Оценка цитогенетического эффекта факторов окружающей среды в клетках органов дыхательной системы экспериментальных животных и человека тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.07, кандидат биологических наук Коваленко, Мария Александровна

• Коваленко, Мария Александровна
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Коваленко, Мария Александровна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОЦЕНКА МУТАГЕННОГО ДЕЙСТВИЯ ФАКТОРОВ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ НА КЛЕТКИ ОРГАНОВ ДЫХАТЕЛЬНОЙ СИСТЕМЫ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Исследуемые факторы.

2.2. Микроядерный тест на клетках костного мозга.

2.3. Микроядерный тест на клетках легких экспериментальных животных.

2.4. Дифференцировка различных типов клеток легкого на суспензионных препаратах экспериментальных животных и человека.

2.5. Микроядерный тест на эпителиальных клетках слизистой оболочки носа человека

3.6. Микроядерный тест на клетках легких человека.

2.7. Оценка результатов.

ГЛАВА 3. ОЦЕНКА ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКОГО ЭФФЕКТА МАЛЫХ ДОЗ ГАММА-ИЗЛУЧЕНИЯ В КЛЕТКАХ ЛЕГКИХ МЫШЕЙ.

ГЛАВА 4. ОЦЕНКА ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКОГО ЭФФЕКТА ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ В КЛЕТКАХ ЛЕГКИХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ.

4.1. Оценка цитогенетического и цитотоксического эффектов диоксидина в клетках легких и костного мозга мышей микроядерным методом.

4.2. Оценка цитогенетического и цитотоксического эффектов диоксазида в клетках легких крыс.

4.3. Оценка цитогенетического и цитотоксического эффектов симвастатина в клетках легких крыс.

4.4. Оценка цитогенетического эффекта продуктов химической дезактивации промышленных отходов в клетках легких экспериментальных животных.

4.5. Оценка цитогенетического и цитотоксического эффектов диоксида азота в клетках легкого крыс.

ГЛАВА 5. ОЦЕНКА ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКОГО И ЦИТОТОКСИЧЕСКОГО ЭФФЕКТОВ

В КЛЕТКАХ ОРГАНОВ ДЫХАТЕЛЬНОЙ СИСТЕМЫ ЧЕЛОВЕКА.

5.1. Оценка цитогенетического и цитотоксического эффектов в эпителиальных клетках слизистой носа.

5.2. Оценка цитогенетических и цитотоксических показателей в клетках легкого больных саркаидозом и другими заболеваниями легких.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Оценка цитогенетического эффекта факторов окружающей среды в клетках органов дыхательной системы экспериментальных животных и человека»

В настоящее время возрастает техногенное загрязнение окружающей среды. В атмосферный воздух ежегодно выбрасываются миллионы тонн пыли, оксида углерода и диоксида серы, сотни тысяч тонн оксидов азота, десятки тысяч тонн других химических веществ. Поступление большого количества вредных веществ в организм человека через органы дыхания приводит к повышению распространенности легочной патологии, и особенно онкологической заболеваемости (Онищенко Г.Г., Новиков С.М., Рахманин Ю.А. с соавт., 2002; Пинигин М.А., 2004; Величковский Б.Т., 2003; Чучалин А.Г. 1998). Опухоли трахеи, бронхов, легкого в последние годы стабильно занимают первое место в общей структуре онкопатологии (41,3 на 100000 населения) (Социально значимые заболевания населения России в 2003 г., 2004; Государственный доклад, 2002). Возрастает необходимость оценки влияния канцерогенных факторов на систему органов дыхания. Проблема профилактики канцерогенного действия факторов окружающей среды является одной из важнейших в мировом сообществе. Первичная профилактика онкологической заболеваемости предусматривает выявление факторов, обладающим канцерогенным действием и их устранением или ограничением распространения в окружающей среде.

В настоящее время существует система исследования канцерогенной активности различных факторов окружающей среды, представляющая собой двухгодичные эксперименты на двух видах лабораторных животных. Однако эти исследования являются длительными, дорогостоящими и проводятся лишь для небольшой части веществ. По определению экспертов ВОЗ «канцерогеном (химическим, физическим или вирусным) называют агент, способный вызвать или ускорять развитие новообразования, независимо от механизма (или механизмов) его действия или от специфичности эффекта. Канцероген - это агент, который в силу своих физических или химических свойств может вызывать необратимые изменения или повреждение в тех частях генетического аппарата, которые осуществляют гомеостатический контроль над соматическими клетками». Вне зависимости от того, на какие организмы действуют канцерогенные факторы, объединяющей их чертой является мутагенный эффект (индукция генных, хромосомных, геномных мутаций). Своевременное и корректное выявление мутагенов для запрета или ограничения их использования является важнейшей задачей гигиены окружающей среды. (Сычева Л.П., Журков B.C., Рахманин Ю.А., 2003).

Разработаны краткосрочные тесты, позволяющие прогнозировать канцерогенные свойства химических веществ на основе определения их мутагенных свойств (Руководство ВОЗ, 1989; Руководство, 2000). Однако эти тесты не позволяют определять мутагенное действие факторов на клетки органов дыхательной системы млекопитающих и человека. Этот аспект проблемы является особенно важным, поскольку доказана органная специфичность действия мутагенов, проявляющаяся в качественных и количественных различиях повреждения генетического аппарата клеток разных органов (Сычева, 2002).

