Биотехнологические исследования по безотходному использованию околоплодника ореха черного: Juglans nigra L. тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Дудников, Михаил Эдуардович

• Дудников, Михаил Эдуардович
• кандидат биологических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Дудников, Михаил Эдуардович

Введение.

ГЛАВА 1. СОСТОЯНИЕ ИССЛЕДОВАНИЙ ПО СОЗДАНИЮ НОВЫХ ГОМЕОПАТИЧЕСКИХ И ПАРАФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ МАЛОИСПОЛЬЗУЕМОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ.

1.1. Современное состояние российского рынка фитосредств.

1.2. Применение растений рода Дщкт в народной и научной медицине.

1.2.1. Использование в медицине ореха грецкого.

1.2.2. Использование в медицине ореха чёрного.

1.3. Технологические аспекты создания фитоэкстракционных препаратов. 18 Заключение по обзору литературы.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материалы исследований.

2.2. Методики исследования.

3.1 .Изучение ареала произрастания ореха черного на Северном Кавказе и его сырьевых запасов.

3.2. Товароведческий анализ околоплодника ореха черного.

3.3. Фитохимический анализ околоплодника черного ореха.

3.3.1. Элементный состав околоплодника ореха черного.

3.3.2. Качественный анализ биологически активных веществ околоплодника черного ореха.

3.3.3. Изучение количественного содержания основных групп БАВ в околоплоднике ореха черного.

3.4. Сравнительный анализ биологической активности извлечений околоплодника ореха черного в зависимости от сушки.

3.5. Определение срока и условий хранения свежего околоплодника черного ореха до его переработки.

ГЛАВА 4. Разработка комплексной биотехнологической схемы производства гомеопатических и парафармацевтических средств на основе околоплодника ореха черного.

4.1. Обоснование параметров экстрагирования свежих околоплодников ореха черного.

4.2. Биотехнологическая схема комплексной экстракции свежего околоплодника черного ореха.

4.3. Стандартизация настойки околоплодника ореха черного гомеопатической

ГЛАВА 5. ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ РАЗРАБОТАННЫХ ИЗ ОКОЛОПЛОДНИКА ОРЕХА ЧЕРНОГО ГОМЕОПАТИЧЕСКИХ И ПАРАФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ СРЕДСТВ.

5.1. Изучение общетоксичного действия настойки ореха черного.

5.2. Изучение гипогликемической активности настойки ореха черного.

5.3. Изучение противоожогового и ранозажиавляющего действия масляного экстракта ореха черного.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биотехнологические исследования по безотходному использованию околоплодника ореха черного: Juglans nigra L.»

В последнее время, как в России, так и за рубежом, наблюдается устойчивая тенденция к повышению интереса населения и фирм производителей к парафармацевтическим и гомеопатическим средствам из растительного сырья. Несмотря на особую социальную значимость увеличения производства этих средств, уровень их выпуска в России обеспечивает удовлетворение потребности населения всего лишь на 30-35%. Одной из причин такого положения является сокращение промышленного возделывания лекарственных растений и ограничение возможности заготовки их дикорастущих видов.

Одним из путей решения проблемы расширения ассортимента отечественных гомеопатических и парафармацевтических средств является освоение промышленной переработки растений, зарекомендовавших себя как эффективно используемые в традиционной медицине и одновременно имеющих достаточную сырьевую базу (Яковлев Г.П., 1995; Арзамасцев А.П., 1997).

Таким объектом является орех черный Juglans nigra L. семейства Juglandacecie L. Растение завезено на Северный Кавказ в XIX веке как ин-тродуцент (Мисник Г.Е, 1963; Дюваль-Строев М.Р. 1963; Кулыгин A.A., 1998). Лист и околоплодник ореха черного в Северной Америке издавна использовались в качестве общеукрепляющего, иммуномодулирующего, про-тивопаразитарного средства. На Российском рынке в последнее время появились биологически активные добавки к пище на основе чёрного ореха, производителями которых, в основном, являются иностранные фирмы.

Ранее исследование биологически активных веществ (БАВ) листа ореха черного проводились в Пятигорской фармацевтической академии, была выделена полифенольная фракция и проведен фармакологический скри-нинг.( Шинкаренко, А.Л.,1967). Однако отечественных парафармацевтических и гомеопатических средств на основе ореха черного до сих пор предложено не было.

В литературе сведения о ресурсах этого, несомненно, интересного растительного объекта и о возможностях его использования в медицинской практике и косметологии ограничены (Алентьев А.П., 1988, 1998; Попови-чев В.В., 1998).

Изучение сырьевой базы ореха черного региона Северного Кавказа, выявление оптимальных условий его заготовки, проведение подробных биотехнологических исследований этого растения будут способствовать расширению диапазона использования флоры Северного Кавказа и пополнению ассортимента парафармацевтических и косметических средств полученных из фитосырья.

Поэтому биотехнологические исследования ореха черного, его малоотходная комплексная переработка-вопрос важный и своевременный.

