Исследования по стандартизации сырья и препаратов аконита каракольского тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 15.00.02, кандидат фармацевтических наук Чубарова, Галина Дмитриевна

• Чубарова, Галина Дмитриевна
• кандидат фармацевтических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат фармацевтических наук Чубарова, Галина Дмитриевна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Ботанико - фармакогностическая характеристика аконита каракольского

1.1.1. Ботаническая классификация

1.1.2. Описание растения

1.1.3. Ареал и места обитания

1.1.4. Заготовка сырья

1.2. Химический состав

1.3. Фармакологические свойства ЛРС аконита

1.4. Применение препаратов аконита в медицине

1.4.1. Применение в официальной медицине

1.4.2. Применение в гомеопатии

1.4.3. Применение в народной медицине

1.5. Стандартизация сырья и препаратов аконита

Выводы

Экспериментальная часть

ГЛАВА 2. Объекты и методы исследования

ГЛАВА 3. .Изучение лекарственного растительного сырья «Клубни аконита каракольского»

3.1. Макроскопический анализ сырья аконита

3.2. Микроскопический анализ сырья аконита

3.3. Изучение биологически активных веществ клубней аконита каракольского 47 3.3.1 Обнаружение отдельных групп БАВ конеклубней аконита с помощью качественных реакций

3.3.2. Изучение алкалоидного состава клубней аконита каракольского

3.3.3. Изучение алкалоидов аконита каракольского с использованием ВЭЖХ 53 Выводы

ГЛАВА 4. Разработка проекта фармакопейной статьи «Клубни аконита каракольского»

4.1. Разработка характеристик подлинности сырья «Клубни аконита каракольского»

4.2. Разработка методики количественного определения суммы алкалоидов

4.3. Валидация титриметрической методики количественного определения суммы алкалоидов в сырье аконита

4.4. Установление сроков годности 66 Выводы

ГЛАВА 5. Исследование настойки гомеопатической матричной аконита

5.1. Разработка характеристик подлинности настойки гомеопатической матричной аконита каракольского

5.2. Изучение компонентного состава настойки гомеопатической матричной аконита каракольского 71 5.2.1. Изучение алкалоидного состава аконита НГМ

5.3. Изучение флавоноидного состава НГМ аконита

5.4. Изучение кумаринового состава НГМ аконита

5.5. Изучение компонентного состава НГМ аконита каракольского методом ВЭЖХ

5.6. Количественное определение алкалоидов в НГМ аконита каракольского

5.6.1. Количественное определение алкалоидов в НГМ аконита методом ВЭЖХ

5.6.2. Количественное определение суммы алкалоидов в НГМ аконита каракольского методом титрования

5.7. Валидация титриметрической методики количественного определения суммы алкалоидов в сырье аконита

5.8.Сравнительная характеристика результатов двух методик по определению суммы алкалоидов в НГМ аконита каракольского

5.9. Разработка показателей качества и установление сроков годности НГМ аконита каракольского

5.10. Оценка подлинности разведений матричной настойки аконита 103 Выводы

ГЛАВА 6. Изучение биологической активности настойки гомеопатической матричной аконита каракольского и ее разведений

6.1. Изучение цитотоксического действия НГМ аконита каракольского и аконитина на культуре клеток HeLa

6.2. Исследование цитотоксического действия комбинации НГМ аконита каракольского с препаратом «Цисплатин»

6.3. Сравнительная характеристика биологической активности настойки гомеопатической матричной и гомеопатических препаратов аконита 108 Выводы

ГЛАВА 7. Изучение действия настойки гомеопатической матричной и гомеопатических препаратов аконита на модели мышиной миеломы

7.1. Изучение противоопухолевого действия настойки аконита и аконитина

7.2. Изучение противоопухолевого действия ГомЛС аконита

7.3. Изучение противоопухолевой активности гомеопатических разведений аконита в сравнении с действием цитотоксического препарата «Цисплатин» и иммуномодулятора «Стимфорте»

Выводы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Исследования по стандартизации сырья и препаратов аконита каракольского»

