Взаимодействие поликислот с модельными липидными мембранами тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.06, кандидат химических наук Беркович, Анна Константиновна

• Беркович, Анна Константиновна
• кандидат химических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат химических наук Беркович, Анна Константиновна

1. Введение.5.

2. Обзор литературы.

2.1. Структура и свойства биологических мембран.'.

2.1.1. Развитие представлений и современные взгляды на структуру и функции биологических мембран.

2.1.2. Свойства липидного бислоя и составляющих его липидов.1.

2.1.3. Модельные системы для изучения свойств мембран.

2.1.4. Барьерные свойства мембран.

2.1.5. Электрические потенциалы липидного бислоя.

2.2 Влияние полимеров на структуру и проницаемость мембран.

2.2.1. Неионогенные амфифильные полимеры.1.

2.2.2. Поликатионы.

2.3. Полианионы.I1.'.'.'.'

3. Постановка задачи.'.:.'.J.

4. Экспериментальная часть.

4.1. Материалы.

4.2. Методы.1.

4.2.1. Формирование малых липосом.1.

4.2.2. Изучение связывания полианионов с липосомами.Л.ill.

4.2.3. Изучение агрегации липосом под действием полианионов.

4.2.4. Изучение заряда частиц.L.i.

4.2.5. Изучение влияния полианионов на проницаемость мембраны липосом для низкомолекулярных соединений.

4.2.6. Оценка изменения дипольного потенциала мембран.;.

4.2.7. Монослои.'.

5. Результаты и обсуждение.

5.1. Связывание поликислот с модельными липидными мембранами из фосфатидилхолина в слабокислой среде.

5.2. Влияние полианионов на проницаемость липидных мембран.

5.2.1. Взаимодействие поликислот с липосомами, заполненными флуоресцентным красителем пиранином.

5.2.2. Взаимодействие полиакриловой кислоты с липосомами, заполненными трипсином.

5.3. Дипольный потенциал мембраны как движущая сила заглубления поликислот в гидрофобную область липидного бислоя в слабокислой среде.

5.3.1. Влияние соединений, меняющих дипольный потенциал лйпидного бислоя.

5.3.2. Влияние ПАК на флуоресцентные свойства потенциалчувствительного зонда RH-421.

5.3.3. Влияние полиакриловой кислоты на свойства липидных монослоев.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Взаимодействие поликислот с модельными липидными мембранами»

Синтетические полимеры представляют значительный интерес для современной фармакологии и биотехнологии. Их используют при создании лекарственных форм направленного и пролонгированного действия, для повышения терапевтической активности и снижения побочных эффектов. Однако применение полимеров невозможно без информации об их взаимодействии с биологическими системами и их отдельными компонентами.

Липидный бислой является структурной основой любой клеточной мембраны и состоит из сотен различных липидов. Большинство из них, в том числе фосфатидилхолин, являются цвиттер-ионными. Однако часть липидов и гликолипидов, например фосфадитилсерин и протеогликаны, несут отрицательный заряд [1]. Благодаря их присутствию, биологические мембраны заряжены отрицательно, что обусловливает возможность их взаимодействия с положительно заряженными полимерами. Механизм взаимодействия с модельными и биологическими мембранами поликатионов подробно^ изучен. I

Известно, что адсорбция поликатионов на противоположно заряженных мембранах приводит к образованию кластеров анионных компонентов t в мембране [2; 3]. причем в такие кластеры вовлекаются не только липидные, но и белковые и протеогликановые компоненты [4, 5]. Показано, что некоторые поликатионы при этом могут образовывать в мембране поры, проницаемые для крупных молекул [5].

Взаимодействие поликислот с липидными мембранами исследовано в меньшей степени. В тоже время известно, что некоторые природные белки, например вирусные гемагглютинины, способные дестабилизировать мембрану I эндосом и обеспечивать транспорт вируса в клетку, содержат кислые аминокислотные остатки глутаминовой кислоты [6]. Известно, ,что( наличие именно этих остатков придает вирусным белкам способность образовывать поры в биологической мембране в слабокислой среде [7]. Это означает, что в природе существует механизм взаимодействия поликислот с липидными мембранами в слабокислой среде. Однако физико-химические предпосылки влияния кислотных групп на проницаемость липидных мембран неизвестны. В ряде работ было показано, что некоторые синтетические поликислоты, такие как поли-(2-этйлактиловая) и поли-(2-пропилакриловая) кислоты вызывают растворение липидных мембран в слабокислой среде с образованием смешанных' липидно-полимерных ассоциатов [8]. Предполагается, что ключевую роль в этом процессе играют гидрофобные взаимодействия. Проявление гидрофобных свойств алкилакриловыми кислотами в слабокислой среде обусловлено протонированйем ' j ■. ■' i кислотных групп в результате чего растворимость полимера в воде уменьшается, и происходит его погружение в мембрану. Этому способствует также высокое значение рКа указанных поликислот (около 5.5). [8] , ; :

