органы-мишени. Однако в этой системе оценка мутагенного эффекта в органах выделительной системы разработана недостаточно. Подобного рода исследования мутагенного действия химических соединений на клетки мочевого пузыря и почек единичны. В то же время установлено, что многие вещества, в том числе ароматические амины, соли тяжелых металлов, хлорорганические соединения индуцируют рак в этих органах. По данным ВОЗ рак мочевого пузыря по частоте встречаемости среди всех злокачественных новообразований, уступает только опухолям желудка, пищевода, легких и гортани. В мире ежегодно регистрируется около 170 ООО - 200000 новых случаев рака мочевого пузыря и среднегодовой темп прироста составляет 3,34% [Чиссов В.И., Старинский В.В., 2002; Borden L.S. et all, 2003].

Установлено, что химические соединения, образующиеся в производственных процессах кожевенной, анилинокрасочной, резиновой, электрокабельной, каучуковой промышленности, а также некоторые лекарственные препараты, обладают генотоксической и канцерогенной активностью в клетках мочевого пузыря человека и лабораторных животных [IARC, 1981; Двойрин В.В. с соавт., 1996; Maltoni С. et all, 1996; Плисс Г.Б., 1996].

Открытие возможности определять генотоксические повреждения в эксфолиативных клетках, полученных неинвазивным способом, позволило использовать микроядра в качестве маркера для выявления ранних канцерогенных изменений в эпителиальных тканях [Stich H.F., Rosin М.Р., 1983; 1984; Rosin MP., 1992; Majer B.J. et all, 2001]. Однако для эксфолиативных уротелиальных клеток человека соответствующие методические основы разработаны недостаточно.

В связи с этим целью исследования являлась оценка микроядерным методом мутагенного действия факторов окружающей среды на клетки органов выделительной системы. Для ее достижения сформулированы следующие задачи:

1. Усовершенствовать методы оценки цитогенетического эффекта факторов среды в клетках органов выделительной системы экспериментальных животных и человека.

2. Определить контрольные уровни цитогенетических и цитотоксических показателей в клетках органов выделительной системы животных и в эксфолиативных уротелиальных клетках человека.

3. Оценить временные и дозовые закономерности действия модельного мутагена на цитогенетические и цитотоксические показатели в клетках мочевого пузыря млекопитающих.

4. Изучить мутагенное действие химических соединений и у-излучения на эпителиальные клетки мочевого пузыря млекопитающих.

Научная новизна. Впервые:

- В оценку цитогенетического эффекта в уротелиальных клетках мочевого пузыря включен новый показатель - доля клеток с ядерными протрузиями. Установлена высокая значимая корреляция этого показателя с микроядрами (0,52 - 0,72; р<0,001).

- В анализ уротелиальных клеток мочевого пузыря включены дополнительные кариологические показатели (частота двуядерных клеток; клеток с центральной ядерной перетяжкой; клеток с атипичной формой ядра), изменение которых может указывать на цитотоксическое действие исследуемого фактора.

- Разработан и апробирован неинвазивный метод комплексной оценки эксфолиативных уротелиальных клеток человека по цитогенетическим и кариологическим показателям.

- Проведена количественная оценка и определены дозовые параметры цитогенетического и цитотоксического действия на эпителиальные клетки мочевого пузыря мышей и/или крыс диоксида азота, диоксидина, диоксазида, метиленового голубого, профлавин ацетата, стронция, цезия, циклофосфамида, продуктов дезактивации химических отходов (люизита, иприта, совтола).

- Определены дозо - временные зависимости цитогенетического эффекта циклофосфамида в клетках мочевого пузыря от длительности воздействия и времени после окончания воздействия.

- Установлены ориентировочные фоновые частоты кариологических показателей в эпителиальных клетках мочевого пузыря у контрольных животных и в эксфолиативных уротелиальных клетках человека. Практическая значимость. Применение разрабатываемой методологии позволяет значительно увеличить объем получаемой информации о цитогенетическом и цитотоксическом действии фактора, повысить надежность качественной и количественной оценки мутагенных свойств химических соединений в экспериментах на млекопитающих и при обследовании людей.

Материалы исследований по корреляции частоты клеток с микроядрами и протрузиями, оценке других кариологических показателей в органах выделительной системы использованы при разработке:

- изобретения «Способ неинвазивной диагностики цитогенетического и цитотоксического действия различных факторов на организм человека» [заявка № 2005108225, приоритет от 24.03.05];

- методических рекомендаций «Оценка цитологического и цитогенетического статуса слизистых оболочек полости носа и рта у человека», утвержденных Председателем Межведомственного научного совета по экологии человека и гигиене окружающей среды РФ академиком РАМН Ю.А.Рахманиным [Москва, 2005. - 37с]. Результаты экспериментальных исследований по изучению мутагенной активности использованы при обосновании гигиенических нормативов:

- диоксида азота - разовая ПДК рекомендована к утверждению Комиссией по санэпиднормированию МЗиСР РФ РФ [протокол от 28.12.04 г.] [Справка о внедрении №2 от 25.01.05 г.].