Цели работы - проведение биотехнологических исследований по безотходному использованию околоплодника ореха черного и создание технологической схемы переработки околоплодника ореха черного с использованием селективных экстракционных схем. Задачи исследования:

• изучить с помощью химических и биотехнологических методов основные группы действующих веществ околоплодника ореха чёрного;

• оптимизировать способы стандартизации сырья с помощью физико-химических методов анализа;

• разработать комплексную биотехнологическую схему переработки свежего околоплодника ореха чёрного с учетом характеристик сырья;

• изучить влияние двух независимых биотехнологических процессов -сушки и замораживания на выход основных БАВ ореха черного;

• получить матричную гомеопатическую настойку ореха чёрного и разработать для нее нормы качества;

• получить масляный экстракт околоплодника ореха черного и предложить для него нормы качества;

• провести биологическое исследование матричной настойки и масляного экстракта;

• разработать нормативную документацию на матричную настойку ореха черного и его масляный экстракт.

Научная новизна. Проведены фитохимические исследования околоплодника ореха чёрного. Установлен его элементный состав и подтверждено высокое содержание дубильных веществ, аскорбиновой кислоты, органических кислот и флавоноидов. Показано, что орех черный содержит значительное количество гидрофобных компонентов - хлорофилла и каротинои-дов. Впервые путем сравнительного биологического тестирования спирто-водных извлечений из свежих и высушенных околоплодников ореха чёрного доказана более высокая эффективность извлечений из свежесобранного сырья.

Разработана оригинальная комплексная биотехнологическая схема переработки свежих околоплодников ореха черного с использованием двухфазного процесса экстракции. При этом получены два целевых продукта -матричная настойка и масляный экстракт. Установлены нормы оценки их качества.

Экспериментально доказано что, разработанные парафармацевтиче-ские и гомеопатические средства обладают выраженной биологической активностью: матричная настойка ореха черного достоверно снижает содержание сахара в крови при использовании модели аллоксанового диабета, а масляный экстракт при наружном применении обладает репаративным действием, оба средства не токсичны.

Теоретическая и практическая значимость. Полученный экспериментальный материал послужил теоретическим основанием для разработки комплексной биотехнологической схемы переработки свежего околоплодника ореха чёрного. С помощью разработанных технологических процессов путем последовательной экстракции действующих БАВ получены следующие продукты: матричная гомеопатическая настойка и масляный экстракт.

Определены нормы стандартизации их качества, которые включены в разработанную нормативную документацию (НД). Разработаны ТУ и ТИ на настойку и масляный экстракт. Определена область применения полученных продуктов в качестве гомеопатических средств и средств дерматокосметики. Основные положения, выносимые на защиту:

• разработка технологических процессов экстракции свежих околоплодников ореха чёрного позволяет получить парафармацевтические и гомеопатические средства с заданными фармакотерапевтическими свойствами;

• фитохимические исследования околоплодника ореха чёрного доказывают целесообразность его заготовки в регионах Северного Кавказа (Ставропольский край, Краснодарский край, Ростовская область) в августе;

• Экстракция липофильных веществ околоплодника в двухфазной системе растворителей: спирт - растительное масло дает максимальный выход готовых продуктов;

Апробация работы и публикация результатов исследований. Основные положения диссертационной работы доложены на: 57-ой, 58-ой, 59-ой региональных конференциях по фармации, фармакологии и подготовке кадров (г. Пятигорск, 2002, 2003, 2004 г.), на 61-ой научной конференции «Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины» (г. Волгоград, 2003 г.) и на региональной научно-практической конференции студентов и молодых ученых Краснодарского края «Медицинская наука и здравоохранение» (г. Анапа, 2004, 2005, 2006 г.).

По теме диссертации опубликовано 10 научных работ, в которых отражено основное содержание диссертации.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 120 страницах машинописного текста в компьютерном наборе, содержит 17 рисунков и 29 таблиц. Состоит из введения, обзора литературы, главы, посвященной материалам и методам исследований, трех глав собственных исследований, выводов, списка литературы, который включает 127 отечественных и 23 зарубежных источника, и приложения.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Дудников, Михаил Эдуардович

Общие выводы

1. Проведены фитохимическне исследования околоплодника ореха черного и установлен его элементный состав. Обнаружены марганец, медь, фосфор, хром, цинк, бор, молибден. Количественное содержание токсических элементов, оказалось не выше допустимых норм. Идентифицированы основные биологически активные вещества и установлено их количественное содержание: дубильных веществ - 14,1%, аскорбиновой кислоты - 0,44%, органических кислот - до 9%, суммы флавоноидов в пересчете на лютеолин - 0,04%, а также липидов общих - 1,8%, каротиноидов -32 мг%, хлорофилла - до 6,1 мг%.

2. Установлено, что максимальное количество биологически активных веществ в околоплоднике накапливается в августе. Определены сроки хранения и условия хранения свежего сырья до переработки: при температуре 15 °С в темном месте до 30 дней, в замороженном состоянии при -8°С до 3-х месяцев.

3. Проведен и теоретически обоснован выбор способа экстракции из свежего околоплодника ореха черного на основании базовых технологических характеристик сырья: двухфазная экстракция. Разработана комплексная технологическая схема, позволяющая из свежего околоплодника ореха черного последовательной экстракцией получить матричную гомеопатическую настойку (70%>) и масляный экстракт.

4. Разработана технологии производства масляного экстракта из шрота околоплодника, остающегося после получения настойки. Предложена экстракция липофильных веществ двухфазной системой экстрагентов: смесью спирта 90%о и масла растительного в соотношении 1:2 с последующим удалением спирта этилового при нагревании.

5. Установлены нормы и критерии качества и проведена стандартизация настойки гомеопатической околоплодника ореха черного по следующим показателям: описание, подлинность, сухой остаток, содержание спирта этилового, микробиологическая чистота, количественное содержание дубильных веществ и флавоноидов. Определен срок годности настойки - 2 года.