Для пептидных последовательностей такой механизм мало вероятен, т.к. рКа глутаминовой кислоты, входящей в состав природных пептидов, составляет 2.4 и ее протонирование при попадании в клеточные эндосомы (рН~5); мало вероятно. Это указывает на то, что, помимо гидрофобных взаимодействий, должен существовать другой сильный фактор, способствующий взаимодействию поликислот с липидным бислоем. ,.УН- м.М;£,

Целью настоящей работы явилось изучение взаимодействия ■ поликислот различной химической природы с модельными липидными мембранами, исследование связи между строением поликислот и характером этого взаимодействия, а также природы сил, способствующих заглублению,поликислот в липидный бислой.

2. Обзор литературы

Заключение диссертации по теме «Высокомолекулярные соединения», Беркович, Анна Константиновна

7. Выводы

1. Впервые обнаружено, что поликислоты различной природы эффективно взаимодействуют с фосфатидилхолиновыми мембранами в слабокислой среде. Связывание поликислот с липидными мембранами происходит за счет комплекса электростатических, гидрофобных и ван-дер-ваальсовых взаимодействий, а также водородных связей, вклад которых определяется природой полимера.

2. Впервые показано, что заглубляться в бислой способны не только гидрофобные поликислоты, но и гидрофильные полимеры, склонные к образованию многоточечных водородных связей и ван-дер-ваальсовых взаимодействий. При этом в липидных мембранах формируются гидрофильные поры, проницаемые для заряженных низкомолекулярных соединений.

3. Установлено, что движущей силой заглубления поликислот в липидный бислой являются диполь-дипольные взаимодействия между протонированными звеньями адсорбированного полимера и липидной мембраной.

6. Заключение

Таким образом, в данной работе мы показали, что различные поликислоты способны взаимодействовать с липидными мембранами из цвиттер-ионного липида фосфатидилхолина в слабокислой среде. Адсорбция поликислот на липидных мембранах происходит как за счет электростатических, так и за счет водородных и вандерваальсовых сил. Адсорбция поликислот в слабокислой среде происходит количественно вплоть до заполнения всей поверхности липосом. При этом все поликислоты вызывают образование агрегатов липидных везикул, размер которых проходит чрез максимум при повышении содержания в растворе поликислоты. Концентрация, соответствующая максимальной агрегации везикул зависит от степени ионизации поликислоты, ее способности к образованию водородных связей и гидрофобности. При этом поликислоты, способные образовывать с мембраной не только электростатические, но также водородные и Ван-дер-ваальсовые связи, вызывают образование в мембране пор, проницаемых для малых молекул. На примере полиакриловой кислоты было показано, что движущей силой этого заглубления является дипольный потенциал липидной мембраны.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Беркович, Анна Константиновна, 2009 год

1. Геннис Р. Биомембраны. Молекулярная структура и функции. М.:1997. 627с

2. Macdonald P.M., Crowell K.J., Franzin C.M., Mitrakos P., Semchyschyn D.J./ Polyelectrolyte-induced domains in lipid bilayer membranes: the deuterium NMR perspective.ll Biochem. Cell Biol. 1998. V. 76. P. 452-464.

3. Bernard E., Faucon J. F., Dufourcq J., Duchesneau L., Pezolet M./ Interaction of Basic Proteins with Charged Phospholipids Followed by Fluorescence, DSC, and Raman Spectroscopy JI Biophys J. 1982. V. 37. № 1. P. 61-62.

4. Kozlova N.O., Bruskovskaya I.B., Okuneva I.B., Melik-Nubarov N.S., Yaroslavov A.A., Kabanov V.A., Menger F.M./ Interaction of a cationic polymer with negatively chargedproteoliposomes.il Biochim Biophys Acta. 2001. V. 1514. № 1. P. 139-51.

