Синтез и исследование свойств глицеролипидных производных нуклеозидных ингибиторов обратной транскриптазы ВИЧ для повышения их биодоступности тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.10, кандидат наук Дьякова, Людмила Николаевна

• Дьякова, Людмила Николаевна
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Дьякова, Людмила Николаевна

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. Вирус иммунодефицита человека: ключевые ферменты и противовирусные препараты, одобренные управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов. Дизайн новых анти-ВИЧ-активных нуклеозидных соединений

1 1 Основные ферменты ВИЧ и их ингибиторы, одобренные для клинического использования

1 2 Нуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы (НИОТ), механизм их действия и недостатки

1 3 Разработка новых анти-ВИЧ-активных нуклеозидов

1 3 1 Модификация углеводного фрагмента

1 3 2 Модификация нуклеиновых оснований 21 1 3 3 Нуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы, находящиеся на разных стадиях

клинических исследований

2. Стратегии для повышения пероральной биодоступности нуклеозидных препаратов. Конструирование пролекарственных соединений с использованием липидной стратегии

2 1 Пролекарственные соединения на основе жирных кислот 31 2 2 Пролекарственные соединения на основе фосфолипидов 34 2 3 Пролекарственные соединения на основе холестерина 36 2 4 Пролекарственные соединения на основе 1,3-диацилглицеринов

3. Преимущества метаболических путей природных триглицеридов. Разработка новых пролекарственных производных фармакологически активных соединений на основе 1,3-диацилглицеринов

4. Конструирование новых противовирусных и противоопухолевых препаратов на основе пронуклеотидного подхода. Способы получения пронуклеотидных производных НИОТ

4 1 Получение заряженных фосфорсодержащих пролекарственных средств

4 2 Биолабильные конструкции для получения мебранопроницаемых пронуклеотидных соединений 48 4 2 1 Дизайн амидо-, фтор- и боранфосфатов

4 2 2 Использование маскирующих групп

ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ

1. Синтез липофильных векторов для модификации (14Т и AZT

1 1 Получение исходных производных глицерина

1 2 Получение производных 1,3-диацилглицеринов с различными спейсерными фрагментами

2. Синтез глицеролипидных пролекарственных соединений с!4Т и АХТ

2 1 Конъюгирование липофильных матриц с нуклеозидными агентами посредством сложноэфирных связей

67

2 2 Конъюгирование липофильных матриц с нуклеозидными агентами посредством функциональных фосфорных связей

2

3. Исследование свойств глицеролипидных конъюгатов d4T и AZT

3.1. Исследование чувствительности конъюгатов к действию ферментативного и химического гидролиза

3.2. Изучение противовирусной активности

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ВЫВОДЫ

ПУБЛИКАЦИИ

БЛАГОДАРНОСТИ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ЗТС - 2',3'-дидезокси-3'-тиацитидин ABC - абакавир Ade - аденин Ar - арил

ага-С - l-ß-D-арабинофуранозилцитозин

AZT - З'-азидо-З'-дезокситимидин

AZTTP - 5'-трифосфат З'-азидо-З'-дезокситимидина

Вое - отре/я-бутилоксикарбонил

ВОР - бис(2-оксо-3-оксазолидинил)фосфин

CCR5 - хемокиновый рецептор макрофаготропных штаммов ВИЧ

CDI -1,1 '-карбонилдиимидазол

СЕМ - лейкемические лимфоидные клетки человека

CXCR4 - хемокиновый рецептор Т-тропных штаммов ВИЧ

cycloSal - циклосалицил

Cyd - цитидин

d4T - 2',3'-дидегидро-3'-дезокситимидин DBU - 1,8-диазабицикло[5.4.0]-ундец-7-ен DCC -N, N '-дициклогексилкарбодиимид ddC - 2',3'-дидезоксицитидин ddl - 2',3'-дидезоксиинозин dFdC - гемцитабин

DMAN - 1,8-бис(диметиламино)нафтален DMAP - 4-диметиламинопиридин DMF - диметилформамид

DTE - 5'-[(2-гидроксиэтил)сульфидил]-2-тиоэтил

ЕС50 (ЕС25) - эффективная концентрация (доза, ингибирующая вирусное цитопатическое

действие на 50% и 25% соответственно)

EDCI - 1-(3'-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид

FDA - Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и

медикаментов (США)

FTC - эмтрицитабин

GABA - гамма-аминомасляная кислота

gp41, gpl 20 — поверхностные белки, участвующие в проникновении ВИЧ в клетку

Guo- гуанозин

HEL - эритролейкемическая линия клеток человека HeLa - линия раковых клеток человека hex - гексан

AtOH- 1-гидрокси-7-азабензотриазол 'Bu - изобутил 'Рг - изопропил

Iva - остаток изовалериановой кислоты

log Р - логарифм коэффициента распределения в системе октанол - вода Me - метил

МТ-4 - Т-лимфоидные клетки человека

NDP - нуклеозиддифосфат

Nie - норлейцин

Nue - нуклеозид

NVP - невирапин

Pg - защитная группа

Ph - фенил

РОМ - пивалоилоксиметил

Ру - пиридин

SI - индекс селективности

Sta - статин

Suc - сукцинил

TBDMS - т£>еот-бутилдиметилсилил

THF - тетрагидрофуран

Thy - тимин

ТК - тимидинкиназа

TZM-bl -производные клеток Hela, которые экспрессируют высокий уровень CD4 и CCR5 вместе с эндогенной экспрессией CXCR4 UD50 - 50%-ная ульцерогенная доза АДФ, АТФ - аденозинди- и трифосфат

ВИЧ-1, ВИЧ-2 - вирус иммунодефицита человека 1-го и 2-го типов

ГЭБ - гематоэнцефалический барьер

ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота

ДОФА - диоксифенилаланин

ЖК - жирная кислота

НПВС - нестероидные противовоспалительные средства РНК - рибонуклеиновая кислота

СПИД - синдром приобретенного иммунодефицита человека

ТК ~ - клетки, дефицитные по тимидинкиназе

ЦМВ - цитомегаловирус

ЦНС - центральная нервная система

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Синтез и исследование свойств глицеролипидных производных нуклеозидных ингибиторов обратной транскриптазы ВИЧ для повышения их биодоступности»

ВВЕДЕНИЕ

В настоящее время для лечения пациентов, инфицированных ВИЧ, применяется высокоактивная антиретровирусная терапия, основанная на использовании нескольких препаратов, направленных на различные стадии жизненного цикла вируса, в том числе на обратную транскрипцию. Нуклеозидные препараты, конкурируя с природными субстратами обратной транскриптазы, терминируют растущую цепь провирусной ДНК, препятствуя работе данного фермента. Однако применяемые в терапии вирусных заболеваний нуклеозидные соединения наряду с высокой эффективностью действия имеют существенные недостатки, связанные с их низкой биодоступностью, низкой способностью к трансмембранному транспорту, формированием резистентных вирусных штаммов, необходимостью использования высоких доз этих лекарственных соединений, что сказывается на проявлении ими токсических свойств.

Одним из подходов для преодоления вышеперечисленных недостатков является подход биоимитации, основанный на структурной модификации данных химиотерапевтических агентов с помощью создания конъюгатов анти-ВИЧ-активных нуклеозидов с веществами липидной природы (жирными кислотами, диацилглицеринами, фосфолипидами, холестерином). Данная стратегия, во-первых, позволяет значительно улучшить биотранспортные характеристики нуклеозидных препаратов за счёт придания им гидрофобных свойств, а кроме того дает возможность нацеливания анти-ВИЧ-нуклеозидов на лимфатическую систему (увеличения их лимфотропности), что обусловлено путями метаболизма соединений липидной природы в организме человека, при этом лимфатический транспорт позволяет избежать первичного метаболизма этих соединений в печени, таким образом повышая их биодоступность. Кроме того, он обеспечивает направленное воздействие модифицированных препаратов на вирусы, так как последние локализуются и распределяются в организме главным образом в лимфатической системе. Поэтому актуальными задачами являются разработка методов получения липидмодифицированных нуклеозидов, исследование их свойств в модельных буферных и клеточных системах, а также зависимости свойств липонуклеозидов от их структуры.

Для присоединения анти-ВИЧ-активного нуклеозида к гидрофобной матрице часто выбирают сложноэфирную или фосфоэфирную связи. Использование последнего типа связи вызвано необходимостью преодоления стадии первичного фосфорилирования данных противовирусных соединений внутриклеточными киназами, лимитирующей их действие: предварительное создание функциональной фосфорной связи может способствовать уменьшению промежутка времени от момента введения

пролекарственного соединения в организм до момента начала его действия, снижению вводимой в организм дозы активного препарата и его токсичности.

Однако одним из недостатков фосфодиэфирных конъюгатов является их низкая мембранотропность, обусловленная депротонированием фосфорного центра при физиологическом значении рН 7.0-7.4. Для получения мембранопроницаемых фосфорсодержащих производных, способных успешно достигнуть внутриклеточных сайтов и расщепиться до монофосфатов нуклеозидов, фосфорные центры маскируют различными биодеградируемыми группами, получая фосфотриэфиры, амидофосфаты, или конструируют такие незаряженные производные, как фосфонатдиэфиры. Поэтому также перспективным направлением является создание пролекарственных соединений на основе веществ липидной природы, содержащих функциональные фосфорные связи.

Цель работы заключалась в разработке путей синтеза новых липофильных производных 2',3'-дидегидро-3'-дезокситимидина (d4T) и З'-азидо-З'-дезокситимидина (AZT) на основе 1,3-диацилглицеринов и исследование их свойств.

Были поставлены следующие задачи:

- Синтез липофильных векторов для модификации d4T и AZT.

- Разработка методов и осуществление синтеза глицеролипидных конъюгатов анти-ВИЧ-активных нуклеозидов, в которых структурные фрагменты соединены между собой посредством сложноэфирных или функциональных фосфорных связей.

- Исследование чувствительности полученных соединений к действию химического и ферментативного гидролиза, изучение их противовирусных свойств.

