Комплексы полиамфолитов с липидными мембранами: формирование, строение и свойства тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.06, кандидат химических наук Ситникова, Татьяна Александровна

• Ситникова, Татьяна Александровна
• кандидат химических наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат химических наук Ситникова, Татьяна Александровна

Введение.

2. Литературный обзор.

2.1. Биомедицинское применение полиэлектролитов.

2.1.1. Полианионы.

2.1.2. Поликатионы.

2.1.3. Полиамфолиты.

2.2. Эволюция представления о структуре биологических мембран.

2.3. Системы, моделирующие биологические мембраны.

2.3.1. Липосомы.

2.3.1.1. Строение липосом и получение.

2.3.1.2. Структура и свойства липосомальной мембраны.

2.3.1.3. Фазовые переходы в мембране липосом.

2.3.1.4. Динамические процессы в липосомальной мембране.

2.3.1.5. Взаимодействие полиионов с липидными мембранами.

2.3.1.5.1. Взаимодействие полиэлектролитов с липидными везикулами.

2.3.1.5.2. Влияние конкурентных реакций и ионной силы раствора на стабильность комплексов полимер-липосома.

2.3.2. Ленгмюровские монослои.

2.3.2.1. Молекулярные слои Ленгмюра как модельные системы.

2.3.2.2. Использование атомно-силовой микроскопии для 49 исследования липидных монослоев.

2.3.3. Плоские бислойные мембраны.

3. Экспериментальная часть.

3.1. Материалы.

3.1.1. Фосфолипиды.

3.1.2. Липосомы.

3.1.3. Полиэлектролиты.

3.1.4. Низкомолекулярные вещества.

3.2. Методы исследования.

3.2.1. Динамическое светорассеяние.

3.2.2. Измерение эдектрофоретической подвижности 62 частиц.

3.2.3. Флуоресцентная спектроскопия.

3.2.4. УФ-спектроскопия.

3.2.5. Потенциометрия.

3.2.6. Препаративное центрифугирование.

3.2.7. Дифференциальная сканирующая микрокалориметрия (ДСК).

3.2.8. Монослойная техника.

3.2.9. Атомно-силовая микроскопия.

3.2.10. Определение цитотоксичности полиэлектролитов.

3.3. Описание эксперимента.

3.3.1. Взаимодействие отрицательно заряженных липосом с 66 полиамфолитами при рН=7 или 9.2.

3.3.2. Влияние ионной силы раствора и присутствия полианиона на 67 стабильность комплекса полимер-липосома.

3.3.3. Фазовые переходы в мембранах.

3.3.4. Целостность мембраны при взаимодействии с полиэлектролитами.

3.3.5. Образование монослоя Ленгмюра и взаимодействие полимеров с 68 монослоем.

3.3.6. Приготовление образцов для АСМ.

4. Обсуждение результатов.

4.1. Взаимодействие полибетаинов с длиной развязки п=1-5 метиленовых групп, с модельными мембранами.

4.1.1. Взаимодействие полибетаинов с отрицательно заряженными 70 липосомами.

4.1.2. Стабильность комплексов полибетаинов с липосомами.

4.1.3. Взаимодействие полибетаинов с липидными монослоями 85 Ленгмюра.

4.2. Взаимодействие сополимеров поливинилпиридина, алкилированных со

Br-пропионовой кислотой и этилбромидом, с отрицательно заряженными липосомами.

4.3. Взаимодействие сополимеров поливинилпиридина, алкилированных ю- 95 Вг-пропионовой кислотой и ю-Вг-кислотами с длинными развязками, с отрицательно заряженными липосомами.

4.4. Взаимодействие сополимеров поливинилпиридина, алкилированных ю- 104 Вг-пропионовой кислотой и цетилбромидом, с отрицательно заряженными липосомами.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Комплексы полиамфолитов с липидными мембранами: формирование, строение и свойства»

Полиэлектролитами (ПЭ) называют синтетические или природные полимерные вещества, способные к электролитической диссоциации при растворении или набухании в полярных растворителях. В зависимости от природы ионогенных групп ПЭ делятся на сильные и слабые полимерные кислоты и основания, а также соли. Существуют, кроме того, амфотерные полимерные электролиты (полиамфолиты), в цепях которых имеются как кислотные, так и основные группы. Полиэлектролиты своеобразно сочетают свойства неионогенных полимеров и низкомолекулярных электролитов. Вместе с тем ПЭ в растворах характеризуются особенностями, отличающими их от растворов незаряженных полимеров и низкомолекулярных электролитов. Все специфические свойства ПЭ проявляются только в условиях, в которых их макромолекулы приобретают локально нескомпенсированные заряды. И определяются эти свойства взаимодействием заряженных групп полиионов между собой и с окружающими их противоионами.

Вот уже более полувека ведутся работы по применению полиэлектролитов в медицине и биотехнологии. В последние два десятилетия эта область активно развивается и имеет хорошие перспективы. Спектр возможных применений чрезвычайно разнообразен. Одним из них является разработка искусственных вакцин [1], что возможно благодаря способности ряда полиэлектролитов увеличивать иммунный ответ. После того, как было обнаружено, что образование комплексов с поликатионами облегчает проникновение ДНК в клетку, это стало применяться для разработки препаратов для трансфекции [2, 3]. Анионные полимеры применяются в противоопухолевой терапии благодаря своей способности уменьшать токсичность лекарственного вещества и одновременно облегчать его проникновение в клетку [4].

