Молекулярно-биологические аспекты рецидивирования немышечно-инвазивного рака мочевого пузыря тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.12, кандидат наук Пакус, Дмитрий Игоревич

• Пакус, Дмитрий Игоревич
• кандидат наук
• 2017

Оглавление диссертации кандидат наук Пакус, Дмитрий Игоревич

ОГЛАВЛЕНИЕ

Стр.

Список сокращений

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1

МАТРИЧНЫЕ МЕТАЛЛОПРОТЕИНАЗЫ И ИХ ИНГИБИТОРЫ: ОБЩАЯ БИОЛОГИЧЕСКАЯ РОЛЬ И УЧАСТИЕ В ПРОГРЕССИИ РАКА МОЧЕВОГО ПУЗЫРЯ (обзор литературы)

1.1. Современные представления о распространенности и прогностических

маркерах рецидива рака мочевого пузыря

1.2. Роль ферментов семейства матричных металлопротеиназ в регуляции состояния экстрацеллюлярного матрикса опухолевой ткани

1.3. Роль матричных металлопротеиназ в опухолевой прогрессии

1.4. Матричные металлопротеазы и их тканевые ингибиторы как

прогностические маркеры роста опухоли у пациентов с РМП

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Дизайн исследования

2.2. Общая характеристика больных

2.3. Методы исследования

2.4. Тактика лечения пациентов клинической группы

2.5. Статистическая обработка результатов

ГЛАВА 3. ГЕНЕТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ И ОСОБЕННОСТИ

ЭКСПРЕССИИ ФЕРМЕНТОВ ПРОТЕОЛИЗА ВНЕКЛЕТОЧНОГО МАТРИКСА И БАЗАЛЬНОЙ МЕМБРАНЫ В ТКАНИ МОЧЕВОГО ПУЗЫРЯ И В МОЧЕ У БОЛЬНЫХ НЕМЫШЕЧНО-ИНВАЗИВНЫМ

РАКОМ МОЧЕВОГО

ПУЗЫРЯ

3.1. Содержание в моче ферментов протеолиза внеклеточного матрикса и их ингибиторов у больных раком мочевого пузыря

3.2. Особенности экспрессии ферментов протеолиза внеклеточного матрикса и их ингибиторов в ткани мочевого пузыря у больных раком мочевого пузыря

3.3. Особенности экспрессии у2 цепи ламинина-5 в ткани мочевого пузыря у больных раком мочевого пузыря

3.4. Генетические аспекты активности ферментов внеклеточного протеолиза

у больных раком мочевого пузыря

ГЛАВА 4. ОСОБЕННОСТИ АКТИВНОСТИ ФЕРМЕНТОВ ЭНДОГЕННОГО ВНЕКЛЕТОЧНОГО ПРОТЕОЛИЗА В ТКАНИ И МОЧЕ В ПРЕДОПЕРАЦИОННОМ ПЕРИОДЕ И В ДИНАМИКЕ ПОСЛЕОПЕРАЦИОННОГО ПЕРИОДА У БОЛЬНЫХ НЕМЫШЕЧНО-ИНВАЗИВНЫМ РАКОМ МОЧЕВОГО ПУЗЫРЯ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ РАННЕГО РЕЦИДИВИРОВАНИЯ

ЗАБОЛЕВАНИЯ

4.1. Содержание металлопротеиназ и их ингибиторов в моче у больных немышечно-инвазивным раком мочевого пузыря до и после операции в зависимости от рецидива заболевания

4.2. Экспрессия ферментов внеклеточного протеолиза и их ингибиторов в ткани мочевого пузыря у больных немышечно-инвазивным раком мочевого пузыря до и после операции в зависимости от рецидива

заболевания

4.3. Оценка прогноза рецидива рака мочевого пузыря по активности

ферментов тканевого внеклеточного протеолиза

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ДС - диагностическая специфичность ДЧ - диагностическая чувствительность

ЕОЯТС - European Organization for Research and Treatment of Cancer ИРМП - инвазивный рак мочевого пузыря Кр - креатинин

ММП - матриксные металлопротеиназы

НТ - гистологически неизмененная ткань

ОП - опухолевая ткань

ПЦР - полимеразная цепная реакция

РМП - рак мочевого пузыря

ТИМ - тканевые ингибиторы металлопротеиназ

ТУР - трансуретральная резекция

ХПН - хроническая почечная недостаточность

ХСН - хроническая сердечная недостаточность

AUC (Area Under Curve) - площадь, ограниченная ROC-кривой и осью доли ложных положительных классификаций

cut-off - дифференциально-диагностическая точка разделения

ROC (Receiver Operator Characteristic) анализ - метод для оценки качества

диагностических тестов

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Молекулярно-биологические аспекты рецидивирования немышечно-инвазивного рака мочевого пузыря»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность исследования

К немышечно-инвазивному раку мочевого пузыря относят неинвазивную папиллярную карциному (Та), карциному in situ (Tis) и опухоли с минимальной инвазией в пределах собственной пластинки слизистой оболочки (Т1). Немышечно-инвазивный РМП характеризуется высокой частотой развития рецидивных и множественных опухолей (Алексеев Б.Я. с соавт., 2013). Частота рецидива после хирургического лечения немышечно-инвазивного РМП составляет до 85%, причем в 30% случаев развиваются диссеминированные и инвазивные формы рака (Алексеев Б.Я. с соавт., 2011; Свеклина Т.А. с соавт., 2012; Pasin E. et al., 2008; Wieczorek et al., 2015). В связи с этим прогноз клинического течения немышечно-инвазивного РМП и его перехода в инвазивные формы является важной задачей онкологии (Михайленко Д.С. с соавт., 2014).

Основным хирургическим методом лечения немышечно-инвазивного РМП является трансуретральная резекция. ТУР является не только лечебной опцией, но и операцией позволяющей стадировать заболевание (Babjuk M., Burger M. , Comperat E., Gontero P.,. Mostafid A.H, Palou J., van Rhijn B.W.G., Roupret M.,. Shariat S.F, Sylvester R., Zigeuner R., 2016). Согласно Клиническим Рекомендациям по диагностике и лечению больных раком мочевого пузыря операции включает: уретроцистоскопию, биопсию изменённых участков слизистой оболочки мочевого пузыря, при показаниях биопсию из простатического отдела уретры, и непосредственно трансуретральная резекция опухоли. При небольших новообразованиях (менее 1 см) предпочтение отдается удалению опухоли единым блоком с подлежащими тканями до мышечного слоя. При опухоли больших размеров производится раздельное удаление экзофитной части новообразования, затем основания опухоли с мышечным слоем, из визуальной неизменённого мышечного слоя необходимо производить «холодную» или «петлевую» биопсию, кроме того должна быть удалена слизистая на расстоянии 1,5 -2 см

от основания опухоли для исследования на предмет сопутствующего CIS (Волкова М.И., Матвеев В.Б., Медведев С.В. и соавт., 2014)

Наиболее точным стандартным методом установления диагноза рецидива и прогрессии немышечно-инвазивного РМП является биопсия мочевого пузыря с последующим патоморфологическим исследованием (Лопаткин Н.А., 2003; Гурьев Э.Н. с соавт., 2011; Мартов А.Г. с соавт., 2016; Mitropoulos D., 2005; Bolat et al., 2016). Однако, инвазивный характер биопсии делает актуальным поиск лабораторных (in vitro) методик диагностики рака (Urquidi et al., 2012) . Известно, что в процессе инвазии злокачественных новообразований происходит протеолитическое разрушение базальной мембраны слизистой оболочки мочевого пузыря опухолевыми клетками. К эндогенным ферментам, участвующим в этом процессе, относятся матриксные металлопротеазы (ММП) (Измайлов А.А. с соавт., 2015; Fehmi et al., 2016), а к адгезивным гликопротеинам, обеспечивающим связь эпителиальных клеток с базальной мембраной - у2 ламинин 5 (Hindermann W. et al., 2003; Kiyoshima K. et al., 2005; Kamada M. et al., 2015). Возможность оценки активности эндогенных ферментов протеолиза в биологических средах, например, в моче (Данильченко Д.И., 2009) делает их удобным маркером для проведения как скрининга, так и диагностики развития РМП и его рецидивов (Mohammed et al., 2013; D'Costa et al., 2016). Однако, с патогенетической стороны более важным представляется определение активности ММП непосредственно в тканях. Кроме оценки экспрессии ММП необходимо учитывать активность их специфических тканевых ингибиторов. Расчет соотношения их экспрессии в самой опухоли, в ткани, прилежащей к карциноме и биологических средах позволит более точно оценить состояние внеклеточного матрикса и связать эти данные с прогнозом развития рецидивов и прогрессии РМП.

Пролиферативная активность опухолевых клеток является одним из ключевых прогностических показателей. Она может быть оценена при помощи различных методик. К ним относятся подсчет количества митозов,

анализ аргентофильных ядрышковых организаторов, исследование числа Ki-67- позитивных клеток, выявление антигена ядра пролиферирующей клетки (PCNA) и т.д. (Бабиченко И.И. с соавт., 2012). Прогностическая ценность при немышечно-инвазивном раке мочевого пузыря доказана для Ki-67 и PCNA. Показана связь между уровнем их экспрессии и степенью дифференцировки, глубиной инвазии новообразований. Уровень экспрессии Ki67 и PCNA могут быть независимыми маркерами прогрессии и

а РМП. (Бабиченко И.И. с соавт., 2012; Mohammed et al., 2013). Определение взаимосвязи изменений внеклеточного матриксного гомеостаза с пролиферативной активностью клеток в опухоли может позволить более полно оценить диагностическую значимость оценки уровня ММП и их ингибиторов в биологических жидкостях для прогноза рецидивов и прогрессии немышечно-инвазивного РМП.

Необходимость поиска дополнительных способов диагностики рецидивов и прогнозирования течения немышечно-инвазивного РМП на основе выявления новых молекулярно-биологических маркеров послужили отправной точкой для проведения настоящего исследования.