5. Kopatz I., Remy J.-S., Behr J.-P./ A model for non-viral gene delivery: through syndecan adhesion molecules and powered by actin.ll J. Gene Med. 2004. V.6. P. 769— 776.

6. Korte Т., Epand R.F., Epand R.M., Blumenthal R./ Role of the Glu residues of the influenza hemagglutinin fusion peptide in the pH dependence of fusion activity.// Virology. 2001. V. 289. № 2. P. 353-361.

7. Thomas J.L., Barton S.W., Tirrell D.A./ Membrane Solubilization by a Hydrophobic Poly electrolyte: Surface Activity and Membrane Binding.// Biophys. J. 1994. V. 67. P. 1101-1106.

8. Gobley M./ Recherches chimiques sur le cerveau// J. Pharm. Chim. 1874. Vol.20, p. 161-164.

9. Osterhout W.J.V./ Some Fundamental Properties of Cellular Physiology.// 1927. Yale University Press. New Haven

10. Overton E./ Ueber die allgemeinen osmotischen Eigenschaften der Zelle, ihre vermutlichen Ursachen und ihre Bedeutung fur die Physiologie.ll 1899. Vjschr. Naturforsch. Ges. Zurich. 44:88.

11. Langmuir I./ The constitution and fundamental properties of solids and liquids. II. Liquids.ll 1917. J. Am. Chem. Soc. Vol. 39. P. 1848-1906.

12. Gorter E.; Grendel FJ On Biomolecular Layers of Lipid on the Chromacytes of the Blood.// J. Exp. Med. 1925. Vol. 41. P. 439.

13. Danielli J. F., Davson H./ A contribution to the theory ofpermeability of thin films.// J. Cell Сотр. Physiol. 1935. vol. 5. p. 495-508.

14. Singer S.J., Nicholson G.L./ The fluid mosaic model of cell membranes.// Science. 1972. Vol. 175. P. 720-731.

15. Spector A.A., Yorek М.А./ Membrane lipid composition and cellular function.// J. Lipid Res. 1985. Vol. 26. P. 1015-1035.

16. Subczynski W.K., Wisniewska A./ Physical properties of lipid bilayer membranes: relevance to membrane biological functions// Acta Biochim. Pol. 2000. Vol. 47, P.613-625

17. Galla H.J., Hartman W., Theilen U., Sackmann EJ On two-dimensional passive random walk in lipid bilayers and fluid pathways in Biomembranes/7 J. Membrane Biol. 1979. Vol. 48. P. 215-236.

18. Tocanne J.-F., Teissie J./ Ionization of phospholipids and phospholipids-supported interfacial lateral diffusion of protons in membrane model systems./ Biochim. Biophys. Acta. 1990. Vol. 1031, P.l 11-142.

19. Brockman HJ Dipole potential of lipid membranes./7 Chem. Phys. Lipids. 1994. Vol. 73. P.57-79.

20. Рубин А.Б. Биофизика. Книга вторая. 1987. М.: Высшая Школа, 303с.

21. Oradd G., Lindblom GJ Lateral diffusion studied by pulsed field gradient NMR on oriented lipid membranes./7 Magn. Reson. Chem. 2004. V. 42, № 2. P. 123-131.

22. Lindblom G./ In Advances in Lipid Methodology.// The Oily Press: Dundee. 1996. P. 133.

23. Mueller P., Rudin D.O., Ti Tien H., Wescott W. C.I Reconstitution of Cell Membrane Structure in vitro and its Transformation into an Excitable System.// Nature 1962. Vol. 194, P. 979-980.

24. Котык А., Яначек К. Мембранный транспорт. М.:Мир. 1980. с.188-197

25. Walter A., Gutknecht J. / Permeability of small nonelectrolytes through lipid bilayer membranes. // J. Membr. Biol. 1986. V.90. P. 207-217.

26. MacDonald R.C./ Effects of unstirred layers or transport number discontinuities on the transient and steady-state current-voltage relationships of membranes.// Biochim. Biophys. Acta. 1976. Vol. 448. P.193-198.

27. Wilson M.A., Pohorille A./ Mechanism of unassisted ion transport across membrane bilayers.H J. Am. Chem. Soc. 1996. V.118. P. 6580-6587.

28. Hauser H., Oldany D., Phillips М.С./ Mechanism of ion escape from phosphatidylcholine and phosphatidylserine single bilayer vesicles.// Biochemistry. 1973. V. 12. P. 4507-4517.

