Молекулярно-биологическая и вирусологическая характеристика вируса лихорадки долины рифт и создание тест-систем для диагностики этой инфекции тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.03, кандидат биологических наук Белов, Артем Владимирович

• Белов, Артем Владимирович
• кандидат биологических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Белов, Артем Владимирович

Список сокращений.

Введение.

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. Эпидемиология ЛДР.

2. Клиника, патогенез ЛДР.

3. Систематическое положение, морфология, молекулярно-биологическая характеристика В ЛДР.

4. Молекулярные аспекты эволюции и филогенетика В ЛДР.

5. Лабораторная диагностика ЛДР.

6. Профилактика и лечение ЛДР.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Молекулярно-биологическая и вирусологическая характеристика вируса лихорадки долины рифт и создание тест-систем для диагностики этой инфекции»

Лихорадка долины Рифт (ЛДР) - это зоонозная, особоопасная вирусная инфекция, распространенная во многих странах Африки и Ближнего Востока. Вирус ЛДР относится к роду Phlebovirus семейства Bunyaviridae. Он обладает выраженной патогенностью для человека и многих видов диких и домашних копытных животных. В эндемичных регионах заболеваемость ЛДР регистрируется в виде спорадических случаев, эпидемических вспышек крупных эпидемий и эпизоотий.

У человека болезнь в основном проявляется как гриппоподобная лихорадка и в большинстве случаев заканчивается выздоровлением. Средний уровень летальности составляет приблизительно 3%, однако развитие отягченных форм заболевания, сопровождающихся геморрагическим синдромом, некрозом печени и менингоэнцефалитами, приводит к резкому увеличению летальности (до 30%). Такие осложненные формы ЛДР наиболее часто наблюдаются во время эпидемий, которым предшествовали эпизоотии среди домашних животных [63].

Лихорадка передается через укусы комаров, при контакте с тканями и кровью заболевших животных, а также аэрогенным путем при вдыхании вируссодержащих аэрозолей. По этим причинам, группу наибольшего риска заболевания ЛДР составляют фермеры, ветеринары, пастухи, работники скотобоен и лабораторный персонал, осуществляющий манипуляции с вирусом [47].

Развитие эпизоотий и эпидемий, интервал между которыми составляет несколько лет, связано с выпадением обильных осадков, когда происходит массовое размножение комаров [55].

Крупные эпидемии и эпизоотии были* зарегистрированы в ЮАР (1974-75 гг.), Египте (1977-78 гг.), Мавритании (1987 г.), на Мадагаскаре (1991 г.), в Кении (1997 г.), в Саудовской Аравии и Йемене (2000-01 гг.) [14]. Во время масштабной эпидемии в Египте в 1977-78 годах было зарегистрировано 18000 случаев ЛДР с 600 летальными исходами [63]. В Саудовскую Аравию и Йемен, впервые за пределы Африки, вирус распространился, вероятно, с инфицированным домашним скотом из Восточной Африки или был перенесен комарами [59].

Лихорадка долины Рифт наносит огромный экономический ущерб сельскому хозяйству, так как обуславливает высокую гибель молодняка, а также приводит к возникновению абортов у 80-100% больных животных [63].

Наряду с другими нозологическими формами вирусных геморрагических лихорадок ЛДР относится к категории карантинных инфекций и требует особого внимания к завозу этого заболевания из эндемичных регионов инфицированными лицами. Импорт копытных животных также может быть причиной интродукции вируса ЛДР на неэндемичные территории. Наконец, вирус ЛДР рассматривается (наряду с вирусами других геморрагических лихорадок) в качестве агента высшей категории «А» для применения в биотеррористических целях [29].

В связи с вышеперечисленными обстоятельствами разработка и совершенствование методов специфической диагностики и средств лечения ЛДР на основе всестороннего изучения свойств вируса ЛДР представляются актуальными направлениями для науки и практики, учитывая факт отсутствия отечественных диагностических и лечебных препаратов.