Степень разработанности темы

В настоящее время недостаточно исследованы причины высокой частоты рецидива и мультифокальности немышечно-инвазивного РМП. При изучении доступной научной литературы отмечено, что большинство авторов, придерживаются гипотезы о наличии не выявленных опухолевых очагов на момент установления диагноза, а также возможности имплантации опухолевых клеток в процессе диагностического или оперативного вмешательства (Пряничникова М.Б., 2014). Исследования последних лет показали, что развитие рецидивных и мультифокальных опухолей может быть объяснено наличием в слизистой мочевого пузыря независимых «полей канцеризации», каждое из которых способно дать начало новой опухоли (Babayan A. e al., 2012; Jones T.D. et al., 2005). Перспективным

количественным методом оценки агрессивности опухолей и их инвазивных свойств в настоящее время считается определение эндогенных ферментов протеолиза, таких как матриксных металлопротеиназ (Клишо Е.В. с соавт., 2014; Kader A.K. и соавт, 2006). Экспериментальные исследования in vitro и in vivo показали, что при РМП рост концентрации ММП взаимосвязан с инвазией и метастазированием (Reis S. et al., 2014). Однако, данные о диагностической эффективности мониторинга уровня ММП, полученные этими исследовательскими группами, оказываются противоречивыми. Таким образом, разработка способов оценки риска развития и своевременной диагностики ранних рецидивов и мультифокальности немышечно-инвазивного РМП на основе оценки активности ферментов внеклеточного протеолиза и их ингибиторов является обоснованным как с теоритической, так и с практической стороны.

Цель исследования

Изучить молекулярно-биологические аспекты рецидивирования немышечно-инвазивного рака мочевого пузыря, связанных с изменением активности ферментов внеклеточного протеолиза в ткани опухоли и моче у больных с первичными и рецидивными новообразованиями, а также оценить их прогностическое значение.

Задачи исследования:

1. Изучить баланс системы «матричные металлопротеиназы (ММП - 2,9, 14) - тканевые ингибиторы металлопротеиназ (ТИМ - 1, 2)» в моче у пациентов немышечно-инвазивным раком мочевого пузыря.

2. Изучить экспрессию матричных металлопротеиназ, их тканевых ингибиторов и у2 цепи ламинина-5 у пациентов с первичным немышечно-инвазивным раком мочевого пузыря.

3. Провести сравнительный анализ системы «ММП-ТИМ» у больных немышечно-инвазивным раком мочевого пузыря с рецидивами и пациентов с безрецидивным течением опухолевого процесса.

4. Изучить сопряжения однонуклеотидных полиморфизмов генов матричных металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов с активностью внеклеточного протеолиза компонентов базальной мембраны у больных немышечно-инвазивным раком мочевого пузыря

5. Выявить взаимосвязь между тканевой экспрессией матриксных металлопротеиназ (ММП-2, 9, 14), их специфических тканевых ингибиторов (ТИМ-1, ТИМ-2), у2 цепи ламинина-5, их экскрецией с мочой и морфологическими характеристиками немышечно-инвазивного рака мочевого пузыря.

6. Выявить возможную корреляцию между пролиферативной активностью опухолевых клеток и экспрессией в опухолевой ткани матричных металлопротеиназ, их тканевых ингибиторов и у2 цепи ламинина-5.

7. Определить комплекс прогностических показателей риска рецидива немышечно-инвазивного рака мочевого пузыря после эндохирургического лечения.

Научная новизна исследования

У больных немышечно-инвазивным РМП на различных этапах лечения определены изменения активности матриксных металлопротеиназ и их ингибиторов в ткани мочевого пузыря и в моче, ассоциированные с рецидивом заболевания. При динамическом наблюдении при развитии или отсутствии рецидива РМП было впервые установлено, что для оценки прогноза риска рецидива новообразований важно учитывать не только повышение активности матриксных металлопротеиназ, но и разобщение между повышением их активности и снижением потенциала ТИМ. Впервые тканевая экспрессия и мочевая экскреция матриксных металлопротеиназ и их специфических ингибиторов была изучена с учетом особенностей клинического течения немышечно-инвазивного, а не инвазивного РМП. Установлено, что протеолитическая активность ММП увеличивается при

изменении стадии рака от Та к Т1, степени дифференцировки опухоли от 01 к 02, и изменении прогноза прогрессирования заболевания от благоприятного к промежуточному.

В результате генетических исследований было выявлено, что риск развития немышечно-инвазивного РМП повышается у больных с наличием полиморфизма по типу С/Т в гене ММП9 (гб3918242), что необходимо принимать во внимание при скрининге пациентов с высоким риском развития рецидива РМП.

Теоретическая и практическая значимость исследования

Разработанная система мониторинга пациентов немышечно-инвазивным РМП после оперативного лечения способствует повышению эффективности ранней диагностики рецидивов опухолей. В качестве оптимизации системы ранней диагностики рецидивов новообразований в работе были определены дифференциальные точки разделения для иммуногистохимических, молекулярно-генетических и биохимических показателей, отражающих особенности экспрессии ММП и их тканевых ингибиторов, у2 цепи ламинина-5. Своевременное определение риска развития рецидива процесса в зависимости от результатов обследования, явилось основанием для разработки прогностической модели определения риска развития рецидива заболевания.

Методология и методы исследования.

Дизайн исследования. Клиническая часть диссертационной работы выполнена в виде ретроспективного исследования по типу «случай-контроль». В качестве конечной исследуемой точки в группе пациентов выбран срок 3-6-12 месяцев.

При проведении исследования были использованы методы иммуногистохимического выявления экспрессии тканевых ферментов внеклеточного протеолиза и их ингибиторов, а также иммуноферментный анализ экспрессии данных ферментов в моче. Используемые статистические

способы обработки полученных результатов: (метод построения таблиц сопряженности с оценкой зависимости признаков и анализом контингенции (ассоциации) явлений, дисперсионный анализ, ЯОС-анализ, статистическая оценка информативности диагностических методов).

Основные положения диссертации, выносимые на защиту.

1. Высокая экспрессия ферментов внеклеточного протеолиза ММП-2 и ММП-14, у2 ламинина 5 на фоне снижения ингибиторного потенциала ТИМ-2 в ткани операционных биоптатов мочевого пузыря у больных немышечно-инвазивным раком мочевого пузыря, а также высокая экспрессия ММП-9 на границе опухоль-здоровая ткань и в области неизмененной ткани ассоциированы с рецидивом заболевания в первые 12 месяцев после ТУР.

2. Наибольшая прогностическая значимость в отношении развития рецидива у больных немышечно-инвазивным раком мочевого пузыря после эндохирургического лечения, среди дооперационных изменений мочевой экскреции ферментов внеклеточного протеолиза отмечается для повышенного уровня ММП-2 в моче.

3. Оценка динамики мочевой экскреции ММП-2 и ТИМ-2 до операции, на 3 и 6 мес. послеоперационного периода у больных немышечно-инвазивным раком мочевого пузыря, исследование выраженности экспрессии ММП-2 в биоптатах мочевого пузыря при контрольной цистоскопии позволяет выделить больных с высоким риском рецидива заболевания.

Степень достоверности и апробации работы.

Достоверность проведенного исследования определяется формированием клинического исследования на достаточном количестве пациентов в группах (п = 73), наличием контрольной группы, использованием методов диагностики и лечения пациентов согласно Руководства Европейской Урологической Ассоциации и Минздравом РФ,

обработкой полученных результатов современными методами статистического анализа.

Результаты проведенной научной работы доложены и обсуждены на Международном конгрессе «Инновационные технологии в иммунологии и аллергологии» (Москва, 17-19 ноября 2015), IX съезде онкологов и радиологов стран СНГ и Евразии (Минск, 15-17 июня 2016).

Внедрение результатов исследования.

Полученные результаты исследования внедрены в работу отделения урологии ФГБУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Минздрава России.

Публикации результатов исследования.

По материалам диссертации опубликовано 5 научных работ в отечественной печати, в том числе 3 статьи в журналах, рекомендованных ВАК при Министерстве образования и науки Российской Федерации для публикации основных результатов диссертаций на соискание ученой степени кандидата и доктора наук.

Личный вклад автора в исследование.

Автором проведен аналитический обзор источников отечественной и зарубежной литературы, лично разработаны и апробированы методологические и методические основы данного научного исследования. Автор принимал непосредственное участие в клинических исследованиях и лечении больных. Диссертант самостоятельно разработал основные идеи и алгоритм обработки полученных результатов, проводил их анализ, обобщения и подготовку публикаций. На основании полученных результатов исследования сделаны обоснованные выводы и предложены практические рекомендации.

Структура и объем диссертации.

Диссертационная работа изложена на 150 страницах текста и состоит из введения, обзора литературы, главы описания материалов и методов исследования, двух результативных глав, обсуждения результатов исследования, выводов и научно-практических рекомендаций, библиографии, включающей 42 источников на русском и 175 на иностранных языках, всего 217 источников. Работа содержит 45 таблиц.

Диссертационное исследование выполнялось на клинической базе онкоурологического отделения, лаборатории молекулярной онкологии, лаборатории изучения патогенеза злокачественных опухолей, отдела цитологических и патологогистологических исследований ФГБУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Минздрава России.

14

ГЛАВА 1

МАТРИЧНЫЕ МЕТАЛЛОПРОТЕИНАЗЫ И ИХ ИНГИБИТОРЫ: ОБЩАЯ БИОЛОГИЧЕСКАЯ РОЛЬ И УЧАСТИЕ В ПРОГРЕССИИ РАКА МОЧЕВОГО ПУЗЫРЯ

1.1 Современные представления о распространенности и прогностических маркерах рецидива рака мочевого пузыря.

Среди онкологических урологических заболеваний рак мочевого пузыря по распространенности находиться на втором месте, а по летальности на третьем. (Свеклина Т.А. с соавт., 2012; 2008 Roy R. et al., 2008). При этом рост заболеваемости данными новообразованиями имеет постоянный рост. По данным разных авторов выявляемость рака мочевого пузыря в мире составляет 260 - 330 тысяч впервые выявленных случаев в год (Аполихин О.И. с соавт., 2014; Каприн А.Д. с соавт., 2015, 2015а, Jemal A. et al., 2005).

В структуре онкологической заболеваемости на долю РМП приходилось 4,5%. Заболеваемость РМП в 2010 г. составила 5,85 на 100 000 населения; по сравнению с 2000 г. она увеличилась на 15,65%. Мужчины заболевали в 4,5 раза чаще, чем женщины. Средний возраст заболевших 67 лет (Волкова М.И., Матвеев В.Б., Медведев С.В., Носов Д.А., Фигурин К.М., Хмелевский Е.В., Черняев В.А., 2014)

В Российской Федерации в 2007 г. на учете находилось 70544 пациентов с раком мочевого пузыря, а в 2010 г. - 79959 (Чиссов В.И. с соавт., 2012). По РФ в структуре онкологических заболеваний рак мочевого пузыря занимает 13 место. За период 2000 - 2010 гг. отмечается выраженный рост заболеваемости: среди женщин на 22,23%; мужчин на 15,14% (Сивков А.В., 2013). Наблюдение за динамикой заболеваемости РМП говорит о росте показателей с 9,8 человек на 100 000 населения в 1991 г. до 12,6 человек в 2007 г. (Бабиченко И.И. с соавт., 2012). В 2000 г. под мониторингом находились 36,7 человек на 100 000 населения, а в 2010 г. 56,4 на 100 000

(Аполихин О.И., 2007; Чиссов В.И. с соавт., 2012, Петрова Г.В., Каприн А.Д., Старинский В.В., Грецова О.П., 2014,2015).

