Исследование эндотелио- и кардиопротективных эффектов некоторых антиоксидантов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.06, кандидат медицинских наук Стабровская, Надежда Владимирована

• Стабровская, Надежда Владимирована
• кандидат медицинских наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Стабровская, Надежда Владимирована

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Роль эндотелиальной дисфункции в развитии сердечно-сосудистых заболеваний.

1.2. Роль эндотелия и васкуляризации в развитии и функционировании костной ткани.

1.3. Принципы фармакологической коррекции эндотелиальной дисфункции и основные группы эндотелиопротективных препаратов.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Изучение эндотелио- и кардиопротективного действия исследуемых препаратов.

2.1.1. Оценка развития Ь-МАМЕ-индуцированного дефицита оксида азота и оценка эндотелийзависимых и эндотелийнезависимых сосудистых реакций.

2.1.2. Проведение функциональных проб в острых экспериментах на наркотизированных крысах.

2.1.3. Биохимические маркеры эндотелиальной дисфункции.

2.1.4. Морфологические методы оценки сердечно-сосудистых изменений при моделировании Ь-КАМЕ-индуцированной эндотелиальной дисфункции.

2.2. Изучение остеопротективного действия исследуемых препаратов.

2.2.1. Моделирование генерализованного остеопороза.

2.2.2. Измерение уровня микроциркуляции в кости.

2.2.3. Гистоморфометрическая оценка изменений, происходящих при генерализованном остеопорозе и его коррекции.

2.3. Обоснование доз и дизайн эксперимента.

2.4. Статистическая обработка результатов исследования.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Сравнительное исследование эндотелиопротективной активности этоксидола и аскорбиновой кислоты при Ь-1чГАМЕ-индуцированном дефиците оксида азота с использованием результатов функциональных проб, биохимических маркеров и морфологических исследований.

3.2. Сравнительное исследование эндотелиопротективной активности резвератрола и аскорбиновой кислоты при Ь-ЫАМЕ-индуцированном дефиците оксида азота с использованием результатов функциональных проб, биохимических маркеров и морфологических исследований.

3.3. Изучение остеопротективного действия этоксидола и резвератрола в сравнении с препаратом кальций-ДЗ Никомед на модели генерализованного остеопороза в эксперименте с использованием результатов измерения микроциркуляции в кости и гистоморфометрического исследования.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Исследование эндотелио- и кардиопротективных эффектов некоторых антиоксидантов»

Сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ) и остеопороз (т.е. снижение костной массы и нарушения микроархитектоники кости) являются основными проблемами здравоохранения в мире, распространенность которых растет с возрастом. Социально-экономическое бремя для общества от остеопороза и ССЗ огромно. Остеопоротические переломы и проявления ССЗ являются основными в структуре заболеваемости и преждевременной смертности у пожилых. Более того, женщины в постменопаузе имеют больший риск развития одновременно и остеопороза, и ССЗ. Фактически, как только женщина достигает возраста менопаузы, риск развития обоих заболеваний значимо увеличивается [218].

В течение многих лет считалось, что остеопороз и ССЗ являются независимыми хроническими заболеваниями, распространенность которых увеличивается с возрастом. Но все больше находится свидетельств того, что между ними существует прямая связь. Например, минеральная плотность кости (МПК) обратно пропорциональна кальцификации коронарных артерий или аорты [88, 217] и прямо пропорциональна уровню холестерина липопротеинов высокой плотности.

Клинические популяционные исследования также выявили связь между ССЗ и остеопорозом. Например, высокая скорость потери костной массы характерна для больных сахарным диабетом, у которых также выражены сосудистые нарушения [7]. Более того, в случаях, когда функция сосудов поражается несимметрично на разных сторонах тела (так называемая асимметричная сосудистая болезнь нижних конечностей), на той стороне, где поражение сосудов больше, также обнаруживается более выраженное снижение костной массы. У пожилых лиц с переломом шейки бедренной кости артерии, снабжающие проксимальные отделы бедра, часто имеют выраженные атеросклеротические изменения [183].

Потенциальная связь между этими хроническими заболеваниями имеет значимые последствия для здоровья многих людей с ССЗ и остеопорозом. Так, было показано, что у женщин в постменопаузе повышен риск смерти от ССЗ и инсульта на каждое стандартное отклонение снижения костной массы [182]. Например, по данным Kado и соавт. [230], каждое стандартное отклонение снижения костной массы повышает риск смерти от коронарной болезни сердца или других форм атеросклероза в 1,3 раза. В исследовании von Recke и соавт. [111] отмечено, что нижний квартиль костной массы связан с 2-кратным повышением риска сердечно-сосудистой смерти (по сравнению с верхним квартилем). Tanko и соавт. показали, что женщины с остеопорозом имеют 3,9-кратный риск сердечно-сосудистых осложнений в отличие от женщин с остеопенией [192]. Такое повышение риска не может быть объяснено наличием только общих факторов риска. Очень важно заметить, что исследования также показали отсутствие ассоциации между кальцификацией коронарных артерий и остеопорозом после поправки на возраст.

В последние годы публикуется много экспериментальных и клинических работ, посвященных роли эндотелиальной дисфункции (ЭД) в возникновении и прогрессировании ряда заболеваний сердечно-сосудистой системы (атеросклероз, гипертоническая болезнь, ишемическая болезнь сердца (ИБС), инфаркт миокарда и др.) [6, 12, 17, 25, 26, 29, 36, 41, 42, 57, 78, 90, 116, 119]. Проявления дисфункции эндотелия некоторые исследователи связывают с недостатком продукции или биодоступности NO в стенке артерий. Другие - с дисбалансом между продукцией вазодилатирующих, ангиопротективных, антипролиферативных факторов, с одной стороны, и вазоконстрикторных, протромботических, пролиферативных факторов - с другой. Основную роль в механизме развития ЭД играют окислительный стресс, продукция мощных вазоконстрикторов (эндопероксиды, эндотелины, ATII), а также цитокинов и фактора некроза опухоли, которые подавляют продукцию NO [11, 15, 24, 45, 66, 68]. Окислительное повреждение тканей играет ключевую роль в развитии многих заболеваний, например атеросклероза, ишемической болезни сердца, нейродегенеративных и аутоиммунных заболеваний и др. [70]. Следовательно, на сегодняшний день немаловажной задачей является поиск, разработка и изучение новых препаратов антиоксидантной терапии, способных корректировать и лечить болезни человека. При различных заболеваниях ведущее значение в развитии патологических изменений тканей будут иметь различные звенья свободнорадикальных реакций [3, 33, 73]. Антиоксиданты влияют на эндотелиальную дисфункцию за счет торможения процессов перекисного окисления липопротеидов низкой плотности и повышение экспрессии е>Ю8 [33].

Для каждого лекарства есть главная мишень, на которую нацелено оказание его эффекта. Для антиоксидантов такая мишень - свободные радикалы, поэтому наиболее эффективными при лечении указанных патологических состояний будут лекарственные препараты с мишенями антиоксидантного действия.

В последнее время проводится широкий поиск и тестирование свойств и активности различных новых ингибиторов свободных радикалов и их смесей [3, 33]. Примером таких антиоксидантов являются производные 3-оксипиридина (мексидол, эмоксипин, проксипин и ряд других), которые широко используются как в клинической, так и в экспериментальной медицине. Производные 3-оксипиридина, с одной стороны, относятся к классу шестичленных азотистых гетероциклов, с другой — к простейшим гетероциклическим аналогам ароматических фенолов. В связи с этим они проявляют антиоксидантные и антирадикальные свойства, обладают широким спектром воздействия на различные механизмы регуляции метаболической активности клеток. Они являются не только ингибиторами перекисного окисления липидов в биомембранах, но и воздействуют на ряд других, принципиально важных для жизнедеятельности клеток процессов.

Ярким представителем данной группы лекарственных средств является 3-окси-6-метил-2-этилпиридина сукцинат, выпускаемый под коммерческими названиями «Мексидол» и «Мексикор» [82]. Перспективной областью применения этих препаратов является кардиология, доказана их антиишемическая и антиаритмическая активность, способность снижать токсичность противоаритмических средств, а также выявлены стресс-протекторные свойства. В то же время среди различных солей З-гидрокси-6-метил-2-этилпиридина имеются вещества, не уступающие, а иногда превосходящие янтарнокислую соль по своей фармакологической активности. Одним из таких соединений является яблочнокислая соль 3-гидрокси-6-метил-2-этилпиридина, запатентованная под названием «этоксидол».

Резвератрол (3,5,4-тригидрокси-транс-стильбен) относится к классу фитоалексинов. К настоящему времени известно, что резвератрол содержится в более чем 70 растениях. К ним относятся разные виды смородины, ревеня, арахиса, сосны и др. В настоящее время выявлены многочисленные фармакологические свойства резвератрола: эндотелиотропные эффекты, антиоксидантные и ангиогенные свойства, кардиопротективная и антиагрегационная активность, противовоспалительное действие, свойства фитоэстрогена, антиканцерогенные свойства, гиполипидемическое и нейропротективное действия, противомикробная активность [81, 188, 189, 190, 191].

Данное исследование посвящено изучению эндотелио- и кардиопротективных, а также остеопротективных свойств нового производного 3-оксипиридина этоксидол а и фитоалексина резвератрола.

Номер государственной регистрации темы - 01.2.009 52877.

Цель исследования: оценить эндотелио- и остеопротективное действие антиоксидантов этоксидола и резвератрола: эндотелиопротективное действие в сравнении с аскорбиновой кислотой на модели L-NAME-индуцированного дефицита оксида азота и остеопротективное действие в сравнении с препаратом кальций-ДЗ Никомед при гипоэстрогениндуцированном остеопорозе.

Задачи исследования

1. Изучить эндотелио- и кардиопротективные эффекты этоксидола при Ь^АМЕ-индуцированном дефиците N0 в эксперименте по физиологическим, биохимическим и морфологическим показателям.

2. Изучить эндотелио- и кардиопротективные эффекты резвератрола при Ь-ЫАМЕ-индуцированном дефиците N0 в эксперименте по физиологическим, биохимическим и морфологическим показателям.

3. Изучить эндотелио- и кардиопротективные эффекты аскорбиновой кислоты при Ь-ЫАМЕ-индуцированном дефиците N0 в эксперименте по физиологическим, биохимическим и морфологическим показателям.