Цели и задачи исследования

Цели настоящего исследования заключались:

- в проведении филогенетических исследований референтного штамма Entebbe вируса ЛДР;

- в создании отечественных тест-систем на основе совмещенных реакций обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР), и иммуноферментного анализа (ИФА) для диагностики ЛДР;

- в изучении действия лекарственных препаратов на цитопатогенную активность вируса ЛДР.

Для достижения этих целей были поставлены следующие задачи:

1. Культивировать и идентифицировать штамм Entebbe вируса ЛДР из коллекции лаборатории биологии и индикации арбовирусов.

2. Определить полную нуклеотидную последовательность гена Gn референтного штамма вируса ЛДР. Определить филогенетические связи референтного штамма Entebbe вируса ЛДР с другими штаммами этого вируса на основе анализа нуклеотидных последовательностей участка гена Gn. Проанализировать аминокислотные замены в антигенных эпитопах гликопротеина Gn у близких к референтному штаммов;

3. Разработать тест-системы «гнездового» варианта ОТ-ПЦР и ОТ-ПЦР в реальном времени для диагностики ЛДР, отработать условия ПЦР на референтном штамме. Определить чувствительность и специфичность разработанных тест-систем.

4. Сконструировать генно-инженерный положительный контроль для использования в тест-системах ПЦР.

5. Разработать тест-систему ИФА для выявления антигена вируса ЛДР, определить ее чувствительность и специфичность. Сравнить чувствительность ИФА и ПЦР тест-систем.

6. Изучить действие отечественного препарата «рибавирин», синтезированного в Институте биоорганической химии с помощью нового биотехнологического метода, и производных данного препарата на цитопатогенную активность вируса ЛДР.

Научная новизна и практическая значимость

1. Проведены филогенетические исследования референтного штамма Entebbe вируса ЛДР из коллекции лаборатории биологии и индикации арбовирусов. Установлены значимые различия в аминокислотных последовательностях антигенных эпитопов гликопротеина Gn у двух линий штамма Entebbe и аттенуированного штамма Smithburn вируса ЛДР, что можно объяснить различиями в условиях культивирования этих штаммов.

2. Созданы отечественные тест-системы «гнездового» варианта ОТ-ПЦР и ОТ-ПЦР в реальном времени для диагностики ЛДР с использованием оригинальных праймеров. Тест-системы для диагностики лихорадки долины Рифт могут быть использованы в диагностических лабораториях и ветеринарных хозяйствах. Разработанные тест-системы прошли сертификацию во Всероссийском Государственном центре качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов (ВГНКИ). Подготовлены проекты стандартов организации (СТО) и наставления для данных тест-систем.

3. Сконструирован генно-инженерный положительный контроль для использования в тест-системах ПЦР.

4. Разработана .и охарактеризована тест-система ИФА для выявления антигена вируса ЛДР. Подготовлены компоненты, необходимые для создания тест-систем ИФА для выявления антител классов М и G к вирусу ЛДР.

5. В опытах in vitro на модели вируса ЛДР впервые проведено изучение противовирусной активности отечественного препарата «рибавирин» и его производных, полученных в Институте биоорганической химии при помощи нового биотехнологического метода. Отечественный рибавирин, в отличие от тестированных серий его производных, обладал выраженным противовирусным действием.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Филогенетический анализ нуклеотидных последовательностей участка гена Gn (736 нуклеотидных оснований) штаммов вируса ЛДР показал, что наиболее близким к штамму Entebbe является штамм Lunyo. Показано различие аминокислотных последовательностей антигенных эпитопов гликопротеина Gn у двух линий штамма Entebbe и аттенуированного штамма Smithburn.

2. Разработаны чувствительные и специфичные тест-системы ОТ-ПЦР и ОТ-ПЦР в реальном времени для выявления РНК вируса ЛДР. Чувствительность обоих диагностикумов составила 7 БОЕ.

3. Сконструирован генно-инженерный положительный контроль для использования в тест-системах ПЦР, представляющий собой бактериальную плазмиду со вставкой фрагмента гена нуклеокапсидного белка N вируса ЛДР.