29. Gutknecht J./ Proton/hydroxide conductance through lipid bilayer membranes.// J. Membrane Biol., 1984. V. 82, P.105-112.

30. Evtodienko V.Y., Kovbasnjuk O.N., Antonenko Y.N., Yaguzhinsky L.S./ Effect of the alkyl chain length of monocarboxylie acid on the permeation through bilayer lipid membranes.// Biochim. Biophys. Acta. 1996. Vol. 1281. P. 245-251.

31. Jackson M.J. Weak electrolyte transport across biological membranes. General principles in membrane physiology. Ed. by Thomas Andreoli. New York and London: Plenum Medical Book, 1987, P. 235-236.

32. Sackmann E./Biological Membranes Architecture and Function. // Handbook of Biological Physics, Ed. by R. Lipowsky and E. Sackmann, V. 1, Elsevier Science, 1995. P. 1-64.

33. Paula S, Volkov A.G., Van Hoek A.N., Haines Т.Н., Deamer D.W./ Permeation of protons, potassium ions, and small polar molecules through phospholipid bilayers as a function of membrane thickness. // Biophys. J. 1996. V. 70. P. 339-348.

34. Bordi F., Cametti C., Motta A. / Ion Permeation Across Model Lipid Membranes: A Kinetic Approach, //J. Phys. Chem. B. 2000. V. 104. P. 5318-5323.

35. Paula S., Volkov A.G., Deamer D.W. / Permeation of halide anions through phospholipid bilayers occurs by the solubility-diffusion mechanism.llBiophys. J. 1998. V. 74. P. 319-327.

36. Sandre O., Moreaux L., Brochard-Wyart F. / Dynamics of transient pores in stretched vesicles II Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1999. V. 96. P. 10591-10596.

37. Wilson M.A., Pohorille A. I Mechanism of unassisted ion transport across membrane bilayers II J. Am. Chem. Soc. 1996. V. 118. P. 6580-6587.

38. Syganov, A., von Kitzing, E. / (Invalidity of the Constant Field and Constant Currents Assumptions in Theories of Ion Transport II Biophys. J. 1999. V. 76. P. 768— 781.

39. Чизмаджев Ю.А./ Как сливаются биологические мембраны //Сор. Образов. Ж. 2001. Т. 7. С. 4-9.

40. Chernomordik L.V., Melikyan G.B., Chizmadzhev Y.A. / Biomembrane fusion: a new concept derived from model studies using two interacting planar lipid bilayers. II Biochim. Biophys. Acta. 1987. V. 906. P. 309-352.

41. Melikov K.C., Frolov V.A., Shcherbakov A., Samsonov A.V., Chizmadzhev Y.A., Chernomordik L.V. / Voltage-induced nonconductive pre-pores and metastable single pores in unmodified planar lipid bilayer. II Biophys. J. 2001. V. 80. P. 1829-1836.

42. Marrink S J., Jahnig F., Berendsen HJ. / Proton transport across transient single-file water pores in a lipid membrane studied by molecular dynamics simulations. II Biophys. J. 1996. V.71.P. 632-647.

43. Jansen M., Blume A. I A comparative study of diffusive and osmotic water permeation across bilayers composed of phospholipids with different head groups and fatty acyl chains.//Biophys. J. 1995. V. 68. P. 997-1008.

44. Yaroslavov A.A., Efimova A.A., Lobyshev V.I., Ermakov Y.A., Kabanov V.A./ Reversibility of structural rearrangements in lipid membranes induced by adsorption-desorption of a polycation. //Membr. Cell Biol. 1997. V. 10. 683-688.

45. Perkins W.R., Cafiso D.S./ Characterization of H+/OH- currents in phospholipid vesicles.il J. Bioenerg. Biomembr. 1987. V. 19, P.443-455.

46. Nagle J.F./ Theory of passive proton conductance in lipid bilayers.ll J. Bioenerg. Biomembr. 1987. V. 19. P. 413-426.

47. Deamer D.W./ Proton permeation of lipid bilayers.ll J. Bioenerg. Biomembr., 1987. V. 19. P. 457-479.

48. Andelman D. Electrostatic Properties of membranes: the Poisson-Boltzmann theory. V. 1. Chapter 12 in Handbook of Biological Physics. Ed. by R. Lipowsky and E. Sackmann. Amsterdam: Elsevier. 1995. P. 603-641.