Столь активное и постоянно расширяющееся биомедицинское применение ПЭ требует проведения исследований по изучению их поведения в биологическом окружении, т.е. по взаимодействию с клетками. Для этой цели могут быть использованы нативные клетки. Однако необходимо иметь в виду, что при интерпретации полученных результатов могут возникать трудности, связанные со сложностью организации клеточной мембраны. Кроме того, состав многокомпонентной клеточной мембраны неодинаков для различных типов клеток. Наконец, необходимо иметь в виду, что в ходе жизненного цикла клетки поверхностные свойства ее мембраны могут существенно изменяться. Т. о полученные результаты могут оказаться неуниверсальными. Для того чтобы полученные результаты можно было применять для описания поведения ПЭ в контакте с различными типами клеток, необходимо применять модельный подход. Известно, что основной частью биологических мембран является липидный бислой. Потому в качестве модельных объектов широко применяются липосомы -замкнутые сферические липидные бислои. Также распространено использование плоских липидных моно- и бислоев, нанесенных на подложку или образованных на поверхности водной фазы.

Что касается исследуемых полимерных объектов, их спектр чрезвычайно широк и включает в себя в основном различные вещества поликатионной и полианионной природы. Что же касается синтетических амфифильных веществ, то исследования их активности по отношению к клеткам весьма ограниченны. Тем не менее, поскольку известным недостатком катионных полимеров является их высокая цитотоксичность, а полианионов - низкая активность, полиамфолиты могли бы стать перспективным решением, в качестве «золотой середины».

Полимеры, которые предполагается использовать в биомедицинских целях, должны помимо активности по отношению к клеточной мембране, обладать умеренной токсичностью. Взаимодействие с мембраной не должно приводить к разрушению клетки. Недопустимым является и стимулирование необратимых изменений в мембране, в частности перемещение ее компонентов и изменение гибкости, приводящее к неспособности клетки нормально функционировать. В этой связи необходимо проводить исследование не только процесса образования комплекса полимера с нативной или модельной мембраной, но и изучать происходящие в результате этого эффекты, в частности динамические процессы, возникающие в мембране.

В настоящей работе на основе широко известного поликатиона поли-4-винилпиридина путем введения в молекулу карбоксильных групп был создан ряд б новых полимеров амфифильной природы. Возможно было ожидать, что полимеры такого типа не будут столь токсичны по отношению к клеткам, как их поликатионный предшественник. Однако по нашему предположению наличие катионных групп могло позволить сохранить активность полимера к мембране, близкую к хорошо известной активности поли-К-этил-4-винилпиридина.

Таким образом, в данной работе на модельных системах различных типов (липосомах и липидных монослоях) будет рассмотрена активность новой группы полимеров по отношению к анионным липидным мембранам, эффекты, вызываемые действием полимера на мембрану, а также цитотоксичность полимеров.

2. Литературный обзор

Заключение диссертации по теме «Высокомолекулярные соединения», Ситникова, Татьяна Александровна

выводы

1. Впервые путем модификации поли-4-винилпиридина со-бромкарбоновыми кислотами и бромистыми алкилами синтезированы три группы полиамфолитов: 1) с катионными и анионными группами в каждом звене (полибетаины, ПБ„), 2) с бетаиновыми и катионными группами и 3) с бетаиновыми группами и боковыми цетильиыми радикалами, и исследовано их комплексообразование с липосомами, сформированными из цвиттер-ионного (электронейтрального) фосфатидилхолина и анионного дифосфатидилглицерола (кардиолипина).

2. Установлено, что варьирование длины метиленовой развязки в бетаиновой группировке позволяет реализовать различные варианты поведения полибетаина в суспензии анионных липосом: от отсутствия взаимодействия до значительных структурных перестроек в липосомальной мембране (латеральной сегрегации и трансмембранной миграции липидов), вызванных адсорбцией полимера. Целостность липосом в комплексе с полиамфолитами сохраняется. Единственным исключением является ПБ3, полученный модификацией поли-4-винилпиридина со-бромбутановой кислотой, который при связывании с липосомами формирует дефекты в липидном бислое и повышает проницаемость липосомальной мембраны.

3. Показано, что стабильность комплексов полиамфолит-липосома в водно-солевых средах определяется строением полимерной молекулы. Комплексы, образованные ПБП и липосомами, полностью диссоциируют на составляющие компоненты в растворе с физиологической концентрацией соли; введение в молекулу полибетаина боковых цетильных радикалов стабилизирует его комплекс с липосомами в присутствии соли.

4. Цитотоксичность синтезированных полиамфолитов на 1-2 порядка ниже цитотоксичности катионного полимера, поли-1ч[-этил-4-винилпиридиний бромида, той же степени полимеризации.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Ситникова, Татьяна Александровна, 2011 год

1. Kabanov V.A., Petrov R.V., and Khaitov R.M. Artificial Antigenes and Vaccines Based on Non-natural Polyelectrolytes// Sov. Sci. Rev. D, Physicochemical Biology. 1984. V. 5.P. 277-322.