Научная новизна. Разработаны методы синтеза новых пролекарственных соединений d4T и AZT на основе 1,3-диацилглицеринов с различными жирнокислотными остатками. При конъюгировании структурных фрагментов посредством сложноэфирных связей были получены моно- и динуклеозидсодержащие соединения, последние могут содействовать увеличению внутриклеточной концентрации d4T и AZT. Использование Н-фосфонатного метода позволило осуществить синтез глицеролипидных соединений d4T и AZT с функциональными фосфорными связями. Ряд синтезированных конъюгатов проявил высокую ингибирующую активность в отношении вирусного штамма ВИЧ-1899А на МТ-4 клетках, что дает возможность рассматривать такие конъюгаты как перспективные фармакологически активные соединения для дальнейших исследований.

В ходе работы получено 25 новых соединений. Чистоту полученных производных подтверждали данными ТСХ-анализа, структуру доказывали с помощью физико-химических и спектральных методов.

Практическая ценность. На основе производных 1,3-диацилглицеринов разработан препаративный метод получения новых моно- и динуклеозидсодержащих конъюгатов d4T и AZT. Я-фосфонатный подход дал возможность с высокой эффективностью осуществить синтез промежуточных соединений и на их основе с высокими выходами получить ряд новых глицеролипидных производных d4T и AZT с функциональными фосфорными связями.

Исследование противовирусных свойств синтезированных конъюгатов в отношении ВИЧ-1899А на МТ-4 клетках выявило соединения, обладающие высокой ингибирующей активностью. Дальнейшее изучение их медико-биологических свойств открывает перспективные направления синтеза препаратов с высокой эффективностью терапевтического действия и пониженным побочным влиянием на организм.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. Вирус иммунодефицита человека: ключевые ферменты и противовирусные препараты, одобренные управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов. Дизайн новых анти-ВИЧ-активных нуклеозидных соединений

1 1 Основные ферменты ВИЧ и их ингибиторы, одобренные для клинического использования

Синдром приобретенного иммунодефицита человека, вызванный патогенным ретровирусом ВИЧ, считается одним из самых опасных и распространенных заболеваний человечества на протяжении последних 26 лет [1,2]. Высокая смертность ВИЧ-инфицированных пациентов и постоянные мутации вируса стимулируют разработку новых эффективных противовирусных соединений, действующих на разных этапах жизненного цикла ВИЧ (рис.1) [3-9].

В настоящее время насчитывается 25 анти-ВИЧ-

активных препаратов [10], одобренных управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) для использования в клинике (табл. 1). Современная высокоактивная антиретровирусная терапия (ВААРТ) включает в себя, по крайней мере, комбинации из трех различных противовирусных соединений. Данные лекарственные вещества являются ингибиторами основных ферментов вируса, обратной транскриптазы, протеазы и интегразы. В последнее время к этому списку добавились ингибитор слияния вируса с клеткой (Энфувиртид®) и блокатор ко-рецептора CCR5 (Маравирок®) [4,11].

смертности и возникновения оппортунистических заболеваний у ВИЧ-инфицированных пациентов. Однако, несмотря на все усилия ученых и врачей данный вирус продолжает уносить жизни нескольких миллионов людей по всему миру каждый год

Применение ВААРТ способствует уменьшению

Рисунок 1. Репликативный цикл ВИЧ

Мишень действия Класс соединений Одобренные препараты Коммерческое название (компания производителя) Дата утверждения

Обратная транскриптаза > Нуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы ^ Пиримидиновые Зидовудин, азидотимидин, AZT, ZDV Ретровир® (GlaxoSmithKline) 19 марта 1987

Зальцитабин, дидезоксицитидин, ddC* Хивид® (Hoffmann - La Roche) 19 июня 1992

Ставудин, d4T Зерит® (Briston Myers-Squibb) 24 июня 1994

Ламивудин, ЗТС Эпивир (GlaxoSmithKline) 17 ноября 1995

Эмтрицитабин, FTC Эмтрива (Cilead Sciences) 2 июля 2003

пуриновые Диданозин, дидезоксиинозин, ddl Видекс (Briston Myers-Squibb) 9 октября 1991

Абакавир, ABC Зиаген® (GlaxoSmithKline) 17 декабря 1998

> Нуклеотидные ингибиторы обратной транскриптазы Тенофовир, TDF Виреад® (Cilead Sciences) 26 ноября 2001

Фосфазид, Ф-АЗТ Никавир® (A3T- Фарма ООО) Одобрен в РФ 5 февраля 2010

> Ненуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы Невирапин, NVP Вирамун® (Boehringer Ingelheim) 21 июня 2006

Делавиридин, DLV Рескриптор® (Pfizer) 4 апреля 1997

Эфавиренз, EFV Сустива® (Boehringer Ingelheim) 17 сентября 1998

Этравирин, ТМС125 Интеленс® (Tibotec, J&J) 18 января 2008

Рилпивирин, ТМС278 Эдурант (Janssen) 20 мая 2011

Саквинавир, SQV Инвираза® (Hoffmann - La Roche) 6 декабря 1995

Ритонавир, RTV Норвир® (Abbott Labs) 1 марта 1996

Индинавир, IDV Криксиван® (Merck & Co.) 13 марта 1996

Нелфинавир, NFV Вирасепт (Pfizer) 14 марта 1997

Протеаза Ингибиторы протеазы Ампренавир, APV Агенеразе® (GlaxoSmithKline)** 15 апреля 1999

Атазанавир, ATV Реатаз ® (Bristol Myers Squibb) 20 июня 2003

Фосампренавир, FOS-APV Лексива® (GlaxoSmithKline) 20 сентября 2003

Типранавир, TPV Аптивус® (Boehringer Ingelheim) 22 июня 2005

Дарунавир, ТМС114 Презиста® (Tibotec, J&J) 23 июня 2006

Вирусные и клеточные Ингибиторы проникновения Маравирок*** Селзентри® (Pfizer) 6 августа 2007

гликопротеины Энфувиртид, Т-20 Фузеон (Hoffmann - La Roche) 13 марта 2003

Интеграза Ингибиторы интегразы Ралтегравир Исентресс® или MK-0518 (Merck & Co.) 12 ноября 2007

*производство зальцитабина прекращено 31.12.2006 **производство ампренавира прекращено 31.12.2004 ***блокатор корецептора CCR5

1.2. Нуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы (НИОТ), механизм их действия и недостатки

Нуклеозидные анти-ВИЧ-препараты (рис. 2) являются аналогами природных нуклеозидов - тимидина, цитидина, аденозина, гуанозина - и составляют основу высокоактивной антиретровирусной терапии. Действие данных агентов направлено на вирусную РНК-зависимую ДНК-полимеразу (обратную транскриптазу). Данный фермент является ключевым в применяемой ВААРТ, и совместные усилия ученых многих стран направлены на разработку и поиск новых эффективных нуклеозидных препаратов, направленных на ингибирование его действия.

Пиримидиновые НИОТ

НО

N3 АТТ1

N О

О-

с1сЛ 6

НО

с!4ТЗ Пуриновые НИОТ

'Д «3

N м

НО^

-О

но

ин

N О

НО

N

А,

N О

О

(НС 2

НО

А

КН

1МН,

N

N О

РТС 5

N Т^Г^ тмн2

о

АВС 7

Рисунок 2. Нуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы.

Существует три класса анти-ВИЧ-активных соединений, подавляющих действие данного фермента: ненуклеозидные, нуклеозидные и нуклеотидные ингибиторы обратной транскриптазы. Нуклеозидные и нуклеотидные препараты после фосфорилирования клеточными нуклеозид- и нуклеотидкиназами до трифосфатов (рис. 3) становятся субстратами обратной транскриптазы, взаимодействуют с каталитическим сайтом

фермента в качестве терминаторных субстратов и прерывают синтез провирусной ДНК, а ненуклеозидные, для которых характерно "несубстратное" связывание с обратной транскриптазой, взаимодействуют с аллостерическим сайтом, находящимся на расстоянии 15 А от субстратсвязывающего участка, и ингибируют действие фермента за счет изменения конформации его активного центра [12-14].

Агт АгТ-МР А2Т-0Р А2Т-ТР

ООО о

УдГ XV

М)Р киназа

РНК

Рисунок 3 Внутриклеточная активация нуклеозидов.

Активные метаболиты нуклеозидов конкурируют с природными дезоксинуклеозидтрифосфатами, имеющими З'-гидроксильную группу, за возможность встраивания в растущую цепь вирусной ДНК. Именно отсутствие гидроксильной группы в 3'-положении молекул антивирусных нуклеозидных средств позволяет им терминировать цепь вирусной ДНК.

Применение нуклеозидных ингибиторов в течение долгого времени не поддерживает постоянную низкую концентрацию вирусных копий. Значительное снижение действия этих препаратов происходит в результате мутаций ВИЧ и возникновения его резистентных штаммов. Среди ВИЧ-инфицированных клеток в организме человека есть такие клетки, в которых обратная транскриптаза не распознает нуклеозидный ингибитор подобно природному нуклеозиду и не включает его в растущую ДНК-цепь вируса. Поэтому актуальной задачей в лечении ВИЧ-инфекции является разработка таких нуклеозидных ингибиторов, которые в инфицированных клетках

узнавались бы вирусными ферментами и включались бы в цепь метаболизма подобно природным соединениям данного класса.

К сожалению, применяемые в клинике антиретровирусные нуклеозидные препараты отличаются незначительными лимфотропными и мембранотропными свойствами, низкой биодоступностью из-за первичной деградации в печени, токсичностью и при их длительном применении вызывают образование резистентных вирусных штаммов.

Рисунок 4. Общая схема обратимой активации НИОТ.

Также при использовании в лечении ВИЧ-инфицированных пациентов высокоактивной антиретровирусной терапии, содержащей один или более нуклеозидных ингибиторов обратной транскриптазы, у больных наблюдаются различные клинические симптомы, такие как миопатия, невропатия, нейтропения, панкреатит, липодистрофия и др. [15-17]. Некоторые из этих симптомов проявляются при длительном применении лекарств и связаны с токсическим действием самих нуклеозидов и их активных трифосфатных метаболитов на клеточные митохондрии при обратимой активации НИОТ (рис. 4) [18-21], к тому же с течением времени возникают вирусные резистентные штаммы, которые значительно осложняют поиск эффективного лечения.