4. Изучить остеопротективное действие этоксидола на модели билатеральной овариэктомии.

5. Изучить остеопротективное действие резвератрола и на модели билатеральной овариэктомии.

6. Изучить остеопротективное действие препарата кальций-ДЗ Никомед на модели билатеральной овариэктомии.

Научная новизна

В работе впервые показано, что новое производное 3-оксипиридина этоксидол в дозе 25 мг/кг оказывает эндотелиопротективное действие на модели Ь-ЫАМЕ-индуцированной N0-дефицитной ЭД, выражающееся в нормализации эндотелийзависимого расслабления и снижении коэффициента эндотелиальной дисфункции (КЭД).

Продемонстрировано, что этоксидол в дозе 25 мг/кг оказывает выраженное кардиопротективное действие на модели Ь-ЫАМЕ-индуцированной МО-дефицитной ЭД, выражающееся в предотвращении повышения адренореактивности и снижения миокардиального резерва.

Установлено что, этоксидол в дозе 25 мг/кг предотвращал увеличение поперечного диаметра кардиомиоцитов, вызванное Ь-ЫАМЕиндуцированной NO-дефицитной ЭД.

Выявлено, что по выраженности эндотелио- и кардиопротективного действия исследованные антиоксиданты расположились в следующей последовательности: резвератрол > этоксидол > аскорбиновая кислота.

Обнаружено, что через восемь недель после билатеральной овариэктомии развивающийся генерализованный остеопороз характеризуется значительным снижением уровня микроциркуляции в проксимальном метафизе бедренной кости, отрицательной динамикой морфологических показателей, наличием тесной прямой зависимости между величиной кровоснабжения кости и шириной костных трабекул в ней.

При этом впервые продемонстрировано, что остеопротективным действием обладали резвератрол в дозе 2 мг/кг и кальций-ДЗ Никомед в дозе 85,7 мг/кг; наиболее выраженным действием обладал резвератрол; препараты эффективно предотвращали снижение уровня регионарной микроциркуляции в костной ткани. Этоксидол в дозе 12,5 мг/кг на модели билатеральной овариэктомии через восемь недель после билатеральной овариэктомии у крыс не обладал остеопротективным действием.

Научная новизна подтверждается 3 поданными заявками на получение патентов на изобретения РФ.

Практическая значимость

В работе обоснована эффективность применения препарата этоксидол для коррекции L-NAME-индуцированной NO-дефицитной ЭД в эксперименте. Показано, что препарат позволяет нормализовать изменение соотношения сосудистых реакций на ацетилхолин (эндотелийзависимая вазодилатация) и нитропруссид натрия (эндотелийнезависимая вазодилатация), предотвратить снижение показателей биохимических маркеров (Total NO, экспрессию NO-синтазы), а также добиться положительной динамики морфофункциональных показателей сердечнососудистой системы (диаметр кардиомиоцитов, прирост давления при пробе на нагрузку сопротивлением и адренореактивности).

Экспериментально доказано, что введение нового производного 3-оксипиридина этоксидола вызывает коррекцию NO-дефицитной эндотелиальной дисфункции.

Полученные данные позволяют рекомендовать целенаправленные клинические испытания препарата этоксидол при состояниях, сопровождающихся эндотелиальной дисфункцией.

Внедрение результатов научных исследований

Результаты работы используются в лекционных курсах кафедры фармакологии ГОУ ВПО КГМУ, кафедры фармакологии и фармацевтических дисциплин ИПМО ГОУ ВПО БелГУ и кафедры фармакологии, клинической фармакологии и фармации ГОУ ВПО «Орловского государственного университета».

Апробация работы

Материалы работы доложены на итоговых научных сессиях и международных конференциях молодых ученых КГМУ (Курск, 2009-2010), III Всероссийской научно-практической конференции «Биотехнология и биомедицинская инженерия» (Курск, 2010), XVII национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2010). Апробация диссертации проведена на научно-практической конференции кафедр фармакологии; травматологии, ортопедии и военно-полевой хирургии; клинической фармакологии; внутренних болезней №2; анатомии человека; биоорганической химии; инфекционных болезней и эпидемиологии; мобилизационной подготовки здравоохранения и медицины катастроф; нормальной физиологии им. профессора A.B. Завьялова; общей химии; фармакогнозии и ботаники; НИИ Экологической медицины КГМУ.

По материалам диссертации опубликовано 15 печатных работ, в том числе четыре из них - в журналах, рекомендуемых ВАК для публикации основных научных результатов диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук.

Положения, выносимые на защиту

1. Этоксидол, резвератрол и аскорбиновая кислота оказывают эндотелио- и кардиопротективное действие на модели Ь-ЫАМЕ-индуцированной эндотелиальной дисфункции, выражающееся в уменьшении коэффициента эндотелиальной дисфункции, снижении адренореактивности, предотвращении исчерпания миокардиального резерва, нормализации биохимических маркеров и морфометрических показателей кардиомиоцитов.

2. Через восемь недель после билатеральной овариэктомии у самок крыс линии Вистар развивается снижение микроциркуляции в костной ткани. Как следствие, значительно ухудшается кровоснабжение костной ткани, что приводит к развитию генерализованного остеопороза, проявляющегося истончением и микропереломами костных трабекул.

3. Резвератрол в дозе 2 мг/кг и кальций-ДЗ Никомед в дозе 85,7 мг/кг на модели билатеральной овариэктомии через восемь недель ежедневного назначения проявляют остеопротективное действие; наиболее выраженным эффектом обладает резвератрол, препарат эффективно предотвращает снижение уровня регионарной микроциркуляции в костной ткани. Этоксидол в дозе 12,5 мг/кг через восемь недель после билатеральной овариэктомии у крыс не обладает остеопротективным действием.

Структура и объем работы.

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов собственных исследований и их обсуждения, заключения, выводов и списка литературы, включающего 234 источников, из которых 83 отечественных и 151 зарубежных авторов.

Заключение диссертации по теме «Фармакология, клиническая фармакология», Стабровская, Надежда Владимирована

выводы

1. Новое производное 3-оксипиридина этоксидол в дозе 25 мг/кг/сут проявлял эндотелио- и кардиопротективное действие на модели Ь-МАМЕ-индуцированного дефицита оксида азота, что выражалось в преобладании эндотелийзависимого расслабления сосудов и снижении коэффициента эндотелиальной дисфункции до значения 2,3 по сравнению с 5,4 у животных, получавших Ь-ЫАМЕ, а также в увеличении экспрессии еЖ)8 (до 37,7% по сравнению с 21,4% от контроля в контрольной группе) и предотвращении снижения концентрации стабильных метаболитов оксида азота (92,3 мкмоль/л по сравнению с 114,1 мкмоль/л у интактных и 61,2 мкмоль/л у контрольных животных). Одновременно результаты нагрузочных проб выявили предотвращение повышения адренореактивности и улучшение результатов проб на нагрузку сопротивлением. Морфометрические исследования кардиомиоцитов обнаружили предотвращение увеличения поперечного диаметра кардиомиоцитов под влиянием этоксидола у животных с Ь-КАМЕ-индуцированной патологией (12,8 мкм по сравнению с 18 мкм в контрольной группе).

2. Резвератрол в дозе 2 мг/кг/сут на модели Ь-ЫАМЕ-индуцированного дефицита оксида азота проявлял эндотелио- и кардиопротективное действие, что выражалось в снижении коэффициента эндотелиальной дисфункции практически до уровня интактных животных (1,2 по сравнению с 1,1 у интактных крыс), а также в предотвращении снижения содержания стабильных метаболитов оксида азота (107,9 мкмоль/л по сравнению с 61,2 мкмоль/л у животных с Ь-ЫАМЕ-патологией). Результаты нагрузочных проб свидетельствовали о выраженной кардиопротективной активности препарата. Морфологические исследования выявили способность препарата предотвращать возникновение гипертрофии кардиомиоцитов у животных на фоне Ь-ЫАМЕ-индуцированного дефицита оксида азота: поперечный диаметр кардиомиоцитов был в среднем равен

13,9 мкм по сравнению с 18 мкм у крыс, получавших Ь-ЫАМЕ.

3. Аскорбиновая кислота в дозе 60 мг/кг/сут обладала эндотелио- и кардиопротективным действием на модели Ь-КАМЕ-индуцированного дефицита оксида азота. Это выражалось в снижении коэффициента эндотелиальной дисфункции (до значения 2,1 по сравнению с 5,4 у животных, получавших Ь-ЫАМЕ), а также в увеличении экспрессии е>Ю8 (до 36,1% по сравнению с 21,4% от контроля в группе Ь-КАМЕ-патологии). Результаты нагрузочных проб выявили улучшение результатов проб на нагрузку сопротивлением относительно группы контроля. Препарат предотвращал увеличение поперечного диаметра кардиомиоцитов на выбранной модели патологии.

4. Резвератрол в дозе 2 мг/кг/сут обладал остеопротективным действием на модели остеопороза, вызванного билатеральной овариэктомией, что выражалось в предотвращении снижения уровня регионарной микроциркуляции в костной ткани бедра (91,0 ПЕ по сравнению с 61,6 ПЕ у крыс с остеопорозом) и истончения костных трабекул (средняя ширина трабекул в бедренной кости составляла 90,0 мкм по сравнению с 61,7 мкм у животных с остеопорозом), а также отсутствии микропереломов.

5. Этоксидол в дозе 12,5 мг/кг через восемь недель после билатеральной овариэктомии у самок крыс линии Вистар не оказывал статистически значимого влияния на уровень регионарной микроциркуляции и ширину костных трабекул.

6. Кальций-ДЗ Никомед в дозе 85,7 мг/кг на модели остеопороза, вызванного билатеральной овариэктомией, не оказывал влияния на кровоснабжение костной ткани, но вместе с тем обладал положительным воздействием на ширину костных трабекул в проксимальном метафизе бедренной кости у крыс (средняя ширина костных трабекул составила 70,5 мкм по сравнению с 61,7 мкм у крыс с остеопорозом).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В настоящее время известно, что эндотелий контролирует сосудистый тонус, рост гладкомышечных клеток, тромбообразование, фибринолиз, лейкоцитарное взаимодействие и миграцию моноцитов, оказывает антиоксидантное действие [19, 45, 83].