Актуальность темы. Более 70% современных гомеопатических средств получают из лекарственного растительного сырья. Аконит является одним из наиболее используемым в гомеопатии растением. В Гомеопатические Фармакопеи ведущих стран мира (Германия, Франция, США и другие) включены препараты аконита, получаемые из следующих видов растений: аконит аптечный (A. napellus L.), аконит ядовитый (A. ferox Wall.), аконит волчий (A. lycoctonum L.): Препараты, в состав которых входят разведения гомеопатической настойки аконита, ' широко используются при острых воспалительных заболеваниях, нервных болезнях с болевым синдромом, разнообразных сердечных симптомах с приступами, страха, для лечения и профилактики простудных заболеваний. На территории России и бывших стран СССР, перечисленные выше виды аконита не произрастают в диком « виде и не культивируются. В Киргизии произрастает в больших количествах близкий вид - аконит каракольский. В ГФ VIII издания (1947г) входила статья «Клубни аконита Тянь-Шаньского» представляющая смесь двух видов аконита каракольского и аконита джунгарского. Современная нормативная документация на сырье и настойку гомеопатическую матричную аконита 1 каракольского отсутствует.

Цель и задачи исследования. Целью работы явились исследования по стандартизации клубней и матричных настоек аконита каракольского на основе изучения состава биологически активных веществ (БАВ) и биологических особенностей сырья.

Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие задачи:

-провести анализ отечественной и зарубежной научной литературы и нормативной документации, регламентирующей качество гомеопатических лекарственных средств;

-изучить морфолого-анатомическое строение клубней аконита каракольского и выявить диагностические признаки для идентификации сырья;

-изучить состав БАВ клубней аконита каракольского;

-изучить динамику содержания БАВ в клубнях аконита каракольского в процессе хранения;

-провести исследования по оптимизации показателей качества клубней аконита каракольского;

-изучить состав БАВ настойки гомеопатической матричной и разработать показатели ее качества;

-изучить стабильность настойки гомеопатической матричной при хранении; -изучить в сравнительном аспекте биологическую (канцеростатическую) активность настойки гомеопатической матричной (НГМ) и гомеопатических лекарственных средств (ГомЛС) аконита на культуре клеток Hela и на мышах с перевитой миеломой.

Научная новизна результатов исследования состоит в комплексном изучении сырья, матричной настойки и разведений, основанном на углубленном анализе химического состава и биологических свойств клубней аконита каракольского. В сырье и настойке определено содержание алкалоидов, флавоноидов, кумаринов, дубильных веществ. Разработаны характеристики подлинности и показатели качества клубней аконита каракольского. Установлены показатели качества гомеопатической матричной настойки аконита. Изучена стабильность сырья и матричной настойки аконита каракольского при хранении, рекомендованы сроки их годности. Показана в сравнении цитостатическая активность настойки аконита (НГМ) и ГомЛС аконита на модели мышиной миеломы и на культуре клеток HeLa. Результаты исследований защищены патентом Рф (№ 2009112845 от 08.04.2009). Дан сравнительный анализ биологической активности настойки гомеопатической матричной аконита (НГМ) и ГомЛС аконита (Д6, Д12, ДЗО, Д12/30).

Практическая значимость результатов исследования. Результаты научных исследований использованы при разработке проектов фармакопейных статей «Клубни аконита каракольского» и «Настойка гомеопатическая матричная аконита каракольского», которые переданы' для утверждения в установленном порядке.

Апробация работы. Материалы работы доложены и обсуждены на Международной 2-ой Российско-Китайской научной конференции по фармакологии «Фундаментальная фармакология и фармация - клинической практике» (Пермь, 2006) и на III Российском Гомеопатическом съезде (Москва, 2007).

Связь темы диссертационной работы с планом научных работ учреждения. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом НИР кафедры фармакогнозии ГОУ ВПО ММА им. И.М. Сеченова по теме: «Фармакогностическое изучение лекарственного растительного сырья, лекарственных сборов, лекарственных форм из сырья и разработка методов их стандартизации с учетом влияния антропогенных факторов» (код темы 04.07.093, проблема № 1006 АМН РФ, Государственный регистрационный номер 01200110546).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 5 печатных работ.