6. Установлены нормы и критерии качества, проведена стандартизация масляного экстракта околоплодника ореха черного по следующим параметрам: описание, подлинность, числовые показатели, содержание кароти-ноидов и хлорофиллов. Установлены условия хранения и срок годности масляного экстракта околоплодника черного ореха, который составил 24 месяца.

7. Проведены фармакологические исследования настойки ореха черного: изучена острая и субхроническая токсичность. Доказано, что настойка околоплодника ореха черного является нетоксичным препаратом

8. Исследовано противоожоговое и ранозаживляющее действие масляного экстракта ореха черного, и установлено, что репаративная активность масла ореха черного в среднем на 30 - 35 % выше по сравнению с контролем, и не значительно уступает маслу облепихи.

9. По результатам проведенных исследований составлена и утверждена нормативная документация ТУ и ТИ на сырье, матричную настойку и масляный экстракт околоплодника ореха черного.

Заключение

В рамках исследований нами был проведен сравнительный фитохими-ческий и товароведческий анализ образцов околоплодника ореха черного и установлен богатый микроэлементный состав околоплодника ореха черного: марганец, медь, фосфор, хром, цинк, бор и другие эссенциальные микроэлементы. Идентифицированы основные биологически активные вещества, и установлено количественное содержание дубильных веществ (14,1%), аскорбиновой кислоты (0,44%>), органических кислот (до 9%>), суммы флаво-ноидов в пересчете на лютеолин (0,04%>), а также липидов общих (1,8%), ка-ротиноидов (32мг%>), хлорофилла до (6,1 мг%>) в исследуемых образцах ореха черного. Полученные данные были сопоставимы к данным найденным в литературе по околоплодникам черному и грецкому орехам (Hong-Yeng , 1982; Лойко, 1990.)

На биологической модели Paramecium caudatum проведено тестирование извлечений (Степанова, 1999) из свежих и высушенных околоплодников и показано, что свежее сырье в биологическом аспекте более активно, чем после предварительной сушки, что послужило основанием для выбора технологической схемы переработки свежего околоплодника ореха черного.

Теоретически обоснован выбор методики экстракции свежего околоплодника ореха черного с учетом основных технологических характеристик сырья. (Дудников, 2004 )., В соответствии с требованиями к получению настоек гомеопатических, предложена технология, позволяющая из свежего околоплодника ореха черного последовательной экстракцией сначала 96% спиртом этиловым (первая ступень), а затем 70%> спиртом этиловым (вторая ступень) получить матричную настойку по § 3 ВФС 42-2799-96 Настойки матричные гомеопатические. Проведены исследования по разработке технологии масляного экстракта из шрота околоплодника после получения настойки. Предложена экстракция липофильных веществ двухфазной системой экстрагентов: смесью спирта 90%> и масла растительного в соотношении 0,5:1, с последующим удалением спирта этилового при нагревании. Для этого был модифицирован описанный в литературе метод ДСЭ. ( Шиков А.Н.,2004.) Спирт этиловый по окончании экстракции отгоняли, интенсифицировав процесс созданием небольшого разряжения (600 мм рт.ст.). Преимущество данного метода сводятся, прежде всего, к тому, что снижаются затраты на закупку сырья и расходы на производство.

На основании полученных результатов установлены нормы и критерии качества и проведена стандартизация настойки гомеопатической околоплодника ореха черного по следующим показателям: описание, подлинность, сухой остаток, содержание спирта этилового, микробиологическая чистота, количественное содержание дубильных веществ и флавоноидов. Установлены нормы и критерии качества, проведена стандартизация масляного экстракта околоплодника ореха черного по показателям: описание, подлинность, числовые показатели, содержание каротиноидов и хлорофиллов.

Изучена острая и субхроническая токсичность, а также гипогликемиче-ская активность настойки из околоплодника ореха черного, и в результате сравнительной оценки состояния внутренних органов подопытных животных, а также биохимических показателей крови можно сделать заключение о том, что настойка околоплодника ореха черного является нетоксичным препаратом и обладает гипокликемическим действием. Проведены исследования противоожогового и ранозаживляющего действия масляного экстракта ореха черного и результаты исследования доказали, что репаративная активность масла ореха черного в среднем на 30 - 35 % выше по сравнению с контролем, и лишь немного уступает таковой масла облепихи.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Дудников, Михаил Эдуардович, 2006 год

1. Авдеева, Е.В. Изучение некоторых фенольных и терпеноидных соединений, используемых в стандартизации лекарственных растений: Автореф. дис.канд. фармац.наук.-М, 1997.-23 с.

2. Алексеев, БД Орех грецкий / Б.Д. Алексеев // Лекарственные растения Кабарды. -1952.-С. 33-34.

3. Алексеев, БД Орех грецкий / БД Алексеев, Г.А. Коробков, ДА. Муравьева, Р.М. Середин // Лекарственные растения Северной Осетии. -1958. С. 77.

4. Алентьев, ПН. Временные рекомендации по разведению и выращиванию ореха черного на Северном Кавказе / ПН Алентьев -Воронеж, 1988. -26 с.

5. Алентьев, ПН Культуры ореха черного в России / ПН Алентьев, НП Алентьев -ML: ВНИИЦлесресурс, 1998. 51 с.