Нормальная эндотелиальная функция необходима для здоровья и сосудов, и кости. Сосудистый эндотелий представляет собой макромолекулярный барьер с множеством функций: 1) про- и противовоспалительная; 2) расширение и сужение сосудов, 3) анти- и протромботическая; 4) анти- и проокислительная; 5) подавление и стимулирование роста сосудов [12, 17, 28, 157]. Особое положение клеток эндотелия на границе между циркулирующей кровью и тканями делает их наиболее уязвимыми для различных патогенных факторов, находящихся в системном и тканевом кровотоке. Именно эти клетки первыми встречаются с реактивными свободными радикалами, с окисленными липопротеинами низкой плотности, с гиперхолестеринемией, с высоким гидростатическим давлением внутри выстилаемых ими сосудов (при артериальной гипертонии), с гипергликемией (при сахарном диабете). Все эти факторы приводят к повреждению эндотелия сосудов, к эндотелиальной дисфункции [6, 171].

Здоровый тонус сосудов и нормальное давление поддерживаются постоянным высвобождением оксида азота (NO), синтезируемого из L-аргинина NO-синтазами (NOS), представленными 3 изоферментами: нейрональная (nNOS), эндотелиальная (eNOS) и индуцируемая (iNOS) [24, 67, 215]. Недавно было выявлено, что NO вовлечен также в процессы костного метаболизма. В костях экспрессируются преимущественно eNOS и iNOS, но влияют на кости они по-разному. Например, eNOS экспрессируется постоянно и преимущественно в клетках остеобластной линии, а экспрессия iNOS происходит под влиянием медиаторов воспаления в клетках как остеобластов, так и остеокластов и участвует в развитии остеопороза при воспалительных заболеваниях через снижение формирования костной ткани и апоптоз остеобластов [184].

Проспективные исследования показали, что у пациентов, непостоянно применяющих нитраты, минеральная плотность кости в области бедренной и пяточной кости выше, чем у тех, кто эти препараты не принимает. В недавнем рандомизированном контролируемом исследовании было выявлено, что изосорбида мононитрат (донор N0) эффективно снижает маркеры костной резорбции (экскрецию 1Ч-телопептида с мочой) и повышает маркеры костеобразования (щелочную фосфатазу) у женщин в постменопаузе [154].

Многие другие факторы также предполагаются в установлении связи между ССЗ и остеопорозом, такие как остеопонтин, матриксные С1а-белки, остеокальцин, лептин и др. [88, 182, 217]. Но, тем не менее, принимая во внимание данные литературы, ключевую роль в ассоциации этих заболеваний играет эндотелиальная дисфункция [88, 182, 183].

При оценке функционального состояния эндотелия сосудов важное значение имеет измерение уровня оксида азота (N0), фактора фон Виллебранда, других протромбогеннных факторов и провоспалительных цитокинов основных маркеров его повреждения или дисфункции [41, 78].

Основным механизмом развития ЭД является снижение образования и биодоступности оксида азота (N0), при одновременном повышении уровня супероксид аниона и продукции мощных вазоконстрикторов, т.е. проявляется дисбалансом между медиаторами, обеспечивающими в норме оптимальное течение всех эндотелийзависимых процессов [11, 15, 125].

Понимание важности ЭД в прогрессировании патологических процессов делает эндотелий важной мишенью для раннего вмешательства в патогенез заболеваний сосудов.

Таким образом, систематизация методологических подходов к оценке эндотелиальной дисфункции и ее коррекции с учетом вклада в течение патологического процесса препаратов разных групп одно из важных направлений современной медицины.

Так, в ходе проведенных нами исследований в эксперименте на белых крысах-самцах линии \Vistar был изучен комплекс методических подходов для оценки функционального состояния эндотелия, включающий физиологические, биохимические и морфологические методы.

Физиологические методы исследования включали моделирование эндотелиальной дисфункции ежедневным внутрибрюшинным введением Ь-ИАМЕ в течение 7 суток. Механизм ингибирования выработки N0 в данном случае заключается в конкурентном ингибировании фермента еМЭБ аналогом Ь-аргинина - Ь-№ЧА. Ь-ИАМЕ фактически является пролекарством: в организме этот эфир гидролизуется с участием специальных ферментов - эстераз, давая активный ингибитор - Ь-КЫА.

На восьмые сутки животных наркотизировали, брали в эксперимент и на первом этапе оценивали реакции артериального давления на эндотелийзависимую (ацетилхолин) и эндотелийнезависимую (нитропруссид натрия) вазодилатацию.

Степень эндотелиальной дисфункции рассчитывали как коэффициент эндотелиальной дисфункции (КЭД) - отношение площадей треугольников над кривыми восстановления артериального давления в ответ на введение нитропруссида и ацетилхолин.

У каждого животного интактной группы и крыс после моделирования блокады Ж)-синтазы был рассчитан КЭД. В ходе исследования было выявлено, что в КЭД в группе интакных животных составил 1,1, а в группе животных, получавших Ь-МАМЕ — 5,4. Данные факты подтвердились при определении биохимических маркеров ЭД. 1\Ю-продуцирующая функция эндотелия исследована на основании данных увеличения экспрессии еЖЗБ (в процентах от контроля) и содержания стабильных метаболитов N0, и обнаружено, что моделирование Ь-ЫАМЕ-индуцированного дефицита N0 приводило к резкому снижению экспрессии е>Ю8 и содержания стабильных метаболитов оксида азота в 3,5 и 1,9 раза соответственно.

Результаты гистологических исследований обнаружили, что моделирование Ь-МАМЕ-индуцированного дефицита N0 на 8-е сутки приводит к яркой гипертрофии кардиомиоцитов, утолщению мышечного слоя сосудистой стенки и спазму артериол, наиболее выраженному в почечных артериях, а также «вздыбливанию» эндотелиоцитов.

Также следует отметить, что предложенный методический комплекс функциональных, биохимических и морфологических изменений, связанных с развитием дефицита N0 вследствие блокады МЗ-синтетазы, позволяет в достаточной степени объективно оценивать эндотелиотропное действие фармакологических агентов.

С помощью изложенных методологических подходов были проведены сравнительные исследования препаратов этоксидол и резвератрол.

В коррекции эндотелиальной дисфункции перспективными считаются препараты, обладающие антиоксидантной активностью, так как главным механизмом, лежащим в основе эндотелиальной дисфункции, являются снижение продукции и биодоступности N0 при одновременном повышении уровня супероксид-аниона вследствие увеличения окислительной активности НАДФ.

Экспериментальные работы по моделированию артериальной гипертензии у животных показали, что увеличение активных форм кислорода приводит к эндотелиальной дисфункции, которая подтверждается улучшением эндотелийзависимой релаксации при применении антиоксидантов. Развитие эндотелиальной дисфункции при избыточном образовании активных форм кислорода подтверждено на экспериментальных моделях сахарного диабета 2-го типа и хронической почечной недостаточности у животных.

В этой связи стратегия на понижение уровня и прогрессирования эндотелиальной дисфункции, вызванной снижением продукции и биодоступности оксида азота, заключается в использовании средств метаболической терапии и антиоксидантов с целью сохранения N0-индуцированных сигнальных путей в сосудах.

Как, показали дальнейшие исследования, изученные препараты проявляли эндотелиопротективное действие на модели Ь^АМЕ-индуцированного дефицита N0. Наиболее выраженными эффектом обладали этоксидол в дозе 25 мг/кг и резвератрол в дозе 2 мг/кг, что выражалось в преобладании эндотелийзависимого расслабления сосудов и снижении коэффициента эндотелиальной дисфункции КЭД до уровня интактных животных, а также в увеличении экспрессии е>Ю8 и предотвращении снижения содержания стабильных метаболитов оксида азота. Результаты нагрузочных проб выявили предотвращение повышения адренореактивности на фоне повышения реакции на реоксигенацию. Морфологические исследования кардиомиоцитов обнаружили предотвращение под влиянием резвератрола 2 мг/кг и этоксидола 25 мг/кг увеличения поперечного диаметра кардиомиоцитов у животных с Ь-МАМЕ-индуцированной патологией. Аскорбиновая кислота как препарат сравнения также проявляла эндотелио- и кардиопротективное действие, но в значительно меньшей степени.

Для поддержания гомеостаза кости чрезвычайно важны развитие функционально полноценного микроциркуляторного русла и общее состояние регионарной микроциркуляции в костной ткани. Ухудшение кровоснабжения костной ткани может приводить к развитию таких патологий опорно-двигательного аппарата как остеонекроз, остеомиелит или остеопороз [39, 165].

Эндотелий в зрелой сосудистой сети играет центральную регуляторную роль, обеспечивая связь с остальными слоями стенки сосуда и адекватно отвечая на их потребности выделением медиаторов. Таким образом, по нашему мнению, эндотелий сосудов костной ткани, являясь неотъемлемой частью кости, во многом определяет состояние регионарной микроциркуляции, а также тем самым отвечает за поддержание гомеостаза в кости [154].

Изложенное подтверждается работами ряда авторов, утверждающих, например, что VEGF (ключевой регулятор каскада событий, приводящих к, формированию и развитию сосудистой системы) играет значительную роль в процессах ремоделирования и репарации повреждений костной ткани [127, 147, 164, 168]. Так, было продемонстрировано, что ингибирование VEGF приводит к увеличению ширины феморальной и тибиальной ростковых зон [234], снижению интенсивности ангиогенеза в ростковых зонах, потере кровеносных сосудов в метафизарной зоне, а также уменьшению образования трабекулярной структуры кости [110, 228] и интенсификации резорбции губчатой костной ткани [119]. При переломах бедренных костей у мышей ингибирование VEGF приводит к уменьшению прорастания кровеносных сосудов, ухудшению минерализации костной мозоли и нарушению перестройки костных трабекул [207].

На основании изложенного нами была сформулирована гипотеза, согласно которой качество процессов ремоделирования костной ткани находится в прямой зависимости от качества функционирования эндотелия сосудов.

Эндотелиальная дисфункция может быть определена как дисбаланс противоположно действующих начал - релаксирующих и констрикторных, прокоагулянтных и антикоагулянтных, факторов роста и их ингибиторов — может быть причиной ухудшения кровоснабжения костной ткани, и, следовательно, нарушения процессов костного ремоделирования и репарации повреждений кости [154].