В 70-80% случаев уротелиальный рак мочевого пузыря выявляют на неинвазивных стадиях (Каприн А.Д. с соавт., 2011, 2014; Ситдыкова M3. с соавт., 2013; Tiguert R., Fradet Y., 2002). При этом от 30 до 85% «немышечно-инвазивных» новообразований после проведенного лечения рецидивирует, из их числа 10-30% перерождаются в метастатические и инвазивные карциномы (Jemal A. et al., 2011). В последнее время отмечается позитивная тенденция к увеличению выявляемости PMQ на ранних стадиях. Так, если в 2000 году пациентов с немышечно-инвазивным PMQ было 41,4 % случаев, то в 2010 году уже 61,3%. Причина проста - улучшение инструментально-диагностических возможностей по выявлению новообразований этой локализации, внедрение скриннинговых программ. (Чиссов В.И. с соавт., 2012; Glas A.S. et al., 2003).

Эндохирургичекое лечение немышечно-инвазивного рака мочевого пузыря сопровождается высокой вероятностью развития множественных и рецидивных опухолей. Частота рецидивов немышечно-инвазивного PMQ после хирургического инвазивного лечения достигает 85% случаев, а у 30% больных развиваются инвазивные формы PMQ (Kavalieris L. 2016, Алферов СМ. с соавт., 2010; Lorenzo Gomez M.F., 2003; Parkin D.M., 2008).

Наиболее современным валидизированным «инструментом», использующимся в клинической практике, позволяющим определять течение рака мочевого пузыря после хирургического лечения является система EORTC (European Organization for Research and Treatment of Cancer). Основываясь на прогностических факторах, больные с немышечно-инвазивными опухолями мочевого пузыря могут быть разделены на следующие группы риска развития рецидива или прогрессии заболевания:

• группа низкого риска с благоприятным прогнозом;

• группа умеренного риска с промежуточным прогнозом;

• группа высокого риска с неблагоприятным прогнозом.

Таблица 2.5

Расчет риска развития рецидива и прогрессии рака мочевого пузыря в

баллах

Фактор Рецидив Прогрессирование

Число опухолей

1 0 0

2-7 3 3

>8 6 6

Диаметр опухоли, см

<3 см 0 0

>3 см 3 3

Число предшествующих рецидивов

Первичная опухоль 0 0

<1 рецидива в год 2 2

> 1 рецидива в год 4 2

Стадия

Та 0 0

Т1 1 4

Сопутствующая с1б

Да 0 0

Нет 1 6

Степень дифференцировки

01 0 0

02 1 0

03 2 5

Общее число баллов 0-17 0-23

Таблица 2.6

Определение вероятности рецидива РМП

Риск рецидива, (баллы) Вероятность развития рецидива на первом году, % (95% ДИ) Вероятность развития рецидива в течение 5 лет, % (95% ДИ) Группа риска по развитию рецидива

0 15 (10-19) 31 (24-37 Низкий риск

1-4 24 (21-26) 46 (42-49) Промежуточный риск

5-9 38 (35-41) 62 (58-65) Промежуточный риск

10-17 61 (55-67) 78 (73-84) Высокий риск

Таблица 2.7

Определение вероятности прогрессии РМП

Риск прогрессии (баллы) Вероятность прогрессии на первом году, % (95% ДИ) Вероятность прогрессии в течение 5 лет, % (95% ДИ) Группа риска по прогрессии

0 0,2 (0-0,7) 0,8 (0-1,7) Низкий риск

2-6 1 (0,4-1,6) 6 (5-8) Промежуточный риск

7-13 5 (4-7) 17 (14-20) Высокий риск

14-23 17 (10-24) 45 (35-55) Высокий риск

Аль-Шукри С.Х. с соавт. (2000) отмечают, что 20-30% рецидивных новообразований имеют все признаки прогрессии - увеличение глубины инвазии и снижение степени дифференцировки. Другие авторы указывают, что в течение 2-8 недель после первичного хирургического вмешательства (трансуретральной резекции) при повторных цистоскопиях у 38-63% пациентов выявлялись резидуальные новообразования (Strong J.H., 1986; Malmstrom P. et al., 1987; Vaidya A. et al., 2001; Wu YP 2016).

В настоящее время выбор оптимальной тактики лечения и прогноз последующего течения РМП, распространенность злокачественного процесса связаны с принадлежности его к классификационной категории по системам G и TNM (Сафиуллин К.Н. с соавт., 2012; Queipo Zaragoza J.A. et al., 2005). При этом отдаленные результаты в лечении пациентов, отнесенных к одним и тем же классификационным подгруппам и проходящих схожую терапию, значительно разнятся (Пряничникова М.Б. с соав., 2011; Nastase A., et al.,

2011). Поэтому для достоверной оценки прогноза РМП важно учитывать дополнительные характеристики новообразования, связанные с его биологией. Кроме стадии, гистологического варианта, степени дифференцировки, важно учитывать индивидуальные факторы, определяющие модель поведения и вероятную агрессивность опухоли.

Высокая частота рецидива у части пациентов с РМП требует детального анализа причин его развития и поиска потенциальных маркеров риска развития этого процесса. (Пряничникова М.Б., 2014; Peng B. et al., 2010; Liu et al., 2010).

К маркерам, связанным с рецидивом РМП разные авторы относят:

- микросателлитную нестабильность ДНК (Mallofre C. et al., 2003),

- белки-регуляторы клеточного цикла,

- мутации протоонкогенов и генов-онкосупрессоров,

- молекулы межклеточной и клеточно-матриксной адгезии (Goldberg A.L., 2007),

- ангиогенные (Михайленко Д.С. с соавт., 2014; Goddard J.C., 2003; Inoue K., 2002; Garcia-Closas M., 2007).

Функционально опухолеассоциированные маркеры, информативные для РМП, можно подразделить на:

- опухолевые антигены,

- пептидные факторы роста и их рецепторы,

- антигены групп крови,

- протеазы внеклеточного матрикса и базальной мембраны,

- онкогены и продукты их экспрессии,

- молекулы межклеточной и клеточно-матриксной адгезии,

- регуляторы клеточного цикла

- белки-регуляторы апоптоза ( Головина Д.А. с соавт., 2014;

Habuchi T. et al., 2005).

Опухолевые антигены важны прежде всего, как объекты, позволяющие с помощью моноклональных антител диагностировать злокачественную

трансформацию уротелия (Kausch I. et al., 2001; Droller M.J. 2002). В настоящее время исследуется возможность использования целой общности моноклональных антител, но пока из них лишь антиген Т-138 обладает прогностической значимостью. Это гликопротеин клеточной стенки, который выявляется в 60% инвазивных РМП и в 15% немышечно-инвазивных. У 80% пациентов с опухолями Та и Т1 и с экспрессией Т-138 заболевание прогрессирует (Ravery V. et al. 1995; Fehmi et al., 2016 ). Помимо этого, данный белок является независимым фактором риска метастазирования рака (Cordon-Cardo C. et al., 1988).

Антигены групп крови ABO(H) находятся на поверхности клеток уротелия в норме и вероятность их утраты в ходе опухолевой трансформации сохраняется. Для уротелиальных раков прогностическое и дифференциально-диагностическое значение имеет потеря экспрессии антигенов групп крови АВО(Н). Нормальный уротелий и раки in situ позитивно окрашиваются на эти антигены, а почти все инвазивные опухоли - негативно (Петров С.В., Райхлин Н.Т., 2000; Chihara Y. et al., 2005).

Протоонкогены находятся в составе генома нормальной клетки и ответственны за синтез циклинов, циклин-связанных-киназ, факторов роста и их рецепторов, регулируя, таким образом, пролиферацию клеток (Cox G. et al., 2000). Транслокация, точечная мутация или амплификация протоонкогенов приводит к их трансформации в онкогены и может запустить процесс малигнизации (Borden L.S. et al., 2005).

Самые значимые онкогены, вызывающие злокачественную трансформацию уротелия мочевого пузыря, это - c-myc, mdm-2, с-Н-ras, EGF/EGFR и ^erb^ (Jebar A.H. et al.; 2005, Zhang et al. 2013). Повышенную экспрессию онкогена с-Н-ras связывают с ранним рецидивом немышечно-инвазивного РМП (Fontana D. et al., 1996), а с-myc находится в связи со степенью дифференцировки новообразования и не считается прогностическим фактором (Lipponen P.K., 1995). ^erb-B2 находят в низкодифференцированных опухолях у пациентов с повышенным риском

метастазирования и поэтому низкой выживаемостью (Sato K. et al., 1992; Sakr et al., 2015), но он не обеспечивает дополнительной прогностической информацией при известной степени дифференцировки и глубине инвазии (Mellon J.K. et al., 1996). Самым исследованным на данный момент геном, регулирующим в числе прочих клеточный цикл, является белок р53 (Badr K.M. et al., 2004; Tsuji M. et al., 1997). J.P. Stein и D. Esrig полагают, что данный белок - единственный независимый, превосходящий по значимости такие параметры как глубина инвазии и степень дифференцировки, фактор, прогноза прогрессии РМП (Esrig D. et al., 1994; Stein J.P. et al., 1998). Однако, ряду авторов не удалось вновь воспроизвести эти результаты (Lipponen P.K., 1993; Liukkonen T. et al., 1999). Повышенная активность мутантного белка р53 отмечалась в 38% карциномы in situ и в 74% случаев инвазивного рака (Франк Г.А. с соавт., 2002).

Основываясь на анализе генетических изменений у пациентов с РМП, Бабаян А.Ю. предположила, что если развитие новообразования связано с активацией протоонкогенов, таких как H-Ras, FGFR3, то формируется немышечно-инвазивная форма рака мочевого пузыря. Если же в клетках немышечно-инвазивного РМП или клетках нормального уротелия происходит инактивация главных генов-супрессоров (RB1, PTEN, р53), то это может вызвать развитие более агрессивной инвазивной формы РМП. (Бабаян А.Ю., 2009; Babayan A. et al., 2010).

