Возрастные изменения пролиферативной активности клеток тимуса человека тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.53, кандидат биологических наук Чеснокова, Анастасия Юрьевна

• Чеснокова, Анастасия Юрьевна
• кандидат биологических наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Чеснокова, Анастасия Юрьевна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ. введение.:.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1Л. Основные сведения о структурно-функциональной организации тимуса.

1Л Л. Анатомия и морфология тимуса.

1 Л.2. Формирование тимуса человека в ходе эмбриогенеза.

1 Л.З. Пролиферация и дифференцировка Т-лимфоцитов в тимусе.

1.2. Циклин А и PCNA как возможные маркеры пролиферации в тимусе

1.3. Апоптоз и его регуляция.

1.4. Апоптоз в тимусе.

Л.5. Старение тимуса.

1.6. Нейроэндокринная регуляция функционирования тимуса.

1.7. Мелатонин.

1.7.1. Функции мелатонина в организме человека и животных.

1.7.2. Влияние мелатонина на функции тимуса.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Характеристика исследуемого материала.

2.2. Подготовка препаратов для гистологического исследования.

2.3. Метод иммуногистохимической окраски.

2.4. Количественная оценка результатов исследования.

2.5. Определение пролиферативного индекса ткани.

2.6. Статистическая обработка результатов.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖЕНИЕ.

3.1. Светооптическое исследование тимуса людей разных возрастных групп.

3.2. Показатели экспрессии маркеров апоптоза в нелимфоидном компоненте тимуса человека.

З.З.Пролиферативная активность клеток тимуса человека.

3.4.Экспрессия мелатонина в тимусе человека.

ВЫВОДЫ.

УКАЗАТЕЛЬ ЛИТЕРАТУРЫ.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АКТГ — адренокортикотропный гормон

ВПП - внутридольковые периваскулярные пространства

ГК — глюкокортикоидные гормоны

ИЛ - интерлейкин

ИФ - интерфероны

КС - кортикостерон

СТГ - гормон роста

ТЗ - трийодтиронин

Т4 - тироксин

ФНО — фактора некроза опухолей цАМФ - циклический аденозинмонофосфат цГМФ - циклический гуанозинмонофосфат

AA-NA - арилалкиламин N-ацетилтрансфераза

A1F - апоптоз индуцирующий фактор

Cdk - циклин-зависимая киназа

CD - кластер дифференцировки

CRH — кортикотропин высвобождающего гормона

DD - домен смерти

DED — эффекторный домен смерти

FADD — Fas-ассоциированный домен смерти

HIOMT — гидроксииндол-О-метилтрансфераза

5-НТ - серотонин (5-гидрокситриптамин)

Icyciin л — количественная плотность циклин А-позитивных ядер

Ipcna - количественная плотность PCNA-позитивных ядер

МНС - major histocompatibility complex (главый комплекс гистосовместимости)

NK - натуральные киллеры ок - количественная плотность ядер клеток, окрашенных гематоксилин-эозином

PCNA — proliferating cell nuclear antigen (ядерный антиген пролиферирующих клеток)

TCR — Т-клеточные рецепторы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Возрастные изменения пролиферативной активности клеток тимуса человека»

Актуальность темы

Тимус (вилочковая железа) представляет собой центральный орган иммунной системы, в котором осуществляется продукция Т-лимфоцитов из клеток предшественников, поступающих из красного костного мозга [Ноздрачев А. Д. и др., 2001]. В тимусе происходит постоянная пролиферация клеток: из общего количества тимоцитов 20-25% клеток ежедневно образуются при их делении de novo. Однако только 2-5% из них покидают тимус в виде зрелых Т-лимфоцитов, поступая в кровь и расселяясь в лимфоидных органах. Остальная часть клеток (95-98%) погибает в процессе положительной и отрицательной селекции путем запрограммированной клеточной гибели (апоптоза). Несмотря на то, что процессы дифференцировки и пролиферации тимоцитов происходят на протяжении всей жизни человека, их интенсивность значительно снижается с возрастом. Возрастные изменения тимуса, в свою очередь, играют важную роль в происходящем по мере старения угнетении иммунитета, приводящем к возникновению многообразных дисфункций гомеостаза в пожилом возрасте [Кветной И.М., Ярилин А.А., Полякова В.О. и др., 2005].

Для расширения представлений о механизмах возрастной инволюции тимуса крайне важны исследования о влиянии локально продуцируемых гормонов тимуса на пролиферацию и дифференцировку тимоцитов. В этом отношении прежде всего большой интерес представляет мелатонин, который обладает выраженными пролиферотропными свойствами и синтез которого верифицирован в тимусе [Полякова В.О., Кветной И.М., 2006].