В связи с этим актуальной проблемой является оценка цитогенетических и цитотоксических эффектов различных факторов (Журков B.C., 1986; Курило Л.Ф., Хилькевич J1.B., 1989; Беляева Н.Н., 1997), особенно в клетках органов дыхательной системы. В настоящее время распространен тест по оценке цитогенетической активности факторов на культуре фибробластов легких китайского хомяка. Разрабатываются системы in vitro на эпителиальных клетках легких для оценки мутагенных свойств. Однако, такие исследования не учитывают истинные взаимодействия структур целого организма на молекулярном, клеточном, тканевом и органном уровнях, метаболические особенности целого организма. Среди методов оценки мутагенности в легких in vivo проводятся исследования с помощью метода Comet, позволяющего определять повреждения ДНК, однако при этом не рассматривается дальнейшая судьба таких повреждений. Проводятся единичные исследования по оценке цитогенетической активности факторов в бронхоальвеолярном лаваже экспериментальных животных, при этом не оцениваются мутагенные эффекты в эпителиоцитах - клетках-мишенях канцерогенеза.

Разработанная Л.П.Сычевой (2002) система оценки цитогенетического эффекта in vivo микроядерным методом в клетках различных органов экспериментальных животных на суспензионных препаратах, позволяет проводить оценку мутагенного действия факторов, в том числе и в легких. Этот методический подход может быть использован для разработки методов оценки мутагенного действия факторов окружающей среды на клетки органов дыхательной системы млекопитающих и человека: эпителиальные клетки бронхов, легких, слизистой носа. Для этого необходима дальнейшая разработка и усовершенствование соответствующих методик, в первую очередь неинвазивных (Рахманин Ю.А., Михайлова Р.И., Зайцева Н.В. с соавт., 2001), их апробация при исследовании различных клеточных популяций дыхательной системы при действии различных факторов, а также определение дозо-временных закономерностей возникновения цитогенетического эффекта.

Таким образом, нерешенные вопросы этой актуальной проблемы позволили сформулировать цель исследования: оценить цитогенетический эффект факторов окружающей среды в клетках органов дыхательной системы. Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

1. Разработать методики оценки цитогенетического действия факторов окружающей среды на клетки органов дыхательной системы экспериментальных животных и человека.

2. Изучить цитогенетическое действие отдельных химических соединений, их смесей и у-излучения на клетки легкого млекопитающих при ингаляционном или пероральном воздействии.

3. Изучить дозовые и временные параметры изменения уровня цитогенетического эффекта в клетках легкого млекопитающих.

4. Сравнить уровни цитогенетических эффектов в разных клеточных популяциях органов дыхательной системы.

5. Оценить спектр и частоту цитотоксических кариологических показателей эпителиальных клеток в слизистой носа и легких человека.

Научная новизна. Впервые:

- разработан метод комплексной оценки цитогенетических и цитотоксических показателей клеток органов дыхательной системы экспериментальных животных и человека;

- определены частоты клеток с микроядрами, ядерными протрузиями, с центральной ядерной перетяжкой, двуядерных клеток в легких контрольных животных;

- проведена количественная оценка и определены дозовые и временные параметры цитогенетического и цитотоксического действия на клетки легких мышей и/или крыс диоксида азота, диоксидина, диоксазида, симвастатина, продуктов дезактивации химических отходов (совтола, люизита, иприта) при ингаляционном и пероральном воздействии;

- проведена комплексная оценка и установлены фоновые уровни цитогенетических (клеток с микроядрами и протрузиями) и цитотоксических показателей (клеток с вакуолизацией ядра, кариорексисом, двуядерных и клеток с перетяжкой ядра) в эпителии слизистой носа 224 жителей г. Москвы, а также частоты этих показателей в макрофагах бронхоальвеолярного лаважа и бронхиальном эпителии браш-биопсии больных бронхолегочными заболеваниями.

Практическая значимость. Материалы исследований использованы при разработке:

- методических рекомендаций: «Оценка мутагенной активности факторов окружающей среды в клетках разных органов млекопитающих микроядерным методом», утвержденных Председателем Межведомственного научного совета по экологии человека и гигиене окружающей среды РФ академиком РАМН Ю.А.Рахманиным (Москва, 2001);

- методических рекомендаций «Оценка цитологического и цитогенетического статуса слизистых оболочек полости носа и рта у человека», утвержденных Председателем Межведомственного научного совета по экологии человека и гигиене окружающей среды РФ академиком РАМН Ю.А.Рахманиным (Москва, 2005);

- изобретения «Способ дифференциальной диагностики туберкулеза и злокачественных поражений легких» (заявка №2004113078, приоритет от 28.04.2004);

- изобретения «Способ неинвазивной диагностики цитогенетического и цитотоксического действия различных факторов на организм человека» (заявка №2005108225, приоритет от 24.03.2005);

Результаты экспериментальных исследований по изучению мутагенной активности использованы при обосновании гигиенических нормативов:

- симвастатина - ПДК утверждена Минздравом РФ (Дополнение №1 к ГН 2.1.6.1338-03 г.-ГН 2.1.6.1765-03 г.);

- диоксида азота - разовая ПДК рекомендована к утверждению Комиссией по санэпиднормированию МЗиСР РФ (протокол от 28.12.04 г.) (Справка о внедрении №2 от|13.01.05 г.);

- смеси триэтаполаминных солей сульфированных полихлорировапных бифенилов и сульфированного трихлорбензола при иероральном поступлении в организм лабораторных животных. ОДУ в воде водных объектов утверждена Минздравом РФ (ГН 2.1.5.1316-03).