На защиту выносятся: -данные по качественному и количественному составу биологически активных веществ (алкалоидов, флавоноидов, кумаринов, дубильных веществ) сырья и настойки клубней аконита каракольского; -результаты морфолого-анатомического изучения клубней аконита каракольского и вариабельность диагностических признаков при переработке сырья;

-результаты стандартизации клубней и матричной настойки аконита каракольского;

-результаты по изучению стабильности сырья и матричной настойки аконита каракольского;

- результаты оценки биологической активности матричной настойки и ее разведений.

Объем и структура диссертации. Работа изложена на 158 страницах машинописного текста, содержит 22 таблицы и 42 рисунка. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, 6 экспериментальных глав, общих выводов, списка литературы (115 наименований, из них 45 на иностранных языках) и приложения.

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия и фармакогнозия», Чубарова, Галина Дмитриевна

Общие выводы

1. Проведен фармакогностический анализ клубней аконита каракольского. На основании результатов макроскопического изучения дано описание внешних признаков цельного сырья- и порошка клубней аконита каракольского. Изучена вариабельность диагностических признаков при переработке сырья. Установлены диагностические признаки анатомического строения сырья: тупоконечные каменистые клетки с пористыми стенками, звездчатый камбий, подковообразные группы сосудов ксилемы.

2. Изучен химический состав БАВ клубней аконита каракольского. С помощью качественных реакций, ТСХ, ВЭЖХ доказано присутствие алкалоидов (аконитин), флавоноидов (кверцетин ), дубильных веществ (гидролизуемые), кумаринов (умбелиферон).

3. В клубнях аконита проведено определение содержания суммы алкалоидов в пересчете на аконитин титрометрическим методом, которое составило в среднем 1,67±0,43%.

4. Проведен анализ настойки гомеопатической матричной аконита, определены ее характеристики, разработана методика определения, подлинности настойки аконита методом ТСХ. Предложены показатели качества НГМ аконита и установлены сроки годности.

5. Разработана методика количественного определения аконитина в настойке гомеопатической матричной аконита методом ВЭЖХ. Относительная ошибка определения аконитина не превышает ±3,061% (доверительный уровень 95%).

6. Содержание аконитина составляет 0,018 ± 0,001%. Разработаны методики количественного определения суммы алкалоидов в гомеопатической матричной настойке аконита с использованием ВЭЖХ и титрометрии. Относительная ошибка определения при доверительном уровне 95% не превышает ±3,056% (ВЭЖХ) и ± 2,28% (титрометрия). Содержание суммы алкалоидов в настойке аконита, определенное методом титрометрии, составило 0,034±0,001%. Содержание суммы алкалоидов в настойке аконита, определенное с помощью ВЭЖХ, составило 0,036 ± 0,001 %.

7. Проведено фармакологическое изучение сырья и гомеопатических лекарственных форм аконита. ГомЛС аконита обладают ярко выраженным аддитивным действием, как по отношению к действию препарата «Цисплатин», непосредственно воздействующего на опухоль, так и опосредованно через иммунную систему - препарат «Стимфорте».

8. Степень ингибирования клеточного роста ГомЛС аконита составляла от 65 - 70% при максимально возможной концентрации для работы с культурой клетки. Установлено, что НГМ аконита каракольского обладает значительно более высокой активностью, чем индивидуальный алкалоид аконитин. Использование НГМ аконита (разведение 1:50) в сочетании с препаратом «Цисплатин» приводит к синергизму рост - ингибирующего действия на клетки HeLa.

9. При пероральном введении ГомЛС «Аконит Д12» и «Аконит ДЗО» наблюдался противоопухолевый эффект на модели мышиной миеломы, который выражался в достоверном увеличении среднего времени продолжительности жизни экспериментальных животных. Максимум биологической активности приходился на разведение Д12.

Ю.Изучено противоопухолевое действие при комбинированном введение ГомЛС «Аконит Д12/30» и препарата «Стимфорте», а также НГМ аконита и «Стимфорте». В обоих вариантах наблюдали выраженное, достоверное противоопухолевое действие, которое проявлялось в увеличение продолжительности жизни экспериментальных животных и высоких показателях торможения роста опухоли в течение всего периода наблюдения. Действие второй комбинации (НГМ аконита и «Стимфорте») было ниже, чем в первом варианте.