Выяснение локальных гормонотропных механизмов регуляции пролиферации и дифференцировки Т-лимфоцитов позволят также разработать новые подходы к профилактике иммунного истощения, ассоциированного с возрастом, и тем самым будут способствовать продлению периода активной жизни человека.

Цель и задачи исследования

Целью диссертационного исследования явилось изучение особенностей процессов пролиферации и апоптоза в тимусе человека при старении и выяснение возможной роли мелатонина в регуляции указанных процессов.

Для достижения указанной цели были поставлены и последовательно решены следующие задачи:

1. оценить динамику пролиферативной активности клеток тимуса у людей разных возрастных групп;

2. определить уровень экспрессии проапоптозного белка Р53 и антиапоптозного белка Мс1-1 в тимусе людей разных возрастных групп;

3. выявить особенности экспрессии мелатонина в структурах тимуса в зависимости от возраста;

4. выяснить существование корреляций между экспрессией мелатонина в тимусе и пролиферацией тимоцитов;

5. оценить роль локальной экспрессии мелатонина в регуляции пролиферативной активности и апоптоза тимоцитов человека при старении.

Научная новизна работы

Впервые изучена динамика экспрессии белков пролиферации и апоптоза в тимусе человека при старении. Установлено достоверное снижение пролиферативной активности клеток в тимусе у людей пожилого возраста, старческого возраста и долгожителей по сравнению с детьми умершими антенатально и детьми первого года жизни. При этом во всех возрастных группах индекс пролиферации по маркеру PCNA в тимусе значительно превышал индекс пролиферации по маркеру циклину А.

Максимальная интенсивность экспрессии антиапоптозного белка Мс1-1 отмечена у эмбрионов, впервые выявлено, что ее снижение происходит в течение уже первых месяцев постнатального онтогенеза с параллельным возрастанием экспрессии проапоптозного белка Р53. Это свидетельствует о ранней инволюции тимуса. Установлено, что замедление процесса инволюции в тимусе людей пожилого и старческого возраста связано не с усилением экспрессии антиапоптозного белка Мс1-1, а с уменьшением экспрессии проапоптозного фактора Р53.

В тимусе человека верифицирована активная экспрессия мелатонина и впервые изучена возрастная динамика его паракринной секреции. Выявлена положительная корреляция между интенсивностью экспрессии мелатонина и сохранностью лимфоидной ткани в тимусе у людей пожилого возраста, старческого возраста и долгожителей. Впервые зарегистрированы корреляционные связи между интенсивностью процесса клеточной пролиферации в тимусе и уровнем локальной экспрессии мелатонина.

Полученные данные свидетельствуют о важном участии локальной экспрессии мелатонина в паракринной регуляции морфо-функционального статуса тимуса в процессе онтогенеза.

Практическая значимость работы

Детальное изучение показателей пролиферации и апоптоза в тимусе у людей разных возрастных групп позволило расширить представленияо механизмах функционирования и возрастной инволюции тимуса. Верификация экспрессии мелатонина - гормона, обладающего иммунорегуляторными, биоритмологическими и геропротекторными свойствами, в тимусе человека и регистрация его стимулирующего действия на пролиферативную активность Т-лимфоцитов позволяет расценивать мелатонин как возможную молекулярную мишень для фармакологической коррекции возрастных иммунодефицитов.

Положения выносимые на защиту

1. Экспрессия проапоптозного белка Р53 и антиапоптозного белка Мс1-1 верифицирована в тимусе у людей разных возрастных групп. У людей пожилого и старческого возраста, а также у долгожителей замедление процесса инволюции тимуса связано не с усилением экспрессии антиапоптозного белка Мс1-1, а с уменьшением экспрессии проапоптозного фактора Р53.

2. В тимусе людей пожилого возраста, старческого возраста и долгожителей происходит снижение пролиферативной активности клеток по сравнению с детьми, умершими антенатально, и детьми первого года жизни. Во всех возрастных группах индекс пролиферации по маркеру PCNA значительно превышает индекс пролиферации по маркеру циклину А.

3. На всех этапах онтогенеза в тимусе зарегистрирована экспрессия мелатонина, что подтверждает представления о тимусе, как органе, совмещающем иммунную и эндокринную функции.

4. В группах людей пожилого возраста и старческого возраста, а также у долгожителей обнаружена достоверная отрицательная связь между экспрессией мелатонина и степенью выраженности инволюции сохранившейся лимфоидной ткани в тимусе, что может свидетельствовать о геропротекторном действии мелатонина на тимоциты человека.

