Остеопротективное действие эналаприла и лозартана при экспериментальном остеопорозе и переломах на его фоне тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.25, кандидат медицинских наук Гудырев, Олег Сергеевич

• Гудырев, Олег Сергеевич
• кандидат медицинских наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Гудырев, Олег Сергеевич

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Роль эндотелия и васкуляризации в развитии, 14 функционировании и репаративной регенерации костной ткани

1.2. Дисфункция эндотелия, принципы ее фармакологической 25 коррекции и основные группы эндотелиопротективных препаратов

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Моделирование генерализованного остеопороза, переломов 40 бедренной кости и последующего остеосинтеза переломов

2.2. Измерение микроциркуляции в костной ткани и проведение 41 функциональных сосудистых проб

2.3. Гистоморфометрическая оценка изменений, происходящих 45 при генерализованном остеопорозе и его коррекции

2.4. Обоснование доз и дизайн эксперимента

2.5. Статистическая обработка результатов исследования

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Комплексная оценка развития генерализованного остеопороза в эксперименте с использованием результатов измерения микроциркуляции в кости, функциональных проб и гистоморфометрического исследования

3.2. Изучение остеопротективного действия ингибитора АПФ 68 эналаприла и блокатора ATI-рецепторов лозартана при экспериментальном генерализованном остеопорозе

3.3. Изучение влияния ингибитора АПФ эналаприла 79 и блокатора ATI-рецепторов лозартана на качество консолидации экспериментальных остеопоротических переломов

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Остеопротективное действие эналаприла и лозартана при экспериментальном остеопорозе и переломах на его фоне»

Актуальность исследования

Остеопороз (ОП) — системное заболевание скелета, характеризующееся снижением массы кости в единице объема и нарушением микроархитектоники костной ткани, приводящими к увеличению хрупкости костей и высокому риску их переломов». Данное определение ОП было сформулировано на международных конференциях в Копенгагене (1990) и Гонконге (1993) и в настоящее время является общепринятым [22, 73].

В основе развития остеопороза лежит дисбаланс между двумя основными процессами костного ремоделирования: костной резорбцией и костеобразованием [52, 73]. Важным звеном в патогенезе остеопороза, особенно иммобилизационного, является снижение кровоснабжения кости [109, 193], приводящее к торможению активности и уменьшению количества остеобластов, а также к усиленной деятельности остеокластов.

В настоящее время ОП является одним из наиболее частых и тяжелых заболеваний скелета, этиологические и патогенетические аспекты которого представляются не до конца изученными [5, 52, 55]. По мнению ВОЗ ОП занимает четвертое место по значимости вслед за сердечно-сосудистыми, онкологическими заболеваниями и сахарным диабетом [22]. Поэтому в конце XX века возникла идея организации борьбы с этим патологическим состоянием, а ВОЗ провозгласила первое десятилетие XXI века «Декадой костей и суставов».

Однако статистические данные свидетельствуют не только о росте заболеваемости ОП, но и о неуклонном увеличении числа его осложнений -остеопоротических переломов [50]. По прогнозам экспертов к 2050 году в мире частота одних только переломов шейки бедра, связанных с ОП, возрастет с 1,7 млн. до 6,3 млн. случаев в год (по данным «Osteoporosis in the European Community»). Показатели смертности в течение первого года после такого перелома составляют от 12 до 40% (по данным National Osteoporosis

Foundation). У половины больных, выживших после перелома бедра, значительно снижается качество жизни, каждый третий больной утрачивает способность к самообслуживанию, нуждается в длительном постоянном уходе и внушительных материальных затратах на лечение и реабилитацию.

Для успешной консолидации перелома также большое значение имеет васкуляризация костных отломков [109, 193]. Всякий перелом трубчатой кости сопровождается повреждением мягких тканей; при этом повреждаются сосуды и нервы, проникающие в кость со стороны надкостницы. Чем больше повреждение питающих сосудов и надкостницы, то есть значительнее нарушение кровоснабжения отломков, тем условия для сращения перелома менее благоприятны, и тем медленнее протекают процессы репаративной регенерации кости.

Значительную роль в поддержании на адекватном уровне процессов костного ремоделирования, а также репаративной регенерации костной ткани играет кровоснабжение кости. Переломы у пациентов, страдающих остеопорозом, возникая на фоне структурных, количественных и качественных изменений в костной ткани, требуют иных подходов к лечению, чем повреждения костей у здоровых лиц.

Как известно, строение микроциркуляторного русла костной ткани существенно отличается от морфологии сосудистого русла остальных тканей организма. Костные микрососуды имеют только эндотелий и не имеют мышечного и соединительнотканого слоев. Таким образом, именно эндотелий опосредует всю гуморальную регуляцию обмена между остеобластами, остеокластами и кровью.

В то же время в доступной литературе мы не нашли сведений о том, чтобы кто-либо использовал эндотелий костных сосудов как мишень фармакологического воздействия при остеопорозе и переломах на его фоне.

В условиях повреждения тканей активируются процессы неоангиогенеза. Одним из основных условий для нормального протекания ангиогенеза является повышение проницаемости эндотелия, что преимущественно связывают с действием оксида азота (NO) [8, 20, 177]. Повышение проницаемости сосудов необходимо для выхода белков плазмы крови, что приводит к образованию фибриновой основы для последующей миграции эндотелиоцитов. Главным механизмом регуляции процессов неоангиогенеза является высвобождение ангиогенных факторов, источником которых могут быть эндотелиальные клетки, тучные клетки, макрофаги и другие клетки. Под действием ангиогенных факторов происходит активация эндотелиоцитов и миграция их за пределы базальной мембраны с формированием ответвлений основных сосудов [83, 205].

Таким образом, одной из причин нарушения регионарного кровоснабжения является дисфункция эндотелия [25, 57, 82]. Следовательно, дисфункция эндотелия посредством нарушения микроциркуляции может приводить к нарушению процессов остеогенеза и остеорепарации, вызывая тем самым ряд остеологических заболеваний, в том числе и остеопороз.

Увеличение частоты остеопороза и его осложнений показывает, что в настоящее время нет надежных методов медикаментозного лечения и профилактики этого заболевания. Современная патогенетическая терапия остеопороза традиционно включает препараты, стимулирующие костеобразование, замедляющие костную резорбцию и препараты многопланового действия [26, 53, 67, 81], но не уделяется никакого внимания препаратам, обладающим положительным влиянием на кровоснабжение костной ткани. Это указывает на актуальность исследования остеопротективного действия препаратов с доказанными положительными эндотелиотропными эффектами.

Номер государственной регистрации темы - 01.2.007 05271.

Цель исследования

Провести оценку остеопротективного действия эналаприла и лозартана и их влияния на процессы репаративной регенерации костной ткани при переломах проксимального метафиза бедренной кости на модели остеопороза, вызванного билатеральной овариэктомией.

Задачи исследования

1. Оценить развитие экспериментального генерализованного остеопороза при билатеральной овариэктомии в эксперименте с использованием результатов измерения микроциркуляции в костной ткани, функциональных сосудистых проб и гистоморфометрического исследования.

2. Изучить остеопротективное действие ингибитора АПФ эналаприла на модели билатеральной овариэктомии.

3. Изучить остеопротективное действие блокатора ATI-рецепторов лозартана на модели билатеральной овариэктомии.

4. Оценить качество репаративных процессов в костной ткани при экспериментальных остеопоротических переломах проксимального метафиза бедренной кости с использованием результатов измерения микроциркуляции в межотломковой зоне и рентгенологического исследования.

5. Изучить влияние ингибитора АПФ эналаприла на качество репаративных процессов при экспериментальных остеопоротических переломах проксимального метафиза бедренной кости.

6. Изучить влияние блокатора ATI-рецепторов лозартана на качество репаративных процессов при экспериментальных остеопоротических переломах проксимального метафиза бедренной кости.

Научная новизна

В работе впервые показано, что через восемь недель после билатеральной овариэктомии развивающийся генерализованный остеопороз характеризуется значительным снижением уровня микроциркуляции в проксимальном метафизе бедренной кости, отрицательной динамикой морфологических показателей, наличием тесной прямой зависимости между величиной кровоснабжения кости и шириной костных трабекул в ней.

Кроме того, обнаруживаются изменения соотношения сосудистых реакций на ацетилхолин (эндотелийзависимая вазодилатация) и нитропруссид (эндотелийнезависимая вазодилатация) с увеличением коэффициента эндотелиальной дисфункции (КЭД), рассчитанного по результатам лазерной допплеровской флоуметрии (ЛДФ) в костной ткани.

Впервые продемонстрировано, что эналаприл и лозартан, вводимые в дозах 0,5 мг/кг и 6 мг/кг соответственно крысам ежедневно однократно в сутки внутрижелудочно в течение восьми недель после билатеральной овариэктомии, обладая эндотелиопротективным действием, эффективно предотвращали снижение уровня регионарной микроциркуляции в костной ткани. Тем самым изучаемые препараты способствовали замедлению истончения костных трабекул в губчатой костной ткани и предотвращению возникновения микропереломов трабекул, то есть обладали остеопротективным действием. Достоверно более выраженным действием обладал лозартан.

Было обнаружено, что консолидация экспериментальных остеопоротических переломов проксимального метафиза бедренной кости через двенадцать недель после билатеральной овариэктомии протекает на фоне снижения кровоснабжения зоны перелома по сравнению с переломами бедра у крыс без остеопороза.

Впервые показано, что эналаприл и лозартан, вводимые в дозах 0,5 мг/кг и 6 мг/кг соответственно крысам ежедневно однократно в сутки внутрижелудочно в течение восьми недель после билатеральной овариэктомии и еще в течение четырех недель после моделирования и остеосинтеза перелома, увеличивали показатели микроциркуляции в межотломковой зоне проксимального метафиза бедренной кости выше таковых у крыс с переломами бедра без остеопороза. Достоверно более выраженным воздействием на уровень кровотока в зоне перелома обладал лозартан. Оба исследуемых препарата статистически значимо увеличивали частоту сращения экспериментальных остеопоротических переломов.