49. McLaughlin SJ Experimental tests of the assumptions inherent in Gouy-Chapmen theory of the aqueous diffuse double layer!I In: Physical Chemistry of transmembrane ion motions. Ed. by G. Spach. Amsterdam. Elsevier. 1983. P. 69-76.

50. Winiski A.P., McLaughlin A.C., McDaniel R.V., Eisenberg M., McLaughlin SJ An experimental test of the discreteness-of charge effect in positive and negative lipid bilayers.ll Biochemistry. 1986. V. 25. P. 8206-8214.

51. Hartsel S.C., Cafiso, D.S./ A test of discreteness-of charge effects in phospholipids vesicles: measurements using paramagnetic amphiphiles.l7 Biochemistry. 1986. V. 25. P. 8214-8219.

52. McLaughlin SJ Electrostatic potentials at membrane-solution interfaces.il Current Topics in Membrane Transport. 1977. V. 9. P. 71-144.

53. Clarke R. J./ The dipole potential of phospholipids membranes and methods for its detection.ll Adv. Colloid Int.Sci. 2001. V. 89-90. P. 263-281.

54. Y.A. Liberman, V.P. Topaly./ Permeability of biomolecularphospholipid membranes for fat-soluble ions.ll Biofizika. 1969. V. 14. P. 452.

55. D.A. Hay don, V.B. Myers/ Surface charge, surface dipoles and membrane conductance.!I Biochim. Biophys. Acta. 1973. V. 307. P. 429-443.

56. Muderhwa J.M., Brockman H.L./ Lateral lipid distribution is a major regulator of lipase activity. Implication for lipid-mediated signal transduction JI J. Biol, Chem. 1992. V. 267. P. 24184-24192.

57. Smaby J.M., Brockman H.L./ Surface dipole moments of lipids at the argon-water interface. Similarities among glycerol-ester-based lipids.II Biophys. J. 1990. V. 58, P. 195-204.

58. Lamarche F., Techy F., Aghion J., Leblank R.M./ Surface pressure, surface potential and ellipsometric study of Cytochrome с binding to dioleoylphosphatidylcholine monolayer at the air-water interface.// Colloids Surf. 1988. V. 30. P. 209-222.

59. Henckl W.M., Thompson M., Mohwald H./ Fluorescence and electron microscopic study lectinpolysaccharide and immunochemical aggregation at phospholipids Langmuir-Blodgett monolayers.1'/ Langmuir. 1989. V. 5. P. 390-394.

60. Трубецкая M.B., Антоненко Ю.Н., Тропша A.E., Ягужинский Л.С./ Иод-содержащие гормоны как дипольные модификаторы липидных мембран.!! Биофизика. 1984. Т. 29. С. 801-805.

61. Antonenko Y.N., Rokitskaya T.I., Kotova Е.А./ Effect of dipole modifiers on the kinetics of sensitized photoinactivation of gramicidin channels in bilayer lipid membranes./! Membr. Cell Biol. 1999.V. 13. № 1. P. 111-120.

62. Peterson U., Mannock D.A., Lewis R.N., Pohl P., McElhaney R.N., Pohl Е.Е./ Origin of membrane dipole potential: contribution of the phospholipid fatty acid chains.ll Chem Phys Lipids. 2002. V. 17. P. 19-27.

63. Pohl EE, Peterson U, Sun J, Pohl P./ Changes of intrinsic membrane potentials induced by flip-flop of long-chain fatty acids.H Biochemistry. 2000. V. 39. №7. P. 18341839.

64. Krylova O.O., Melik-Nubarov N. S., Badun G.A., Ksenofontov A.L., Menger F. M., Yaroslavov А.А./ Pluronic L61 accelerates flip-flop and transbilayer doxorubicin permeation.!! A European Chemistry Journal. 2003. V. 9. №16. P. 3930-3936.

65. Крылова О. О., Дёмина Т.В., Мелик-Нубаров Н.С./ Влияние блок-сополимеров алкшеноксидов на проницаемость липидных мембран: возможные причиныбиологической активности.// Доклады Академии Наук. Химия. 2001. Т. 380. С. 267-271.

66. Kiylova О. O.; Pohl P./ Ionophoric Activity of Pluronic Block Copolymers.// Biochemistry. 2004. V. 43. № 12. P. 3696-3703.

67. Hinderberger D., Spiess H.W., Jeschke G./ Dynamics, site binding, and distribution of counterions in polyelectrolyte solutions studied by electron paramagnetic resonance spectroscopy Л J. Phys. Chem. B. 2004. V. 108. № 12. P. 3698-3704.