- смеси триэтаноламинных солей сульфированных полихлорированных бифенилов и сульфированного трихлорбензола при пероральном поступлении в организм лабораторных животных. ОДУ этих соединений в воде водных объектов утверждена Минздравом РФ [ГН 2.1.5.1316-03].

Результаты по оценке мутагенной активности смесей РМ1 (продуктов нейтрализации люизита) и РМ2 (продуктов нейтрализации иприта) использованы при комплексной оценке степени эффективности обезвреживания и утилизации этих отходов и при обосновании гигиенических рекомендаций по технологии их переработки [Справка о внедрении от 02.02.05г.].

Работа выполнена в лаборатории генетического мониторинга в рамках плановых тем ГУ НИИЭЧиГОС им.А.Н.Сысина РАМЫ «Разработка методологии оценки мутагенного эффекта в клетках органов дыхательной и выделительной системы», 2003-2005 гг., № госрегистрации 01200303902; «Гигиенические основы управления качеством внутренней среды современных общественных зданий» 2005-2007г., № госрегистрации 01200502722; "Разработка системы методов обоснования и верификации эколого-гигиенических нормативов химических веществ в окружающей среде на основе компьютерного моделирования и экспериментальных исследований", 20032005 гг., № госрегистрации 01200303903.

Исследования проведены совместно с лабораториями ГУ НИИЭЧиГОС им.А.Н.Сысина РАМН: комплексного экологогигиенического нормирования (зав. - д.м.н. О.О.Синицина); гигиены почвы (зав. - к.м.н. И.А.Крятов), питьевого водоснабжения (зав. - д.м.н. Р.И.Михайлова); гигиены атмосферного воздуха (зав. - д.м.н., проф., М.А.Пинигин); цитогистологии (зав. - д.б.н. Н.Н.Беляева); и другими институтами: ГУП МосНПО Радон (рук. группы - д.б.н. А.Н.Осипов); ФГУП ЦХЛС-ВНИХФИ (рук. лаборатории - д.м.н. С.М. Шарова); ГУ НИИ фармакологии (рук. лаборатории - д.м.н., проф., А.Д.Дурнев).

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на конференции молодых ученых «Развитие научного творчества молодежи -объект постоянного внимания В.А.Рязанова» [Москва, 2003]; 2-м съезде токсикологов России [Москва, 2003]; 3-м съезде Вавиловского общества генетиков и селекционеров [Москва, 2004]; 5-м съезде Российского общества медицинских генетиков [Уфа, 2005]; Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых и специалистов "Окружающая среда и здоровье" [Суздаль, 2005].

Публикации. По теме диссертации опубликовано 12 печатных работ, из них 3 - в центральной печати.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, пяти глав собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и списка литературы. Текст изложен на 156 страницах машинописи, иллюстрирован 43 таблицами и 11 рисунками. Указатель литературы содержит 150 источника, из них 52 отечественных и 98 иностранных авторов.

Заключение диссертации по теме «Гигиена», Шереметьева, Светлана Михайловна

выводы

1. Для токсикологической оценки факторов окружающей среды, прогноза канцерогенного действия и донозологической диагностики при обследовании людей разработаны методические основы оценки цитогенетического и цитотоксического эффектов микроядерным методом в клетках органов выделительной системы: новый метод приготовления суспензионных препаратов мочевого пузыря мышей и крыс ex tempore; неинвазивный метод приготовления и анализа препаратов эксфолиативных уротелиальных клеток человека; новый количественный способ анализа исследуемых клеток органов выделительной системы с учетом пяти показателей (частоты клеток с микроядрами; с протрузиями; частоты двуядерных клеток; клеток с центральной ядерной перетяжкой ядра; с атипичной формой ядра); учет клеток с ядерными протрузиями включен в анализ в качестве дополнительного показателя цитогенетического действия на основании данных литературы о возможных механизмах образования протрузий и полученных нами в эксперименте с циклофосфамидом данных о высокой значимой корреляции этого показателя с долей клеток с микроядрами (при действии дозы 20 мг/кг (R=0,72, Р<0,001); при дозе 10 мг/кг (R=0,52, Р<0,001); учет других кариологических показателей (частоты двуядерных клеток; клеток с центральной ядерной перетяжкой; клеток с атипичной формой ядра) включен в анализ для оценки цитотоксического действия исследуемых факторов.

2. Уровни цитогенетических и цитотоксических показателей в клетках мочевого пузыря контрольных животных и в эксфолиативных уротелиальных клетках условно здоровых людей на данном этапе могут служить ориентировочными фоновыми показателями: средняя доля клеток с микроядрами у мышей - 0,69%о; у крыс - 0,76%о; у человека - 0,31%о; доля клеток с протрузиями у мышей - 1,28%о; у крыс - 3,23%о; у человека -0,53%о; доля двуядерных клеток приблизительно одинакова у мышей (14,96%о) и крыс (15,56%о) и значительно ниже у человека (1,21%о); доля клеток с центральной ядерной перетяжкой варьирует от 14,53%о у мышей до 33,64%о у крыс, при 1,95%о у человека.