6. Андреева, Н.Д Справочник по медицинской косметике./ НД Андреева, Н.П Боброва, С.Н. Потапова-Л: Медицина, 1978. -172 с.

7. Асатиани, B.C. Новые метода биохимической фотометрии / B.C. Асатиани. М, 1965.-С. 495-510.

8. И. Афанасьева, ТГ. Исследование ассортимента и потребителей фитопрепаратов / ТГ.

9. Афанасьева, Н.Б. Дремова// Актуальные проблемы медицины и фармации: Материалы 65-й итог. науч. конф. молодых ученых и студентов. Курск: КГМУ, 2000. - С.300-302.

10. Ахабадее, АС. Косметика дня всех/АС. Ахабадзе-М: Знание, 1974.-90 с.

11. Балабьян, ВЮ. Разработка системы скрининга лекарственных веществ аншоксидантного и мембраносгимулирующеш действия: Автореф. дисс.канд. фарм. наук-М., 1998.-22 с.

12. Барабой, В.А. Биологическое действие растительных фенольных соединений / В.А Барабой-Киев: Наукова думка, 1976.-162 с.

13. Барабой, В.А Растительные фенолы и здоровье человека / В.А Барабой М.: Наука, 1984.-160 с.

14. Баранова, ЛИ Биологически активные вещества ароматических растений, перспективных для ароматизации продуктов переработки молока / JIJX Баранова, СВ. Баранова // Новые пищевые и кормовые растения в народном хозяйстве. Киев: 1981. ч. 1. -С. 55-56.

15. Бежуашвили, М. Г. Химическая характеристика перегородок Juglans regia / М. Г. Бе-жуашвили, Н 3. Курашвили // Хим. природных соединений. -1998. № 2. - С. 161164.

16. Беленький, МЛ. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта / МЛ. Беленький-Л: Медицинская литература, 1963. С. 50.

17. Беликов, ВГ. Дифференциальная спектрофогомегрия / ВГ. Беликов Ставрополь, 1970.-136 с.

18. Беликов, ВГ. Лабораторные работы по фармацевтической химии / В.Г. Беликов, E.H. Вергейчик, ВЕ. Годацкий и др. -М: Высш. шк., 1989. 376 с.

19. Биотехнология. Принципы и применение / Под ред. ИХиггинса, Д.Бест и Дж. Джонса М.: Мир 1988.-480 с.

20. Богатырёв, А.Н Использование БАД в пищевых продуктах / АН. Богатырёв, OB. Большаков, НА Макеева. -М: Пищевая пром-сть, 1987.-236 с.

21. Богдаш, АС. Популяция одноклеточных организмов как модель интегральной оценки воздействия вредных факторов // Тез. докл. Всесоюзн. конг. -М, 1989. С. 12-13.

22. Большая медицинская энциклопедия: в 30-ти т. /АМН СССР. Гл. ред. БВ. Петровский.-3-е изд.-М: Советская энциклопедия.-1981.-т. 17-512 с. (т.30.-140 е.).

23. Бреднева, НД Природные вещества плодов боярышника, определяющие их фармакологическую активность // Наука-здравоохранению: тез. докл. науч. конф. м. уч. (9; 3-5 февраля, 1986).-Пяшшрск, 1986.-С. 50-51.

24. Бурковский, И.В. Основы экологии свободно-живущих инфузорий: Автореф. дис. докг. биол. наук. -М., 1986. -43 с.

25. Валь, Е. Препараты из растительного сырья: отраслевая проблема / Валь Е. // Ремедиум. 2001. - №1-2. - С. 38-40.

26. Ветров, ПП. Комплексная технология переработки растительного сырья / П.П. Ветров // Состояние и перспективы создания новых готовых лекарственных средств и фитохимических препаратов: Тез. докл. Харьков, 1990. - С. 38.

27. Ветров, ПП Определение содержания липофильных веществ и суммы каротинои-дов в растительном сырье / ПП Ветров и др. // Хим.-фармац. журнал. -1989. №3. -С. 320.

28. Гаммерман, А.Ф. Дикорастущие растения СССР / А.Ф. Гаммерман, Г.И. Гром. М: Медицина, 1976.-С.48.

29. Гаммерман, А.Ф. Орех грецкий / А.Ф. Гаммерман // Растения-целители. 1963.- С. 337-339.

30. Георгиевский, В.П Физико-химические методы анализа биолошчески активных веществ растительного происхождения / В.П Георгиевский, НА. Казаринов, М.О. Кар-рыев. Ашхабад: «Ылым», 1976.-240 с.

31. Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов. СанПиН2.3.2.1078-€1.-М, 2001.-168 с.

32. ГОСТ 17.0.0.01-76. Система стандартов в области природы и улучшения использования природных ресурсов. Основные положения.

33. ГОСТ 91500.05.001-00. Стандарты качества лекарственных средств. Основные положения. М.: Изд-во МЗ РФ. - 2000. -29 с.

34. Государственная фармакопея СССР / МЗ СССР. 11-е изд. - М: Медицина, 1987. -Вып. 1,2.

35. Государственная фармакопея СССР. Общие методы анализа Лекарственное растительное сырье. -М.: Медицина, 1990. -Вьш.2.-397с.

36. Государственный доклад «О состоянии окружающей среды Российской Федерации в 1997 году» //Зеленый мир. -1998. -№26.