Результаты по оценке мутагенной активности смесей РМ1 (продуктов нейтрализации люизита) и РМ2 (продуктов нейтрализации иприта) использованы при комплексной оценке степени эффективности обезвреживания и утилизации этих отходов и при обосновании гигиенических рекомендаций по технологии их переработки (Справка о внедрении от 06.12.04 г.).

Индивидуальные выписки, отражающие цитогенетические и цитотоксические показатели эпителия слизистой носа 205 обследуемых, служащих офиса, переданы в медсанчасть для практического использования с целью улучшения состояния здоровья обследованных.

Работа выполнена в лаборатории генетического мониторинга в рамках двух плановых тем ГУ НИИЭЧиГОС им.А.Н.Сысина РАМН (№ госрегистрации 01200303902 2003-2005 гг.; «Гигиенические основы управления качеством внутренней среды современных общественных зданий» 2005-2007).

В работе использованы материалы совместных исследований по оценке цитогенетической активности различных факторов с сотрудниками лабораторий: комплексного эколого-гигиенического нормирования, гигиены атмосферного воздуха, гигиены почвы, экологии и гигиены жилой среды, цитогистологии ГУ НИИЭЧиГОС им.А.Н.Сысина РАМН, Института общей генетики РАН, ВНИХФИ, ГУП МосНПО Радон.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на III международной научно-практической конференции «Проблемы онкогенетики: научные и прикладные аспекты» (Киев, 2002); научной конференции «Теоретические основы и практические решения проблем санитарной охраны атмосферного воздуха» и конференции молодых ученых «Развитие научного творчества молодежи - объект постоянного внимания В.А.Рязанова», посвященных 100-летию со дня рождения академика В.А.Рязанова (Москва, 2003); 2-м съезде токсикологов России (Москва, 2003); 3-м съезде Вавиловского общества генетиков и селекционеров (Москва, 2004).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 12 печатных работ, из них 3 - в центральной печати.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, четырех глав собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и списка литературы. Текст изложен на 124 страницах машинописи, иллюстрирован 29 таблицами и 10 таблицами (приложение) и 7 рисунками. Указатель литературы содержит 134 источника, из них 48 отечественных и 86 . иностранных авторов.

Заключение диссертации по теме «Гигиена», Коваленко, Мария Александровна

ВЫВОДЫ

1. Для регламентирования химических веществ разработаны методические основы оценки цитогенетического и цитотоксического эффектов микроядерным методом с учетом дополнительных кариологических показателей в клетках органов дыхательной системы экспериментальных животных и человека: приготовление суспензионных препаратов, дифференциация на них клеток легкого, анализ показателей в назальном эпителии, бронхах и легких.

2. Определены частоты цитогенетических и цитотоксических показателей в клетках легких контрольных животных; в назальном эпителии человека; в альвеолярных макрофагах бронхоальвеолярного лаважа и клетках бронхиального эпителия больных различными бронхолегочными заболеваниями (саркоидозом, альвеолитами и др.).

3. Установлены цитогенетический и цитотоксический эффекты ряда факторов в легких экспериментальных животных:

- диоксидин (300 мг/кг) повышал частоту клеток с микроядрами в легких мышей на 5 и 16 день воздействия и частоту двуядерных клеток на 16 день эксперимента;

- смесь продуктов дезактивации люизита вызывала увеличение частоты клеток с микроядрами в костном мозге; клеток с протрузиями и двуядерных клеток в легких мышей при действии минимальной исследуемой дозы 1,56 мг/кг;

- смесь продуктов дезактивации иприта в минимальной исследуемой дозе 3,6 мг/кг увеличивала частоту клеток легких с ядерными протрузиями и двуядерных клеток при отсутствии эффекта в костном мозге;

- диоксид азота не индуцировал микроядра и протрузии при изученных дозовых и временных параметрах ингаляции, но вызывал повышение частоты двуядерных клеток на 5 сутки воздействия.

4. Установлено отсутствие цитогенетического и цитотоксического эффекта лекарственных препаратов диоксазида и симвастатина при подостром ингаляционном воздействии; продуктов дезактивации совтола (ПХДС-Т) при пероральном трехмесячном введении в легких крыс; низких доз у-излучения на уровне трехкратного повышения природного радиоактивного фона в 12-месячном эксперименте.

5. Определены дозовые и временные параметры цитогенетического и цитотоксического эффекта химических соединений в клетках легкого мышей: минимально-действующая доза варьировала в широких пределах: от 1/1250 и 1/250 ЛД5о в случае продуктов дезактивации люизита и иприта до 1/2 ЛД50 - для диоксидина; цитогенетический эффект в легких мышей при действии ксенобиотиков выявлен на 5 и 16 сутки воздействия.