В ходе исследования были разработаны вспомогательные лабораторные инструменты, а также рационализированы некоторые манипуляции.

Научная- новизна подтверждается получением двух патентов РФ (патент РФ № 62505 от 27.04.2007 г. «Канюлированный стержень-кондуктор для проведения экспериментальных измерений»; патент РФ № 62512 от 27.04.2007 г. «Стол для хирургических манипуляций на мелких лабораторных животных»); Поданы две заявки на получение патентов РФ (заявка № 2008122134 от 02.06.2008 г. «Способ коррекции ; остеопороза и профилактики возникновения остеопоротических переломов эналаприлом»; заявка № 20081221361 от 02.06.2008 г. «Способ коррекции остеопороза и профилактики возникновения остеопоротических переломов лозартаном»). Получены два удостоверения на рационализаторские предложения (рационализаторское предложение № 1793-07 от 05.10.2007 г. «Способ: моделирования метафизарных переломов у мелких лабораторных животных»; рационализаторское предложение № 1794-07 от 05:10.2007 г. «Способ остеосинтеза метафизарных переломов у мелких лабораторных животных»).

Практическая значимость

В работе обоснована эффективность применения ингибитора АПФ эналаприла и блокатора ATI-рецепторов лозартана для коррекции остеопоротических изменений костей скелета, а также для улучшения качества консолидации переломов при генерализованном остеопорозе. В- эксперименте доказано, что использование исследуемых препаратов позволяет нормализовать изменения соотношений сосудистых реакций^ на ацетилхолин (эндотелийзависимая вазодилатация) и нитропруссид (эндотелийнезависимая вазодилатация), предотвратить уменьшение кровоснабжения костной' ткани при остеопорозе и остеопоротических переломах, а также добиться замедления отрицательной динамики морфометрических показателей кости и значительно увеличить количество положительных результатов сращения переломов на фоне остеопороза.

Результаты исследования позволяют рекомендовать проведение целенаправленных клинических испытаний эналаприла и лозартана при системном остеопорозе, а также остеопоротических переломах костей скелета.

Внедрение результатов научного исследования

Материалы диссертационного исследования, касающиеся остеопротективной активности эналаприла и лозартана, а также положительного влияния указанных препаратов на качество сращения переломов костей скелета при системном остеопорозе, используются в лекционных курсах кафедр фармакологии и травматологии, ортопедии и военно-полевой хирургии КГМУ.

Апробация работы

Материалы работы были представлены на 72 итоговой межвузовской научной конференции студентов и молодых ученых «Молодежная наука и современность» (Курск, 2007), заседании Курского регионального отделения ассоциации травматологов-ортопедов России (Курск, 2007), VI Международной конференции «Гемореология и микроциркуляция (от молекулярных мишеней к органным и системным изменениям)» (Ярославль, 2007), конференции «Молодежная наука: от фундаментальной идеи до инновационных проектов» (Курск, 2008), II Международной научной конференции молодых ученых-медиков (Курск, 2008), Всероссийской научно-практической конференции «Биомедицинская инженерия и биотехнология» (Курск, 2008), XV Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2008).

Апробация диссертации проведена на межкафедральной научно-практической конференции кафедр фармакологии, травматологии, ортопедии и военно-полевой хирургии, клинической фармакологии, внутренних болезней № 2, гистологии, цитологии и эмбриологии, анатомии, НИИ Экологической медицины КГМУ. По материалам диссертации опубликовано 12 печатных работ, в том числе две из них — в журналах, рекомендуемых ВАК для публикации основных научных результатов диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук.

Положения, выносимые на защиту

1. Через восемь недель после билатеральной овариэктомии у самок крыс линии Вистар развивается нарушение функции эндотелия сосудов микроциркуляторного русла костной ткани, сопровождающееся увеличением коэффициента эндотелиальной дисфункции, рассчитанного по результатам лазерной допплеровской флоуметрии в кости. Как следствие, значительно ухудшается кровоснабжение костной ткани, что приводит к развитию генерализованного остеопороза, проявляющегося истончением и микропереломами костных трабекул.

2. Эналаприл в дозе 0,5 мг/кг и лозартан в дозе 6 мг/кг на модели билатеральной овариэктомии имеют выраженное эндотелиопротективное действие, снижая коэффициент эндотелиальной дисфункции до уровня интактных (ложно оперированных) животных; предотвращают снижение уровня микроциркуляции в костной ткани бедра, удерживая его на значениях, не отличающихся от интактных (ложно оперированных) крыс; обладают статистически значимым остеопротективным действием, проявляющимся в замедлении истончения костных трабекул и предотвращении возникновения в них микропереломов. Более выраженными остеопротективными свойствами обладает лозартан.

3. Сращение экспериментальных остеопоротических переломов проксимального метафиза бедренной кости у самок крыс линии Вистар протекает на фоне снижения значений микроциркуляции в кости по сравнению с переломами бедра у крыс без остеопороза, что отрицательно сказывается на результатах их консолидации и приводит к увеличению числа неудовлетворительных исходов консолидации - несращению переломов.

4. Эналаприл в дозе 0,5 мг/кг и лозартан в дозе 6 мг/кг повышают показатели микроциркуляции в зоне перелома проксимального метафиза бедренной кости до значений, достоверно превышающих таковые у крыс с экспериментальными остеопоротическими переломами, а также увеличивают количество положительных результатов консолидации остеопоротических переломов.

Структура и объем работы

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов и списка литературы, включающего 233 источника, из которых 87 отечественных и 146 зарубежных авторов. Диссертация изложена на 122 страницах машинописного текста, содержит 6 таблиц и 36 рисунков.

Заключение диссертации по теме «Фармакология, клиническая фармакология», Гудырев, Олег Сергеевич

ВЫВОДЫ

1. Через восемь недель после билатеральной овариэктомии у самок крыс линии Вистар развивается нарушение функции эндотелия сосудов микроциркуляторного русла костной ткани, свидетельством чего является увеличение коэффициента эндотелиальной дисфункции, рассчитанного по результатам лазерной допплеровской флоуметрии в костной ткани, до 2,4±0,2 по сравнению с 1,3±0,2 у интактных животных. Значительно ухудшается регионарный кровоток в костной ткани (61,5±3,7 ПЕ по сравнению с 100,5±4,4ПЕ у интактных крыс), что приводит к развитию генерализованного остеопороза, сопровождающегося истончением костных трабекул в среднем на 39,4% и возникновением в них микропереломов.

2. Эналаприл в дозе 0,5 мг/кг на модели билатеральной овариэктомии имеет выраженное эндотелиопротективное действие, проявляющееся в снижении коэффициента эндотелиальной дисфункции до 1,6±0,1, предотвращает снижение уровня микроциркуляции в костной ткани бедра, удерживая его на значениях, не отличающихся от интактных крыс (93,3±4,5 ПЕ), а также, увеличивая ширину костных трабекул в среднем на 29,5% по сравнению с группой крыс с остеопорозом и предотвращая возникновение микропереломов, обладает остеопротективным действием.

3. Лозартан в дозе 6 мг/кг на модели билатеральной овариэктомии, обладая выраженным эндотелиопротективным действием, снижает коэффициент эндотелиальной дисфункции до 1,5±0,2; препарат эффективно предотвращает снижение показателей кровотока в костной ткани бедра, удерживая его на уровне интактных животных (100,0±2,3 ПЕ), и имеет более выраженное остеопротективное действие, чем эналаприл в дозе 0,5 мг/кг, увеличивая ширину костных трабекул в среднем на 45,9%.

4. Консолидация экспериментальных остеопоротических переломов проксимального метафиза бедренной кости у самок крыс линии Вистар по сравнению с аналогичными переломами у крыс без остеопороза протекает на фоне сниженного уровня микроциркуляции в костной ткани (69,7±5,9 ПЕ по сравнению с 87,6±6,3 ПЕ), что негативно отражается на результатах сращения переломов, приводя к увеличению вдвое числа неудовлетворительных исходов консолидации.

5. Эналаприл в дозе 0,5 мг/кг увеличивает показатели микроциркуляции в зоне перелома проксимального метафиза бедренной кости до значений, превышающих показатели у крыс с экспериментальными остеопоротическими переломами, а именно до 102,2±5,4 ПЕ, а также увеличивает количество положительных результатов консолидации остеопоротических переломов.

6. Лозартан в дозе 6 мг/кг повышает показатели микроциркуляции в зоне перелома проксимального метафиза бедренной кости до 123,1±5,0 ПЕ, что превышает соответствующие показатели не только у крыс с остеопоротическими переломами, но и у животных с переломами бедренной кости без остеопороза. Влияние лозартана на показатели микроциркуляции в зоне перелома бедра у крыс превосходит аналогичное воздействие эналаприла. Лозартан в дозе 6 мг/кг увеличивает количество положительных результатов консолидации остеопоротических переломов до 100%.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Для поддержания гомеостаза кости чрезвычайно важны развитие функционально полноценного микроциркуляторного русла и общее состояние регионарной микроциркуляции в костной ткани. Ухудшение кровоснабжения костной ткани может приводить к развитию таких патологий опорно-двигательного аппарата, как остеонекроз [110], остеомиелит [162] или остеопороз [109, 193]. В состоятельности репарации повреждений костей скелета также играют значительную роль своевременное протекание процессов неоангиогенеза и адекватное кровоснабжение костных отломков, ведь, как известно, в результате травмы опорно-двигательного аппарата происходит неизбежное повреждение питающей сосудистой сети, что приводит к развитию гипоксии окружающих тканей и локальному некрозу, являющихся, кроме прочих, причинами нарушения консолидации переломов [138].

