Геропротекторное и регуляторное действие пептидов на клетки тимуса тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.53, кандидат биологических наук Полякова, Виктория Олеговна

• Полякова, Виктория Олеговна
• кандидат биологических наук
• 2003

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Полякова, Виктория Олеговна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Глава 1. МОЛЕКУЛЯРНО-КЛЕТОЧНЫЕ МЕХАНИЗМЫ РАЗВИТИЯ, ФУНКЦИОНИРОВАНИЯ И СТАРЕНИЯ ТИМУСА.

1.1. Биология развития и анатомия тимуса.

1.2. Типы клеток и гормоны тимуса.

1.3. Дифференцировка клеток тимуса и их иммуноцито-химический фенотип.

1.4. Нейроэндокринная регуляция функционирования тимуса.

1.5. Тимус и старение.

1.6. Вилон и эпиталон: роль и значение в нейроиммуно-эндокринной регуляции.;.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Исследования in vitro.

2.2. Исследования in vivo.

Глава 3. ДЕЙСТВИЕ ВИЛОНА И ЭПИТАЛОНА НА ЭПИТЕЛИАЛЬНЫЕ КЛЕТКИ ТИМУСА.

3.1. Экспрессия маркеров активации

3.2. Секреторная функция.

3.3. Пролиферативная активность при старении культур.

3.4. Экспрессия белков ядрышковых организаторов

Глава 4. ДЕЙСТВИЕ ВИЛОНА И ЭПИТАЛОНА НА ТИМОЦИТЫ.

4.1. Экспрессия маркеров активации.;.

4.2. Апоптоз

4.3. Экспрессия белков ядрышковых организаторов.

Глава 5. ДЕЙСТВИЕ ВИЛОНА И ЭПИТАЛОНА НА ПЕРИФЕРИЧЕСКИЕ Т-ЛИМФОЦИТЫ.

5.1. Пролиферация и апоптоз лимфоцитов.

5.2. Внутриклеточный синтез цитокинов.

Глава 6. ВЛИЯНИЕ ВИЛОНА НА МОРФО-ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ

СОСТОЯНИЕ ТИМУСА ПРИ ПРЕЖДЕВРЕМЕННОМ

РАДИАЦИОННОМ) СТАРЕНИИ.

6.1. Световая микроскопия.

6.2. Электронная микроскопия.

6.3. Иммуногистохимические и гистохимические исследования.

Компьютерный анализ микроскопических изображений.

6.3.1. Контрольная группа (1 группа).

6.3.2. Преждевременное старение (действие ионизирующей радиации (2 группа)).

6.3.3. Сочетанное действие радиации и вилона (3 группа).

6.3.4. Действие вилона (4 группа).

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

Глава 7. ОСОБЕННОСТИ ДЕЙСТВИЯ ПЕПТИДОВ НА КЛЕТКИ

ТИМУСА В ПРОЦЕССЕ ИХ ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ И

СТАРЕНИЯ.

ВЫВОДЫ.

УКАЗАТЕЛЬ ЛИТЕРАТУРЫ

АБП метод

Г-КСФ

ГМ-КСФ

Кон А

М-КСФ стг тк

ТЭК ФГА Ф

ФИО ФРК

IpCiNA

Список сокращений: иммуногистохимический метод авидин - биотин -пероксидазного комплекса аденокортикотропный гормон колониестимулирующий фактор гранулоцитов гранулоцитарный и моноцитарный колониестимулирующий фактор дендритные клетки интерлейкин интерферон конкавалин А колониестимулирующие факторы макрофаги колониестимулирующий фактор макрофагов области ядрышковых организаторов предшественники Т-лимфоцитов соматотропный гормон тучные клетки эпителиальные клетки тимуса фитогемагглютинин фибробласты фактор некроза опухолей физиологический раствор Кунса эпителиальные клетки внутриклеточные молекулы адгезии иммуноглобулины иммунофенотип индекс PCNA (%)= Npcna / No6uieMyx главный комплекс гистосовместимости транспортный белок манозный рецептор число тучных клеток на 1 mm2 площади среза пролиферативный клеточный ядерный антиген Т-клеточный рецептор

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Геропротекторное и регуляторное действие пептидов на клетки тимуса»

Актуальность темы

Известно, что возрастные изменения тимуса играют ключевую роль в ослаблении системы клеточного и гуморального иммунитета у лиц пожилого и старческого возраста [103]. Инволюция тимуса сопровождается глубокими изменениями морфологии клеток микроокружения и недостаточной выработкой нейропептидов, цитокинов и гормонов, регулирующих функциональную активность органов иммунной системы и созревание Т-лимфоцитов [80]. Ускоренное старение тимуса, протекающее с подобной картиной, наблюдается также на фоне химиотерапевтического лечения, жесткого радиационного облучения и в условиях длительного стресса [87]. Поиск и исследование пептидов с высокой биологической активностью, способных регулировать и восстанавливать адаптационные реакции организма является приоритетным направлением современной биологии.