Пролиферативная клеточная активность оценивается при помощи белков, регулирующих митотический цикл клетки. Одним из них является белок Ki-67, синтез которого начинается в G1-фазе и повышается в G2- и S-фазе клеточного цикла. Г.А. Франк и соавт. (2009) доказали низкую пролиферативную активность Ki-67 (10%) в слизистой оболочке мочевого пузыря при отсутствии опухоли, однако при раке in situ ее увеличение составило до 45% клеточной популяции. V. Margulis с соавт. (2006) отметили, что увеличение экспрессии Ki-67 в уротелиальной карциноме повышает возможности оценки степени дифференцировки

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Пакус, Дмитрий Игоревич, 2017 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Аль-Шукри С.Х., Ткачук В.Н. Опухоли мочеполовых органов // СПб.: Питер, 2000. - 320 с.

2. Андреева Ю.Ю. Морфологические и молекулярно-биологические факторы прогноза рака мочевого пузыря. Автореферат на соискание учёной степени доктора медицинских наук // Москва. -2009. - 164 с.

3. Аполихин О.И. Состояние оказания урологической помощи в России и задачи службы по реализации национального проекта «Здоровье». Пути улучшения образования уролога. М: Дипак, 2007. - 32 с.

4. Аполихин О.И., Сивков А.В., Москалева Н.Г., Солнцева Т.В., Комарова В. А. Анализ уронефрологической заболеваемости и смертности в Российской Федерации за десятилетний период (2002-2012 гг.) по данным официальной статистики // Экспериментальная и клиническая урология. -2014. -№ 2. -С. 4-12.

5. Бабаян А.Ю. Характеристика молекулярно-генетических нарушений в качестве дополнительных маркеров прогноза при поверхностном раке мочевого пузыря // Вестник российского государственного медицинского университета. Материалы IV международной Пироговской студенческой научной медицинской конференции. -2009. -Т. 3. -С. 223.

6. Бабиченко И.И., Самойлов М.В., Кудрявцева Л.В. Иммуногистохимические особенности уротелиальных опухолей мочевого пузыря // Москва. Архив патологии. -2012. -№ 3. -С. 7-10.

7. Бабиченко И.И., Самойлов М.В., Кудрявцева Л.В., Мартов А.Г., Андронов А.С, Ергаков Д.В., Максимов В.А. Оптическая диагностика мышечно-неинвазивного рака мочевого пузыря // Урология. 2012. -№ 3. -С. 52-57.

8. Бережная Н.М. Роль клеток системы иммунитета в микроокружении опухоли // Клетки и цитокины-участники воспаления. Онкология. -2009. -№ 11. -Т. 1(39). -С. 6-17.

9. Волкова М.И., Матвеев В.Б., Медведев С.В., Носов Д.А., Фигурин К.М., Хмелевский Е.В., Черняев В.А. // Клинические рекомендации по диагностике и лечению больных раком мочевого пузыря. Москва - 2014 г.

10. Головина Д.А., Трофимова О.Б., Ермилова В.Д., Матвеев В.Б., Волгарева Г.М. Комплекс молекулярно-генетических и

иммуногистохимических методов для выявления вируса папилломы человека в раковом эпителии мочевого пузыря // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. -2014. -№ 1. -С. 81-84.

11. Гришин М.А., Алферов С.М., Емельяненко А.В. Эндохирургия рака мочевого пузыря у геронтологических пациентов // Хирургия. -2010. -№ 9. -С. 30-35.

12. Гурьев Э.Н., Насруллаев М.Н., Кутовой И.Б. Прицельная биопсия в диагностике рака мочевого пузыря // Казанский медицинский журнал. -2011. -№ 1. -С. 22-26.

13. Данильченко Д.И. Клиническая оценка и внедрение новых малоинвазивных методов оценки диагностики рака мочевого пузыря.// Диссертация на соискание учёной степени доктора медицинских наук. Санкт-Петербург 2008 г.

14. Данильченко Д.И. Диагностическая и прогностическая ценность определения матрикс-металлопротеаз в моче у больных раком мочевого пузыря // Нефрология: Северо-западная ассоциация нефрологов и врачей диализа. Научно-практический журнал. -2009. -Т 13. -№ 1. -С. 87-89.

15. Завалишина Л.Э., Франк Г.А., Андреева Ю.Ю. Матриксные металлопротеиназы и их тканевые ингибиторы при уротелиальном раке мочевого пузыря и светлоклеточном раке почки // Материалы съезда онкологов. -2006. - С. 58.

16. Измайлов А.А., Ахмадишина Л.З., Измайлова С.М., Викторова Т.В. Исследование роли полиморфных локусов матриксных металлопротеиназ в развитии рака мочевого пузыря // Медицинский альманах. -2015. -№ 2. -С.58-60.

17. Камоева С.В., Ферментативные и генетические аспекты генитального пролапса у женщин у женщин перименопаузального возраста // Диссертация на соискание учёной степени кандидата медицинских наук // Москва - 2009 г.

18. Каприн А.Д. В.В. Старинского, Г.В. Петровой Состояние онкологической помощи населению России в 2015 году. // Москва - 2015 г.

19. Клишо Е.В., Кондакова И.В., Чойнзонов Е.Л. Матриксные металлопротеиназы в онкогенезе // Сибирский онкологический журнал. -2003. -№ 2. -С. 62-71.

20. Кондакова И.В., Клишо Е.В., Савенкова О.В. Содержание матриксных металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов в сыворотке крови и опухолях при их метастазировании и др. // Вестник национальной академии наук Белоруссии. -2008. -№ 2. -С. 88-92.

21. Масляков Г.Н., Понукалин А.Н., Цмокалюк Е.Н. и др. Роль иммуногистохимических маркеров в диагностике рака мочевого пузыря // Саратовский научно-медицинский журнал. -2009. -Т. 5(4). -С. 608-611.

22. Матвеев Б.П., Фигурин К.М., Карякин О.Б. Рак мочевого пузыря. М., -2001. - 27 с.

23. Михайленко Д.С., Перепечин Д.В., Аполихин О.И., Ефремов Г.Д., Сивков А.В. Маркеры для неинвазивной молекулярно-генетической диагностики онкоурологических заболеваний // Урология. -2014. -№ 5. -С. 116-120.

24. Петров С.В., Райхлин Н.Т. Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека. Издание 2-е. Казань, 2000. - 237 с.

25. Петрова Г.В., Каприн А.Д., Старинский В.В., Грецова О.П., Состояние онкологической помощи в регионах Центрального федерального округа России. Онкология, 2016.-N 3.-С.52-56

26. Проданец Н.Н., Снопова Л.Б., Бунегина Л.В. Молекулярно-биологические маркеры поверхностного и инвазивного рака мочевого пузыря. // СТМ. -2009. -Т. 2. -С. 87-91.

27. Пряничникова М.Б., Зимичев А.А., Маклаков В.Н. Эпидемиология рака мочевого пузыря в Самарской области // Урология. -2010. -№ 2. -С. 44-47.

28. Пряничникова М.Б., Низамова Р.С., Трубин А.Ю. Гистологические формы рака мочевого пузыря и выживаемость // Морфологические ведомости. -2011. -№ 1. -С. 112-115.

29. Пряничникова М.Б. Современные гипотезы возникновения рака мочевого пузыря // Урология. -2014. -№ 1. -С. 88-91.

30. Сафиуллин К.Н., Карякин О.Б. Комбинированное хирургическое лечение мышечно-неинвазивного рака мочевого пузыря // Вестник РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН. -2012. -Т. 2. -С. 40-43.

31. Свеклина Т.А., Крупин В.Н. Выживаемость пациентов с диагнозом: мышечно-инвазивный рак мочевого пузыря в стадии т2б и т3а после хирургического лечения // Медицинский альманах. -2012. -№ 4. -С. 52-55.

32. Сивков А.В., Рощин Д.А., Перепечин Д.В., Никонова Л.М., Положенцева М.О. Молекулярно-генетические маркеры рака мочевого пузыря в клинической практике // Экспериментальная и клиническая урология. -2013. -№ 3. -С. 48-54.

33. Ситдыкова М.Э., Зубков А.Ю., Нуриев И.Р. Органосохраняющее лечение инвазивного рака мочевого пузыря // Казанский медицинский журнал. -2013. -№ 4. -С. 501-505.

34. Спирина Л.В., Кондакова И.В., Усынин Е.А. с соавт. Протеасомы при раке почки и мочевого пузыря // Пути повышения

эффективности онкологической службы Российской Федерации: материалы Всероссийской научно-практической конференции с международным участием. -2009. -Казань: ИГМА-пресс. -С. 198-200.

35. Спирина Л.В., Кондакова И.В., Усынин Е.А. с соавт. Активность протеасом в тканях злокачественных опухолей различных локализаций // Сибирский онкологический журнал. -2009а. -№ 5. -С. 49-52.

36. Спирина Л.В., Кондакова И.В., Усынин Е.А., Винтизенко С.И. Регуляция ангиогенеза протеасомной системой при раке почки и мочевого пузыря // Совершенствование онкологической помощи в современных условиях: материалы Российской научно-практической конференции с международным участием. -2008. -С. 239-240.

37. Спирина Л.В., Кондакова И.В., Усынин Е.А., Винтизенко С.И. Регуляция ангиогенеза при злокачественных новообразованиях почки и мочевого пузыря // Сибирский онкологический журнал. -2008а. -№ 28. -С. 65-70.

38. Спирина, Л.В., Кондакова И.В. Роль внутриклеточного специфического протеолиза в онкогенезе // Вопросы онкологии. -20086. -Т. 54. -С. 690-694.

39. Франк Г. А., Завалишина Л.Э., Андреева Ю.Ю. Иммуногистохимическая характеристика и степень дифференцировки рака мочевого пузыря // Арх. Патол. -2002. -Т. 6. -С. 16-18.

40. Франк Г. А., Завалишина Л.Э., Андреева Ю.Ю. Методы иммуногистохимии и гибридизации in situ в онкоморфологии // Медицинская технология. - Москва. - 2009.

41. Франк Г. А., Завалишина Л.Э., Андреева Ю.Ю. Уточняющая диагностика рака с использованием иммуногистохимического определения маркеров // Медицинская технология. Москва. - 2009.

42. Чиссов В.И., Старинский В.В., Петрова Г.В. Злокачественные новообразования в России в 2010 году (заболеваемость и смертность) // М. -2012. - 260 с.

43. Amirghofran Z., Monabati A., Khezri A., Malek-Hosseini Z. Apoptosis in transitional cell carcinoma of bladder its relation to proliferation and expression of p53 and bcl-2. // Pathol. Oncol. Res. -2004. -Vol.10(3). -P.154-158.

44. An J., Rettig M.B. Epidermal growth factor receptor inhibition sensitizes renal cell carcinoma cells to the cytotoxic effects of bortezomib. // Mol. Cancer Ther. -2007. -Vol.6(1). -P.61-69.