126

Список литературы диссертационного исследования кандидат фармацевтических наук Чубарова, Галина Дмитриевна, 2009 год

1. Агапова Н. Д. Семейство лютиковые (Ranunculaceae) // Жизнь растений. В 6-ти т. Т. 5. Ч. 1. Цветковые растения. Под ред. А. Л. Тахтаджяна. - М.: Просвещение, 1980.- С. 210-216.

2. Аконит или борец.//Растительные ресурсы СССР .т. 5-Л., 1985.-С. 113137.

3. Бельков А.П., Чубарова Г.Д., Терентьев А.А., Самылина И.А., Сорокина А.А., Ильичев А.В., МальдовД.Г. Роль алкалоидов в противоопухолевой активности настойки аконита // Фармация,- 2008.-№4.-С. 46-48.

4. Бойко И.А. Фитокомплекс, обладающий противоопухолевым действием, и способ лечения онкологических больных.//Пат.2074731 RU, 6 А61К35/78.-№ 94044388/14; Заявлено 29.12.1994; Опубл. 10.03.1997.

5. Варшавский В. К . Практическая гомеопатия. М.: Медицина, 1989.- 176с.

6. Временная фармакопейная статья 42-1666-86. Трава аконита белоустого . Введ. 09.12.1986 до 31.12.1988. -М.: Изд-во стандартов, 1986. -22с.

7. Ганеманн С. Чистая материя медика.Т. 1.- Т.О.О.ЮЛЛО, 1994.- С.240-260.

8. Генкина Г.Л., Закирова М.Л., Пичугин Е.И. Спектрофотометрический метод анализа суммы алкалоидов надземной части борца белоустого. // Химико-фармацевтический журнал.-1992.- т.26, №1.- С.64-65.

9. Гиляров М. С. Биологический энциклопедический словарь. М.: Советская энциклопедия, 1986. - 831 с.

10. Ю.Гоникман Э.И. Пути исцеления. Мир лекарственных растений,- Изд-во Сантана, 1994,-352с.11 .Государственная Фармакопея СССР: Вып. 1. Общие методы анализа. //МЗ СССР. -11-е изд., доп. -Е : Медицина, 1987. -336с. ил.

11. Государственная Фармакопея СССР: Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье.//МЗ СССР.-11-е изд., доп.- М.: Медицина, 1989.-400с.

12. Государственный реестр лекарственных средств, т. I. М., 2002.-1300с.

13. Грищенко И.И., Зубов А.Н., Наумов А.П. Цитология.- 1982.-№24(6).-С.658.

14. Жапова Ц. А., Моденова Л. Д., Семенов А. А. Исследование химического состава аконита Чекановского. //Лек. растения в традицинной и народной медицине: Тез. докл. науч. конф. -Улан-Удэ, 1987. -С. 66-67.

15. Кейн С. Гомеопатическая фармация. Введение и руководство: Пер.с англ.Федотовой Г.А.-М.: Гомеопатическая медицина, 2002.-252 с.

16. Кирхнер Ю. Тонкослойная хроматография. В 2-х т. Пер. с англ.// Подред. В. Г. Березкина.,- М.: Мир, 1981.

17. Кисилева Т.Л., Цветаева Е.В., Устынюк Л.А., Союнова Ж.А., О.Горошко. Разработка методики проведения ТСХ для обнаружения флавоноидов и кумаринов в матричных настойках из сырья различных видов полыни.//Традиционная медицина, 2007.-№3 (10).-С.34-38.

18. Клубни Аконита Тянь-Шанского. Государственная Фармакопея СССР: VIII издание, 1946.-С.551-552.

19. Клышев Л. К. , Бандюкова В. А. , Алюшина А. С. Флавоноиды растений,- Алма-Ата: Наука, 1978. 254с.

20. Клюев М. А. Справочник. Лекарственные средства, применяемые в медицинской практике в СССР. М. : Медицина, 1989.- 512с.

