Оценка мутагенной активности бензола и некоторых его производных как загрязнений воды тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.07, кандидат биологических наук Фельд, Елена Георгиевна

• Фельд, Елена Георгиевна
• кандидат биологических наук
• 1984

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Фельд, Елена Георгиевна

ВВЕДЕНИЕ.

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Системы оценки мутагенной активности химических соединений

1.2. Изучение мутагенных свойств бензола и его производных.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Глава 2. Материалы и методы

2.1. Исследованные вещества

2.2. Экспериментальные животные

2.3. Микроядерный тест

2.4. Метафазный анализ аберраций хромосом в клетках костного мозга мышей.

2.5. Метод учета доминантных летальных мутаций в половых клетках самцов мышей.

2.6. Методы статистической обработки материала

Глава 3. Анализ полихроматофильных эритроцитов с микроядрами в костном мозге мышей (микроядерный тест): показатели микроядерного теста у интактных животных и метод статистической обработки результатов экспериментов.

Глава 4. Оценка мутагенной активности бензола и некоторых его производных в опытах на млекопитающих при пероральном поступлении

4.1. Изучение мутагенной активности бензола

4.2. Изучение мутагенной активности толуола.

4.3. Изучение мутагенной активности п-ксилола

4.4. Изучение мутагенной активности нитробензола

4.5. Изучение мутагенной активности псевдокумола, этилбензола и хлорбензола микроядерным методом

Глава 5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

5.1. Оценка мутагенной опасности бензола и его производных при пероральном поступлении

5.2. Связь цитогенетической активности бензола и его производных с химической структурой вывода.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Оценка мутагенной активности бензола и некоторых его производных как загрязнений воды»

Одной из важнейших задач, стоящих перед современной гигиеной, является повышение точности и надежности гигиенических нормативов с обязательным учетом отдаленных эффектов (Г.И.Сидоренко, 1981), Последнее требование отражено в методических руководствах по установлению ПДК химических веществ в воде водных объектов, атмосферных загрязнений, вредных веществ в воздухе рабочей зоны (М.А.Пинигин, 1976; Г.Н.Красовс-кий и соавт., 1978; И.В.Саноцкий, В.Н.Фоменко, 1979),

Одним из видов отдаленных эффектов является мутагенный - способность факторов окружающей среды повышать частоту мутаций в соматических и половых клетках.

На необходимость учета мутагенной активности химических веществ в токсиколого-гигиенических исследованиях неоднократно указывали как гигиенисты (Н.В.Лазарев, 1966; Л.И.Медведь, Ю.С.Каган, 1964; И.В.Санощеий, 1965; 1968; Г.Н.Красовский и соавт., 1979 и другие), так и генетики (И.А.Рапопорт, 1970; Н.П.Бочков, 1973; Н.П.Дубинин, 1977 и другие). Однако до настоящего времени оценка мутагенной активности химических веществ при их гигиеническом регламентировании проводилась еще недостаточно широко по причине отсутствия обоснованной системы тестов для выявления мутагенов среди загрязнителей окружающей среды, количественной оценки их мутагенности в опытах на млекопитающих и подходов к оценке опасности этих веществ для человека 1Г.Н.Красовский, В.СДурков, 1977).

В.С.Журковым (1981) разработана этапная схема оценки . мутагенной активности факторов окружающей среды при их гигиеническом регламентировании, в которой оцределены тест-объекты, методы и схемы экспериментов, используемые на каждом этапе, а также предложены подходы к оценке степени мутагенной опасности выявленных мутагенов для человека и применению полученных данных при гигиеническом регламентировании. Анализ мутагенных эффектов следует проводить как при разработке новых регламентов, так и при оценке надежности нормативов соединений, установленных без учета мутагенных свойств, хотя имеющиеся в литературе данные (экспериментальные исслеь дования или наблюдения на людях) указывают на наличие мутагенного эффекта, К последним веществам относятся распространенные загрязнители воды бензол и толуол, регламентированные в воде водных объектов без учета мутагенности. В то же время в экспериментах на различных тест-объектах и в наблюдениях на профессиональном контингенте установлена их способность повышать частоту мутаций (В.С.Журков, 1975; Dean f 1978).

В рекомендациях ВОЗ (1971) отмечается, что одним из факторов, указывающих на потенциальную мутагенную активность вещества, является его сходство по химическому строению с известными мутагенами. Это обусловило необходимость анализа мутагенной активности других производных бензола, являющихся загрязнителями среды и регламентированных в воде водных объектов - ксилола, нитробензола, этилбензола, хлорбензола.

Настоящее исследование проведено в рамках Всесоюзной проблемы "Научные основы гигиены окружающей среды" по теме ГОНТ СССР 02.0503Н4в "Экспериментальная оценка мутагенной опасности химических загрязнений окружающей среды", а также в рамках этапа 06.02.HI "Разработать методы нормирования мутагенных загрязнителей окружающей среды" задания 06.02 "Оценить мутагенную активность новых факторов среды обитания человека" Программы по решению научно-технической проблемы 0.69.07 "Иммунология и медицинская генетика".

Целью настоящего исследования являлась экспериментальная оценка мутагенной активности бензола и некоторых его производных в опытах на млекопитающих при пероральном поступлении. Для достижения цели были определены следующие задачи:

1. Анализ мутагенной активности бензола и некоторых его производных (толуола, ксилола, нитробензола, этилбензола, хлорбензола, псевдокумола) в острых опытах на мышах с применением микроядерного метода.

2. Установление зависимости "доза-эффект" для мутагенного действия веществ при использовании метафазного анализа клеток костного мозга и учета доминантных летальных мутаций в половых клетках самцов мышей.