6. Установлена одинаковая чувствительность разных типов клеток легкого (пневмоцитов I, II и макрофагов) к цитогенетическому действию диоксидина.

7. Показано соответствие установленных экспериментально органов-мишеней (легких) и минимально действующих доз мутагенного действия смесей продуктов дезактивации люизита и иприта и канцерогенного эффекта (по данным литературы) исходных соединений.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Коваленко, Мария Александровна, 2005 год

1. Абилев С.К., Абдразаков М.М. //Генетика.-1991 .-Т.27.-№ 11 .-С.2039-2041.

2. Алов И.А. Цитофизиология и патология митоза. -М: Медицина.-1972.-264с.

3. Бекбергенов Б.М., Антипов А.В., Данильянс Е.В., Королев П.Н., Глезер Г.А. Клиническое и экспериментальное исследование диоксидина. Его антибактериальное действие. //Антибиотики.-1982.-Т.27.-№ 5.-С.349-352.

4. Беляева Н.Н. Клеточная восстановительная регенерация как биомаркер вредного действия при гигиенической оценке факторов окружающей среды. Дисс. на соикание уч.степ. д.б.н. -М.-1997.-266 с.

5. Бландова З.К., Душкин В.А., Малашенко A.M., Шмидт Е.Ф. Линии лабораторных животных для медико-биологических исследований. -М.: Наука.-1983.-191 с.

6. Большая медицинская энциклопедия. под ред. Петровского Б.В. -М.: Советская энциклопедия.-1978.-Т.9.-С.380-381.

7. Бонашевская Т.Н. О характере действия газов и паров химических соединений на эпителий воздухоносных путей и респираторных отделов дыхательной системы. //Успехи современной биологии,-1977.-Т.4.-Вып.З.-С.441-452.

8. Величковский Б.Т. Экологическая пульмонология (Роль свободнорадикальных процессов).-Екатеринбург: ЕМНЦ ПОЗРПП Минздрава России.-2003.-141 с.

9. Вредные вещества в промышленности. Справочник для химиков, инженеров и врачей. Том III. Неорганические и элементоорганические соединения под ред. проф. Лазарева Н.В.-Л.: Химия.-1977.-607 с.

10. Государственный доклад о состоянии здоровья населения Российской Федерации в 2002 году. //Здравоохранение Российской Федерации, под ред. Потапова А.И. -М: Медицина.-2004.-С.З-18.

11. Гусева Н.В., Дурнев А.Д., Серединин С.Б. Способность клеток костного мозга генерировать активные формы кислорода у С57В1/6 и BALB/c мышей и мутагенные эффекты диоксидина. //Вопр. мед. химии.-1995.-Т.41.-№ 4.-С.25-28.

12. Дегтярева И.Н., Фадеева Н.И., Буданова Л.И., Кузовкин В.А., Стебаева Л.Ф. Изучение эффекта диоксидина на внутриклеточные фракции микробной клетки. //Фармакология. Токсикология.-198 l.-T.44.-№ З.-С.330-334.

13. Жолдакова З.И. Стабильность, биоаккумуляция, трансформация как эколого-гигиенические критерии опасности СОЗ, их заменителей и продуктов переработки. //Всеросийская конференция по проблеме стойких органических загрязнителей. -М., РФ.-2003.-С.266-277.

14. Журков B.C. Оценка мутагенной активности химических факторов окружающей среды при их гигиеническом регламентировании. /В кн: Медико-биологические исследования в гигиене. -М.: Медицина.-1986.-С.222-251.

15. Закс Л. Статистическое оценивание. -М.: Статистика.-1976.-598 с.

16. Клеточное обновление, под ред. проф. Лиознера Л.Д. Ленинградское отд -е: Медицина.-1966.-270 с.

17. Кузоватов С.Н., Кравцов В.Ю., Бахтин Ю.Б. Межъядерные хромосомные мосты и ядра с протрузиями в клеточных популяциях рабдомиосаркомы РА-23 крыс. //Цитология.-2000.-Т.42.- № 11.-С. 1097-1102.

18. Курило Л.Ф., Хилькевич Л.В. Современные подходы к изучению гонадо- и гаметотоксического эффекта экзогенных факторов. //Медгенетика, экспресс информация. -М.-1989.№ 9.-С.1-16.

19. Маймулов В.Г., Китаева Л.В., Верещагина Т.В. и др. Цитогенетические нарушения в соматических клетках у детей, проживающих в районах с различной интенсивностью загрязнения окружающей среды. //Цитология.-1998.-Т.40.-№ 7.-С.686-689.

20. Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге. -Новосибирск: Наука.-1983.-257 с.

21. Новиков С.М., Поройков В.В., Тертичников С.Н., Семеновых Л.Н., Филимонов Д.А. Анализ тенденций в развитии информационных технологий и обоснование концепции разработки банка токсикологических данных SARETbase. //Гигиена и санитария.-1995.-№ 1.-С.29-33.

22. Онищенко Г.Г., Новиков С.М., Рахманин Ю.А., Авалиани С.Л., Буштуева К.А. Основы оценки рика для здоровья населения при воздействии химических веществ, загрязняющих окружающую среду. /Под ред. Рахманина Ю.А., Онищнко Г.Г. -М.: НИИЭЧиГОС.-2002.-408 с.