Участие нейрогуморальных пептидных факторов, вырабатываемых клетками тимусного микроокружения в процессах гемопоэза и формировании иммунного ответа, послужило предпосылкой к созданию на их основе лекарственных препаратов нового поколения. На основе аминокислотного анализа природных препаратов тимуса и эпифиза в Санкт-Петербургском институте биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН были сконструированы синтетические пептиды вилон (Lys-Glu) и эпиталон (Ala-Glu-Asp-Gly), обладающие выраженными иммуномодулирующими свойствами [46].

Сравнительное изучение действия вилона и эпиталона на эпителиальные клетки тимуса и Т-лимфоциты в процессе их дифференцировки и старения позволит более глубоко понять механизмы функционирования и возрастной инволюции тимуса, а также разработать подходы к пептидергической регуляции иммунных и эндокринных функций железы в процессе старения организма.

Цель и задачи исследования

Целью диссертационного исследования является сравнительное изучение действия вилона и эпиталона на эпителиальные клетки тимуса и Т-лимфоциты в процессе их дифференцировки и старения.

Для достижения указанной цели были поставлены и последовательно решены следующие задачи:

1. изучить действие пептидов на дифференцировку тимоцитов;

2. исследовать влияние вилона и эпиталона на пролиферацию и апоптоз Т-лимфоцитов;

3. определить эффекты действия вилона и эпиталона на экспрессию маркеров активации и на секреторную активность эпителиальных клеток тимуса (ТЭК);

4. оценить влияние пептидов на синтез внутриклеточных цитокинов;

5. изучить влияние пептидов на пролиферативный потенциал ТЭК при старении культур;

6. изучить функциональную морфологию тимуса крыс в радиационной модели ускоренного старения;

7. оценить геропротекторные свойства изучаемых пептидов - вилона и эпиталона.

Научная новизна работы

В работе впервые получены данные о роли пептидов (вилона и эпиталона) в регуляции функций эпителиальных клеток тимуса и Т-лимфоцитов при старении. Установлены внутриклеточные пептидергические механизмы, участвующие в процессах пролиферации и дифференцировки и старения клеток тимуса. Проведен анализ морфо-функциональных изменений в тимусе при ускоренном старении. Выявлено геропротекторное и регуляторное действие вилона и эпиталона по отношению к клеткам тимуса.

Практическая значимость работы

Полученные результаты позволяют расширить представления о влиянии пептидов на развитие и функционирование клеток иммунной системы, в первую очередь Т-лимфоцитов и эпителиальных клеток тимуса. Установленное геропротекторное и регуляторное действие вилона и эпиталона на клетки тимуса открывают перспективы для детального изучения возможности применения пептидов в гериатрической практике для коррекции функций, нарушенных при старении организма.

Положения выносимые на защиту

1. Вилон и эпиталон обладают регуляторным действием на клетки тимуса in vitro, изменяя экспрессию активационных антигенов CD54, HLA-DR, CD69 на их поверхности.

2. Вилон и эпиталон проявляют геропротекторные свойства при старении культур клеток тимуса человека, ослабляя апоптоз и усиливая пролиферацию ТЭК.

3. Вилон стимулирует репаративные процессы в тимусе крыс при ускоренном (радиационном) старении.

4. Вилон и эпиталон могут рассматриваться как потенциальные иммуно- и геропротекторы.

Связь с научно - исследовательской работой Института

Диссертационная работа является темой, выполняемой по основному плану ПИР Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, 7 глав, выводов и указателя литературы. Глава 1 (обзор литературы) представляет собой анализ данных литературы по функциональной морфологии тимуса и роли пептидов в регуляции иммунных и эндокринных функций железы. Глава 2 посвящена описанию материалов и методов, используемых в данном исследовании. Главы 3-6 представляют собственные экспериментальные данные изучения эффектов действия пептидов на ТЭК, тимоциты, периферические Т-лимфоциты и на структурно-функциональную организацию тимуса в модели преждевременного старения in vivo. В главе 7 обсуждаются полученные результаты. Текст диссертации изложен на 119 страницах, содержит 15 таблиц, иллюстрирован 26 рисунками. Список литературы содержит 129 источников, из которых отечественных - 82.