4. Разработана и охарактеризована высокоспецифичная тест-система ИФА для выявления антигена вируса ЛДР. Ее чувствительность составила 2,1хЮ БОЕ, то есть оказалась на порядок ниже чувствительности тест-систем ПЦР.

5. Исследована (противовирусная, активность отечественного препарата «рибавирин», синтезированного с использованием нового биотехнологического метода. Показано, что данный препарат эффективно подавляет цитопатогенную активность вируса ЛДР в культуре клеток Vero Е6. Индекс противовирусной активности рибавирина составил 4,0 lglin/ko при максимальной концентрации препарата (1000 мкг/мл). Наряду с этим, испытанные серии производных рибавирина не обладали противовирусной активностью в отношении вируса ЛДР.

Апробация работы

Основные результаты работы были представлены на международной конференции «Профилактика, диагностика и лечение заболеваний, общих для людей и животных» (Ульяновск, 21-23 июня 2006 г.) и на расширенном пленуме проблемной комиссии «Арбовирусы» и научно-практической конференции «Арбовирусы и арбовирусные инфекции» (Астрахань, 17-20 октября 2006 г.). •

Материалы диссертации были доложены и рассмотрены на совместном заседании отдела молекулярной вирусологии и апробационного совета ГУ НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского РАМН 13 сентября 2007 г.

Публикации

По результатам диссертации опубликовано 2 статьи в центральных научных журналах и 3 тезисов докладов в сборниках конференций.

Объем и структура диссертации Диссертация состоит из Введения, Обзора литературы, 6 глав Собственных исследований, Обсуждения результатов, Выводов и Списка литературы (10 отечественных, 97 зарубежных авторов). Объем работы составляет 108 страниц машинописного текста, иллюстрированного 8 таблицами и 11 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Молекулярная биология», Белов, Артем Владимирович

ВЫВОДЫ

1. В результате филогенетического анализа нуклеотидных последовательностей участка гена Gn (736 нуклеотидных оснований) референтного штамма Entebbe и 40 других африканских изолятов вируса ЛДР было показано, что штамм Entebbe из коллекции лаборатории биологии и индикации арбовирусов наиболее близок другому угандийскому штамму Lunyo. Показаны значимые различия в аминокислотных последовательностях антигенных эпитопов поверхностного гликопротеина Gn у близких штаммов вируса ЛДР: Smithburn (аттенуированный вариант штамма Entebbe) и двух линий штамма Entebbe: из лаборатории биологии и индикации арбовирусов и из CDC (Атланта, США).

2. С использованием оригинальных олигонуклеотидных праймеров созданы высокоспецифичные тест-системы «гнездового» варианта ОТ-ПЦР и ОТ-ПЦР в реальном времени для детекции РНК вируса ЛДР. Их специфическая чувствительность составила 7 БОЕ.

3. Для использования в тест-системах ПЦР сконструирован генно-инженерный положительный контроль, представляющий собой плазмиду pGEM-T Easy со вставкой фрагмента гена нуклеокапсидного белка N вируса ЛДР.

4. Разработана и охарактеризована тест-система ИФА для обнаружения антигенов вируса ЛДР, обладающая выраженной специфичностью и чувствительностью, эквивалентной 2,1x10 БОЕ. Специфические компоненты, используемые в этой тест-системе, являются основой для создания тест-систем ИФА. для'выявления антител IgM и IgG к вирусу ЛДР в крови больных людей и животных.

5. В опытах in vitro на модели вируса ЛДР установлена выраженная противовирусная активность оригинального отечественного препарата «рибавирин». Индексы его противовирусной активности варьируют от 2,0 lgUn^o (при концентрациях препарата 62,5 - 250 мкг/мл) до 4,0 ^ЦПД5о при концентрации 1000 мкг/мл). Тестированные производные рибавирина (метилрибавирин и метил-2'-дезоксирибавирин) не обладают противовирусной активностью даже при максимальной концентрации.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Белов, Артем Владимирович, 2007 год

1. Дроздов С.Г. Лихорадка долины Рифт // ЖМЭИ. 1984, №1. - с.3-8.