21. Корепанов С.В. Лица растений. Растительный мир глазами врача.-Барнаул, 2001.-180 с.

22. Костенникова З.П., Акашкина Л.В., Островский А.З. Введение вгомеопатическую фармацию.- М.: Симилия, 2003.-208 с.

23. Кузнецова М.А., Резникова А.С. Сказания о лекарственных растениях. М.: Высш. школа, 1992.- 272 с.

24. Ладыгина Е.Я.;Фролова Л.Н., Мельникова Н.Н., Цветаева Е.В., Смирнова Ю.А.Изучение Анатомического строения аконита аптечного.// Традиционная медицина. 2007.- №3 (10).- С.53-55.

25. Латыпова Г.М. Фармакогностическое изучение некоторых видов аконитов секции Lycoctonum: Дис. канд. фарм.наук: 15.00.02/БГМИ.-Уфа, 1993.-120с.

26. Луферов А.Н. Конспект кавказских видов Aconitum (Ranunculaceae) //Ботанический журнал, 2000,- т.85, №10.-С.87-96.

27. Луферов А.Н. Конспект кавказских видов Aconitum (Ranunculaceae) // Бот. журн. -2000. -Т. 85, № 10. -С. 86-95.

28. Луферов А.Н. Таксономический конспект лютиковых (Ranunculaceae Juss.) Дальнего Востока России // Turczaninowia, 2004.- Т. 7, вып. 1. -С. 1-85.

29. Мальдов Д.Г., Чубарова Г.Д., Ильичев А.В., Бельков А.П., Костенникова З.П., Костюк Г.В., Тереньтьев А. А. Действиегомеопатических препаратов цисплатина.// III Гомеопатический съезд: Сб. науч. тр.- М.,- 2007.-С.93-95.

30. Мануков А.Н. Фармакогностическое изучение некоторых северокавказских видов аконита (А.восточного, А. скученноцветкового, А.носатого) и перспектива их использования. //Дис.канд. фарм.наук: 15.00.02/Пятигорск, 1994.- 151с.

31. Маслов JT.H., Лишманов Ю.Б., Майшмекулова Л.А. Антиаритмические свойства агонистов каннабиноидного рецептора. //Экспериментальная Клиническая Фармакология.- 2001.- 64(3).-С. 37-40. •

32. Мигранова И.Г., Мардамшин А.Г., Старухин Ф.Н., Лукичева И.А. // Биотехнология.- 1997.- № 9-10. -С. 24-26.

33. ОФС 42-0027-05.Настойки гомеопатические матричные.

34. Патудин А.В., Мищенко B.C., Л.И.Ильенко. Гомеопатические лекарственные средства, разрешенные в Российской Федерации для применения в здравоохранении и ветеринарии.- М., Изд-во Валанг, 2005.- 348 с.

35. Пашинский В.Г. Использование лекарственных растений в комплексной терапии заболеваний,- Томск, Изд-во ТГУ, 1988.-100с.

36. Пашинский В.Г., К.В.Яременко. Проблема онкологической фармакологии.- Томск, Изд-во ТГУ, 1983.- 204с.

37. Пигаревский П.В., Мохнач И.В. Иммуноморфологические изменения в лимфоидной системе мыши под влиянием Aconitum soongaricum Stapf., левамизола и нуклеата натрия.// Доклады АН СССР.- 1983;268(3).-754с.

38. Плеханова Т. И. , Латыпова Г. М. , Федорова И. А. Алкалоидные компоненты аконита восточного, произрастающего в районах Северного Кавказа.//Фармация. 1991.- N 5.-С. 33-36.

39. Плугарь В. Н. , Рашкес Л. В. , М. Г. Жамиерашвили. МАСС-спектрометрический метод анализа суммы алкалоидов Aconitum Lycoctonum. //Химия природ, соединений. 1982.-N 1. - С.80-86.

40. Приказ Минздравмедпрома Росии от 29.11.1995г № 335 «Об использовании метода гомеопатии в практическом здравоохранении».

41. Пушкарский С.В. Фармакологические свойства дитерпеновых алкалоидов аконита байкальского. :Автореф. дис.канд.биолог. наук: 14.00.25.-Томск.- 2006.-23с.