2. Yaroslavov A.A., Sukhishvili S.A., Obolsky O.L., Yaroslavova E.G., Kabanov A.V., Kabanov V.A. DNA Affinity to Biological Membranes is Enhanced Due to Complexation with Hydrophobized Polycation// FEBS Lett. 1996. № 384. P. 177-180.

3. Kabanov A.V., Kabanov V.A ./DNA complexes with polycations for the delivery of genetic material into cells.// Bioconjug. Chem. 1995. V. 6. P. 7-20.

4. Chung J. C., Gross D. J., Thomas, J. L., Tirrell D. A., Opsahl-Ong L. R. pH-Sensitive, Cation-Selective Channels Formed by a Simple Synthetic Polyelectrolyte in Artificial Bilayer Membranes// Macromolecules. 1996. V. 29. № 13. P. 4636-4641.

5. A.A. Иванов, A.H. Гвоздетский, В.А.Кабанов, Влияние поли-4-винилпиридина и полиокси-4-винилпиридина и их сополимеров на гемолитическую активность комплемента// Докл. Акад. Наук СССР. 1976. Т. 229. С. 1946.

6. В.А. Кабанов, И.М. Паписов. Комплексообразование между комплементарными синтетическими полимерами и олигомерами в разбавленных растворах// Высокомол. Соед. А. 1979. Т. 21. С. 243.

7. В.А. Кабанов, Р.В. Петров, P.M. Хаитов. Новый принцип создания искусственных иммуногенов// Ж. Всес. Хим. Об-ea им. Д.И.Менделеева. 1982. Т. 27. С. 417-424.

8. Zunino F., Pratesi G., Pezzoni G. / Increased therapeutic efficacy and reduced toxicity of doxorubicin linked to pyran copolymer via the side chain of the drug. // Cancer Treat. Rep. 1987. V. 71. P. 367-373.

9. Oda Т., Sato F., Maeda H. Facilitated internalization of neocarzinostatin and its lipophilic polymer conjugate, SMANCS, into cytosol in acidic pH. // J. Natl. Cancer Inst. 1987. V. 79. P. 1205-1211.

10. Janes, K.A., Fresneau, M.P., Marazuela, A., Fabra, A., Alonso, M.J. .Chitosan nanoparticles as delivery systems for doxorubicin// J. Control. Release. 2001. V. 73. P. 255-267.

11. Bogush, Т., Smirnova, G., Shubina, I., Syrkin, A., Robert. Direct evaluation of intracellular accumulation of free and polymer-bound anthracyclines// Cancer Chemother. Pharmacol. 1995. V. 35. P. 501-505.

12. Ефимова A.A. Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук. Москва. 1996.

13. Coakley W.T., Heweison L.A., and Tilley D. Interfacial instability and the agglutination of erythrocytes by polylysine// Eur. Biophys. J. 1985. V. 13, P. 123-130.

14. T. Ikeda, H. Hirayama, K. Suzuki, H. Yamaguchi, Sh. Tazuke, Polymeric pyridinium salts with well-defined main chain structure// Makromol. Chem. 1986. V. 187. P. 333-340.

15. В.А.Кабанов, A.B. Кабанов, Интерполиэлектролитные комплексы нуклеиновых кислот как средство доставки генетического материала в клетку// Высокомол. Соед. 1994. Т. 36. № 2. С. 198-211.

16. Li Song, Huang Leaf. Lipidic supramolecular assemblies for gene transfer// J. Liposome Res. 1996. V. 6. № 3. P. 589-608.

17. Mack Karl D., Walzem Rosemary L., Lehmann-Bruinsma Karin, Powell Jerry S., Zeldis Jerome B. Polylisene enhances cationic liposome-mediated transfection of the hepatoblastoma cell line Hep G2// Biotechnol. Appl. Biochem. 1996. V 23. № 3. P. 217220.

18. Плате H.A., Васильев A.E. Физиологически активные полимеры. М. :Мир. 1986. С. 159.

19. Margolin A.L., Izumrudov V.A., Shviadas V.K., Zezin A.V., Kabanov V.A., Berezin I.V. Reversibly soluble penicillin amidase immobilized in polyelectrolyte complexes// Biochem. Biophys. Acta. 1981. V. 660. P. 359.

20. B.A. Кабанов. Физикохимические основы и перспективы примерения растворимых интерполиэлектролитных комплексов// Высокомол. Соед. 1994. Т. 36. №2. С. 183-197.

21. Xiubo Zhao, Zhuoqi Zhang, Fang Pan, Yihua Ma, Steve P. Armes, Andrew L. Lewis, Jian R. Lu. Solution pH-Regulated Interfacial Adsorption of Diblock Posphorylcholine Copolimers// Langmuir. 2005. № 21. P. 9597 -9603.