Заключение диссертации по теме «Геронтология и гериатрия», Полякова, Виктория Олеговна

выводы

Вилон и эпиталон усиливают экспрессию активационных антигенов CD54, HLA-DR на поверхности тимоцитов человека и ослабляют ее на поверхности ТЭК. Оба пептида ослабляют экспрессию раннего активационного антигена CD69 на поверхности тимоцитов. Вилон усиливает, а эпиталон ослабляет экспрессию CD69 на поверхности ТЭК.

Вилон и эпиталон ослабляют апоптоз тимоцитов. Эпиталон усиливает апоптоз периферических лимфоцитов, особенно активационный апоптоз Т-клеток. Вилон усиливает пролиферацию ТЭК человека, сниженную в результате длительных их пассажей, т.е. при старении in vitro культур ТЭК.

Вилон и эпиталон усиливают секрецию цитокинов ТЭК человека и ослабляют индуцированную секрецию этими клетками тимулина. При действии на активированные Т-клетки вилон и эпиталон ослабляют выработку ИЛ-4, практически не влияя на выработку ИФНу.

Вилон стимулирует репаративные процессы в вил очковой железе крыс при преждевременном (радиационном) старении, что связано со специфическим восстановлением микроокружения и межклеточного взаимодействия в органе.

Вилон обладает выраженным стимулирующим влиянием на гуморальный и клеточный иммунитет, усиливает пролиферативную активность тимоцитов ускоряя дифференцировку Т- и В- лимфоцитов и усиливая миграцию лейкоцитов. Эти эффекты особенно выражены при преждевременном (радиационном) старении тимуса.

Полученные данные позволяют рассматривать вилон и эпиталон как потенциальные иммуно- и геропротекторы, усиливающие пролиферативные, репаративные и компенсаторно-адаптационные процессы в основном органе иммунной системы - тимусе.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Полякова, Виктория Олеговна, 2003 год

1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. Руководство. М.: Медицина, 1990. 384с.

2. Акоев И.Г. Проблемы постлучевого восстановления. М.: Атомиздат, 1970. 250с.

3. Анисимов В.Н., Кветной И.М., Комаров Ф.И. и соавт. Мелатонин в физиологии и патологии желудочно-кишечного тракта. М.: Советский спорт, 2000. 184 с.i

4. Анисимов В.Н., Соловьев М.В. Эволюция концепций в геронтологии. Эскулап, 1999. 129 с.

5. Анисимов В.Н., Хавинсон В.Х., Заварзина Н.Ю. и соавт. Влияние пептида эпифиза на показатели биологического возраста и продолжительности жизни мышей // Рос. физиологический журн. 2001. Т. 87, № 1. С. 125-136.

6. Анисимов В.Н., Хавинсон В.Х., Морозов В.Г. Роль пептидов эпифиза в регуляции гомеостаза: 25-летний опыт исследования // Успехи соврем, биологии. 1993. Т 113, №6. С. 752-762.

7. Бабаева А.Г. Кроветворные и лимфоидные органы. Структурные основы адаптации нарушенных функций: Руководство / Ред. Д.С. Саркисов. М., Медицина. 1987. С. 328-342.

8. Быков В.Л. Частная гистология человека. СПб.: СОТИС, 1997. 207 с.

9. Банков В П;, Петкова Л.Б. Вклочковая железа. М.: Медицина, 1974. 235 с.fc 106

10. Васин М.В., Чернов Г. А., Королева JI.B. и др. К механизму противолучевого действия индралина // Радиац. биология. Радиоэкология.1996. Т. 36, вып. 1.С. 36-48.

11. Войткевич А.А., Полуэктов А.И. Регенерация надпочечной железы. М.: Медицина, 1970. 251 с.

12. Галактионов В.Г. Очерки эволюционной иммунологии. М.: Наука, 1995. 256 с.

13. Гистология / Под ред. Э.Г.Улумбекова, Ю.А.Челышева. М.: Медицина, 1998. 960 с.

14. Гончаренко Е.Н., Кудряшов Ю.Б. Химическая защита от лучевого поражения. М.: МГУ, 1985. 247с.

15. Дедов В.И., Дедов И.И., Степаненко В.Ф. Радиационная эндокринология. М.: Медицина, 1993. 208 с.

16. Зуфаров К. А., Хамидов Д. Д. Нейроэндокринная система при экспериментальных воздействиях на организм. Ташкент, 1971. 330с.