С целью проверки соответствия предложенной гипотезы действительности оценивали степень развития остеопороза у крыс через восемь недель после билатеральной овариэктомии, а также измеряли уровень микроциркуляции в проксимальном метафизе бедренной кости. В предыдущих исследованиях, проведенных в лаборатории доклинических исследований НИИ Экологической медицины КГМУ, было доказано, что через 6 недель после билатеральной овариэктомии у самок крыс линии Вистар развивается и в дальнейшем не прогрессирует гипоэстроген-индуцированная дисфункция эндотелия сосудов. По данным литературы, через восемь недель после билатеральной овариэктомии у половозрелых самок крыс развивается генерализованный остеопороз. Также была доказано, что через восемь недель после проведения операции билатеральной овариэктомии у самок крыс линии Вистар развивается дисфункция эндотелия сосудов микроциркуляторного русла костной ткани проксимального метафиза бедренной кости.

Для определения показателей микроциркуляции в костной ткани бедра у крыс использовали полиграф MP 100 производства компании Biopac systems с модулем лазерной допплеровской флоуметрии (ЛДФ) LDF100C и инвазивным игольчатым датчиком TSD144. Развитие остеопороза оценивали посредством проведения гистоморфометрического исследования срезов бедренных костей путем измерения ширины костных трабекул.

В ходе эксперимента выявлено, что через восемь недель после проведения билатеральной овариэктомии у самок белых крыс линии Вистар развивается значительное ухудшение регионарного кровотока в костной ткани, приводящее к дисбалансу процессов костного ремоделирования и, в конечном счете, возникновению и развитию генерализованного остеопороза, сопровождающегося истончением костных балок и возникновением в них микропереломов. Подтверждением данному положению служит наличие прямой тесной зависимости между уровнем микроциркуляции в костной ткани проксимального метафиза бедренной кости и шириной костных трабекул в данной локализации у крыс.

В предыдущем исследовании было доказано, что этоксидол и резвератрол обладают выраженными эндотелиопротективными свойствами.

При исследовании остеопротективного действия препаратов выявлено, что этоксидол в дозе 12,5 мг/кг через восемь недель после билатеральной овариэктомии у крыс не обладал остеопротективным действием. Остеопротективным действием обладал резвератрол в дозе 2 мг/кг и кальций-ДЗ Никомед в дозе 85,7 мг/кг. Резвератрол предотвращал снижение уровня регионарной микроциркуляции в костной ткани. Это позволило поддержать на адекватном уровне процессы костного ремоделирования при развивающемся генерализованном остеопорозе, свидетельством чего явилось замедление истончения костных трабекул в губчатой костной ткани и предотвращение возникновения микропереломов.

Из этого следует, что спектр действия препаратов с доказанной эндотелиопротективной активностью может быть расширен за счет добавления остеопротективного элемента, что, однако, требует проведения дополнительных исследований.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Стабровская, Надежда Владимирована, 2011 год

1. Абидова, K.P. Значение эндотелина 1 в регуляции функций сердечнососудистой системы / K.P. Абидова // Врачеб. дело. 1999. - № 7-8. — С. 22-27.

2. Автандилов, Г.Г. Основы патологоанатомической практики / Г.Г. Автандилов. -М.: РМАПО, 1998. 505 с.

3. Антиоксиданты — цитопротекторы в кардиологии / А.П. Голиков, В.Ю. Полумисков, В.П. Михин и др. // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. 2004. - № 6. - Ч. 2. - С. 66-74.

4. Бажин, М.Н. Уральская кардиологическая концепция: Новое в изучении гипертонической болезни: дайджест / М.Н. Бажин. — В. Пышма: МО В. Пышма, 2000.-51 с.

5. Беленков, Ю.Н. Ингибиторы ангиотензинпревращающего фермента в лечении сердечно-сосудистых заболеваний (Квинаприл и эндотелиальная дисфункция) / Ю.Н. Беленков, В.Ю. Мареев, Ф.Т. Агеев., М.: ООО «Инсайт полиграфик», 2002. - 86 с.

6. Белоусов, Ю.Б. Эндотелиальная дисфункция как причина атеросклеротического поражения артерий при артериальной гипертензии: методы коррекции / Ю.Б. Белоусов, Ж.Н. Намсараев // Фарматека. 2000. - № 6. - С. 62-72.

7. Белых, O.A., Кочеткова Е.А., Гельцер Б.И. Состояние кальций-фосфорного обмена у больных сахарным диабетом 1 типа / O.A. Белых, Е.А. Кочеткова, Б.И. Гельцер // Остеопороз и остеопатии. 2005 - № 1. -С. 12-15.

8. Беневоленская, Л.И. Миакальцик (кальцитонин лосося) для интраназального введения в лечении и профилактике остеопороза // Л.И. Беневоленская // Рос. ревматол. 1999. - № 2. - С. 6-15.

9. Блокатор ATl-ангиотензиновых рецепторов лозартан. Ч. 1. Основы клинической фармакологии / Б.А. Сидоренко, Д.В. Преображенский, Т.М. Стеценко и др. // Кардиология. 2003. - Т. 43, № 1. - С. 90-98.

10. Блокатор ATl-ангиотензиновых рецепторов лозартан. Ч. 2. Опыт использования для лечения гипертонической болезни и диабетической нефропатии / Б.А. Сидоренко, Д.В. Преображенский, Т.М. Стеценко и др. // Кардиология. 2003. - Т. 43, № 2. - С. 88-95.

11. Брошусь, В.В. Оксид азота как регулятор защитных и гомеостатических реакций организма / В.В. Брошусь // Укр. ревматол. журн. 2003. - № 4. -С. 3-11.

12. Бувальцев, В.И. Дисфункция эндотелия как новая концепция профилактики и лечения сердечно-сосудистых заболеваний / В.И. Бувальцев // Междунар. мед. журн. 2001. - № 3. - С. 202-208.

13. Вазопротекция при гипертонической болезни: влияние рамиприла на функциональное состояние эндотелия плечевой артерии / H.H. Соболева, Т.В. Балахонова, А.Н. Рогоза и др. // Кардиология. 1998. - Т. 38, № 3. — С. 44-47.

14. Гавриков, H.A. Гипертония: профилактика, диагностика и лечение / H.A. Гавриков. — Ростов н/Д: Феникс, 2001. 256 с.

15. Галаган, М.Е. Гипотензивное действие оксида азота, продуцируемого из экзо- и эндогенных источников / М.Е. Галаган, A.B. Широколова, А.Ф. Ванин // Вопр. мед. химии. 1991. - Т. 37, № 1. - С. 67-70.

16. Гланц, С. Медико-биологическая статистика: пер. с англ. — М.: Практика, 1998.-459 с.

17. Гогин, Е.Е. Курение, эндотелий и гипертоническая болезнь / Е.Е. Гогин // Клинич. медицина. 1998. - Т. 70, № 11. - С. 10-13.

18. Гогин, Е.Е. Природа артериальной гипертензии. Роль и место ингибиторов АПФ среди прочих антигипертензивных средств / Е.Е. Гогин // Фарматека. 2002. - № 2/3. - С. 14-23.

19. Гомазков, O.A. Эндотелии в кардиологии: молекулярные, физиологические и патологические аспекты / O.A. Гомазков // Кардиология. 2001. - Т. 41, № 2. - С. 50-58.

20. Горская, Ю.Ф. Возрастные изменения в популяции индуцибельных остеогенных клеток-предшественнников / Ю.Ф. Горская, Е.Ю. Шуклина, В.Г. Нестеренко // Бюл. эксперим. биологии. 2002. - № 2. - С. 180-182.

21. Грибкова, И.В. NO активирует Са2+-активируемый К+ ток гладкомышечных клеток хвостовой артерии крысы через GMP-зависимый механизм / И.В. Грибкова, Р. Шуберт, В.П. Серебряков // Кардиология. 2002. - № 8. - С. 34-39.

22. Дворецкий, Д.П. Механогенная регуляция тонуса и реактивности кровеносных сосудов / Д.П. Дворецкий // Рос. физиолог, журн. им. И.М. Сеченова. 1999. - Т. 85, № 9-10. - С. 1267-1277.

23. Дедов, И.И. Остеопороз: патогенез, диагностика, принципы профилактики и лечения: метод, пособие для врачей / И.И. Дедов, Л.Я. Рожинская, Е.И. Марова. М., 2002. - 60 с.

24. Динамика показателей эндотелийзависимой вазодилатации и гипотензивная эффективность эналаприла у пациентов с артериальной гипертонией / Р.Ф. Мордовии, Т.М. Рипп, A.A. Соколов и др. // Кардиология. 2001. - Т. 41, № 6. - С. 31-33.

25. Дисфункция эндотелия у больных гипертонической болезнью / А.И. Мартынов, Н.Г. Аветян, Е.В. Акатова и др. // Кардиология. 2005. - Т. 45, № 10.-С. 101-104.

26. Затейщикова, A.A. Эндотелиальная регуляция сосудистого тонуса: методы исследования и клиническое значение / A.A. Затейщикова, Д.А. Затейщиков // Кардиология. 1998. - Т. 38, № 9. — С. 68-80.

27. Зодионченко, B.C. Дисфункция эндотелия и артериальная гипертония: терапевтические возможности / B.C. Зодионченко, Т.В. Адашева, А.П. Сандомирская // Рус. мед. журн. 2002. - № 1.-С. 11-15.

28. Зотова, И.В. Синтез оксида азота и развитие атеросклероза / И.В. Зотова, Д.А. Затейщиков, Б.А. Сидоренко // Кардиология. 2000. - № 4. - С. 5867.

29. Изучение антигипоксической активности новых соединений производных винилимидазола / E.H. Стратиенко, Н.П. Катунина, Н.Ф. Петухова, C.B. Ромащенко // Кубанский научный медицинский вестник. -2009.-№8.-С. 79-80.

30. Каземирский, A.B. Особенности асептического некроза мыщелков бедренной и болынеберцовой костей (обзор литературы) / A.B. Каземирский, Н.В. Корнилов, К.А. Новоселов // Вестн. травматологии и ортопедии им. H.H. Приорова. 2003. - № 1. - С. 76-80.