37. Государственный peecip лекарственных средств. М., 2001. -1260 с

38. Гринкевич, НИ. Химический анализ лекарственных растений / Под ред. НИ. Грин-кевич.: М, Высш. школа,-1983. С. 176.

39. Гроссгейм, A.A. Определитель растений Кавказа / A.A. Гроссгейм. М.: Гос. Изд-во Советская наука, 1949-109 с.

40. Гроссгейм, А.А Флора Кавказа / A.A. Гроссгейм.- M-J1: Изд. АНСССР, 1950 Т.4. -79 с.

41. Дадали, В.А. Процессы перекисного окисления в организме и природные антиокси-данты // В сб. «Введение в частную микронутриентологию/ Под ред. Ю.Н Гичева, Э. Огановой. Новосибирск: Наука, 1999. С. 240-263.

42. Дикорастущие полезные растения России / Отв. ред. A.J1 Буданцев, Е.Е. Лесиовская. -СПб.: Изд-во СПХФА, 2001. -663с.

43. Дудников, МЭ. Микроэлементный и фигохимический анализ околоплодника ореха черного (сем. ЮОЬАЮАСЕАЕ) / М.Э. Дуднжов, В.В. Мелик-Гусейнов // Вестник СГУ. -2006. №47. - С. 130-134.

44. Дудников, М.Э. Динамика БАВ в зависимости от сроков и условий хранения оклоп-лодников ореха черного / МЭ. Дудников, ВБ. Мелик-Гусейнов // Владикавказский медико-биологаческий вестник; Владикавказ, 2005. - С. 189-190.

45. Дюваль-Строев, МР. Орех Чёрный в Краснодаре / Бюллетень Главного ботанического сада -1963. -Вып. 50. С. 52-57.

46. Евдокимова, О.В. Изучение липофильной фракции плодов боярышника / О.В. Евдокимова, ИА Самылина, О.В. Нестерова// Фармация.-1992.-Т.41,№3.-С. 60-61.

47. Кабишев, КЗ. Определение экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье при различной технологии получения экстрактов / К.Э. Кабишев, Е.И. Саканян, Б.Л. Молдавер // Раст. ресурсы. 2002. - Т.38, №3. - С. 113-120.

48. Калашникова, НА Протиювоспалительная активность флавоноидов / НА. Калашникова, Г.И. Геращенко // Актуальные вопросы фармации. Ставрополь. - 1974. -Вып. 2.-С. 353-354.

49. Капин, В.В. Структура и состояние защитных лесных насаждений Краснодарского края и перспективы увеличения их площадей / ВБ. Капин, ЕБ. Левченко // Тр. Кубан. ГАУ. -2004. -Вып. 412 (440). С. 5-10.

50. Карагулов, ХГ. Разработка и исследование спиртового экстракта, полученного на основе пелоидов Тамбуканского озера / ХГ. Карагулов, СБ. Москаленко // Традиционная медицина 2000: Сб. материалов конгр. - 27-29 сент. 2000. - Элиста, 2000. - С. 250-252.

51. Каргеев, АА Современное состояние традиционной фитотерапии и фитофармации в России / А А Каргеев, Т. Л. Киселёва // Традиционые методы лечения основные направления и перспективы развития: Материалы науч-пракг. конф. М, 1998. С. 126127.

52. Касумова, ММ. Исследование зеленого околоплодника и листьев грецкого ореха / М.М Касумова // Сб. трудов Азербайджанского гос. мед. ин-та им. Нариманова Баку, 1958.-С. 48-55.

53. Касумова, ММ. Исследование листьев и зеленого околоплодника грецкого ореха на фитонцидные свойства: Сб. трудов Азербайджанского гос. мед. ин-та Баку, 1956. -ВыпЗ.-С. 170-174.

54. Киселёва, T.JI. Эликсиры и бальзамы: некоторые вопросы терминологии и стандартизации (обзор) / Т.Л. Киселёва, АБ. Чаусов, НН Меньшикова // Фарматека -1997. -№5.-С. 51-57.

55. Кит С.М Лекарственные растения в эцдокринологии / С.М Кит, CM. Турчин // Киев: Здоровя, 1986.-80 с.

56. Клышев, Л.К. Флавоноиды растений / Л.К. Клышев, В. А. Бандюкова, ЛС. Алюкина -Алма-Ата: Наука, 1978.-220 с.

57. Колб, В.Г. Справочник по клинической химии / ВГ. Колб, B.C. Камышников -Минск: Беларусь, 1982. -170 с.

58. Кольцова, Э.В. Каротиноиды препараты микробиологического синтеза и их применение в животноводстве, птицеводстве и пищевой промышленности / Э.В. Кольцова, B.C. Минина -М.: ВНИИСЭНЩ 1984.-38 с.

59. Команд, ИГ. Кариологическое исследование видов рода Juglans L. / ИГ. Команц // Бюл. ГБС АНСССР. -1988. -Вып. 125. -С. 73-79.

60. Контроль качества лекарственных средств: Справочник. М.: Медицина, 1986. - 268 с.

61. Корсун, В.Ф. Фитотерапия экземы / В.Ф. Корсун, А.А. Кубакова, С.Я. Соколов // Минск: Наука и техника, 1995. 284 с.

62. Корязова, Л.К. Модификация структуры и функций липидов крови и биомембран при сахарном диабете / Л.К. Корязова, А.К. Гулевский // Биохимия животных и человека 1990.-Вып. 14.-С. 70-79.