3. Определены дозовые и временные закономерности изменения цитогенетических и цитотоксических показателей в клетках мочевого пузыря мышей при действии циклофосфамида - модельного мутагена и канцерогена, индуцирующего опухоли мочевого пузыря: при ежедневном постоянном введении циклофосфамида в дозе 10 мг/кг максимальный эффект наблюдается на 7 сутки и сохраняется на этом уровне в течение месяца, тогда как при действии циклофосфамида в дозе 20 мг/кг изменение эффекта носит флуктуирующий характер; после окончания четырехсуточного введения циклофосфамида в дозе 10 мг/кг максимальный цитогенетический эффект в клетках мочевого пузыря выявляется на 3 сутки, далее эффект снижается к 7 и 21 суткам, но при этом достоверно превышает контрольный уровень. В то же время в костном мозге достоверные отличия выявляются только через сутки после окончания воздействия, а на 3, 7 и 21 сутки эффект уже не отличается от контроля. Установленные закономерности позволяют оптимизировать схемы экспериментальных исследований.

4. Методы оценки цитогенетических и цитотоксических показателей клеток органов выделительной системы мышей и крыс апробированы при действии 12 различных факторов в рамках комплексных токсикологических исследований. Впервые при анализе клеток мочевого пузыря лабораторных животных установлено: цитогенетическое действие метиленового голубого (мутагена, характеризующегося интеркалирующим действием) в низкой дозе 0,05 мг/кг, соответствующей 5 ПДК; цитотоксическое действие в дозах 0,01- 0,25 мг/кг; цитогенетическое действие смеси продуктов нейтрализации люизита, в которой определялись соединения мышьяка (генотоксического канцерогена, индуцирующего опухоли мочевого пузыря) в дозе, соответствующей 1/10 ЛД50; и цитотоксическое действие этой смеси в дозах, соответствующих 1/250; 1/50 и 1/10 ЛД50; цитогенетическое действие смеси продуктов нейтрализации иприта (генотоксического канцерогена, индуцирующего опухоли мочевого пузыря) в дозе, соответствующей 1/50 ЛД50; цитотоксическое действие этой смеси в дозах, соответствующих 1/1250 и 1/50 ЛД50; цитотоксическое действие диоксида азота в концентрациях 10 мг/мЗ, 20 мг/м3, 45 мг/м3 в динамике постоянного ингаляционного воздействия в течение 4, 24, 48 и 120 часов, увеличивающееся с длительностью воздействия; цитотоксическое действия солей стабильного цезия (70 мг/л); стронция (70мг/л); низких доз у-излучения (0,17 сГр в сутки) в течение 9 месяцев; цитотоксическое действие диоксазида при ингаляции в дозе, соответствующей терапевтической (25 мг/кг); отсутствие цитогенетического и цитотоксического эффекта: продуктов нейтрализации совтола (ПХДС-Т), сочетанного действия солей цезия и гамма-излучения (40 и 270 дней), стронция и гамма-излучения (40 и 270 дней), а также низких доз у-излучения в течение 40 дней.

5. Разработанный методический подход может быть использован, наряду с классическим микроядерным методом на клетках костного мозга, для изучения цитогенетического и цитотоксического действия различных факторов окружающей среды при их изолированном и совместном действии и разных путях поступления в организм. Анализ пяти показателей, характеризующих генетические повреждения и цитотоксический эффект на одних и тех же препаратах, позволяет повысить информативность метода, в том числе для определения референтных доз, и в целом повысить надежность оценки генетической безопасности изучаемых факторов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Шереметьева, Светлана Михайловна, 2006 год

1. Аксель Е.М., Матвеев Б.П. Статистика онкоурологических заболеваний в России в 1996 г. //Урол. и нефрол.-1999.-№2.-С.З-10.

2. Аль Шукри С.Х., Ткачук В.Н. Опухоли мочеполовых органов: руководство для врачей.-С.П.: Питер.-2000.-320с.

3. Бекбергенов Б.М., Антипов A.B., Данильянс Е.В., Королев П.Н., Глезер Г.А. Клиническое и экспериментальное исследование диоксидина. Его антибактериальное действие. //Антибиотики.-1982.-Т.27.-№5.-С.349-352.

4. Беляева H.H. Клеточная восстановительная регенерация как биомаркер вредного действия при гигиенической оценке факторов окружающей среды. //Автореферат доктора биологических наук. М.-1997.-47с.

5. Беляева H.H., Сычева Л.П., Журков B.C. с соавт. Оценка цитологического и цитогенетического статуса слизистых оболочек полости носа и рта у человека. М., 2005.-37с.

6. Бландова З.К., Душкин В.А., Малашенко A.M., Шмидт Е.Ф. Линии лабораторных животных для медико-биологических исследований. -М.: Наука.-1983.-191с.

7. Босых Е.А., Жанатаев А.К., Дурнев А.Д. //Медицинская генетика.-2005. -Т.4ю-№4.-С. 160-161.

8. Бочков Н.П., Чеботарев А.Н. Наследственность человека и мутагены внешней среды. М.: Медицина.-1989.-272с.

9. Гигиенические критерии состояния окружающей среды. Окислы азота. Всемирная организация здравоохранения. Женева.-1981.-№4.