Таким образом, оптимальное соблюдение взаимосвязи высвобождения активного вещества из лекарственной формы, его всасывания, распределения, метаболизма, выведения и оказываемого эффекта на клетки-мишени при конструировании новых

нуклеозидных ингибиторов может способствовать созданию наиболее активных лекарственных препаратов.

1.3. Разработка новых анти-ВИЧ-активных нуклеозидов

1.3.1. Модификация углеводного фрагмента

Исходя из того, что З'-азидо-З'-дезокситимидин 1 стал первым одобренным анти-ВИЧ-активным агентом, дальнейшие исследования сосредоточились на разработке 2',3'-дидезоксинуклеозидов (сИС 2, с!4Т 3, скП 6). Открытие противовирусной активности ¿-нуклеозидов ЗТС 4 и БТС 5 с «оксатиа» рибозной структурой дало толчок к разработке новых эффективных соединений, в которых возможно как замещение в углеводном фрагменте [14,22-24], так и изменение его конфигурации [25-27], что приводит к модулированию фармакологических и токсических свойств нуклеозидных препаратов.

Ранее было показано, что аналог нуклеозида 8 является более устойчивым соединением в кислых условиях по сравнению с исходным с14Т 3, обладает меньшей цитотоксичностью в МТ-4 клетках, но проявляет значительно низкие противовирусные свойства в отношении ВИЧ-1 и ВИЧ-2 [28]. Исследования ингибирующей активности его энантиомера ¿-И-МСсМТ 9 (рис. 5) в отношении вирусных штаммов Н1\Мшв и Н1У-2ясю на МТ-4 клетках показали, что он обладает 50%-ной эффективной концентрацией 6.76 мкг/мл, что в 1.3 раза ниже, чем применяемая в клинике ингибирующая концентрация диданозина 6, но оказывается неактивным в отношении ВИЧ-2. Цитотоксическая концентрация энантиомера 9 составляет более 100 мкг/мл [29].

0 0 О

1ЧН

хУ

ш

л.

N О

£>-Ы-МСс14Т 8

ОН

¿-И-МСсМТ 9

НО

яохЧ>

О-

но

10 К = N3

11 я = сы

Рисунок 5. Структура энантиомеров 8, 9 и 4'-азидо-, 4'-цианопроизводных тимидина 10, 11.

В связи с возникновением резистентных вирусных штаммов при длительном применении 2',3'-дидезоксинуклеозидов поиск новых анти-ВИЧ-агентов привел к разработке 4'-замещенных нуклеозидов. Исследования показали, что соединения 10 и 11 (рис. 5) обладают ингибирующими свойствами против обратной транксриптазы ВИЧ-1

даже при наличии в 3'- положении гидроксильной группы [30,31]- Введение заместителей в 4'-положение углеводного фрагмента нуклеозида способствует тому, что вторичная З'-ОН группа в составе неопентильного спирта приобретает низкую реакционноспособность, предотвращая включение подобных нуклезидов в построение провирусной ДНК. Дальнейшие исследования взаимосвязи структура-активность 4'-С-замещенных нуклеозидных производных показали, что они способствуют проникновению анти-ВИЧ-активных агентов через клеточные барьеры, повышению их биодоступности, снижению токсических свойства и предотвращению возникновения резистентных вирусных штаммов, а также они являются устойчивыми к ферментативному расщеплению [23].

12, 15, 18,21,25 R = Ade

13, 16, 19 R = Thy

14, 17, 20 R = Cyt

22, 26 R = 6-кетопурин

23, 27 R = 2AA

24, 28 R = Gua

OH 25-28

Рисунок 6. 3'- и 4'-Замещенные нуклеозиды.

Группа соединений 12-28 (рис. 6), которые содержат различные гетероциклические основания и имеют различные заместители в 3'- и 4'- положениях сахарного остатка была исследована на биологическую активность (как анти-ВИЧ-активность, так и токсичность) [32]. Исследования проводили на МТ-4 клетках в отношении вирусного штамма ВИЧ-Ilai методом МТТ. Полученные результаты свидетельствовали о том, что соединения 12-14 обладают значительной противовирусной активностью (ЕС50 0.072^7.2(iM), тогда как производные 15-20 совсем не проявляют ингибирующих свойств. Эти результаты указывают на важность присутствия З'-ОН группы для проявления анти-ВИЧ-активности. Дальнейшие исследования пуриновых производных 21-27 выявили, что 4'-цианпроизводные 21-23 обладают значительной противовирусной активностью, но не все имеют высокий индекс селективности, однако пуриновые нуклеозиды 25-28 показывают как значительную активность в отношении выбранного штамма, так и высокий SI. Соединения 25-28 проявляют высокие ингибирующие свойства в отношении многих вирусных штаммов, резистентных к одобренным НИОТ (KH65R, L74V, 41/215, M184V, M184I), кроме того производные 25-27 обладают активностью

против вирусного штамма У181С, устойчивого к ненуклеозидным ингибиторам обратной транскриптазы.

Наличие гидроксильной группы в 3'- положении 4'- замещенных нуклеозидов не всегда является важным критерием для проявления их антивирусной активности, так был синтезирован нуклеозидный аналог 2',3'-дидегидро-3'-дезокси-4'-этинилтимидин 32 (Ес14Т) (схема 1) [33], который проявляет более высокую противовирусную активность, чем сам ё4Т, является менее токсичным в Т-лимфобластоидных клетках и клетках СЕМ и не подавляет синтез митохондриальной ДНК в СЕМ-клетках. При взаимодействии 4',5'-эпоксида 29 с избытком триэтинилалюминия (3 экв.) в хлористом метилене при температуре -30°С в течение 4 ч образовывался промежуточный интермедиат 30, дальнейшая трансформация которого приводила к получению соединения 31 в 4'-а-конформации с выходом 57%. Дальнейшее последовательное проведение реакций -VI позволило получить новый нуклеозидный аналог 32.

О

NH N^O

-TBDMS

29

11 -vi

Yr

N O

НО

TBDMS

ИХ

НС=С—Al—С=СН I

с

/

32

i) (НС=СН)3А1, СН2С12: -30°С, 4 ч; и) ацетилирование; iii) десилилирование (TBAF/THF); iv) мезилирование; v) удаление MsOH (DBN/CH3CN); vi) деацетилирование (NH3/MeOH)

Схема 1. Синтез 2',3'-дидегидро-3'-дезокси-4'-этинилтимидина 32.

Авторы полагают, что использование в клинике 4'-Ed4T 32 может способствовать проявлению большего терапевтического эффекта, чем при использовании самого d4T, за счет поддержания стабильного уровня митохондриальной ДНК в периферических нейронах, ответственного за возникновение периферической нейропатии [34]. Исследования показали, что соединение 32 является лучшим субстратом для тимидинкиназы, чем d4T, и обладает большей устойчивостью к катаболизму под действием тимидинфосфорилазы. Сравнение способности ингибиторов защищать клетки TZM-bl при ВИЧ-инфекции через 48 ч после удаления фармакологически активного препарата из клеточной культуры показали, что она уменьшается в ряду 4'-Ed4T> ddl> d4T> ЗТС> AZT> FTC> NVP [35,36]. В настоящее время вещество 32 запатентовано как Фестинавир® (Bristol Myers-Squibb) и находится на II стадии клинических исследований [37].

1.3.2. Модификация нуклеиновых оснований

Одним из важных барьеров в процессе доставки анти-ВИЧ-активных нуклеозидов к клетках ЦНС является гематоэнцефалический барьер. ГЭБ не только задерживает и не пропускает целый ряд гидрофильных веществ из крови в вещество мозга, но и выполняет противоположную функцию — транспортирует вещества, необходимые для метаболических процессов в мозге. В связи с этим разрабатываются подходы, которые направлены на улучшение свойств известных препаратов за счет включения в их структуру как гидрофобных фрагментов для пассивного транспорта, так и фрагментов, являющихся субстратами эндотелиальных ферментов ГЭБ [38-40].

Я

но

х

N N

НО

О

N

Я,

33 X = С; Я = ЫН-

<1

34 Х = 0;Я = >Ш—<]

МН2 35 Я= С1; Я] = Н ;

36 Я = Вг; Я, = Н;

37 11 = 1; Я, = Н;

38 Я = Р;Я! = Н;

39 Я = 1ЧН2;Я1 = Н;

40 Я = ОСН3; Ь^ = Н;

41 Я = ОС2Н5; Я] =Н;

42 К = ОС6Н13;К, =Н;

43 Я = С1, Я, = N№>5

44 Я = Б, Я] = ЫН2

НО

45 Я, = Р; Я = Н;У = Н; Ъ = N3;

46 Я! = Я = ОН; У = Н; Ъ = N3;

47 Я] = Я = ОН; У = N3; Ъ = I

Рисунок 7. Пролекарственные соединения, полученные модификацией азотистых оснований.

Введение остатка циклопропиламина в 6-е положение пуринового основания в пролекарственных соединениях 33, 34 (рис. 7) способствует повышению биодоступности анти-ВИЧ-активных нуклеозидов. Данные соединения подвергаются в организме дезаминированию, а затем уже трехступенчатому фосфорилированию для их внутриклеточной активации [14]. Отношение концентрации активных соединений в клетках мозга к концентрации в плазме для С-6-галидпуринов 35-38 при их пероральном применении после 30 мин составляет 0.67, 0.40, 0.48, 0.30, в то время как для скП - 0.02. Соединения 39, 43, 44 могут быть преобразованы до гидроксипуринов с помощью аденозиндезаминазы, что позволит таким образом увеличить мембранотропность пролекарственных соединений и облегчить их проникновение через ГЭБ к клеткам ЦНС [41]. Исследования пролекарственных веществ 33, 34, 39, 43, 44 показали, что они обладают высокой субстратспецифичностью к действию аденозиндезаминазы и

проявляют ингибпрующие свойства в отношении ВИЧ [14,42]. Хорошую биодоступность показывают С-6-алкоксипурины 40-42 и азидопурины 45-47 [41,43-45]. С-2- или С-6 -азидо группа в пуриновых производных 45-47 способна восстанавливаться под действием цитохром Р450-зависимой монооксидазы. Соединение 45 метаболизирует in vivo до 2'-F-araddI, что приводит к снижению его биодоступности и уменьшению скорости дезаминирования в клетках мозга [44]. Исследования производного 46 in vivo показали, что продукт его метаболизма ara-A пролонгированно высвобождается в клетках мозга, что может способствовать поддержанию постоянной концентрации препарата [45].