23. Пинигин М.А. Оценка риска воздействия атмосферных загрязнений на здоровье населения./Проблемы оценки риска здоровью населения от воздействия факторов окружающей среды. под. ред. Рахманина Ю.А., Онищенко Г.Г. -М.-2004.-С. 160-161.

24. Пономарева Г.Р., Малахова В.А., Ананев B.C. Фармакокинетика диоксидина у онкологических пациентов в послеоперативный период. //Антибиот. Химиотерапия.-1989.-Т.34 -№ 9.-С.684-687.

25. Рахманин Ю.А., Михайлова Р.И., Зайцева Н.В., Вайсман Я.И. Методы донозологической диагностики экологически обусловленных заболеваний. //Гигиена и санитария.-М.-Медицина.-2001.-Ы.5.-С.58-61.

26. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA. -М: МедиаСфера.-2003.-312 с.

27. Регистр лекарственных средств России. Энциклопедия лекарств. под. ред. Г.Л.Вышковского. ООО «РЛС-2002».- 2002.-Вып.9.-1504 с.

28. Романова Л.К., Младковская Т.Б., Покровская М.С. Источники пополнения альвеолярных макрофагов в легких животных и человека. //2й Всероссийский съезд анатомии, гистологии и эмбриологии. -М.-1988.-С.105-106.

29. Руководство по краткосрочным тестам для выявления мутагенных и канцерогенных химических веществ./Гигиенические критерии состояния окружающей среды 51. ВОЗ., Женева.-1989.-212 с.

30. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. /Методические указания по оценке мутагенных свойств фармакологических веществ. -М.-2000.-С.47-60.

31. Серебряков И.С., Романова Л.К. Респираторный отдел легких интактных мышей BALB. //Архив анатомии, гистологии и эмбриологии.-1984.-Т.86.-№ 5.-С.56-63.

32. Серединин С.Б., Дурнев А.Д. Фармакологическая защита генома. /М: ВИНИТИ.-1992.-162 с.

33. Социально значимые заболевания населения России в 2003 году: Статистические материалы. -М.: ГЭОТАР МЕД.-2004.-68 с.

34. Сычева Л.П. Научное обоснование и разработка системы оценки мутагенного эффекта химических загрязнений окружающей среды у млекопитающих in vivo с учетом органной специфичности. Автореф. дисс. д.б.н. М.-2002.-46 с.

35. Сычева JI.П. Оценка органной специфичности мутагенного эффекта циклофосфамида у мышей микроядерным методом. //Бюлл. Экспер.биол. мед.-2001№ 4.-С.445-447.

36. Сычева Л.П., Журков B.C., Рахманин Ю.А. Новый подход к диагностике мутагенных и канцерогенных свойств факторов окружающей среды. //Гигиена и санитария. -М.- Медицина.-2003.-№ 6.-С.87-91.

37. Сычева Л.П., Коваленко М.А., Шереметьева С.М., Дурнев А.Д., Журков B.C. Изучение мутагенного действия диоксидина полиорганным микроядерным методом. //Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.-2004.-Т. 138.-№ 8.-С. 188-190.

38. Техногенное облучение и безопасность человека. Под ред. Л.А.Ильина. Государственный научный центр Институт биофизики. -М.-2001.

39. Урываева И.В. Пролиферация клеток в ключевых событиях канцерогенеза. /Клеточная репродукция и процессы дифференциации. Ленинград.:Наука.-1990.-С.94-109.

40. Хэм А., Кормак Д. Гистология. -М: Мир.-1983.-Т.4.-244 с.

41. Чучалин А.Г. Хронические обструктивные болезни легких. //Хроническая обструктивная болезнь легких. Под. ред. А.Г.Чучалина.-М.-1998.-С.11-26.

42. Шевченко В.А., Померанцева М.Д. Генетические последствия действия ионизирующих излучений.-М.:Наука.-1985.-280 с.

43. Юрченко, Л.П. Сычева, Ю.А. Ревазова, Б.А. Ревич, B.C. Журков. Анализ частоты микроядер и ядерных аномалий в эпителиальных клетках слизистой щеки у женщин, контактирующих с диоксинами. //Токсикологический вестник.-2000.-.Ч.З .-С.2-6.

44. Adkins B.Jr., Van Stee E.W., Simmons J.E., Eustis S.L. Oncogenic response of strain A/J mice to inhaled chemicals. //J Toxicol Environ Health.-1986.-V. 17.-P.311-322.

45. Allen J., Kligerman A., Campbell J., Westbrook-Collins В., Erexson G., Kari F., Zeiger E. Cytogenetic analyses of mice exposed to dichloromethane. //Environmental and Molecular Mutagenesis. -1990.-V.15.-P.221-228.

46. Balansky R.M., D' Agostini F., De Flora S. Induction, persistence and modulation of cytogenetic alterations in cells of smoke-exposed mice. //Carcinogenesis.-1999.-V.20(8).-P. 1491 -1497.