2. Гребенникова Т.В. Метод ПЦР в диагностике и мониторировании лечения инфекционных заболеваний // Методические указания для студентов медицинского факультета РУДН. М., 2005. - С.21-23.

3. Константинова И.Д., Есипов Р.С., Муравьева Т.И., Таран С.А., Веревкина К.Н., Гуревич А.И., Феофанов С.А., Мирошников А.И. Способ получения 1-(3-0-рибофуранозил-1,2,4-триазол-3-карбоксамида (Рибавирина). // Патент РФ № 2230118 от 21.08.2002.

4. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование: Пер. с англ. М.: Мир, 1984. - 480 с.

5. Методические' рекомендаций по диагностике и профилактике тропических вирусных геморрагических лихорадок. М., 1980, с. 1-20.

6. Общая и частная вирусология // Под. ред. В.М. Жданова и С.Я. Гайдамович. М., Медицина, 1982, 517 с.

7. Руководство по тропическим болезням / Под ред. А.Я. Лысенко. 4-е издание. -М.: Медицина, 1983, 512 с.

8. Сюрин В.Н., Самуйленко А.Я., Соловьев Б.В., Фомина И.В. Вирусные болезни животных. М., ВНИТИБП, 1998. - 928 с.

9. Яскович Г.А., Яковлева Е.П. Микробиологический синтез виразола иммобилизованными-клетками'//Прикладная биохимия и микробиология. -1999.-Т. 35, №27, С.146-149.

10. An Rift Valley fever epidemic in Southern Mauritania / Jouan A., Le Suenno В., Digoutte J. et al. // Ann. Inst. Pasteur Virol. 1988. - V.139, N.3. -P.307-308.

11. Anderson G.W. and Smith F.J. Immunoelectron microscopy of Rift Valley fever viral morphogenesis in primary rat hepatocytes // Virology. 1987. - V. 161, N.l -P.91-100.

12. Anderson G.W. and Peters C.J. Viral determinants of virulence for Rift Valley fever in rats // Microb. Pathol. 1988. - V.5, N.4. - P.241-250.

13. Balkhy H.H. and Memish Z.A. Rift Valley fever: an uninvited zoonosis in the Arabian peninsula // Int. J. of Antimicrob. Agents. 2003. - V.21. - P.153-157. ' ' ' . " Л '■:>■

14. Becerra S.P., Rose J.A., Hardy M., Baroudy B.M., Anderson C.W. Direct mapping of adeno-associated virus capsid proteins В and C: a possible ACG initiation codon // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1985. - V.82. - P.7919-7923.

15. Billecocq A., Spiegel M., Vialat P., Kohl A., Weber F., Bouloy M., Haller 0. NSs protein of Rift Valley fever virus blocks interferon production by inhibiting host gene transcription // J. of Virology. 2004. - V.78. - N.l8. -P.9798-9806.

16. Bishop D.U.L. The Senetic Basis for Describing viruses as species // Intervirology. 1985. - N.24. - P.79-93.

17. Bishop D.U.L. and Beaty B.J. Molecular and biochemical studies of the evolution infection and transmission of insect bunyaviruses // Phil. Trans. Roy. Soc. London B. 1988. - V.321, N.1207. - P.463-483.i.\ (i^iil i\ .; i ni i I.

18. Bishop D.H., Gay M.E., Matsuoko Y. Nonviral heterogeneous sequences are present at the 5' ends of one species of snowshoe hare Bunyavirus S complementary RNA //Nucleic Acids Res. 1983. - V.ll, N.18. -P.6409-6418.

19. Bouloy M., Plotch S.J., Krug R.M. Globin mRNAs are primers for the transcription of influenza viral RNA in vitro // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. -1978. V.75, N.10. - P.4886-4890.

20. Broom J.C. and Findlay G.M. Complement fixation in Rift Valley fever // Lancet. 1931. - N.l. - P.609-611.

21. Brown J.L., Dominik J.W., Morrissey R.L. Respiratory infectivity of a recently isolated Egyptian strain of Rift Valley fever virus // Infection and Immunity. 1981. - V33, N.3. - P. 848-852.