63. Кудрин, А.Н Система экспресс-методов интегральной оценки биологической активносги индивидуальных и комплексных препаратов на биологических объектах / Кудрин АН, Ананин ВВ., Балабьян ВЮ. // Рос. Хим. журн. -1997. Т.41, №5. - С. 114123.

64. Кулыгин, АА Культура ореха черного / А.А. Кулыган, ВВ. Поповичев // Научное издание НГМА. -Новочеркасск, 1998.-96 с.

65. Куркин, В. А Фармакогнозия: Учебник для студентов фармацевтических вузов / В. А. Куркин. Самара: ООО «Офорт», ГОУВПО «СамГМУ», 2004.-1180 с.

66. Сернов, Л.Н Элементы экспериментальной фармакологии / JI.H Сернов, В.В. Гацу-pa.-M.-2000.-351 с.

67. Лойко, Р.Э. Химический состав плодов Juglans regia L. в Белоруссии / Р.Э. Лойко, Т.С. Ширко, Ай Короткевич и др. //Раст. ресурсы. -1990. -Т.26. -Вып. 2. С. 160-169.

68. Медако-биологические требования и санитарные нормы качества продовольственного сырья и пищевых продуктов. М., 1990.

69. Медицинская микробиология / Гл. ред. В.Й Покровский, ОХ. Поздеев. М: ГЭО-ТАР МЕДИЦИНА, 1998.-С. 160-162.

70. Международная фармакопея. Общие методы анализа ВОЗ. 3-е. изд. Женева, 1981.— 242 с.

71. Мельникова, В.А. Новые подходы к комплексной переработке травы зверобоя / В.А Мельникова, В.А. Вайншгейн, АН Шиков и др. // Хим.-фармац. журнал. -1999. -Т.33,№12.-С. 27-30.

72. Методика определения запасов лекарственных растений.-М., 1986.-50 с.

73. Методы анализа пищевых сельскохозяйственных продуктов и мед ицинских препаратов / Пер. с англ. МИ. Вольшанского. // Под ред. А.Ф. Наместникова. М: Пищевая промышленность, 1974.-743 с.

74. Методы биохимических исследований / Под ред. МИ Прохоровой. Л.: Изд-во1. МГУ, 1982.-272 с.

75. Методы биохимического анализа растений / Под ред. Полевого и ГБ. Максимова. -Л: Изд-во Ленинград, ун-та, 1978. -С. 97-98.

76. Минаева, В Г. Лекарственные растения Сибири / В Г. Минаева Новосибирск: Наука, 1991.-С. 209-212.

77. Минаева, В.Г. Флавоноиды в онтогенезе растений и их практическое использование / В.Г. Минаева-Новосибирск: Наука, 1978.-255 с.

78. Мисник, Г.Е. Орехи дендропарка «Тростянец» и их плодоношение. / Г.Е. Мисник // Бюллетень Главного ботанического сада -1963. Вып. 50. - С. 79-52.

79. Муравьева, ДА Фармакогнозия основами биохимии лекарственных веществ. 2-е изд., стереотип / Муравьева ДА. -М.: Медицина, 1981. - 657 с.

80. Настойки, экстракты, эликсиры и их стандартизация. / Под ред. В. Л Багировой, В. А. Северцева.-СПб.:СпецЛиг,2001.-223 с.

81. Нешта, И.Д Флавоноиды / ИД Нешта, Т Г. Запесочная, НА. Колошина // Хим. природ. соединений -1973. №6. - С. 796-797.

82. Ноздрюхина, ЛР. Нарушение микроэлементного обмена и пути его коррекции / Л.Р. Ноздрюхина, НИ Гринкевич. -М: Наука, 1980. 280с.

83. Орехоплодные / Под ред. Е.В. Вульф М.: Гос. изд-во совхозной и колхозной литературы, 1936.-С. 354

84. Пехов, А В. Экстрагирование растительного лекарственного сырья / АВ. Пехов, НФ. Дюбанькова, Р.С. Мазуренкова//Тр. Краснодар. НИИ пищ. пром.-ти. -1969. Т.5. - С. 224-247.

85. Плановский, А.Н Процессы и аппараты химической технологии /. Плановский АД Рамм В.М., Каган С.В. -М.: Химия, -1986. 847 с.

86. Пономарёв, В.Д Экстрагирование лекарственного сырья / В.Д. Пономарёв М.: Наука, 1976.-202 с.

87. Попов, АП Орех грецкий (Juglans regia L.) из семейства ореховых (Juglandaceae) / А.П Попов//В кн. Лесные целебные растения. М, 1973. - С. 43-44.

88. Попов, АП Орех грецкий / АП Попов // Лекарственные растения в народной медицине. Киев, 1969. - С. 171-172.

89. Поповичев, В.В. Опыт выращивания ореха черного в Ставропольском крае. / ВВ. Поповичев // Лесомелиорация Юга России: Сб. ст. НГМА. Новочеркасск, 1998. - С. 7-10.

90. Поповичев, ВБ. Орехи горного парка г. Кисловодска. / ВБ. Поповичев // Лесомелиорация Юга России: Сб. ст. НГМА-Новочеркасск, 1998.-С. 134-135.

91. Пыжов, В.Х Биологическая активность вещества грецкого ореха и миндаля обыкновенного /В.Х. Пыжов, АА. Ддров // Тр. ГНБС.-1981. Т.83.-С. 61-67.

