Изучение анти-ВИЧ активности новых комплексных мембранотропных соединений тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.06, кандидат биологических наук Тимофеев, Денис Игоревич

• Тимофеев, Денис Игоревич
• кандидат биологических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Тимофеев, Денис Игоревич

Список использованных сокращений.

Введение.

Глава 1. Обзор Литературы.

1.1. Антиретровирусные препараты и их мишени.

1.2. Взаимодействие ВИЧ-1 с рецепторами клеточной мембраны.

2.2. Взаимодействие рецептора CD4 с гликопротеином оболочки ВИЧ-1 gpl20.

2.3. Рецепторы хемокинов - корецепторы ВИЧ.

2.3.1. CCR5 - клеточный корецептор ВИЧ.

2.3.2. CxCR4 - клеточный корецептор ВИЧ.

3. Анти-ВИЧ соединения, действующие на стадии проникновения вируса в клетку.

3.1. Соединения, блокирующие взаимодействие гликопротеина gp 120 ВИЧ-1 с клеточным рецептором CD4.

3.1.1. Соединения, воздействующие па вирусный ополочечный белок gp 120.

3.1.2. Соединения, блокирующие клеточный рецептор CD4.

3.2. Соединения, воздействующие на хемокиновый рецептор CCR.5.

3.3. Соединения, воздействующие на хемокиновый рецептор CxCR4.

3.4. Ингибиторы слияния вирусной оболочки и клеточной мембраны.

3.5. Соединения комбинированного действия.

Глава 2. Материалы и методы исследования.

2.1. Материалы.

2.1.1. Вирус.

2.1.2. Культуры клеток.

2.1.3. Исследуемые соединения.

2.2. Методы.

2.2.1. Ведение культуры лимфобластоидных клеток МТ-4.

2.2.2. Культивирование и определение инфекционности штаммов ВИЧ-1.

2.2.3. Оценка цитотоксичности противовирусных препаратов.

2.2.4. Определение анти-ВИЧ активности мембранотропных препаратов.

2.2.5. Иммуноферментный анализ иигибирования накопления вирусного АГр24 в культуре клеток.

2.2.6. Статистическая обработка данных.

ГЛАВА 3. Результаты исследований.

3.1. Токсичность комплексных мембранотропных соединений и их компонентов.

3.2. Определение фазы жизненного цикла ВИЧ, на котором исследуемые соединения проявляют ингибирующее действие.

3.3. Анти-ВИЧ активность базовых полимерных соединений.

3.4. Анти-ВИЧ активность адамантан-содержащих соединений на базе матриц разных типов.

3.5. Активность комплексных препаратов в отношении штаммов ВИЧ-1 в зависимости от длины спейсера и типа модификатора.

3.6. Анализ анти-ВИЧ активности соединений, с включенными в состав пептидами.

3.6.1. Выбор и синтез пептидов - имитаторов корецепторов ВИЧ CCR5, CxCR4.

3.6.2. Анализ анти-ВИЧ активности пептидов - имитаторов корецепторов ВИЧ, комплексных пептид-содержащих препаратов и смесей их компонентов.

3.6.3. Анти-ВИЧ активность комплексных препаратов, содержащих гидрофобные агенты и пептидные имитаторы корецепторов ВИЧ.

3.6.4. Сравнение бинарных пептид-содержащих соединений с препаратами, модифицированными адамаитаном или иорборпеном.

3.6.5. Исследование анти-ВИЧ эффективности препаратов при многократном внесении их в культуру клеток МТ-4 в течение инкубации.

3.6.6. Анти-ВИЧ активность комбинаций мембранотропных препаратов.

Глава 4. Обсуждение результатов.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изучение анти-ВИЧ активности новых комплексных мембранотропных соединений»

Актуальность проблемы. Синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД), описанный впервые в 1981 году в США, продолжает распространяться по всему миру. По данным Всемирной организации здравоохранения в 2003 году вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ) было инфицировано 5 млн. человек, около 3 миллионов человек умерло. В настоящее время в мире по приблизительным оценкам зарегистрировано 40 млн. человек инфицированных ВИЧ [UNAIDS/WHO, 2003].

По самым оптимистическим прогнозам с 2003 по 2010 годы еще 40 миллионов человек будет инфицировано ВИЧ, если человечество не сможет осуществить кардинальные, глобальные профилактические мероприятия. Ожидается, что более 40% случаев инфицирования произойдет в Азии и странах Тихоокеанского региона (в котором уже сейчас отмечается около 20% всех новых случаев инфицирования в год). Эпидемия быстро распространяется и в большинстве стран Восточной Европы и СНГ. В течение последнего десятилетия в Российской Федерации также отмечается исключительно резкий рост случаев инфицирования ВИЧ [UNAIDS/WHO, 2003]. По данным Федерального научно-методического Центра по профилактике и борьбе со СПИД в стране на 1 января 2004 года зарегистрированы более 264 тысяч ВИЧ-инфицированных, которые выявлены практически во всех субъектах Российской Федерации.

Все это свидетельствует о необходимости незамедлительно решать проблему пандемии ВИЧ-инфекции и пожизненной дорогостоящей терапии миллионов людей в мире и сотен тысяч в нашей стране. Однако, интенсивные работы по поиску эффективных анти-ВИЧ препаратов, которые проводятся в ведущих научных лабораториях всего мира, до сих пор не принесли ощутимых успехов. Лекарства, способные излечивать ВИЧ-инфекцию, пока не найдены [De Clercq, 2002а], а к применяемым сегодня препаратам вирус довольно быстро приобретает устойчивость [LaBranche et al., 2001].

В борьбе со столь изменчивым вирусом становится важным не только эффективно блокировать конкретную вирус-специфическую мишень, но и снизить вероятность появления новой, устойчивой к лекарственному препарату, генерации вирусного потомства. Актуальным становится вопрос: «На какой стадии жизненного цикла вируса препарат эффективней реализует свое действие?» Очевидно, что наиболее надежных результатов терапии следует ожидать в том случае, когда инфекционный процесс подавляется «в зародыше» - на самых ранних стадиях. Так как стартовая агрессия вирусов в отношении клеток-мишеней начинается на внешней стороне плазматической мембраны, то именно здесь целесообразно локализовать приоритетные усилия по блокаде вирусной адсорбции/фузии, прежде чем инфекционный материал вируса проникнет внутрь клетки. Таким образом, наиболее действенным способом контроля эпидемии СПИДа оказываются противовирусные препараты, которые способны предотвратить инфицирование, в частности, при гетеросексуальных контактах, т.е. микробициды.

Возможно, основой для создания эффективных ингибиторов ВИЧ станут достижения последнего десятилетия по детальному изучению механизмов многостадийного взаимодействия вирус-клетка. Так, выяснение роли клеточных хемокиновых рецепторов CCR5 и CxCR4 в механизме проникновения вируса в клетку [Blanpain et al., 1999; Brelot et al., 2000; Chabot et al., 1999; Farzan et al., 1998; Piatt et al., 2001; Rabut et al., 1998] и обнаружение конформационных изменений, происходящих с белками оболочки вируса gpl20 и gp41 [Moore et al., 1993; Root et al., 2001; Sattentau et al., 1993; Sullivan et al., 1998; Wyatt et al., 1998], открывают новые возможности для блокады ВИЧ-инфекции. Мишенью для ингибиторов ВИЧ-1 могут быть, как трансмембранные клеточные корецепторы ВИЧ: CCR5 и CxCR4, так и высококонсервативные участки белка оболочки вируса gpI20, отвечающие за связывание с корецепторами, или структурные элементы вирусного гликопротеина gp41, задействованные в трансформации данного белка. Подобные ингибиторы ВИЧ-1 уже предложены и активно изучаются. Это противовирусные соединения различной природы: антитела [Allaway et al., 1995; Golding et al., 2002], низкомолекулярные соединения циклического строения (цикламы [Donzella et al., 1998; Schols et al., 1997a; 2003], производные пиррола [Howard et al., 1998], пиперидина [Dom et al., 2001; Finke et al., 2001a; Ichiyama et al., 2003; Strizki et al., 2001; Trkola et al"., 2002], пиперазина [Maeda et al., 2001; Tagat et al., 2001] и др. [Hale et al., 2001a; Willoughby et al., 2001]), пептидные имитаторы корецепторов или их антагонисты [Baba et al., 1999; Dorr et al., 2003; Fenard et al., 2001; Sakaida et al., 1998; Tamamura et al., 1998a; 2001a; 2003; Tarasova et al., 1999], имитаторы их естественных лигандов - хемокинов [Brandt et al., 2002; Doranz et al., 1999; Heveker et al., 1998; Kim S. et al., 2001; Proudfoot et al., 1999; Townson et al., 2000; Yang A. et al., 1998]. Подробнее указанные молекулярные мишени и вирус-ингибирующие агенты рассмотрены в литературном обзоре.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы являлась разработка и исследование высокоэффективных анти-ВИЧ препаратов, действующих на стадии адсорбции и проникновения ВИЧ в чувствительные клетки.