42. Раменская Г.В. Высокоэффективная жидкостная хроматография в оценке биотрансформации лекарственных средств//Фармакогенетика и фармакокинетика.- М.,2003.-.С.328.

43. Растительные Ресурсы СССР: Цветковые растения, их химическийсостав, использование. Семейства Magnoliaceae-Limoniaceae. Л.: Наука, 1984.-460 с.

44. Садиков А. 3., Шакиров Т.Т. Способ получения аллапинина из надземной части Aconitum Lycoctonum. //Химия природ, соединений. -1990. -N 1.- С. 91-94.

45. Садикова Ш. А. Технология инъекционных растворов дезоксипе-ганина гидрохлорида и аллапинина: Автореф. дис. канд. фармац. наук:15.00.02.-М.,1991.- 22с.

46. Сахибов А. Д. , Садикова Ш. А. , Генкина Г. Л. Контроль качества препарата аллапинина методом ВЭЖХ. //Химия природ, соединений -1990.-N1.-С. 129-131.

47. Сиротенко Е. Г. , Рашкес Я. В. , Тельнов В. А. , Юнусов М. С. Особенности масс-спектров С -дитерпеновых алкалоидов.// Химия природных соединений.-1989. N 1.- С. 95.

48. Сиротенко Е.Г., Рашкес А.В. МАСС-спектрометрический метод анализа дитерпеновых оснований растений рода АсотПш1.//Химия при род. соединений. 1989.- N 4.- С. 532-536.

49. Сиротенко Е.Г., Рашкес А.В., Плугарь В.Н. ГХ-МАСС-анализ суммы дитерпеновых алкалоидов из корней Aconitum Septentrionale. //Химия природ, соединений. 1989.- N4.- С.538-543.

50. Собецкий В.В., Аксенов Г.Н. Таблетка противоопухолевого действия, способ ее получения и способ лечения больных с онкологической патологией.//Пат.2256443 UA, 7 А61К9/20, А61К35/78.-№ 2003106791/15; Заявлено 12.03.2003; 0публ.20.07.2005.

51. Тодоров И.И., Тодоров Г.И. Стресс, старение и их биохимическая коррекция.- М.: Наука, 2003 .-479с.

52. Толкачев О.Е., Шемерякин Б.В., Пронина Е.В. Выделение и, очистка алкалоидов. //Химия природных соединений. 1983. - N 4. -С. 415-429.

53. Трещалина Е.М. Противоопухолевая активность веществ природного происхождения.-М.-Изд-во.: Практическая медицина- 2005.- 272с.

54. Файзрахманова И.М., Цырлина Е.М., Юнусов М.С., Муринов Ю.И., Миназова Г.И. Стандартизация лаппаконитина стандартного образца.//Фармация.-2008.- № 3.-С.23-24.

55. ФС 42-269-72 от 15.01.1973 «Трава аконита джунгарского свежая»

56. Хоперская О.А., Мальдов Д.Г. Способ лечения онкологических заболеваний.//Пат. 2259210 RU.-№ 2003101275; опубл.27.07.04.

57. Чубарова Г.Д., Бельков А.П., Ильичев А.В., Мальдов Д.Г., Самылина И.А. Противоопухолевая активность гомеопатических препаратов из спиртовых экстрактов Куркумы длинной.//III Гомеопатический съезд.-Москва.- 2007.-С.232-233.

58. Шаретт Ж. Практическое гомеопатическое лекарствоведение//2-е изд.-Киев.-1990.- с.15.

59. Шаршунова М., Шварц В., Михалец Ч. Тонкослойная хроматография в фармации и клинической биохимии,- Москва.-1980.-С.280.

60. Швабе Д.В. Гомеопатические лекарственные средства.-Москва.-1967.-С.262.

61. Шретер А.И., Валентинов Б.Г.,Наумов Э.М. Природное сырье китайской медицины. Т.1//Москва, 2004.-506с.

62. Юнусов С.Ю. Алкалоиды,- Ташкент.- 1974. 318с.