Эндотелий в зрелой сосудистой сети играет центральную регуляторную роль, обеспечивая связь с остальными слоями стенки сосуда и адекватно отвечая на их потребности выделением медиаторов [46]. Таким образом, по нашему мнению эндотелий сосудов костной ткани, являясь неотъемлемой частью кости, во многом определяет состояние регионарной микроциркуляции, а также тем самым отвечает за поддержание гомеостаза в кости.

Данное положение подтверждается работами ряда авторов, утверждающих, например, что VEGF (ключевой регулятор каскада событий, приводящих к формированию и развитию сосудистой системы) играет значительную роль в процессах ремоделирования [115, 186, 198, 228] и репарации повреждений [124, 203, 222] костной ткани. Так, было продемонстрировано, что ингибирование VEGF приводит к увеличению ширины феморальной и тибиальной ростковых зон [233], снижению интенсивности ангиогенеза в ростковых зонах, потере кровеносных сосудов в метафизарной зоне, а также уменьшению образования трабекулярной структуры кости [115, 228] и интенсификации резорбции губчатой костной ткани [155]. При переломах бедренных костей у мышей ингибирование VEGF приводит к уменьшению прорастания кровеносных сосудов, ухудшению минерализации костной мозоли и нарушению перестройки костных трабекул [158, 186, 222, 228]. Напротив, при переломах костей скелета стимуляция эндостального кровообращения в поврежденной кости [191] позволяет мезенхимальным клеткам проникать в область повреждения со стороны эндоста и костного мозга [221] и дифференцироваться в клетки остеобластического ряда с последующим образованием губчатой кости.

На основании изложенного нами была сформулирована гипотеза, согласно которой качество процессов ремоделирования и репаративной регенерации костной ткани находится в прямой зависимости от качества функционирования эндотелия сосудов, определяющего уровень регионарной микроциркуляции в костной ткани. Этой концепции мы придерживались в ходе выполнения наших исследований.

Таким образом, эндотелиальная дисфункция, которая может быть определена как дисбаланс противоположно действующих начал: вазорелаксирующих и вазоконстрикторных, прокоагулянтных и антикоагулянтных, факторов роста и их ингибиторов, - может быть причиной ухудшения кровоснабжения костной ткани, и, следовательно, нарушения процессов костного ремоделирования и репарации повреждений кости.

В настоящее время ведется активное изучение препаратов, обладающих эндотелиопротективными свойствами. К сожалению, на данный момент не существует лекарственных средств для специфической коррекции дисфункции эндотелия, в связи с чем внимание исследователей приковано к различным группам препаратов. По нашему мнению наибольшего внимания заслуживают представители ингибиторов АПФ и блокаторов ангиотензиновых рецепторов, а именно эналаприл и лозартан ввиду наиболее частого их применения в клинической практике.

В частности, один из возможных путей протективного влияния ингибиторов АПФ на эндотелиальную дисфункцию связан с восстановлением метаболизма брадикинина: блокада тканевого АПФ приводит не только к уменьшению синтеза АТ-2, но и замедлению деградации брадикинина. Также под действием данных препаратов возможно снижение базальной и инсулин-индуцированной секреции эндотелина-1 и увеличение продукции NO.

Эндотелиопротективное влияние антагонистов ангиотензиновых рецепторов реализуется, по-видимому, за счет блокады ATI-рецепторов, что ведет к уменьшению продукции супероксидных радикалов, снижению степени связывания NO и его накоплению. Так как стимуляция АТ1-рецепторов способствует образованию супероксидов, инактивирующих NO, а стимуляция АТ2-рецепторов приводит к вазодилатации и усилению натрийуреза за счет активации системы брадикинина, NO и цГМФ, то эффект АТ-2 (усиление синтеза или инактивация NO) зависит от того, с какими рецепторами он преимущественно взаимодействует. Поэтому очевидно, что на фоне блокады ATI-рецепторов создаются благоприятные условия для интенсифицированного функционирования свободных АТ2-рецепторов, что приводит к накоплению NO.

С целью проверки соответствия предложенной гипотезы действительности оценивали степень развития эндотелиальной дисфункции сосудов костной ткани и степень развития остеопороза у крыс через восемь недель после билатеральной овариэктомии, а также измеряли уровень микроциркуляции в проксимальном метафизе бедренной кости. Данная модель патологии была выбрана не случайно. Во-первых, в предыдущих исследованиях, проведенных в лаборатории доклинических исследований НИИ Экологической медицины КГМУ, было доказано, что через 6 недель после билатеральной овариэктомии у самок крыс линии Вистар развивается и в дальнейшем не прогрессирует гипоэстроген-индуцированная дисфункция эндотелия сосудов [37]. Во-вторых, по данным литературы, через восемь недель после билатеральной овариэктомии у половозрелых самок крыс развивается генерализованный остеопороз [152]. Стоит отметить, что автор методики моделирования остеопороза связывает развитие остеопороза с гипоэстрогенным состоянием после овариэктомии, не рассматривая в качестве возможной причины формирования остеопороза эндотелиальную дисфункцию.

Для определения показателей микроциркуляции в костной ткани бедра у крыс использовали полиграф MP 100 производства компании Biopac systems с модулем лазерной, допплеровской флоуметрии (ЛДФ) LDF100C и инвазивным игольчатым датчиком TSD144. Для количественного выражения степени развития эндотелиальной дисфункции проводили фармакологические пробы с внутривенным болюсным введением растворов ацетилхолина [161] и нитропруссида [14]. Затем на основании полученных результатов рассчитывали коэффициент эндотелиальной дисфункции (КЭД) по методике, разработанной в нашей лаборатории [47, 61], как отношение площади треугольника над кривой восстановления микроциркуляции в ответ на введение нитропруссида к площади треугольника над кривой восстановления микроциркуляции в ответ на введение ацетилхолина. Развитие остеопороза оценивали посредством проведения гистоморфометрического исследования срезов бедренной и плечевой костей и поясничных позвонков путем измерения ширины костных трабекул.

В результате экспериментов установили, что через восемь недель после проведения операции билатеральной овариэктомии у самок крыс линии Вистар развивается дисфункция эндотелия * сосудов микроциркуляторного русла костной ткани проксимального метафиза бедренной кости, по-видимому, являющаяся частным случаем развития «системной» гипоэстроген-индуцированной эндотелиальной дисфункции и выражающаяся в достоверном увеличении значения КЭД у крыс после билатеральной овариэктомии. Одновременно с этим наблюдалось достоверное снижение среднего уровня микроциркуляции в костной ткани бедра по сравнению с интактными(Л-О) животными. При анализе результатов гистоморфометрии костной ткани обнаружили, что у самок крыс линии Вистар через восемь недель после билатеральной овариэктомии развиваются генерализованные остеопоротические изменения костей скелета, выражающиеся в истончении костных трабекул в бедренных, плечевых костях и поясничных позвонках в среднем на 39,4% (по сравнению с интактными (Л-О) крысами) и появлении микропереломов трабекул. Наибольшие патологические изменения претерпевала губчатая костная ткань тел позвонков. Кроме того, наблюдалось наличие прямой тесной связи между уровнем микроциркуляции и средней шириной костных трабекул проксимального метафиза бедра как у крыс с остеопорозом, так и у интактных (Л-О) животных, свидетельствующее о подтверждении факта активной роли кровоснабжения в процессах костного ремоделирования.

Таким образом, комплекс патологических изменений, обнаруженный через восемь недель после билатеральной овариэктомии у самок крыс линии Вистар, подтверждает предложенную нами" теорию развития остеопороза: эндотелиальная дисфункция сосудов микроциркуляторного русла костной ткани, ухудшая кровоснабжение кости, принимает участие в разобщении процессов костного ремоделирования и, как следствие, развитии генерализованного остеопороза.

Следовательно, эндотелиотропные препараты в дозировках, оказывающих эффективное эндотелиопротективное действие, теоретически должны оказывать положительное влияние на регионарную микроциркуляцию, а также обладать некоторой остеопротективной активностью. В соответствии с этим было изучено остеотропное действие ингибитора АПФ эналаприла и блокатора ATI-рецепторов лозартана в дозировках 0,5 мг/кг и 6 мг/кг соответственно, обладающих доказанной эндотелиопротективной активностью [31, 68, 85].

В подтверждение нашей теории эналаприл и лозартан, усиливая эндотелийзависимое расслабление сосудов костной ткани, нормализовали показатели КЭД, приводя их к значениям интактных (JI-0) животных. Изучаемые препараты повышали уровень микроциркуляции в проксимальном метафизе бедра до значений, достоверно не отличающихся от таковых у интактных (Л-О) крыс. Эналаприл и лозартан также оказывали статистически значимое влияние на среднюю ширину костных трабекул во всех изучаемых локализациях: эналаприл увеличивал ширину трабекул в среднем на 29,5%, лозартан — на 45,9% по сравнению с крысами, страдающими остеопорозом. При этом лозартан обладал достоверно более сильным остеопротективным действием, чем эналаприл. Это можно объяснить большей степенью сродства препарата к ренин-ангиотензин-альдостероновой системе.

Следуя логике, вполне корректно предположить, что, если препараты обладают положительным влиянием на процессы костного ремоделирования, они также способны позитивно влиять на репарацию повреждений костей. Для подтверждения этого положения изучали влияние препаратов на заживление экспериментальных переломов проксимального метафиза бедра у крыс.

Выяснили, что по сравнению с переломами у животных без остеопороза заживление остеопоротических переломов бедренной кости у крыс протекает на фоне снижения кровоснабжения зоны перелома, что, несомненно, негативно отражается на результатах сращения переломов. Так, у крыс с остеопоротическими переломами проксимального метафиза бедра число неудовлетворительных исходов консолидации переломов в виде несращения было в два раза больше, чем у животных с аналогичными переломами бедра без остеопороза.