В задачи исследования входило: Исследовать цитотоксичность и анти-ВИЧ активность (in vitro) мембранотропных полимеров различного строения и комплексных соединений на их основе, полученных путем модификации полимеров известным противовирусным агентом адамантаном. Определить наиболее подходящий полианион для последующих модификаций. Выявить принципиальные особенности структурной организации комплексных мембранотропных соединений, обеспечивающие достижение наибольшего противовирусного эффекта.

Определить этап жизненного цикла ВИЧ, на котором соединения реализуют противовирусную функцию.

Провести литературный поиск функционально важных доменов корецепторов ВИЧ-1/2 CCR5 и CxCR4, выбрать фрагменты, обеспечивающие взаимодействие с белком оболочки ВИЧ-1 gpl20 для синтеза пептидов - имитаторов данных участков корецепторов ВИЧ.

Изучить цитотоксичность и противовирусную активность (in vitro): а) выбранных пептидов, как самостоятельных противовирусных агентов, так и в смеси с изучаемыми мембранотропными соединениями; б) новых мембранотропных соединений типа МП и МГАП, содержащих ковалентно связанные пептиды.

Оценить влияние комбинаций полученных соединений на репродукцию ВИЧ-1 на модели лимфобластоидных клеток человека.

Научная новизна и практическая ценность работы. Впервые предложены и изучены перспективные анти-ВИЧ соединения нового типа на основе полианионных матриц, модифицированных низкомолекулярными гидрофобными агентами карбоциклического строения (производными адамантана и норборнана) и/или пептидными имитаторами фрагментов клеточных корецепторов ВИЧ CCR5 и CxCR4. На комплексные пептид-содержащие соединения подана заявка на патент Российской Федерации № 2004117904 приоритет от 11 июня 2004г.

Подтверждена целесообразность применения полианионных соединений, несущих упорядочение расположенные карбоксильные группы, в качестве «сборочных молекулярных платформ» для конструирования комплексных анти-ВИЧ препаратов.

Выявлены принципиальные особенности структурной организации исследуемых соединений, обеспечивающие реализацию противовирусной активности. Доказана эффективность включения в состав комплексных противовирусных препаратов пептидов, тропных к сайтам гликопротеина gpl20 ВИЧ-1, участвующих в связывании с клеточными корецепторами ВИЧ.

Показано, что ингибирующее действие испытанных соединений локализовано на этапе проникновения ВИЧ в клетку-мишень.

Установлено, что большинство изученных бинарных препаратов проявляют независимый и синергичный характер действия при совместном применении, что создает хорошие предпосылки для их комбинированного использования в качестве агентов, блокирующих проникновение вируса в чувствительные клетки.

Разработанные комплексные соединения являются перспективными анти-ВИЧ препаратами, и могут быть использованы как микробициды, т.е. средства, предохраняющие от передачи ВИЧ-инфекции половым путем при местном применении.

Положения, выносимые на защиту:

1. Изучена анти-ВИЧ активность четырех поликарбоксилатов различного строения и их производных, модифицированных аминоадамантаном. Среди исследованных соединений полимер As470 (синтетический сополимер малеиновой кислоты) является лучшим кандидатом для получения на его базе комплексных анти-ВИЧ препаратов.

2. Выявлены принципиальные особенности структурной организации комплексных мембранотропных соединений, обеспечивающие достижение максимального противовирусного эффекта препаратами. Наиболее важными факторами являются гибкость полианионной матрицы (за счет включения дополнительных метиленовых групп в мономерное звено) и тип стереоизомера гидрофобного агента.

3. Исследованы перспективные анти-ВИЧ соединения нового типа — МП (As641, As643, As645), полученные путем модификации полимерной матрицы As470 пептидами -имитаторами фрагментов корецепторов ВИЧ CCR5 и CxCR4. На модели острой ВИЧ-инфекции (in vitro) определены количественные характеристики противовирусной активности данных соединений.

4. Изучена анти-ВИЧ активность новых трехкомпонентных соединений (тип МГАП), содержащих как пептидные фрагменты корецепторов ВИЧ, так и известные мембранотропные гидрофобные агенты (адамантан, норборнен). Определены количественные характеристики противовирусной активности данных соединений в культуре клеток МТ-4, инфицированной ВИЧ-1.

5. Определен этап жизненного цикла ВИЧ, на котором исследованные соединения реализуют противовирусную функцию.

6. Выявлен аддитивный эффект при совместном применении бинарных соединений As337, As504, As632 (тип МГА) и As643, As645 (тип МП) в соотношениях - 1:1; 5:1; 10:1 (МГА:МП). Обнаружен синергизм анти-ВИЧ действия препаратов As337 и As504 с бинарным соединением As641, содержащим пептид Р5 - имитатор N-концевого фрагмента корецептора ВИЧ CCR5, в соотношении 1:1 и аддитивность их совместного действия в соотношении 10:1.

Апробация работы и публикации. Материалы диссертации вошли в 5 опубликованных статей, были представлены и обсуждены на следующих конференциях и семинарах: II научной конференции "Проблемы инфекционной патологии в регионах Сибири, Дальнего Востока и Крайнего Севера" (Новосибирск, 2002); международных семинарах "New Technologies in Medicine and Ecology, Integrative Medicine" (Высокие Татры, Словакия, 2002; 2003); международной научной конференции "Медико-биологические и экологические проблемы здоровья человека на Севере" (Сургут, 2002); I международном симпозиуме "Стресс и экстремальные состояния" (Кара-Даг, Крым, Украина, 2002); X международной конференции "Новые информационные технологии в медицине и экологии" (Феодоссия, Крым, Украина, 2002); конгрессе "Прогрессивные научные технологии для здоровья человека» (Кара-Даг, Крым, Украина, 2003); XIV научной конференции - конкурсе молодых ученых ГНЦ ВБ «Вектор» (Кольцово, 2003).

Личный вклад автора заключается в проведении основной части экспериментов по оценке цитотоксичности и анти-ВИЧ активности исследуемых соединений, как вирусологическим, так и иммуноферментным методом; обработке и анализе полученных данных; активном участии в поиске и анализе литературных данных при выборе фрагментов клеточных корецепторов ВИЧ для синтеза пептидов - псевдолигандов для поверхностных гликопротеинов ВИЧ-1.

Автор искренне благодарен ближайшим коллегам и соавторам и, персонально, выражает благодарность А.В. Сербину (НИФ "Здоровья", Москва), за синтез исследуемых полимерных соединений, активное участие в обсуждении результатов и написании статей; Н.Н. Карпышеву (ГНЦ ВБ «Вектор») за синтез пептидов; Я.Ю. Киселевой (ГНЦ ВБ «Вектор») за любезно предоставленные данные по протективному действию ряда изучаемых препаратов на клетки, инфицированные устойчивым к АЗТ вариантом ВИЧ-1; В.В. Неклюдову (ГНЦ ВБ «Вектор») за разработку программного обеспечения для обсчета полученных данных; Н.М. Бормотовой и О.А. Щуке (ГНЦ ВБ «Вектор») за помощь при проведении экспериментальных работ; Н.Г. Перминовой, О.А. Плясуновой и И.В. Тимофееву (ГНЦ ВБ «Вектор») за обучение навыкам культуральной работы и ценные советы при написании статей и обсуждении результатов.

Работа выполнена при поддержке гранта ВТЕР#Ш 21/МНТЦ № 2175р.

Заключение диссертации по теме «Вирусология», Тимофеев, Денис Игоревич

выводы

Изучена анти-ВИЧ активность четырех поликарбоксилатов различного строения и их производных, модифицированных аминоадамантаном. Установлено, что полианион As470 с гибкой структурой (синтетический сополимер малеиновой кислоты), является лучшим кандидатом, среди исследованных полимеров, для получения на его базе комплексных анти-ВИЧ препаратов типа МГА или МП.

Выявлена зависимость степени анти-ВИЧ активности бинарных соединений типа МГА от особенностей их макромолекулярного строения. Установлено, что для обеспечения противовирусного действия наиболее важными факторами являются гибкость полианионной матрицы (за счет включения в мономерное звено дополнительных метиленовых групп) и тип стереоизомера модификатора, тогда как длина спейсерной группы играет меньшую роль в процессе ингибирования ВИЧ.

Впервые изучены перспективные анти-ВИЧ соединения нового типа МП (As641, As643, As645), полученные путем модификации полимерной матрицы As470 выбранными пептидами - имитаторами фрагментов корецепторов ВИЧ CCR5 и CxCR4. Определены количественные характеристики противовирусной активности данных соединений в культуре клеток МТ-4 (штамм ВИЧ-1 evk IC50 - 19-129 нМ; штамм ВИЧ-lz IC50 - 53-369 нМ; IS>600). Эффективность действия новых соединений in vitro сопоставима с таковой широко известных препаратов PRO 2000, Т-20 и Т134, блокирующих ВИЧ на этапе инфицирования клеток.

Впервые предложены и исследованы на анти-ВИЧ активность трехкомпонентные соединения типа МГАП, содержащие как пептидные фрагменты корецепторов ВИЧ, так и известные мембранотропные гидрофобные агенты (адамантан, норборнен). Определены количественные характеристики ВИЧ-ингибирующей активности данных соединений (штамм ВИЧ-Ievk IC50 - 19-168 нМ; штамм ВИЧ-lz IC50 - 49-167 нМ; IS>1 ООО). Преимуществ комплексных препаратов типа МГАП перед исходными бинарными соединениями As337 (M-Ad) и As504 (M-Nb) и соединениями типа МП не выявлено.