45. An J., Rettig M.B. Mechanism of von Hippel-Lindau protein-mediated suppression of nuclear factor kappa activity. // Molecular and cellular biology. -2005. -Vol.25. -P.7546-7556.

46. Babayan A. , Andreeva Y., Zaletaev D., Nemtsova M. Molecular evidence supporting field effect in recurrent and primary multiple superficial bladder cancers. // Eur. J. Hum. Genet. -2010. -Vol.18(1). -P.163.

47. Babjuk M., Burger M. , Comperat E., Gontero P.,. Mostafid A.H, Palou J., van Rhijn B.W.G., Roupret M.,. Shariat S.F, Sylvester R., Zigeuner R. Non-muscle-invasive Bladder Cancer.// Guidelines European Association of Urology. 2016. http://uroweb. org.

48. Badr K.M., Nolen J.D., Derose P.B., Cohen C. Muscle invasive schistosomal squamous cell carcinoma of the urinary bladder: frequency and prognostic significance of p53, BCL-2, HER2/neu and proliferation (MIB-1). // Hum. Pathol. -2004. -Vol.35(2). -P.184-189.

49. Bauvois B. New facets of matrix metalloproteinases MMP-2 and MMP-9 as cell surface transducers: Outside-in signaling and relationship to tumor progression. Biochim Biophys Acta. 2012;1825:29-36.

50. Birkedal-Hansen H., Moore W.G.I., Bodden M.K. Matrix metalloproteinases: A review. // Crit. Rev. Oral. Biol. Med. -1993. -Vol.4. -P.197.

51. Blasi F., Stoppelli M.P. Proteases and cancer invasion: from belief to certainty AACR. // Meeting on proteases and protease inhibitors in cancer. Biochimica et biophysica acta. -Vol.142(3). -1998. -P.35-44.

52. Bogusiewicz M., Stryjecka-Zimmer M., Szymanski M. et al. Activity of matrix metalloproteinases-2 and -9 in advanced laryngeal cancer. // Otolaryngol. head neck. Surg. -2003. -Vol.128. -№1. -P.132-136.

53. Borden L.S., Clark P.E., Hall M.C. Bladder Cancer. // Curr. Opin. Oncol. -2005. -Vol.17. -P.275-280.

54. Bolat D., Gunlusoy B., Degirmenci T., Ceylan Y., Polat S., Aydin E., Aydogdu O., Kozacioglu Z. Comparing the short-term outcomes and complications of monopolar and bipolar transurethral resection of non-muscle invasive bladder cancers: a prospective, randomized, controlled study.// Arch Esp Urol. 2016 Jun;69(5):225-33.

55. Boyd S. et al. Differential expression of stromal MMP-1, MMP-9 and TIMP-1 in basal cell carcinomas of immunosuppressed patients and controls. // Virchows Arch. -2008. -Vol.452(1). -P.83-90.

56. Burchardt M., Burchardt T., Shabsigh A. et al. Current concepts in biomarker technology for bladder cancers. // Clin. Chem. -2000. -Vol.46. -P.595-605.

57. Chandrasekar N. et al. Modulation of endothelial cell morphogenesis in vitro by MMP-9 during glial-endothelial cell interactions. // Clin. Exp. Metastasis. -2000. -Vol.18(4). -P.337-42.

58. Chang C.K., Hung W.C., Chang H.C. The Kazal motifs of RECK protein inhibit MMP-9 secretion and activity and reduce metastasis of lung cancer cells in vitro and in vivo. // J. Cell. Mol. Med. -2008. -Vol.12. -P.12.

59. Chantrain C.F. et al. Stromal matrix metalloproteinase-9 regulates the vascular architecture in neuroblastoma by promoting pericyte recruitment. // Cancer Res. -2004. -Vol.64(5). -P.1675-86.

60. Chihara Y., Sugano K., Kobayashi A. et al. Loss of group A antigen expression in cancer caused by allelic loss and/or methylation of the ABO gene. // Lab. Invest. -2005. -Vol.85. -P.1051.

61. Cordon-Cardo C., Reuter V.E., Finstad C.L. et al. Blood group related antigens in human urothelium: enhanced expression of precursors, LeX and LeY

determinants in urothelial carcinoma. // Cancer Res. -1988. -Vol.48. -P.4113-4120.

62. Cox G., Jones J.L., Walker R.A., Steward W.P., O'Byrne K.J. Angiogenesis and non-small cell lung cancer. // Lung Cancer. -2000. -Vol.27. -P.81-100.

63. D'Costa Jamie J, James C. Goldsmith, Jayne S. Wilson, Richard T. Bryan, Douglas G. Warda. A Systematic Review of the Diagnostic and Prognostic Value of Urinary Protein Biomarkers in Urothelial Bladder Cancer.// Bl Cancer. 2016; 2(3): 301-317.

64. Dahlmann B. Role of proteasomes in disease. // BMC Biochem. -2007. -Vol.8. -P.1-3.

65. Dey P. Urinary markers of bladder carcinoma. // Clin. Chim. Acta. -2004. -Vol.340. -P.57-65.

66. de Ramón Fata F, Ferruelo A, Andrés G, Gimbernat H, Sánchez-Chapado M, Angulo JC. The role of matrix metalloproteinase MMP-9 and TIMP-2 tissue inhibitor of metalloproteinases as serum markers of bladder cancer. Actas Urol Esp. - 2013 Sep;37(8):480-8.

67. Di Sabatino A. et al. Blockade of transforming growth factor beta upregulates T-box transcription factor T-bet, and increases T helper cell type 1 cytokine and matrix metalloproteinase-3 production in the human gut mucosa. // Gut. -2008. -Vol.57(5). -P.605-12.

68. Dickinson A.J., Fox S.B., Newcomb P.V. et al. An immunohistochemical and prognostic evaluation of cathepsin D expression in 105 bladder carcinomas. // J. Urol. -1995. -Vol.154. -P.237-241.

69. Droller M.J. Current concepts of tumor markers in bladder cancer. // Urol. Clin. North. Am. -2002. -Vol.29. -P.229-234.

70. Edyta Wieczorek, Wojciech Wasowicz, Jolanta Gromadzinska, Edyta Reszka Functional polymorphisms in the matrix metalloproteinase genes and their association with bladder cancer risk and recurrence: A mini-review// International Journal of Urology. -2014.vol.- 21.-P. 744-752.

71. Eissa S., Ali-Labib R., Swellam M., Bassiony M., Tash F., El-Zayat T.M. Noninvasive diagnosis of bladder cancer by detection of matrix metalloproteinases (MMP-2 and MMP-9) and their inhibitor (TIMP-2) in urine. // Eur. Urol. -2007. -Vol.52. -P.1388-1396.

72. Eissa S, Badr S, Elhamid SA, Helmy AS, Nour M, Esmat M. The value of combined use of survivin mRNA and matrix metalloproteinase 2 and 9 for bladder cancer detection in voided urine.// Dis Markers. 2013; 34:57-62.

73. El-Sharkawi Fathia, Mahmoud El Sabah, Zeinab Hassan, Hussein Khaled. The biochemical value of urinary metalloproteinases 3 and 9 in diagnosis and prognosis of bladder cancer in Egypt.//J Biomed Sci. 2014; 21(1): 72.

74. Escaff S., Fernandez J.M., Gonzales A. et al. Study of matrix metalloproteinases and their inhibitors in prostate cancer. // British journal of cancer. -2010. -Vol.102. -P.922-929.

75. Esrig D., Elmajian D., Groshen S. et al. Accumulation of nuclear p53 and tumor progression in bladder cancer. // New Eng. J. Med. -1994. -Vol.331. -P.1259-1264.

76. Fan-Chang Zeng, Song Cen, Zheng-Yan Tang , Xin-Li Kang. Elevated matrix metalloproteinase-9 expression may contribute to the pathogenesis of bladder cancer.// Oncol Lett. 2016 Mar; 11(3): 2213-2222.

77. Fehmi Kamil Narter, Kubilay Sabuncu. Invasion Mechanisms of Bladder Cancer: A Molecular Review.// Journal of Urological Surgery, 2016; 3: 66-73

78. Fontana D., Bellina M., Scoffone C. et al. Evaluation of cras oncogene product (p21) in superficial bladder cancer. // Europ. Urol. -1996. -Vol.29. -P.470-476.

79. Gakiopoulou H1, Nakopoulou L, Siatelis A, Mavrommatis I, Panayotopoulou EG, et al. Tissue inhibitor of metalloproteinase 2 as a multifunctional molecule of which the expression is associated with adverse prognosis of patients with urothelial bladder carcinomas. // Clin. Cancer Res. -2003. -vol. 9.-P. 5573-5581

80. Garcia-Closas M., Malats N., Real F.X. et al. Large-scale evaluation of candidate genes identifies association between VEGF polymorphism and bladder cancer risk. // PloS. Genet. -2007. -Vol.3. -P.287-293.

81. Gazzaniga P., Gradilone A., Vercillo R. et al. Bcl-2/bax mRNA expression ratio as prognostic factor in low grade urinary bladder cancer. // Int. J. Cancer. -1996. -Vol.69. -P.100-104.

82. Gendy R, Delprado W, Brenner P, Brooks A, Coombes G, Cozzi P, Nash P, Patel MI. Repeat transurethral resection for non-muscle-invasive bladder cancer: a contemporary series. BJU Int. 2016 Apr;117 Suppl 4:54-9.

83. Glas A.S., Roos D., Deutekom M. et al. Tumor markers in the diagnosis of primary bladder cancer. // A systematic review. J. Urol. -2003. -Vol.169. -P.1975-1982.

84. Gocheva V., Joyce J.A. Cysteine cathepsins and cutting edge of cancer invasion. // Cell. Cycle. -2007. -Vol.6(1). -P.60-64.

85. Goddard J.C., Sutton C.D., Furness P.N. et al. Microvessel density at presentation predicts subsequent muscle invasion in superficial bladder cancer. // Clin. Cancer Res. -2003. -Vol.9. -P.2583-2586.

86. Goldberg A.L. Functions of the proteasome: from protein degradation and immune surveillance to cancer therapy. // Biochemical society transactions. -2007. -Vol.35. -P.12-17.

87. Grignon DJ1, Sakr W, Toth M, Ravery V, Angulo J, Shamsa F, Pontes JE, Crissman JC, Fridman R. High levels of tissue inhibitor of metalloproteinase-2 (TIMP-2) expression are associated with poor outcome in invasive bladder cancer.// Cancer Res. -1996.- vol. 56.-P. 1654-1659.

88. Gunes M, Kemik AS, Pirincci N, Gecit I, Taken K, Yuksel MB, Kaba M, Eryilmaz R. Preoperative levels of matrix metalloproteinase-7 and -9 and tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1 relation to pathologic parameters in bladder carcinoma patients.// Asian Pac J Cancer Prev. 2013;14:873-876.