31. Капелько, В.И. Активные формы кислорода, антиоксиданты и профилактика заболеваний сердца / В.И. Капелько // Русс. мед. Журнал.- 2003. № 21. — Т. 11. — С. 1185-1188.

32. Кательницкая, Л.И. Влияние эналаприла на функцию эндотелия у больных артериальной гипертонией в разных возрастных группах / Л.И. Кательницкая, Л.А. Хашиева, С.А. Плескачев // Рос. кардиолог, журн. -2005. -№ 6. -С. 71-76.

33. Клинико-функциональные особенности артериальной гипертонии у больных хроническими обструктивными болезнями легких / B.C. Зодионченко, Т.В. Адашева, Е.В. Шилова и др. // Рус. мед. журн. 2003.- № 9. С. 535-538.

34. Комплексная оценка вазомоторной функции сосудистого эндотелия у больных с артериальной гипертонией / Б.И. Гельцер, C.B. Савченко, В.Н. Котельников, И.В. Плотникова. // Кардиология. — 2004. — Т. 44, № 4. — С. 24-28.

35. Комплексная оценка эффективности лозартана (козаара) у больных мягкой и умеренной гипертонией / Я.И. Коц, П.Ю. Галин, Л.Г. Вдовенко и др. // Клинич. фармакология и терапия. — 2001. — № 4. — С. 73-75.

36. Лаврищева, Г.И. Морфологические и клинические аспекты репаративной регенерации опорных органов и тканей / Г.И. Лаврищева, Г.А. Оноприенко. -М.: Медицина, 1996. 208 с.

37. Лечение больных артериальной гипертонией антагонистом рецепторов ангиотензина II лозартаном / О.М. Драпкина, A.B. Клименков, Е.Л. Буеверова, В.Т. Ивашкин // Кардиоваскуляр. терапия и профилактика. -2002. -№ 4. -С. 30-31.

38. Личман, А.Н. Дисфункция эндотелия при сочетании ишемической болезни сердца и гипертонической болезни / А.Н. Личман, А.И. Силаков, В.М. Березов//Врачеб. дело. -2001.-№ 1.-С. 137-138.

39. Майчук, Е.Ю. Современные представления об использовании ингибиторов ангиотензинпревращающего фермента для леченияартериальной гипертензии / Е.Ю. Майчук, И.В. Воеводина // Рус. мед. журн.: Кардиология. 2005. - Т. 13, № 19. - С. 1287-1291.

40. Маколкин, В.И. Лечение гипертонической болезни / В.И. Маколкин // Врач.-2005.-№2.-С. 12-15.

41. Марков, Х.М. Молекулярные механизмы дисфункции сосудистого эндотелия / Х.М. Марков // Кардиология. 2005. - Т. 45, № 12. - С. 6280.

42. Марков, Х.М. Оксидантный стресс и дисфункция эндотелия / Х.М. Марков // Патол. физиология и эксперим. терапия. 2005. — № 4. — С. 59.

43. Медведев, Ю.В. Гипоксия и свободные радикалы в развитии патологических состояний организма / Ю.В. Медведев // ООО «Терра Календер и Промоушн». М.: 2000. - с. 74-75.

44. Метельская, В.А. Возможности лабораторной оценки NO-продуцирующей функции эндотелия / В.А. Метельская // Клинич. и лаб. диагностика. 2004. - № 9. - С. 86. i

45. Микроциркуляция в кардиологии / под ред. В.И. Маколкина. М.: Визарт, 2004.-136 с.

46. Минушкина, Л.О. Генетические аспекты регуляции эндотелиальной функции при гипертонии / Л.О. Минушкина, Д.А. Затейщиков, Б.А. Сидоренко // Кардиология. — 2000. № 3. - С. 68-76.

47. Моисеев, C.B. Артериальная гипертензия и медицина доказательная / C.B. Моисеев, Ж.Д. Кобалава // Врач. 2002. - № 1. - С. 4-5.

48. Моругова, Т.В. Влияние лекарственных средств на свободнорадикальное окисление / Т.В. Моругова, Д.Н. Лазарева // Экспер. и клин, фармакол. — 2000.-Т. 63.-№ 1.-С. 71-75.

49. Насонов, E.JI. Вторичный остеопороз: патогенез и клиническое значение при воспалительных заболеваниях суставов / E.JL Насонов // Остеопороз и остеопатии. 1998. - № 3. - С. 18-20.

50. Насонов, Е.Л. Дефицит кальция и витамина D: новые факты и гипотезы / Е.Л. Насонов // Остеопороз и остеопатии. 1998. - № 3. - С. 42-47.

51. Насонов, Е.Л. Профилактика и лечение остеопороза: современное состояние проблемы / Е.Л. Насонов // Рус. мед. журн. — 1998. — № 6. — С. 1176-1180.

52. Небиеридзе, Д.В. Клиническое значение дисфункции эндотелия при артериальной гипертонии / Д.В. Небиеридзе // Consilium medicum: Системные гипертензии (прил.). 2005. - Т. 7, № 1. - С. 31-38.

53. Небиеридзе, Д.В. Микроциркуляторные расстройства при артериальной гипертонии и перспективы их коррекции / Д.В. Небиеридзе, Е.В. Шилова, С.Н. Толпыгина // Кардиоваскуляр. терапия и профилактика. — 2004.-№4.-С. 28-32.

54. Подзолков, В.И. Антагонисты ATI рецепторов и состояние микроциркуляции у больных гипертонической болезнью: еще одна мишень для терапии? / В.И. Подзолков, В.А. Булатов, Е.А. Сон // Артериальная гипертензия. 2005. - Т. 11, № 3. - С. 207-210.

55. Подзолков, В.И. Эффективность лозартана у больных артериальной гипертензией с высоким риском сердечно-сосудистых осложнений (поматериалам исследований LIFE и RENAL) / В.И. Подзолков, В.А. Булатов // Фарматека. 2004. - № 6. - С. 79-85.

56. Поливода, С.Н. Эндотелиопротективные эффекты эналаприла у больных гипертонической болезнью / С.Н. Поливода, A.A. Черепок, Ю.Н. Писанко // Врачеб. дело. 2001. - № 2. - С. 136-137.

57. Полонский, В.М. Исследование LIFE: новые перспективы применения лозартана / В.М. Полонский // Фарматека 2002. — № 7-8. - С. 3-9.

58. Применение кальция и витамина D для профилактики остеопороза у женщин в постменопаузе / Л.Я. Рожинская, Л.К. Дзеранова, Е.И. Марова и др. // Остеопороз и остеопатии. 2001. - № 1. - С. 29-33.

59. Роль коррекции метаболизма оксида азота в организме при профилактике гипертонического ремоделирования сердечно-сосудистой системы / В.И. Бувальцев, С.Ю. Машина, Д.А. Подкидышев и др. // Рос. кардиолог, журн. 2002. - № 5. - С. 74-81.

60. Роль оксида азота в регуляции растяжимости артериальных сосудов у нормо- и гипертензивных крыс / Д.Л. Сонин, A.B. Сыренский, М.М. Галагудза и др. // Артериальная гипертензия. — 2002. — № 6. — С. 57-64.

61. Роль оксида азота и свободных радикалов в патогенезе артериальной гипертензии / Е.Б. Манухина, Н.П. Лямина, П.В. Долотовская и др. // Кардиология. 2002. - Т. 42, № 11. - С. 73-84.

62. Руководство по остеопорозу / Под ред. Л.И. Беневоленской. М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2003. - 524 с.

63. Саприн, А.Н. Окислительный стресс и его роль в механизмах апоптоза и развития патологических процессов / А.Н. Саприн, Е.В. Калинина // Успехи биологии и химии. 1999. - Т. 39. - С. 289-326.

64. Связь между химическим строением и мишенью действия как основа классификации антиоксидантов прямого действия / Е.Г. Зайцев, О.В. Островский, В.И. Закревский и др. // Эксперим. и клинич. фарм. — 2003. № 4. - Т. 66.-С. 66-70.

65. Скрипникова, И.А. Остеопороз и ревматические заболевания / И.А. Скрипникова, Е.Л. Насонов // Мед. новости. 1997. - № 2 (31). - С. 9-10.

66. Смирнов, Л.Д. Современные средства и методы антиоксидантной фармакотерапии. 1. Гетероароматические антиоксиданты — универсальные средства антиоксидантной фармакотерапии» / Л.Д. Смирнов // Энциклопедия инженера-химика. 2007. - № 5. - С. 16-24.

67. Современная терапия артериальной гипертензии (Рекомендации Европейского общества по гипертензии и Европейского общества кардиологов, 2003 г.) / Д.В. Преображенский, Б.А. Сидоренко, А.В. Маренич и др. // Кардиология. 2003. - Т. 43, № 12. - С. 91-103.

68. Фармакологическая регуляция тонуса сосудов / под ред. П.А. Галенко-Ярошевского. М.: Издательство РАМН, 1999. - 608 с.

69. Функциональное состояние эндотелия у больных артериальной гипертонией и ишемической болезнью сердца / Д.А. Затейщиков, Л. О. Минушкина, О.Н. Кудряшова и др. // Кардиология. — 2000. — Т. 40, № 6. — С. 14-17.

70. Шварц, Г.Я. Витамин Б, Б-гормон и альфакальцидол: молекулярно-биологические и фармакологические аспекты действия / Г.Я. Шварц // Остеопороз и остеопатии. 1998. - № 3. - С. 2-6.

71. Шестакова, М.В. Дисфункция эндотелия причина или следствие метаболического синдрома? / М.В. Шестакова // Рус. мед. журн. - 2001. -Т. 9, № 2. - С. 88-90.

72. Шляхто, Е.В. Клеточные аспекты ремоделирования сосудов при артериальной гипертензии / Е.В. Шляхто, О.М. Моисеева // Артериальная гипертензия. — 2002. Т. 8, № 2. - С. 45-49.

73. Эндотелиальная дисфункция и сердечная недостаточность: патогенетическая связь и возможности терапии ингибиторами ангиотензинпревращающего фермента / Ф.Т. Агеев, А.Т. Овчинников,

74. B.Ю. Мареев, Ю.Н. Беленков // Consilium medicum. — 2001. Т. 3, № 2.1. C. 61-65.

75. Эффективность цитопротектора мексикора в неотложной кардиологии / А.П. Голиков, В.П. Михин, В.Ю. Полумисков и др. // Тер. архив. — 2004.-№4. -С. 60-65.