Показано, что исследованные соединения эффективны против ВИЧ-1 на этапе проникновения вируса в клетку и, следовательно, препятствуют инфицированию вирусом иммунодефицита человека чувствительных клеток.

Показано, что бинарные соединения As337, As504, As632 (тип МГА) и As643, As645 (тип МП) с включенными в состав пептидами РЗ и Р4 - имитаторами фрагментов корецептора ВИЧ CxCR4, при совместном применении в соотношениях - 1:1; 5:1; 10:1 (МГА.МП) проявляют аддитивный эффект. Выявлен синергизм анти-ВИЧ действия препаратов As337 и As504 с бинарным соединением As641, содержащим пептид Р5 - имитатор N-концевого фрагмента корецептора ВИЧ CCR5, в соотношении 1:1 и аддитивность их совместного действия в соотношении 10:1.

Заключение. у Результаты анализа противовирусной активности базовых полимерных соединений показывают, что ее уровень определяется структурой полимерного остова и плотностью расположения карбоксильных групп. Однако, поскольку электростатическое связывание молекулы ингибитора (поликарбоксилата) с поверхностью вириона в водной межклеточной фазе носит обратимый характер, включение в состав полианиона гидрофобных агентов, способных к образованию с белками оболочки ВИЧ-1 (gpl20/gp41) прочных связей, включая водородные и гидрофобные, может существенно повысить уровень противовирусной активности комплексных соединений. Действительно, модификация полианионных матриц низкомолекулярными гидрофобными агентами (производными адамантана и норборнана, блокирующими проникновение вируса гриппа в чувствительные клетки), ведет к резкому усилению анти-ВИЧ активности исходных полимеров. Выявлено, что противовирусная активность созданных комплексных препаратов существенно зависит от особенностей их макромолекулярного строения: типа модификатора (Ad, Nb, Nba), типа стереоизомера (экзо-/эндо-), наличия и длины «спейсера» (метиленовые мостики), регулирующей дистанцию между модификатором и полимерным остовом матрицы.

Исследование анти-ВИЧ активности соединений, в зависимости от времени ^ внесения их в клеточную культуру (до или после инфицирования), показало, что действие препаратов явно выражено на этапе проникновения вируса в клетку. Анализ ВИЧ-ингибирующего эффекта изучаемых агентов при добавлении их в культуральную среду только на период адсорбции вируса, с последующим удалением препарата подтверждает указанную направленность действия соединений.

Испытания in vitro показали, перспективность использования в комплексных препаратах пептидов-имитаторов, тропных к сайтам связывания клеточных корецепторов гликопротеина gpl20 ВИЧ-1. Сравнительный анализ анти-ВИЧ действия, проявляемого функциональными компонентами препаратов типа МП в механической смеси (каждой * структурной единицей отдельно), со свойствами комплексных препаратов, где компоненты ковалентно связаны в единое целое, показал несомненное преимущество работы целостной макромолекулярной системы.

Оптимизированные по структурно-функциональным параметрам противовирусные агенты, предложенного нами типа (МГА, МП), обеспечивают высокий химиотерапевтический индекс (IS> 1 ООО) и эффективно действуют в отношении различных штаммов ВИЧ-1, включая варианты вируса, резистентные к азидотимидину [Киселева Я.Ю. и соавт., 2002; Перминова Н.Г. и соавт., 2003; Сербии А.В. и соавт., 2000].

Таким образом, подтверждена целесообразность применения полианионных соединений, несущих упорядоченно расположенные карбоксильные группы, в качестве «сборочных молекулярных платформ» для конструирования комбинированных анти-ВИЧ препаратов, блокирующих инфицирование клеток вирусом.

В связи с высокой генетической изменчивостью вируса иммунодефицита человека, является обоснованным применение комбинаций исследуемых анти-ВИЧ соединений, нацеленных на разные молекулярные мишени. Так, бинарные препараты типа МП обеспечивают блокаду белка gpl20 на стадии вирусной адсорбции и связывания ВИЧ-1 с корецепторами, а препараты типа МГА ингибируют процесс конформационных ^ преобразований белков оболочки ВИЧ-1 gpl20 и gp41 на последующей стадии проникновения, ведущей к слиянию вирусной и клеточной мембран. Действительно, большинство изученных бинарных препаратов проявляют аддитивный и синергичный характер действия при совместном применении, что создает хорошие предпосылки для их комбинированного использования в качестве агентов блокирующих проникновение вируса в чувствительные клетки.

Разработанные комплексные соединения являются перспективными анти-ВИЧ препаратами, и могут быть использованы как микробициды, т.е. средства, предохраняющие от передачи ВИЧ-инфекции половым путем при местном применении * [Timofeyev I., 2004].

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Тимофеев, Денис Игоревич, 2004 год

1. Ашмарин И.П., Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Ленинград, 1962. С. 173.

2. Ерёмин В.Ф. ВИЧ-инфекция в республике Беларусь (вирусологические, серологические и молекулярно-биологические исследования). Дисс. док. мед. наук. Минск, 1997. С. 199.

3. Змушко Е.И., Белозеров Е.С. ВИЧ инфекция. Санкт-Питербург: Изд. Питер, 2000. С. 320.

4. Карамов Э.В., Богомолов Б.П., Жданов В.М. Обзор центров, сотрудничающих с ВОЗ по вирусным инфекциям. М., 1986. С. 4-7.

5. Киселев О.И., Блинов В.М., Козелецкая К.Н. и др. Молекулярный механизм действия антивирусных препаратов адамантанового ряда // Вестн. РАМН. 1993. № 3. С. 10-15.

6. Киселева Я.Ю., Тимофеев Д.И., Перминова Н.Г. и др. Противовирусный эффект мембранотропных препаратов на АЗТ-устойчивые и исходные штаммы ВИЧ-1 II Мат. Междунар. Семинара Новые технологии в медицине и экологии. Словакия, 2002. Тез. 16.

7. Козелецкая К.Н., Стоцкая Л.Л., Сербии А.В., Мунши К., Соминина А.А., Киселев О.И. Структура и антивирусная активность адамантансодержащих полимерных препаратов // Вопр. Вирусол. 2003. Т. 48. № 5. С. 19-26.

8. Муравьева Д.А., Самылина И.А., Яковлев Г.П. Фармакогнозия:Учебник/ 4-е изд. М.: Медицина, 2002. С. 656.

9. Руднева И.А., Карамов Э.В., Горчакова Т.А., Черных А.И., Мамаева О.А., Плясунова О.А., Покровский А.Г. Штамм перевиваемых моноцитов человека продуцент вируса иммунодефицита человека I типа // Патент РФ № 1554370, выдан 19.03.1993 г.

10. Рытик П.Г., Ван Дер Гроен Г., Ерёмин В.Ф., Коломиец Н.Д., Попов С.А., Нис П., Виллемс В., Веркаутерен Г., Илькевич Ю.Г., Лемешко Н.Н. Биологические свойства ВИЧ, выделенного от вирусоносителя, проживающего в БССР // Вопр. вирусол. 1990. №5. С. 389-390.

11. Сербии А.В., Стоцкая Л.Л., Букринская А.Г. и др. Усиление и расширение диапазона вирус-специфической активности лекарственных соединений // XII Российский нац конгресс Человек и лекарство. Москва, 2000. Тез. 544.

12. Сербии А.В., Алиханова О.Л., Бурштейн М.Е. и др. Gag белки ВИЧ-1 как терапевтические мишени на ранних и/или завершающих стадиях репликации вируса // Русский журнал ВИЧ/СПИД и родств. пробл. 2002. Т. 6. № 1. С. 167.

13. Сербии А.В., Стоцкая Л.Л., Алымова И.В. и др. Изучение новых адамантан-содержащих препаратов против ВИЧ // III Международ, конф. СПИД, рак и родств. пробл. С.-Петербург, 1995. Тез. 72-73.

14. Сербии А.В., Стоцкая JI.JI., Кренцель Б.А. и др. Сополимеры на основе фурана и мапеинового ангидрида и перспективы их использования в медицине // Сб. Полимеры медицинского назначения. М.: ИНХС, 1988. С. 127-152.

15. Неклюдов В.В. Стандартная методика по обработке экспериментальных данных, полученных при изучении противовирусной активности препаратов в отношении вируса иммунодефицита человека // Соп №СМИ 2/038/01-03. 2003. С. 1-15.

16. Стоцкая Л.Л., Сербии А.В., Мунши К. и др. Эффективность новых адамантансодержащих полимерных соединений против вируса гриппа и их влияние на мембранный транспорт ионов //Хим. фарм. ж. 1995. Т. 29 № 3. С. 19-21.

17. Тимофеев И.В., Сербии А.В., Тимофеев Д.И., Бакулина АЛО., Киселева Я.Ю., Перминова Н.Г. Анализ структурно-функциональной организации хемокинового рецептора CXCR4 и поиск новых подходов к терапии ВИЧ-инфекции // Биотехнология. 2003. № 4. С. 3-21.