3. Определение степени мутагенной опасности веществ с выявленной активностью по соотношению параметров общетоксического и мутагенного действия.

4. Поиск связи мутагенного эффекта бензола и его производных с химической структурой.

На защиту выносятся следующие положения:

1. Данные по мутагенной активности бензола, толуола, п-ксилола, нитробензола, этилбензола, хлорбензола и псевдокумола, полученные в экспериментах на млекопитающих при пероральном введении.

2. Оценка мутагенной опасности веществ с выявленной активностью и использование полученных данных при регламентировании этих соединений в воде водных объектов.

3. Характеристика показателей нормы в микроядерном тесте у самцов неинбредных мышей.

4. Связь мутагенного эффекта бензола и его производных с химической структурой.

- 7

Научная новизна:

Впервые в экспериментах на млекопитающих с использованием микроядерного теста доказан мутагенный эффект толуола при пероральном поступлении и отсутствие мутагенной активности п-ксилола, нитробензола, этилбензола, хлорбензола и псевдокумола.

Выявлена четкая дозовая зависимость частоты аберраций хромосом в клетках костного мозга мышей при внутрижелудочном введении бензола; толуол, п-ксилол и нитробензол не влияли на частоту аберраций хромосом при пероральном поступлении.

Доказана надежность предельно допустимых концентраций бензола и толуола в воде водных объектов с точки зрения возможности проявления мутагенного эффекта этих соединений.

Установлены колебания показателей микроядерного теста у самцов контрольных мышей.

Показано, что мутагенная активность гомологов бензола связана с их химической структурой: наиболее выражена у бензола, в меньшей степени проявляется у толуола и полностью отсутствует у других метилпроизводных, а также у этил-, нитро-и хлорпроизводных бензола.

Практическая значимость:

Результаты исследований, проведенных с применением микроядерного теста, использованы при подготовке методических рекомендаций "Оценка мутагенной активности химических веществ микроядерным методом", утвержденных Минздравом СССР - № 28-6/10 от 3 апреля 1984г.

Данные о мутагенном действии бензола, толуола, ксилола, нитробензола, этилбензола, хлорбензола и псевдокумола учтены при установлении классов опасности указанных веществ и повышении надежности их нормативов. ЦЦК утвервдены Минздравом СССР

- 8 2932 - 83 от 24 октября 1983г.

Результаты исследований, проведенных с использованием метафазного анализа и микроядерного теста, вошли в проект "Методических рекомендаций по изучению мутагенной активности химических соединений при обосновании их ЦЦК в воде водных объектов" (справка №11 - 13а/89 от б апреля 1984г.).

Материалы диссертационной работы экспонировались на ВДНХ СССР и отмечены дипломом участника (свидетельство №9903, 1982г).

Разработанная модификация микроядерного теста оформлена в виде рационализаторских предложений (№№ 352, 354 от 26 ноября 1981г).

Метод учета микроядер в полихроматофильных эритроцитах костного мозга мышей и крыс внедрен в практику лаборатории токсикологии Казанского ветеринарного института (справка о внедрении № Б-800 от б октября 1983г) и лаборатории охраны окружающей среды Пермского политехнического института (справка о внедрении № 1058/НИС от 27 октября 1983г).

Заключение диссертации по теме «Гигиена», Фельд, Елена Георгиевна

ВЫВОДЫ

1. Из числа изученных микроядерным методом ароматических углеводородов (бензол, толуол, ксилол, нитробензол, этилбензол, хлорбензол, псевдокумол) только бензол и толуол показали мутагенный эффект в острых опытах на мышах при пер-оральном поступлении. Минимально действующей дозой бензола была доза 40 мг/кг. Толуол обладал активностью в дозах 200 и 1000 мг/кг.

2. В условиях подострого эксперимента при внутрижелудочном введении бензола частота клеток с аберрациями хромосом в костном мозге мышей возрастала с увеличением дозы. Данная зависимость в диапазоне доз до 80 мг/кг удовлетворительно описывалась линейным уравнением: у = 0,86 + 0,124х, где х -доза бензола в мг/кг, у - частота клеток с аберрациями хромосом в %. Минимально действующей была доза 20 мг/кг.

Толуол, ксилол и нитробензол при пероральном введении не влияли на частоту аберраций хромосом в клетках костного мозга мышей.

3. Бензол и толуол при 5-недельной внутрижелудочной затравке в дозах от 0,001 до 0,05 ДЦзд не индуцировали доминантных летальных мутаций в половых клетках самцов мышей.

4. Установленные допустимые по мутагенному действию концентрации бензола и толуола (2 мг/л и 20 мг/л соответственно) превышают значения ГЩК этих веществ для воды водных объектов (0,5 мг/л для обоих соединений), что свидетельствует о надежности существующих регламентов бензола и толуола в генетическом отношении.

5. Установлены колебания показателей микроядерного теста у самцов контрольных неинбредных мышей знк. Частота полихроматофильных эритроцитов с микроядрами в костном мозге составила 0,191+0,020$, нормохромных эритроцитов с микроядрами - 0,196+0,018$, доля полихроматофильных эритроцитов от общего числа эритроцитов - 49,2+0,68$.

6. Цитогенетическая активность производных бензола связана с их химической структурой. Бензол обладает выраженным цитогенетическим эффектом. Введение в ароматическое кольцо одной метильной группы (толуол) снижает мутагенную активность вещества; увеличение количества метильных групп (ксилол, псевдокумол), удлинение ажильного радикала (этил-бензол), наличие нитрогруппы (нитробензол) или атома хлора (хлорбензол) приводит к снятию мутагенных свойств.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Фельд, Елена Георгиевна, 1984 год

1. Алиханян С.И., Оганесян М.Г. Зависимость мутагенного эффекта 2-хлоралкиламинов от структуры их функциональных групп и радикалов.- Вестник АМН СССР, 1964, 1. с.72-84.