Эналаприл и лозартан на модели остеопоротических переломов увеличивали значения микроциркуляции в межотломковой зоне не только выше соответствующих показателей у крыс с остеопоротическими переломами, но и выше показателей микроциркуляции у животных с переломами без остеопороза. При этом лозартан оказывал более выраженное влияние на кровоснабжение зоны перелома, чем эналаприл. Что касается результатов сращения экспериментальных остеопоротических переломов, то препараты статистически значимо увеличивали количество положительных исходов консолидации, а у крыс, получавших лозартан, сращение переломов наблюдалось в 100% случаев.

Таким образом, ингибитор АПФ эналаприл и блокатор ATI-рецепторов лозартан, оказывая эндотелиопротективное воздействие на эндотелий микроциркуляторного русла костной ткани, эффективно предотвращают снижение регионарного кровоснабжения в костной ткани при остеопорозе и экспериментальных остеопоротических переломах, и, следовательно, обладают остеопротективным действием, заключающимся в положительном влиянии указанных препаратов на процессы костного ремоделирования и остеорепарации.

Из этого следует, что спектр плейотропного действия препаратов с доказанной эндотелиопротективной активностью может быть расширен за счет добавления остеопротективного элемента, что, однако, требует проведения дополнительных исследований.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Гудырев, Олег Сергеевич, 2009 год

1. Абидова, К.Р. Значение эндотелина 1 в регуляции функций сердечнососудистой системы / К.Р. Абидова // Врачеб. дело. 1999. - № 7-8. - С. 22-27.

2. Бажин, М.Н. Уральская кардиологическая концепция: Новое в изучении гипертонической болезни: дайджест / М.Н. Бажин. В. Пышма: МО В. Пышма, 2000.-51 с.

3. Беленков, Ю.Н. Ингибиторы ангиотензинпревращающего фермента в лечении сердечно-сосудистых заболеваний (Квинаприл и эндотелиальная дисфункция) / Ю.Н. Беленков, В.Ю. Мареев, Ф.Т. Агеев. М.: ООО «Инсайт полиграфик», 2002. - 86 с.

4. Белоусов, Ю.Б. Эндотелиальная дисфункция как причина атеросклеротического поражения артерий при артериальной гипертензии: методы коррекции / Ю.Б. Белоусов, Ж.Н. Намсараев // Фарматека. 2000. - № 6. - С. 62-72.

5. Беневоленская, Л.И. Миакальцик (кальцитонин лосося) для интраназального введения в лечении и профилактике остеопороза // Л.И. Беневоленская // Рос. ревматол. 1999. - № 2. - С. 6-15.

6. Блокатор ATl-ангиотензиновых рецепторов лозартан. Ч. 1. Основы клинической фармакологии / Б.А. Сидоренко, Д.В. Преображенский, Т.М. Стеценко и др. // Кардиология. 2003. - Т. 43, № 1. - С. 90-98.

7. Блокатор ATl-ангиотензиновых рецепторов лозартан. Ч. 2. Опыт использования для лечения гипертонической болезни и диабетической нефропатии / Б.А. Сидоренко, Д.В. Преображенский, Т.М. Стеценко и др. // Кардиология. 2003. - Т. 43, № 2. - С. 88-95.

8. Брошусь, В.В. Оксид азота как регулятор защитных и гомеостатических реакций организма / В.В. Брошусь // Укр. ревматол. журн. 2003. - № 4. -С. 3-11.

9. Бувальцев, В.И. Дисфункция эндотелия как новая концепция профилактики и лечения сердечно-сосудистых заболеваний / В.И. Бувальцев // Междунар. мед. журн. 2001. - № 3. - С. 202-208.

10. Вазопротекция при гипертонической болезни: влияние рамиприла на функциональное состояние эндотелия плечевой артерии / Н.Н. Соболева, Т.В. Балахонова, А.Н. Рогоза и др. // Кардиология. 1998. - Т. 38, № 3. -С. 44-47.

11. Влияние терапии эналаприла малеатом на функцию сосудистого эндотелия и тромбоцитарно-эндотелиальные взаимосвязи у больных гипертонической болезнью / В.М. Яковлев, А.А. Семенкин, С.М. Юдин и др. // Терапевт, арх. 2000. - № 1. - С. 40-44.

12. Гавриков, Н.А. Гипертония: профилактика, диагностика и лечение / Н.А. Гавриков. Ростов н/Д: Феникс, 2001. - 256 с.

13. Галаган, М.Е. Гипотензивное действие оксида азота, продуцируемого из экзо- и эндогенных источников / М.Е. Галаган, А.В. Широколова, А.Ф. Ванин // Вопр. мед. химии. 1991. - Т. 37, № 1. - С. 67-70.

14. Гланц, С. Медико-биологическая статистика: пер. с англ. М.: Практика, 1998.-459 с.

15. Гогин, Е.Е. Курение, эндотелий и гипертоническая болезнь / Е.Е. Гогин //Клинич. медицина.- 1998.-Т. 70, № 11. С. 10-13.

16. Гогин, Е.Е. Природа артериальной гипертензии. Роль и место ингибиторов АПФ среди прочих антигипертензивных средств / Е.Е. Гогин // Фарматека. 2002. - № 2/3. - С. 14-23.

17. Гомазков, О.А. Эндотелии в кардиологии: молекулярные, физиологические и патологические аспекты / О.А. Гомазков // Кардиология.-2001.-Т. 41, №2. -С. 50-58.

18. Горская, Ю.Ф. Возрастные изменения в популяции индуцибельных остеогенных клеток-предшественнников / Ю.Ф. Горская, Е.Ю. Шуклина, В.Г. Нестеренко // Бюл. эксперим. биологии. 2002. -№ 2. - С. 180-182.2"Ь "f*

19. Грибкова, И.В. NO активирует Са -активируемый К ток гладкомышечных клеток хвостовой артерии крысы через GMP-зависимый механизм / И.В. Грибкова, Р. Шуберт, В.П. Серебряков // Кардиология. 2002. - № 8. - С. 34-39.

20. Дворецкий, Д.П. Механогенная регуляция тонуса и реактивности кровеносных сосудов / Д.П. Дворецкий // Рос. физиолог, журн. им. И.М. Сеченова. 1999. - Т. 85, № 9-10. - С. 1267-1277.

21. Дедов, И.И. Остеопороз: патогенез, диагностика, принципы профилактики и лечения: метод, пособие для врачей / И.И. Дедов, Л.Я. Рожинская, Е.И. Марова. М., 2002. - 60 с.

22. Динамика показателей эндотелийзависимой вазодилатации и гипотензивная эффективность эналаприла у пациентов с артериальной гипертонией / Р.Ф. Мордовии, Т.М. Рипп, А.А. Соколов и др. // Кардиология. 2001. - Т. 41, № 6. - С. 31 -33.

23. Дисфункция эндотелия у больных гипертонической болезнью / А.И. Мартынов, Н.Г. Аветян, Е.В. Акатова и др. // Кардиология. 2005. - Т. 45, № 10.-С. 101-104.

24. Затейщикова, А.А. Эндотелиальная регуляция сосудистого тонуса: методы исследования и клиническое значение / А.А. Затейщикова, Д.А. Затейщиков // Кардиология. 1998. - Т. 38, № 9. - С. 68-80.

25. Зодионченко, B.C. Дисфункция эндотелия и артериальная гипертония: терапевтические возможности / B.C. Зодионченко, Т.В. Адашева, А.П. Сандомирская//Рус. мед. журн. -2002. — № 1.-С. 11-15.

26. Зотова, И.В. Синтез оксида азота и развитие атеросклероза / И.В. Зотова, Д.А. Затейщиков, Б.А. Сидоренко // Кардиология. 2000. - № 4. - С. 5867.

27. Каземирский, А.В. Особенности асептического некроза мыщелков бедренной и болынеберцовой костей (обзор литературы) / А.В. Каземирский, Н.В. Корнилов, К.А. Новоселов // Вестн. травматологии и ортопедии им. Н.Н. Приорова. 2003. -№ 1. - С. 76-80.

28. Кардиопротективное действие каптоприла и лозартана при инфаркте миокарда у гипертензивных крыс / М.П. Гладченко, М.В. Покровский, Е.Б. Артюшкова и др. // VI Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство» (19-23 апр. 1999 г., г. Москва).-М., 1999.-С. 21 .

29. Кательницкая, Л.И. Влияние эналаприла на функцию эндотелия у больных артериальной гипертонией в разных возрастных группах / Л.И. Кательницкая, Л.А. Хашиева, С.А. Плескачев // Рос. кардиолог, журн. — 2005.-№6.-С. 71-76.

30. Клинико-функциональные особенности артериальной гипертонии у больных хроническими обструктивными болезнями легких / B.C. Зодионченко, Т.В. Адашева, Е.В. Шилова и др. // Рус. мед. журн. 2003. -№ 9. - С. 535-538.

31. Комплексная оценка эффективности лозартана (козаара) у больных мягкой и умеренной гипертонией / Я.И. Коц, П.Ю. Галин, Л.Г. Вдовенко и др. // Клинич. фармакология и терапия. 2001. - № 4. - С. 73-75.

32. Лаврищева, Г.И. Морфологические и клинические аспекты репаративной регенерации опорных органов и тканей / Г.И. Лаврищева, Г.А. Оноприенко. М.: Медицина, 1996. - 208 с.

33. Лечение больных артериальной гипертонией антагонистом рецепторов ангиотензина II лозартаном / О.М. Драпкина, А.В. Клименков, Е.Л. Буеверова, В.Т. Ивашкин // Кардиоваскуляр. терапия и профилактика. -2002.-№4.-С. 30-31.

34. Личман, А.Н. Дисфункция эндотелия при сочетании ишемической болезни сердца и гипертонической болезни / А.Н. Личман, А.И. Силаков, В.М. Березов//Врачеб. дело. -2001.- № 1.-С. 137-138.