18. Тимофеев Д.И., Перминова Н.Г., Сербии А.В., Тимофеев И.В. Мембранотропные соединения и препараты, воздействующие на ранние стадии ВИЧ-инфекции // Антибиотики и химиотер. 2003а. Т.48. № 2. С. 29-41.

19. Abad J.L., Gonzalez М.А., G. del Real, Mira E., Manes S., Serrano F., Bernad A. Novel interfering bifunctional molecules against the CCR5 coreceptor are efficient inhibitors of HIV-1 infection // Mol. Therapy. 2003. V. 8. № 3. P. 475-484.

20. Alkhatib G., Combadiere С., Broder C.C., Feng Y., Kennedy P.E., Murphy P.M., Berger E.A. CC CKR5: a RANTES, MIP-1, MIP-1 receptor as a fusion cofactor for macrophage-tropic HIV-1 // Science. 1996. V. 272. P. 1955-1958.

21. Arakaki R., Tamamura H., Premanathan M. et al. T134, a small-molecule CXCR4 inhibitor, has no cross-drug resistance with AMD3100, a CXCR4 antagonist with a different structure // J. Virol. 1999. V. 73. № 2. P. 1719-1723.

22. Arthos J., Cicala C., Steenbeke T.D. et al. Biochemical and biological characterization of a dodecameric CD4-Ig fusion protein: implications for therapeutic and vaccine strategies // J. Biol. Chem. 2002. V. 277. № 13. P. 11456-11464.

23. Asagarasu A., Uchiyama Т., Achiwa K. Syntheses of HIV-protease inhibitors having a peptide moiety which binds to gpl20 // Chem. Pharm. Bull. 1998. P. 697-703.

24. Baba M., Nishimura O., Kanzaki N. A smoll-molecule, nonpeptide CCR5 antagonist with highly potent and selective anti-HIV-1 activity // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1999. V. 96. P. 5698-5703.

25. Baldwin C.E., Sanders R.W., Berkhout B. Inhibiting HIV-1 entry with fusion inhibitors // Curr. Med. Chem. 2003. V. 10. № 17. P. 1633-1642.

26. Batinic D., Robey F.A. The V3 region of the envelope glycoprotein of human immunodeficiency virus type 1 binds sulfated polysaccharides and CD4-derived synthetic peptides // J. Biol. Chem. 1992. V. 267. № 10. P. 6664-6671.

27. Bennetts B.H., Teutsch S.M., Buhler M.M., Heard R.N., Stewart G.J. The CCR5 deletion mutation fails to protect against multiple sclerosis // Hum. Immunol. 1997. V. 58. № 1. P. 52-59.

28. Berger E.A., Murphy P.M., Farber J.M. Chemokine receptors as HIV-1 coreceptors: roles in viral entry, tropism, and disease // Annu. Rev. Immunol. 1999. V. 17. P. 657-700.

29. Bieniasz P.D., Fridell R.A., Aramori I., Ferguson S.S., Caron M.G., Cullen B.R. HIV-1-induced cell fusion is mediated by multiple regions within both the viral envelope and the CCR-5 co-receptor// EMBO J. 1997. V. 16. № Ю. P. 2599-2609.

30. Blanpain С., Doranz B.J., Vakili J. et al. Multiple charged and aromatic residues in CCR5 amino-terminal domain are involved in high affinity binding of both chemokines and HIV-1 Env protein // J. Biol. Chem. 1999. V. 274. P. 34719-34727.

31. Bleul C.C., Wu L., Hoxie J.A. et al. The HIV coreceptors CXCR4 and CCR5 are differentially expressed and regulated on human T lymphocytes // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. V. 94. № 5. P. 1925-1930.

32. Boutet A., Salim H., Leclerc P., Tardieu M. Cellular expression of functional chemokine receptor CCR5 and CXCR4 in human embryonic neurons // Neurosci. Lett. 2001. V. 311. №2. P. 105-108.

33. Brandt S.M., Mariani R., Holland A.U. et al. Chemokine-mediated block to HIV entry is associated with CCR5 internalization efficiency // J. Biol. Chem. 2002. V. 277. № 19. P. 17291-17299.

34. Brelot A., Heveker N.t Adema K., Hosie M.J., Willett В., Alizon M. Effect of mutations in the second extracellular loop of CXCR4 on its utilization by human and feline immunodeficiency viruses//J. Virol. 1999. V. 73. № 4. P. 2576-2586.

35. Brelot A., Heveker N., Montes M., Alizon M. Identification of residues of CXCR4 critical for human immunodeficiency virus coreceptor and chemokine receptor activities // J. BioL Chem. 2000. V. 275. № 31. P. 23736-23744.

36. Brelot A., Heveker N. Pleskoff O., Sol N. Alizon M. Role of the first and third extracellular domains of CXCR-4 in human immunodeficiency virus coreceptor activity // J. Virol. 1997. V. 71. № 6. P. 4744-4751.

37. Bukrinskaya A.G., Serbin A.V., Bogdan O.P. et al. Adamantane Analogues Block Early Steps of HIV Infection // VII Int. Conf. Antivir. Res. Venice, 1993. Abs. 63.

38. Bukrinskaya A.G., Serbin A.V., Bogdan O.P. et al. Polymeric Adamantane Analogues // US Pat. US005880154A. 1999.

39. Burstein M.E., Serbin A.V., Khakhulina T.V. et al. Newly developed polyanionic derivative of norbomene inhibits HIV-1 replication // Antivir. Res. 1999a. V. 41. № 2. P. 45.

40. Burstein M.E., Serbin A.V., Khakhulina T.V. et al. Inhibition of HIV-1 replication by newly developed adamantane-containing polyanionic agents // Antivir. Res. 1999b. V. 41. №3. P. 134-144.

41. Chabot D.J., Broder C.C. Substitutions in a homologous region of extracellular loop 2 of CXCR4 and CCR5 alter coreceptor activities for HIV-1 membrane fusion and virus entry // J. Biol. Chem. 2000. V. 275. № 31. P. 23774-23782.

42. Chabot D.J., Chen H., Dimitrov D.S., Broder C.C. N-linked glycosylation of CXCR4 masks coreceptor function for CCR5-dependent human immunodeficiency virus type 1 isolates // J. Virol. 2000. V. 74. № 9. P. 4404-4413.

43. Chan D.C., Fass D., Berger J.M. et al. Core structure of gp41 from the HIV envelope glycoprotein // Cell. 1997. V. 89. P. 263-273.

44. Chen Z., Ни В., Huang W. et al. HIV-1 Mutants Less Susceptible to SCH-D, a Novel Small-Molecule Antagonist of CCR5 // 9th Conf. Retroviruses Opportunistic Infect. 2002. Seattle. USA. Abs. 396-T.

45. Choi Y.H., Rho W.S., Kim N.D. et al. Short peptides with induced beta-turn inhibit the interaction between HIV-1 gpI20 and CD4 // J. Med. Chem. 2001. V. 44. № 9. P. 13561363.

46. Chou T.C., Talalay P. Quantitative analysis of dose-effect relationships: the combined effects of multiple drugs or enzyme inhibitors // Adv. Enzyme Regul. 1984. V. 22. P. 2755.

47. Cooley L.A., Lewin S.R. HIV-1 cell entry and advances in viral entry inhibitor therapy // J. Clin. Virol. 2003. V. 26. № 2. P. 121-132.

48. Cormier E.G., Tran D.N., Yukhayeva L., Olson W.C., Dragic T. Mapping the determinants of the CCR5 amino-terminal sulfopeptide interaction with soluble human immunodeficiency virus type 1 gpl20-CD4 complexes // J. Virol. 2001. V. 75. № 12. P. 5541-5549.

49. Daar E.S., Ho D.D. Relative resistance of primary HIV-1 isolates to neutralization by soluble CD4 // Am. J. Med. 1991. V. 90 № 4A. P. 22-26.

50. De Clercq E. Chemotherapeutic approach to the treatment of the acquired immune deficiency syndrome (AIDS) // J. Med. Chem. 1986. V. 29. P. 1561-1569.

51. De Clercq E. New anti-HIV agents and targets // Med. Res. Rev. 2002a. V. 22: № 6. P. 531-565.

52. De Clercq E. New developments in anti-HIV chemotherapy // Biochim. Biophys. Acta. 2002b. V. 1587. P. 258-275.

53. De Clercq E., Yamamoto N., Pauwels R. et al. Highly potent and selective inhibition of human immunodeficiency virus by the bicyclam derivative JM3100 // Antimicrob. Agents Chemother. 1994. V. 38. P. 668-674.

54. Debnath A.K., Radigan L., Jiang S. Structure-based identification of small molecule antiviral compounds targeted to the gp41 core structure of the human immunodeficiency virus type 1 //J. Med. Chem. 1999. V. 42. № 17. P. 3203-3209.

55. Derdeyn C.A., Decker J.M., Sfakianos J.N., Zhang Z., O'Brien W.A., Ratner L., Shaw

56. Di Marzio P., Tse J., Landau N.R. Chemokine receptor regulation and HIV type 1 tropism in monocyte-macrophages // AIDS Res. Hum. Retroviruses. 1998. V. 14. № 2. P. 129-138.