2. Архипова О.Г., Губина Н.Б., Грибова И.А., Зорина Л.А., Лядова Е.В., Мельникова М.М., Попова Т.Б., Сорокина Л.С. Состояние здоровья и некоторые вопросы метаболизма толуола у рабочих цехов глубокой печати.- Гигиена труда и профзабол., 1977, №3, с.1-4.

3. Бартошевич Ю.Э. Мутагенный эффект и строение производных этиленимина.- Тр. Московок, о-ва испытат. природы, 1966, 22, с.124.

4. Батикян Г.Г., Ширинян Г.С., Арутюнян P.M. Оценка уровня сестринских хроматидных обменов на бензольном производстве.- Биол. ж-л Армении, 1980, 33, Л 7, с.753-755.

5. Бочков Н.П. Проблемы мутагенеза у человека.- Вестник АМН СССР, 1973, $ I, с.55-61.

6. Бочков Н.П., Шрам Р.Я., Кулешов Н.П., Журков B.C. Система оценки химических веществ на мутагенность: общие принципы, практические рекомендации и дальнейшие разработки.» Генетика, 1975, II, $ 10, с.156-169.

7. Брахнова И.Т., Баженова Л.Н. Строение кристаллической решетки простых веществ и соединений как показатель их токсического действия.- Гигиена и санитария, 1971, № 10, с.95-100.

8. Бреслер В.М., Шубик В.М. Экспериментальное и клиническое изучение аутоиммунного асперматогенеза.- Вестник АМН СССР, 1971, № I, с.87-89.

9. Венецкий И.Г., Венецкая В.И. Основные математико-ста-тистические понятия и формулы в экономическом анализе. М., Статистика, 1979.

10. ВОЗ. Оценка и тестирование лекарств на мутагенность. Принципы и проблемы.- Серия техн. докл. ВОЗ, 1971,482, с.1-18.

11. Волкова О.В., Невструева В.В., Боронихина Т.В., Рухад-зе Е.В. К вопросу о структурной организации перитубу-лярной ткани семенника.- Вестник АМН СССР, 1981, Je II, с.80-85.

12. Волкова О.В., Боронихина Т.В., Невструева В.В. Современное состояние вопроса о структуре и функциях гемато-тестикулярного барьера.- Архив анат., гистол. и эмбриол., 1982, вып. 10, с.5-24.

13. Гладкова Н.С. Электронно-микроскопическое изучение компонентов гематотестикулярного барьера и сперматогенного эпителия у крыс после дозированной травмы семенника.-Тр. 2 Московск. мед. ин-та, сер. гистология, 1978, 86, вып. I, с.30-36.

14. Голубев A.A., Люблина Е.И., Толоконцев H.A., Филов В.А. Количественная токсикология. Л., 1973.

15. Гурфейн Л.Н., Павлова З.К. Предельно допустимая концентрация бензола в воде водоемов.- В сб.: Санитарная охрана водоемов от загрязнения промышленными сточными водами. М., i960, вып. 4, с.91-99.

16. Даввдова А.И. Гематотестикулярный барьер.- В кн.: Бюлл. Московск. о-ва испытат. природы. М., Изд. МГУ, 1972, с.96.

17. Доброхотов В.Б. О мутагенном влиянии бензола и толуола в условиях эксперимента.- Гигиена и санитария, 1972, 37, № 10, с.36-39.

18. Доброхотов В.Б., Еникеев М.И. 0 мутагенном действии бензола, толуола и смеси этих углеводородов в хроническом эксперименте.- Гигиена и санитария, 1977, ffa I,с.32-34.

19. Дубинин Н.П. Мутагены среды и наследственность человека. -В кн.: Генетические последствия загрязнения окружающй среды. М., Наука, 1977, с.3-20.

20. Дубинин Н.П., Пашин Ю.В. Мутагенез и окружающая среда. М., Наука, 1978.

21. Егорова Н.А. Гигиеническое обоснование некоторых расчет-но-экспериментальных методов прогнозирования безвредных уровней содержания веществ в воде водоемов.- Автореф. дисс. канд. мед. наук. М., 1980.

22. Журков B.C. Химические мутагены в окружающей человека среде.- В кн.: Генетика человека, т.2, сер. "Итоги науки и техники". М., ВИНИТИ, 1975, с.116-161.

23. Журков B.C. Подходы к регламентации химических загрязнителей окружающей среды, обладающих мутагенной активностью.- В сб.: Медицинские проблемы охраны окружающей среды. М., 1981, с.88-95.

24. Журков B.C., Шрам Р.Я. Динамика доминантных летальных мутаций у самцов мышей при разных сроках экспозиции циклофосфамида в питьевой воде.- Генетика, 1978, 14, № 5, с.824-828.

25. Измеров Н.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров И.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии. Ы., Медицина, 1977, 240 с.

26. Коваленко С.П. Некоторые проблемы и перспективы химического мутагенеза.- Цитология и генетика, 1967, № 6,с.65-72.

27. Корогодина Ю.В. Влияние генотипа самок на выход доминантных летальных мутаций, индуцированных тиофосфамидом в зрелых спермиях мышей.- Бюлл. эксп. биол. и мед., 1980, 89, № 2, с.210-211.

28. Красовский Г.Н. Принципы и критерии поэтапного гигиенического нормирования веществ в воде.- В кн.: Вопросы охраны окружающей среды. Пермь, 1977, с.19-22.

29. Красовский Г.Н., Жолдакова З.И., Егорова Н.А. Методичес -кие основы ускоренного гигиенического нормирования вредных веществ в воде.- В сб.: Проблема пороговости в токсикологии.- М., 1979, с.27-50.