76. Эффекты центрального эндотелина-1 у нормотензивных и спонтанногипертензивных крыс / Т.И. Пономарева, О.Н. Хохлова, Е.А. Туховская, А.Н. Мурашев // Бюл. эксперим. биологии и медицины. -2003.-№3.-С. 275-278.

77. Abnormal bone growth and selective translational regulation in basic fibroblast growth factor (FGF-2) transgenic mice / J.D. Coffin, R.Z. Florkiewicz, J. Neumann et al. // Mol. Biol. Cell. 1995. - Vol. 6. - P. 18611873.

78. Acceleration of fracture healing in nonhuman primates by fibroblast growth factor-2 / H. Kawaguchi, K. Nakamura, Y. Tabata et al. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2001. - Vol. 86. - P. 875-880.

79. Adhesion of hematopoietic progenitor cells to human bone marrow or umbilical vein derived endothelial cell lines: a comparison / P.M. Rood, W.R. Gerritsen, D. Kramer et al. // Exp. Hematol. 1999. - Vol. 27. - P. 13061314.

80. An in vivo model for study of the angiogenic effects of basic fibroblast growth factor / A. Hayek, F.L. Culler, G.M. Beattie et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1987. - Vol. 147. - P. 876-880.

81. Association between serum cholesterol and bone mineral density / J. Makovey, J.S. Chen, C. Hayward et al. // Bone. 2009. - Vol. 44. - P. 208213.

82. Barton, M. The therapeutic potential of endothelin receptor antagonists in cardiovascular disease / M. Barton, W. Kiowski // Curr. Hypertens. Rep.2001.-Vol. 3.-P. 322-330.

83. Basic fibroblast growth factor induces angiogenesis in vitro / R. Montesano, J.D. Vassalli, A. Baird et al. // Proc. Natl. Acad. Sei. U. S. A. 1986. - Vol. 83.-P. 7297-7301.

84. BMP signaling components are expressed in human fracture callus / P. Kloen, P.M. Di, O. Borens et al. //Bone. -2003. Vol. 33. - P. 362-371.

85. Bone endothelial cells as estrogen targets / M.L. Brandi, C. Crescioli, A. Tanini et al. // Calcif. Tissue Int. 1993. - Vol. 53. - P. 312-317.

86. Bone loss and progression of abdominal aortic calcification over a 25 year period: the Framingham Heart Study / D.P. Kiel, L.I. Kauppila, L.A. Cupples et al. // Calcif. Tissue Int. 2001. - Vol. 68(5). - P. 271-276.

87. Bone morphogenetic proteins stimulate angiogenesis through osteoblast-derived vascular endothelial growth factor A / M.M. Deckers, R.L. van Bezooijen, G. van der Horst et al. // Endocrinology. 2002. - Vol. 143. - P. 1545-1553.

88. Bone morphogenic protein 4 produced in endothelial cells by oscillatory shear stress stimulates an inflammatory response / G.P. Sorescu, M. Sykes, D. Weiss et al. // J. Biol. Chem. 2003. - Vol. 278. - P. 31128-31135.

89. Bone regeneration via a mineral substrate and induced angiogenesis / W.L. Murphy, C.A. Simmons, D. Kaigler, DJ. Mooney // J. Dent. Res. 2004. -Vol. 83.-P. 204-210.

90. Brandi, M.L. Vascular biology and the skeleton / M.L. Brandi, P. Collin-Osdoby // J. Bone Miner. Res. 2006. - Vol. 21. - P. 183-192.

91. Burkus, J.K. Development of the cartilage canals and the secondary center of ossification in the distal chondroepiphysis of the prenatal human femur / J.K. Burkus, T.M. Ganey, J.A. Ogden // Yale J. Biol. Med. 1993. - Vol. 66. - P. 193-202.

92. Carano, R.A. Angiogenesis and bone repair / R.A. Carano, E.H. Filvaroff// Drug Discov. Today. 2003. - Vol. 8. - P. 980-989.

93. Carmeliet, P. Angiogenesis in health and disease / P. Carmeliet // Nat. Med. -2003.-Vol. 9.-P. 653-660.

94. Carmeliet, P. Molecular basis of angiogenesis. Role of VEGF and VE-cadherin / P. Carmeliet, D. Collen // Ann. N. Y. Acad. Sci. 2000. - Vol. 902. -P. 249-262.

95. Changes in trabecular bone, hematopoiesis and bone marrow vessels in aplastic anemia, primary osteoporosis, and old age: a comparative histomorphometric study / R. Burkhardt, G. Kettner, W. Bohm et al. // Bone.- 1987.-Vol. 8.-P. 157-164.

96. Childs, S.G. Osteonecrosis: death of bone cells / S.G. Childs // Orthop. Nurs.- 2005. Vol. 24. - P. 295-301.

97. Clemens, T.L. Principles of bone biology / T.L. Clemens. San Diego: Academic Press, 1996. - 605 p.

98. Cloned endothelial cells from fetal bovine bone / E.A. Streeten, R. Ornberg, F. Curcio et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 1989. - Vol. 86. - P. 916920.

99. Collin-Osdoby, P. Role of vascular endothelial cells in bone biology / P. Collin-Osdoby // J. Cell. Biochem. 1994. - Vol. 55. - P. 304-309.

100. Conditional inactivation of VEGF-A in areas of collagen2al expression results in embryonic lethality in the heterozygous state / J.J. Haigh, H.P. Gerber, N. Ferrara, E.F. Wagner // Development. 2000. - Vol. 127. - P.1445-1453.

101. Correcting calcium nutritional deficiency prevents spine fracture in eldery women / R.R. Recker, S. Hinders, K.M. Davies et al. // J.Bone Miner.Res. -1996.-Vol. 11.-P. 1961-1966.

102. Coronary vasodilation and improvement in endothelial dysfunction with endothelin ETA receptor blockade / J.P.J. Halcox, K.R.A. Nour, G. Zalos, et al. // Circ. Res. 2001. - Vol. 89. - P. 969-976.

103. Coultas, L. Endothelial cells and VEGF in vascular development / L. Coultas, K. Chawengsaksophak, J. Rossant // Nature. 2005. - Vol. 438. - P. 937-945.

104. Decreased bone anabolic effect of basic fibroblast growth factor at fatty marrow sites in ovariectomized rats / S. Pun, R.L. Dearden, A.M. Ratkus et al. // Bone. 2001. - Vol. 28. - P. 220-226.

105. Differences in sulfation patterns of heparan sulfate derived from human bone marrow and umbilical vein endothelial cells / T. Netelenbos, A.M. Drager, B. van het Hof et al. // Exp. Hematol. 2001. - Vol. 29. - P. 884-893.

106. Different effects of antihypertensive drugs on endothelial dysfunction / P. Puddu, G.M. Puddu, E. Cravero, A. Muscari // Acta. Cardiol. 2004. - Vol. 59 (5).-P. 555-564.

107. Disruption of the fibroblast growth factor-2 gene results in decreased bone mass and bone formation / A. Montero, Y. Okada, M. Tomita et al. // J. Clin. Invest.-2000.-Vol. 105.-P. 1085-1093.

108. Effect of human endothelial cells on human bone marrow stromal cell phenotype: role of VEGF? / F. Villars, L. Bordenave, R. Bareille, J. Amedee // J. Cell. Biochem. 2000. - Vol. 79. - P. 672-685.

109. Effect of treatment on flow dependent vasodilation of the brachial artery in essential hypertension / M.L. Muiesan, M. Salvetti, C. Monteduro et al. // Hypertension. 1999. - Vol. 33. - P. 575-580.

110. Effect of vascular endothelial growth factor in fracture healing / T.W. Chu, Z.G. Wang, P.F. Zhu et al. // Zhongguo Xiu Fu Chong Jian Wai KeZaZhi. -2002.-Vol. 16.-P. 75-78.

111. Effects of ACE inhibition on spontaneous and insulin-stimulated endothelin-1 secretion: in vitro and in vivo studies / G. Desideri, C. Ferri, C. Bellini et al. // Diabetes. 1997. - Vol. 46. - P. 81-86.

112. Effects of acidic and basic fibroblast growth factors on osteoblastic cells / S.B. Rodan, G. Wesolowski, K.A. Thomas et al. // Connect. Tissue Res. -1989. Vol. 20. - P. 283-288.

113. Effects of FGF-2 on metaphyseal fracture repair in rabbit tibiae / WJ. Chen, S. Jingushi, I. Aoyama et al. // J. Bone Miner. Metab. 2004. - Vol. 22. - P. 303-309.

114. Expression of vascular endothelial growth factors and their receptors during osteoblast differentiation / M.M. Deckers, M. Karperien, C. van der Bent et al. // Endocrinology. 2000. - Vol. 141. - P. 1667-1674.

115. Ferrara, N. The biology of VEGF and its receptors / N. Ferrara, H.P. Gerber, J. LeCouter // Nat. Med. 2003. - Vol. 9. - P. 669-676.

116. Ferrara, N. The role of vascular endothelial growth factor in angiogenesis / N. Ferrara, H.P. Gerber // Acta. Haematol. 2001. - Vol. 106. - P. 148-156.

117. Findlay, D.M. Mechanisms of bone loss in rheumatoid arthritis / D.M. Findlay, D.R. Haynes // Mod. Rheumatol. 2005. - Vol. 15. - P. 232-240.

118. Gerber, H.P. Angiogenesis and bone growth / H.P. Gerber, N. Ferrara // Trends. Cardiovasc. Med. 2000^- Vol. 10. - P. 223-228.

119. Globus, R.K. Regulation of bovine bone cell proliferation by fibroblast growth factor and transforming growth factor beta // R.K. Globus, P. Patterson-Buckendahl, D. Gospodarowicz // Endocrinology. — 1988. — Vol. 123.-P. 98-105.

120. Glowacki, J. Angiogenesis in fracture repair / J. Glowacki // Clin. Orthop. Relat. Res. 1998. - Vol. 355. - P. 82-89.

121. Growth factor regulation of fracture repair / G.L. Barnes, P J. Kostenuik, L.C. Gerstenfeld, T.A. Einhorn // J. Bone Miner. Res. 1999. - Vol. 14. - P. 18051815.