57. Dimitrov D.S., Xiao X., Chabot D.J., Broder C.C. HIV coreceptors // J. Membr. Biol. 1998. V. 166. №2. P. 75-90.

58. Doms R.W., Peiper S.C. Unwelcome guests with master keys: how HIV uses chemokine receptors for cellular entry//J. Virol. 1997. V. 235. P. 179- 190.

59. Donzella G.A., Schols D., Lin S.W., Este J.A., Nagashima K.A., Maddon P.J., Allaway G.P., Sakmar T.P., Henson G., De Clercq E., Moore J.P. AMD3100, a small molecule inhibitor of HIV-1 entry via the CXCR4 co-receptor// Nat. Med. 1998. V. 4. P. 72-77.

60. Doranz B.J., Filion L.G., Diaz-Mitoma F., Sitar D.S., Sahai J., Baribaud F., Orsini M.J., Benovic J.L., Cameron W., Doms R.W. Safe use of the CXCR4 inhibitor ALX40-4C in humans // AIDS Res. Hum. Retroviruses. 2001. V. 17. № 6. P. 475-486.

61. Doranz B.J., Grovit-Ferbas K., Sharron M.P. et al. A small-molecule inhibitor directed against the chemokine receptor CXCR4 prevents its use as an HIV-1 coreceptor // J. Exp. Med. 1997b. V. 186. № 8. P. 1395-1400.

62. Doranz B.J., Lu Z., Rucker J. et al. Two distinct CCR5 domains can mediate coreceptor usage by human immunodeficiency virus type 1 // J. Virol. 1997a. V. 71. № 9. P. 63056314.

63. Doranz B.J., Orsini M.J., Turner J.D. et al. Identification of CXCR4 domains that support coreceptor and chemokine receptor functions // J. Virol. 1999. V. 73. № 4. P. 2752-2761.

64. Dorr P., Macartney M., Rickett G. et al. UK-427,857, a Novel Small Molecule HIV Entry Inhibitor is a Specific Antagonist of the Chemokine Receptor CCR5 // 10th Conf. Retroviruses Opportunistic Infect. 2003. Boston. USA. Abs. 12.

65. Douglas S.D. Methadone may promote HIV replication: study // AIDS Alert. 2001. V. 16. №9. P. 120.

66. Dragic T. An overview of the determinants of CCR5 and CXCR4 co-receptor function // J. Gen. Virol. 2001. V. 82. № 8. P. 1807-1814.

67. Dragic Т., Litwin V., Allaway G.P., Martin S.R., Huang Y., Nagashima K.A., Cayanan C., Maddon P.J., Koup R.A., Moore J.P., Paxton W.A. HIV-1 entry into CD4+ cells is mediated by the chemokine receptor CC-CKR-5 // Nature. 1996. V. 381. P. 667-673.

68. Eckert D.M., Malashkevich V.N., Hong L.H. Inhibiting. HIV-1 entry: Discovery of D-peptide inhibitors that target the gp4l coiled-coil pocket // Cell. 1999. V. 99. P. 103-115.

69. Este J.A., Cabrera C., De Clercq E. et al. Activity of different bicyclam derivatives against human immunodeficiency virus depends on their interaction with the CXCR4 chemokine receptor// Mol. Pharmacol. 1999. V. 55. № 1. P. 67-73.

70. Fantini J., Hammache D., Pieroni G., Yahi N. Role of glycosphingolipid microdomains in CD4-dependent HIV-1 fusion // Glycoconj. J. 2000. V. 17. № 3 -4. P. 199-204.

71. Farzan M., Babcock G.J., Vasilieva N., Wright L., Kiprilov E., Mirzabekov Т., Choe H. The role of post-translational modifications of the CXCR4 amino-terminus in SDF-la. association and HIV-1 entry // J. Biol. Chem. 2002. V. 277. № 33. P. 29484-29489.

72. Fenard D., Lambeau G., Maurin T. et al. A peptide derived from bee venom-secreted phospholipase A2 inhibits replication of T-cell tropic HIV-1 strains via interaction with the CXCR4 chemokine receptor // Mol. Pharmacol. 2001. V. 60. № 2. P. 341-347.

73. Feng Y., BroderC.C., Kennedy P.E., Berger E.A. HIV-1 entry cofactor: functional cDNA cloning of a seven-transmembrane G protein coupled receptor// Science. 1996. V. 272. P. 872-877.

74. Feng Y., Leavitt M., Tritz R. Inhibition of CCR5-dependent HIV-1 infection by hairpin ribozyme gene therapy against CC-chemokine receptor 5 // J. Virol. 2000. V. 276. № 2. P. 271-278.

75. Franti M„ Nagashima K„ Maddon P. et al. The CCR5 Co-Receptor Inhibitor PRO 140 Effectively Controls Established HIV-1 Infection in Vivo // 9th Conf. Retroviruses Opportunistic Infect. 2002. Seattle. USA. Abs. 403-T.

76. Gabuzda D., Wang J. Chemokine receptors and mechanisms of cell death in HIV neuropathogenesis // J. Neurovirol. 2000. V. 6. P. 24-32.

77. Gerlach L.O., Skerlj R.T., Bridger G.J. et al. Molecular interactions of cyclam and bicyclam non-peptide antagonists with the CXCR4 chemokine receptor // J. Biol. Chem. 2001. V. 276. № 17. P. 14153-14160.

78. Ghezzi S., Vicenzi E., Soldini L. et. al. Experiences in immune reconstitution. The rationale for interleukin-2 administration to HIV-infected individuals // J. Biol. Regul. Homeost. Agents. 1997. V. 11. № 1-2. P. 74-78.

79. Golding H., Aliberti J., King L.R., Manischewitz J., Andersen J., Valenzuela J., Landau N.R., Sher A. Inhibition of HIV-1 infection by a CCR5-binding cyclophilin from Toxoplasma gondii // Blood. 2003. V. 102. № 9. P. 3280-3286.

80. Golding H., Zaitseva M., de Rosny E. Dissection of human immunodeficiency virus type 1 entry with neutralizing antibodies to gp41 fusion intermediates // J. Virol. 2002. V. 76. № 13. P. 6780-6790.

81. Gupta S.K., Lysko P.G., Pillarisetti K. et al. Chemokine receptors in human endothelial cells. Functional expression of CXCR4 and its transcriptional regulation by inflammatory cytokines // J. Biol.Chem. 1998. V. 273. № 7. P. 4282-4287.

82. Harrison P.F., Rosenberg Z., Bowcut J. Topical Microbicides for Disease Prevention: Status and Challenges // Clin. Infect. Dis. 2003. V. 36. P. 1290-1294.

83. Heil M., Decker J., Chen D. et al. Analysis of Patient-derived HIV-1 Isolates Suggests a Novel Mechanism for Decreased Sensitivity to Inhibition by Enfuvirtide and T-649 // 10th Conf. Retroviruses Opportunistic Infect. 2003. Boston. USA. Abs. 615.

84. Hernandez-Lopez C., Varas A., Sacedon R. et al. Stromal cell-derived factor 1/CXCR4 signaling is critical for early human T-cell development // Blood. 2002. V. 99. № 2. P. 546-554.

85. Heroid B.C., Bourne N., Marcellino D., Kirkpatrick R., Strauss D.M. Poly(sodium 4-styrene sulonate): an ef fective candidate topical antimicrobial for prevention of sexually transmited diseases // J. Infect. Dis. 2000. V. 181. P. 770-773.

86. Heveker N., Montes M., Germeroth L. et al. Dissociation of the signaling and antiviral properties of SDF-1-derived small peptides // Current. Biol. 1998, V. 8. P. 369-376.

87. Jansen R.W., Schols D., Pauwels R. et al. Novel, negatively charged, human serum albumins display potent and selective in vitro anti-human immunodeficiency virus type 1 activity // Mol. Pharmacol. 1993. V. 44. № 5. P. 1003-1007.

88. Ji H., Shu W., Burling F.T., Jiang S., Lu M. Inhibition of human immunodeficiency virus type 1 infectivity by the gp41 core: role of a conserved hydrophobic cavity in membrane fusion // J. Virol. 1999. V. 73. № 10. P. 8578-8586.

89. Jinquan Т., Quan S., Jacobi H.H. et al. CXC chemokine receptor 4 expression and stromal cell-derived factor-1 alpha-induced chemotaxis in CD4+ T lymphocytes are regulated by interIeukin-4 and interleukin-10 //J. Immunol. 2000. V. 99. № 3. P. 402-410.

90. Jourdan P., Abbal C., Noraz N. et al. IL-4 induces functional cell-surface expression of CXCR4 on human T cells // J. Immunol. 1998. V. 160. № 9. P. 4153-4157.

91. Jourdan P., Vendrell J.P., Huguet M.F. et al. Cytokines and cell surface molecules independently induce CXCR4 expression on CD4+ CCR7+ human memory T cells // J. Immunol. 2000. V. 165. № 2. P. 716-724.