5. Мелатонин обладает выраженным стимулирующим действием на пролиферацию Т-лимфоцитов, что позволяет считать перспективным поиск и разработку методов профилактики возрастных иммунодефицитов, связанных с усилением его локальной продукции в тимусе при старении организма.

Связь с научно - исследовательской работой Института

Диссертационная работа является темой, выполняемой по основному плану НИР Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН.

Структура и объем диссертации

Заключение диссертации по теме «Геронтология и гериатрия», Чеснокова, Анастасия Юрьевна

выводы

1. Экспрессия проапоптозного белка Р53 и антиапоптозного белка Мс1-1 верифицирована в тимусе у людей разных возрастных групп. Максимальная интенсивность экспрессии Мс1-1 отмечена у плодов, ее снижение происходит уже в течение первых месяцев постпатального онтогенеза. У детей первого года жизни заметно усиливается экспрессия проапоптозного белка Р53. Выявленная динамика экспрессии ключевых факторов регуляции апоптоза свидетельствует о ранней инволюции тимуса.

2. Замедление процесса инволюции в тимусе людей пожилого и старческого возраста связано не с усилением экспрессии антиапоптозного фактора Мс1-1, а с уменьшением экспрессии проапоптозного фактора Р53.

3. Установлено достоверное снижение пролиферативной активности клеток в тимусе людей пожилого возраста, старческого возраста и долгожителей по сравнению с детьми, умершими антенатально, и детьми первого года жизни. Во всех возрастных группах индекс пролиферации по маркеру PCNA значительно превышал индекс пролиферации по маркеру циклину А.

4. Экспрессия мелатонина впервые верифицирована в структурах нелимфоидного компонента тимуса (капсуле, междольковых перегородках, тельцах Гассаля и стенках сосудов) и в Т-лимфоцитах корковой и медуллярной зон тимуса человека во всех исследованных возрастных группах.

5. Наиболее высокая площадь экспрессии мелатонина обнаружена в тимусе антенатально умерших детей и детей первого года жизни. Площадь экспрессии мелатонина была достоверно ниже в тимусе людей пожилого возраста, старческого возраста и долгожителей по сравнению с группами детей.

6. Выявлена положительная корреляция между площадью экспрессии мелатонина и индексом пролиферации по маркерам PCNA и циклину А во всех возрастных группах, что свидетельствует о влиянии локальной продукции мелатонина на процессы пролиферации и дифференцировки тимоцитов.

7. В группах людей пожилого возраста и старческого возраста, а также у долгожителей обнаружена достоверная отрицательная корреляция между экспрессией мелатонина и степенью выраженности инволюции сохранившейся лимфоидной ткани в тимусе, что может свидетельствовать о геропротекторном действии мелатонина на тимоциты человека.

Практические рекомендации

1. При диагностике иммунодефицитных состояний, протекающих самостоятельно или отягощающих течение других заболеваний у больных пожилого и старческого возраста, рекомендуется проводить анализ содержания мелатонина в плазме крови или его метаболитов в моче.

2. Учитывая установленные иммуногеропротекторные свойства мелатонина по отношению к клеткам тимуса целесообразно провести клинические испытания данного гормона в качестве геропротекторного средства широкого действия.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Чеснокова, Анастасия Юрьевна, 2008 год

1. Автандилов Г. Г. Медицииская морфометрия: Руководство. М.: Медицина. 1990. - 384 с.

2. Агол В.И. Генетически запрограммированная смерть клеток // Соросовский Образовательный Журнал. 1996. - № 6. - с. 20-24.

3. Анисимов В.Н., Соловьев М.В. Эволюция концепций в геронтологии. Спб.: Эскулап. - 1999. - 129 с.

4. Анисимова В.П. Роль морфофункциональных перестроек тимуса в обменно-эндокринных нарушениях организма // Рос. Вестник перинатологии и педиатрии. 1994. — Т.39, №1. — С. 35.

5. Афанасьев Ю.И., Юрина Н.А. Гистология: Учебник, 5-е изд., перераб. и доп. М.: Медицина. - 1999. - 744 с.

6. Белушкина Н.Н., Хасан Хамад А., Северин С.Е. Молекулярные основы апоптоза // Вопросы биологической, медицинской и фармокологической химии. 1998. - №4. - С. 15-24.

7. Быков В.Л. Частная гистология человека. — СПб.: СОТИС. -1997.-207 с.