22. Fischer D, Li Y, Ahlemeyer B, Krieglstein J, Kissel T. In vitro cytotoxicity testing of polycations: influence of polymer structure on cell viability and hemolysis// Biomaterials. 2003.24(7). P. 1121-31.

23. N.P.Shusharina, E.B.Zhulina, A.V.Dobrynin, M. Rubinstein. Scaling Theory of Diblock Polyampholyte Solutions// Macromolecules. 2005. V. 38. P. 8870 -8881.

24. C.S. Patrickios, W.R.Hertler, N.L.Abbott, T.A.Hatton, Diblock. ABC Triblock, and Random Methacrylic Poly electrolytes: Synthesis by Group Transfer Polymerization and Solution BehaviorII Macromolecules. 1994. V. 27. № 4. P. 930-937.

25. Mahlti B, Werner C, Muller M, Jerjme R, Stamm M. Protein adsorption on preadsorbed polyampholytic monolayers// J Biomater Sei Polym Ed. 2001. № 12. P. 9951010.

26. Sunil Nath, Costas S. Patrickios, T.Alan Hatton. Turbodimetric Titration Study of the Interaction of Proteines with Acrilic Polyampholytes// Biotechnol. Prog. 1995. №11. P. 99-103.

27. C.S. Patrickios, S.D. Gadam, S.M. Cramer, W.R. Hertier, T.A. Hatton. Block Methacrilic Polyampholytes as Protein Displacer in Ion-Exchange chromatography. Biotechnol//Prog. 1995. № 11. P. 33-38.

28. Б. Альберте, Д. Брей, Дж. Льюис, К. Роберте, Дж. Д. Уотсон. Молекулярная биология клетки. М.: Мир. 1998.

29. Р. Геннис. Биомембраны: молекулярная структура и функции. М.: Мир. С. 52, 84-85.

30. Болдырев A.A., Кяйвяряйнен Е.И., Илюха В. А. Биомембранология. Петрозаводск, 2006.

31. Марголис Л.Б., Бергельсон Л.Д. Липосомы и их взаимодействие с клетками. М.: Наука. 198. С. 8-40.

32. Bangham A.D. In liposomes Letters (Bangham A.ed), L.,N.Y., Acad. Press. 1983, 12-15.

33. Барсуков Л.И., Липосомы. Соросовский обогревательный журнал. 1998, № 10, 2-9.

34. Mueller P., Chien T.F., Rudy B. Formation and Properties of Cell-saze lipid bilayer vesicles И Biophys. J. 1983. 44. P. 375-381

35. Huang C.-H. Studies on phosphatidylcholine vesicles. Formation and physical characteristics// Biochemistry. 969. 8. P. 344-351.

36. Goormaghtigh E., Scarborough G.A. Density-based reparation of liposomes by glycerol gradient centrifugationП Analitical biochemistry. 1987. 159. P. 122-131.

37. Lentz B.R., Barenholz Y., Thompson Т.Е. Fluorescence depolarization studies of phase transitions and fluidity in phospholipids bilayers. Two component phosphatidylcholine liposomes// Biochemistry. 1976. 15. P. 4529-4537.

38. Ueno M., Tanford C., Reynolds J.A., Phospholipid vesicle formatuion using nonionic detergents with low monomer solubility. Kinetic factors determine vesicle size and permeability// Biochemistry. 1984. 23.P. 3070-3076.

39. Papahadjorpoulos D., Vail W.J., Jacobson K., Poste G. Cochleate lipid cylinders: formation by fusion of unilamellar lipid vesicles// Biochim Biophys. Acta. 1975. 394. P. 483-491.

40. Овчинников Ю.А. Биоорганическая химия. M.: Просвещение. 1987. С. 577.

41. Huang С, Mason J.T. geometric Packing constraints in egg phosphatidylcholine vesicles// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1978. 75.P. 308-310.

42. N. Oku, S.Shibamoto, F. Ito, H. Gongo, Nango M. Low pH induced membrane fusion of lipid vesicles containing proton-sensitive polymer// Biochemistry. 1987. № 26, P. 8145-8150.

43. Dill K.A., Flory P.J. Molecular organization in micelles and vesicles// Proc. Nat. Acad. Sci. US. 1981. V. 78. P. 676-680.

44. Lichtenberg D., Freire E., Schmidt C.F. Effect of surface curvature on stability, thermodynamic, behavior end osmotic activity of dipalmitoylphospotidilholine single lamellar vesicles// Biochemistry. 1981. V. 20. P. 3462-3467.

45. Cevc G. How membrane chain melting properties are regulated by the polar surface of the lipid bilayer// Biochemistry. 1987. 26. P. 6305-6310.

46. Е.И. Чадов, И.Н. Смирнов, А.В. Мазаев, В.П. Торчилин. Макромолекулярные лекарственные препараты в кардиологии// Ж. Всес. Хим. Об-ea им. Д.И.Менделеева. 1985, Т. 30, С. 365-372.

47. Albon N., Sturtevant J.M. Nature of the gel to lipid crystal transition of synthetic phosphatidylcholines// Proc. Nat. Acad. Sci. US. 1978. 75. P. 2258-2260.