63. Ahmad М, Ahmad W, Ahmad М, Zeeshan М, Shaheen F. Norditerpenoid alkaloids from the roots of Aconitum heterophyllum Wall with antibacterial activity//J Enzyme Inhib Med Chem.- 2008.- p.21

64. Alibeu JP, Jobert J. Aconite in homeopathic relief of post-operative pain and agitation in children // Pediatrie.- 1990.-№ 45(7-8).-p.465-466.

65. Ameri A, Peters Т. С alcium-dependent, sustained enhancement of excitability during washout of aconitine in rat hippocampal slices. //Exp

66. Brain Res.- 1997.-№ 114(3).-p.518-524.

67. Been A. Aconitum: genus of powerful and sensational plants.//Pharm Hist, 1992.- № 34(1).-p.35-37.

68. Berdiev BK, Xia J, McLean LA, Markert JM, Gillespie GY, Mapstone ТВ, Naren AP, Jovov B, Bubien JK, Ji HL, Fuller CM, Kirk KL, Benos DJ. Acid-sensing ion channels in malignant gliomas.// J Biol Chem.- 2003.- № 25.-p.278.

69. Braca A, Fico G, Morelli I, De Simone F, Tome F, De Tommasi N. Antioxidant and free radical scavenging activity of flavonol glycosides from different Aconitum species.// J Ethnopharmacol, 2003.- № 86(1).-p.63-67.

70. Chen JH, Lee CY, Liau ВС, Lee MR, Jong TT, Chiang ST. Determination of aconitine-type alkaloids as markers in fuzi (Aconitum carmichaeli) by LC/(+)ESI/MS(3)// J Pharm Biomed Anal.- 2008.- № 28.

71. Csupor D, Forgo P, Wenzig EM, Bauer R, Hohmann J. Bisnorditerpene, norditerpene, and lipo-alkaloids from Aconitum toxicum. //J Nat Prod.-2008,- №71(10).-p.l779-1782.

72. Gardeners' Encyclopedia of Plants & Flowers.— Dorling Kindersley Limited, London, 1995.-c.308.

73. Gu WL, Chen CX, Wang Y. Comparative study of Scrophulariae and Aconite in inhibiting myocardial hypertrophy in rats and mice// Zhong Xi Yi Jie He Xue Bao.- 2008.-№ 6(4).-p.376-380.

74. Guo X, Tang XC. Effects of central Ca2+ on analgesic action of lappaconitine // Zhongguo Yao Li Xue Bao. -1989.-№ 10(6).-p.504-507.

75. Guo X, Tang XC. Effects of reserpine and 5-HT on analgesia induced by lappaconitine and N-deacetyllappaconitine. // Zhongguo Yao Li Xue Bao.-1990.-№ 1 l(l).-p.l 4-18.

76. Hikino H, Takata H, Fujiwara M, Konno C, Ohuchi K. Mechanism of inhibitory action of mesaconitine in acute inflammations.//Eur J Pharmacol.-1982.-№82(l-2).-p.65-71.

77. Huang QA, Zhang YM, He Y, Lu J, Lin RC. Studies on hydrolysis of aconitine//Zhongguo Zhong Yao Za Zhi. 2007 0ct;32(20):2143-5.1981. -т. 1-ый -616c., т. 2-ой 524c.

78. Huang Y, Hou S, Xie R, Zhuang Z, Wang F, Zhong N. Extraction, purification and ascertainment of anti-hepatoma active principles for targeted preparation of radix Aconiti Kusnezoffii.// Zhongguo Zhong Yao Za Zhi.- 1997.-№22(11).- p.667-671, 703.

79. Kasahara Y, Itou T. Simultaneous determination of aconitine analogues in Aconitum plants and foods that caused food poisoning by liquid chromatography with tandem mass spectrometry//Shokuhin Eiseigaku Zasshi.- 2008.-№49(2).- p.76-81.

80. Kimura I, Takada M, Nojima H, Kimura M. Aconitine, a main component of aconite, increases spontaneous acetylcholine release from the frontal cerebral cortex of freely moving rats.//Biol Pharm Bull.-1996.- №19(11).-p.1440-1442.