30. Красовский Г.Н., Журков B.C. Актуальные аспекты изучения генетических эффектов загрязнений окружающей среды.- В кн.: Вопросы охраны окружающей среды. Пермь, 1977,с.323-326.

31. Красовский Г.Н., Перелыгин В.М., Пинигин М.А., Рапопорт К.А., Васюкович Л.Я., Сутокская И.В. Достижения в СССР коммунальной токсикологии.- Итоги науки и техники, ВИНИТИ, Токсикология, М., 1978, 10, с.78-107.

32. Лазарев H.B. Наркотики. Л., 1940.

33. Лазарев H.B. Неэлектролиты. Л., 1944.

34. Лазарев Н.В. Некоторые проблемы и трудности промышленной токсикологии.- В сб.: Токсикология и гигиена высокомолекулярных соединений и химического сырья, используемогодля их синтеза. М.-Л., 1966, с.8-9.

35. Лазарев Н.В., Левина Э.Н. Вредные вещества в промышленности. Л., Химия, 1976.

36. Лакин Г.Ф. Биометрия. М., 1980.

37. Левина Э.Н. Общая токсикология металлов Л., 1972.

38. Лоприено Н. Мутагены окружающей среды и быстрая сравнительная оценка мутагенности.- В кн.: Молекулярные основы генетических процессов. М., Наука, 1981, с.127-138.

39. Люблина Е.И., Работнова Л.В. Возможность прогнозирования токсичности летучих органических соединений по физическим константам.- Гигиена и санитария, 1971, № 8,с.33-37.

40. Ляпкало A.A. 0 генетической активности бензола и толуола.-Гигиена труда и профзабол., 1973, № 3, с.24-29.

41. Лярский П.П., Юрченко В.В., Журков B.C., Глейберман С.Е. Мутагенная опасность парентерального поступления окиси этилена в организм млекопитающих.- Гигиена и санитария, 1983, № I, с.23-26.

42. Малашенко A.M., Суркова Н.И. Мутагенный эффект тиоТЭФу лабораторных мышей. Сообщение У. Влияние генотипа самок на реализацию доминантных летальных мутаций, индуцированных в сперматозоидах самцов.- Генетика, 1975, II, № 2, C.I05-III.

43. Медведь Л.И., Каган Ю.С. Некоторые теоретические вопросы токсикологии пестицидов.- В сб.: Вопросы промышленной исельскохозяйственной токсикологии. Киев,1964, с.43-52.

44. Метод учета хромосомных аберраций как биологический индикатор влияния фактрров внешней среды на человека (Методические рекомендации). М., 1974.

45. Мнацаканов С.Т., Погосян А.С. К вопросу о мутагенной активности бензола в клетках человека в опытах 1п у^гд-Биол. ж-л Армении, 1973, 26, № 12, с.38-43.

46. Невструева В.В., Боронихина Т.В. Некоторые барьерообра-зующие структуры семенника.- Архив анат., гистол. и эмбриол., 1980, 79, вып.9, с.81-91.

47. Нечипоренко С.П., Ротенберг ГО.С. Метаболизм ароматических углеводородов.- В кн.: Итоги науки и техники. ВИНИТИ, Токсикология, 1981, 12, с.117-156.

48. Определение мутагенности химических соединений (генетический скрининг) на лабораторных мышах. (Методические указания), М., 1977.

49. Павленко С.М. Новые санитарно-токсикологические материалы для гигиенического обоснования предельно допустимой концентрации бензола в воде водоемов.- В сб.: Промышленные загрязнения водоемов. М., 1969, вып.9, с.201-210.

50. Парк Д.В. Биохимия чужеродных соединений.- М., Медицина, 1973, с.260-269.

51. Петров А.А., Бальян Х.В., Трощенко А.Т. Органическая химия. Учебник для вузов.М», Высшая школа, 1981.

52. Пинигин М.А. Научные основы санитарной охраны атмосферного воздуха.- В кн.: Санитарная охрана атмосферного воздуха. М., Медицина, 1976, с.15-47.

53. Поллард Дж. Справочник по вычислительным методам статистики. М., Финансы и статистика, 1982, с.248-250.

54. Райцина С.С., Давыдова А.И. Гематотестикулярный барьер.

55. Успехи соврем, биол., 1973, 75, № I. с.104-124.

56. Рапопорт И.А. Токсикогенетика.- В кн.: Итоги^науки, отд. биол., фармакол. и токсикол. ВИНИТИ, М., 1966, вып.7,с.7-46.

57. Рапопорт И.А. Химические мутагены, опасные для человека.-В сб.: Проблемы медицинской генетики. М., .Медицина, 1970, с.249.

58. Рашевская A.M., Зорина Л.А. Профессиональные заболевания системы крови химической этиологии. М., 1968,с.71-79.

59. Рюютель П.Я. Применение теста Эймса у лиц, имеющих контакт с бензолом (предварительное сообщение).- Докл. 2 финско-эстонского симп. по ранним воздействиям токсических веществ. Хельсинки, 1981, с.45-52.

60. Саноцкий И.В. К вопросу о гонадотропном действии ядовитых веществ.- В кн.: Гигиена и токсикология пестицидов и клиника отравлений. Киев, 1965, с.108-110.

61. Саноцкий И.В. Проблема отдаленных последствий воздействия продуктов нефтехимии.- В кн.:'Токсикология и гигиена нефтехимии и нефтехимических производств. Ярославль, 1968, с.15-16.

62. Саноцкий И.В., Фоменко В.Н. Отдаленные последствия влияния химических соединений на организм. М., Медицина, 1979, с.15-17.