92. Kanamoto Т., Kashiwada Y., Kanbara K. et al. Anti-human immunodeficiency virus activity of YK-FH312 (a betulinic acid derivative), a novel compound blocking viral maturation // Antimicrob. Agents Chemother. 2001. V. 45. № 4. P. 1225-1230.

93. Kashiwada Y., Nagao Т., Hashimoto A. et al. Anti-AIDS agents 38. Anti-HIV activity of 3-O-acyl ursolic acid derivatives Hi. Nat. Prod. 2000. V. 63. № 12. P. 1619-1622.

94. Kashiwada Y., Wang H.K., Nagao T. et al. Anti-AIDS agents. Anti-HIV activity of oleanolic acid, pomolic acid, and structurally related triterpenoids // J. Nat. Prod. 1988. V. 61. №9. P. 1090-1095.

95. Khatri V.P., Fehniger T.A., Baiocchi R.A. et. al. Ultra low dose interleukin-2 therapy promotes a type 1 cytokine profile in vivo in patients with AIDS and AIDS-associated malignancies//J. Clin. Invest. 1998. V. 101. №6. P. 1373-1378.

96. Kim D., Wang L., Caldwell C.G., et al. Design, synthesis, and SAR of heterocycle-containing antagonists of the human CCR5 receptor for the treatment of HIV-1 infection // Bioorg. Med. Chem. Lett. 2001. V. 11. № 24. P. 3103-3106.

97. Kim S., Jao S., Laurence J.S., LiWang P.J. Structural comparison of monomelic variants of the chemokine MlP-lbeta having differing ability to bind the receptor CCR5 // Biochem. 2001. V. 40. № 36. P. 10782-10791.

98. Kolocouris N., Foscolos G.B., Kolocouris A. et al. Synthesis and antiviral activity evaluation of some new aminoadamantane derivatives // J. Med. Chem. 1994. V. 37. P. 2896-2902.

99. Konishi K., Ikeda K., Achiwa K. et al. Synthesis of peptides mimicking chemokine receptor CCR5 and their inhibitory effects against HIV-1 infection // Chem. Pharm. Bull.2000. V. 48. № 2. P. 308-309.

100. Kuhmann S.E., Piatt E.J., Kozak S.L., Kabat D. Cooperation of multiple CCR5 coreceptors is required for infections by human immunodeficiency virus type 1 // J. Virol. 2000. V. 74. № 15. P. 7005-7015.

101. Kuipers M.E., Huisman J.G., Swart P.J. et al. Mechanism of anti-HIV activity of negatively changed albumins: biomolecular interaction with the HIV-1 envelope proteine gpl20 // J. AIDS Hum. Retrovir. 1996. V. 11. № 5. p. 419-429.

102. Kuritzkes D.R., Jacobson J.M., Powderly W. et al. Safety and Preliminary Anti-HIV Activity of an Anti-CD4 mAb (TNX-355; Formerly Hu5A8) in HIV-infected Patients // 10th Conf. Retroviruses Opportunistic Infect. 2003. Boston. USA. Abs. 13.

103. Kutza J., Hayes M.P., Clouse K.A. Interleukin-2 inhibits HIV-1 replication in human macrophages by modulating expression of CD4 and CC- chemokine receptor-5 // AIDS. 1998. V. 12. №8. P. F59-F64.

104. Kwong P.D., Wyatt R., Robinson J., Sweet R.W., Sodroski J., Hendrickson W.A. Structure of an HIV gpl20 envelope glycoprotein in complex with the CD4 receptor and a neutralizing human antibody// Nature. 1998. V. 393. № 6686. P. 648-659.

105. LaBranche C.C., Galasso G., Moore J.P. et al. HIV fusion and its inhibition // Antivir. Res.2001. V. 50. P. 95-115.

106. Labrosse В., Brelot A., Heveker N., Sol N., Schols D., De Clercq E., Alizon M. Determinants for sensitivity of human immunodeficiency virus coreceptor CXCR4 to the bicyclam AMD3100//J. Virol. 1998. V. 72. P. 6381-6388.

107. Larack-Stone A., Melton D.J., Lewis M.S. Structure-function relations of heparin-mimetic sulfated xylan oligosaccharides: inhibition of human immunodeficiency virus-1 infectity in vitro // Glycoconjugate J. 1988. V. 10. P. 697-712.

108. Lavi E., Kolson D.L., Ulrich A.M., Fu L., Gonzalez-Scarano F. Chemokine receptors in the human brain and their relationship to HIV infection // J. Neurovirol. 1998. V. 4. № 3. P. 301-311.

109. Lazzarino D.A., Diego M., Musi E., Hirschman S.Z., Alexander R.J. CXCR4 and CCR5 expression by H9 T-cells is downregulated by a peptide-nucleic acid immunomodulator // Immunol. Lett. 2000. V. 74. № 3. P. 189-195.

110. Lin P.F., Robinson В., Gong Y.F. et al. Identification and characterization of a novel inhibitor of HIV-1 entry // Works of IX Conf. Retrovir. Opportunistic Infec., Seattle. 2002. Virology and resistance. Abs. 9.

111. Liu S., Jiang S., Wu Z. Identification of inhibitors of the HIV-1 gp41 six-helix bundle formation from extracts of Chinese medicinal herbs Prunella vulgaris and Rhizoma cibotte //Life Sci. 2002. V. 71.№ 15. P. 1779-1791.

112. Lorens O., Filizola M., Spisani S. et al. Amygdalin binds to the CD4 receptor as suggested from molecular modeling studies// Bioorg. Med. Chem. Lett. 1998. V. 8. P. 781-786.

113. Louis J.M., Bewley C.A., Clore G.M. Design and properties of N(CCG)-gp41, a chimeric gp41 molecule with nanomolar HIV fusion inhibitory activity // J. Biol. Chem. 2001. V. 276. №31. P. 29485-29489.

114. Luo Z., Zhou N., Luo J. et al. The role of positively charged residues in CXCR4 recognition probed with synthetic peptides // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1999. V. 263. №3. P. 691-695.

115. Maeda К., Nakata H., Miyakawa Т. et al. AK602: A Novel HIV-specific Spirodiketopiperazine CCR5 Inhibitor Potent Against a Wide Spectrum of R5-HIV // 10th

116. Conf. Retroviruses Opportunistic Infect. 2003. Boston. USA. Abs. 10.

117. Maeda K., Yoshimura K., Shibayama S. et al. Novel low molecular weight spirodiketopiperazine derivatives potently inhibit R5 HIV-1 infection through their antagonistic effects on CCR5 // J. Biol. Chem. 2001. V. 276. № 37. P. 35194-35200.

118. Margolis L., Grivel J-Ch., Ito Y. et al. Mechanisms of differential pathogenesis of R5 and X4 HIV-1 variants in human lymphoid tissue // Antivir. Res. 2002. V. 53. № 3. A68.

119. Mayer K.H., Karim S.A., Kelly C., Maslankowski L., Rees H„ Profy A.T., Day J., Welch

120. J., Rosenberg Z. Safety and tolerability of vaginal PRO 2000 gel in sexually active HIV-uninfected and abstinent HIV-infected women // AIDS. 2003. V. 17. № 3. P. 321-329.

121. McGrath K.E., Koniski A.D., Maltby K.M., McGann J.K., Palis J. Embryonic expression and function of the chemokine SDF-1 and its receptor, CXCR4 // Dev. Biol. 1999. V. 213. № 2. P. 442-456.

122. Meanwell N.A., Kadow J.F. Inhibitors of the entry of HIV into host cells // Curr. Opin. Drug Discov. Devel. 2003. V. 6. № 4. P. 451-461.

123. Mennicken F., Chabot J.G., Quirion R. Systemic administration of kainic acid in adult rat stimulates expression of the chemokine receptor CCR5 in the forebrain // Glia. 2002. V. 37. №2. P. 124-138.

124. Michael N.L., Chang G., Louie L.G., Mascola J.R., Dondero D., Birx D.L., Sheppard H.W.

125. The role of viral phenotype and CCR-5 gene defects in HIV-1 transmission and disease progression // Nat. Med. 1997. V. 3. № 3. P. 338-340.

126. Montaner L.J. Structured treatment interruptions to control HIV-1 and limit drug exposure // Trends Immunol. 2001. V. 22. № 2. P. 92-96.

127. Moore J.P., Jameson B.A., Weiss R.A., Sattentau Q.J. The HIV-cell fusion reaction. In:

128. Viral Fusion Mechanisms / Eds. Bentz J. Boca Raton, Florida: CRC Press. 1993. P. 233— 289.

129. Moriuchi M., Moriuchi H. Increased susceptibility to HIV-1 of peripheral blood lymphocytes in acute infection with Epstein-Barr virus // J. Med. Virol. 2003. V. 71. № 3.1. A P. 343-346.

130. Murakami Т., Zhang T.Y.r Koyanagi Y. et al. Inhibitory mechanism of the CXCR4 antagonist T22 against human immunodeficiency virus type 1 infection // J. Virol. 1999. V.1. Ф 73. № 9. P. 7489-7496.