17. Иванов А.А., Клемпарская Н.Н., Шальнова Г.А., и др. Противолучевые щ эффекты иммуноглобулинов. М.:Энергоатомиздат, 1990. 176 с.

18. Иванов А. А., Кузнецов В.П., Уланова A.M. Противолучевые терапевтические свойства лейкинферона // Радиац. биология. Радиоэкология. 1998. Т. 38, вып. 1. С. 3-8.

19. Иванов А.Е., Куршакова Н.Н., Шиходыров В.В. Патологическая анатомия лучевой болезни. М.Медицина, 1981. 303с.т107

20. Кветной И.М., Попучиев В.В. и др. Изучение общерегуляторнош и компенсаторно-адаптационного действия препаратов «эпиталамин» и «эпиген» на клеточный и тканевой гомеостаз после эпифизэктомии (Отчет) // Обнинск. 1998. 59с.

21. Кветной И.М., Южаков В.В. и др. Изучение пептида эпифиза «эпигена» и пептида вилочковой железы «вилона» на клеточную репарацию слизистой оболочки кишечника и других органов после радиационного повреждения (Отчет) // Обнинск. 1998. 64с.

22. Кветной И.М., Южаков В.В. Окрашивание ткани эндокринных желез и элементов АПУД-системы // Микроскопическая техника: Руководство / Ред.: Д.С.Саркисов, Ю.Л.Перов. М.: Медицина, 1996. С. 375-418.

23. Киселева Е.П., Огурцов Р.П., Попова О .Я. и др. Сравнительная характеристика двух пептидных иммуномодуляторов // Иммунология. 1999. Т. 36, №2. С. 23-26.

24. Кмелева 3. Вилочковая железа. М.: Медицина, 1984. 105 с.

25. Клименко Н.А., Павлова Е.А. Реакция тучных клеток на общее облучение // Радиац. биология. Радиоэкология. 1997. Т. 37, вып. 3. С. 395-398.

26. Коноплянников А.Г. Радиобиология стволовых клеток. М.: Энергоатомиздат, 1984. 120 с.

27. Коноплянников А.Г. Молекулярные и клеточные механизмы поздних лучевых повреждений // Радиац. биология. Радиоэкология. 1997. Т. 37, вып. 4. С. 621-628.

28. Корогодин В.И. Проблемы пострадиационного восстановления. М.: Атомиздат, 1966.115 с.

29. Краевский Н.А. Острая лучевая болезнь // Патологическая анатомия радиационных поражений. Кн.2. М.:Медгиз5 1987, С. 17-26.

30. Кудряшов Ю.Б. Лучевое повреждение "критических систем" // Лучевое поражение (острое лучевое поражение, полученное в эксперименте). М.:Изд-во МГУ, 1987. С. 5-72.

31. Кудряшов Ю.Б. О химической защите от ионизирующей радиации низкой интенсивности // Радиац. биология. Радиоэкология. 1997. Т. 37, вып. 4. С. 673-675.

32. Легеза В.И., Владимиров В.Г. Новая классификация профилактических противолучевых средств // Радиац. биология. Радиоэкология. 1998. Т. 38, вып. 3. С. 416-425.

33. Лобанок Л.М., Малыхина А.П. Эффекты пролонгированного гамма-облучения и гипоксии на биоэлектрическую активность клеток миокарда //Радиац. биология. Радиоэкология. 1998. Т. 38, вып. 2. С. 201-206.

34. Мамаев Н.Н., Мамаева С.Е., Либуркина И.Л., Козлова Т.В., Медведева Н.В., Макаркина Г.Н. Активность ядрышковых организаторов нормальных и лейкозных клеток костного мозга человека // Цитология. 1984. Т. 26, №1. С. 46-51.

35. Мамаев Н.Н., Мамаева С.Е. Структура и функция ядрышкообразующихрайонов хромосом: молекулярные, цитологические и клинические аспекты // Цитология. 1992. Т. 34, №10. С. 3-25.

36. Мамаева С.Е. Закономерности кариотипической эволюции в культуре // Цитология. 1996. Т. 38, №8. С. 787-814.щ 39. Мороз Б.Б., Кендыш И.Н. Радиобиологический эффект и эндокринныефакторы. М.: Атомиздат, 1975. 230 с.

37. Морозов В.Г., Хавинсон В.Х. Влияние экстракта из тимуса на процессы заживления ожоговых ран в эксперименте // Эксперим. Хирургия и анестезиология. 1974. № 2. С.49-51.