63. Селезнева Т.Г., Шаталина И.Г., Чеботарев А.Н. Связь эффективности индуцирования СХО с химической структурой мутагена.- Генетика, 1982, 18, № 2, с.269-274.

64. Сидоренко Г.И. Об эффективности гигиенического нормирования и путях его совершенствования.- Гигиена и санитария, 1981, № 5, с.4-7.

65. Соколов В.В., Горизонтова М.Н., Чулина H.A. Структураи состав хромосом клеток костного мозга при воздействии на организм некоторых физических и химических факторов.-Генетика, 1970, 6, № 6, с.174-177.

66. Соколов В.З., Харлампович Г.Д. Производство и использование ароматических углеводородов. М., 1980.

67. Суханова В.А., Макарьева Л.М., Бойко В.И. Исследование функциональных свойств лейкоцитов у рабочих производства ксилола.- Гигиена и санитария, 1969, № 9, с.130-132.

68. Тиунов Л.А. Основные механизмы метаболизма ксенобиотиков в организме человека и животных.- В кн.: Итоги науки и техники. ВИНИТИ, Токсикология, 1981, 12, с.5-64.

69. Филов В.А., Люблина Е.И. Связи состава, строения и свойств химических соединений с показателями токсического действия и их использование для предсказаний.

70. В кн.: Основы общей промышленной токсикологии. Л., Медицина, 1976, с.230-267.

71. Фламм У.Г. Ступенчатый метод тестирования мутагенов.-В кн.: Генетические последствия загрязнения окружающей среды. М., Наука, 1977, с.26-31.

72. Юрченко В.В. Микроядерный тест в системе этапной оценки мутагенных свойств антимикробных и репеллентных препаратов (экспериментальные исследования). Автореф. дисс. канд. мед. наук. М., 1983.

73. Юрченко В.В., Глейберман С.Е. Методика выявления микроядер в ретикулоцитах костного мозга. Лаборат. дело, (ВИНИТИ, Д-5324), 1982, с.1-13.

74. Aksoy M., Dinjol K., Akqiin T., Erdem S., Dingol G. Hae-matological effects of chronic benzene poisoning in 217 Workers. Br. Jour. Ind. Med., 1971, 28, 3, p.296-302.

75. Andrews L.S., Sasame H.A., Gillette J.R. -benzene metabolism in rabbit bone marrow. Life Sciences, 1979,25, 7, p. 567-572.

76. Bauchinger M., Schmid E., Dresp Y», Kolin-Gerreslieim J., Häuf R., Suhr E» Chromosome changes in lymphocytes after occupational exposure to toluene . Mutat. Res., 1982, 102, p. 439-445.

77. Bauchinger M., Schmid E., Dresp J., Kolin-Gerresheim J. Chromosome abberations and sister-chromatid exchanges in toluene-exposed workers. Mutat. Res., 19835 113> 3-4, p. 231-232.

78. Bos R.P., Brouns R.M.E., Doom R. van, Theuws J.L.G., Henderson P. Th. lion mutagenicity of toluene, o,-m and p-xylene, o-methyl-benzylalcohol and o-methylbenzylsulfate in the Ames assay. Mutat. Res., 1981, 88, 3, p. 273-279.

79. Bridges B.A. Some general principles of mutagenicity screening and a possible framework for testing procedures. -Environ.Health Inspect., 1973, 6, p. 221-227.

80. Bridges B.A. The three-tier approach to mutagenicity screening and the concept of radiation equivalent dose. -iviutat.Res., 1974, 26, 4, p. 355-340.

81. Browning E. Toxicity and metabolism of industrial solvents.

82. Elsevier, Amsterdam, 1965»

83. Bynum G., Kram D., Sclineider E.L. The need for defining areas of divergences between mutagen screening tests. Benzene and phenylenediamine (hair dye) induced sister chromatid exchanges. Environ, ivlutagenes., 1979» JL>p. 137.

84. Chandley A.C., Xofman-Alfaro S. Unscheduled DNA synthesis in human germ cells following W irradiation. -Exp.cell Res., 1971» I> P* 45-48.

85. Cornish H.H., Ryan R.C. Metabolism of benzene in non-fasted, fasted and arylhydroxylase inhibited rats. Toxicol. Appl. Pharmacol., 1965, 6, p. 767-771*

86. Daly J., Jerina D., Witkop B. Migration of deuterium during hydroxylation of aromatic substrates by liver microsomes: I. Influence of ring substituents. Arch. Biochem. Biophys., 1968, 128, 2, p. 515-527.

87. Dean B.J. Chemical-induced chromosome .damage. Lab.Anim., 1969, 3, 2, p. 157-174.89» Dean B.J. Genetic toxicology of benzene, toluene,-xylenes and phenols. Mutat. Res., 1978, 4£, 2, p. 75-97.

88. Diaz M., ELjtman N., Carricarte V., Braier L., Diez J. Effects of benzene on sister-chromatid exchange in human lymphocytes. Environ. Mutagenes, 1979, I, 2, p.177«

89. Dobashi I. Influence of benzene and its metabolites on mitosis of cultured human cells. Jpn. J. Ind. Health, 1974, I6t p. 453-461.

90. Donner M., Husgafvel-Pursiainen K. , Maki-Paakkanen J., Sorsa M., Vainlo H. Genetic effects of in vivo exposure to toluene. Mutat. Res., 1981, 85, 4, p.293-294.93» Donner M., Maki-Paaickanen J., Horppa H., Sorsa M.,

91. Vainio H. Genetic toxicology of xylenes. Mutat. Res., 1980, £4, 3, P. I7I-I72.

92. Pord C.E., Hamerton J.L. A colchicine, hypotonic citrate, squash sequence for mammalian chromosomes. Stain Tech-nol*, 1956, 31, 6, p. 247-251.