22. Bunyaviruses and Bunyaviridae / Porterfield J.S., Casals J., Chumakov M.P., Gaidamovich S.Y. et al.'// Ihtervirology. 1975/76, N.6. - P. 13-24.

23. Bunyaviridae. Bishop D.U.L., Calisher C.U., Casals G.P., Chumakov M.P., Gaidamovich S.Y. // Intervirology. 1980. - V.14. - P.125-143.

24. Bunyaviridae: the viruses and their replication. Shmaljohn C.S., Hooper J.W. / Field's Virology. Philadelphia, 2001. - P.1581-1602.

25. Clarke D.U., Casals J. Techniques for hemagglutination and hemagglutination-inhibition with arthropod-borne viruses // Ann. J. Trop. Med. Hyg. 1958. -N.7. -P.562-573.

26. Collett M.S. Messenger RNA of the M segment RNA of Rift Valley fever virus // Virology: 1986.- V.l51; -РЛ51-156.

27. Crimean-Congo Hemorrhagic fever. A global perspective / Ed. by Ergonul 0. and Whitehouse C.A. Springer, the Netherlands. - 2007. - P.4.

28. Curran J. and Kolakofsky D. Ribosomal initiation from an ACG codon in the Sendai virus P-C mRNA // EMBO J. 1988. - V.7. -P.245-251.

29. Daubney R., Hudson J.R. and Garuham P.C. Epizootic hepatitis of Rift Valley fever an undescribed virus disease of sheep, cattle and Nan from East Africa // J. of Pathol, and Bacteriol. 1931. - V.34. - P.545-579.

30. Dewey R.A., Semorile L.C., Grau O., Crisci J.V. Cladistic analysis of Tospovirus using molecular characters // Mol. Phylogenet. Evol. 1997. - V.8. -P. 11-32.

31. Digoutte J.P., Present status of an arbovirus infection: yellow fever, its natural history of hemorrhagic fever, Rift Valley fever // Bull. Soc. Pathol. Exot. -1999.-V.92.-P. 343-348.

32. Eisa M. and Obeid H.M. Rift Valley fever in the Sudan // Bull, of An. Health and Product in Africa. -1977. V.24. - P.349-355.

33. Eisa M. and Obeid H.M. Isolation and identification of the virus from a recent epizootic in Kosti District 1973 // Bull, of An. Health and Product in Africa. - 1977. - V.24. - P.343-347.

34. Elliott R.M. The Bunyaviridae. New York, Plenum Press, 1996,1250p.

35. El Mekki, van der Groen. Detection of Rift Valley fever by the fluorescent antibody technique. in .organs-^of.experimentally infected animals // J. Virol. Methods. 1981. -N.3. - P.61-63.

36. Findlay S.U. Rift Valley fever or enzootic hepatitis // Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 1931. - V.25. - P.229.

37. Gerdes G.H. Rift Valley fever// Vet. Clin. North. Am. Food. Anim. Pract. -2002. V. 18. -1^.549-555.

38. Gerrard S.R. and Nichol S.T. Characterization of the Golgi retention motif of Rift Valley fever virus GN glycoprotein // J. of Virology. 2002. - V.76, N.23. -P.12200-12210.

39. Gerrard S.R. and Nichol S.T. Synthesis, proteolytic processing and complex formation of N-terminally nested precursor protein of Rift Valley fever virus glycoproteins // Virology. 2006. - in press.

40. Gupta K.C. and Patwardhan S. ACG, the initiator codon for Sendai virus protein//J. Biol.1 Chem. 1988. - V.263. -P.8553-8556.

41. Hann S.R., King W., Bentley D.L., Anderson C.W., Eisenman R.N. A non-AUG translation initiation in c-myc exon 1 generates an N-terminally distinct protein whose synthesis is disrupted in Burkitt's lymphomas // Cell. 1988. -V.52. -P.185-195.

42. Hoogstraal H., Meegan J.M., Khalil G.M., Adham F.K. The Rift Valley fever epizootic in Egypt 1977-78. Ecological and entomological studies // Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 1979. - V.73, N.6. - P.624-629.