10. Двойрин В.В., Аксель Е., Трапезников H.H. Заболеваемость злокачественными новообразованиями и смертность от них населения стран СНГ в 1995 году. М.: Онкологический научный центр им. H.H. Блохина РАМН.-1996.-286с.

11. Дегтярева И.Н., Фадеева Н.И., Буданова Л.И., Кузовкин В.А., Стебаева Л.Ф. Изучение эффекта диоксидина на внутриклеточные фракции микробной клетки. //Фармакология. Токсикология.-1981.-Т.44.-ЖЗ.-С.330-334.

12. Жолдакова З.И. Стабильность, биоаккумуляция, трансформация как эколого-гигиенические критерии опасности СОЗ, их заменителей и продуктов переработки. //Всеросийская конференция по проблеме стойких органических загрязнителей. М., РФ.-2003.-С.266-277.

13. Зюсс Р., Кинцель В., Скрибнер Дж.Д. Рак: эксперименты и гипотезы. -М.:Мир.-1977.-360с.

14. Канцерогенные вещества. Справочник. Материалы Международного агентства по изучению рака. Под ред. В.С.Турусова. - М.: Медицина,-1987,-ЗЗЗс.

15. Крылова Ю.Ф. Энциклопедия лекарств. Регистр лекарственных средств России. Изд. 8-е перераб и дополн. М.-2001.-342с.

16. Кузоватов С.Н., Кравцов В.Ю., Бахтин Ю.Б. Межъядерные хромосомные мосты и ядра с протрузиями в клеточных популяциях рабдомиосаркомы РА-23 крыс. //Цитология.-2000.-Т.42.-№11.-С.1097-1102.

17. Коваленко М.А. Оценка цитогенетического эффекта факторов окружающей среды в клетках органов дыхательной системы экспериментальных животных и человека. Автореф. дисс. к.б.н. - М.-2005.-22с.

18. Лагучев С.С. Значение полиплоидии и двухъядерных клетк в процессахфизиологической регенерации. АМНСССР.:Вестн.-1963.-№7.-62с.

19. Лазарева Н.В., Гадаскина И.Д. Вредные вещества в промышленности. Л.: Химия.-1977.-T.IH-C. 108-111.

20. Лиознер Л.Д. Клеточное обновление. Л.: Медицина.-1966.-268с.

21. Новиков С.М., Поройков В.В., Тертичников С.Н., Семеновых Л.Н., Филимонов Д.А. Анализ тенденций в развитии информационных технологий и обоснование концепции разработки банка токсикологических данных ЗАЯЕТЬазе. //Гигиена и санитария.-1995.-№1.-С .29-33.

22. Онищенко Г.Г., Новиков С.М., Рахманин Ю.А. и др. Основы оценки риска для здоровья при воздействии химических веществ, загрязняющих окружающую среду. М.-2002.-347с.

23. Плисс Г.Б., Власов H.H. Новое средство для профилактики опухолей мочевого пузыря. //Вопросы онкологии.- 1996.-Т.42.-№2.-С.68-73.

24. Перечень веществ, продуктов, производственных процессов, бытовых и прородных факторов, канцерогенных для человека. ГН 1.1.029-95. Издание официальное. //М.гГСЭНРоссии-1995.

25. Пономарева Г.Р., Малахова В.А., Ананев B.C. Фармакокинетика диоксидина у онкологических пациентов в послеоперативный период. //Антибиот. Химиотерапия.-1989.-Т.34-№9.-С.684-687.

26. Попов В.А. Некоторые аспекты проблемы адаптации к токсическим воздействиям. //Гигиена и санитария.-1997.-№8.-С.90-94.

27. Рахманин Ю.А., Михайлова Р.И., Зайцева Н.В., Вайсман Я.И. Методы донозологической диагностики экологически обусловленных заболеваний. //Гигиена и санитария.-М.: Медицина.-2001.-№.5.-С.58-61.

28. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA. -М: МедиаСфера.-2003.-312с.

29. Ревазова Ю.А., Журков B.C. Генетические подходы к оценке безопасности факторов среды обитания человека. //Вестник РАМН.-2001 .-№ 10.-С.77-80.

30. Регистр лекарственных средств России. Энциклопедия лекарств. под. ред. ГЛ.Вышковского. ООО «PJIC-2002».- 2002.-Вып.9.-1504с.

31. Рябинина З.А., Бенюш В.А. Полиплоидия и гипертрофия клеток в процессах роста и восстановления. М.: ív^HUHHá,-1973.-207с.

32. Серединин С.Б., Дурнев А.Д. Фармакологическая защита генома. М: ВИНИТИ.-1992.-162с.

33. Смирнова Л.Г., Е.А.Кост. Руководство по клиническим лабораторным исследованиям основанное В.Е.Предтеченским. М.: Медицинская литература.-1960.-963с.

34. Страчунский Л.С., Белоусов Ю.Б., Козлов С.Н. Антибактериальная терапия. Практическое руководство.-М.-2000.

35. Сычева Л.П. Оценка органной специфичности мутагенного эффекта циклофосфамида у мышей микроядерным методом. //Бюлл. Экспер.биол. мед.-2001 .-№4.-С.445-447.