131. Nagasawa Т., Tachibana K., Kishimoto T. A novel CXC chemokine PBSF/SDF-1 and its ^ receptor CXCR4: their functions in development, hematopoiesis and HIV // Semin.1.munol. 1998. V. 10. № 3. P. 179-185.

132. Nagase H., Miyamasu M., Yamaguchi M., Fujisawa Т., Kawasaki H., Ohta K., Yamamoto K., Morita Y., Hirai K. Regulation of chemokine receptor expression in eosinophils // Int. Arch. Allergy Immunol. 2001. V. 125. P. 29-32.

133. Nakakuma H., Kawaguchi Т., Koito A., Hattori Т., Kagimoto Т., Takatsuki K. Inhibition of human immunodeficiency virus infection of human lymphocytes by gangliosides // J. Cancer Res. 1989. V. 80. № 8. P. 702-705.

134. National Institutes of Health, National Institute of Allergy and Infectious Diseases, Division of AIDS. DAIDS Virology Manual for HIV Laboratories. Publication NIH-97-3828. Washington, DC: US Department of Health and Human Services. 1997. P. 78-89.

135. Nishimura S.I.,. Kai H., Shinada K. et al. Regioselective synthesis of sulfated ^ polysaccharides: Specific anti-HIV-1 activity of novel chitin sulfates // Charbohyd. Res.1998. V. 5. P. 427-433.

136. Onuffer J J., Horuk R. Chemokines, chemokine receptors and small-molecule antagonists: recent developments // Trends Pharmacol. Sci. 2002. V. 23. № 10. P. 459-467.

137. Pannecougue C., Fikkert V., Schols D. et al. Quaternary Ammonium Solts inhibiting HIV replication in vitro // Antivir. Res. 2000. V. 46. № 1. A43.

138. Patterson S., Rae A., Hockey N., Gilmour J., Gotch F. Plasmacytoid dendritic cells are highly susceptible to human immunodeficiency virus type 1 infection and release infectious virus//J. Virol. 2001. V. 75. № 14. P. 6710-6713.

139. Pauwels R., De Clercq E. Development of vaginal microbicides for the prevention of heterosexual transmission of HIV // J. Acquir. Immune Defic. Syndr. Hum. Retrovirol. 1996. V. 11. № 3. P. 211-221.

140. Pelchen-Matthews A., Signoret N., Klasse P.J. et al. Chemokine receptor trafficking and viral replication// Immunol. Rev. 1999. V. 168. P. 33-49.

141. Picone D., Rivieccio A., Crescenzi O., Caliendo G., Santagada V., Perissutti E., Spisani S., Traniello S., Temussi P.A. Peptide T revisited: conformational mimicry of epitopes of anti-HIV proteins // J. Pept. Sci. 2001. V. 7. № 4. P. 197-207.

142. Polianova M.T., Ruscetti F.W., Pert C.B. et al. Antiviral and immunological benefits in HIV patients receiving intranasal peptide T (DAPTA) // Peptides. 2003. V. 24. № 7. P. 1093-1098.

143. Premanathan M., Kathiresan K., Yamamoto N., Nakashima H. In vitro anti-human immunodeficiency virus activity of polysaccharide from Rhizophora mucronata Poir // Biosci. Biotechnol. Biochem. 1999. V. 63. №7. P. 1187-1191.

144. Proudfoot A.E., Buser R., Borlat F. et al. Amino-terminally modified RANTES analogues demonstrate differential effects on RANTES receptors // J. Biol. Chem. 1999. V. 274. № 45. P. 32478-32485.

145. Puri A., Riley J.L., Kim D., Ritchey D.W., Hug P., Jernigan K., Rose P., Blumenthal R., Carroll R.G. Influenza virus upregulates CXCR4 expression in CD4+ cells // AIDS Res. Hum. Retroviruses. 2000. V. 16. № 1. P. 19-25.

146. Reynes J., Rouzier R., Kanouni T. et al. SCH C: Safety and Antiviral Effects of a CCR5 Receptor Antagonist in HIV-1- Infected Subjects // 9th Conf. Retroviruses Opportunistic Infect. 2002. Seattle. USA. Abs. 1.

147. Rezaie P., Trillo-Pazos G., Everall I.P., Male D.K. Expression of beta-chemokines and chemokine receptors in human fetal astrocyte and microglial co-cultures: potential role of chemokines in the developing CNS // Glia. 2002. V. 37. № 1. P. 64-75.

148. Rimsky L.T., Shugars D.C., Matthews T.J. Determinants of human immunodeficiency virus type 1 resistance to gp41-derived inhibitory peptides // J. Virol. 1998. V. 72. № 2. P. 986-993.

149. Rizzuto C.D., VVyatt R., Hernandez-Ramos N., Sun Y., Kwong P.D., Hendrickson W.A., Sodroski J. A conserved HIV gpl20 glycoprotein structure involved in chemokine receptor binding // Science. 1998. V. 280. P. 1949-1953.

150. Rollins B.J. Chemokines // Blood. 1997. V. 90. № 3. P. 909-928.

151. Root M.J., Kay M.S., Kim P.S. Protein design of an HIV-1 entry inhibitor// Science. 2001. V. 291. P. 884-888.

152. Ross T.M., Cullen B.R. The ability of HIV type 1 to use CCR-3 as a coreceptor is controlled by envelope V1/V2 sequences acting in conjunction with a CCR-5 tropic V3 loop // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998. V. 95. P. 7682-7686.

153. Ruff M.R., Melendez-Guerrero L.M., Yang Q.E., Ho W.Z., Mikovits J.W., Pert C.B., Ruscetti F.A. Peptide T inhibits HIV-1 infection mediated by the chemokine receptor-5 (CCR5) // Antiviral Res. 2001. V. 52. № 1. P. 63-75.

154. Rusconi S., Merrill D.P., La Seta Catamancio S. et al. In vitro inhibition of HIV-1 by Met-SDF-lbeta alone or in combination with antiretroviral drugs // Antivir. Ther. 2000. V. 5. № 3. P. 199-204.

155. Saccani A., Saccani S., Orlando S. et al. Redox regulation of chemokine receptor expression // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2000. V. 97. № 6. P. 2761-2766.

156. Sakaida H., Hori Т., Yonezawa A. et al. T-tropic human immunodeficiency virus type 1 (HlV-l)-derived V3 loop peptides directly bind to CXCR-4 and inhibit T-tropic HIV-1 infection // J. Virol. 1998. V. 72. № 12. P. 9763-9770.

157. Samson M., Labbe O., Mollereau C., Vassart G., Parmentier M. Molecular cloning and functional expression of anew human CC-chemokine receptor gene // Biochemistry. 1996. V. 35. № 11. P. 3362-3367.

158. Sattentau Q.J., Moore J.P., Vignaux F., Traincard F., Poignard P. Conformational changes induced in the envelope glycoproteins of the human and simian immunodeficiency viruses by soluble receptor binding// J. Virol. 1993. V. 67. P. 7383-7393.

159. Schols D., Claes S., Hatse S. et al. Anti-HIV Activity Profile of AMD070, an Orally Bioavailable CXCR4 Antagonist H // 10th Conf. Retroviruses Opportunistic Infect. 2003. Boston. USA. Abs. 563.230231232233234235236237,238.239.240.241.242.243.244.

160. Schols D., Este J.A., Henson G., De Clercq E. Bicyclams, a class of potent anti-HIV agents, are targeted at the HIV coreceptor fusin/CXCR-4 // Antiviral. Res. 1997a. V. 35. № 3. P. 147-156.

161. Schols D., Struyf S., Van Damme J., Este J.A., Henson G., De Clercq E. Inhibition of T-tropic HIV strains by selective antagonization of the chemokine receptor CXCR4 // J. Exp. Med. 1997b. V. 186. P. 1383-1388.

162. Secchiero P., Zella D., Barabitskaja O. et al. Progressive and persistent downregulation of surface CXCR4 in CD4(+) T cells infected with human herpesvirus 7 // Blood. 1998. V. 92 № 12. P. 4521-4528.

163. Serbin A.V. New anti-viral drug design for ecological security of people // Ecol. Congress Int. J. 1997. V. 1. № 2. P. 31-34.

164. Serbin A.V., Kasyan L.I., Burstein M.E. et al. Norbornene containing antivirals: synthesis and evaluation of new polyanionic derivatives // Antivir. Res. 1999. V. 41. № 2. P. 46.

165. Shalekoff S., Tiemessen C.T. Duration of Sample Storage Dramatically Alters Expression of the Human Immunodeficiency Virus Coreceptors CXCR4 and CCR5 // Clin. Diagnost. Lab. Immunol. 2001. V. 8. № 2. P. 432-436.

166. Shukla D., Liu J., Blaiklock P., Shworak N.W., Bai X., Esko J.D., Cohen G.H., Eisenberg R.J., Rosenberg R.D., Spear P.G. A novel role for 3-O-sulfated heparan sulfate in herpes simplex virus 1 entry//Cell. 1999. V. 99. № 1. P. 13-22.

167. Signoret N., Oldridge J., Pelchen-Matthews A. et al. Phorbol esters and SDF-1 induce rapid endocytosis and down modulation of the chemokine receptor CXCR4 // J. Cell Biol. 1997. V. 139. №3. p. 651-664.