35. Маколкин, В.И. Новые возможности лечения сердечно-сосудистых заболеваний;ингибиторами ангиотензинпревращающего фермента / В.И.

36. Маколкин // Кардиоваскуляр. терапия и профилактика. 2005; - №5. - С. 66-70;

37. Марков,, Х.М. Молекулярные механизмы дисфункции сосудистого эндотелия / Х.М. Марков // Кардиология. 2005. - Т. 45, № 12. - С. 6280;

38. Марков, Х.М. Оксидантный стресс и дисфункция эндотелия / Х.М: Марков // Патол. физиология и эксперим; терапия; 2005. - № 4. - С. 59.

39. Микроциркуляция в кардиологии / под ред. В.И; Маколкина. М.: Визарт, 2004;-136 с.

40. Минушкина, Л.О. Генетические аспекты регуляции эндотелиальной функции, при гипертонии / Л.О: Минушкина, Д.А. Затейщиков, Б.А. Сидоренко//Кардиология.- 2000. №'3. -С. 68-76.

41. Михайлов, Е.Е. Частота переломов проксимального отдела бедренной кости и дистального отдела предплечья среди городского населения России / Е.Е. Михайлов, Л.И. Беневоленская, С.Г. Аникин // Остеопороз и остеопатии.- 1999. № 3. - С. 2-6.

42. Моисеев, С.В. Артериальная гипертензия и медицина доказательная / С.В. Моисеев, Ж.Д. Кобалава // Врач. 2002. - № 1. - С. 4-5.

43. Насонов, E.JT. Вторичный остеопороз: патогенез и клиническое значение при воспалительных заболеваниях суставов / E.JI. Насонов // Остеопороз и остеопатии. 1998. - № 3. - С. 18-20.

44. Насонов, E.JT. Дефицит кальция и витамина D: новые факты и гипотезы / E.JI. Насонов // Остеопороз и остеопатии. 1998. - № 3. - С. 42-47.

45. Насонов, E.JI. Маркеры активации эндотелия (тромбомодулин, антиген фактора Виллебранда и ангиотензинпревращающий фермент): клиническое значение / E.JI. Насонов, А.А. Баранов, Н.П. Шилкина // Клинич. медицина. 1998. - Т. 70, № 11. - С. 4-10.

46. Насонов, E.JI. Профилактика и лечение остеопороза: современное состояние проблемы / E.JI. Насонов // Рус. мед. журн. 1998. - № 6. - С. 1176-1180.

47. Небиеридзе, Д.В. Клиническое значение дисфункции эндотелия при артериальной гипертонии / Д.В. Небиеридзе // Consilium medicum: Системные гипертензии (прил.). 2005. - Т. 7, № 1. - С. 31-38.

48. Небиеридзе, Д.В. Микроциркуляторные расстройства при артериальной гипертонии и перспективы их коррекции / Д.В. Небиеридзе, Е.В. Шилова, С.Н. Толпыгина // Кардиоваскуляр. терапия и профилактика. -2004.-№4.-С. 28-32.

49. Небиеридзе, Д.В. Перспективы ингибиторов ангиотензинпревращающего фермента при лечении артериальной гипертензии / Д.В. Небиеридзе, Е.В. Шилова, С.Н. Толпыгина // Фарматека. 2004. - № 6. - С. 89-92.

50. Новиков, В.И. Влияние эналаприла на клинико-метаболические показатели у больных инсулиннезависимым сахарным диабетом в сочетании с артериальной гипертонией / В.И. Новиков, И.В. Милягина // Терапевт, арх. 2000. - Т. 72, № 2. - С. 63-64.

51. Ольбинская, Л.И. Влияние лозартана на риск сердечно-сосудистых осложнений у больных артериальной гипертензией / Л.И. Ольбинская, Ю.И. Данилогородская // Врач. 2004. - № 1. - С. 39-42.

52. Подзолков, В.И. Антагонисты ATI рецепторов и состояние микроциркуляции у больных гипертонической болезнью: еще одна мишень для терапии? / В.И. Подзолков, В.А. Булатов, Е.А. Сон // Артериальная гипертензия. 2005. - Т. 11, № 3. - С. 207-210.

53. Подзолков, В.И. Эффективность лозартана у больных артериальной гипертензией с высоким риском сердечно-сосудистых осложнений (по материалам исследований LIFE и RENAL) / В.И. Подзолков, В.А. Булатов // Фарматека. 2004. - № 6. - С. 79-85.

54. Поливода, С.Н. Эндотелиопротективные эффекты эналаприла у больных гипертонической болезнью / С.Н. Поливода, А.А. Черепок, Ю.Н. Писанко // Врачеб. дело. 2001. - № 2. - С. 136-137.

55. Полиморфизм генов NO-синтетазы и рецептора ангиотензина-П 1-го типа и эндотелиальный гемостаз у больных ишемической болезнью сердца / Д.А. Затейщиков, Л.О. Минушкина, О.Ю. Кудряшова и др. // Кардиология. 2000. - № 11. - С. 28-32.

56. Полонский, В.М. Исследование LIFE: новые перспективы применения лозартана / В.М. Полонский // Фарматека.- 2002. № 7-8. - С. 3-9.

57. Применение кальция и витамина D для профилактики остеопороза у женщин в постменопаузе / Л.Я. Рожинская, Л.К. Дзеранова, Е.И. Марова и др. // Остеопороз и остеопатии. — 2001. — № 1. С. 29-33.

58. Применение эналаприла у больных артериальной гипертонией с метаболическими нарушениями / B.C. Зодионченко, С.Б. Хруленко, Т.В. Адашева, И.В. Погонченкова // Кардиология. 2000. - № 10. - С. 38-41.

59. Роль коррекции метаболизма оксида азота в организме при профилактике гипертонического ремоделирования сердечно-сосудистой системы / В.И. Бувальцев, С.Ю. Машина, Д.А. Подкидышев и др. // Рос. кардиолог, журн. 2002. - № 5. - С. 74-81.

60. Роль оксида азота в регуляции растяжимости артериальных сосудов у нормо- и гипертензивных крыс / Д.Л. Сонин, А.В. Сыренский, М.М. Галагудза и др. // Артериальная гипертензия. 2002. - № 6. - С. 57-64.

61. Роль оксида азота и свободных радикалов в патогенезе артериальной гипертензии / Е.Б. Манухина, Н.П. Лямина, П.В. Долотовская и др. // Кардиология. 2002. - Т. 42, № 11. - С. 73-84.

62. Руководство по остеопорозу / Под ред. Л.И. Беневоленской. М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2003. - 524 с.

63. Саприн, А.Н. Окислительный стресс и его роль в механизмах апоптоза и развития патологических процессов / А.Н. Саприн, Е.В. Калинина // Успехи биологии и химии. 1999. - Т. 39. - С. 289-326.

64. Скрипникова, И.А. Остеопороз и ревматические заболевания / И.А. Скрипникова, Е.Л. Насонов // Мед. новости. 1997. - № 2 (31). - С. 9-10.

65. Современная терапия артериальной гипертензии (Рекомендации Европейского общества по гипертензии и Европейского общества кардиологов, 2003 г.) / Д.В. Преображенский, Б.А. Сидоренко, А.В. Маренич и др. // Кардиология. 2003. - Т. 43, № 12. - С. 91-103.

66. Сравнительная оценка антигипертензивного и кардиопротективного эффектов лозартана и его фиксированной комбинации с гидрохлортиазидом / Л.Г. Ратова, Д.М. Атауллаханова, С.Н. Толпыгина,

67. И.Е. Чазова // Consilium medicum: Системные гипертензии (прил.). -2004.-№2. -С. 26-32.

68. Суточные профили артериального давления и функции эндотелия при длительном лечении артериальной гипертонии ингибиторами ангиотензинпревращающего фермента / В.Б. Симоненко, А.Я. Фисун,

69. A.А. Михайлов и др. // Клинич. медицина. 2004. - № 7. - С. 48-55.

70. Фармакологическая регуляция тонуса сосудов / под ред. П.А. Галенко-Ярошевского. -М.: Издательство РАМН, 1999. 608 с.

71. Функциональное состояние эндотелия у больных артериальной гипертонией и ишемической болезнью сердца / Д.А. Затейщиков, JI.O. Минушкина, О.Н. Кудряшова и др. // Кардиология. 2000. - Т. 40, № 6. -С. 14-17.

72. Шварц, Г.Я. Витамин D, D-гормон и альфакальцидол: молекулярно-биологические и фармакологические аспекты действия / Г.Я. Шварц // Остеопороз и остеопатии. 1998. - № 3. - С. 2-6.

73. Шестакова, М.В. Дисфункция эндотелия — причина или следствие метаболического синдрома? / М.В. Шестакова // Рус. мед. журн. 2001. -Т. 9, № 2. - С. 88-90.

74. Шляхто, Е.В. Клеточные аспекты ремоделирования сосудов при артериальной гипертензии / Е.В. Шляхто, О.М. Моисеева // Артериальная гипертензия. 2002. - Т. 8, № 2. - С. 45-49.

75. Эндотелиальная дисфункция и сердечная недостаточность: патогенетическая связь и возможности терапии ингибиторами ангиотензинпревращающего фермента / Ф.Т. Агеев, А.Т. Овчинников,

76. B.Ю. Мареев, Ю.Н. Беленков // Consilium medicum. 2001. - Т. 3, № 2.1. C. 61-65.

77. Эффективность и переносимость лозартана и гизаара при лечении гипертонической болезни у пациентов с высоким риском осложнений / А .Я. Ивлева, O.K. Максименко, Е.Б. Сивкова и др. // Кардиология. -2001.-Т. 41, № 1.-С. 34-38.