36. Сычева Л.П. Научное обоснование и разработка системы оценки мутагенного эффекта химических загрязнений окружающей среды у млекопитающих in vivo с учетом органной специфичности. Автореф. дисс. д.б.н.-М.-2002.-46с.

37. Сычева Л.П., Жолдакова З.И., Полякова Е.Е., Лукманова Н.Э., Ахальцева Л.В., Журков B.C. Оценка мутагенной активности циклогексена и продуктов его хлорирования. //Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.-2000.-Т.29.-№6.-С.683-685.

38. Сычева Л.П., Журков B.C., Рахманин КХА. Новый подход к диагностике мутагенных и канцерогенных свойств факторов окружающей среды. //Гигиена и санитария. -М.: Медицина.-2003.-№6.-С.87-91.

39. Сычева Л.П., Коваленко М.А., Шереметьева С.М., Дурнев А.Д., Журков B.C. Изучение мутагенного действия диоксидина полиорганным микроядерным методом. //Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.-2004.-Т.138.-№8.-С.188-190.

40. Сычева Л.П., Рахманин Ю.А., Ревазова Ю.А., Журков B.C. Роль генетических исследований при оценке влияния факторов окружающей среды на здоровье человека. //Гигиена и санитария. -М.: Медицина.-2005 .-№6.-С.56-62.

41. Техногенное облучение и безопасность человека. под ред. Ильина Л.А. Государственный научный центр - Институт биофизики. -М.-2001.

42. Усольцев М.В., Дурнев А.Д., Серединин С.Б. //Экспериментальная и клиническая фармакология.-2000. Т.63.-№2.-С.60-62.

43. Фонштейн Л.М., Ревазова Ю.А., Золотарева Г.Н. и др. //Генетика.-1978. Т.15. №6.-С.901-908.

44. Худолей В.В., Мизгирев И.В. Экологически опасные факторы С-Пб.-Publishing House.-1996.

45. Чеботарев А.Н., Яковенко К.Н. Математическое моделирование зависимости цитогенетического эффекта от концентрации мутагена. //Генетика.-1974.-№8.-С. 150-137.

46. Чиссов В.И., Старинский В.В. Злокачественные новообразования в России в 2000 году (заболеваемость и смертность). М.-2002.-263с.

47. Юрченко В.В., Сычева Л.П., Ревазова Ю.А., Ревич Б.А., Журков B.C. Анализ частоты микроядер и ядерных аномалий в эпителиальных клетках слизистой щеки у женщин, контактирующих с диоксинами. //Токсикологический вестник.-2000.-№3 .-С.2-6.

48. Adkins B.Jr., Van Stee E.W., Simmons J.E., Eustis S.L. Oncogenic response of strain A/J mice to inhaled chemicals. //J Toxicol Environ Health.-1986.-V.17.-P.311-322.

49. Anwar W.A., Rosin M.P. Reduction in chromosomal damage in schistosomiasis patients after treatment with praziquantel. //Mutat Res.-1993 Jan.-№298 (3).-P. 179-85.

50. Arutyunyan R.M., Sarkisyan T.F., Oganesyan G.G., Durnev A.D. Comparative investigation of anticlastogenic effects in cell cultures of healthy donors and patients with nettle rash. //Mutat Res.-1994 Mar.-№320(4).-P.335-341.

51. Baker E.L., Goyer R.A., Fowler B.A., Khettery U., Bernard D.B. Occupational lead exposure, nephropathy, and renal cancer. //Am. J. ind. Med.-1980.-№ 1 .-P .139-148.

52. Biggs M.L., Kalman D.A., Moore L.E., Hopenhayn-Rich C., Smith M.T., Smith A.H. Relationship of urinary arsenic to intake estimates and a biomarker of effect, bladder cell micronuclei. //Mutat Res.-1997 Jun.-№386(3).-P. 185-95.

53. Burgaz S., Cakmak G., Erdem O., Yilmaz M., Karakaya A. Micronuclei frequencies in exfoliated nasal mucosa cells from pathology and anatomy laboratory workers exposed to formaldehyde. //Neoplasma.-2001.-V.48(2).-P.144-147.

54. Borden L.S., Clark P.E., Hall M.C. Bladder cancer. //Curr. Opin. Oncol.-2003.-May №15 (3).-P.227-233.

55. Choi M.J., Lee J.W., Lee B.M. Comparative assessment of DNA adduct formation, Salmonella mutagenicity, and chromosome aberration assays as short-term tests for DNA damage. //J. Toxicol. Environ. Health.-1996.-V.49.-№3.-P.271-284.

56. Connolly J.G., Webber M., Promislow C., Demelker I., Bruce A.W. Exfoliation of epithelial cells from benign and malignant urothclium Invest. //Urol.-1967.-№5.-P.l 19-125.

57. Cooper W.C., Gaffey W.R. Mortality of lead workers. //J. occup. Med.-1975.-№ 17.-P. 100-109.

58. Cordier S., Clavel J., Limasset J., Boccon-Gibod L., Le Moual N., Mandereau L., Hemon D. Occupational risks of bladder cancer in France: a multicentre casecontrol study. //International Journal of Epidemiology.-1993 .-№22.-P.403-411.