38. Морозов В.Г., Хавинсон В.Х. Влияние экстрактов из гипоталамуса и эпифиза на некоторые функции организма / Матер, научн. конф.щ 109

39. Слушателей Военно-медицинской академии им. С.М. Кирова. Л., 1971. -С.127-128

40. Морозов В.Г., Хавинсон В.Х. Вьщеление из костного мозга, лимфоцитов и тимуса полипептидов, регулирующих процессы межклеточной кооперации в системе иммунитета // Докл. АН СССР. 1981. Т.261, №1. С. 235-239.

41. Морозов В.Г., Хавинсон В.Х. Молекулярные механизмы биорегуляции генетической активности и клеточного метаболизма // Тез. докл. XVIII Всесоюз. съезда терапевтов. М.: Медицина, 1981. Т. 1. С. 78-80.

42. Морозов В.Г., Хавинсон В.Х. Новый класс биологических регуляторов многоклеточных систем цитомедины // Успехи соврем, биологии. 1983. Т. 96, № 3. С. 339-346.

43. Морозов В.Г., Хавинсон В.Х. Роль клеточных медиаторов (цитомединов) в регуляции генетической активности // Изв. АН СССР. Сер. биол. 1985. № 4. С.581-587.

44. Морозов В.Г., Хавинсон В.Х., Малинин В.В. Пептидные тимомиметики. С-Пб: Наука, 2000. 158 с.

45. Москалев Ю.И. Отдаленные последствия воздействия ионизирующих излучений. М.: Медицина, 1991. 464 с.

46. Ноздрачев А. Д., Баженов Ю. И., Баранникова И. А., Батуев А. С. и др. Начала физиологии: Учебник для вузов / Под ред. акад. А. Д. Ноздрачева. СПб.: Издательство «Лань», 2001. 1088 с.

47. Никонова М.Ф., Литвина М.М., Варфоломеева М.И. и др. Апоптоз и пролиферация как альтернативные формы ответа Т-лимфоцитов на стимуляцию //Иммунология. 1999. №2. С.20-23.

48. Полак Дж., Ван Норден С. Введение в иммуноцитохимию: современные методы и проблемы. М.: Мир, 1987. 74с.Ш110

49. Попучиев В.В., Яковлева Н.Д., Кита К. и др. Ультраструктура тимуса после у-облучения в условиях ингибирования стероидогенеза //Архив патологии. 2000. № 5. С. 39-43.

50. Райхлин Н.Т., Букаева И.А., Пробатова Н.А., Смирнова Е.А., Тупицын Н.Н., Шолохова Е.Н. Ядрышковый организатор как маркер степени злокачественности и прогноза неходжкинских злокачественных лимфом // Архив патологии. 1996. Т. 58, № 4, С. 22-28.

51. Ромейс Б. Микроскопическая техника. М.: Медицина, 1954. 212 с.

52. Савина Н.П. Иммунноэндокринный гомеостаз у мышей после локального облучения органов иммунной и эндокринной систем // Радиац. биология. Радиоэкология. 1996. Т. 36, вып. 1. С. 68-77.

53. Савина Н.П. Ярилин А.А. Влияние локального облучения областей тимуса, гипоталамуса, гипофиза и гонад мышей на клеточность аутологичного и трансплантированного тимуса // Радиац. биология. Радиоэкология. 1995. Т. 35, вып. 4. С. 486-493.

54. Самбур М.Б., Калиповская Л.П., Мельников О.Ф. и др. Морфологическая характеристика центральных и периферических органов системыиммунитета крыс в динамике адаптации к внешнему гамма-облучению //

55. Радиац. биология. Радиоэкология. 1998. Т. 38, вып. 3. С. 191-200.1. Ь.

56. Саркисов Д.С., Аруин Л.И. Обновление структур организма // Структурные основы адаптации и компенсации нарушенных функций: Руководство / Ред. Д.С. Саркисов М.: Медицина, 1987. С. 20-36.

57. Смирнов B.C., Хавинсон В.Х., Яковлев Г.М., Новиков B.C. Коррекцияррадиационных иммунодефицитов.Спб.: Наука, 1992. 32с.

58. Степанова Е.Н. Надпочечники // Структурные основы адаптации, нарушенных функций: Руководство / Ред. Д.С. Саркисов М.: Медицина, 1987. С. 310-319.

59. Стрелин Г.С., Ярмоненко С.П. Процессы восстановления в облученном организме // Пострадиационная репарация. М.: Атомиздат, 1970. С. 214313.