43. Ikegami Т., Won S., Peters C.J., Makino S. Rift Valley fever virus NSs mRNA is transcribed)from an incoming anti-viral-sense S RNA segment // J. of Virology. 2005. - V.79, N.18. - P. 12106-12111.

44. Ikegami Т., Peters C.J., Makino S. Rift Valley fever virus nonstructural protein NSs promotes viral RNA replication and transcription in a minigenome system // J. of Virology. 2005. - V.79, N.9. - P.5606-5615.

45. Kashula V.R. Rift Valley fever as a veterinary and medical problem // J. Amer. Vet. Med. Assoc. 1957.-V.131, N.5. -P.219-221.

46. Keegan К. and Collett M.S. Use of bacterial expression cloning to define the amino acid sequences of antigenic determinants on the G2 glycoprotein of Rift Valley fever virus // J. of Virology. 1986. - V.58, N2. - P.263-270.

47. Kouka Saad El Din, Abdel-Wahab, El Bar L.M. Rift Valley fever virus infections in Egypt pathological and virological bindings in man // Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 1979. - V.72, N.4. - P.392-396.

48. Legatsas G. and Weiss K.E. Electron microscopic studies on BHK-21 cells infected with Rift Valley fever virus // Arch. Gesamte Virusforsch. 1968. - V.25, N.1.-P.58-64.

49. Le May N., Dubaele S., De Santis L.P., Billecocq A., Bouloy M., Egly J-M. TFIIH transcription factor, a target for the Rift valley hemorrhagic fever virus // Cell. 2004. - V. 116. - P.541-550.

50. Lupi 0., Tyring S.K. Tropical dermatology: viral tropical diseases // J. Am. Acad. Dermatol. 2003. - V.49, N.6. - P.989-1000.

51. Mahy B.W. Zoonoses and hemorrhagic fever // Dev. Biol. Stand. 1998. -V.93. -P.31-36.

52. Matumoto M., Iwrsa S., Endo M. Complement fixation reaction of Rift valley fever virus // Jap. J. Exp. Med. -1950. V.20. - V.20. - P.501-558.

53. Mear S.A., Swanepoel R. and Gelfand M. Rift valley fever encephalitis. A description of a case // Cent. Afr. Med. 1979. - V.25. - P.8-11.

54. Miller B.R., Godsey M.S., Crabtree M.B. et al. Isolation and genetic characterization of RVFV from Aedes vexans arabiensis, Kingdom of Saudi Arabia // Emerg. Inf; Dis.- 2002. V.8-'Ш2. - P. 1492-1494.

55. Mims C.A. and Mason P.J. Rift valley fever in mice. The properties of a hemagglutinin present in infective serum // Brit. J. Exp. Path. 1956. - V.37. -P.423-433.

56. Morbill J.C., Jennings G.B., Caplan H., Turell M.J. Pathogenecity and immunogenecity of a mutagen-attenuated Rift Valley fever virus immunogen in pregnant ewes // J. Vet. Res. 1987. - V.48. - P. 1042-1047.

57. Nabeth P., Kane Y., Abdalahi M.O., Diallo M. et al. Rift Valley fever outbreak, Mauritania, 1998: seroepidemiologic, virologic, entomologic and zoologic investigations. // Emerg. Infect. Dis. 2001. - V.7. - P.1052-1054.

58. Niklasson B. Rift valley fever. Evaluation of a vaccine and development of rapid diagnostic tests. Stockholm, 1984. - 124 p.

59. Niklasson В., Meadors G.F., Peters C.J. Active and passive immunization against Rift Valley fever virus infection in Syrian hamsters // Acta Pathologica, Microbiol, et Immunol. Scandinavica. 1984. - V.92, N.4. - P. 197-200.

60. Niklasson В., Grandien M., Peters C.J., Sargan T.P. Detection of Rift Valley fever virus antigen by Enzyme-linked immunosorbent assay // J. Clin. Microbiol.-1983.-.V.17,N.6.^.1026.1031.

61. Niklasson В., Meegan G.M., Bengtsson B. Antibodies to Rift Valley fever in Swedish soldiers in Egypt and the Sinai Scand // J. Infect. Dis. 1979. - N.l 1. -P.313-318.