Для противовирусных средств пиримидинового ряда эффективными оказались 5-галид-6-алкокси(или азидо)замещённые соединения 48-55, 56-62 и 63-68 (рис. 8), биодоступность которых удалось увеличить в 2-30 раз [14,46-47]. Данные соединения быстро деградируют в организме в присутствии глутатиона до родоначальных нуклеозидных аналогов и наряду с природными нуклеозидами конкурентно встраиваются в растущую цепь «ровирусной ДНК. При исследовании на СЕМ клетках 5-йодо-6-метоксипиримидины 50 и 59 проявили более высокие ингибирующие свойства, чем 5-бром- и 5-хлорзамещенные пиримидины. Соединения 54, 55, 61, содержащие в гетероциклическом основании азидную группу, не обладали противовирусной активностью.

О

Ме X

NH

Г 'N^4)

НО.

N3

48 X = Br, R = ОМе;

49 X = Cl, R = ОМе;

50 X = I, R = ОМе;

51 X = Br, R = OEt;

52 X = Cl, R = OEt;

53 X = Br, R = OCH(Me)2;

54 X = Br, R = N3;

55 X = Cl, R = N3

НО

Me X

O

NH

O

56 X = Br, R = OH;

57 X = Br, R = OMe;

58 X = Cl, R = OMe;

59 X = I, R = OMe;

60 X = Br, R = OEt;

61 X = Br, R = N3;

62 X = OMe, R = OH

НО

OH

63 R = Me, X = Br, R, = OMe;

64 R = F, X = Br, R, = OMe;

65 R = F, X = Cl, R] = OMe;

66 R = Et, X = Br, R, = OMe;

67 R = Et, X = Cl, R, = OMe;

68 R = Et, X = Cl, R, = OEt

Рисунок 8. 5-Галид-6-алкокси(или азидо)замещённые пиримидиновые нуклеозиды.

Также известны подходы, в которых модифицируется как нуклеиновое основание, так и сахарный остаток [48,49]. Одним из примеров является получение З'-дезокси-З'-

фтор-2-тиотимидина 74. Его предшественник З'-дезокси-З'-фтортимидин (РЬТ) представляет собой высокоактивный ингибитор обратной транскриптазы ВИЧ-1. Образование резистентных штаммов вируса, устойчивых к РЬТ, происходит медленнее, чем к другим ингибиторам ЯТ, но, как и другие нуклеозидные препараты, РЬТ проявляет токсические свойства при длительном применении. Поэтому были синтезированы и исследованы липофильные аналоги РЬТ: 2',3'-дидезокси-3'-фтор-2-тиотимидин и 2',3'-дидезокси-3'-фтор-4-тиотимидин, которые проявили активность против ВИЧ-1 с низкой цитотоксичностью (схема 2) [50].

(I) - DAST, 0°С, 1ч, (II) - DBU, ЕЮН, Зч, (III) - Ас20, DMAP, Ткомн., 2ч, (IV) - H2S. TMG, Ру, 0°С, 1ч. (V) -NH3/MeOH, Ткомн . 2ч.

Схема 2. Синтез 3'-дезокси-3'-фтор-2-тиотимидина 74.

1.3.3. Нуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы, находящиеся на разных стадиях клинических исследований

Априцитабин [(-)2'-дезокси-3'-окса-4'-тиацитидин] 75 - аналог дезоксицитидина, в данное время находящийся на одобрении FDA после прохождения III стадии клинических исследований, является нуклеозидным ингибитором обратной транскриптазы (рис. 9), [10,51]. Структурная особенность данного нуклеозида заключается в его «оксатиа» рибозной структуре, которая содействует терминации построения яровирусной ДНК. Исследования in vitro показали, что препарат 75 обладает низкой митохондриальной токсичностью, что может быть связано с меньшим побочным влиянием на клетки, он активен в отношении вирусных штаммов, устойчивых к действию AZT и ЗТС, а также против штаммов дикого типа [52-54]. При комбинированном применении априцитабина 75 in vitro с AZT, d4T или FTC была выявлена большая активность в отношении ВИЧ, чем

при использовании этих нуклеозидных препаратов по отдельности. Клинические испытания in vivo показали лучшие результаты, чем испытания in vitro [55]. В условиях in vivo вирусные штаммы, устойчивые к действию других агентов, оказались чувствительными к этому нуклеозиду в течение 10-дневной монотерапии, при этом соединение 75 сохраняло низкую токсичность [56,57].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Дьякова, Людмила Николаевна, 2013 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1) Broder, S. The development of antiretroviral therapy and its impact on the HIV-1/AIDS pandemic / S. Broder // Antiviral. Res. - 2010. - V. 85. - P. 1-18.

2) Sosnik, A. Drug delivery systems in HIV pharmacotherapy: What has been done and the challenges standing ahead / A. Sosnik, D. Chiappetta, A. Carcaboso // J. Control. Release. - 2009. - V. 138. - P. 2-15.

3) Mehellou, Y. Twenty-six years of anti-HIV drug discovery: Where do we stand and where do we go? / Y. Mehellou, E. Clercq // J. Med. Chem. - 2010. - V. 53. - P. 521-538.

4) Clercq, E. Antiretroviral drugs / E. Clercq // Curr. Opin. Pharmacol. - 2010. - V. 10.-P. 507-515.

5) Martin, J. Early nucleoside reverse transcriptase inhibitors for the treatment of HIV: a brief history of stavudine (d4T) and its comparison with other dideoxynucleosides / J. Martin, M. Hitchcock, E. Clerc, W.H. Prusoff// Antiviral. Res. - 2010. - V. 85. - P. 34-38.

6) Clercq, E. Strategies in the desing of antivital drugs / E. Clercq // Nature Rev. -2002.-V. l.-P. 13-25.

7) Clercq, E. In search of a selective therapy of viral infections / E. Clercq // Antiviral. Res. - 2010. - V. 85. - P. 19-24.

8) Wlodawer, A. Rational approach to AIDS drug design through structural biology / A. Wlodawer // Annu. Rev. Med. - 2002. V. 53. - P. 595-614.

9) Palombo, M.S. Prodrug and conjugate strategies for improwing HIV/AIDS therapy / M.S. Palombo, Y. Singh, P.J. Sinko // J. Drug Sci. Tech. - 2009. - V. 19, № 1. - P. 314.

10) http://www.arvt.ru/drugs.html

11) Clercq, E. Anti-HIV drugs: 25 compounds approved within 25 years after discovery of HIV / E. Clercq // Int. J. Antimicrob. Agents. - 2009.- V. 33,- P. 307-320.

12) Chapter, C. Evolving a cure to aids / C. Chapter // Biology. - 2001. - № 9. - P. 216-230.

13) Clercq, E. Antiviral drug discovery and development: Where chemistry meets with biomedicine / E. Clercq // Antivir. Res. - 2005. - V. 67. - P. 56-75.

14) Mackman, R. Prodrug Strategies in the Design of Nucleoside and Nucleotide Antiviral Therapeutics / R. Mackman, T. Cihlar // Ann. Rep. Med. Chem. - 2004. - V. 39. - P. 305-321.

15) Hulgan, T. Nucleoside and nucleotide analogue reverse transcriptase inhibitor toxicity: how much longer must we wield the sword? / T. Hulgan // Future HIV Ther. - 2007. -V. 1,№ 1. - P. 61-72.

16) Ellis, R. HIV and antiretroviral therapy: impact on the nervous system / R. Ellis // Prog. Neurobiol. - 2010. - V. 91.-P. 185-187.

17) Varatharajan, L. The transport of anti-HIV drugs across blood-CNS interfaced: summary of current knowledge and recommendations for the further research / L. Varatharajan, S. Thomas // Antiviral. Res. - 2009. - V. 82. - P. 99-109.

18) Cihlar, T. Nucleoside and nucleotide HIV reverse transcriptase inhibitors: 25 years after zidovudine / T. Cihlar, A. Ray // Antiviral. Res. - 2010. - V. 85. - P. 39-58.

19) Birkus, G. Assessment of mitochondrial toxicity in human cells treated with tenofovir: comparison with other nucleoside reverse transcriptase inhibitors / G. Birkus, J. Hitchcock, T. Cihlar // Antimicrob. Agents Chemother. - 2002. - V. 46, № 3. - P. 716-723.

20) Brinkman , K. Mitochondrial toxicity induced by nucleoside-analogue reverse-transcriptase inhibitors is a key factor in the pathogenesis of antiretroviral-therapy-related lipodystrophy / K. Brinkman, J. Smeitink, J. Romijn, P. Reiss //Lancet. - 1999. - V. 354. - P. 1112-1115.

21) White, A. Mitochondrial toxicity and HIV therapy / A. White // Sex Transm. Inf. -2001.-V. 77.-P. 1558-173.

22) Schinazi, R.F. Pharmacology of current and promising nucleosides for the treatment of human immunodeficiency viruses / R.F. Schinazi, B.I. Hernandez-Santiago, S.J. Hurwitz // Antiviral. Res. - 2006. - V. 7. - P. 322-334.

23) Hayakawa, H. Potential of 4'-C-subsituted nucleosides for the treatment of HIV / H. Hayakawa, S. Kongo, K. Kitano K. N. Ashida,E. Kodama,H. Mitsuya, H. Ohrui // Antivir. Chem. Chemother. - 2004. - V. 15. - P. 169-187.

24) Wu, J. Design, synthesis, and biological evaluation of new 2'-deoxy-2'-fluoro-4'-triazole cytidine nucleosides as potent antiviral agents / J. Wu, Yu. Wenquan, Fu. Leixia, W. He, Y. Wang, B. Chai, C. Song, J. Chang // J. Med. Chem. - 2013. - V. 63. - P. 739-745.