78. Эффекты центрального эндотелина-1 у нормотензивных и спонтанногипертензивных крыс / Т.И. Пономарева, О.Н. Хохлова, Е.А. Туховская, А.Н. Мурашев // Бюл. эксперим. биологии и медицины. -2003.-№3.-С. 275-278.

79. Abnormal bone growth and selective translational regulation in basic fibroblast growth factor (FGF-2) transgenic mice / J.D. Coffin, R.Z. Florkiewicz, J. Neumann et al. // Mol. Biol. Cell. 1995. - Vol. 6. - P. 18611873.

80. Acceleration of fracture healing in nonhuman primates by fibroblast growth factor-2 / H. Kawaguchi, K. Nakamura, Y. Tabata et al. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2001. - Vol. 86. - P. 875-880.

81. Adhesion of hematopoietic progenitor cells to human bone marrow or umbilical vein derived endothelial cell lines: a comparison / P.M. Rood, W.R. Gerritsen, D. Kramer et al. // Exp. Hematol. 1999. - Vol. 27. - P. 13061314.

82. An in vivo model for study of the angiogenic effects of basic fibroblast growth factor / A. Hayek, F.L. Culler, G.M. Beattie et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1987. - Vol. 147. - P. 876-880.

83. Antagonism of ANGII type 1 receptors protects the endothelium during the early stages of renal hypertension in rats / J. Hoshino, T. Nakamura, T. Kurashina, et al. // Amer. J. Physiol. 1998. - Vol. 275. - P. 1950-1957.

84. Barton, M. The therapeutic potential of endothelin receptor antagonists in cardiovascular disease / M. Barton, W. Kiowski // Curr. Hypertens. Rep.2001.-Vol.3.-P. 322-330.

85. Basic fibroblast growth factor induces angiogenesis in vitro / R. Montesano, J.D. Vassalli, A. Baird et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 1986. - Vol. 83.-P. 7297-7301.

86. Bone endothelial cells as estrogen targets / M.L. Brandi, C. Crescioli, A. Tanini et al. // Calcif. Tissue Int. 1993. - Vol. 53. - P. 312-317.

87. Bone morphogenetic proteins stimulate angiogenesis through osteoblast-derived vascular endothelial growth factor A / M.M. Deckers, R.L. van Bezooijen, G. van der Horst et al. // Endocrinology. 2002. - Vol. 143. - P. 1545-1553.

88. Bone morphogenic protein 4 produced in endothelial cells by oscillatory shear stress stimulates an inflammatory response / G.P. Sorescu, M. Sykes, D. Weiss et al. // J. Biol. Chem. 2003. - Vol. 278. - P. 31128-31135.

89. Bone regeneration via a mineral substrate and induced angiogenesis / W.L. Murphy, C.A. Simmons, D. Kaigler, D.J. Mooney // J. Dent. Res. 2004. -Vol. 83.-P. 204-210.

90. Bostrom, M.P. Transforming growth factor beta in fracture repair / M.P. Bostom, P. Asnis // Clin. Orthop. Relat. Res. 1998. - Vol. 355. - P. 124131.

91. Brandi, M.L. Vascular biology and the skeleton / M.L. Brandi, P. Collin-Osdoby//J. Bone Miner. Res. 2006. - Vol. 21.-P. 183-192.

92. Burkus, J.K. Development of the cartilage canals and the secondary center of ossification in the distal chondroepiphysis of the prenatal human femur / J.K. Burkus, T.M. Ganey, J.A. Ogden // Yale J. Biol. Med. 1993. - Vol. 66. - P. 193-202.

93. Юб.Сагапо, R.A. Angiogenesis and bone repair / R.A. Carano, E.H. Filvaroff // Drug Discov. Today. 2003. - Vol. 8. - P. 980-989.

94. Carmeliet, P. Angiogenesis in health and disease / P. Carmeliet // Nat. Med. -2003.-Vol. 9.-P. 653-660.

95. Carmeliet, P. Molecular basis of angiogenesis. Role of VEGF and VE-cadherin / P. Carmeliet, D. Collen // Ann. N. Y. Acad. Sci. 2000. - Vol. 902. -P. 249-262.

96. Changes in trabecular bone, hematopoiesis and bone marrow vessels in aplastic anemia, primary osteoporosis, and old age: a comparative histomorphometric study / R. Burkhardt, G. Kettner, W. Bohm et al. // Bone.- 1987.-Vol. 8.-P. 157-164.

97. Childs, S.G. Osteonecrosis: death of bone cells / S.G. Childs // Orthop. Nurs.- 2005. Vol. 24. - P. 295-301.

98. Clemens, T.L. Principles of bone biology / T.L. Clemens. San Diego: Academic Press, 1996. - 605 p.

99. Cloned endothelial cells from fetal bovine bone / E.A. Streeten, R. Ornberg, F. Curcio et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 1989. - Vol. 86. - P. 916920.

100. Collin-Osdoby, P. Role of vascular endothelial cells in bone biology / P. Collin-Osdoby // J. Cell. Biochem. 1994. - Vol. 55. - P. 304-309.

101. Conditional inactivation of VEGF-A in areas of collagen2al expression results in embryonic lethality in the heterozygous state / J.J. Haigh, H.P. Gerber, N. Ferrara, E.F. Wagner // Development. 2000. - Vol. 127. - P. 1445-1453.

102. Coronary vasodilation and improvement in endothelial dysfunction with endothelin ETA receptor blockade / J.P.J. Halcox, K.R.A. Nour, G. Zalos, et al. // Circ. Res. 2001. - Vol. 89. - P. 969-976.

103. Coultas, L. Endothelial cells and VEGF in vascular development / L. Coultas, K. Chawengsaksophak, J. Rossant // Nature. 2005. - Vol. 438. - P. 937-945.

104. Decreased bone anabolic effect of basic fibroblast growth factor at fatty marrow sites in ovariectomized rats / S. Pun, R.L. Dearden, A.M. Ratkus et al. // Bone. 2001. - Vol. 28. - P. 220-226.

105. Differences in sulfation patterns of heparan sulfate derived from human bone marrow and umbilical vein endothelial cells / T. Netelenbos, A.M. Drager, B. van het Hof et al. // Exp. Hematol. 2001. - Vol. 29. - P. 884-893.

106. Different effects of antihypertensive drugs on endothelial dysfunction / P. Puddu, G.M. Puddu, E. Cravero, A. Muscari // Acta. Cardiol. 2004. - Vol. 59 (5).-P. 555-564.

107. Disruption of the fibroblast growth factor-2 gene results in decreased bone mass and bone formation / A. Montero, Y. Olcada, M. Tomita et al. // J. Clin. Invest. 2000. - Vol. 105.-P. 1085-1093.

108. Effect of human endothelial cells on human bone marrow stromal cell phenotype: role of VEGF? / F. Villars, L. Bordenave, R. Bareille, J. Amedee // J. Cell. Biochem. 2000. - Vol. 79. - P. 672-685.

109. Effect of treatment on flow dependent vasodilation of the brachial artery in essential hypertension / M.L. Muiesan, M. Salvetti, C. Monteduro et al. // Hypertension. 1999. - Vol. 33. - P. 575-580.

110. Effect of vascular endothelial growth factor in fracture healing / T.W. Chu, Z.G. Wang, P.F. Zhu et al. // Zhongguo Xiu Fu Chong Jian Wai KeZaZhi. -2002.-Vol. 16.-P. 75-78.

111. Effects of ACE inhibition on spontaneous and insulin-stimulated endothelin-1 secretion: in vitro and in vivo studies / G. Desideri, C. Ferri, C. Bellini et al. // Diabetes. 1997. - Vol. 46. - P. 81-86.

112. Effects of acidic and basic fibroblast growth factors on osteoblastic cells / S.B. Rodan, G. Wesolowski, K.A. Thomas et al. // Connect. Tissue Res. -1989.-Vol. 20.-P. 283-288.

113. Effects of FGF-2 on metaphyseal fracture repair in rabbit tibiae / W.J. Chen, S. Jingushi, I. Aoyama et al. // J. Bone Miner. Metab. 2004. - Vol. 22. - P. 303-309.

114. Expression of various growth factors for cell proliferation and cytodifferentiation during fracture repair of bone / K. Tatsuyama, Y. Maezawa, H. Baba et al. // Eur. J. Histochem. 2000. - Vol. 44. - P. 269-278.

115. Expression of vascular endothelial growth factors and their receptors during osteoblast differentiation / M.M. Deckers, M. Karperien, C. van der Bent et al. //Endocrinology.-2000.-Vol. 141.-P. 1667-1674.

116. Ferrara, N. The biology of VEGF and its receptors / N. Ferrara, H.P. Gerber, J. LeCouter // Nat. Med. 2003. - Vol. 9. - P. 669-676.

117. Ferrara, N. The role of vascular endothelial growth factor in angiogenesis / N. Ferrara, H.P. Gerber // Acta. Haematol. 2001. - Vol. 106. - P. 148-156.

118. Findlay, D.M. Mechanisms of bone loss in rheumatoid arthritis / D.M. Findlay, D.R. Haynes // Mod. Rheumatol. 2005. - Vol. 15. - P. 232-240.

119. Gerber, H.P. Angiogenesis and bone growth / H.P. Gerber, N. Ferrara // Trends. Cardiovasc. Med. 2000. - Vol. 10. - P. 223-228.

120. Globus, R.K. Regulation of bovine bone cell proliferation by fibroblast growth factor and transforming growth factor beta // R.K. Globus, P. Patterson-Buckendahl, D. Gospodarowicz // Endocrinology. 1988. - Vol. 123.-P. 98-105.

121. Glowacki, J. Angiogenesis in fracture repair / J. Glowacki // Clin. Orthop. Relat. Res. 1998. - Vol. 355. - P. 82-89.

122. Growth factor regulation of fracture repair / G.L. Barnes, P.J. Kostenuik, L.C. Gerstenfeld, T.A. Einhorn // J. Bone Miner. Res. 1999. - Vol. 14. - P. 18051815.