8. Банков В.П., Петкова Л.Б. Вилочковая железа / М.: Медицина. 1974.-235 с.

9. Донцова В.И. Регуляция лимфоцитами клеточного роста соматических тканей и новая иммунная теория старения. // Профилактика старения. 1998. - Вып. 1. - С. 40-63.

10. Заварзин А.А. Сравнительная гистология. / СПб.: Изд-во. СПбГУ. 2000. 520 с.

11. Ивановская Т.Е., Зайратьянц О.В., Леонова Л.В., Волощук И.Н. Патология тимуса у детей. СПб: СОТИС. - 1996. - 272 с.

12. Кветная Т. В., Князькин И. В., Кветной И. М. Мелатонин -нейроиммусноэндокринный маркер возрастной патологии. — СПб.: Издательство ДЕАН. 2005. - 144 с.

13. Кветной И.М., Ярилин А.А., Полякова В.О., Князькин И.В. Нейроиммуноэндокринология тимуса. СПб.: Издательство ДЕАН. -2005.- 160 с.

14. Кемилева 3. Вилочковая железа // Пер. с болг. — М.: Медицина. 1984. - 256 с.

15. Копнин Б. П. Мишени действия онкогенов и опухолевых супрессоров: ключ к пониманию базовых механизмов канцрогенеза // Биохимия. 2000. - Т. 65., №1.-С. 5-33.

16. Коркушко О.В., Хавинсон В. X., Бутенко Г. М., Шатило В. Б. Пептидные препараты тимуса и эпифиза в профилактике ускоренного старения. СПб.: Наука. 2002. 202 с.

17. Коркушко О.В., Шатило В.Б. Шишковидная железа: физиологическая роль в организме, функциональная недостаточность в пожилом возрасте, возможные пути коррекции // Медичний Всесвто -2003. Т. 3, №2. - С.45-49.

18. Крутъко В. И., Подколзин А. А., Донцов В. И. Общие причины, механизмы и типы старения // Успехи геронтол. — 1997. — Т. С. 34-40.

19. Львова Л. В. Он не щадит никого // Провизор —1999. №9. -С. - 45-49.

20. Макинодан Т., Юнис Э. Иммунология и старение. — М.: Мир. 1980.-277 с.

21. Мушкамбаров Н.Н., Кузнецов С.Л. Молекулярная биология: Учебное пособие для студентов медицинских вузов. М.: Медицинское информационное агентство. - 2003. — 544 с.

22. Ноздрачев А.Д., Баженов Ю.И., Бранникова И.А., Батуев А.С. и др. Начала физиологии. Учебник для вузов / Под ред. акад. А.Д. Ноздрачева. СПб.: Лань. 2001. - 1088 с.

23. Петров С.В., Райхлин Н.Т. Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека. — Казань: Титул. — 2003. 456 с.

24. Полак Дж.; Ван Норден с. Введение в иммуноцитохимию: современные методы и проблемы (пер. с англ.). М.: Мир. — 1987. — 74 с.

25. Полякова В.О., Кветной И.М. Тимус и старение: нейроиммуноэндокринные механизмы. СПб.: Система. - 2004. - 102 с.

26. Полякова В.О., Кветной И.М., Хавинсон В.Х. и др. Тимус и старение // Успехи геронтологии. — 2001. №8. — С. 50-57.

27. Полякова В.О., Князькин И.В. Мелатонин: регуляторное действие на клетки тимуса // Материалы XII Российского национального конгресса «Человек и лекарство». — Москва. 2005. — с. 514.

28. Райе Р.Х., Гуляева Л.Ф. Биологические эффекты токсических соединений. — Новосибирск. 2003. — 208 с.

29. Ройт А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология: пер. с англ. -М.Мир. 2000. - 592 с.

30. Самуилов В.Д. Биохимия программируемой клеточной смерти (апоптоза) у животных // Соросовский образовательный журнал. — 2001. -№10.-С. 18-25.

31. Серова Л.Д. Иммунология старения // Медицинский вестник. -2001.-№27.-С. 13-16.

32. Серова Л.Д. Особенности организма при старении // Клиническая геронтология. 2001. - №8. - С. 81.

33. Фильченков А.А. Каспазы: регуляторы апоптоза и других клеточных функций // Биохимия. 2003. - Т. 68, №4. - С. 23-27.

34. Фрейдлин И.С. Загадки тимуса. Возраст и иммунитет // Соросовский Образовательный Журнал. 1997. - №5. - С 24-28.