68. Manning G.S., Ray J./ Counterion condensation revisited.// J. Biomol. Struct. Dyn. 1998. V. 16. P. 461-476.

69. Laroche G., Dufourc E.J., Pezolet M., Dufourcq J./ Coupled changes between lipid order and polypeptide conformation at the membrane surface. A 2H-NMR and Raman study of polylysine-phosphatidic acid systems.// Biochemistry. 1990. V. 29. P. 64606465.

70. Laroche G., Carrier D., Pezolet M./ Study of the effect of poly(L-lysine) on phosphatidic acid and phosphatidylcholine/phosphatidic acid bilayers by Raman spectroscopy J/ Biochemistry. 1988. V. 27. P. 6220-6228.

71. Carrier D., Pezolet M./ Investigation of polylysine-dipalmitoylphosphatidylglycerol interactions in model membranes.// Biochemistry. 1986. V. 25. P. 4167-4174.

72. Hammes G.G., Schullery S.E./ Structure of macromolecular aggregates. II. Construction of model membranes from phospholipids and polypeptides.// Biochemistry 1970. V. 9. P. 2555-2563.

73. Ikeda Т., Yamaguchi H., Tazuke S./ Phase separation in phospholipid bilayers induced by biologically active polycations.il Biochim. Biophys. Acta. 1990. V. 1026. P. 105-112.

74. Yaroslavov A.A., Efimova A.A., Lobyshev V.I., Kabanov V.A./ Reversibility of structural rearrangements in the negative vesicular membrane upon electrostatic adsorption/desorption of the polycation.il Biochim. Biophys. Acta. 2002. V. 1560. P. 1424.

75. Barenholz Y., Hirsch-Lerner D./ Probing DNA-cationic lipid interactions with the fluorophore trimethylammonium diphenyl-hexatriene TMADPH.II Biochim. Biophys. Acta. 1998. V. 1370. P. 17-30.

76. Franzin C.M., Macdonald P.M./ Polylysine-induced 2H NMR-observable domains in phosphatidylserine/phosphatidylcholine lipid bilayers.ll Biophys. J. 2001. V. 81. P.3346-3362.

77. Mitrakos P., Macdonald P.M./ Polyelectrolyte molecular meight and electrostatically-induced domains in lipid bilayer membranes.ll Biomacromolecules 2000. V. 1. P. 365-376.

78. Mitrakos P., Macdonald P.M./ DNA-induced lateral segregation of cationic amphiphiles in lipid bilayer membranes as detected via 2H NMR.II Biochemistry. 1996. V.35.P. 16714-16722.

79. Mitrakos P., Macdonald P.M./ Nucleotide chain length and the morphology of complexes with cationic amphiphiles: 31P-NMR observations Л Biochim. Biophys. Acta 2000. V. 1463. P. 355-373.

80. Macdonald P.M., Crowell K.J., Franzin C.M., Mitrakos P., Semchyschyn D.J./ Poly electrolyte-induced domains in lipid bilayer membranes: the deuterium NMR perspective.!I Biochem. Cell Biol. 1998. V. 76. P. 452-464.

81. Glaser M./ Characterization and formation of lipid domains in vesicles and erythrocyte membranes.il Comments Mol. Cell. Biophys. 1992. V. 8. P. 37-51.

82. Wada A./ The a-helix as an electric macro-dipole.H Adv. Biophys. 1976. V. 9. P. 163.

83. Novellani M., Santini R., Tadrist LJ Experimental study of the porosity of loose stacks of stiff cylindrical fibres: influence of the aspect ratio offibres Л Eur. Phys. J. B. 2000. V. 13. P. 571-578.

84. Yaroslavov A.A., Kul'kov V.E., Polinsky A.S., Baibakov B.A., Kabanov V.A./ Polycation causes migration of negatively charged phospholipids from the inner to outer leaflet of the liposomal membrane.!7 FEBS Lett. 1994. V. 340. P. 121-123.

85. Yaroslavov A.A., Efimova A.A., Lobyshev V.I., Ermakov Y.A., Kabanov V.A./ Reversibility of structural rearrangements in lipid membranes induced by adsorption-desorption of a polycation.!! Membr. Cell Biol. 1997. V. 10. P. 683-688.