123. Hall, A.P. Review of the effects of anti-angiogenic compounds on the epiphyseal growth plate / A.P. Hall, F.R. Westwood, P.F. Wadsworth // Toxicol. Pathol. 2006. - Vol. 34. - P. 131-147.

124. Hl.Haller, A. Experimentorum de ossiemformatione / A. Haller. — Milan: Francisci Grasset, 1763. — 400 p.

125. Hayashi, К. Three-dimensional organization of the cartilage canal-a scanning electron-microscopic study by vascular cast of the rabbit's femoral head / K. Hayashi // Nippon Seikeigeka Gakkai Zasshi. 1992. - Vol. 66. - P. 548-559.

126. Heparanase mRNA expression during fracture repair in mice / M. Saijo, R. Kitazawa, M. Nakajima et al. // Histochem. Cell. Biol. 2003. - Vol. 120. -P. 493-503.

127. Hornig, B. Bradykinin in human endothelial dysfunction / B. Hornig // Drugs. 1997.-Vol. 54.-P. 42-47.

128. Human bone marrow endothelial cells: a new identified source of B-type natriuretic peptide / L. Bordenave, A. Georges, R. Bareille et al. // Peptides. -2002. Vol. 23. - P. 935-940.

129. Hunter, J. Treatise on the blood, inflammation and gunshot wounds // J. Hunter. London: Eds. George Nicol., 1794. - 216 p.

130. Hunziker, E.B. Mechanism of longitudinal bone growth and its regulation by growth plate chondrocytes / E.B. Hunziker // Microsc. Res. Tech. 1994. -Vol. 28.-P. 505-519.

131. Hydroxy-methylglutarylconezyme A reductase inhibition promotes endothelial nitric oxide synthase activation through a decrease in caveolin abundance / O. Feron, C. Dessy, J.P. Desager et al. // Circulation. 2001. -Vol. 103.-P. 113-118.

132. Hypoxia and VEGF up-regulate BMP-2 mRNA and protein expression in microvascular endothelial cells: implications for fracture healing / P.J. Bouletreau, S.M. Warren, J.A. Spector et al. // Plast. Reconstr. Surg. 2002. -Vol. 109.-P. 2384-2397.

133. Imhof, B.A. Basic mechanism of leukocyte migration / B.A. Imhof, D. Dunon //Horm. Metab. Res. 1997.-Vol. 29.-P. 614-621.

134. Immunohistochemical study of vascular endothelial growth factor (VEGF) and bone morphogenetic protein-2,-4(BMP-2,-4) on lengthened rat femurs / K. Sojo, Y. Sawaki, H. Hattori et al. // J. Craniomaxillofac. Surg. 2005. -Vol. 33.-P. 238-245.

135. Impaired angiogenesis and endochondral4bone formation in mice lacking the vascular endothelial growth factor isoforms VEGF 164 and VEGF 188 / C. Maes, P. Carmeliet, K. Moermans et al. // Mech. Dev. 2002. - Vol. 111. - P. 61-73.

136. Improved endothelium-dependent vasodilation after blockade of endothelin receptors in patients with essential hypertension / C. Cardillo, U. Campia, C.M. Kilcoyne et al. // Circulation. 2002. - Vol. 105. - P. 452-456.

137. Increase of both angiogenesis and bone mass in response to exercise depends on VEGF / Z. Yao, M.H. Lafage-Proust, J. Plouet et al. // J. Bone. Miner. Res. -2004.-Vol. 19.-P. 1471-1480.

138. Induction of growth plate cartilage ossification by basic fibroblast growth factor / J. Baron, K.O. Klein, J.A. Yanovski et al. // Endocrinology. 1994. -Vol. 135.-P. 2790-2793.

139. Is human fracture hematoma inherently angiogenic? / J. Street, D. Winter, J.H. Wang et al. // Clin. Orthop. Relat. Res. 2000. - Vol. 378. - P. 224-237.

140. Jain, R'.K. Molecular regulation of vessel maturation / R.K. Jain // Nat. Med. -2003.-Vol. 9.-P. 685-693.

141. Kanczler, J.M. Osteogenesis and angiogenesis: the potential for engineering bone / J.M. Kanczler, R.O.C. Oreffo // Eur. Cell. Mater. 2008. - Vol. 15. -P. 100-114.

142. Laursen, J.B. Role of superoxide in angiotensin II-induced but notcatecholamine-induced hypertension / J.B. Laursen, S. Rajagopalan, Z. Galis // Circulation. 1997. - Vol. 95. - P. 588-593.

143. Lazzarini, L. Long Bone Osteomyelitis / L. Lazzarini, F. De Lalla, J.T. Mader // Curr. Infect. Dis. Rep. 2002. - Vol. 4. - P. 439-445.

144. Local application of basic fibroblast growth factor minipellet induces the healing of segmental bony defects in rabbits / K. Inui, M. Maeda, A. Sano et al. // Calcif. Tissue Int. 1998. - Vol. 63. - P. 490-495.

145. Lusher, Т.Е. Biology of the endothelium / Т.Е. Lusher, M. Barton // Clin. Cardiol. 1997. - Vol. 10. - P. 3-10.

146. Luscher, T.F. Endothelial dysfunction as therapeutic target / T.F. Luscher // Eur. Heart. J. 2000. - Suppl. D. - P. 20-25.

147. Madeddu, P. Therapeutic angiogenesis and vasculogenesis for tissue regeneration / P. Madeddu // Exp. Physiol. 2005. - Vol. 90. - P. 315-326.

148. Maintenance of the hematopoietic stem cell pool by CXCL12-CXCR4 chemokine signaling in bone marrow stromal cell niches / T. Sugiyama, H. Kohara, M. Noda, T. Nagasawa // Immunity. 2006. - Vol. 25. - P. 977-988.

149. Mandracchia, V.J. Current concepts of bone healing / V.J. Mandracchia, S.C. Nelson, E.A. Barp // Clin. Podiatr. Med. Surg. 2001. - Vol. 18. - P. 55-77.

150. Marotti, G. Changes in the vascular network during the formation of Haversian systems / G. Marotti, A.Z. Zallone // Acta. Anat. (Basel). 1980. -Vol. 106.-P. 84-100.

151. Matrix metalloproteinase 9 and vascular endothelial growth factor are essential for osteoclast recruitment into developing long bones / M.T. Engsig, Q.J. Chen, Т.Н. Vu et al. // J. Cell. Biol. 2000. - Vol. 151. - P. 879-889.

152. Matrix metalloproteinase-9 triggers the angiogenic switch during carcinogenesis / G. Bergers, R. Brekken, G. McMahon et al. // Nat. Cell. Biol. 2000. - Vol. 2. - P. 737-744.

153. Mechanisms of action of demineralized bone matrix in the repair of cortical bone defects / C. Colnot, D.M. Romero, S. Huang, J.A. Helms // Clin. Orthop. Relat. Res. 2005. - Vol. 435. - P. 69-78.

154. Mechanisms of alveolar bone destruction in periodontitis / Z. Schwartz, J. Goultschin, D.D. Dean, B.D. Boyan // Periodontol. 2000. - Vol. 14. - P. 158-172.

155. Meury, T. Human endothelial cells inhibit BMSC differentiation into mature osteoblasts in vitro by interfering with osterix expression / T. Meury, S. Verrier, M. Alini //J. Cell. Biochem. 2006. - Vol. 98. - P. 992-1006.

156. Midy, V. Vasculotropin/vascular endothelial growth factor induces differentiation in cultured osteoblasts / V. Midy, J. Plouet // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1994. - Vol. 199. - P. 380-386.

157. ММР-9/gelatinase В is a key regulator of growth plate angiogenesis and apoptosis of hypertrophic chondrocytes / Т.Н. Vu, J.M. Shipley, G. Bergers et al. // Cell. 1998. - Vol. 93. - P. 411-422.

158. Napoli, C. Nitric oxide and atherosclerosis / C. Napoli, L.J. Ignarro // Nitric Oxide. 2001. - Vol. 5. - P. 88-97.

159. Nikolova, G. The vascular niche and its basement membrane / G. Nikolova, B. Strilic, E. Lammert // Trends. Cell. Biol. 2006. - Vol. 17. - P. 19-25.

160. Osteoblastic responses to TGF-beta during bone remodeling / A. Erlebacher, E.H. Filvaroff, J.Q. Ye, R. Derynck // Mol. Biol. Cell. 1998. - Vol. 9. - P. 1903-1918.

161. Parfitt, A.M. The mechanism of coupling: a role for the vasculature / A.M. Parfitt // Bone. 2000. - Vol. 26. - P. 319-323.

162. Petersen, W. Expression of VEGF 121 and VEGF 165 in hypertrophic chondrocytes of the human growth plate and epiphyseal cartilage / W. Petersen, M. Tsokos, T. Pufe // J. Anat. 2002. - Vol. 201. - P. 153-157.

163. Platelet-derived growth factor is angiogenic in vivo / W. Risau, H. Drexler, V. Mironov et al. // Growth Factors. 1992. - Vol. 7. - P. 261-266.

164. Pravastatin has cholesterol-lowering independent effects on the artery wall of atherosclerotic monkeys / J.K. Williams, G.K. Sukhova, D.M. Herrmgton et al. // J. Am. Coll. Cardiol. 1998. - Vol. 31. - P. 684-691.

165. Preclinical safety evaluation of rhuMAbVEGF, an antiangiogenic humanized monoclonal antibody / A.M. Ryan, D.B. Eppler, K.E. Hagler et al. // Toxicol. Pathol. 1999. - Vol. 27. - P. 78-86.

166. Prevention of first stroke. A review of guidelines and a multidisciplinary consensus statement from the National Stroke Assotiation / P.B. Gorelick, R.L. Sacco, D.B. Smith et al.//JAMA. 1999.-Vol. 31.-P. 1112-1120.