25) Wang, P. Recent advances in ¿-nucleosides: chemistry and biology / P. Wang P, J.H. Hong, J.S. Cooperwood, C.K. Chu // Antiviral. Res. - 1998. - V. 40. - P. 19-44.

26) Gumina, G. ¿-Nucleosides as chemotherapeutic agents / G. Gumina,G-Y. Song, C.K. Chu // FEMS Microbiol, lett. - 2001. - V. 202. - P. 9-15.

27) Lee, K. Molecular modeling approach to understanding the role of action of L-nucleosides as antiviral agents /K. Lee , C.K. Chu // Antimicrob. Agents Chemother. - 2001. -V. 45.-P. 138-144.

28) Choi, Y. A conformationally locked analogue of the anti-HIV agent stavusine. An important correlation between pseudorotation and maximum amplitude / Y. Choi, C. George,

M.J.Comin, J.J. Barchi, H.S. Kim, K.A. Jacobson, J. Balzarini, H. Mitsuya, P.L. Boyer, S.H. Hughes, V.E. Marquez // J. Med. Chem. - 2003. - V. 46. - P. 3292-3299.

29) Moon, H.R. Asymmetric synthesis and biological activity of L-bicyclocarba-d4T / H.R. Moon, A-Y. Park, K.R. Kim // Nucleosides Nucleotides Nucleic Acids. - 2007. - V. 26. -P. 1653-1657.

30) O-Yang, C. Synthesis of 4'-cyanothymidine and analogs as potent inhibitors of HIV / C. O-Yang, H.Y. Wu, E. Fraser-Smith, A. Walkman // Tetrahedron Lett. - 1992. - V. 33. - P.37-40.

31) Maag, H. Synthesis and anti-HIV activity of 4'-azido- and 4'-methoxynucleosides / H. Maag, R. Rydzewski, M. McRoberts, D. Crawford-Ruth, J.P. Verheyden, E.J. Prisbe // J. Med. Chem. - 1992. - V. 35. - P. 1440-1451.

32) Ohrui, B.H. Development of modified nucleosides that have supremely high anti-HIV activity and low toxicity and prevent the emergence of resistant HIV mutants / B.H. Ohrui // Proc. Jpn. Acad. - 2011. - V. 87. - P. 53-65.

33) Haraguchi, K. Synthesis of a highly active new anti-HIV agent 2',3'-didehydro-3'-deoxy-4'-ethynylthymidine / K. Haraguchi, S. Takeda, H. Tanaka, T. Nitanda, M. Baba, G.E. Dutschman, Y.C. Cheng // Bioorg. Med. Chem. Lett. - 2003. - V. 13. - P. 3775-3777.

34) Tanaka, H. 4'-Ethynylstavudine (4'-Ed4T) has potent anti-HIV-1 activity with reduced toxicity and shows a unique activity profile against drug-resistent mutants / H. Tanaka, K. Haraguchi, H. Kumamoto, M. Baba, Y.C. Cheng // Antivir. Chem. Chemother. - 2005. - V. 16.-P. 217-221.

35) Medendez-Arias, L. Mechanismz of resistance to nucleoside analogue inhibitors of HIV-1 reverse transcriptase / L. Medendez-Arias // Virus Res. - 2008. - V. 134. - P. 124-146.

36) Paintsil, E. Comparative study of the persistence of anti-HIV activity of deoxynucleoside HIV reverse transcriptase inhibitors after removal from culture / E. Paintsil, S. Crill, G. Dutschman, Y.C. Cheng // AIDS Res. Ther. - 2009. - V. 6, № 5. - P. 1-10.

37) Wang, X. Study of the retention of metabolites of the 4'-Ed4T, a novel anti-HIV-1 thymidine analog, in cells / X. Wang, T. Hiromichi, M. Baba, Y.C. Cheng //Antimicrob. Agents Chemother. - 2009. - V. 53. - P. 3317-3324.

38) Anderson, B.D. Approaches toward the optimization of CNS uptake of anti-AIDS agents / B.D. Anderson, R.E. Galinsky, D.C. Baker, S.-C. Chi, B.L. Hoesterey, M.E. Morgan, K. Murakami, H. Mitsuya // J. Control. Release. - 1992. - V. 19. - P. 219-230.

39) Anderson, B.D. Prodrugs for improved CNS delivery / B.D. Anderson // Adv. Drug Deliv. Rew. - 1996. - V. 19. - P. 171-202.

40) Gallo, G.M. Delivery of anti-HIV nucleosides to the central nervous system /

G.M. Gallo // Adv. Drug Deliv. Rew. - 1994. - V. 14. - P. 199-209.

41) Shirasaka, T. Lipophilic halogenated congeners of 2',3'-dideoxypurine nucleosides active against human immunodeficiency virus in vitro / T. Shirasaka, K. Murakami,

H. Ford, J.A. Kelley, H. Yoshioka, E. Kojima, S. Broder, H. Mitsuya // Proc. Natl. Acad. Sci. -1990.-V. 87.-P. 9426-9340.

42) Murakami, K. Escherichia coli mediated biosynthesis and in vitro anti-HIV activity of lipophilic 6-halo-2',3'-dideoxypurine nucleosides / K. Murakami, T. Shirasaki, H. Yoshioka, E. Kojima, S. Aoki, H. Ford, J.S. Driscoll, J.A. Kelley, H. Mitsuya // J. Med. Chem. -1991-V. 34. - P. 1606-1612.

43) Burns, C.L. Novel 6-alkopurine 2',3'-dideoxynucleosides as inhibitors of the cytopathic effect of the human immunodeficiency virus / C.L. Burns, M.H.S. Clair, L.W. Frick // J. Med. Chem. - 1993. - V. 36. - P. 378-384.

44) Koudriakova, T. In vitro and in vivo evaluation of 6-azido-2',3'-dideoxy-2'-fluoro-P-D-arabinofuranosyladenine as prodrugs of the anti-HIV nucleosides 2'-F-ara-ddAand 2'-F-ara-ddI / T. Koudriakova, K.K. Manouilov, K. Shanmuganathan, L.P. Kotra, F.D. Boudinot, E. Gretton-Scott, J-P. Somadossi, R.F, Schinazi, C.K. Chu // J. Med. Chem. - 1996. - V. 39, № 23.-P. 4676-4681.

45) Kotra, L.P. Synthesis, biotransformation, and pharmacokinetic studies of 9-(|3-D-arabinofuranosyl)-6-azidopurine: A prodrug for ara-A designed to utilize the azide reduction pathway / L.P. Kotra, K.K. Manouilov, E. Cretton-Scott, J-P. Somadossi, F.D. Boudinot, Schinazi, C.K. Chu // J. Med. Chem. - 1996. - V. 39, № 26. - P. 5202-5207.

46) Kumar, R. Synthesis, in vitro biological stability, and anti-HIV activity of 5-halo-6-alkoxy(or azido)-5,6-dihydro-3'-azido-deoxythymidine diastereomers as potential prodrugs to 3'-azido-3'-deoxythymidine (AZT) / R. Kumar,L. Wang , L.I. Wiebe, E.E. Knaus // J. Med. Chem. - 1994. - V. 37. - P. 4297-4306.

47) Kumar, R. Synthesis, in vitro biological stability, and anti-HIV activity of 5-halo(or methoxy)-6-alkoxy(azido or hydroxy)-5,6-dihydro-3'-azido-deoxythymidine diastereomers as potential prodrugs to 2',3'-didehydro-3'-deoxythymidine (d4T) / R. Kumar, L. Wang, L.I. Wiebe, E.E. Knaus //Nucleosides Nucleotides. - 1996. - V. 15(1-3). - P. 265-286.

48) Fujun, Li. Prodrugs of nucleoside analogues for improved oral absorption and tissue targeting / Li. Fujun,H. Maag, T. Alfredson // J. Pharm. Sci. - 2008. - V. 97, № 3. - P. 1109-1134.

49) Simons, C. Recent advances in antiviral nucleoside and nucleotide therapeutics / C. Simons, Q. Wu, T.T. Htar // Curr. Top. Med. Chem. - 2005. - V. 5. - P. 1191-1203.

115

50) Miazga, F. Thiated derivatives of 2',3'-dideoxy-3'-fluorothymidine: Synthesis, in vitro anti-HIV-1 activity and interaction with recombinant drug resistant HIV-1 reverse transcriptase forms / F. Miazga,S. Hamy,N. Louvel, T. Klimkait, Z. Pietrusiewicz, A. Kurzyriska-Kokorniak, M. Figlerowicz,P. Wiriska, T. Kulikowski // Antiviral. Res. - 2011. - V. 92. -P.57-63.

51) Oliveira, M. Apricitabine does not select additional drug resistance mutations in tissue culture in human immunodeficiency virus type 1 variants containing K65R, Ml 84V, or Ml84V plus thymidine analogue mutations / M. Oliveira, D. Moisi, B. Spira, C. Susan, G. Bluma, M.A. Wainberg // Antimicrob. Agents Chemother. - 2009. - V.53, № 4. - P. 1683-1685.

52) Stellbrink, H.-J. Novel compounds for the treatment of HIV type-1 infection / H-J.Stellbrink // Antivir. Chem. Chemother. - 2009. - V. 19. - P. 189-200.

53) Richard, N. Selection of resistance-conferring mutations in HIV-1 by the nucleoside reverse transcriptase inhibitors (+/-)dOTC and (+/-)dOTFC / N. Richard, H. Salomon, M. Oliveira, R. Rando, T. Mansour, Z. Gu, M.A. Wainberg // Antivir. Chem. Chemother. - 2000. - V. 11. - P. 359-365.

54) Jochmans, D. Novel HIV-1 reverse transcriptase inhibitors / D. Jochmans// Virus Res. - 2008.-V. 134.-P. 171-185.

55) Safadi, Y. HIV-1 reverse transcriptase inhibitors / Y. Safadi, V. Volet-Boudou // Appl. Microbiol. Biotechnol. - 2007. - V. 75. - P. 723-737.