92. Рощина, ВБ. Биомедиаторы в растениях. Ацетилхолин и биогенные амины. / ВБ. Рощина // Пущинский НЦАНСССР Пущино, 1991 - С. 193.

93. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ//Под редакцией В.П Фисенко.-М. -2000. С. 114-119.

94. СанПиН 2.3.2.1293-03 Гигиенические требования по применению пищевых добавок. -М.: Минздрав России, 2003.-416 с.

95. Северцева, ОБ. Исследование состава облепихового масла и разработка новой лекарственной формы облепихового масла и его заменителя препарата Аекол. Авто-реф. дис. канд. фармац. наук. - СПб. -1997. - 28 с.

96. Селиванчикова, И.Б. Количественное определение флавоноидов в гомеопатических настойках туи методом спектрофотометрии// Фармация.-2001.-№6.-С. 14-16.

97. Сергеев, A.B. Медико-биологические аспекты каротиноидов / АБ. Сергеев, Л.А. Вакулова, МЛ Шашкина, Т.А. Жидкова // Вопр. мед. химии. -1992. Т.38, Вып.6. -С.8-12.

98. Сливкин, А.И. Физико-химические и биологические методы анализа лекарственных средств: Учеб. пособие / АИ. Сливкин, В.Ф. Селеменев, Е.А. Суховерхова / Под ред. В.Г. Арпохова Воронеж: Медицина, 1999. - 368 с.

99. Степанова, Э.Ф. Использование экспресс-методов оценки биологической активности на культуре клеток при разработке фитопрепаратов адаптогенного действия / Э.Ф.

100. Степанова, И.Н Андреева, М.А. Огай, Б.Б. Сысуев // Фармация на современном этапе проблемы и достижения: Науч. тр., т. XXXIX, ч. 1. М, 2000. - С. 299-302.

101. Степанова, Э.Ф. Фармацевтическая фигогехнология / Э.Ф. Степанова, И.Н Андреева // Терминологические аспекты медицинской и фармацевтической деятельности в области традиционной медицины и гомеопатии: Науч. тр. НПЦ ТМГ. М, 2000. - Т.1. -С. 148-150.

102. Стреляева, А.П. Изучение токсичности и фармакологической активности препаратов на основе лекарственного растительного сырья и новых экстрагентов (15.00.02, 14.00.25): Автореф. дисс. докт. фарм. наук. М., 2003. - 50 с.

103. Технология и стандартизация лекарств: В 2тУ Под ред. ВП Георгиевского, ФА Конева. -Харьков: Рирег, 1996. Т. 1. - 778с.

104. Технология и стандартизация лекарств: В 2тУ Под ред. ВЛ. Георгиевского, ФА Конева. -Харьков: РирегДЮО.-Т. 2. -781с.

105. НЗ.Федеральный реестр биологически активных добавок к пище. / Под ред. ТЛ. Пилат. -М.: Изд-во «Когелег», 2001.-421 с.

106. Филатов, В.П. Тканевая терапия (учение о биогенных стимуляторах). / В.П Филатов.-М.: Знание, 1955.

107. Цапалова, ИЭ. Экспертиза дикорастущих плодов, ягод и травянистых растений. / ИЭ. Цапалова, М.Д Губина, ВМ. Позняковский. Новосибирск, Сибирское университетское издательство, 2002. -180с.

108. Чепурной, B.C. Плодоношение ореха черного в разнофункциональных насаждениях Западного Предкавказья / B.C. Чепурной, В.В. Калин, ЕВ. Левченко // Тр. Ку~ бан. ГАУ. -2004. -Вып. 412 (440).-С. 88-107.

109. Шарапов, НИ Закономерности химизма растений. /Н.И Шарапов. -М.-Л: Изд-во АН СССр, 1962.-130с.

110. Швиденко, А.И. Культура ореха черного / А.И. Швиденко, ПА. Цыганков -Львов: Вьпца школа, 1978.-129 с.

111. Шиков, А.Н. К вопросу о стандартизации масел и масляных растительных экстрактов. / AR Шиков // Материалы УП Международного съезда «Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения». -СПб.-2003-С. 385-390.

112. Шиков, А.Н. Растительные масла и масляные экстракты: технология, стандартизация, свойстваУ АН. Шиков, В.Г. Макаров В.Е. Рыженков // М.: «Русский Врач». -2004.-264 с.

113. Шинкаренко, А.Д Химическое и фармакологическое изучение флавоноидных комплексов из листьев чёрного и грецкого орехов. / A.JI. Шинкаренко, С.Д. Соколов,

114. B.И. Дороднева Вопросы курортологи, фармации, фармакологии. Пятигорск, 1967.1. C. 365-366

115. Шретер, АИ. Справочник «Природное сырье китайской медицины» (в 3-х томах)./ А.И. Шретер, Б.Г. Валентинов, Э.М Наумова -М.: Теревинв, 2004. -Т. 1. -506с.

116. Экспфиментапьный сахарный диабет/Под ред. В. Г. Баранова,- J1: Наука, 1983-С37.

117. Эрнандес, Е. Новая косметология. / Эрнандес Е., Марголина А., Петрухина А- М.: Косметика и медицина, 2002. -208 с.

118. Яковпев, Г.П. Поиск новых видов лекарственных растений, перспективных для создания лекарственных средств / Г.П Яковлев, К.Ф. Блинова // Человек и лекарство: тез. докл П Рос. нац. конгресс (10-15 апреля 1995, М). -М, 1995. С. 247.