86. Kozlova N.O., Bruskovskaya I.B., Melik-Nubarov N.S., Yaroslavov A.A., Kabanov V.A./ Catalytic properties and conformation of hydrophobized. alpha-chymotrypsin incorporated into a bilayer lipid membrane.// FEBS Lett. 1999. V. 461. P. 141-144.

87. White J, Kielian M, Helenius A./ Membrane fusion proteins of enveloped animal viruses.// Q. Rev. Biophys. 1983. V. 16. P. 151-195.

88. Parente RA, Nir S, Szoka Jr. F.C./pH-dependent fusion of phosphatidylcholine small vesicles. Induction by a synthetic amphipathicpeptide.// J. Biol. Chem. 1988. V. 263. P. 4724-4730.

89. Subbarao NK, Parente RA, Szoka FC, Nadasdi L, Pongracz КJ pH-Dependent Bilayer Destabilization by an Amphipathic Peptide.// Biochemistry 1987. V. 26. P.2964-2972.

90. Seki K., Tirrell D.A. /pH-Dependent Complexation of Pоly(aerylie acid) Derivatives with Phospholipid Vesicle Membranes.// Macromolecules 1984. V. 17. P. 1692-1698.

91. Thomas J., Devlin B.P., Tirrell D.A./ Kinetics of membrane micellization by the hydrophobic polyelectrolyte poly-(2-ethylacrylic acid).I I Biochim. Biophys. Acta 1996. V. 1278 P. 73-78.

92. Thomas J.L., Tirrell D.A./ Polymer-induced leakage of cations from dioleoylphosphatidylcholine and phosphatidylglycerol liposome.ll J. Control. Release 2000. V. 67. P. 203-209.

93. Chung, J. C.; Gross, D. J.; Thomas, J. L.; Tirrell, D. A.; Opsahl-Ong, L. R./ pH-Sensitive, Cation-Selective Channels Formed by a Simple Synthetic Polyelectrolyte in ArtificialBilayer Membranes.il Macromolecules 1996. V. 29. № 13. P. 4636-4641.

94. Meyer O., Papahadjopoulos D., Leroux J.C. / Copolymers ofN-isopropylacrylamide can triggerpHsensitivity to stable liposomes.// FEBS Lett. 1998. V. 421P. 61- 64.

95. Kono K., Zenitani K., Takagishi Т./ Novel pH-sensitive liposomes: liposomes bearing a poly(ethylene glycol) derivative with carboxyl groups.// Biochim. Biophys. Acta 1994. V. 1193. P. 1-9.

96. Мальцева E.A., Антоненко Ю.Н., Мелик-Нубаров Н.С., Ягужинский JI.C./ Влияние синтетических амфифилъных полианионов на транспорт ионов через плоскую бислойную липидную мембрану.// Биол. мембраны. 2002, Т. 19. С. 347-350.

97. Yessine М.А., Leroux J.C. / Membrane-destabilizing polyanions: interaction with lipid bilayers and endosomal escape of biomacromolecules.il Advanced Drug Delivery Rev. 2004. V. 56. P. 999- 1021.

98. Hoffman A.S., Stayton P.S., Bulmus V., Chen G., Chen J., Cheung C., Chilkoti A., Ding Z., Dong L., Fong R., Lackey C.A., Long C.J., Miura M., Morris J.E., Murthy N., Nabeshima Y., Park T.G.,. Press O.W, Shimoboji Т., Shoemaker S., Yang H.J., Monji N.,

99. Nowinski R.C., Cole C.A., Priest J.H., Harris J.M., Nakamae K., Nishino Т., Miyata Т./ Really smart bioconjugates of smart polymers and receptor proteins./ J. Biomed. Mater. Res. 2000. V. 52. P. 577- 586.

100. Drummond D.C., Zignani M., Leroux J.C./ Current status of pH-sensitive liposomes in drug delivery Л Prog. Lipid Res. 2000. V. 39 P. 409- 460.

101. Konig T, Kocsis B, Meszaros L, Nahm K, Zoltan S, Horvath I./ Interaction of a synthetic polyanion with rat liver mitochondria.// Biochim Biophys Acta. 1977. V. 462. №2. P.380-389.

102. New R.R.C. Liposomes: a practical approach. New York. 1990.

103. Kamp F., Hamilton J. A J pH gradients across phospholipid membranes caused by fast flip-flop of un-ionized fatty acids Л Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1992. V. 89. №23. P. 11367-11370.