35. Хавинсон В.Х., Кветной И.М., Южаков В.В., Попучиев В.В. и др. Пептидэргическая регуляция гомеостаза. СПб.: Наука. - 2003. - 194 с.

36. Хавинсон В.Х., Морозов В.Г. Пептиды эпифиза и тимуса в регуляции старения. СПб.: Фолиант. - 2001. - 158 с.

37. Хавинсон В.Х., Чалисова Н.И., Морозов В.Г. Малинин В.В. Роль пептидов тимуса в регуляции рака лимфоидной ткани у крыс разного возраста // Докл. РАН. 1999. - Т. 369, № 5. - С. 701-703.

38. Харченко В.П., Саркисов Д.С., Ветшев П.С., Галил Оглы Г.А., Зайратьянц О.В. Болезни вилочковой железы. М.: Триада-Х. — 1988. — 232 с.

39. Хирокава К. Тимус и ожидаемая продолжительность жизни // Геронтология и гериатрия: Иммунитет и старение. 1987. - С. 33-43.

40. Чернышева М.П. Гормоны животных. Введение в физиологическую эндокринологию / СПб.: "Глаголь". — 1995. — 530 с.

41. Эллидини В.Н., Аникеева Н.В., Максимова Н.А. Практическая иммуноцитохимия. Санкт-Петербург. — 2002. - 35 с.

42. Ярилин А.А. Апоптоз. Природа феномена в целостном организме. // Патол. физиол. эксп. терап. 1998. - №2. — С. 38-48.

43. Ярилин А.А. Цитокины в тимусе. Биологическая активность и функции цитокинов в тимусе // Цитокины и воспаление. 2003. - Т.2, №2. -С. 3-11.

44. Ярилин А.А., Беляков И.М. Тимус как орган эндокринной системы // Иммунология. 1996. - № 1. - С. 4 -10.

45. Ярилин А.А., Пинчук В.Г., Гриневич Ю.А. Структура тимуса и дифференцировка Т-лимфоцитов. — Киев: Наукова думка. — 1991. — 244 с.

46. Agarwal S., Gupta S. Increased activity of caspase 3 and caspase 8 in anti-Fas-indused apoptosis in lymhocytes from ageing humans // Clin. Exp. Immunol. Vol. 117. - 1999. - P.285-290.

47. Andrew D., Aspinall R. Age-assosiated thymic atrophy is linked to a decline in IL-7 production // Exp. Gerontol. Vol. 37. - 2004. - P.45 5^163.

48. Antonica A, Magni F, Mearini L, Paolocci N. Vagal control of lymphocyte release from rat thymus. // J Auton Nerv Syst. 1994. - Vol. 48. -P. 187-97.

49. Aspinal R., Andrew D. Thymic atrophy in the mouse is a soluble problem of the thymic environment // J. Vaccine. 2000. - Vol. 18. - P. 16291637.

50. Babu J. P. Cell death induced by acute renal injury: a perspective on the contributions of apoptosis and necrosis // Renal Physiol. 2003. — Vol. 284, N4 - P. 608-627.

51. Bach M.A., Bach J.F. Stadies on age-related decrease of thymic secretion and its concequences on T-cell function // Gerontology 1979. - Vol. 25.-P. 159-160.

52. Beetz A., Messer G., Oppel Т., van Beuningen D. Induction of interleukin-6 by ionizing radiation in a human epitelial cell line: control by corticosteroids // Int. J. Radiat.Biol. 1997.-Vol.72, № l.-P. 33-43.

53. Behrens S. H., Borkovec M., Schurtenberger P. Aggregation in charge-stabilized colloidal suspensions revisited. // Langmuir. 1998. Vol. 14, N. 8.-P. 1951-1954.

54. Boehmer H. von. Thymus development // Curr. Top Microbiol. Immunol. 1986.-Vol. 126.-P. 19-25.

55. Botham C.A., Jones G.V., Kendall M.D. Immuno-characterisation of neuroendocrine cells of the rat thymus gland in vitro and in vivo // Cell Tissue Res.-2001. Vol. 303.-P. 381-389.

56. Bravo R., Frank R., Blundell P.A. et al., Cyclin/PCNA is the auxiliary protein of DNA polymerase-delta. // Nature. Vol. 326. - 1987. - P. 515-517.

57. Burnet F. Role of the thymus and related organs in immunity // Brit. Med J. 1962. - Vol. 2. - P. 807-811.

58. Cardoso M.C., Leonhardt H., Nadal-Ginard B. Reversal of terminal differentiation and control of DNA replication: cyclin A and cdk2 specificity localize at subnuclear sites of DNA replication. // Cell. — Vol. 74. — 1993.-P. 79-992.