48. Lichtenberg D., Menasche M., Donaldson S., Biltonen R.L. Thermodynamic characterization od the pretranstion of unilamellar dipalmitoylphospotidilholine vesicles// Lipids. 1984. 19. P. 395-400.

49. Ярославов A.A., Ефимова A.A., Лобышев В.И., Ермаков Ю.А., Кабанов В.А. Обратимость изменения структуры липидных мембран, индуцированных адсорбцией поликатиона// Биологические мембраны. 1996. № 13. Р. 628-633.

50. Kennedy М.Т., Pozharski E.V., Rakhmanova V.A., MacDonald R.C. Factors Governing the Assembly of Cationic Phospholipid-DNA Complexes// Biophys. J. 2000. V. 78, P. 1620-1633.

51. Wu S.H.-W., McConnell H.M. Phase separations in phospholipids membranes// Biochemistry. 1975.14. P. 847-854.

52. Tokutomi S., lew R., Ohnishi S.I. Ca2+-induced phase separation in phosphatidylserine, phosphatidylethanolamine, and phosphatidylcholine mixed membranes// Biochim Biophys. Acta. 1981. 643. P. 276-282.

53. Ипатова O.M. Фосфоглив. Механизм действия и применения в клинике. Под ред. академика РАМН Арчакова А.И. М.: Изд. ГУ НИИ биомедицинской химии РАМН, 2005.

54. Galla H.J., Hartman W., Theilen U., Sackmann E. On two-dimensional passive random walls in lipid bilayers and fluid pathways in biomembranes// J. Membrane boil. 1979. 48. P. 215-236.

55. Vaz W.L.C., Goodsail-Zalduondo F., Jacobson K. Lateral diffusion of lipids and proteins in bilayer membranes// FEBS Lett. 1984. 174. P. 199-207.

56. Vaz, W.L.C., R.M. Clegg and D. Kallmann. Translational diffusion of lipids in liquid crystalline phase phosphatidylcholine multibilayers. A comparison of experiment with theoryI/ Biochemistry. 1985.V. 24. P. 781-786.

57. O'Leary, T.J. Lateral diffusion of lipids in complex biological membranes// Proc. Nat. Acad.Sci. USA. 1987. V. 84, P. 429-433.

58. Galla, H.-J., W. Hartmann, U. Theilen and E. Sackmann. On two-dimensional passive randomwalk in lipid bilayers and fluid pathways in biomembranes// J. Membr. Biol. 1979. V. 48. P. 215-236.

59. Sankaram, M.B. and T.E. Thompson. Modulation of phospholipid acyl chain order by cholesterol. A solid-state 2H nuclear magnetic resonance study// Biochemistry. 1990.V. 29. P. 10676-10684.

60. Sankaram, M.B. and T.E. Thompson. Cholesterol-induced fluid phase immiscibility in membranes// Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1991. V. 88. P. 8686-8690.

61. Bishop W.R., Bell R.M. Assembly of the endoplasmic reticulum phospholipids bilayer: the phosphatidylcholine transporter// Cell. 1985. V. 42. P. 51-60.

62. Barsukov L.I., Kulikov V.I., Bergelson L.D. Cytochrome P-450 facilitate phosphatidylcholine flip-flop in proteohiposomes// FEBS Lett. 1982. V. 144. P. 337-340.

63. Mclntyre J.C. Sleight R.G. Fluorescence assay for phospholipid membrane asymmetry//Biochemistry. 1991. Y. 30. P. 11819-11827.

64. Bai J. Pagano R.E. Measurement of spontaneous transfer and transbilayer movement of BODIPY-labeled lipids in lipid vesicles// Biochemistry. 1997. V. 36. P. 8840-8848.

65. Kornberg R.D., McConnell H.M. Inside-outside transition of phospholipids in vesicle membranes//Biochemistry. 1971. V. 10. P. Ill 1-1120.

66. Homan R. Pownall H.R. Transbilayer diffusion of phospholipids: dependence on headgroup structure and acyl chain length // Biochim. Biophys. Acta. 1988. V. 938. P.155-166.

67. Tilley L., Cribier S., Roelofsen B., Op den Kamp J.A.F., Van Deenen L.L.M. ATP-dependent translocation of aminophospholipids across the human erythrocyte membrane// FEBS Lett. 1986. V. 194. P. 21-27.

68. Zachowski A., Favre E., Cribier S., Herve P., Devaux P.F. Outside-inside translocation aminophospholipids in the human erythrocyte membrane is mediated by a specific enzyme// Biochemistry. 1986. V. 25. P. 2585-2590.

69. Devaux P. Protein involvement in transmembrane lipid assimetryIIAnnu. Rev. Biophys. Boimol. Struct. 1992. V. 21. P. 417-439.

70. Buton X., Morrot G., Fellmann P., Seigneuret M. Ultrafast glycerophospholipid-selective transbilayer motion mediated by a protein in the endoplasmic reticulum membrane// J. Biol. Chem. 1996. V. 271. P. 6651-6657.

71. Pomorski T., Muller P., Zimmermann B., Burger K., Devaux P.F., Herrmann A. Transbilayer movement of fluorescent and spin-labeled phospholipids in plasma membrane of human fibroblasts: a quantitative approach// J. Cell Sci. 1996. V. 109. P. 687-698.