89. Habuchi T., Marberger M., Droller M. Prognostic markers for bladder cancer. // International consensus panel on bladder tumor markers. Urology. -2005. -Vol.66. -P.64.

90. Henriet P., Blavier L., DeclerckY.A. Tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMP) in invasion and proliferation. // APMIS. -1999. -Vol.107. -P.111-119.

91. Hindermann W , Berndt A, Haas KM, Wunderlich H, Katenkamp D, Kosmehl H. Immunohistochemical demonstration of the gamma2 chain of laminin-5 in urinary bladder urothelial carcinoma. Impact for diagnosis and prognosis.// Cancer Detect Prev. - 2003.- 27(2).-P. 109-15.

92. Hofmann U.B., Westphal J.R., Van Muijen G.N., Ruiter D.J. Matrix metalloproteinases in human melanoma. // J. Invest. Dermatol. -2000. -Vol.115. -№3. -P.337-344.

93. Hsu M.C., Chang H.C., Hung W.C. HER-2 neurepresses the metastasis suppressor RECK via ERK and Sp-transcription factor to promote cell invasion. // J. Biol. Chem. -2006. -Vol.281. -P.4718-4725.

94. Huang L.W., Garrett A.P., Bell D.A. Differential expression of matrix metalloproteinase-9 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 protein and mRNA in epithelial ovarian tumors. // Gynecol. Oncol. -2000. -Vol.77. -№3. -P.369-376.

95. Iczkowski K.A., Shanks J.H., Allsbrook W.C. et al. Small cell carcinoma of urinary bladder is differentiated from urothelial carcinoma by chromogranin expression, absence of CD44 variant 6 expression, a unique pattern of cytokeratin expression, and more intense g-enolase expression. // Histopathology. -1999. -Vol.35. -P.150-156.

96. Iczkowski K.A., Shanks J.H., Bostwick D.G. Loss of CD44 variant 6 expression differentiates small cell carcinoma of urinary bladder from urothelial (transitional cell) carcinoma. // Histopathology. -1998. -Vol.32. -P.322-327.

97. Inoue K., Kamada M., Slaton J.W. et al. The prognostic value of angiogenesis and metastasis-related genes for progression of transitional cell

carcinoma of the renal pelvis and ureter. // Clin. Cancer. Res. -2002. -Vol.8. -P.1863-1870.

98. Jang J.S., Choi Y.H. Proteolytic degradation of the retinoblastoma family protein pi07: A putative cooperative role of calpain and proteasome. // Int. J. Mol. Med. -1999. -Vol.4(5). -P.487-492.

99. Jebar A.H., Hurst C.D., Tomlinson D.C. FGFR3 and Ras-gene mutations are mutually exclusive genetic events in urothelial cell carcinoma. // Oncogene. -2005. -Vol.24. -P.5218-5225.

100. Jemal A., Murray T., Ward E., Samuels A., Tiwari R.C. et al. Cancer Statistics. // Cancer journal for clinicians. -2005. -Vol.55(1). -P.10-30.

101. Jemal A., Bray F., Center M.M. Global cancer statistics. // Cancer. J. Clin. -2011. -Vol.61. -P.69-90.

102. Jewett H. Strong, infiltrating carcinoma of the bladder: Nation of the depth of penetration of the bladder wall to incidence of local extension and metastasis. // J. Urol. -1986. -Vol.123. -P.1176-1214.

103. Jiang Y., Wang M., Celiker M. Stimulation of mammary tumorigenesis by systemic tissue inhibitor of matrix metalloproteinase 4 gene delivery. // Cancer Res. -2001. -Vol.61. -P.2365-2370.

104. Johansson N., Airola K., Grenman R. et al. Expression of collagenase-3 (matrix metalloproteinase-13) in squamous cell carcinomas of the head and neck. // Am. J. Pathol. -1997. -Vol.151. -№2. -P.499-508.

105. Kader AK1, Shao L, Dinney CP, Schabath MB, Wang Y, Liu J, Gu J, Grossman HB, Wu X. Matrix metalloproteinase polymorphisms and bladder cancer risk.// Cancer Res. -2006.- 66(24).-P.11644-8.

106. Kader AK1, Liu J, Shao L, Dinney CP, Lin J, Wang Y, Gu J, Grossman HB, Wu X. Matrix metalloproteinase polymorphisms are associated with bladder cancer invasiveness.// Clin Cancer Res. - 2007.- 13(9).- P. 2614-20.

107. Kang S.G., Ha Y.R., Ko Y.H., Kang S.H., Joo K.J., Cho H.Y., Park H.S., Kim C.H., Kwon S.Y., Kim J.J., Cheon J., Lee J.G. Effect of laminin 332 on

motility and invasion in bladder cancer.// Kaohsiung J Med Sci. 2013 Aug;29(8):422-9.

108. Kanayama H. Matrix metalloproteinases and bladder cancer.//J Med Invest. 2001 Feb;48(1-2):31-43

109. Kamada Masayuki, Naohiko Koshikawa, Tomoko Minegishi, 2 Chiaki Kawada, Takashi Karashima, Taro Shuin. Urinary laminin-y2 is a novel biomarker of non-muscle invasive urothelial carcinoma Cancer Sci. 2015 Dec; 106(12): 1730-1737.

110. Kausch I., Bohle A. Molecular aspects of bladder cancer II — molecular diagnosis of bladder cancer. // Europ. Urol. -2001. -Vol.396. -P.498-506.

111. Kavalieris L., O'Sullivan P., Frampton C., Guilford P., Darling D., Jacobson E., Suttie J., Raman J.D., Shariat S.F., Lotan Y.// Performance Characteristics of a Multigene Urine Biomarker Test for Monitoring for Recurrent Urothelial Carcinoma in a Multicenter Study.// J Urol. 2016 Dec 14 P. 322- 430.

112. Kenny H.A. The initial steps of ovarian cancer cell metastasis are mediated by MMP-2 cleavage of vitronectin and fibronectin. // J. Clin. Invest. -2008. -Vol.118(4). -P.1367-79.

113. Kleiner D.E., Stetler-Stevenson W.G. Structural biochemistry and activation of matrix metalloproteinases. // Curr. opinion cell. biol. -1993. -Vol.5. -P.891-895.

114. Keijiro Kiyoshima, Yoshinao Oda, Naoko Kinukawa , Seiji Naito, Masazumi Tsuneyoshi . Overexpression of laminin-5 c2 chain and its prognostic significance in urothelial carcinoma of urinary bladder: association with expression of cyclooxygenase 2, epidermal growth factor, and human epidermal growth factor 2// Human Pathology.- 2005.-vol. 36.-P. 522- 530.

115. Kodate M., Kasai T., Hashimoto H., Yabumoto K., Iwata Y., Manobe H. Expression of matrix metalloproteinase (gelatinase) in T1 adenocarcinoma of the lung. // Pathol. Int. -1997. -Vol.47. -P.461-469.

116. Kugler A., Hemmerlein B., Thelen P. et al. Expression of metalloproteinase 2 and 9 and their inhibitors in renal cell carcinoma. // J. Urol. -1998. -Vol.160. -№5. -P.1914-1918.

117. Kumar A., Collins H.M., Scholefield J.H., Watson S.A. Increased type-IV collagenase-(MMP-2 and MMP-9) activity following preoperative radiotherapy in> rectal cancer. // Br. J. Cancer. -2000. -Vol.82. -№4. -P.960-965.

118. Lakka S.S. et al. Synergistic down-regulation of urokinase plasminogen activator receptor and matrix metalloproteinase-9 in SNB19 glioblastoma cells efficiently inhibits glioma cell invasion, angiogenesis and tumor growth. // Cancer Res. -2003. -Vol.63(10). -P.2454-61.

119. Lee C.T., Wood D.P. Bladder cancer: diagnosis, therapeutics and management. // Ed. Humana Press. -2010. -P.313.

120. Lee S.H., Lee J.Y., Park W.S. et al. Transitional cell carcinoma expresses high levels of Fas ligand in vivo. // J. U. Int. -1999. -Vol.83. -P.698-702.

121. Li Y., Jia J.H., Kong S. et al. The functional polymorphisms on promoter region of matrix metalloproteinase-12, -13 gens may alter the risk of epithelial ovarian carcinoma in Chinese. // Int. J. Gynecol. Cancer. -2009. -Vol.19(1). -P.129-133.

122. Liu S, Hou J, Zhang H, Wu Y, Hu M, Zhang L, Xu J, Na R, Jiang H, Ding Q. The evaluation of the risk factors for non-muscle invasive bladder cancer (NMIBC) recurrence after transurethral resection (TURBt) in Chinese population.// PLoS One. 2015 Apr 7;10(4).

123. LiabakkN.B., Talbot I., Smith R.A., Wilkinson K., Ballewill F. Matrix metalloproteinase 2 (MMP-2) and matrix metalloproteinase 9 (MMP-9) type IV collagenase in colorectal cancer. // Cancer Res. -1996. -Vol.56. -P.190-196.

124. Liotta L.A., Kohn E.C. The microenvironment of the tumour-host interface. // Nature. -2001. -Vol.411. -P.375-379.

125. Liotta L.A., Tryggvason K., Garbisa S. et al. Metastatic potential correlates with enzymatic degradation of basement membrane collagen. // Nature. -1980. -Vol.284. -P. 67.

126. Lipponen P.K. Expression of c-myc protein is related o cell proliferation and expression of growth factor receptors in transitional cell bladder cancer. // J. Pathol. -1995. -Vol.175. -P.203-210.

127. Lipponen P.K. Over expression of p53 nuclear oncoprotein in transitional cell bladder cancer and its prognostic value. // Int. J. Cancer. -1993. -Vol.53. -P.365-370.

128. Liukkonen T., Lipponen P., Raitanen M. et al. Prognostic value of MIB-1 score, p53, EGFr, mitotic index and papillary status in primary superficial (stage pTa/T1) bladder cancer: a prospective comparative study. // Europ. Urol. -1999. -Vol.36. -P.393-400.

129. Liu Tao, Zuo Li, Li Lin, Yin Lei, Yu Hongyuan, Jing Hongwei, Liu Yang, Kong Chuize MMP1, 2, 3, 7, and 9 Gene Polymorphisms and Urinary Cancer Risk: A Meta-Analysis.//Genet Test Mol Biomarkers. 2015 Oct 1; 19(10): 548-555.

130. Lorenzo Gomez M.F. El papel de los marcadores tumorales en la consulta de urologia para el screening, diagnostic y seguimento del cancer de vejiga. // Actas Urol Esp. -2003. -Vol.27. -P.110-116.