59. Cox L.S. Who binds wins: competition for PCNA rings out cell-cycle changes // Trends in Cell Biology. Vol. 7, N.12. - P. 493-498(6)

60. Dardenne M. Role of thymic peptides as transmitters between the neuroendocrine and immune systems // J. Ann. Med. 1999. - Vol. 31. - P. 34-39.

61. Dubocovich M.L., Cardinali, D.P., Delagrange P.R.M., Krause, D.N., StrosberG, D., Sugden, D., Yocca, F.D. Melatonin Receptors. // The 1UPHAR Compendium of Receptor Characterization and Classification 2000 - P. 270-277.

62. Evan G., Littlewood T. Role c-myc in cell growth // Curr Opin Gouct Dev. 1993. - Vol. 3. - P. 44-49.

63. Fortune J. M., Stith С. M., Kissling G. E., Burgers P. M. J., Kunkel T. A. RPA and PCNA suppress formation of large deletion errors by yeast DNA polymerase delta // Nucleic Acids Research 2006. - Vol. 34, N. 16.-P. 335-341.

64. Furuno N., Elzen N., Pines J. Human Cyclin A Is Required for Mitosis until Mid Prophase // The Journal of Cell Biology. 1999 - Vol. 147, N. 2-P. 295-306.

65. Galand P., Degaref C. Cyclin PCNA immunostaining as an alternative to tritiated thymidine pulse labelling for marking S phase cells in parafm sections from animal and human tissues // Cell Tiss. Kinet. 1989. -Vol. 22, N. 5.-P. 383-392.

66. Gaudecker В von. Functional histology of the human thymus // Anat. Embryol. 1991. - Vol. 183. - P. 1-15.

67. Geenen V., Brilot F. Role of the thymus in the development of tolerance and autoimmunity towards the neuroendocrine system // Ann N У Acad Sci.- 2003. -Vol. 992.-P. 186- 195.

68. Ginaldi L, De Martinis M., D'Ostilio A. The immune system in the elderly: 11. Spesific cellular immunity // Immunol. Res. 1999. - Vol. 20, №2. -P. 109-115.

69. Goya R. G., Brown O. A., Bolognani F. The thymus-pituitary axis and its changes during aging // 1999. Neuroimmunomodulation. - Vol 6. - P 137-142.

70. Goya R.G., Bolognani F. Homeostasis, thymic hormones and aging // Gerontology. 1999. - Vol. 45. - P. 174-178.

71. Green D., Kroemer G. The central executeoners of apoptosis: caspases or mitochondria // Trends in cell biology. 1998. - Vol 8. - P. 267272.

72. Hall N.R., O'Grade M.P., Menzies R.A. Thymic regulation on the hypothalamic-pituitary-gonadal axis // Int. J. Immunophannac. 1992. - Vol. 14.-P. 353-359.

73. Higley H., O'Morchoe C. Morphometric analysis of thymic medullary nonlymphoid cells // Dev. Сотр. Immunol. 1984. - Vol. 8. -P.711-714.

74. Hirokawa К. The thymus and aging // Immunology and aging. / New York-London. Pergamon Press. 1977. - P.51-72.

75. Hirokawa K., Utsuyama M., Kobayashi S. Hypothalamic control of thymic function // Cell Mol. Biol. (Noisy-le-grand). 2001. - Vol. 47. - P. 97-102.

76. Hoijman E., Viegas L. R., Sarmiento M. I. K., Rosenstein R. E., Pecci A. Involvement of Bax protein in the prevention of glucocorticoid-induced thymocytes apoptosis by melatonin // Endocrinology. — 2004. Vol. 145.-P. 418-425.

77. Howell W.M., Black D.A. Controlled silver-staining of nucleouls organizer regions with a protective colloidal developer: on a step method // Experientia.-1980.-Vol.36, №8.-P. 1014-1015.

78. Hsu H.-C. Genetic regulation of thymic involution // Mechanisms of ageing and development. 2005. - Vol. 126. - P. 87-97

79. Iguchi H, Kato K.I., Ibayashi Y. Melatonin serum levels and metabolic clearance rate in patients with liver, cirrhosis // J Clin Endocrinol Metab.- 1982.-Vol. 54-P. 1025-1027.