47. Balansky R.M., D'Agostini F., Izzotti A., De Flora S. Less than additive interaction between cigarette smoke and chromium (VI) in inducing clastogenic damage in rodents. //Carcinogenesis.-2000.-V.21(9).-P. 1677-1682.

48. Ballarin C., Sarto F., Giacomelli L., Bartolucci G.B., Clonfero E. Micronucleated cells in nasal mucosa of formaldehyde-exposed workers. //Mutat Res.-1992.-V.280(l).-P.l-7.

49. Bao S., Harwood P.W., Wood B.H., Chrisler W.B., Groch K.M., Brooks A.L. Comparative clastogenic sensitivity of respiratory tract cells to gamma rays. //Radiat Res.-1997.-V. 148( 1 ).-P.90-97.

50. Burgaz S., Cakmak G., Erdem O., Yilmaz M., Karakaya A.E. Micronuclei frequencies in exfoliated nasal mucosa cells from pathology and anatomy laboratory workers exposed to formaldehyde. //Neoplasma.-2001.-V.48(2).-P.144-147.

51. Cartner L.P., Hiatt J.L. Color atlas of histology. 2nd edition: L.W.& W.-1994.-397p.

52. Cartner L.P., Hiatt J.L., Strum J.M. Cell biology & histology. 3rd edition: L.W.& W.-l998.-375 p.

53. Chorvatovicova D., Hoet P.H., Tatrai E., Kovacikova Z. Ozone-induced micronuclei frequency in rat alveolar Type II cells. //Physiol Res.-2000.-V.49(6).-P.733-736.

54. Ciaravino V., Kropko M.L., Rothwell C.E., Hovey C.A., Theiss J.C. The genotoxicity profile of atorvastatin, a new drug in the treatment of hypercholesterolemia. //Mutat Res.-1995.-V.343(2-3).-P.95-107.

55. D'Agostini F., Bonatti S., Oddera S, De Flora S. Micronuclei in human alveolar macrophages. //Respiration.-1992.-V.59 Suppl 1.-P.35-37.

56. Das R.K., Sahu K., Dash B.C. Induction of chromosome aberrations and micronuclei in pulmonary alveolar macrophages of rats following inhalation of mosquito coil smoke. //Mutat Res.-1994.-V.320(4).-P.285-292.

57. Dopp E., Saedler J., Stopper H., Weiss D.G., Schiffmann D. Mitotic disturbances and micronucleus induction in Syrian hamster embryo fibroblast cells caused by asbestos fibers. //Environ Health Perspect.-1995.-V.103(3).-P.268-271.

58. Environmental Health Criteria 188. //Nitrogen oxides 2nd edition. -WHO, Geneva.-l997.-550 p.

59. Eroschenko V.P. Atlas of histology with functional correlations. 9th edition: Lippincott Williams & Wilkins.-2000.-363 p.

60. Evans M.J., Dekker N.P., Cabral-Anderson L.J., Freeman G. Quantitation of damage to the alveolar epithelium by means of type 2 cell proliferation. //Am Rev Respir Dis.-1978.-V. 118(4).- P.787-790.

61. Evans M.J., Shami S.G., Cabral-Anderson L.J., Dekker N.P. Role of nonciliated cells in renewal of the bronchial epithelium of rats exposed to N02. //Am J Pathol.-1986.-V. 123(1).- P. 126-133.

62. Fenech M., Chang W.P., Kirsch-Volders M. et al. HUMN project: detailed description of the scoring criteria for the cytokinesis-block micronucleus assay using isolated human lymphocyte cultures. //Mutation Research.- 2003-V.534.-P.65-75.

63. GAP99W1N.Genetic activity profile of short-term test using data from the US.EPA and from the IARC Monographs (W.J.A.Lohman and P.H.M. Lohman)-1999.

64. Gorelick N.J., Andrews J.L., deBoer J.G., Young R., Gibson D.P., Walker VE. Tissue-specific mutant frequencies and mutational spectra in cyclophosphamide-treated lacl transgenic mice. //Environ Mol Mutagen.-1999.-V.34(2-3).-P.154-166.

65. Haaf Т., Raderschall E., Reddy G. Et al. Sequestration of mammalian Rad51-recombination protein into micronuclei. //J.Cell.Biol.-1999.-V.144.-P.l 1-20.

66. Henrikson R.C., Kaye G.I., Mazurkiewicz J.E. Histology. L. W. & W.-1997.-512 P

67. IARC Monographs on the evaluation of carcinogenic risks to humans., Genetic and Related effects: An Updating of Selected IARC Monographs from Volumes 1-42. Suppl. 6. WHO, IARC, Lyon, France.-1987.

68. IARC Monographs on the evaluation of carcinogenic risks to humans.Overall Evaluations of Carcinogenicity: An Updating of IARC Monographs Volumes 142. Suppl. 7. -WHO, IARC, Lyon, France.-1987.

69. IARC Monographs on the evaluation of carcinogenic risks to humans. Polychlorinated biphenyls and polybrominated biphenyls. Volume 18. //IARC, Lyon, France.-1978.-140 p.

70. Imaeda A, Kaneko T, Aoki T, Kondo Y, Nakamura N, Nagase H, Yoshikawa T. Antioxidative effects of fluvastatin and its metabolites against DNA damage in streptozotocin-treated mice. Food Chem Toxicol.-2002.-V.40(10).-P.1415-1422.