122. Hall, A.P. Review of the effects of anti-angiogenic compounds on the epiphyseal growth plate / A.P. Hall, F.R. Westwood, P.F. Wadsworth // Toxicol. Pathol. 2006. - Vol. 34. - P. 131-147.

123. Haller, A. Experimentorum de ossiemformatione / A. Haller. Milan: Francisci Grasset, 1763. - 400 p.

124. Hayashi, K. Three-dimensional organization of the cartilage canal-a scanning electron-microscopic study by vascular cast of the rabbit's femoral head / K. Hayashi // Nippon Seikeigeka Gakkai Zasshi. 1992. - Vol. 66. - P. 548-559.

125. Hornig, B. Bradykinin in human endothelial dysfunction / B. Hornig // Drugs. -1997.-Vol. 54.-P. 42-47.

126. Human bone marrow endothelial cells: a new identified source of B-type natriuretic peptide / L. Bordenave, A. Georges, R. Bareille et al. // Peptides. -2002. Vol. 23. - P. 935-940.

127. Hunter, J. Treatise on the blood, inflammation and gunshot wounds // J. Hunter. London: Eds. George Nicol., 1794. - 216 p.

128. Hunziker, E.B. Mechanism of longitudinal bone growth and its regulation by growth plate chondrocytes / E.B. Hunziker // Microsc. Res. Tech. 1994. — Vol. 28.-P. 505-519.

129. Hydroxy-methylglutarylconezyme A reductase inhibition promotes endothelial nitric oxide synthase activation through a decrease in caveolin abundance / O. Feron, C. Dessy, J.P. Desager et al. // Circulation. 2001. -Vol. 103.-P. 113-118.

130. Hypoxia and VEGF up-regulate BMP-2 mRNA and protein expression in microvascular endothelial cells: implications for fracture healing / P.J. Bouletreau, S.M. Warren, J.A. Spector et al. // Plast. Reconstr. Surg. 2002. -Vol. 109.-P. 2384-2397.

131. Imhof, B.A. Basic mechanism of leukocyte migration / B.A. Imhof, D. Dunon //Horm. Metab. Res. 1997. - Vol. 29. -P. 614-621.

132. Immunohistochemical study of vascular endothelial growth factor (VEGF) and bone morphogenetic protein-2,-4(BMP-2,-4) on lengthened rat femurs / K. Sojo, Y. Sawaki, H. Hattorf et al. // J. Craniomaxillofac. Surg. 2005. -Vol. 33.-P. 238-245.

133. Impaired angiogenesis and endochondral bone formation in mice lacking the vascular endothelial growth factor isoforms VEGF 164 and VEGF 188 / C. Maes, P. Carmeliet, K. Moermans et al. // Mech. Dev. 2002. - Vol. 111. - P. 61-73.

134. Improved endothelium-dependent vasodilation after blockade of endothelin receptors in patients with essential hypertension / C. Cardillo, U. Campia, C.M. Kilcoyne et al. // Circulation. 2002. - Vol. 105. - P. 452-456.

135. Increase of both angiogenesis and bone mass in response to exercise depends on VEGF / Z. Yao, M.H. Lafage-Proust, J. Plouet et al. // J. Bone. Miner. Res. -2004.-Vol. 19.-P. 1471-1480.

136. Induction of growth plate cartilage ossification by basic fibroblast growth factor / J. Baron, K.O. Klein, J.A. Yanovski et al. // Endocrinology. 1994. -Vol. 135.-P. 2790-2793.

137. Is human fracture hematoma inherently angiogenic? / J. Street, D. Winter, J.H. Wang et al. // Clin. Orthop. Relat. Res. 2000. - Vol. 378. - P. 224-237.

138. Jain, R.K. Molecular regulation of vessel maturation / R.K. Jain // Nat. Med. -2003.-Vol. 9.-P. 685-693.

139. Kanczler, J.M. Osteogenesis and angiogenesis: the potential for engineering bone / J.M. Kanczler, R.O.C. Oreffo // Eur. Cell. Mater. 2008. - Vol. 15. -P. 100-114.

140. Lazzarini, L. Long Bone Osteomyelitis / L. Lazzarini, F. De Lalla, J.T. Mader // Curr. Infect. Dis. Rep. 2002. - Vol. 4. - P. 439-445.

141. Local application of basic fibroblast growth factor minipellet induces the healing of segmental bony defects in rabbits / K. Inui, M. Maeda, A. Sano et al. // Calcif. Tissue Int. 1998. - Vol. 63. - P. 490-495.

142. Lusher, T.E. Biology of the endothelium / T.E. Lusher, M. Barton // Clin. Cardiol.-1997.-Vol. 10.-P. 3-10.

143. Luscher, T.F. Endothelial dysfunction as therapeutic target / T.F. Luscher // Eur. Heart. J. 2000. - Suppl. D. - P. 20-25.

144. Madeddu, P. Therapeutic angiogenesis and vasculogenesis for tissue regeneration / P. Madeddu // Exp. Physiol. 2005. - Vol. 90. - P. 315-326.

145. Maintenance of the hematopoietic stem cell pool by CXCL12-CXCR4 chemokine signaling in bone marrow stromal cell niches / T. Sugiyama, H. Kohara, M. Noda, T. Nagasawa // Immunity. 2006. - Vol. 25. - P. 977-988.

146. Mandracchia, V.J. Current concepts of bone healing / V.J. Mandracchia, S.C. Nelson, E.A. Barp // Clin. Podiatr. Med. Surg. 2001. - Vol. 18. - P. 55-77.

147. Marotti, G. Changes in the vascular network during the formation of Haversian systems / G. Marotti, A.Z. Zallone // Acta. Anat. (Basel). 1980. -Vol. 106.-P. 84-100.

148. Matrix metalloproteinase 9 and vascular endothelial growth factor are essential for osteoclast recruitment into developing long bones / M.T. Engsig, Q.J. Chen, T.H. Vu et al. // J. Cell. Biol. 2000. - Vol. 151. - P. 879-889.

149. Matrix metalloproteinase-9 triggers the angiogenic switch during carcinogenesis / G. Bergers, R. Brekken, G. McMahon et al. // Nat. Cell. Biol. 2000. - Vol. 2. - P. 737-744.

150. Mechanisms of action of demineralized bone matrix in the repair of cortical bone defects / C. Colnot, D.M. Romero, S. Huang, J.A. Helms // Clin. Orthop. Relat. Res. 2005. - Vol. 435. - P. 69-78.

151. Mechanisms of alveolar bone destruction in periodontitis / Z. Schwartz, J. Goultschin, D.D. Dean, B.D. Boyan // Periodontol. 2000. - Vol. 14. - P. 158-172.

152. Meury, T. Human endothelial cells inhibit BMSC differentiation into mature osteoblasts in vitro by interfering with osterix expression / T. Meury, S. Verrier, M. Alini // J. Cell. Biochem. 2006. - Vol. 98. - P. 992-1006.

153. Midy, V. Vasculotropin/vascular endothelial growth factor induces differentiation in cultured osteoblasts / V. Midy, J. Plouet // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1994. - Vol. 199. - P. 380-386.

154. MMP-9/gelatinase B is a key regulator of growth plate angiogenesis and apoptosis of hypertrophic chondrocytes / T.H. Vu, J.M. Shipley, G. Bergers et al. // Cell. 1998. - Vol. 93. - P. 411-422.

155. Mussolino, M.T. Bone mineral density and mortality in women and men: The NHANES I epidemiologic follow-up study / M.T. Mussolino, J.H. Madans, R.F. Gillum // Ann. Epidrmiol. 2003. - Vol. 13(10). - P. 692-697.

156. Napoli, C. Nitric oxide and atherosclerosis / C. Napoli, L.J. Ignarro // Nitric Oxide. 2001. - Vol. 5. - P. 88-97.

157. Nikolova, G. The vascular niche and its basement membrane / G. Nikolova, B. Strilic, E. Lammert // Trends. Cell. Biol. 2006. - Vol. 17. - P. 19-25.

158. Osteoblastic responses to TGF-beta during bone remodeling / A. Erlebacher, E.H. Filvaroff, J.Q. Ye, R. Derynck // Mol. Biol. Cell. 1998. - Vol. 9. - P. 1903-1918.

159. Parfitt, A.M. The mechanism of coupling: a role for the vasculature / A.M. Parfitt // Bone. 2000. - Vol. 26. - P. 319-323.

160. Petersen, W. Expression of VEGF 121 and VEGF 165 in hypertrophic chondrocytes of the human growth plate and epiphyseal cartilage / W. Petersen, M. Tsokos, T. Pufe // J. Anat. 2002. - Vol. 201. - P. 153-157.

161. Platelet-derived growth factor is angiogenic in vivo / W. Risau, H. Drexler, V. Mironov et al. // Growth Factors. 1992. - Vol. 7. - P. 261-266.

162. Pravastatin has cholesterol-lowering independent effects on the artery wall of atherosclerotic monkeys / J.K. Williams, G.K. Sukhova, D.M. Herrmgton et al. //J. Am. Coll. Cardiol. 1998. - Vol. 31. - P. 684-691.

163. Preclinical safety evaluation of rhuMAbVEGF, an antiangiogenic humanized monoclonal antibody / A.M. Ryan, D.B. Eppler, K.E. Hagler et al. // Toxicol. Pathol. 1999. - Vol. 27. - P. 78-86.

164. Prevention of first stroke. A review of guidelines and a multidisciplinary consensus statement from the National Stroke Assotiation / P.B. Gorelick, R.L. Sacco, D.B. Smith et al. // JAMA. 1999. - Vol. 31. - P. 1112-1120.

165. Progression of aortic calcification is associated with metacarpal bone loss during menopause: a population-based longitudinal study / A.E. Hak, H.A.P. Pols, A.M. van Hemert et al. // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 2000. -Vol. 20.-P. 1926-1931.

166. Radiographic measure of aorta calcification is a site-specific predictor of bone loss and fracture risk at the hip / Y.Z. Bagger, L.B. Tanko, P. Alexandersen et al. // J Intern Med. 2006. - Vol. 259 (6). - P. 598-605.

167. Relation of low bone mineral density and carotid atherosclerosis in postmenopausal women / T. Montalcini, V. Emanuele, R. Ceravolo et al. // Am. J Cardiol. 2004. - Vol. 94(Iss. 2, 15). - P. 266-269.