93. Porni a. Chromosome changes due to chronic exposure to benzene. Proc. XV Int. Congr. Occupational Health II/I, Vienna, 1966, II, I, p. 437-439.

94. Porni A.M., Cappellini A., Pacifico E., Vighiani E.C.

95. Porte P.J., Cohen H.S., Rosman J., Preedman M.L. Heniin reversal of benzene-induced inhibition of reticulocyte protein synthesis. Blood, 1976, I, p. 145-154.

96. Prank D.W., Trzos E.Y., Good P.Y. A comparison of two methods for evaluating drug-induced chromosome alterationS.-Mutat. Res., 1978, 56,3, p. 3H-3I7.

97. Pry J.R. Activation systems in tissue culture toxicity studies. Toxicology, 1982, 25» I, p. I-I2.

98. Generoso W.H., Cain K.T., Krishna M., Huff S.W. Genetic lesions induced by chemicals in spermatozoa and spermatids of mice are repaired in the egg. Proc.Hatl.Acad.-Sci. (USA), 1979, 76, I, p.435-437*

99. Germain D., Requin Ch., Philippe. H. La fragilité chromosomique acquise. Monographies d'hematologie clinique et biologique, 1971, II, P» 45-51»

100. Gerner-Smidt P., Priedrich U. The mutagenic effect of benzene, toluene and xylene studied by the SCii technique.-Mutat. Res., 1978, 58^, 2-3, p. 313-316.

101. Gledhill B.L., Darzynkiewicz Z. Unscheduled synthesis of DNA during mammalian spermatogenesis in response to UV irradiation. J. exp. Zool., 1973, 183, 3, p.375-382.

102. Goguel A., Cavigneaux A., Bernard J. Les leucémies ben-benzeniques de la region parisienne entre 1950 et 1965» (iStude de 50 observations). Ilovelle revue française d'hematologie, 1967, 7, 4, p. 465-480.

103. Gonasun L.M., Witmer C., Kocsis J.J., Snyder R. Benzene metabolism in mouse liver microsomes. Toxicol. Appl. Pharmacol., 1973, 26, 3, p. 39&-406.

104. Gu^glielmo G.di., Iannaccone A. Inhibition of mitosis and regressive changes of erythroblasts in acute erythro-pathy caused by occupational benzene poisoning. Acta haematologica, 1958, 19, 3, p. 144-147»

105. Haberlandt W., Mente B. Deviation in number and structure of chromosomes in industrial workers exposed to benzene. Zentrabl. Arbeitsmed., 1971» 21» II» P. 338-341.

106. Hanke J., Dutkiewicz T., Piotrowski J. The absorption of benzene through the skin in men. Med. Pracy, 1961»12» 5» p. 413-425.

107. Hartwich G., Schwanitz G. Ghromosomenuntersuchungen nach chronischer Benzol-iUxposition. Dtsch. Med. Wochenschr., 1972, 97, 2, p. 45-49.

108. Heidger P. An electron microscopic study of a barrierto the entrance of horseradish peroxidase into the seminiferous tubule. Anat. Res., 1969, 165» p. 198.

109. Hite M., Pecharo M., Smith I., Thornton S. The effect of benzene in the micronucleus test . Mutat. Res., I960, 77, 2, p. 149-155.

110. I7Howards S.S., Jessee S.J., Johnson A.D. Micropuncture studies of the blood seminiferous tubule barier. -Biol. Repr., 1976, 14, 3, p. 264-269.

111. Hunter O.G. Solvents with reference to studies on the pharmacodynamic of benzene. Proc. R.Soc. Med., 1968, 61, p. 913-915.

112. Hunter C.G., Blair D. Benzene: pharmacokinetic studies in man. Ann.Qccup. Hyg., 1972, 15» 2-4, p.I93-I99.

113. Infante P.I?., Wagoner O.K., Rinsky R.A., loung R.J. Leukemia in benzene workers. Lancet, 1977» 8028, p. 76-78.

114. Jerina D.M., Daly J.W., Witkop B. Deuterium migration during the Acid-catalyzed dehydration of 6-deuterio-5,6- dihydroxy-3-chloro-I,3-cyclohexadiene, a nonenzy-matic model for the NiH shift. -J.Amer.Chem.Soc.,I9&7, 89, 21, p. 5488-5489.

115. Jerina D.Li., Daly J.W., Witkop B. The role of areneoxepin systems in the metabolism of aromatic substrates.21.. Synthesis of 3,4-toluene-4- H oxide and subsequent "NiH Shift" to 4-hydroxytoluene-J-^H. J.Amer.Chem. Soc., 1968, . -90, 23, p. 6323-6323.

116. Joshikawa K., Uchino H., Kurata H. Mutagenicity of benzene derivatives in salmonella typhimurium. Mutat. Res., 1978, 3ft, 2, p. 262-263.

117. Kaubisch N., Daly J.W., Jerina D.M. Arene oxides as intermediates in the oxidative metabolism of aromatic compounds: isomerisation of methyl-substituted arene oxides. Biochemistry, 1972, II, 16, p. 3080-3088.

118. Khan H., Khan M.H. Cytogenetische Untersuchungen bei chronischer Benzolex position. Arch. Toxicol., 1973, 31, I, p. 39-49.

119. Kinoshita T., Santella R., Pulkrabek P., Jeffrey A.M. Benzene oxide: genetic toxicity. Mutat. Res., I9SI, 9I, 2, p. 99-102.

120. Kissling M., Speck B. Chromosome aberrations in experimental benzene intoxication. Helv. Med. Acta., 1971, 36, I, P. 59-66.