59. Dayal H, Kinman J. Epidemiology of kidney cancer. //Semin Oncol.-1983 Dec.-№ 10(4).-P.366-3 77.

60. Dean B.J., Hodson-Walker G. An in vitro chromosome assay using cultured rat-liver cells. //Mutat. Res.-1979.-V.64.-P.329-337.

61. DeKernion J.B., Berry D. The diagnosis and treatment of renal cell carcinoma. //Cancer.-1980.-Vol.45, №7, Suppl.-P. 1947-1956.

62. Douglas G.K, Blakey D.H., Clayson O.B. International commission for protection aganst environmental mutagens and carcinogens. ICPEMCworking paper № 5. Genotoxicity tests as predictors of carcinogens: an analysis. //Mutat. Res.-1988.-Vol.l96.-P.83-93.

63. Dunhill M.S., Millard P.R., Oliver D. Acquired cystic disease of the kidney: a hazard of long-term intermittent maintenance dialysis. //J. clin. Pathol.-1977.-№30.-P.868-877.

64. Environmental Health Criteria 188. //Nitrogen oxides 2nd edition.-WHO, Geneva.-P. 1997.-550.

65. GAP2000.Genetic activity profile of short-term test using data from the US.EPA and from the IARC Monographs.-2000.

66. Ghosh S., Talukder G., Sharma A. Clastogenic activity of strontium chloride on bone marrow cells in vivo. //Biol Trace Elem Res.-1990.-№25.-P.51-56.

67. Gonzalez Cid M., Loria D., Vilensky M. Leather tanning workers: chromosomal aberrations in peripheral lymphocytes and micronuclei in exfoliated cells in urine. //Mutat Res.-1991 Feb.-№259(2).-P. 197-201.

68. Goodman M.T., Morgenstern H., Wynder E.L. A case control study of factors affecting the development of renal cell cancer. //Am. J. Epidem.-1986.-V. 124.-P.926-941.

69. Gorelick N.J., Andrews J.L., deBoer J.G., Young R., Gibson D.P., Walker VE. Tissue-specific mutant frequencies and mutational spectra in cyclophosphamide-treated lacl transgenic mice. //Environ Mol Mutagen.-1999.-V.34(2-3).-P. 154-166.

70. Gortoo H.L., Bansal S.K., Pavelic Z., Struck R.F. Effects of the induction of hepatic microsomal metabolism on the toxicity of cyclofosphamide. //Br.J.Cancer.-l 985.-V.51 .-P.67.

71. Hakura A., Tsutsui Y., Sonoda J. et al. Comparison between in vivo mutagenicity and carcinogenicity in multiple organs by benzoa.pyrene in the lacZ transgenic mouse (Muta Mouse). //Mutat. Res.-1998.-V.398-№l-2.-P.123-130.

72. Hintenlang D. Synergistic effects of ionizing radiation and 60 Hz magnetic fieds. //Bioelectromagnetics.-1993.-P.545-551.

73. Hofseth L.J., Dunn B.P., Rosin M.P. Micronucleus frequencies in urothelial cells of catheterized patients with chronic bladder inflammation. //Mutat Res.-1996 Jun 10.-№352.-P.65-72.

74. IARC Monographs on the Evalution of Carcinogenic Risk of Chemicals to Man. Some aziridines, N-, S- and 0-mustards and selenium. //WHO, Lyon (France).-1975.-V.9.-P. 1 -268.

75. IARC Monographs on the evaluation of carcinogenic risks to humans. Polychlorinated biphenyls and polybrominated biphenyls. Volume 18. IARC, Lyon, France.-P. 1978.-140.

76. IARC Monographs on the evaluation of carcinogenic risks to humans., Genetic and Related effects: An Updating of Selected IARC Monographs from Volumes 1-42. Suppl. 6.-WHO, IARC, Lyon, France.-1987a.

77. IARC Monographs on the evaluation of carcinogenic risks to humans. Overall Evaluations of Carcinogenicity: An Updating of IARC Monographs Volumes 1-42. Suppl. 7.-WHO, IARC, Lyon, France.-19876.

78. IARC Wood, Leather and Some Associated Industries. IARC Monographs on the Evaluation of the Carcinogenic Risk of Chtmicals to Humans.-1981 Vol.25.-P.201-247.

79. IRIS. Database for Windows (компьютерная база данных параметров токсичности веществ).

80. Isomura К., Chikahira М., Terannishi К., Hamada К. Induction of mutations and chromosome aberrations in lung cells following in vivo exposure of rats to nitrogen oxides. //Mutat Res.-1984.-V.136.-P.l 19-125.

81. Itoh S., Miura M., Itoh T. et al. N-Nitrosodi-n-propylamine induces organ specific mutagenesis with specific expression times in lacZ transgenic mice. //Mutat. Res.-1999.-V.444.- №2.-P.309-319.

82. Jacobsen B.K., Bjelke E., Kvale G., Heuch I. Coffee drinking, mortality and cancer incidence: results from a Norwegian prospective study. //J. Natl Cancer Inst.-1986.-№76.-P.823-831.