80. Karasek M. Melatonin, human aging, and age-related diseases. // Exp. Gerontol. -2004. Vol. 39. - P. 1723-1729.

81. Kato S. Thymic microvascular system // Microscopy Research and Technique. 1997. - Vol. 38, N. 3. - P. 287-299.

82. Kendall M.D. Functional anatomy of the thymus microenvironment//J. Anat. 1991. - Vol. 177. - P. 1-99.

83. Krishna Т. S., Kong X. P., Gary S., Burgers P. M., Kuriyan J. Crystal structure of the eukaryotic DNA polymerase processivity factor PCNA. // Cell. 1994. Vol. 79, N. 7. - P. 1233-1243.

84. Kvetnoy I. M. Neuroimmunoendocrinology: Where Is the Field for Study? // Neuroendocrinology Lett. 2002. - Vol. 23. - P. 119-120.

85. Loning Т., Caselitz J., Otto H. The epithelial framework of the thymus in normal and pathological conditions: immunohistochemical demonstration of any autopsy series // Virchovs Arch. B. — 1980. — 392. — P.7-20.

86. Lou Y., Hurwitz J., Massague J. Cell-cycle inhibition by independent CDK and PCNA binding domains in p21Cip. // Nature 1995 -Vol. 375.-P. 159-161.

87. Macchi M. M., Bruce J. N. Human pineal physiology and functional significance of melatonin // Front. Neuroendocronol. 2004. - Vol. 25.-P. 177- 195.

88. Maestroni G. J. The immunoendocrine role of melatonin. // J. Pineal Res. 1993. - Vol. 14, N. 1. P. 1 - 10.

89. Maestroni G. J. The photoperiod transducer melatonin and the immune-hematopoietic system. // J. Photochem. Photobiol. B: Biology 1998. -Vol. 43.-P. 186- 192.

90. Manley N.R. Thymus organogenesis and molecular mechanisms of thymic epithelial cell differentiation // Immunology.-2000.-V.12.-P. 421-428.

91. Maroder M., Bellavista D„ Vacca A., Felli M.P., Screpanti I. The thumus at the crossroad of neuroimmune interactions // Ann. NY Acsd. Sci. -2000.-Vol. 217.-P. 741-747.

92. Martens H., Malgrange В., Robert F. Cutokine production by human thymic epithelial cells: control by the immune recognition of the neurohypophysial self-antigen // Regul. Pept. 1996. - Vol. 14. - P. 39-45.

93. Mathews C.E., Pietropaolo S.L., Pietropaolo M. Reduced thymic expression of islet antigen contributes to loss of self-tolerance // Ann N Y Acad Sci.-2003.-Vol. 1005.-P. 412-417.

94. Mocchegiani E., Fabris N. Age-related thymus involution: zinc reverses in vitro the thymulin secretion defect // Int. J. Immunopharmacol. -1995.-Vol. 17.-P. 745-749.

95. Morgan D. O. Cyclin-dependent kinases: engines, clocks, and microprocessors. // Annu Rev. Cell Dev. Biol. 1997. - Vol. 13. - P. 261-291.

96. Morozov V.G., Khavinson V.Kh. Natural and synthetic peptides as therapeutics for immune disfunction // Int. J. Immunopharm. 1997. - Vol. 19, №9-10.-P. 501-505.

97. Noginova O.A., Riabenco V.V., Kaidashev I.P. Influence of peptide complexes from kinney on dexametasone- and ionophore- induced apoptosis in thymocytes snd peripheral blood lymphocytes // Exp. Oncology. -2002.-Vol. 24. P.69-71.

98. Noguchi Т., Dobashi Y., Minehara H., Itoman M., Kameya T. Involvement of Cyclins in Cell Proliferation and Their Clinical Implications in Soft Tissue Smooth Muscle Tumors // American Journal of Pathology. 2000. -Vol. 156.-P. 2135-2147.

99. Odaka C, Morisada T, Oike Y, Suda T Distribution of lymphatic vessels in mouse thymus: immunofluorescence analysis // Cell Tissue Res. -2006. Vol 325, N. 1. -P 13-22.

100. Pattabiraman N., Kellogg G. E., Lemcke Th., Kunick C., Sausville E. A., Zaharevitz D. W., Edward A, Daniel W., Gussio R. Homology Model of the CDKl/cyclin В Complex //J. of Biomol. Structure and Dynamics. 2005. -Vol. 22, N. 5.-P 493-502.

101. Pawelec G., Effros R.B., Caruso C. T-cells and aging // Frontiers in Bioscience. 1999. - Vol. 4. - P. 216-269.

102. Pearse A. G. E. The cytochemistry and ultra structure of polypeptide hormone-producing cells of the APUD series and the embryologic, physiologic and pathologic implications of the concept. // J Histochem Cytochem.- 1969.- Vol. 17.-P. 303-313.