56) Cahn, P. Efficacy and tolerability of 10-day monotherapy with apricitabine in antiretroviral-naive, HIV-infected patients / P. Cahn, I. Cassetti, R. Wood, P. Phanuphak, L. Shiveley, R.C. Bethell, J. Sawyer // AIDS. - 2006. - V. 20. - P. 1261-1268.

57) Gu, Z. In vitro antiretroviral activity and in vitro toxicity profile of SPD754, a new deoxycytidine nucleoside reverse transcriptase inhibitor for treatment of human immunodeficiency virus infection / Z. Gu, B. Allard, J. Muys, J. Lippens, R.F. Rando, N. Nguyen-Ba, C. Ren, P. McKenna, D.L. Taylor, R.C. Bethell // Antimicrob. Agents Chemother. -2006.-V. 50.-P. 625-631.

58) Schinazi, R. Selective inhibition of human immunodeficiency viruses by racemates and enantiomers of cis-5-fluoro-l-[2-(hydroxymethyl)- l,3-oxathiolan-5-yl]cytosine / R. Schinazi, A. McMillan, D. Cannon, R. Mathis, R.M. Lloyd, A. Peck, J.P. Sommadossi // Antimicrob. Agents Chemother. - 1992. - V. 36. - P. 2423-2431.

59) Herzmann, C. Safety, pharmacokinetics, and efficacy of (+/-)-beta-2',3'-dideoxy-5- fluoro-3'-thiacytidine with efavirenz and stavudine in antiretroviral- naive human immunodeficiency virus-infected patients / C. Herzmann, K. Arasteh, R. Murphy, H. Schulbin,

P. Kreckel, D. Drauz, R.F. Schinazi, A. Beard, L. Cartee, M.J. Otto // Antimicrob. Agents Chemother. - 2005. - V. 49. - P. 2828-2836.

60) Otto, M.J. New nucleoside reverse transcriptase inhibitors for the treatment of HIV infections /M.J. Otto //Curr. Opin. Pharma. - 2004. - V. 4. - P. 431-436.

61) Geleziunas, R. HIV-1 resistance profile of the novel nucleoside reverse transcriptase inhibitor P-D-2',3'-dideoxy-2',3'-didehydro-5-fluorocytidine (Reverset™) / R. Geleziunas, K. Gallangher, H. Zhang, B. Lee, G. Sena, WU Ling-Tao // Antivir. Chem. Chemother. - 2003. - V. 14. - P. 49-59.

62) Gotte, M. The Ml84V mutation in the reverse transcriptase of human immunodeficiency virus type 1 impairs rescue of the chain terminated DNA synthesis / M. Gotte, D. Arion, M.A. Parniak, M.A. Wainberg // J. Virol. - 2000. - V. 74. - P. 3579-3585.

63) Vivet-Boudou, V. Nucleoside and nucleotide inhibitors of HIV-1 replication / V. Vivet-Boudou, J. Didierjean, C. Isel, R. Marquet // Cell Mol. Life Sci. - 2006. - V. 63. - P. 163-186.

64) Furman, P. Mechanism of action of l-beta-D-2,6-diaminopurine dioxolane, a prodrug of the human immunodeficiency virus type 1 inhibitor 1-beta-D-dioxolane guanosine / P. Furman, J. Jeffrey, L. Kiefer, J.Y. Feng, K.S. Anderson, K. Borroto-Esoda, E. Hill, W.C. Copeland, C.K. Chu, J.P. Sommadossi, I. Liberman, R.F. Schinazi, G.R. Painter // Antimicrob. Agents Chemother. - 2001. - V. 45. - P. 158-165.

65) Jeffrey, J. Dioxolane guanosine 5'-triphosphate, an alternative substrate inhibitor of wild-type and mutant HIV-1 reverse transcriptase. Steady state and pre-steady state kinetic analyses / J. Jeffrey, J. Feng, C. Qi, K.S. Anderson, P.A. Furman // J. Biol. Chem. - 2003. - V. 278.-P. 18971-18979.

66) Chu, C.K. Anti-HIV activity of (-)-(2R, 4R)-l-(2-hydroxymethyl-l,3-dioxolan-4-yl)-thymine against drug-resistant HIV-1 mutants and studies of its molecular mechanism / C.K. Chu, V. Yadav, Y.H. Chong, R.F. Schinazi // J. Med. Chem. - 2005. - V. 48. - P. 3949-3952.

67) Liang, Y. Phosphoramidate and phosphate prodrugs of (-)-beta-D-(2R,4R)-dioxolane- thymine: synthesis, anti-HIV activity and stability studies / Y. Liang, J. Narayanasamy, R. Schinazi, C.K.Chu // Bioorg. Med. Chem. - 2006. - V. 14. - P. 2178-2189.

68) Balimane, P. Involvement of multiple transporters in the oral absorption of nucleoside analogues / P. Balimane, P. Sinko // Adv. Drug Deliv. Rev. - 1999. - V. 39. - P. 183-209.

69) Lalanne, M. Strategies to increase the oral bioavailability of nucleoside analogs / M. Lalanne, K. Andrieux, P. Couvreur // Curr. Med. Chem. - 2009. - V. 16. - P. 1391-1399.

70) Bender, A.Inhibition of HIV in vitro by antiviral drug-tergeting using nanopartieles / A. Bender, V. Schafer, A. Steffan, C. Royer, J. Kreuter, H. Riibsamen-Waigmann, H. Briesen // Res. Virol. - 1994. - V. 145. - P. 215-220.

71) Schroeder, U. Diffusion enhancement of drugs by loaded nanopartieles in vitro / U. Schroeder, B.A. Sabel, H. Schroader // Prog. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatry -1999.-V. 23.-P. 941-949.

72) Gunaseelan, S. Surface modifications of nanocarries for effective intracellular delivery of anti-HIV drugs / S. Gunaseelan,K. Gunaseelan, H. Deshmukh, X. Zhang, P.J. Sinko // Adv. Drug Deliv. Rev. -2010. - V. 62. - P. 518-531.

73) Sarparanta, M.P. The mucoadhesive and gastroretentive properties of hydrophobin-coated porous silicon nanoparticle oral drug delivery systems / M.P. Sarparanta, L.M. Bimbo, E.M. Makila, J.J. Salonen, P.H. Laaksonen, A.M. Helariutta, M.B. Linder, J.T. Hirvonen, T.J. Laaksonen, H.A. Santos // Biomaterials - 2012. - V. 13, № 11. - P. 3353-3362.

74) Neves, J. Nanotechnology-based systems for the treatment and prevention of HIV/AIDS / J. Neves, M.M. Amiji, M.F. Bahia, B. Sarmento // Adv. Drug. Deliv. Rev. - 2010. -V. 62.-P. 458-477.

75) Aggarwal, S. Synthesis and biological evaluation of prodrugs of zidovudine / S. Aggarwal, S. Gogu, S. Rangan, K.C. Agrawal // J. Med. Chem. - 1990. - V. 33. - P. 15051510.

76) Dembri, A. Targeting of 3'-azido-3'-deoxythymidine (AZT)-loaded poly(isohexylcyanoacrylate) nanospheres to the gastrointestinal mucosa and associated lymphoid tissue / A. Dembri, M.J. Montisci, J.C. Gantier, H. Chacun ,G. Ponchel // Pharm. Res. - 2001. -V. 18.-P. 467-473.

77) Sriram, D. Synthesis of zidovudine prodrugs with broad-spectrum chemotherapeutic properties for the effective treatment of HIV/AIDS / D. Sriram, N. Srichakravarthy ,T.R. Bal, P. Yogeeswari // Biomed. Pharmacother. -2005. -V. 59, №8. -P. 452-455.

78) Lobenberg, R. Body distribution of azidothymidine bound to hexylcyanoacrylate nanopartieles after i.v. injection in rats / R. Lobenberg, L. Araujoi, H. von Briesen // J. Contr. Rel.- 1998. -V. 50. - P. 21-30.

79) Unui, K. Dipeptide transporters / K. Unui, T. Terada // Pharm. Biotechnol. - 1999. -V. 12.-P. 269-288.

80) Tsuji, A. Carrier-mediated intestinal transport of drugs / A. Tsuji, I. Tamai // Pharm. Res. - 1996. - V. 13. - P. 963-977.

81) Bai, J.P. Utilization of peptide carrier system to improve intestinal absorption: targeting prolidase as prodrug-convertion enzyme / J.P. Bai, M. Hu, P. Subramanian, // J. Pharm. Sci. - 1992. - V. 81. - P. 1542-1546.

82) Han, H-K. 5'-Amino acid esters of antiviral nucleosides, acyclovir and AZT are absorbed by the intestinal PEPT1 peptide transporter / H-K. Han, L.A. Remco, J.K. Rhie, K.M. Covitz, P.L. Smith, C.P. Lee, D.M. Oh, W. Sadee,G.L. Amidon // Pharm. Res. - 1998. - V. 15, №8.-P. 1154-1159.

83) Antman, M. Case Study: Valacyclovir: A Prodrug of Acyclovir / M. Antman, O. Gudmundsson. - Prodrugs. - 2007. - P. 1369-1376.

84) Soul-Lawton, J. Absolute bioavailability and metabolic disposition of valaciclovir, the L-valyl ester of acyclovir, following oral administration to humans / J. Soul-Lawton, E. Seaber, R. Wootton, P. Rolan, J. Posner // Antimicrob. Agents Chemother. - 1995. - V. 39. - P. 2759-2764.

85) Biron, K.K. Antiviral drugs for cytomegalovirus diseases / K.K. Biron // Antiviral. Res. - 2006. - V. 22. - P. 297-303.

86) Cvetkovic, R.S. Vanganciclovir: a review of its use in the management of CMV infection and disease in immunocompromised patients / R.S. Cvetkovic, K. Wellington // Drugs. -2005. - V. 65.-P. 859-878.

87) Beumer, J. Modulation of gemcitabine (2',2'-difluoro-2'-deoxycytidine) pharmacokinetics, metabolism; bioavailability in mice by 3,4,5,6-tetrahydrouridine / J. Beumer, J. Eiseman, R. Parise, E. Joseph, J.M. Covey, M.J. Egorin // Clin. Cancer Res. - 2008. - V. 14. -P. 3529-3535.