71. Imaeda A., Tanigawa Т., Aoki Т., Kondo Y., Nakamura N., Yoshikawa T. Antioxidative effects of fluvastatin and its metabolites against oxidative DNA damage in mammalian cultured cells. //Free Radic Res.-2001.-V.35(6).-P.789-801.

72. Isomura K., Chikahira M., Terannishi K., Hamada K. Induction of mutations and chromosome aberrations in lung cells following in vivo exposure of rats to nitrogen oxides. //Mutat Res.-1984.-V.136.-P. 119-125.

73. Jagetia G.C., Adiga S.K. Influence of vindesine exposure on the micronucleus formation and cell survival in V79 cells. //Mutat Res.-1998.-V.12.-N.421(l).-P.55-56.

74. Jodinger S., Seth Y., Seth N. Effect of NOx on the somatic chromosomes goldsmiths. //Environ Health Perspect.-1998.-V.106(10).-P.643-647.

75. Keane M.J., Stephens J.W., Zhong B.Z., Miller W.E., Ong T.M., Wallace W.E. A study of the effect of chrysotile fiber surface composition on genotoxicity in vitro. //J Toxicol Environ Health.-1999.-V.27.-N.57(8).-P.529-541.

76. Kennedy C.H., Mitchell C.E., Fukushima N.H., Neft R.E., Lechner J.F. Induction of genomic instability in normal human bronchial epithelial cells by 238Pu alpha-particles. //Carcinogenesis.-1996.-V. 17(8).-P. 1671 -1676.

77. Khan M.A., Van Dye J. Partial volume rat lung irradiation: an evaluation of early DNA damage. //Int J Radiat Oncol Biol Phys Jan.-1998.-V15.-N.40(2). -P.467-476.

78. Kleinsasser N.H., Kastenbauer E.R., Weissacher H., Muenzenrieder R.K., Harreus U.A. Phthalates demonstrate genotoxicity on human mucosa of the upper aerodigestive tract. //Environ Mol Mutagen.-2000.-V.35(l).-P.9-12.

79. Kurt J.E. Histology & cell biology. (NMS for independent study) 2nd edition.-1991.-409 p.

80. Lemaire I. Characterization of the bronchoalveolar cellular response in experimental asbestosis. Different reactions depending on the fibrogenic potential. //Am Rev Respir Dis.-1985.-V.131(l).-P.144-149.

81. Manna G. K., Karmakar M. Chromosome aberrations and mitosis in bone marrow cells of mice treated with tuberculostatic drugs. //Nucleus.-1979.-V.22.-P.96-103.

82. Manti L., Jamali M., Prise K.M., Michael B.D., Trott K.R. Genomic instability in Chinese hamster cells after exposure to X rays or alpha particles of different mean linear energy transfer. //Radiat Res.-1997.-V.147(l).-P.22-28.

83. Massey E., Aufderheide M., Koch W., Lodding H., Pohlmann G., Windt H., Jarck P., Knebel J.W. Micronucleus induction in V79 cells after direct exposure to whole cigarette smoke. //Mutagenesis.-1998.-V.13(2).-P.145-149.

84. Miele M., Bonatti S., Menichini P. et. al. The presence of amplifyed regions affects the stability of chromosomes in drug-resistent Chinese hamster cells. //Mutat. Res.- 1989.-V.219.-P.171-178.

85. Noda Y., Suzuki Т., Kohara A., Hasegawa A. Yotsuyanagi Т., Hayashi M., Sofuni Т., Yamanaka K., Okada S. In vivo genotoxicity evaluation of dimethylarsinic acid in MutaMouse. //Mutat Res.-2002.-V.15.-N.513(l-2).-P.205-212.

86. Ong Т., Liu Y., Zhong B.Z., Jones W.G., Whong W.Z. Induction of micronucleated and multinucleated cells by man-made fibers in vitro in mammalian cells. (V79). //Toxicol Environ Health.- 1997.-V.50(4).-P.409-414.

87. Ono Т., Yoshimura H. Analysis of micronucleus induction of pyrimethamine in in vitro CHL cells and in in vivo mouse bone marrow cells. //Mutagenesis.-1996.-V. 1 l(l).-P.85-88.

88. Oshimura M., Hesterberg T.W., Tsutsui Т., Barrett J.C. Correlation of asbestos-induced cytogenetic effects with cell transformation of Syrian hamster embryo cells in culture. //Cancer Res.-1984.-V.44( 11).-P.5017-5022.

89. Qian H., Whong W., Olsen L., Nath J., Ong T. Induction of micronuclei in V79 cells by fractions of roofing asphalt fume condensate. //Mutat Res.-1999.-V. 17.-N.441 (2).-P. 163-170.

90. Ranaldi R., Bassani В., Pacchierotti F. Genotoxic effects of butadiene in mouse lung cells detected by an ex vivo micronucleus test. //Mutat Res.-2001.-V.5.-N.491(l-2).-P.81-85.

91. Ranaldi R., Bassani В., Villani P., Lombardi C.C., Tanzarella C., Pacchierotti F. Measurement and characterization of micronuclei in cultured primary lung cells of mice following inhalation exposure to benzene. //Mutagenesis.-1998.-V.13(5).-P.453-460.