119. Aromaterapie plus./ ПБ. Брандгнер, Д. Слуненко, М. Кадлец и др. Germany: CosmetikKarl Hadek, 1997.-С. 14-16.

120. Autery, A Phanmcodynamics and phannacodnetics of Veliten (rutine, alfa-tocopherol and ascorbic acid) in patients with chronic venous insufficiency. // Int. J. din. Pharmacol. Res.-1994.14(3). P. 95-100.

121. Bader, W. Die Carotinoide/ Bader W. //Chem.unserer Zeit. 1972.-Vol.6, №3.- P.94-96.

122. Beraldo, H. Heavy metals / H. Beraldo, A Garnier-Sullerot, L. Tosi // Biochemistiy. -1985. N.2. - P.284-289.

123. Britton, G. Biosynthesis of carotenoids / Briton G. I I Chemistry and Biochemistry of Plant Pigments-London, 1976. -P. 51-55.

124. Cao, G. Antioxidant and prooxidant behavior of flavonoids: structure-activity relationships /

125. G. Cao, E. Sofic, R.L. Prior// Free Rad. Biol. Med. -1997. Vol. 22, № 5. - P. 749-760.

126. Cardiotonic flavonoids from Citrus plants (Rutaceae). / Itoigawa Masataki, Taceya Kazumi, Furukawa HizDshi. // Biol, and Pharm. Bull. -1994. Vol. 17. - №11. - P. 1519-1521.

127. Flavonoids from Achillea crithmifolia Waldst and Kit. / Txakou 0., Skaltsa H., Harvala C. // Sci. Pharm. -1996. Vol. 64. - №2,- P. 197-202.

128. Formica, J.V. Review of the biology of quercetin and related bioflavonoids / J.V. Formica, W. Regelson // Fd. Chem. Toxic. -1995. Vol. 33.- № 12. - P. 1061-1080.

129. Garrido Femandes Por.I. Minguer Pigmentos carotenoides/ Garrido Fernandes Por.I., Mosqueio M.I.// Grasas Y aceites.-1983.-Vol.34, №5.-P.197-202.

130. Gester, H. The 11 th International Symposium on Carotenoids, Leiden, 18-23 Aug J Gester

131. H. //J. Nutr. And Environ. Med. -1996. № 3. -P. 197-201.

132. Hanasaki, J. The correlation between active oxygens scavenging and antioxidative effects of flavonoids / J. Hanasaki, S. Ogawa, S. Fukui // Free Rad. Biol. Med. -1994. Vol. 16. - P. 845-850.

133. Hong-Yeng Hsu The chemical constitunes of oriental herbs. /Hong-Yeng Hsu, Yuh-Pan Chen, Mina Hong// Oriental Healing Ants. ints. Los Angeles OUP, 1982-P.1546

134. Itoigawa Masataki. Cardiotonic flavonoids from Citrus plants (Rutaceae). / Itoigawa Masataki, Taceya Kazumi, Furukawa Hizoshi. // Biol, and Pharm. Bull. -1994. Vol. 17. -№11.-P. 1519-1521.

135. Khachik, F. Separation, identification, and quantification of carotenoids in fruits, vegetables and human plasma by high performance liquid Chromatography / Khachik F., Beecher G.R., Goli M.B. // Pure & Appl. Chem. -1991. Vol. 63, № 1. - P. 71-80.

136. Können, M. Red wine derived compounds and their putative antiatherog properties / M. Können, J. Caen. In: Polyphenols 96. Ed. INRA Paris. -1998. - P. 105-115.

137. Myocardial effects of flavonoids from Crataegus species. / M. Schussler, J. Holsl, U. Fricke // Arzneim. Forsch. -1995. - Vol. 45, №8. - P. 842-245.

138. Myocardial effects of flavonoids from Crataegus species. / M. Schussler, J. Holsl, U. Fricke//Arzneim. Forsch. -1995. - Vol. 45, №8. - P. 842-245.

139. Prasad, AS. Zinc and immunity / AS. Prasad // Moll. Cell. Biochem. -1998. -V.188. -N.l-2. P.63-69.

140. Pratt, D.E. Naytral Antioxidants from Plant Material. Phenolic Compounds in Food and Their Effects on Health./ D.E. Pratt Washington, 1992. - 54 p.

141. Remesy, C. Interest of polyphenols in preventive nutrition / C. Remesy, C. Manach, C. Demigne. In: Polyphenols 96. Ed. INRA Paris. -1998. - P. 251-265.

142. Rice-Evans, CA Structure-antioxidant activity relationships of flavonoids and phenolic acids / CA Rice-Evans, NJ. Miller, G. Paganga. // Free Rad. Biol. Med. -1996. Vol. 20. - № 7.-P. 933-956.

143. Seemann, J. High Oleic Sunflower Oil 90plus: Sunflowers Are More Powerful That They Are Thought To Be /J.Seemann, B. Olbrich-Deubner, R.Grob Lannert// SOFW cosmetics-2001.-№1.-P.18-21.

144. Zindone, J. Characterization and dissolution studey of solid despersion of theophylline and indometacin with PVP IVA copolumes / J. Zindone, M. Moneghini, P. Rupeno, D. Voinovic // STP Pharma Sei. -1992. vol. 2. - №2. - P. 186-192.