121. Kissling M., Speck B. Further studies on experimental benzene induced aplastic anemia. Blut, 1972, 25, 2, p. 97-IO3.

122. Kofman-Alfaro S., Chandley A.C. Radiation-initiated DBA synthesis in spermatogenie cells of the mouse. Exp. cell Res., 1971, 69, I, p.33-44.

123. Koizumi A., Dabachi I., iDachibana I., Tsuda K., Katsu-nujiia H. Cytokinetic and cytogenetic changes in cultured human leucocytes and HeLa cells induced by benzene. -Ind. Health, 1974-, 12, 1-2, p. 23-29.

124. Kormano M.Dy permeability and alkaline phosphatase activity of testicular capillaries in the postnatal rat. -Histochemia, 1967, % p. 327-338.

125. Kormano M. Penetration of intravenous trypan blue intou the rat testis and epididymis. Acta histochem., 1968, 30, p. 133-136.133* Ledebur M. Von, Schmid W. 'J?he xaicronucleus test. Methodological aspects. Mutat. Res., 1973, 19, I, p.I09-117.

126. Lee E.W., Kocsis J.J., Snyder R. Dose dependent inhibitstion of ; . Pe incorparation into erythrocytes after a single dose of benzene. Res. Commun. Chem. Pathol. Barmacol., 1973, 2, p. 547-550.

127. Lorenzo F. de, Staiano N., Silengo L., Cortese R. Mutagenicity of diallate, sulfallate and triallate and relationship between structure and mutagenic effects of carbamates widely used in agriculture. Cancer Res., 1978, ¿8, P» 13-15.

128. Mackey B.jtfi., MacGregor J. The micronucleus test: statistical design and analysis. Mutat. Res., 1979, 64, 3, p. 195-204.

129. Mc Carroll N.E., Piper C.E., Keech B.H. Bacterial microsuspension assays with benzene and the other organic solvents. Environ. Mutagenes, 1980, 2, p. 281-282.

130. Matter B.E., Grauwiler J., Micronuclei in mouse bone-marrow cells. A simple in vivo model for the evaluation of drug-induced chromosomal aberrations-. Mutat. Res., 1974, 23, 2, p. 239-249.

131. Matter B.E., Grauv/iler J. The micronucleus test as a simple model in vivo for the evaluation of drug-induced chromosome aberration. Comparative studies with thirteen compounds. Mutat. Res., 1975, 29, 2, p.I98-I99.

132. Miller R.C. The micronucleus test as in vivo cytogenetic method. Environ.Health Persp., 1973, JL P* 167-170.

133. Moeschlin S., Speck B. Experimental studies on the mechanism of action of benzene of the bone marrow. (Radioautographic studies using ^H-thymidine). Acta haernat., 1967, 38, 2, p. 104—III•- 115

134. Morimoto K., Wolff S. Benzene metabolites increase sister chromatid exchanges and disturb cell division kinetics in human lyphocytes. jSnviron. Mutagenes, 1980 a, 2j 2, p. 274-275.

135. Neudecker T., Lutz D., Eder IS., Menscher D. Structure-activity relationship in halogen and alkyl substituted allylic compounds! correlation of alkylating and mutagenic properties. Biochem. Pharmacol., 1980, £9, 19, p. 26II-26I7.

136. Hew Sci. Mutagens could be hidden by eggs on the mend, (short communication). - 1979, 82, H52, p. 270.

137. Horppa H., Vainio H. Induction of sister-chromatid exchanges by styrene analogues in cultured human lymphocytes. Mutat. Res., 1983, 116, 3-4, p. 379-387.

138. Hylander P.-O., Olofsson H., Rasmuson B., Stahlin H. Mutagenetic effects of petrol in Drosophila melanogaster.1. iiffects of benzene and 1,2-dichloraebhane. Mutat. Res., 1978, 37, 2, p. 163-167.

139. J., 1953, 54, 2, p. 231-238.

140. Picciano D. Cytogenetic study of workers exposed to benzene. iiinviron. Res., 1979, I, P« 33-38.

141. Pulkarbek P., Kinoshita Т., Jeffrey A. Benzene oxide;in vitro mutagenic and toxic effects. Proc. 71st Annu.

142. Meet. Amer. Cancer Res., San Diego, Calif., 1980 and1.th Annu. Meet. Amer. Soc. Clin. Oncol., San Diego,

143. Calif., 1980. Abstrs. Baltimore, 1980, 21, p. 107.14

144. Ro T.S., Busch H. Concentration of С actinomycin D in various tissus following intravenous injection. -Biochem. Biophys. Acta, 1965, 108, 2, p. 217-318.

145. Robustelli C.G. della, Pavino A., Biscaldi G.P., Pollini G. Transformazione in leucemia acuta di un caso di mielopatia involutiva benzolica. Haematologica, 1972, 57, I, p.65-89.

146. RHhrborn G., Basler A. Genetic aspects of dose-effect-relationships and their significance for the exprapola-tion to man-chromosome aberrations. Abh. Akad. Wiss. DDR. Abt. Math., Naturwiss., Oiechn., 1977, 9, p.IOI-III.

147. Rondanelli E.G., Gorini P., Magliulo E., Vannini V., 3?iori G.P., Parma A. A benzene induced anomalies in mi- 117 totic cycle of living erythroblasts. Sangre, 1964, 9,p. 342-351.

148. Eondanelli E.G., Gorini P., Pecorari D., Trotta N.,

149. Colombi E. Effects du benzene sur la mitose erythroblas-tique. Investigations a la rn.icro-cinematograph.ie en contrast e de phase. Acta haemat., 1961, 26» 5, P- 281-302.