72. Oram J.F., Wolfbauer G., Vaughan A.M., Tang C., Albers J.J. Phospholipid transfer protein interact with and stabilized ATP-binding cassette transporter A1 and enhances cholesterol efflux from cells// J. Biol. Chem. 2003. V. 278. P. 52379-52385.

73. Schwichtenhovel C., Deuticke B., Haest C.W. Alcohols produce reversible and irreversible acceleration of phospholipid flip-flop in the human erythrocyte membrane// Biochim. Biophys. Acta. 1992. V. 1111. P. 35-44.

74. Jain M.K., Jahagirdar D.V., Linde M.V., Roelofsen B., Eibl H. Solute-induced acceleration of transbilayer movement and its implications on models of blood-brain barrier/I Biochim. Biophys. Acta. 1985. V. 818. P. 356-364.

75. Apell H.-J., Lauger P. Quantitative analysis of pump-mediated fluxes in reconstituted lipid vesicles// Biochim. Biophys. Acta. 1987. V. 861. P. 302-310.

76. A.A. Meier-Koll, C.C. Fleck and H.H. von Grtinberg. The counterion-release interaction// J. Phys.: Condens. Matter. 2004. № 16. P. 6041-6052.

77. Franks N.P. Structural analysis of hydrated egg lecithin in cholesterol belayers I. X-ray diffraction// J. Mol. Biol. 1976. V. 100. P. 345-358.

78. A.A. Yaroslavov, E.G. Yaroslavova, A.A. Rakhnyanskaya, F.M. Menger, V.A. Kabanov. Modulation of interaction of polycatoions with negative unilamellar lipid vesicles// Coll. And Surf B. Bio interfaces. 1999. № 16. P. 29-43

79. A.A. Yaroslavov, V.Ye. Kulkov, A.A.Efimova, M.O. Ignatiev. Synthetic polycations on the surface of negatively charged liposomes// Thin Solid Films. 1995. V. 265. P. 66-70.

80. Kabanov V.A., Yaroslavov A.A. What happens to negatively charged lipid vesicles upon interacting with polycation species?// J. Control. Release. 2002. V. 78. P. 267-271.

81. Murray D, Arbuzova A, Hangyas-Mihalyne G, Gambhir A, Ben-Tal N, Honig B, McLaughlin S. Electrostatic properties of membranes containing acidic lipids and adsorbed basic peptides: theory and experiment// Biophys J. 1999 . V. 77(6). P. 3176-88.

82. S. Sennato, F. Bordi, C. Cametti, M. Diociaiuti, P. Malaspina.Charge patch attraction and reentrant condensation in DNA—liposome complexes// Langmuir. 2004. V. 20 (13). P. 5214-5222.

83. Yaroslavov A.A., Efimova A.A., Lobyshev V.I., Kabanov V.A. Reversibility of structural rearrangements in the negative vesicular membrane upon electrostatic adsorption/desorption of the polycation.// Biochim. Biophys. Acta. 2002. V. 1560. P. 1424.

84. Yaroslavov A.A., Efimova A.A., Lobyshev V.I., Ermakov Y.A., Kabanov V.A. Reversibility of structural rearrangements in lipid membranes induced by adsorption-desorption of a polycation// Membr. Cell Biol. 1997. V. 10. P. 683-688.

85. G.G. Hammes, S.E. Schullery. Structure of macromolecular aggregates. Construction of model membranes from phospholipids and polypeptides// Biochemistry. 1970. №9. P. 2555-2563.

86. Gad AE, Silver BL, Eytan GD. Poly cation-induced fusion of negatively-charged vesicles// Biochim Biophys Acta.1982. 690(1). P. 124-132.

87. Walter A, Steer CJ, Blumenthal R. Polylysine induces pH-dependent fusion of acidic phospholipid vesicles: a model for polycation-induced fusion// Biochim Biophys Acta. 1986. 861(2). P. 319-330.

88. Bordi F, Cametti C, Diociaiuti M, Gaudino D, Gili T, Sennato S. Complexation of anionic polyelectrolytes with cationic liposomes: evidence of reentrant condensation and lipoplex formation//Langmuir. 2004. 20(13). P. 5214-22.

89. A.A. Yaroslavov, V.Ye. Kulkov, F.S. Polinsky, B.A. Baibakov, V.A. Kabanov. A polycation causes migration of negatively charged phopholipids from the inner to outer leaflet of the liposomal membrane// FEES Lett. 1994. V. 340. P. 121-123.

90. Gad AE. Cationic polypeptide-induced fusion of acidic liposomes// Biochim Biophys Acta. 1983. 728(3). P. 377-82.

91. Akesson, T., Woodward, C., Jonsson, B.J. Electric double layer forces in the presence of polyelectrolytes II J. Chem Phys. 1989. V. 91. P. 2461-2469.

92. Linse P. Adsorption of weakly charged polyelectrolytes at oppositely charged surfaces. // Macromolecules. 1996. V. 29. P. 326-336.