167. Ramipril prevents endothelial dysfunction induced by oxidized low-density lipoproteins: a bradykinin-dependent mechanism / G. Berkenboom, I. Langer, Y. Carpentier et al. // Hypertension. 1997. - Vol. 30 (3 Pt 1). - P. 371-376.

168. Rhinelander, F.W. Tibial blood supply in relation to fracture healing / F.W. Rhinelander//Clin. Orthop. Relat. Res. 1974. - Vol. 105.-P. 34-81.

169. Role of bone morphogenetic protein 2 in the crosstalk between endothelial progenitor cells and mesenchymal stem cells / M. Raida, A.C. Heymann, C. Gunther, D. Niederwieser // Int. J. Mol. Med. 2006. - Vol. 18. - P. 735-739.

170. Role of vascular factors in osteoporosis / K. Alagiakrishnan, A. Juby, D. Hanley et al. // J. Gerontol. A Biol. Sci. Med. Sci. 2003. - Vol. 58. - P. 362366.

171. Rosier, R.N. The potential role of transforming growth factor beta in fracture healing / R.N. Rosier, R.J. O'Keefe, D.G. Hicks // Clin. Orthop. Relat. Res. -1998. Vol. 355. - P. 294-300.

172. Rossant, J. Signaling pathways in vascular development / J. Rossant, L. Howard//Annu. Rev. Cell. Dev. Biol.-2002.-Vol. 18.-P. 541-573.

173. Skeletal defects in VEGF(120/120) mice reveal multiple roles for VEGF in skeletogenesis / E. Zelzer, W. McLean, Y.S. Ng et al. // Development. 2002. -Vol. 129.-P. 1893-1904.

174. Stimulation of bone formation by intraosseous application of recombinant basic fibroblast growth factor in normal and ovariectomized rabbits / K. Nakamura, H. Kawaguchi, I. Aoyama et al. // J. Orthop. Res. 1997. - Vol. 15.-P. 307-313.

175. Stimulation of endosteal bone formation by systemic injections of recombinant basic fibroblast growth factor in rats / T. Nakamura, K. Hanada, M. Tamura et al.//Endocrinology. 1995.-Vol. 136.-P. 1276-1284.

176. Storkebaum, E. VEGF: a critical player in neurodegeneration / E. Storkebaum, P. Carmeliet // J. Clin. Invest. 2004. - Vol. 113. - P. 14-18.

177. Streeten, E.A. Biology of bone endothelial cells / E.A. Streeten, M.L. Brandi // Bone Miner. 1990. - Vol. 10. - P. 85-94.

178. Synergistic enhancement of bone formation and healing by stem cell-expressed VEGF and bone morphogenetic protein-4 / H. Peng, V. Wright, A. Usas et al. // J. Clin. Invest. 2002. - Vol. 110. - P. 751 -759.

179. The biology of vascular endothelial growth factors / T. Tammela, B. Enholm, K. Alitalo, K. Paavonen // Cardiovasc. Res. 2005. - Vol. 65. - P. 550-563.

180. The HMG-CoA reductase inhibitor simvastatin activates the protein kinase Akt and promotes angiogenesis in normocholesterolemic animals / Y. Kureishi, Z. Luo, I. Shiojima et al. // Nat. Med. 2000. - Vol. 6. - P. 10041010.

181. The hypoxia-inducible factor alpha pathway couples angiogenesis to osteogenesis during skeletal development / Y. Wang, C. Wan, L. Deng et al. // J. Clin. Invest. 2007. - Vol. 117.-P. 1616-1626.

182. The murine mutation osteopetrosis is in the coding region of the macrophage colony stimulating factor gene / H. Yoshida, S. Hayashi, T. Kunisada et al. // Nature. 1990. - Vol. 345. - P. 442-444.

183. The Quinapril Ischemic Event Trial (QUIET): evaluation of chronic ACE inhibitor therapy in patients with ischemic heart disease and preserved ventricular function / B. Pit, B. O'Neill, R. Feldman et al. // Am. J. Cardiol. -2001.-Vol. 87.-P. 1058-1063.

184. The relationship of left ventricular mass to endothelium-dependent vasodilation of the brachial artery in patients with hypertension / T. Motoyama, H. Kawano, N. Hirai et al. // Cardiology. 2001. - Vol. 96. - P. 7-15.

185. The relevance of tissue angiotensin-converting enzyme: manifestations in mechanistic and endpoint data / V. Dzau, K. Bernstein, D. Celermaier et al. // Am. J. Cardiol.-2001.-Vol. 88.-P. 1-20.

186. The role of cartilage canals in the formation of secondary centres of ossification / J.H. Kugler, A. Tomlinson, A. Wagstaff, S.M. Ward // J. Anat. -1979. Vol. 129. - P. 493-506.

187. The significance of angiogenesis in guided bone regeneration. A case report of a rabbit experiment / J. Schmid, B. Wallkamm, C.H. Hammerle et al. // Clin. Oral. Implants Res. 1997. - Vol. 8. - P. 244-248.

188. The splice variants VEGF 121 and VEGF 189 of the angiogenic peptide vascular endothelial growth factor are expressed in osteoarthritic cartilage / T. Pufe, W. Petersen, B. Tillmann, R. Mentlein // Arthritis Rheum. 2001. -Vol. 44.-P. 1082-1088.

189. The vascular origin of coordinates is determined angiotensin I expression of an enzyme with conversion in endothelial cells / B. Baudin, M. Berard, J.L. Carrier et al. // Hypertension. 1997. - Vol. 29. - P. 124-131.

190. The vascular supply of the chondro-epiphyses of the elbow joint in young swine / D.M. Visco, S. Van, M.A. Hill, S.A. Kincaid // J. Anat. 1989. - Vol. 163.-P. 215-229.

191. Tiefenbacher, C.P. Nitric oxide-mediated endothelial dysfunction — is there need to treat? / C.P. Tiefenbacher, J. Kreuzer // Curr. Vase. Pharmacol. -2003.-Vol. l.-P. 123-133.

192. Transient changes in oxygen tension inhibit osteogenic differentiation and Runx2 expression in osteoblasts / A. Salim, R.P. Nacamuli, E.F. Morgan et al. // J. Biol. Chem. 2004. - Vol. 279. - P. 40007-40016.

193. Trueta, J. The role of the vessels in osteogenesis / J. Trueta // Journal of Bone and Joint Surgery. 1963. - Vol. 45. - P. 402-418.

194. Vascular endothelial growth factor can substitute for macrophage colony-stimulating factor in the support of osteoclastic bone resorption / S. Niida, M. Kaku, H. Amano et al. // J. Exp. Med. 1999. - Vol. 190. - P. 293-298.

195. Vascular endothelial growth factor gene-activated matrix (VEGF165-GAM) enhances osteogenesis and angiogenesis in large segmental bone defects / F.

196. Geiger, H. Bertram, I. Berger et al. // J. Bone Miner. Res. 2005. - Vol. 20. -P. 2028-2035.

197. Vascular endothelial growth factor is expressed along with its receptors during the healing process of bone and bone marrow after drill-hole injury in rats / S. Uchida, A. Sakai, H. Kudo et al. // Bone. 2003. - Vol. 32. - P. 491501.

198. Vascular endothelial growth factor stimulates bone repair by promoting angiogenesis and bone turnover / J. Street, M. Bao, L. deGuzman et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 2002. - Vol. 99. - P. 9656-9661.

199. Vascular endothelial growth factor (VEGF) directly enhances osteoclastic bone resorption and survival of mature osteoclasts / M. Nakagawa, T. Kaneda, T. Arakawa et al. // FEBS Lett. 2000. - Vol. 473. - P. 161-164.

200. Vascularisation and osteochondrosis of the epiphyseal growth cartilage of the distal femur in pigs-development with age, growth rate, weight and joint shape / B. Ytrehus, C.S. Carlson, N. Lundeheim et al. // Bone. 2004. - Vol. 34.-P. 454-465.

201. Vascular-specific growth factors and blood vessel formation / G.D. Yancopoulos, S. Davis, N.W. Gale et al. // Nature. 2000. - Vol. 407. - P. 242-248.

202. VEGF and VEGF receptors are differentially expressed in chondrocytes / G. Bluteau, M. Julien, D. Magne et al. // Bone. 2007. - Vol. 40. - P. 568-576.

203. VEGF couples hypertrophic cartilage remodeling, ossification and angiogenesis during endochondral bone formation / H.P. Gerber, Т.Н. Vu, A.M. Ryan et al. // Nat. Med. 1999. - Vol. 5. - P. 623-628.

204. VEGF improves, whereas sFltl inhibits, BMP2-induced bone formation and bone healing through modulation of angiogenesis / H. Peng, A. Usas, A. Olshanski et al. // J. Bone. Miner. Res. 2005. - Vol. 20. - P. 2017-2027.

205. Walsh, D.A. Joint physiology and synovial cell proliferation / D.A. Walsh, P.I. Mapp //Br. J. Rheumatol. 1998. - Vol. 37. - P. 1032-1033.

206. Xanthine oxidase mediates cytokine-induced, but not hormone-induced bone resorption / J.M. Kanczler, T.M. Millar, T. Bodamyali et al. // Free Radic. Res. 2003. - Vol. 37. - P. 179-187.

207. Yabsley, R.H. The effect of shaft fractures and periosteal stripping on the vascular supply to epiphyseal plates / R.H. Yabsley, W.R. Harris // J. Bone Joint Surg. Am. 1965.-Vol. 47.-P. 551-566.

208. ZD6474 inhibits vascular endothelial growth factor signaling, angiogenesis, and tumor growth following oral administration / S.R. Wedge, D.J. Ogilvie, M. Dukes et al. // Cancer Res. 2002. - Vol. 62. - P. 4645-4655.