81. Kolak U, Turkekul A, Ozgokce F, Ulubelen A. Two new diterpenoid alkaloids from Aconitum cochleare.// Pharmazie. 2005.-№60(12).-p.953-955.

82. Liu XP, Yang SY, Pan GM. Determination of aconitine in biological samples//Se Pu.- 2002.-№ 20(l).-p.81-83.

83. Luferov 119. A.N. A classification of the subfamily Aconitoideae (Ranunculaceae Juss.) // Komarovia, 2002. Vol. 2. P. 61-64.

84. Mariani C, Braca A, Vitalini S, De Tommasi N, Visioli F, Fico G. Flavonoid characterization and in vitro antioxidant activity of Aconitum anthora L. (Ranunculaceae).// Phytochemistry, 2008.-69(5).-p. 12.

85. Murayama M, Ito T, Konno C, Hikino H. Mechanism of analgesic action of mesaconitine. I. Relationship between analgesic effect and central monoamines or opiate receptors.// Eur J Pharmacol. -1984.-№ 18.-p.29-36.

86. Qin L, Peng X, Zhang SH, Wang L, Liu F. Influence of monkshood root-peony root combination on inflamation-induced agents and free radicals // Zhongguo Zhong Yao Za Zhi.- 2000.-№25(6).-p.370-373.

87. Solyanik G.I., A.G. Fedorchuk, O. N. Pyaskovskaya, О. I. Dasyukevitch, N. N. Khranovskaya, G. N. Aksenov, V. V. Sobetsky. Anticancer activity of aconitine-containing herbal extract BC1//EXP. 0ncology.-2004.- Vol. 26, No. 4.

88. Song MK, Liu H, Jiang HL, Yue JM, Hu GY, Chen HZ. Discovery of talatisamine as a novel specific blocker for the delayed rectifier K+ channels in rat hippocampal neurons.//Neuroscience.-2008.-№ 13.-p.469-475.

89. Svendsen A. B. , Verpoorte R. Chromatography of alkaloids.Pt. A. Thin-layer chromatography.-1988.-vol. 15.-534p.

90. Taki M, Niitu K, Omiya Y, Noguchi M, Fukuchi M, Aburada M, Okada M.8-0-cinnamoylneoline, a new alkaloid from the flower' buds of': Aconitum carmichaeli and its toxic and analgesic activities.//Planta Med.-2003.- №69(9).-p.800-803. (

91. Tu Y, Zhang GJ, Wang SM, Liu ZQ. Study on active components alignment of alkaloids in extractive of folium aconiti kusnezoffii by ESI-MS//Zhongguo Zhong Yao Za Zhi. -2008.-№33(7).-p.789-790.

92. Wang CF, Gerner P, Schmidt B, Xu ZZ, Nau C, Wang SY, Ji RR, Wang GK./ Use of bulleyaconitine A as an adjuvant for prolonged cutaneous analgesia in the rat.// Anesth Analg. -2008.-№107(4).-p.l397-1405.

93. Wright S.N. Comparison of aconitine-modified human heart (hHl) and rat skeletal (ц1) muscle Na+ channels: an important role for external Na+ ions.// Journal of Physiology.- 2002.- №538.- p. 759-771.

94. Yamanaka H, Doi A, Ishibashi H, Akaike N. Aconitine facilitates spontaneous transmitter release at rat ventromedial hypothalamic neurons.// Br J Pharmacol.- 2002.-№ 135(3).-p.816-822.

95. Zhao C, Li M, Luo Y, Wu W. Isolation and structural characterization of an immunostimulating polysaccharide from fuzi, Aconitum carmichaeli.// Carbohydr Res.- 2006.-№341 (4).-p.485-491.

96. Zheng P, Yang YR, Zhang WP, Wang HC, Lao AN. Analgesic effect and toxicity of 3,15-diacetylbenzoylaconine and comparison with its analogues.//Zhongguo Yao Li Xue Bao. -1994.-№15(3).-p.239-243.

97. Zhu WH, Leng XS, Zhu JY. Effect of Shenfu injection on ischemia-reperfusion injury of rat liver graft.//Hepatobiliary Pancreat Dis Int.- 2006.-№5(2).-p.205-209.