62. Patterson J.L., Kolakofsky D // Characterization of La Crosse virus small-genome transcripts // J. Virol. 1984. - V.49, N.3. - P.680-685.

63. Peters C.J. and Anderson G.W. Pathogenesis of Rift Valley fever // Contributions to Epidemiology and Biostatistics. 1981, N.3. - P.21-41.

64. Peters C.J., Jones D., Trotter R., Donaldson J. Experimental Rift Valley fever in rhesus macaques // Arch. Virol. 1988. - V.99, N.l-2. - P.31-34.

65. Peters C.J., Liu C.T., Anderson G.W., Morril J.C., Jahrling P.B. Pathogenesis of viral hemorrhagic fevers: Rift Valley fever and Lassa fever contrasted // Rev. of Inf. Dis. 1989. - V.l 1, Suppl.4. - 743-749.

66. Pini A., Lund L.J., Davies F.A. Detection of Rift Valley fever virus by the fluorescent antibody technique in'brgans' of experimentally infected animals // Res. Vet. Sci. 1970. - V. 11. - P.80.

67. Poelwijk F., Prins M., Goldbach R. Completion of the impatiens necrotic spot virus genome sequence and genetic comparison of the L proteins within the family Bunyaviridae // J. Gen. Virol. 1997. - V.78. - P.543-546.

68. Prats H., Kaghad M., Prats A.C. et al. High molecular mass forms of basic fibroblast grouth factor are initiated by alternative CUG codons // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1989. - V.86. - P.1836-1840.

69. Randall R., Gibbs C.J., Anlisio C.G., Binn L.N. The development of a formalin-killed Rift Valley fever vaccine for use in man // J. Immunol. 1962. -V.98, N.5.-P.660-671.

70. Rapid detection of Rift Valley fever virus antigen in the serum of infected lambs / C.J. Peters, W.U. Ennis, M.J. Turell // Res. Virol. 1989. - V. 140, N.l. -P.43-46.

71. Rapid diagnosis of Rift Valley fever. A comparison of methods for the direct detection of viral antigen in human sera / J. Meegan, B. Le Guenno, T. Ksiazek // Res. Virol. 1989. - V.140, N.l. - P.59-65.

72. Rift Valley fever, among\domesticv animals in the recent West African outbreak / T.G. Ksiazek, A. Jouan, J.M. Meegan // Res. Virol. 1989. - V.140, N.l. -P.67-77.

73. Rift Valley fever an emerging human and animal problem. World Health Organization. Geneva, 1982. - 1-67 p.

74. Rift Valley fever studies // Egypt Morbidity and Mortality weekly report. -1980. V.28, N.51. - P.617.

75. Rift Valley fever infections in Egypt pathological and virological findings in men / K.S.E. Abdel-Wahab, L.M. El-Baz, E.M. El Tayeb et al. // Trans. R. Soc. Trap. Med. Hyg. 1978. - V.72v-P.392-396.

76. Rossi C.A. and Turell M.J. Characterization of attenuated strains of Rift Valley fever virus // J. Gen. Virol. 1988. - V.69, N.4. - P.817-823.

77. Sail A.A., Zanotto P.M., Sene O.K., Zeller H.G., Digoutte J.P., Thiongane Y., Bouloy M. Genetic reassortment of Rift Valley fever virus in nature // J. of Virology.-1999. V.73,N;10. - P.8196-8200.

78. Sail A.A., Thonnon J., Sene O.K. Single tube and nested RT-PCR for detection of RVFV in human and animal sera // J. Virol. Methods. 2001. - V.91. -P.85-92.

79. Sail A.A., Macondo E.A., Sene O.K., Diagne M. et al. Use of RT-PCR in early diagnosis of Rift Valley fever // Clin, and Diagn. Lab. Immunol. 2002. -V.9, N.3. - P.713-715.