93. M. Brynda, P. Chodanowski, and S. Stoll. Polyelectrolyte-particle complex formation. Polyelectrolyte linear charge density and ionic concentration effects// Polymer and Colloid Science. 2002. V. 280. P. 789-797.

94. Кученкова O.E., Ярославов A.A., Кабанов B.A. Размер отрицательно заряженных липосом решающим образом влияет на их взаимодействие с полилизином// Доклады Акад. Наук. 1999. Т. 369. С. 778-780.

95. Kleinschmidt J.H., Marsh D. Spin-label electron spin resonance studies on the interactions of lysine peptides with phospholipid membrane// Biophys. J. 1993. V.73. P. 2546-2555.

96. Tighe A. Spurlin, Andrew A. Gewirth. Poly-L-Lysine-Induced Morphology Changes in Mixed Anionic/Zwitterionic and Neat Zwitterionic-Supported Phospholipid Bilayers// Biophysical Journal. 2006. V. 91, P. 2919-2927.

97. Macdonald P.M., Crowell K.J., Franzin C.M., Mitrakos P, Semchyschyn D.J. Poly electrolyte-induced domains in lipid bilayer membranes: the deuterium NMR perspective// Biochem Cell Biol. 1998. 76(2-3). P.452-64.

98. Xie AF, Granick S. Phospholipid membranes as substrates for polymer adsorption// Nat Mater. 2002. 1(2). P. 129-33.

99. G. Laroche, D. Carrier, M. Pezolet. Study of the effect of poly(L-lysine) on phosphatidic acid and phosphatidylcholine/phosphatidic acid bilayers// Biochemistry. 1988. № 27. P. 6220-6228.

100. Carrier D., Dufourcq J., Faucon J.-F., Pezolet M. A fluorescence investigation of the effects of polylysine on dipalmitoylphosphatidylglycerol bilayers// Biochim. Biophys. Acta. 1985. V. 820. P. 131-139.

101. Feng Z.V., Granick S, Gewirth A.A. Modification of a supported lipid bilayer by polyelectrolyte adsorption// Langmuir. 2004. V. 20. P. 8796-804.

102. Epand RM, Lim W. Mechanism of liposome destabilization by polycationic amino acids// Biosci. Rep. 1995. V. 15. P. 151-160.

103. Kozlova N.O., Bruskovskaya I.B., Okuneva I.B., Melik-Nubarov N.S., Yaroslavov A.A., Kabanov V.A., Menger F.M. Interaction of a cationic polymer with negatively charged proteoliposomes// Biochim Biophys Acta. 2001. 1514(1). P. 139-51.

104. A.A. Ярославов, У.А. Киселева, О.Ю. Удалых, В.А. Кабанов. Композиционный предел устойчивости жидких отрицательно заряженных липосом при контакте с поликатионом// Докл. Акад. Наук. 1996. Т. 349. С. 67-69.

105. Ozon F, di Meglio J.M., Joanny J.F. Adsorption of polyampholytes on charged surfaces// Ear Phys JE Soft Matter. 2002. V. 8(3). P. 321-30.

106. Dobrynin A.V. Polyampholyte adsorption on a charged sphere// Phys. Rev. 2001. V. 63. Is. 5.

107. Netz R.R., Joanny J.F. Complexation Behavior of Polyampholytes and Charged ObjectsII Macromolecules. 1998. V. 31(15). P. 5123-41.

108. B. Philipp, H. Dautzenberg, K.-J. Linow, L. Kotz, W. Dawydoff. Polyelectrilyte complexes recent developments and open problems// Prog. Polym. Sei. 1989. V. 14. P. 91-172.

109. V.A. Kabanov, A.B. Zezin. Water-Soluble nonstoichiometric polyelectrolyte complexes: a new class of syntetic polyelectrolytes// Sov. Sei. Rev. B. 1982. V. 2. P. 207282.

110. V.A. Kabanov, A.B. Zezin, M. I. Mustafaev. Soluble Interpolymeric Complexes as a New Class of Synthetuc Polyelectrolytes// Pergamon. 1980. P. 173-192.

111. Pawagi A.B., Campbell I.M. Vesicle surface charge and polylysine modification of ultraviolet absorption by the olefinic bonds in charged lipid// Can J Biochem. 1981. V. 59. P. 404-411.

112. Щукин Е.Д., Перцов A.B., Амелина E.A. Коллоидная химия. М.: Высшая школа. 2004. 96-102 с.

113. Блинов JI.M. Физические свойства и применение ленгмюровских моно- и мультимолекулярных структур. Успехи Химии. 1983. Т. 52. № 8. С. 1263-1300.

114. Gaines G.L. On the history of Langmuir-Blodgett films. Thin Solid Films. 1983. V. 99. P. 9-13.

115. Ghannam M.M., Mady M.M., Khalil W.A. Interaction of type-I collagen with phospholipid monolayer// Biophis. Chem. 1999. V. 80. P. 31-40.

116. Demel R.A., London Y. The specific interaction of myelin basic protein with lipids at the air-water interface// Biochim. Biophys. Acta. 1973. V. 311. P. 507-519.