168. Relationship between osteoporosis and cardiovascular disease in postmenopausal women / L.B. Tanko, C. Christiansen, D.A. Cox et al. // J Bone Miner. Res. -2005. Vol. 20(11). - P. 1912-1920.

169. Resveratrol acts as a mixed agonist/antagonist for estrogen receptors alpha and beta / J.L. Bowers, V.V. Tyulmenkov, S.C. Jernigan, C.M. Klinge // Endocrinology. 2000. - Vol. 141. - P. 3657-3667.

170. Resveratrol acts as an estrogen receptor (ER) agonist in breast cancer cells stably tranfected with ERa / A.S. Levenson, B.D. Gehm, S.T. Pearce et al. // Int. J. Cancer. 2003. - Vol. 104. - P. 587-596.

171. Resveratrol Ameliorates myocardial damage by inducing vascular endothelial growth factor-angiogenesis and tyrosine kinase receptor Flk-1 / S. Fukuda, S. Kaga, L. Zhan et al. // Cell Biochem. Biophys. 2006. - Vol. 44. - P. 43-49.

172. Resveratrol increases vascular oxidative stress resistance / Z. Ungvari, Z. Orosz, A. Rivera et al. // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 2007. - Vol. 292.-P. 2417-2424.

173. Role of bone morphogenetic protein 2 in the crosstalk between endothelial progenitor cells and mesenchymal stem cells / M. Raida, A.C. Heymann, C. Gunther, D. Niederwieser // Int. J. Mol. Med. 2006. - Vol. 18. - P. 735-739.

174. Role of vascular factors in osteoporosis / K. Alagiakrishnan, A. Juby, D. Hanley et al. // J. Gerontol. A Biol. Sci. Med. Sci. 2003. - Vol. 58. - P. 362366.

175. Rosier, R.N. The potential role of transforming growth factor beta in fracture healing / R.N. Rosier, R.J. O'Keefe, D.G. Hicks // Clin. Orthop. Relat. Res. -1998. Vol. 355. - P. 294-300.

176. Rossant, J. Signaling pathways in vascular development / J. Rossant, L. Howard // Annu. Rev. Cell. Dev. Biol. 2002. - Vol. 18. - P. 541-573.

177. Skeletal defects in VEGF(120/120) mice reveal multiple roles for VEGF in skeletogenesis / E. Zelzer, W. McLean, Y.S. Ng et al. // Development. 2002. -Vol. 129.-P. 1893-1904.

178. Stimulation of bone formation by intraosseous application of recombinant basic fibroblast growth factor in normal and ovariectomized rabbits / K. Nakamura, H. Kawaguchi, I. Aoyama et al. // J. Orthop. Res. 1997. - Vol. 15.-P. 307-313.

179. Stimulation of endosteal bone formation by systemic injections of recombinant basic fibroblast growth factor in rats / T. Nakamura, K. Hanada, M. Tamura et al. // Endocrinology. 1995. - Vol. 136. - P. 1276-1284.

180. Storkebaum, E. VEGF: a critical player in neurodegeneration / E. Storkebaum, P. Carmeliet // J. Clin. Invest. 2004. - Vol. 113. - P. 14-18.

181. Streeten, E.A. Biology of bone endothelial cells / E.A. Streeten, M.L. Brandi // Bone Miner. 1990. - Vol. 10. - P. 85-94.

182. Synergistic enhancement of bone formation and healing by stem cell-expressed VEGF and bone morphogenetic protein-4 / H. Peng, V. Wright, A. Usas et al. // J. Clin. Invest. 2002. - Vol. 110. - P. 751 -759.

183. The biology of vascular endothelial growth factors / T. Tammela, B. Enholm, K. Alitalo, K. Paavonen // Cardiovasc. Res. 2005. - Vol. 65. - P. 550-563.

184. The HMG-CoA reductase inhibitor simvastatin activates the protein kinase Akt and promotes angiogenesis in normocholesterolemic animals / Y.

185. Kureishi, Z. Luo, I. Shiojima et al. // Nat. Med. 2000. - Vol. 6. - P. 10041010.

186. The hypoxia-inducible factor alpha pathway couples angiogenesis to osteogenesis during skeletal development / Y. Wang, C. Wan, L. Deng et al. // J. Clin. Invest. 2007. - Vol. 117.-P. 1616-1626.

187. The murine mutation osteopetrosis is in the coding region of the macrophage colony stimulating factor gene / H. Yoshida, S. Hayashi, T. Kunisada et al. // Nature. 1990. - Vol. 345. - P. 442-444.

188. The relationship of left ventricular mass to endothelium-dependent vasodilation of the brachial artery in patients with hypertension / T. Motoyama, H. Kawano, N. Hirai et al. // Cardiology. 2001. - Vol. 96. - P. 7-15.

189. The relevance of tissue angiotensin-converting enzyme: manifestations in mechanistic and endpoint data / V. Dzau, K. Bernstein, D. Celermaier et al. // Am. J. Cardiol.-2001.-Vol. 88.-P. 1-20.

190. The significance of angiogenesis in guided bone regeneration. A case report of a rabbit experiment / J. Schmid, B. Wallkamm, C.H. Hammerle et al. // Clin. Oral. Implants Res. 1997. - Vol. 8. - P. 244-248.

191. The splice variants VEGF 121 and VEGF 189 of the angiogenic peptide vascular endothelial growth factor are expressed in osteoarthritic cartilage /.T. Pufe, W. Petersen, B. Tillmann, R. Mentlein // Arthritis Rheum. 2001. -Vol. 44.-P. 1082-1088.

192. The vascular supply of the chondro-epiphyses of the elbow joint in young swine / D.M. Visco, S. Van, M.A. Hill, S.A. Kincaid // J. Anat. - 1989. - Vol.163.-P. 215-229.

193. Tiefenbacher, C.P. Nitric oxide-mediated endothelial dysfunction is thereneed to treat? / C.P. Tiefenbacher, J. Kreuzer // Curr. Vase. Pharmacol. — 2003.-Vol. l.-P. 123-133.

194. Transient changes in oxygen tension inhibit osteogenic differentiation and Runx2 expression in osteoblasts / A. Salim, R.P. Nacamuli, E.F. Morgan et al. // J. Biol. Chem. 2004. - Vol. 279. - P. 40007-40016.

195. Trueta, J. The role of the vessels in osteogenesis / J. Trueta // Journal of Bone and Joint Surgery. 1963. - Vol. 45. - P. 402-418.

196. Usefulness of bone mineral density to predict significant coronary artery disease / P.A. Marcovitz, H.H. Tran, B.A. Franklin et al. // Am. J Cardiol. -2005. Vol. 96(Iss. 8,15). - P. 1059-1063.

197. Vascular calcification and its relation on bone calcification: possible underlying mechanisms / N. Mody, Y. Tintut, K. Radcliff et al. // J Nucl. Cardiol.-2003.-Vol. 10(2).-P. 177-183.

198. Vascular endothelial growth factor can substitute for macrophage colony-stimulating factor in the support of osteoclastic bone resorption / S. Niida, M. Kaku, H. Amano et al. // J. Exp. Med. 1999. - Vol. 190. - P. 293-298.

199. Vascular endothelial growth factor gene-activated matrix (VEGF165-GAM) enhances osteogenesis and angiogenesis in large segmental bone defects / F. Geiger, H. Bertram, I. Berger et al. // J. Bone Miner. Res. 2005. - Vol. 20. -P. 2028-2035.

200. Vascular endothelial growth factor stimulates bone repair by promoting angiogenesis and bone turnover / J. Street, M. Bao, L. deGuzman et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 2002. - Vol. 99. - P. 9656-9661.

201. Vascular endothelial growth factor (VEGF) directly enhances osteoclastic bone resorption and survival of mature osteoclasts / M. Nakagawa, T. Kaneda, T. Arakawa et al. // FEBS Lett. 2000. - Vol. 473. - P. 161-164.

202. Vascularisation and osteochondrosis of the epiphyseal growth cartilage of the distal femur in pigs-development with age, growth rate, weight and joint shape / B. Ytrehus, C.S. Carlson, N. Lundeheim et al. // Bone. 2004. - Vol. 34. P. 454-465.

203. Vascular-specific growth factors and blood vessel formation / G.D. Yancopoulos, S. Davis, N.W. Gale et al. // Nature. 2000. - Vol. 407. - P.

204. VEGF and VEGF receptors are differentially expressed in chondrocytes / G. Bluteau, M. Julien, D. Magne et al. // Bone. 2007. - Vol. 40. - P. 568-576.

205. VEGF couples hypertrophic cartilage remodeling, ossification and angiogenesis during endochondral bone formation / H.P. Gerber, T.H. Vu, A.M. Ryan et al. // Nat. Med. 1999. - Vol. 5. - P. 623-628.

206. VEGF improves, whereas sFltl inhibits, BMP2-induced bone formation and bone healing through modulation of angiogenesis / H. Peng, A. Usas, A. Olshanski et al. // J. Bone. Miner. Res. 2005. - Vol. 20. - P. 2017-2027.

207. Vertebral Fractures and Mortality in Older Women: Study of Osteoporotic Fractures Reseach Group / D. Kado, W. Browner, L. Palermo et al. // Arch. Intern. Med. 1999. - Vol. 159(11). - P. 1215-1220.

208. Walsh, D.A. Joint physiology and synovial cell proliferation / D.A. Walsh, P.I. Mapp //Br. J. Rheumatol. 1998. - Vol. 37. - P. 1032-1033.

209. Xanthine oxidase mediates cytokine-induced, but not hormone-induced bone resorption / J.M. Kanczler, T.M. Millar, T. Bodamyali et al. // Free Radie. Res.-2003.-Vol. 37.-P. 179-187.

210. Yabsley, R.H. The effect of shaft fractures and periosteal stripping on the vascular supply to epiphyseal plates / R.H. Yabsley, W.R. Harris // J. Bone Joint Surg. Am. 1965. - Vol. 47. - P. 551-566.

211. ZD6474 inhibits vascular endothelial growth factor signaling, angiogenesis, and tumor growth following oral administration / S.R. Wedge, D.J. Ogilvie, M. Dukes et al. // Cancer Res. 2002. - Vol. 62. - P. 4645-4655.242.248.