131. Lynch C.C., Matrisian L.M. Matrix metalloproteinases in tumor-host cell communication. // Differentiation. -2002. -Vol.70. -P.561-573.

132. Magali V.S., Ruth O., Francis F. et al. Membrane type 1 matrix metalloproteinase detection in tumors, using the lodinated endogenous tissue inhibitor 2 of metalloproteinases as imaging agent. // Cancer biotherapy and radiopharmaceuticals. -2010. -P.511-520.

133. Mallofre C., Castillo M., Morente V., Sole M. Immunohistochemical expression of CK20, p53, and Ki-67 as objective markers of urothelial dysplasia. // Mod. Pathol. -2003. -Vol.16(3). -P.187-191.

134. Malmstrom P., Busch C. et al. Recurrence, progression and survival in bladder cancer. // Scand. J. Urol. Nephrol. -1987. -Vol.2. -P.171-185.

135. Malmstrom P., Busch C. et al. Recurrence, progression and survival in bladder cancer. // Scand. J. Urol. Nephrol. -1987. -Vol.2. -P.171-185.

136. Mannello F., Tonti G., Papa S. Matrix metalloproteinase inhibitors as targets of anticancer therapeutics. // Curr. cancer drug targets. -2005. -Vol.5. -P.285-298.

137. Masayuki Kamada, Naohiko Koshikawa, Tomoko Minegishi, Chiaki Kawada, Takashi Karashima, Taro Shuin, Motoharu Seiki Urinary laminin-c2 is a novel biomarker of non-muscle invasive urothelial carcinoma// Cancer Sci.- 2015. -Vol. 106. -P. 1730-1737.

138. Margulis V., Shahrokh F. et al. Ki-67 is an independent predictor of bladder cancer outcome in patientstreated with radical cystectomy for organ-confined disease. // Clin. Cancer Res. -2006. -Vol.12(24). -P.15.

139. Mellon J.K., Lunec J., Wright C. et al. C-erb-B2 in bladder cancer: molecular biology, correlation with epidermal growth factor receptors and prognostic value. // J. Urol. -1996. -Vol.155. -P.321-326.

140. Messing E.M. Clinical implications of the expression of epidermal growth factor receptors in human transitional cell carcinoma. // Cancer Res. -1990. -Vol.50. -P.2530-2537.

141. Mikko M. et al. Human T cells stimulate fibroblast mediated degradation of extracellular matrix in vitro. // Clin. Exp. Immunol. -2008. -Vol.151(2). -P.317-25.

142. Mohammed M.A., Seleim M.F., Abdalla M.S., Sharada H.M., Abdel Wahab A.H. Urinary high molecular weight matrix metalloproteinases as noninvasive biomarker for detection of bladder cancer. //BMC Urol. 2013 May 14;13:25. doi: 10.1186/1471-2490-13-25.

143. Mungan U., Kirkali G., Celebi I., Kirkali Z. Significance of serum laminin P1 values in patients with transitional cell carcinoma of the bladder. // Urology. -1996. -Vol.48. -P.496-500.

144. Mungan U., Kirkali G., Celebi I., Kirkali Z. Significance of serum laminin P1 values in patients with transitional cell carcinoma of the bladder. // Urology. -1996. -Vol.48. -P.496-500.

145. Nakamura T. et al. Stromal metalloproteinase-9 is essential to angiogenesis and progressive growth of orthotopic human pancreatic cancer in parabiont nude mice. // Neoplasia. -2007. -Vol.9(11). -P.979-86.

146. Nastase A., Paslaru L., Niculescu A.M. et al. Prognostic and predictive potential molecular biomarkers in colon cancer. // Chirurgia (Bucur). -2011. -Vol.106(2). -P.177-185.

147. Neal D.E., Marsch C., Bennett M.K. et al. Epidermal growth factor receptors in human bladder cancer: comparison of invasive and superficial tumors. // Lancet. -1985. -Vol.1(8). -P.366-368.

148. Nozawa H. et al. Infiltrating neutrophils mediate the initial angiogenic switch in a mouse model of multistage carcinogenesis. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 2006. -Vol.103(33). -P.12493-8.

149. Nutt J.E. , Durkan G.C., Mellon J.K., Lunec J. Matrix metalloproteinases (MMPs) in bladder cancer: the induction of MMP9 by epidermal growth factor and its detection in urine.// BJU Int. 2003 Jan;91(1):99-104.

150. Offersen B.V., Knap M.M., Horsman M.R., Verheijen J., Hanemaaijer R., Overgaard J.// Matrix metalloproteinase-9 measured in urine from bladder cancer patients is an independent prognostic marker of poor survival. Acta Oncol. 2010;1283-1287

151. Ong F., Moonen L.M., Gallee M.P. et al. Prognostic factor in transitional cell cancer of the bladder: an emerging role for bcl-2 and p53. // Radioter. Oncol. -2001. -Vol.61(2). -P.169-175.

152. Otto T., Birchmeier W., Schmidt U. et al. Inverse relation of E-cadherin and autocrine motility factor receptor expression a prognostic factor in patients with bladder carcinomas. // Cancer Res. -1994. -Vol.54. -P.3120-3123.

153. Owen J.L. et al. Molecular events involved in the increased expression of matrix metalloproteinase-9 by T lymphocytes of mammary tumor-bearing mice. // Int. J. Mol. Med. -2008. -Vol.21(1). -P.125-34.

154. Ozemir E., Kakehi Y., Okuno H., Yoshida O. Role of matrix metalloproteinase-9 in the basement membrane destruction of superficial urothelial carcinomas. // J. Urol. -1999. -Vol.161. -P.1359-1363.

155. Parkin D.M. The global burden of urinary bladder cancer. // Scand. J. Urol. Nephrol. -2008. -Vol.218. -P.12-20.

156. Peng B., Cao L., Wang W. et al. Polymorphisms in the promoter regions of matrix metalloproteinases 1 and 3 cancer risk: a meta-analysis of 50 case-control studies. // Mutagenesis. -2010. -Vol.25(1). -P.45-48.

157. Perez E.C. et al. B-1 lymphocytes increase metastatic behavior of melanoma cells through the extracellular signal regulated kinase pathway. // Cancer Sci. -2008. -Vol.99(5). -P.920-8.

158. Powell W.C., Fingleton B., Wilson C.L. et al. The metalloproteinase matrilysin proteolytically generates active soluble Fas ligand and potentiates epithelial cell apoptosis. // Curr. Biol. -1999. -Vol.9. -P.1441-1447.

159. Protheroe A.S., Banks R.F., Mziba M. et al. Urinary concentrations of the soluble adhesion molecule E-cadherin and total obtain in protein in patients with bladder cancer. // Brit. J. Cancer. -1999. -Vol.80. -P.273-278.

160. Queipo Zaragoza J.A., Ruiz Cerda J.L., Palmero Marti L. et al. Prognostic value for progression of the regulating proteins of the cellular cycle in pT1G3 bladder tumors. // Actas Urol. Esp. -2005. -Vol.29(3). -P.261-268.

161. Ravery V., Colombel M., Popov Z. et al. Prognostic value of epidermal growth factor-receptor, T-138 and T43 expression in bladder cancer. // Brit. J. Cancer. -1995. -Vol.71. -P.196-200.

162. Reis S.T., Leite K.R., Piovesan L.F., Pontes-Junior J. et al. Increased expression of MMP-9 and IL-8 are correlated with poor prognosis of Bladder Cancer. // BMC Urology. -2012. -Vol.12. -P.18-25.

163. Ricci S, Bruzzese D, DI Carlo A. Evaluation of MMP-2, MMP-9, TIMP-1, TIMP-2, NGAL and MMP-9/NGAL complex in urine and sera from patients with bladder cancer.// Oncol Lett. 2015 Oct;10(4):2527-2532. Epub 2015 Aug 3.

164. Rodriguez Faba O., Palou-Redorta J. et al. Matrix metalloproteinases and bladder cancer: what is new? // Urology article. -2012. -Vol.9. -P.581-539.

165. Ross J.S., Cohen M.B. Detecting recurrent bladder cancer: new methods and biomarkers. // Expert Rev. Mol. Diagn. -2001. -Vol.1. -P.39-52.

166. Roy R., Louis G., Loughlin K. et al. Tumor-specific urinary MMP fingerprinting: identification of high molecular weight urinary MMP. // Species. Clin. Cancer Res. -2008. -Vol.14. -P.6610-6617.

167. Roy R., Zhang B., Moses M. Making the cut: protease-mediated regulation of angiogenesis. // Exp. Cell. Res. -2006. -Vol.312. -P.608-622.

168. Rundhaug J.E. Matrix metalloproteinases and angiogenesis. // J.Cell. Mol. -2005. -Vol.9. -№2. -P.267-285.

169. Salo T., Liotta L.A., Tiyggvason K. Purification and characterization of a murine basement membrane collagen degrading enzyme secreted by metastatic tumor cells. // J. Biol. Chem. -1983. -Vol.258. -P.30-58.

170. Sand J.M., Larsen L., Hogaboam C., Martinez F., Han M, Larsen R0ssel M., Nawrocki A., Zheng Q., Karsdal M.A., Leeming D.J. MMP mediated degradation of type IV collagen alpha 1 and alpha 3 chains reflects basement membrane remodeling in experimental and clinical fibrosis - validation of two novel biomarker assays. // PLoS One. 2013; 83-87.

171. Sakr S.A., Mahran H.A., Fahmy A.M., El-Kholy M.A., Meawad M. Expression of c-erb-B2 gene in bladder cancer of Egyptian patients and its correlation with p53 and bcl-2.//Biomed Pharmacother. 2015 Dec;76:73-81.

172. Sato K., Moriyama M., Mori S. et al. An immunohistologic evaluation of c-erb-B2 gene product in patients with urinary bladder carcinoma. // Cancer. -1992. -Vol.706. -P.2493-2498.

173. Seargent J.M., Loadman P.M., Martin S.W. et al. Expression of matrix metalloproteinase-10 in human bladder transitional cell carcinoma. // Urology. -2005. -Vol.65(4). -P.815-820.

174. Singh H., Jain M., Mittal B. MMP-7 (-181A>G) promoter polymorphisms and risk for cervical cancer. // Gynecol. Oncol. -2008. -Vol.110(1). -P.71-75.

175. Smith I.J., Dodd S.L. Calpain activation causes a proteasome dependent increase in protein degradation and inhibits the Akt signaling pathway in rat diaphragm muscle. // Exp. Physiol. -2007. -Vol.92(3). -P.561-573.