83. Jen M.N., Hwang J.J., Yang J.Y., Nabyvanets Y.B., Hsieh W.A., Tsai M.H., Guo S.D., Chang W.P. Micronuclei and nuclear anomalies in urinary exfoliated cells of subjects in radionuclide contaminated regions. //Mutat Res.-2002 Sep-№26.-P.39-46.

84. Jodinger S., Seth Y., Seth N. Effect of NOx on the somatic chromosomes goldsmiths. //Environ Health Perspect.-1998.-V.106.-№10.-P.643-647.

85. Luhr O.R., Frostell C.G., Heywood R., Riley S., Lonnqvist P. Induction of chromosome aberrations in peripheral blood lumphocytes after short time inhalation of nitric oxide. //Mutat Res.-1998.-№1.-P.107-115.

86. Johnson G., Lewis Т., Wagner W. Acute toxicity of cesium and rubidium compounds. //Toxicol Appl Pharmacol.-1975.-№32.-P.239-245.

87. Kinman J., Dayal H. Social environment and cancer mortality in men. //Engl J Med.-1983.-№30.-P.1606.

88. Khosid G. Цезий и рубидий. In: Israelson A., ed. Novye dannye po toksikologii redkikh metalov. Moscow-1967.

89. Langenbach R., Nesnow S., Tompa A. et al. Lung and liver cell-mediated mutagenesis systems: specificities in the activation of chemicals carcinogens. //Carcinogenesis.-1981.-V.2.- №9.-P.851-858.

90. Lehucher Michel M.P., Di Giorgio C. The micronucleus assay in human exfoliated urothelial cells: effect of smoking. //Mutagenesis.-1995 Jul-№10.-P.320-32.

91. Lilis R. Long term lead exposure, chronic nephropathy, and renal cancer: a case report. //Am. J. ind. Med.-1981.-№2.-P.293-297.

92. Llobet J.M., Colomina M.T., Domingo J.L., Corbella J. Effect of chelating agents on tissue distribution and excretion of strontium following semichronic strontium ingestion. //Res Commun Chem Pathol Pharmacol.-1991 Feb.-№71 (2).-P.243-246.

93. Martelli A., Campart G., Canonero R. et al. Evaluation of auraminegenotoxicity in primary rat and human hepatocytes and in the intact rat. //Mutat. Res.-1998.-V.414.-№ 1 -3.-P.37-47.

94. Martelli A., Robbiano L., Carrozzino R. DNA damage induced by 3,3'-dimethoxybenzidine in liver and urinary bladder cells of rats and humans. //Toxicol. Sci.-2000.-V.53 .-№l .p.71 -76.

95. Mihatsch M., Manz T., Knusli C., Hofer H.O., Rist M. Phenacetin abuse. III. Malignant turnouts of the urinary tract associated with phenacetin abuse in Basel. //Schweiz. med. Wochenschr.-I980.-№110.-P.225-264.

96. Miller E.C., Miller J.A. Mehanisms of chemical carcinogenesis: nature of proximate carcinogens and interactions with macromolecules. //Pharmacol. Rev.-l 966.-№l 8.-P.805-838.

97. Miller E.C., Miller J.A. The mutagenicity of chemical carcinogens: correlations, problems, and interpretation. In: Hollaender A., ed. Chemical mutagens: principles and methods for their detection, New York, London, Plenum Press-1971.-P.83-119.

98. Mommsen S., Aagaard J. Tobacco as a risk factor in bladder cancer. //Carcinogenesis.-1983.-№4.-P.335-338.

99. Moore L.E., Smith A.H., Hopenhayn-Rich C., Biggs M.L., Kalman D.A., Smith M.T. Micronuclei in exfoliated bladder cells among individualschronically exposed to arsenic in drinking water. //Cancer Epidemiol Biomarkers Prev.-1997 Jan.-№6(l).-P.31-36.

100. Morrison A.S., Advances in the etiology of uiothelial caneer. //Urol. Clin. North Am.-1984.-11.-P.557-566.

101. Murray E.B., Edwards J.W. Micronuclei in peripheral lymphocytes and exfoliated urothelial cells of workers exposed to 4,4 -methylenebis-(2-chloroaniline). //Mutat. Res.-1999 Dec.-№13.-P.175-180.

102. Neulieb R. Effekt of oral intake of cesium chloride: A single case report. Pharmacol Biochem Behav.-1984.-№21-P.15-16.

103. Nesterova E.V., Durnev A.D., Seredenin S.B. Verapamil contributes to the clastogenic effects of acrylamide, cyclophosphamide, and dioxidine on somatic cells of BALB/C and C57BL/6 mice. //Mutat Res-1999 Apr 6;440(2)-P. 171 -179.

104. Peluso M., Bolognesi C., Munnia A. et al. In vivo studies on genotoxicity of a soil fiimigant, dazomet. //Environ.Mol.Mutagen.-1998.-V.32.- №2.-P.179-184.

105. Phillips D., Hewer A. DNA adducts in human urinary bladder and other tissues. //Environ. Health. Perspect.-1993.-V.99.-P.45-49.