80. Shawky S. Rift Valley fever // Saudi Med. J. 2000. - V.21. - P.1109-1115.

81. Scherer W.F., Eddy G.A., Monath T.P. et al. Laboratory safety for arboviruses and certain other viruses of vertebrates // Am. J. Trop. Med. Hyg. -1980. V.29, N.6.-P.1359-1381.

82. Shimshony A. and Bazzilai R. Rift Valley fever // Adv. Vet. Sci. сотр. Med. New York. 1983. - V.21. - P.347-425.

83. Shirae H., Yokozeki K., Kubota K. Enzymatic production of ribavirin // Agric. Biol. Chem. 1988. - V. 52, N. 1. - P.295-296.

84. Shoemaker Т., Boulianne C., Vincent M.J. et al. Genetic analysis of viruses associated with emergence of RVF in Saudi Arabia and Yemen, 2000-01 // Emerg. Inf. Dis. -2002. V.8, N.12. -P.1415-1420.

85. Shope R.E., Meegan J.M., Peters C.J. Rift Valley fever / Eds T.A. Swartz, M.A. Kligberg, N. Goldblum. Basel, 1981.42-52p.

86. Shope R.E., Peters C.J., Walker J.S. Serological relation between Rift Valley fever virus and virus of phlebotomus fever serogroup // Lancet. 1980. -V.19, N.4. -P.886-887.

87. Shortridge K.F. Hemagglutination of trypsin-modified human erythrocytes by Chagres virus // Arch. Virol. 1976. - V.52. - P.181-186.

88. Sidwell R.W. and Smee D.F. Viruses of the Bunya- and Togaviridae families: potential as bioterrorism agents and means of control // Antiviral. Res. -2003. V.57. -P.101-111.

89. Sidwell R., Huffman H., Barnett B.B., Pifat D.Y. In vitro and in vivo Phlebovirus inhibition by ribavirin // Antimicrob. Agents and Chemotherapy. -1988. V.32, N.3. - P.331-336.

90. Smithburn K.C. Rift Valley fever: the neurotropic adaptation of virus and experimental use of this modified virus as a vaccine // Brit. Exp. Pathol. 1949. -V.30.-P.1-8.

91. Suzich J.A., Collett M.S. Rift Valley fever virus M segment: cell-free transcription and translation of virus-complementary RNA // Virology. 1988. -V.164. -P.478-486.

92. Suzich J.A., Kakach L.T., Collett M.S. Expression strategy of a phlebovirus: biogenesis of proteins from the Rift Valley fever virus M segment // J. Virol. 1990. - V.64. - P.1549rl555.

93. Swanepoel R. Studies on the epidemiology of Rift Valley fever // J. S. Afr. Assoc. 1976. - V.47, N.2. - P.93-94.

94. Swanepoel R., Blackburn N.K., Efstrationsend J.B. Studies of Rift Valley fever in some African murids (Rodentia: Muridae) // J. Hyg. Camb. 1978. -V.80. -P.183-196. ' ' -:

95. Swanepoel R., Manning В., Watt J.C. Fatal Rift Valley fever of man in Rhodesia // Cent. Afr. J. Med. 1979. - V.25. - P.l-7.

96. Virology, second edition / Ed. by Fields B.N., Knipe D.M. et al. New York, Raven Press, 1990,1515 p.

97. Wasmoen T.L., Kakach L.T., Collett M.S. Rift Valley fever virus M segment: cellular localization of M segment-encoded proteins // Virology. 1988. - V.166. - P.275-280.

98. WHO/IZSTe consultation on recent developments in RVF. WHO collaborating centre for research and training in veterinary epidemiology and management. Civitella del Tronto Italy, 14-15 Sept., 1993, p.23.

99. Weiss K.E. Rift Valley fever a review // Bull. epiz. Dis. Afr. 1957. -N.5. -P.432-458.

100. Weiss K.E. Studies on Rift Valley fever passive and active immunity in lambs // Onderstepoort J. Vet. Res. 1962. - V.9, N.l. -P.3-9.

101. Zeller H. and Bouloy M. Infections by viruses of the families Bunyaviridae and Filoviridae // Rev. Sci. Tech. 2000. - V. 19. - P.79-91.1. Благодарности