168. Signoret N., Pelchen-Matthews A., Mack M., Proudfoot A.E., Marsh M. Endocytosis and recycling of the HIV coreceptor CCR5 // J. Cell Biol. 2000. V. 151. № 6. P. 1281-1294.

169. Simmons G., Reeves J.D., Hibbitts S., Stine J.T., Gray P.W., Proudfoot A.E., Clapham P.R. Co-receptor use by HIV and inhibition of HIV infection by chemokine receptor ligands // Immunol. Rev. 2000. V. 177. P. 112-126.

170. Stephenson J. Researchers Explore New Anti-HIV Agents // JAMA. 2002. V. 287. № 13. P. 1635-1637.

171. Szekely Z., Fabian P., Torday L.L. et al. Binding between the CD4 receptor and polysulfonated azo-dyes. An exploratory theoretical study on action-mechanism // J. Mol. Struct. (Theochem.) 1998. V. 423. P. 153-159.

172. Tamamura H., Hiramatsu K., Mizumoto M. et al. Enhancement of the T140-based pharmacophores leads to the development of more potent and bio- stable CXCR4 antagonists // Org. Biomol. Chem. 2003. V. 1. № 21. P. 3663-3669.

173. Tamamura H., Ishihara Т., Otaka A. et al. Analysis of the interaction of an anti-HIV « peptide, T22 (Tyr5,12, Lys7.-polyphemusin II), with gpl20 and CD4 by surface plasmonresonance // Biophim. Biophys. Acta. 1996. V. 1298. P. 37-44.

174. Tamamura H., Xu Y., Hattori T. et al. A low-molecular-weight inhibitor against the chemokine receptor CXCR4: a strong anti-HIV peptide T140 // Biochem. Biophys. Res. Comm. 1998b. V. 253. № 3. P. 877-882.

175. Tarasova N.I., Rice W.G., Michejda C.J. Inhibition of G-protein-coupled receptor function by disruption of transmembrane domain interactions // J. Biol. Chem. 1999. V. 274. № 49. P. 34911-34915.

176. Thelen M., Dancing to the tune of chemokines // Nat. Immunol. 2001. V. 2. P. 129-134.

177. Timofeyev D.I., Perminova N.G., Kiseleva Ya.U., Serbin A.V., Timofeyev I.V. Membranotropic compounds new class of anti-HIV drugs // Works of an international seminar New technologies in medicine and ecology. Slovakia. 2002. P. 40.

178. Timofeyev I., Serbin A., Timofeyev D., Plyasunova O., Karpyshev N., Varaksin N,

179. Ryabicheva Т., Nekludov V., Kiseleva Y., Perminova N. Design of anti-HIV microbicides with inclusion of pharmacophore modifiers and pseudo-ligands // "Microbicides 2004" conference abstracts. London, 2004. Abs. 02656.

180. Townson J.R., Graham G.J., Landau N.R. et al. Aminooxypentane addition to the chemokine macrophage inflammatory protein-1 alpha P increases receptor affinities and HIV inhibition//J. Biol. Chem. 2000. V. 275. № 50. P. 39254-39261.

181. Trkola A., Ketas T.J., Nagashima K.A. et al. Potent, broad-spectrum inhibition of human immunodeficiency virus type 1 by the CCR5 monoclonal antibody PRO 140 // J. Virol. 2001. V. 75. №2. P. 579-588.

182. Trkola A., Kuhmann S.E., Strizki J.M. et al. HIV-1 escape from a small molecule, CCR5-specific entry inhibitor does not involve CXCR4 use // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2002. V. 99. № 1. P. 395-400.

183. Tscheming C., Alaeus A., Fredriksson R., Bjomdal A., Deng H., Littman D.R., Fenyo E.M., Albert J. Differences in chemokine coreceptor usage between genetic subtypes of HIV-1 //Virology. 1998. V. 241. №2. P. 181-188.

184. Ueki M., Watanabe S., Saitoh T. et al. Synthesis and chain length-anti-HIV activity relationship of fully N- and O-sulfated homooligomers of tyrosine // Bioorg. Med. Chem. 2001. V. 9. №2. P. 487-492.

185. Ugolini S. HIV-1 attachment: another look // Trends Microbiol. 1999. V. 7. № 4. P. 144149.

186. UNA IDS and WHO, AIDS Epidemic Update 2003. http://www.unaids.org/en/

187. Van Der Meer P., Goldberg S.H., Fung K.M., Sharer L.R., Gonzalez-Scarano F., Lavi E.

188. Expression pattern of CXCR3, CXCR4, and CCR3 chemokine receptors in the developinghuman brain// J. Neuropathol. Exp. Neurol. 2001. V. 60. № 1. P. 25-32.

189. Van der Meer P., Ulrich A.M., Gonzalez-Scarano F., Lavi E. Immunohistochemical analysis of CCR2, CCR3, CCR5, and CXCR4 in the human brain: potential mechanisms for HIV dementia // Exp. Mol. Pathol. 2000. V. 69. № 3. P. 192-201.

190. Vassiliadou N., Tucker L., Anderson D.J. Progesterone-induced inhibition of chemokine receptor expression on peripheral blood mononuclear cells correlates with reduced HIV-1infectability in vitro // J. Immunol. 1999. V. 162. № 12. P. 7510-7518.

191. Wang J., Guan E., Roderiquez G., Norcross M.A. Inhibition of CCR5 expression by 1L-12through induction of beta-chemokines in human T lymphocytes // J. Immunol. 1999. V. 163. № 11. P. 5763-5769.

192. Wang J., Harada A., Matsushita S. et al. 1L-4 and a glucocorticoid up-regulate CXCR4 expression on human CD4+ T lymphocytes and enhance HIV-1 replication // J. Leukoc. Biol. 1998b. V. 64. № 5. P. 642-649.

193. Wang J.F., Liu Z.Y., Groopman J.E. The alpha-chemokine receptor CXCR4 is expressed on the megakaryocyte lineage from progenitor to platelets and modulates migration and adhesion // Blood. 1998a. V. 92. № 3. P. 756-764.

194. Werner A., Winskowsky G., Kurth R. Soluble CD4 enhances simian immunodeficiency virus SIVagm infection // J. Virol. 1990. V. 64. № 12. P. 6252-6256.

195. Willoughby C.A., Berk S.C., Rosauer K.G. et al. Combinatorial synthesis of CCR5antagonists // Bioorg. Med. Chem. Lett. 2001. V. 11. № 24. P. 3137-3141.

196. Wyatt R., Kwong P.D., Desjardins E., Sweet R.W., Robinson J., Hendrickson W.A., Sodroski J.G. The antigenic structure of the HIV gpl20 envelope glycoprotein // Nature. 1998. V. 393. № 6686. P. 705-711.

197. Xiao X.D., Wu L., Stantchev T.S., Feng Y.R., Ugolini S., Chen H., Shen Z., Riley J.L., Broder C.C., Sattentau Q.J., Dimitrov D.S. Constitutive cell surface association between CD4 and CCR// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1999. V. 96. P. 7496-7501.

198. Yang A.G., Zhang X., Torti F., Chen S.Y. Anti-HIV type 1 activity of wild-type and functional defective RANTES intrakine in primary human lymphocytes // Hum. Gene Ther. 1998. V. 9. № 14. P. 2005-2018.

199. Yang J., Liu C. Molecular modeling on human CCR5 receptors and complex with CD4 antigens and HIV-1 envelope glycoprotein gpl20 // Acta Pharmacol. Sin. 2000. V. 21. № LP. 29-34.

200. Zaitseva M., Peden K., Golding H. HIV coreceptors: role of structure, posttranslational modifications, and internalization in viral-cell fusion and as targets for entry inhibitors // Biochem. Biophys. Acta. 2003. V. 1614. P. 51-61.

201. Zaneveld L.J., Waller D.P., Anderson R.A. et al. Efficacy and safety of a new vaginal contraceptive antimicrobial formulation containing high molecular weight poly(sodium 4-styrenesulfonate) // Biol. Reprod. 2002. V. 66. № 4. P. 886-894.

202. Zang Y.C., Haider J.B., Samanta A.K., Hong J., Rivera V.M., Zhang J.Z. Regulation of chemokine receptor CCR5 and production of RANTES and MIP-1 alpha by interferon-beta //J. Neuroimmunol. 2001. V. 112.№ .-2. P. 174-180.

203. Zanussi S., Simonelli C., Bortolin M.T. et.al. Dynamics of provirus load and lymphocyte subsets after interleukin 2 treatment in HIV-infected patients // AIDS Res. Hum. Retroviruses. 1999. V. 15. № 2. P. 97-103.

204. Zhang Y.J., Moore J.P. Will multiple coreceptors need to be targeted by inhibitors of human immunodeficiency virus type 1 entry? // J. Virol. 1999 V. 73. № 4. P. 3443-3448.

205. Zhou N., Luo Z., Hall J.W., Luo J., Han X., Huang Z. Molecular modeling and site-directed mutagenesis of CCR5 reveal residues critical for chemokine binding and signal transduction// Eur. J. Immunol. 2000. V. 30. № 1. P. 164-173.