104. Clarke R.J., Kane D.J./ Optical detection of membrane dipole potential: avoidance of fluidity and dye-induced effects.// Biochim. Biophys. Acta. 1997. V. 1323. №2. P. 22339.

105. Gregor H.P., Luttinger L.B., Loebl Е.М./ Titration of Polyacrylic Acid with Quaternary Ammonium Bases.// J. Am. Chem. Soc. 1954. V. 76. № 22. P. 5879-5880.

106. Mandel M., Leyte J., Stadhouder M./ The Conformational Transition of Poly(methacrylic acid) in Solution.// J. Phys. Chem. 1967. V. 71. № 3. P. 603-612.

107. Энциклопедия полимеров. M.: Советская энциклопедия. 1977. Т.З С. 41.

108. Printz М.Р., von Hippel Р.Н./ On the Kinetics of Hydrogen Exchange in Deoxyribonucleic Acid. pH and Salt Effects.// Biochemistry. 1968. V. 7. P. 3194-3206.

109. Garrett E.R., Guile R.L./ Potentiometric Titrations of a Polydicarboxylic Acid: MaleicAcid-Styrene Copolymer.HI. Am. Chem. Soc. 1951. V. 73. P. 4533-4535.

110. Зезин А.Б., Кабанов В.А./ Новый класс комплексных водорастворимых полиэлектролитов Л Успехи химии. 1982. № 51, С. 1447-1483.

111. Goldstein L., Levin Y., Kachalski E./ A Water-insoluble Polyanionic Derivative of Trypsin. Kinetic Behavior of the Bound Trypsin. // Biochemistry. 1964. V. 3. P. 19131919.

112. Rice S.A., Nagasawa M. Polyelectrolyte solutions, a theoretical introduction. London-New York: Academic Press. 1961. 568 p.

113. Leo A., Hansch С./ Linear free energy relations between partitioning solvent systems.ll J. Org. Chem. 1971. V. 36. P. 1539-1544.

114. Kah M., Brown C.D./ LogD: lipophilicity for ionisable compounds.il .Chemosphere. 2008. V. 72. № 10. P. 1401-1408.

115. Abraham M.H., Whiting G.S., Doherty R.M., Shuely W.J./ Hydrogen bonding. Part 13. A new method for the characterisation of GLC stationary phases—the laffort data set JI J. Chem. Soc., Perkin Trans. 2. 1990. V. 8. P. 1451-1460.

116. Kamlet M.J., Abboud J.L., Taft R.W./ The Solvatochromic Comparison Method. 6. The ж* Scale of Solvent Polarities./П. Am. Chem. Soc. 1977. V. 99. P. 6027-6038.

117. H. You, D.A. Tirrell/ Photoinduced, Poly electrolyte-Driven Release of Contents of Phosphatidylcholine Bilayer Vesicles Л h Am. Chem. Soc. 1991. V. 113. P. 4022-4023.

118. Dtizgttnes N., Wilschut J./ Fusion assays monitoring intermixing of aqueous contents. //Methods. Enzymol. 1993. P. 3-14.

119. Clarke R.J., Schrimpf P., Schoneich M./ Spectroscopic investigations of the potential-sensitive membrane probe RH421.II Biochim. Biophys. Acta. 1992. V. 1112. P.142-152.

120. Clarke R.J./ Effect of lipid structure on the dipole potential ofphosphatidylcholine bilayers.ll Biochim. Biophys. Acta. 1997. V. 1327. P. 269-278.

121. Gawrisch К., Ruston D., Zimmerberg J., Parsegian A., Rand R.P., Fuller N./ Membrane dipole potentials, hydration forces, and the ordering of water at membrane surfaces.!I Biophys. J. 1992. V. 61. P. 1213-1223.

122. Krylov A.V., Rokitskaya T.I., Kotova E.A., Yaroslavov A.A., Antonenko Y.N./ Kinetically different populations of O-pyromellityl-gramicidin channels induced by poly-L-lysines in lipid bilayers.H J.Membr.Biol. 2002. V. 189. P. 119-130.

123. Chang L.-C., Lin C.-Y., Kuo M.-W., Gau C.-S./ Interactions of Pluronics with phospholipid monolayers at the air-water interface.!У J. Colloid Interface Sci. 2005. V. 285. P. 640-652.

124. Cho Y. W., Kim J.-D., Park К./ Polycation gene delivery systems: escape from endosomes to cytosol.il J. Pharm. Pharmacol. 2003. V. 55. P. 721-734.