176. Sorimachi H., Hata S., Ono Y. Calpain chroniclean enzyme family under multidisciplinary characterization. // Proc. J. Acas. Ser. Phys. Biol. Sci. -2011. -Vol.87(6). -P.287-327.

177. Srivastava P1, Gangwar R, Kapoor R, Mittal RD. Bladder cancer risk associated with genotypic polymorphism of the matrix metalloproteinase-1 and 7 in North Indian population.// Dis Markers.- 2010.- 29(1).- P.37-46.

178. Srivastava P1, Mandhani A, Kapoor R, Mittal RD. Role of MMP-3 and MMP-9 and their haplotypes in risk of bladder cancer in North Indian cohort.// Ann Surg Oncol. -2010. - 17(11). P.3068-75.

179. Stavropoulos N.E., Filiadis I., Ioachim E. et al. Prognostic significance of p53, bcl-2 and Ki-67 in high risk superficial bladder cancer. // Anticancer Res. -2002. -Vol.22(6B). -P.3759-3764.

180. Stein J.P., Grossfeld G.D., Ginsberg D.A. et al. Prognostic markers in bladder cancer: a contemporary review of the literature. // J. Urol. -1998. -Vol.160. -P.645-659.

181. Sternlicht M.D., Bissell M.J., Werb Z. The matrix metalloproteinase stromelysin-1 acts as a natural mammary tumor promoter. // Oncogene. -2000. -Vol.19. -№8. -P. 1102-1113.

182. Sternlicht M.D., Werb Z. How matrix metalloproteinases regulate cell behavior. // Ann. Rev. Cell. Biol. -2001. -Vol.17. -P.463-516.

183. Strong J.H. Infiltrating carcinoma of the bladder: Nation of the depth of penetration of the bladder wall to incidence of local extension and metastasis. // J. Urol. -1986. -Vol.123. -P.1176-1214.

184. Su Y., Cui Z., Li Z., Block E.R. Calpain-2 regulation of VEGF-mediated angiogenesis. // The FASEB Journal. -2006. -Vol.20. -P.1443-1451.

185. Sung-Gu Kang, Young-Ran Ha, Young-Hwii Ko, Seok-Ho Kang, Kwan-Joong Joo , Hyun-Yee Cho et al. Effect of laminin 332 on motility and invasion in bladder cancer// Kaohsiung Journal of Medical Sciences.- 2013.- vol. 29.-P. 422-429.

186. Szarvas T, vom Dorp F, Ergun S, Rubben H. Matrix metalloproteinases and their clinical relevance in urinary bladder cancer.//Nat Rev Urol. 2011 May;8(5):241-54.

187. Takahashi C., Sheng Z., Horan T.P. et al. Regulation of matrix metalloproteinase-9 and inhibition of tumor invasion by the membrane-anchored glycoprotein RECK. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. -1998. -Vol.95. -P.13221-13226.

188. Takeuchi T., Hisanaga M., Nagao M. et al. The membrane-anchored matrix metalloproteinase (MMP) regulator RECK in combination with MMP-9 serves as an information prognostic indicator for colorectal cancer. // Clin. Cancer Res. -2004. -Vol.10. -P.5572-5579.

189. Talvensaari-Mattila A., Turpeenniemi-Hujanen. Preoperative serum MMP-9 immunoreactive protein is a prognostic indicator for relapse-free survival in breast carcinoma. // Cancer Let. -2005. -Vol.20. -P.237-242.

190. Tasci AI1, Tugcu V, Ozbek E, Ozbay B, Simsek A, Koksal V. A single-nucleotide polymorphism in the matrix metalloproteinase-1 promoter enhances bladder cancer susceptibility.// BJU Int. -2008.-101(4).-P. 503-7.

191. Tena-Suck M.L., Alarcon A., Rosl F. et al. E-cadherin expression in male urethral smears and correlation with PCR-based detection of human papillomavirus infection. // Diagnostic cytopathology. -2010. -Vol.38(8). -P.583-589.

192. Tibor S., Dorp F., Ergun S., Rubben H. Matrix 20 metalloproteinases and their clinical relevance in urinary bladder cancer. // Nature reviews. Urology. -2011. -Vol.8. -P.241-254.

193. Tibor S., Vom Dorp F., Ergun S., Rubben H. Matrix metalloproteinases and their clinical relevance in urinary bladder cancer. // Nature reviews. Urology. -2011. -Vol.8(5). -P.241-254.

194. Tiguert R., Fradet Y. New diagnostic and prognostic tools in bladder cancer. // Curr. Opin. Urol. -2002. -Vol.12. -P.239-243.

195. Tsuji M., Kojima K., Muraka Y., Kanayama H., Kagawa S. Prognostic value of ki-67 antigen and p53 protein in urinary bladder cancer: immunohistochemical analysis of radical cystectomy specimens. // British journal of urology. -1997. -Vol.79. -P.367-372.

196. Todenhofer T., Hennenlotter J., Guttenberg P., Mohrhardt S., Kuehs U., Esser M., Aufderklamm S., Bier S., Harland N., Rausch S., Gakis G., Stenzl A., Schwentner C. Prognostic relevance of positive urine markers in patients with negative cystoscopy during surveillance of bladder cancer.// BMC Cancer. 2015 Mar 19;15:155.

197. Urquidi V., Chang M., Dai Y. et al. IL-8 as a urinary biomarker for the detection of bladder cancer. // BMC Urology. -2012. -Vol.12. -P.12.

198. Urquidi V., Rosser C. J., Goodison S. Molecular Diagnostic Trends in Urological Cancer: Biomarkers for Non-Invasive Diagnosis.// Curr Med Chem. 2012 Aug 1; 19(22): 3653-3663.

199. Vaidya A., Soloway M., Hawke C. et al. De novo muscle invasive bladder cancer: is there a change in trend? // J. Urol. -2001. -Vol.165. -P.47-62.

200. Van Kempen L.C. et al. Epithelial carcinogenesis: dynamic interplay between neoplastic cells and their microenvironment. // Differentiation. -2002. -Vol.70(9-10). -P.610-23.

201. Vandooren J., Van den Steen P.E., Opdenakker G. Biochemistry and molecular biology of gelatinase B or matrix metalloproteinase-9 (MMP-9): The next decade.// Crit Rev Biochem Mol Biol. 2013;48:222-272.

202. Visse R., Nagase H. Matrix metalloproteinases and tissue inhibitors of metalloproteinases: structure, function and biochemistry. // Circ. Res. -2003. -Vol.92. -P.827-839.

203. Wallard M.J., Pennington C.J., Veerakumarasivam A. et al. Comprehensive profiling and localization of the matrix metalloproteinases in urothelial carcinoma. // Br. J. Cancer. -2006. -Vol.94. -P.569-577.

204. Werb Z. ECM and cell surface proteolysis: regulating cellular ecology. // Cell. -1997. -Vol.91. -P. 439-442.

205. Wiegand S., Dunne A. A., Muller H. H. et al. Metaanalysis of the significance of matrix metalloproteinases for lymph node disease in patients with head and neck squamous cell carcinoma. // Cancer. -2005. -Vol.104. -P.94-100.

206. Wieczorek E., Reszka E., Jablonowski Z., Jablonska E., Beata Krol M., Grzegorczyk A., Gromadzinska J., Sosnowski M., Wasowicz W. Genetic polymorphisms in matrix metalloproteinases (MMPs) and tissue inhibitors of MPs (TIMPs), and bladder cancer susceptibility. // BJU Int. 2013.

207. Wieczorek E., Jablonowski Z., Tomasik B., Konecki T., Jablonska E., Gromadzinska J., Fendler W., Sosnowski M., Wasowicz W., Reszka E.MMP, VEGF and TIMP as prognostic factors in recurring bladder cancer.// Clin Biochem. 2015 Dec;48(18):1235-40.

Wu T.T., Chen J.H., Lee Y.H., Huang J.K. The role of bcl-2, p53, and Ki-67 index in predicting tumor recurrence for low grade superficial transitional cell bladder carcinoma. // J. Urol. -2000. -Vol.163(3). -P.758-760.

208. Wu Deyao, Ding Jingjing, Wang Linmao, Pan Xuixing, Ping Qu. MicroRNA-125b inhibits cell migration and invasion by targeting matrix metallopeptidase 13 in bladder cancer.// Oncol Lett. 2013 Mar; 5(3): 829-834

209. Wu Y.P., Lin T.T., Chen S.H., Xu N., Wei Y., Huang J.B., Sun X.L., Zheng Q.S., Xue X.Y., Li X.D. Comparison of the efficacy and feasibility of en bloc transurethral resection of bladder tumor versus conventional transurethral resection of bladder tumor: A meta-analysis.// Medicine (Baltimore). 2016 Nov; -P127-154.

210. Xu J, Zhu D, Sonoda S, He S, Spee C, Ryan SJ, et al. Over-expression of BMP4 inhibits experimental choroidal neovascularization by modulating VEGF and MMP-9. Angiogenesis. 2012;15:213-27

211. Yan Y., Liang H., Li T., Li M., Li R., Qin X, Li S. The MMP-1, MMP-2, and MMP-9 gene polymorphisms and susceptibility to bladder cancer: A meta-analysis. // Tumour Biol. 2014;35:3047-3052.

212. Yulan Yan, Hongjie Liang, Taijie Li, Meng Li, Ruolin Li, Xue Qin,Shan Li. The MMP-1, MMP-2, and MMP-9 gene polymorphisms and susceptibility to bladder cancer: a meta-analysis.// Tumour Biol. 2014 Apr; 35(4): 3047-3052.

213. Zaher A., Sheridan T. Tumor markers in the detection of recurrent transitional cell carcinoma of the bladder: a brief review. // Acta Cytol. -2001. -Vol.45. -P.575-581.

214. Zhang G., Miyake M., Lawton A., Goodison S., Rosser C.J. Matrix metalloproteinase-10 promotes tumor progression through regulation of angiogenic and apoptotic pathways. // Accepted BMC Cancer. 2014.

215. Zhang J., Liu H., Zhu R., Hinterdorfer P., Zhang B., Tang J.

Single molecular dissection of the ligand binding property of epidermal growth factor receptor. //Analyst. 2013 Sep 21;138(18):5325-31.

216. Zhao B, Wang Q, Lei Y, Zhang G, Li R, Song Z. Study on the expression of MMP-9 and CD34 in bladder urothelial carcinoma and their correlation.// J Clin Res. 2014;31:1518-1521.

217. Zheng XY, Pang X, Wang FJ, Zhu ZQ. Expression of CXCR4 and MMP-9 in bladder transitional cell carcinoma tissue.// Xian Dai Sheng Wu Yi. 2012;12:5255-5260