150. Eusch G.M., Leong B.K., Laskin S. Benzene Metabolism. -J. Toxicol. Envron. Health. Suppl. 2, 1977, 2, p. 23-36.

151. Sato T., Fukuyama T., Suzuki T., Yoshikawa H. 1,2-Dihyd-ro-I,2 dihydroxybenzene and several other substances in the metabolism of benzene. - J. Biochem., 1963, 53, I, p. 23-27.

152. Schmid W. The micronucleus test. Mutat. Ees., 1975, 31» I, p. 9-15.

153. Schmid W. The micronucleus test for cytogenetic analysis., In: Chemical mutagens. Principles and Methods for their detection, 1976, P. 31-35.

154. Scott M.J., Harper B.L., Gad-El-Karim M., Ward J.B., Legator M.S. Cytogenetic analysis of pulmonary alveolar macrophages from trated mice: the effects of cyclophosphamide and benzene. Environ. Mutagenes., 1982, 4, 3, p.316.

155. Sega G.A. Unscheduled DHA synthesis in the germ cells of male mice exposed in vivo to the chemical mutagen ethyl methanesulfonate. Proc. Hatl. Acad. Sci. (USA), 1974, 71, 12, p. 4955-4959.

156. Sellyei M., Kelemen E. Chromosome study in a case of granulocytic leukaemia with "pelgerisation" 7 years after benzene pancytopenia. Environ. J. of Cancer, 1971, 7, I, p. 83.

157. Serres 2?.J. de. Genetic tests for evaluating environmental mutagens. AMBIO special Report, 1973, 3, P« 23.

158. Setchell B.P. The blood-testicular fluid barrier in sheep. J. Physiol., 1967, 189, p. 63-63.

159. Setchell B.P., Main S.J. The blood-testis barrier and steroids. In: Hormonal regulation of spermatogenesis. London, 1973, P. 223-233.

160. Shahin M.M., Bugaut.' A., Kalopissis. G. Structure-activity relationship within a series of m-diaminobenzene derivatives. Mutât. Ses., I960, 78, I, p.23-31.

161. Siou G., Conan L. Maturité sexuelle et sensibilité à l'action mutagene du benzène chez la Souris. Sei. et techn. anim. lab., 1979, 4-, p. 239-262.

162. Siou G., Conan L., Haitem M. Evaluation of the clasto-genic action of benzene by oral administration with 2 cytogenetic techniques in mouse and Chinese hamster. -Mutat. Res., I98I, 90, 3, p. 273-278.

163. Siou G., Sourdeix D. Contribution a la connaissance de1. S s sl'effet mutagene du benzene. 2. Action de la castration sur la sensibilité de la Souris maie à l'action mutagene du benzène. Cah. notes doc. Inst. nat. rech, secur.,1980, 101, p. 331-534.

164. Snyder E., Lee E.Vi., Kocsis J.J., Witmer C.M. Bone marrow depressant and leukoiaogenie actions of benzene. Life Sei., 1977, 21, 12, p. I709-I722.- 119

165. Snyder E., Uzuki P., Gonazun L., Bromfeld jSS. , Wells A. •The metabolism of benzene in vitro. QJoxicol. Appl. Pharmacol., 1967, II, 2, p. 346-360.

166. ODates A.D., Natara^an A.T. A correlative study on thegenetic damage induced by chemical mutagens in bone marrow and spermatogonia of mice. I. CNU-ethanol-r LIutat. Res., 1976 ,37, 2-3, p. 267-277.

167. Tice R.R., Costa D.L., Drew R.T. The effect of prior partial hepatectomy or co-administered toluene on benzene — induced bone marrow damage. Environ. Mutagenes., I980a, ■2, 2, p. 302.

168. Dill G., Czeizel E. Chromosome tests with patients working with benzenerSymp.Med.G-enet.vDebrecen Hajduszoboszlo, 1976, p. 29.189» Tough I.M., Brown W.M.C. Chromosome aberrations and exposure to ambient benzene. Lancet, 1965, I., 73S7, p. 684.

169. Tough I.M., Smith P.G., Brown W.M.C., Harnden D.G. Chromosome studies on workers exposed to atmospheric benzene. The possible influence of age. Europ. J. Cancer, 1970, Jo,I, p. 49-55.

170. Tryfiates G.P. Effect of benzene on rat liver polyribosomes. Biochem. Pharmacol., I971, 20, p. 1669-1677.

171. Vigliani E.C., Saita G. Benzene and leukemia. Hew Eng. J.Med., 1964, 271, p. 872-876.

172. Wild D.MrT., King K., Erkhardt K., Gocke E. Mutagenic activity of aminophenols and diphenols, and relations with chemical structure. Mutat. Res., 1981,85,6, p. 456.

173. Zeiger E„, Pagano D.A., Nomeler A.A. Structure-activity studies on the mutagenicity of tris (2,3-dibroinopropyl)-phosphate (tris-Bp) and its metabolites in Salmonella. -Environ. Mutagenes., 1982, 4, 3, p. 271-277.12 X —

174. МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ СССР

175. АКАДЕМИЯ МЕДИЦИНСКИХ НАУК С С С Р

176. Ордена Трудового Красною Знамени научио-исследоиательский институт общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сысина119121, Москва, Погодинская ул., д. 10

177. Телефоны: 216-58-24, 240-27-641. СПРАВКА

178. Методические рекомендации утверждены Минздравом СССР №28 6/10 от 3 апреля 1984г.

179. Заместитель председателя /? / /.

180. Ученого Совета, к.м.н. ки^Ь р Н.Н.Литвинов1. Ученый секретарь /7/

181. Института, к.м.н. ((* ^(¿яЩ^я&Г^ — Е.В.Печенникова.1. : о а >1. Зак. 687. Тир. 10.000- 122 -Академия медицинских наук СССР