88) Ali, S.M. Synthesis and biological evaluation of gemcitabine-lipid conjugate (NE06002) / S.M. Ali,A.R. Khan , M.U. Ahmad, P. Chen, S. Sheikh, I. Ahmad // Bioorg. Med. Chem. - 2005. - V. 15. - P. 2571-2574.

89) Lalanne, M. Synthesis and biological evaluation of two glycerolipidic prodgugs of didanosine for direct lymphatic delivery against HIV / M. Lalanne, A. Paci, K. Andrieux, N. Dereuddre-Bosquet, P. Clayette, A. Deroussent, M. Re, G. Vassal, P. Couvreur, D. Desmaele // Bioorg. Med. Chem. - 2007. - V. 17. - P. 2237-2240.

90) Wong, A. Lipid, sugar and liposaccharide based delivery systems / A. Wong, I. Toth // Curr. Med. Chem. - 2001. - V. 8, № 9. - P. 1123-1136.

91) Steim, J.M. Lipid conjujates of antiretroviral agents. I. Azidothymidinemonophosphate-diglyceride: Anti-HIV activity, physical property and interaction with plasma proteins / J.M. Steim,C.C. Neto, P.S. Sarin, D.K. Sun, R.K. Sehga, J.G. Turcotte // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 1990. - V. 171, № 1. - P. 451-457.

119

92) Scriba, G.K.E. Phenytoin-Lipid Conjugates as Potential Prodrugs of Phenytoin / G.K.E. Scriba // Arch. Pharm. (Weinheim) - 1993. - V. 326. - P. 477-481.

93) Trevaskis, N.L. Lipid-based delivery systems and intestinal lymphatic drug transport: A mechanistic update / N.L. Trevaskis, W.N. Charman, C.J.H. Porter // Adv. Drug Deliv. Rev. - 2008. - V. 60. - P. 702-716.

94) Porter, C.J.H. Lipids and lipid-based formulations: optimizing the oral delivery of lipophilic drugs / C.J.H. Porter, N.L. Trevaskis, W.N. Charman // Nat. Rev. Drug Discov. -2007.-V. 6.-P. 231-248.

95) Reddy, R.H. Lipid-Based Anticancer Prodrugs / R.H. Reddy, P. Couvreur // Cancer Drug Deliv. - 2010. - V. 8. - P. 291-328.

96) Lambert, D.M. Rationale and applications of lipids as prodrug carriers / D.M. Lambert // Eur. J. Pharm. Sci. - 2000. - V. 11 (Suppl. 2). - P. S15-S27.

97) Bibby, D.C. Synthesis and evaluation of 5' alkyl ester prodrugs of zidovudine for the directed lymphatic delivery / D.C. Bibby, W.N. Charman, S.A. Charman, S.A. Charman, M.N. Iskander, C.J.H. Porter // Int. J. Pharm. - 1996. - V. 144. - P. 61-70.

98) Saturnino, C. Synthesis and preliminary biological evaluation of a new pyridocarbazole derivative covalently linked to a thymidine nucleoside as a potential targeted antitumoral agent / C. Saturnino, M. Buonerba, G. Boatto, M. Pascale, O. Moltedo, L. Napoli , D. Montesarchio, J.C. Lancelot, P. Caprariis // Chem. Pharm. Bull. - 2003. - V. 51, No 8. - P. 971-974.

99) Singh, R. K. Synthesis, structure-activity relationship and antiviral activity of 3'-N,N-dimethylamino-2',3'-dideoxythymidine and its prodrugs / R. K. Singh, D. Yadav, D. Rai, G. Kumari, C. Pannecouque, E. Clercq // Eur. J. Med. Chem. - 2010. - V. 45. - P. 3787-3793.

100) Agarwaq, H.K. Synthesis and anti-HIV-activities of symmetrical dicarboxylate esters of dinucleoside reverse transcriptase inhibitors / H.K. Agarwaq, K.W. Buckheit, R.W. Buckheit, K. Parang // Bioorg. Med. Chem. - 2012. - V. 22. - P. 5451-5454.

101) Holy, A. Antiviral acyclic nucleoside phosphonates structure activity studies / A. Holy // Antiviral. Res. - 2006. - V. 71. - P. 248-253.

102) Alexander, R. Lipid nucleoside conjugates for the treatment of cancer / R. Alexander, G. Kucera // Curr. Pharm. Des. - 2005. - V. 11. - P. 1079-1089.

103) Alexander, R.L. Synthesis and Cytotoxic Activity of Two Novel l-Dodecylthio-2-decyloxypropyl-3-phosphatidic Acid Conjugates with Gemcitabine and Cytosine Arabinoside / R.L. Alexander, S.L. Morris-Natschke, K.S. Ishaq, R.A. Fleming, G.L. Kucera // J. Med. Chem. - 2003. - V. 46. - P. 4205-4208.

104) Hostetler, K.Y. Acyclovir diphosphate dimyristoylglycerol: A phospholipid prodrug with activity against acyclovir-resistant herpes simplex virus / K.Y. Hostetler, S. Parker, C.N. Sridhar//Proc. Natl. Acad. Sci. USA - 1993. -V. 90. - P.l 1835-11839.

105) Wijk, G.M. Synthesis and antiviral activity of 3'-azido-3'deoxythymidine triphosphate distearoylglycerol: a novel phospholopid conjugate of anti-HIV agent AZT / G.M. Wijk, K.Y. Hostetler, E. Kroneman, D.D. Richman, C.N. Sridhar, R. Kumar, H. Bosch // Chem. Phys. Lipids - 1994. - V. 70. - P. 213-222.

106) Radwan, A.A. Targeting cancer using cholesterol conjugates / A.A. Radwan, F.K. Alanazi // Saudi Pharm. J. - 2013. - in press.

107) Oka, N. Synthesis of nucleoside 5'-boranophosphorothioate derivatives using an H-boranophosphonate monoester as precursor / N. Oka, Y. Takayama, K. Ando, T. Wada // Bioorg. Med. Chem. Lett. - 2012. - V. 22. - P. 4571-4574.

108) Jin, Y. Self-assembled drug delivery systems. 2. Cholesterol derivatives of antiviral nucleoside analogues: synthesis, properties and the vesicle formation / Y. Jin, R. Xin, P. Ai, D. Chen // Int. J. Pharm. - 2008. - V. 350. - P. 330-337.

109) Yanez, J. Intestinal lymphatic transport for drug delivery / J. Yanez, S. Wang, I. Knemeyer, M.A. Wirth, K.B. Alton // Adv. Drug Deliv. Rev. - 2011. - V. 63. - P. 923-942.

110) Charman, W.N. Lipophilic prodrugs designed for intestinal lymphatic transport / W.N. Charman, C.J.H. Porter // Adv. Drug Deliv. Rev. - 1996. - V. 19. - P. 149-169.

111) Smith, M.B. March's advanced organic chemistry: reactions, mechanisms, and structure. - 5lh ed. / M.B. Smith, J. March // USA: John Wiley & Sons, Inc. - 2001. - P. 485486.

112) Porter, C. Uptake of drugs into the intestinal lymphatics after oral administration / C. Porter, W.N. Charman // Adv. Drug Deliv. Rev. - 1997. - P. 71-89.

113) Евстигнеева, P.П. Химия биологически активных природных соединений / Р.П. Евстигнеева, Г.А. Серебренникова, Е.Н. Звонкова, Е.И. Филиппович, Т.К. Митрофанова, Г.И. Мягкова, Ю.Е. Скляр - М.: Химия, 1976. - С. 393-397.

114) Scriba, G.K.E. Synthesis and in vitro Evaluation of 4-(2-Glyceryl)butyric Acid: A Glyceride Mimic for Drug Delivery via Drug-Lipid Conjugates / G.K.E. Scriba // Arch. Phorm. (Weinheim) - 1994. - V. 327. - P. 347-348.

115) Kurz, M. Drug-phospholipid conjugates as potential prodrugs: synthesis, characterization, and degradation by pancreatic phospholipase A2 / M. Kurz M., G.K.E. Scriba // Chem. Phys. Lipids - 2000. - V. 107.-P. 143-157.

116) Gaucher, B. Prodrugs of HIV protease inhibitors - saquinavir, indinavir and nelfinavir - derived from diglycerides or amino acids: synthesis, stability and anti-HIV activity /

121

B.Gaucher, M.Rouquayrol, D.Roche, J. Greiner, A.M. Aubertin, P. Vierling // Org. Biomol. Chem. - 2004. - V. 2. - P. 345-357.

117) Delie, F. Synthesis and in vitro study of a diglyceride prodrug of a peptide / F.Delie, P.Couvreur, D.Nisato, J.B. Michel, F. Puisieux, Y. Letourneux // Pharmacol. Res. -1994.-V. 11, № 8. - P.1082-1086.

118) Dhaneshwar, S. Diglyceride prodrug strategy for enhancing the bioavailability of norfloxacin /S. Dhaneshwar , K. Tewari, S. Joshi, D. Godbole, P. Ghosh // Chem. Phys. Lipids -2011.-V. 164.-P. 307-313.

119) Khan, M.S. Synthesis, pharmacological activity and hydrolytic behavior of glyceride prodrugs of ibuprofen / M.S. Khan, M. Akhter // J. Med. Chem. - 2005. - V. 40. - P. 371-376.

120) Tan, X. Development and optimization of anti-HIV nucleoside analogs and prodrugs:a review of their cellular pharmacology, structure-activity relationships and pharmacokinetics / X. Tan, C.K. Chu, F.D. Boudinot // Adv. Drug. Deliv. Rev. - 1999. - V. 39. -P. 117-151.

121) Ho, H.-T. Cellular pharmacology of 2',3'-dideoxy-2',3'-didehydrothymidine, a nucleoside analog active against human immunodeficiency / H.-T. Ho, M.J.M.Hitchcock // Antimicrob. Agents Chemother. - 1987. - V. 33. - P. 844-849.

122) Balzarini, J. Differential patterns of intracellular metabolism of 2',3'-dideoxy-2',3'-didehydrothymidine, two potent anti-human immunodeficiency virus compounds / J.Balzarini, P.Herewijn, E. De Clercq // J. Biol. Chem. - 1989. - V. 264. - P. 6127-6133.