92. Recio L, Saranko C.J, Steen A.M. 1,3-butadiene: cancer, mutations, and adducts. Part II: Roles of two metabolites of 1,3-butadiene in mediating its in vivo genotoxicity. //Res Rep Health Eff Inst.-2000.-V.92.-P.49-87.

93. Registry of Toxic Effects of Chemical Substances R: EK 779 8000.

94. Sanchez A.M., Barrett J.T., Schoenlein P.V. Fractionated ionizing radiation accelerates loss of amplified MDR1 genes harbored by extrachromosomal DNA in tumor cells.//Cancer Res.-1998.-V.l.-N.58(17).-P.3845-3854.

95. Sandvic U.K., Wang IIu, Jarventaus H. et al. Contents of nuclear buds and micronuclei in folate-deprived human lymphocytes. //From hazard to risk. EEMS 33rd Annual Meeting. Aberdeen, Scotland, UK.-2003.-P.58-59.

96. Shimizu N., Itoh N., Utiyama H., Wahl G.M. Selective entrapment of extrachromosomally amplified DNA by nuclear budding and micronucleation during S phase. //J. Cell Biol.-1998.-V.140.-P.1307-1320.

97. Shimizu N., Shimuara Т., Tanaka T. Selective elimination of acentric double minutes from cancer cells through the extrusion of micronuclei. //Mutat. Res.-2000.-V.448.-P.81-90.

98. Styles J.A., Kelly M., Elcombe C.R. A cytological comparison between regeneration, hyperplasia and early neoplasia in the rat liver. //Carcinogenesis.-1987.-V.8.-P.391-399.

99. Sycheva L.P. Lung and liver are target organs of mutagenic effects of diethylnitrosamine (DENA) in mice and rats. //Pharmacology and Toxicology.-1999.-V.85.Suppl. 1 .-P.20.

100. Talbot R.J., Nicholis L., Morgan A., Moores S.R. Effect of inhaled a-emitting nuclides on mouse alveolar macrophages. //Radiation Research.-1989.-V.l 19(2).-P.271-285.

101. Tisch M., Schmezer P., Faulde M., Groh A., Maier H. Genotoxicity studies on permethrin, DEET and diazinon in primary human nasal mucosal cells. //Eur Arch Otorhinolaryngol.-2002.-V.259(3).-P.150-153.

102. Toxicological profile for Arsenic (update). Draft for public Comment. Agency for Toxic Substancces and Desease Registry.- 1998.-P.143-152.

103. Van Agen В., Maas L.M., Zwingmann I.H., Van Schooten F.J., Kleinjans J.C. Ba.P-DNA adduct formation and induction of human epithelial lung cell transformation. //Environ Mol Mutagen.- 1997.-V.30(3).-P.287-292.

104. Van Schooten F.J., Nia A.B., De Flora S., D'Agostini F., Izzotti A., Camoirano

105. Vodicka P., Koskinen M., Vodickova L., Stetina R., Smerak P., Barta I., Hemminki K. DNA adducts, strand breaks and micronuclei in mice exposed to styrene by inhalation. //Chem Biol Interact.-2001.-V.28.-N.137(3).-P.213-227.

106. Wagner W.D., Duncan B.R., Wright P.G., Stokinger H.E. Experimental study of threshold limit ofN02. //Arch Environ Health.-1965.-V.10.-P.455-466.

107. Walles S.A., Victorin K., Lundborg M. DNA damage in lung cells in vivo and in vitro by 1,3-butadiene and nitrogen dioxide and their photochemical reaction products. //Mutat Res.-1995.-N.328.-P.l 1-19.

108. Ying C.J., Yan W.S., Zhao M.Y., Ye X.L., Xie H., Yin S.Y., Zhu X.S. Micronuclei in nasal mucosa, oral mucosa and lymphocytes in students exposed to formaldehyde vapor in anatomy class. //Biomed Environ Sci.-l997.-V. 10(4).-P.451-455.

109. Zhao H.W., Yin X.J., Frazer D., Barger M.W., Siegel P.D., Millecchia L. Zhong

110. B.Z., Tomblyn S., Stone S., Ma J.K., Castranova V., Ma J.Y. Effects of pavingasphalt fume exposure on genotoxic and mutagenic activities in the rat lung. //Mutat Res.-2004.-V. 14.-N.557(2).-P. 137-149.

111. Zhang J., Zhu H. Comparative study on water-induced micronuclei and chromosomal aberrations in human embryonic lung fibroblast cells. //Wei Sheng Yan Jiu.-l 997.-V.26(3).-P. 183-187.

112. Zhong B.Z., Cu Z.W., Whong W.Z., Wallace W.E., Ong T.M. Comparative study of micronucleus assay and chromosomal aberration analysis in V79 cells exposed to ethylene oxide. //Teratog Carcinog Mutagen.-1991.-V.l 1(5).-P.227-233.

113. Zhong B.Z., Siegel P.D. Induction of micronuclei following exposure to methylene di-phenyl diisocyanate: potential genotoxic metabolites. //Toxicol Sci.-2000.-V.58(l).-P. 102-108.