106. Rogers Rofe P. The cells of normal human urine. //J. Clin. Path-1955.-№8.-P.25-31.

107. Pegg A.E. Formation of 06-methylguanine by alkylation of rat liver, colon, and kidney DNA following administration of 1,2-dimethylhydrazine. //Cancer Res.-1977 Nov.-№37.-P.4082-7.

108. Reali D., Di Marino F., Bahramandpour S., Carducci A., Barale R., Loprieno N. Micronuclei in exfoliated urothelial cells and urine mutagenicity in smokers. //Mutat. Res-1987.-№192.-P.145-149.

109. Reed T., Dick D. Heritability and validity of healthy physical aging (wellness) in elderly male twins. //Twin Res. 2003 Jurt.-№6(3).-P.227-34.

110. Registry of toxic effects of chemical substances. //Nat. Inst, for Occup. Safety and Health.-1980.-V.1-P.462.

111. Ribeiro L.R., Cerqueira E.M., Salvadori D.M., Barbosa H.S., Whorton E.B. Biomonitoring of individuals occupationally exposed to aromatic amines. //Mutation and the Environment. Part C.-1990.-P.387-396.

112. Rosin M.P. The use of the micronucleus test on exfoliated cells to identify anti-clastogenic action in humans: a biological marker for the efficacy of chemopreventive agents. //Mutat Res-1992 Jun.-№267(2).-P.265-276.

113. Rosin M., Anwar W. Chromosomal damage in urothelial cells from Egyptians with chronic Schistosoma haematobium infections. //Int J Cancer.-1992 Feb.-№20.-P.539-543

114. Sandvic H., Wang H., Jarventaus H. Contents of nuclear buds and micronuclei in folate-deprived human lymphocytes. //From hazard to risk. EEMS 33rd Annual Meeting. Aberdeen, Scotland, UK:-2003.-P.58-59.

115. Sarto F., Finotto S., Giacomelli L. et al. The micronucleus assay in exfoliated cells of the human buccal mucosa. //Mutagenesis.-1987.-V.2.-P.11-17.

116. Sasaki Y.F., Nishidate E., Izumiyama F. et al. Simple detection of in vivo genotoxicity of pyrimethamine in rodents by the modified alkaline single-cell gel electrophoresis assay. //Mutat. Res.-1997b.-V.392.-№3.-P.25 1-259.

117. Sasaki Y., Saga A., Yoshida K. et al. Colon-specific genotoxicity of geterocyclic amines detected by the modified alkaline single cell gel electrophoresis assay of multiple mouse organs. //Mutat. Res.-1998a.-V.414.-№ 1 -3 .-P.9-14.

118. Schmid W. The micronucleus test for cytogenetic analysis. //In: Chemical mutagens, ed. A. Hollaender. №Y-L.-1976.-P.31-53.

119. Shmeser P., Eckert C., Liegibel U. Tissue-specific induction of mutations by streptozotocin in vivo. //Mutat.Res.-1994.-V.307.-№2.-P.495-499.

120. Smith A., Hopenhhayn Rich C., Warner M., Biggs M., Moore L., Smith M. Rationale for selecting exfoliated bladder cell micronuclei as potentialbiomarkers for arsenic genotoxicity. //J. Toxicol. Environ. Health.-1993-№40.-P.223-234.

121. Soloway M.S. The evaluation and Follow up of patients with Ta, Tis, and T1 bladder cancer. //World J. Urol.-l993.-Vol.11(3).-P.153-155.

122. Stich H.F., Rosin M.P. Micronuclei in exfoliated human cells as a tool for studies in cancer risk and cancer intervention. //Cancer Lett.-1984 Apr-№22(3).-P.241-53.

123. Stich H.F. Stich W. and Rosin M.P. The micronucleus test on exfoliated human cells, in: A. Muhammed and R.C. von Borstel (Eds.), Basic and Applied Mutagenesis, Plenum Pres, New York.-1985.-P.337-342.

124. Sufrin G., Beckley S. Renal adenocarcinoma. Geneva. //International Union Against Cansr.-1980.-P.133-155.

125. The scientific bases of cancer chemoprevention //Eds. C. Maltoni, M. Soffriti, W. Davis.-Elsevier, Amsterdam.-1996.-290 p.

126. Tolbert P.E., Shy C.M., Allen J.W. Micronuclei and other nuclear anomalies in buccal smears: method development. //Amer. J. Epidemiol.-1991, V.134.-№8.-P.840-850.

127. Toxicological profile for Arsenic (update). Draft for public Comment. Agency for Toxic Substancces and Desease Registry.-1998.-P. 143-152.

128. Tsuda S., Kosaka Y., Murakami M. et al. Detection of genotoxicity in cultured cells and multiple organs by the alkaline single cell gel electrophoresis assay. //Mutat. Res.-1998.-V.415.-№3.-P.191-200.

129. Wagner W.D., Duncan B.R., Wright P.G., Stokinger H.E. Experimental study of threshold limit of N02. //Arch Environ Health.- 1965.-V.10.-P.455-466.

130. Walles S.A., Victorin K., Lundborg M. DNA damage in lung cells in vivo and in vitro by 1,3-butadiene and nitrogen dioxide and their photochemical reaction products. //Mutat Res.-1995.-№328.-P.l 1-19.