103. Penault-Llorca F, Cayre A, Bouchet M. F. Induction chemotherapy for breast carcinoma: predictive markers and relation with outcome // Int J Oncol. 2003 - Vol. 22, N 6. - P. 1319-25

104. Pratt W.B. The role of heat shock proteins in regulating the function, folding, and trafficking of the glucocorticoid receptor // J. Biol. Chem. 1993. - Vol. 268. - P. 21455-21458.

105. Prelich G., Tan C., Kostura M., Mathews M.B., So A.G., Downey K.M., Stillman B. Functional identity of proliferating cell nuclear antigen and a DNA polymerase- auxiliary protein. // Nature. 1987. - Vol. 326 -517-520.

106. Presman D. M., Hoijman E., Ceballos N. R., Galigniana M. D., Pecci A. Melatonin inhibits glucocorticoid receptor nuclear translocation 1 n in mouse thymocytes // Endocrinology. 2006 - Vol. 147, N. 11. - P. 5452-5459

107. Pugliese A. Central and peripheral autoantigen presentation in immune tolerance // Immunology. 2004. - Vol.111, №2.-P. 138-146.

108. Raica M., Encica S., Motoc A., Cimpean A.M., Scridon Т., Barsan M. Structural heterogeneity and immunohistochemical profile of Hassall corpuscles in normal human thymus // Annals of Anatomy.-2006.-Vol. 188, N. 4.-P. 345-352.

109. Reiter R. J. Pineal melatonin; cell biology of its synthesis and of its physiological interaction // Endocr Rev. 1991. - Vol 12. - P. 151-180.

110. Sainz R. M., Mayo J. C., Reiter R. J., Antolin I., Esteban M. M., Rodriguez C. Melatonin regulates glucocorticoid receptor: an answer to its antiapoptotic action in thymus. 1999 - FASEB J. - Vol. 13. - P. 1547-1556.

111. Savino W., Dardenne M. Neuroendocrine control of thymus physiology // Endocr. Rev. 2000. - Vol. 21. - P. 412-443.

112. Scollay R., Shortman K. Identification of early stages of T lymphocyte development in the thymus cortex and medulla. // J Immunol. -1985 -Vol. 134, N. 6.-P. 3632-3642.

113. Srinivasan V., Maestroni G. J. M., Cardinali D. P., Esquifino A. I., Perumal S. R. P., Miller S. C. Melatonin, immune function and aging // Immun. Ageing. 2005. - P. 2-17.

114. Strasser A., Bouilliet Ph. The control of apoptosis in lymphocyte selection // Immunol. Rev. 2001. - Vol. 76. - P.82-92.

115. Sugden D. Melatonin Receptors. I I Tocris Reviews 2000. - N. 14 -P. 1-3.

116. Taub D. D., Longo D.L. Insights into thymic aging and regeneration // Immunol. Rev. 2005. - Vol. 205. - P. 72 - 93.

117. Throsby M., Pleau J., Dardenne M., Homo-Delarche F. Thymic expression of the pancreatic endocrine hormones // Neiroimmunomodulation.-1999.-V.6, №l-2.-P. 108-114.

118. Tian Y. M, Zhang G. Y, Dai Y. R. Melatonin rejuvenates degenerated thymus and redresses peripheral immune functions in aged mice. // Immunol. Lett.-2003.-Vol. 88.-P. 101-104.

119. Van E. W. Immunohistology of limphoid and non-lymphoid cells in the thimus in reletion to lymphocyte differention // Amer. J. Anat. 1984. -N70. - P.643 - 644.

120. Wu L., Li C., Shortman K. Tymic dendritic cell precursor: Relationships to the T lymphocyte lineage and phenotype of the dendritic cell progeny // J exp. med. 1996. - Vol. 184. - P. 903-911.

121. Yajima N., Sakamaki K, Yonehara Sh. Age-related thymic involution is mediated by Fas on thymic epithelial cells // Int. Immunol. -2004.-Vol. 16, N 7.-P. 1027-1035.

122. Yarilin A.A. What the thymus is needed for? Intrathymic events and their uniqueness // Russian J. of Immunol. 1998. - N1. - P.6-20.

123. Zatz M., Goldstein A. Thymosins, lymphokines and the immunology of ageing // Gerontology. 1985. - N31. - p. 263-277.

124. Zeng X. R., Hao H., Jiang Y., Lee M. Y. Regulation of human DNA polymerase delta during the cell cycle. // J Biol Chem. 1994. - Vol. 269, N. 39. - P. 24027-24033.