117. Shafer P.T. The interaction of polyamino acids with lipid monolayers// Biochim. Biophys. Acta. 1974. V. 373. P. 425-435.

118. Gawrish K., Barry J.A., Holte L.L., Sinnwell T., Bergelson L.D., Ferretti J.A. Role of interactions at the lipid-water interface for domain formation// Mol. Membr. Biol. 1995. V. 12. P. 83-88.

119. J. Engelking, M. Wittemann, M. Rehahn, H. Menzel. UV/Vis spectroscopic monitoring of polyelectrolyte adsorption onto monolayers of azobenzene amphiphiles// Langmuir. 2000. № 16. 3407-3413.

120. Bordi F., De Luca F., Cametti C., Nagliely A., Misasi R., Sorice M. Interactions of mono- and di-sialogangliosides with phospholipids in mixed monolaers at the air-water surface// Colloids Surfaces. 1999. V. 13. P. 135-142.

121. Bordi F., De Luca F., Cametti C., Gibi T., Gaudino D., Sennato S. Charged lipid monolayers at the air-solution surfase: coupling to polyelectrolytes// Colloids Surfaces. 2003. V. 29. P. 149-157.

122. Pezron E., Claesson M., Berg J.M. and Vollhardt D. Stability of arachidic acid monolayers on aqueous salt solution// J. of Coll. and Int. Sci. 1990. V. 138. P.245-254.

123. V.J. Morris//Pergamon, Prog. Biophys. molec. Biol. 1994. V. 61, P. 131-185.

124. D.K. Schwartz, R. Viswanathan, J.A. Zasadzinski. Surface order and stability of Langmuir-Blodgett films// J. Phys. Chem. 1992. V. 96. P. 10444-10447.

125. Kolb H. A., Enders O., Schauer R. Morphology of native and reconstructed biological membranes and their components analysed with atomic force microscopy// Applied Physics. 1999. V. 68. P. 247-254.

126. Hui S. U., Viswanathan R., Zasadzinski R. A.,Israelachvili J., N. The structure and stability of phospholipid bilayers by atomic force microscopy // Biofhysical Journal. 1995. V. 68. P. 171-178.

127. R. Viswanathan, D.K. Schwartz, J. Garnaes, J.A.N. Zasadzinski. Atomic Force Microscopy imaging of substrate and pH effects on Langmuir-Blodgett monolayers// Langmuir. 1992. № 8. P. 1603-1607.

128. Montal M. Formation of biomolecular membranes from lipid monolayers// Mehod in enzym. 1974. V. 32. P. 545-556.

129. Montal M. Reconstitution of channel proteins from excitable cells in plannar lipid bilayer membranes// J. membrane boil. 1987. V. 98. P. 105-111.

130. Vaz W.L.C., Derzco I., Jacobson K.A. Photobleaching measurements of the lateral diffusion of lipids and proteins in artificial phospholipid bilayer membranes// Cell surface reviews. 1982. V. 8. P. 84-128.

131. Fuoss, R.M.; Strauss, U.P. Poly-4-vinylpyridonium chloride and poly-4-vinyl-N-butylpyridonium bromide//./ Polym. Sci. 1948. № 3. P. 246.

132. Кирш Ю.Э., Плужнов C.K., Шомина T.C.,Кабанов В.А., Каргин В.А. Синтетические полимерные аналоги ферментов, обладающие эстеразной активностью// Высокомол. Соед. 1970. № 1. С. 186.

133. Krylova, О.О.; Melik-Nubarov, N.S.; Badun, G.A.; Ksenofontov, A.L.; Menger, F.M.; Yaroslavov A.A. Pluronic L61 accelerates flip-flop and transbilayer doxorubicin permeation// Chemistry. A European Journal. 2003. V. 9. P. 3930-3936.

134. V.A.Izumrudov, N.I.Domashenko, M.V. Zhiryakova, A.A.Rakhnyanskaya. Effect of Alkyl Spacer in the Betaine Moiety pf Polycarboxybetaines on Their Complexing With Poly(methacryIic acid) and DNA// Macromol. Rapid Commun. 2005. № 26. P. 1060-1063.

135. Yaroslavov A.A., Yaroslavova E.G., Rakhnyanskaya A.A., Menger F.M., Kabanov V.A. Modulation of interaction of polycations with negative unilamellar lipid vesicles// Colloids Surf. 1999. V. 16B. P. 29.

136. Ohno H., Shimidzu N., Tsuchida E., Sasakawa S., Honda K. Fluorescence polarization study on the increase of membrane fluidity of human erythrocyte ghostsinduced by synthetic water-soluble polymers// Biochim. Biophys. Acta. 1981. V.649. P. 221.

137. IkedaT., Lee B., Yamaguchi Y., Tazuke S. Time-resolved fluorescence anisotropy studies on the interaction of biologically active polycations with phospholipid membranes 11 Biophys. Biochim. Acta. 1990. V. 1021. P. 56.

138. Kabanov, V.A.; Yaroslavov, A.A.; Sukhishvili, S.A. Interaction of Polyions with Cell-Mimetic Species: Physico-Chemical and Biomedical AspectsII J.ControlledRelease. 1996. №39. P. 173-189.