123) Lin, T.-S. Potent and selective in vitro activity of 3'-deoxythymidin-2'-ene (3'-deoxy-2',3'-didehydrothymidine) against human immunodeficiency virus / T.-S.Lin, R.F.Schinazi, W.H.Prusoff// Biochem. Pharmacol. - 1987. - V. 36. - P. 2713-2718.

124) Hamamoto, Y. Inhibitory effect of 2',3'-didehydro-2',3'-dideoxynucleosides on infectivity, cytopathic effects, and replication of human immunodeficiency virus / Y.Hamamoto, H.Nakashima, A.Matsuda, A. Matsuda, T. Ueda, N. Yamamoto // Antimicrob. Agents Chemother. - 1987.-V. 31.-P. 907-910.

125) Schinazi, R.F. Pharmacology of current and promising nucleosides for the treatment of human immunodeficiency viruses / R.F. Schinazi, B.I. Hernandez-Santiago, S.J. Hurwitz // Antivir. Res. - 2006. - V. 71. - P. 322-334.

126) Арзуманов, A.A. Модифицированные фосфаты нуклеозидов как предшественники противовирусных и противоопухолевых соединений в клетке / A.A. Арзуманов, Н.Б Дяткина // Биоорган, химия - 1996. - Т. 22, № 10-11. - С. 777-794.

127) Turcotte, J.G. Cytotoxic liponucleotide analogs. I. Chemical synthesis of CDP-diacylglycerol analogs containing the cytosine arabinoside moiety / J.G. Turcotte, S.P. Srivastava, W.A. Meresak, B.A. Rizkall, F. Louzon // Biochim. Biophys. Acta. - 1980. - V. 619.-P. 604-618.

128) Krise, J.P. Prodrugs of phosphates, phosphonates, and phosphinates / J.P. Krise, V.J. Stella // Adv. Drug Deliv. Rev. - 1996. - V. 19. - P. 287-310.

129) Jonhum, A. Biolabile constructs for pronucleotide desing / A. Jonhum, N. Schlienger, D. Egron, S. Peyrottes, C. Perigaud // J. Organomet. Chem. - 2005. - V. 690. - P. 2614-2625.

130) Baraniak, J. Synthesis of nucleoside-amino acid conjugates containing boranephosphate, boranephosphorothioate and boranephosphoramidate linkages / J.Baraniak, R.Kaczmarek, E.Wasilewska // Tetrahedr.Lett. - 2004. - V. 45. - P. 671-675.

131) Ray, A.S. Application of kinase bypass strategies to nucleoside antivirals / A.S. Ray, Y.K. Hostetler // Antiviral. Res. - 2011. - V. 92, № 2. - P. 277-291.

132) Liang, Y. Phosphoramidate and phosphate prodrugs of (-)-fl-D-(2R,4R)-dioxolane-thymine: synthesis, anti-HIV activity and stability studies / Y. Liang, J. Narayanasamy, R.F. Schinazib, C.K. Chua // Bioorg. Med. Chem. - 2006. - V. 14. - P. 21782189.

133) Drontle, D.P. Designing a pronucleotide stratagem: Lessons from amino acid phosphoramidates of anticancer and antiviral pyrimidines / D.P. Drontle, C.R. Wagner // Mini Rev. Med. Chem. - 2004. - V. 4, № 4. - P. 409-419.

134) Schultz, C. Prodrugs of Biologically Active Phosphate Esters / C. Schultz // Bioorg. Med. Chem. - 2003. - V. 11. - P. 885-898.

135) Carl, P. A novel connector linkage applicable in prodrug design /P. Carl, P. Chakravarty, J. Katzenellenbogen // J. Med. Chem. - 1981. - V. 24, № 5. - P. 479-480.

136) Lefebvre, I. Mononucleoside phosphotriester derivatives with S-acyl-2-thioeyhyl bioreversible phosphate-protecting groups: intracellular deliver of 3'-azido-2',3'-dideoxythymidine 5'-monophosphate /1. Lefebvre, C. Perigaud, A. Pompon, A-M. Aubertin, J-L. Girardet, A. Kirn,G. Gosselin, . -L. Imbach // J. Med. Chem. - 1995. - V. 38. - P. 39413950.

137) Villard, A-L. Phenyl phosphotriester derivatives of AZT: variations upon the SATE moiety / A-L. Villard, G. Coussot, I. Lefebvre, P. Augustijns, A-M. Aubertin, G. Gosselin, S. Peyrottes, Ch. Perigaud // Bioorg. Med. Chem. - 2008. - V. 16. - P. 7321-7329.

138) Meier, C. c>>c/oSal-pronucleotides - design of chemical trojan horses / C. Meier //

Mini Rev. Med. Chem. - 2002. - V. 2. - P. 219-234.

123

139) Meier, C. Nucleotide delivery from cyc/oSaligenyl-3'-azido-3'-deoxythymidine monophosphates (cycloSal-AZTMP) / C. Meier, E. Clercq, J. Balzarini // Eur. J. Org. Chem. -1998.-V. 1998.-P. 837-846.

140) Meier, C. cyc/oSal-2',3'-dideoxy-2',3'-didehydrothymidine monophospate (cyc/oSal-d4TMP): synthesis and antiviral evaluation of a new d4TMP delivery system / C. Meier, M. Lorey, E. Clercq, J. Balzarini // J. Med. Chem. - 1998. - V. 41. - P. 1417-1427.

141) Balzarini, J. CycloSaligenyl-2',3'-Didehydro-2',3'-dideoxythymidine monophosphate (cycloSal-d4TMP): Efficient Intracellular Delivery of d4TMP / J. Balzarini, S. Aquaro, T. Knispel, C. Rampazzo, V. Bianchi, C.F. Perno, E. Clercq, C. Meier // Mol. Pharmacol. - 2000. - V. 58. - P. 928-935.

142) Meier, C. CycloSal-Pronucleotides - Development of First and Second Generation Chemical Trojan Horses for Antiviral Chemotherapy / C. Meier, A. Meerbach, J. Balzarini // Frontiers in Bioscience. - 2004. - V. 9. - P. 873-890.

143) Meiera, C. Cyclic Saligenyl phosphotriesters of 2',3'-dideoxy-2',3'~ didehydrothymidine (d4T). A new pro-nucleotide approach / C. Meiera, M. Loreya, E. Clercq, T. Knispel, C. Rampazzo, V. Bianchi, C.F. Perno // Bioorg. Med. Chem. Lett. - 1997. - V. 7, № 2. -P. 99-104.

144) Meiera, C. Cyclic Saligenyl phosphotriesters of 2',3'-dideoxy-2',3'-didehydrothymidine (d4T). A new pro-nucleotide approach / C. Meier, L. Martina, E. Clercq, J. Balzarini // Bioorg. Med. Chem. Lett., 1997, v.7, № 2, p.99-104.

145) Schlienger, N. S-acyl-2-thioethyl aryl phosphotriester derivatives as mononucleotide prodrug / N. Schlienger, S. Peyrotters, T. Kassem // J. Med. Chem. - 2000. - V. 43.-P. 4570-4574.

146) Gumina, G. Resent advances in antiviral nucleosides / G. Gumina, Y. Choi, C.K. Chu // Recent Adv Antivir Nucleosides - 2003. - V. 1. - P. 1-76.

147) Chi, Z. Immunomodulatory antivirals / Z. Chi // Drug Discov. Today. - 1999. -V. 4, № 2. - P. 97-98.

148) Bentley, P.H. An Efficient Synthesis of Symmetrical 1,3-Diglycerides / P.H. Bentley, W. McCrae // J. Org. Chem. - 1970. - V. 36, № 6. - P, 2082-2083.

149) Berezovskaya, Yu. Desing of the new molecular transport systems for the nucleosides-pharmacophores carrying / Yu. Berezovskaya, M. Chudinov, Yu. Kirillova, V. Shvets, A. Yurkevich // Nucleosides & Nucleotides. - 1998. - V. 17, № 9-11. - P. 2127-2133.

150) Matsumoto, H. Synthesis and biological evaluation of prodrug type anti-HIV agents: ester conjugates of carboxylic acid-containing dipeptide HIV protease inhibitors and a

reverse transcriptase inhibitor / H. Matsumoto, T. Matsuda, S. Nakata // Bioorg Med Chem. -2001.-V. 9. - P. 417-430.

151) Замятина, А.Ю. Фосфиттриэфирный и Я-фосфанатный методы в синтезе фосфолипидов / А.Ю. Замятина , А.С. Бушнев, В.И. Швец // Биоорган, химия. - 1994. -Т.20, № 12. - С. 1253-1296.

152) Шастина Н.С. Применение современных методов образования фосфодиэфирных связей для синтеза природных соединений и их аналогов / Н.С. Шастина. - М.: МИТХТ им. М.В. Ломоносова, 2008. - С. 21-29.

153) Xiao, Q. Synthesis of AZT 5'-O-hydrogen phospholipids and their derivatives / Q. Xiao, J. Sun, Q. Sun, Y. Ju, Y. Zhao, Y. Cu // Synthesis - 2003. - N. 1. - P. 107-111.

154) Zhang, H. A Novel Synthesis of AZT-5 '-Glycosyl-1 "-Я-Phosphonate Diesters / H. Zhang, D. Jin, X.J. Zhao // Adv. Mat. Res. -2014. -V. 830. - P. 159-162.

155) Mavromoustakos, T. Ether phospholipid-AZT conjugates possessing anti-HIV and antitumor cell activity. Synthesis, conformational analysis, and study of their thermal effects on membrane bilayers / T. Mavromoustakos, T. Calogeropoulou, M. Koufaki, A. Kolocouris, I. Daliani, C. Demetzos, Z. Meng, A. Makriyannis,J. Balzarini, E. Clercq // J. Med. Chem. -2001. -V. 44, № 11.-P. 1702-1709.

156) Рубцов, М.В. Синтетические химико-фармацевтические препараты / М.В.Рубцов, А.Г. Байчиков-М. 1971. - с. 11.

/