60. Стручко Г.Ю., Меркулова Л.М., Сергеева В.Е., Стоменская И.С. Реакция биоаминсодержащих структур тимуса у крыс на экспериментальное удаление селезенки // Иммунология. 2000. №2. С.13-16.

61. Турдыев А.А., Александров В.В., Усманов Р.Б. и др. Гемо- ииммунностимулирующий эффект экстракта клеток крови среднеазиатской черепахи // Радиац. биология. Радиоэкология. 1998. Т. 38, вып. 2. С. 206209.

62. Тяжелова В.Г. Кинетический принцип в межвидовых экстраполяциях. М.: Наука, 1988. 194 с.

63. Хавинсон В.Х., Морозов В.Г. Пептиды эпифиза и тимуса в регуляции старения. СПб: Фолиант, 2001.158 с.

64. Хавинсон В.Х., Анисимов В.Н. Синтетический пептид эпифиза увеличивает продолжительность жизни и угнетает развитие спонтанных опухолей у мышей // Докл. АН. 2000. Т.373, № 4. С.567-569.

65. Хавинсон В.Х. // Выделение из эпифиза физиологически активных веществ и изучение их влияния на перевиваемые опухоли и некоторые функции организма.- Автореф. Дис. кмн, JL, 1978, 24с.

66. Хавинсон В.Х., Мыльников С.В. Влияние тетрапептида эпифиза на состояние антиоксидантной защиты у Drosophila melanogaster // Бюлл. экспер. биол. и медицины. 2000. Т. 129, №4. С.420-422.

67. Хавинсон В.Х., Рыбалкина Е.Г., Малинин В.В., Пиванович И.Ю., Шанин С.Н., Корнева Е.А. Влияние коротких пептидов на реакцию бласттрансформации тимоцитов и процесс сигнальной трансфункции по сфингомиелиновому пути // БЭБиМ. 2002. №5. С. 574-578.

68. Хавинсон В.Х., Чалисова Н.И., Морозов В.Г. Малинин В.В. Роль пептидов тимуса в регуляции рака лимфоидной ткани у крыс разного возраста // Докл. АН. 1999. Т. 369, № 5. С. 701-703.

69. Чалисова Н.И., Хавинсон В.Х., Пеннияйнен В.А., Григорьев Е.И. Влияние полипептидных фракций тимуса на развитие органотипической культуры вилочковой железы и селезенки крысы // Цитология. 1999. Т. 41, № 10. С. 889-894.

70. Шехтер А.Б. Окрашивание соединительной и мышечной тканей // Микроскопическая техника: Руководство / Ред.: Д.С.Саркисов, Ю.Л.Перов. М.: Медицина, 1996. С. 419-445.

71. Шехтер А.Б., Серов В.В. Воспаление и регенерация // Воспаление. Руководство для врачей / Ред.: Серов В.В. М.: Медицина, 1995. С. 152173.

72. Шурлыгина А.В., Ковшик И.Г., Вербицкая JI.B., Труфакин В.А. Хронозависимое влияние введения ИЛ-2 на соотношение субпопуляций клеток тимуса и селезенки мышей // Иммунология. 2000. №1.С.21-24.

73. Южаков В.В., Кветной ИМ. APUD-механизм в эндокринных и неэндокринных клетках. Возможное значение биогенных аминов в патогенезе пострадиационных дисфункций // Хирургия эндокринных желез. СПб, 1995. С. 211-213.

74. Ярилин А.А., Беляков И.М. Тимус как орган эндокринной системы // Иммунология. 1996. № 1. С. 4-10.

75. Ярилин А.А. Коррекция эндогенной выработки гормонов тимуса. Обоснование нового подхода к иммунореабилитации, иммуннорегуляции // Int. J. on Immunorehabilitation. 1998. № 10. P.8-17.

76. Ярилин А.А., Основы иммунологии. M.: Медицина, 1999. 607с.

77. Ярилин А.А. Радиация и иммунитет. Вмешательство ионизирующих излучений в ключевые иммунные процессы // Радиационная биология. Радиоэкология. 1999. Т. 39, № 1, С. 181-189.

78. Ярмоненко С.П. Радиобиология человека и животных. М.: Высшая школа, 1985. 424 с.• 83. Aspinal R., Andrew D. Thymic atrophy in the mouse is a soluble problem of the thymic environment // J.Vaccine. 2000. Vol 18. P. 1629-1637.

79. Bach M.A., Bach J.F. Studies on the age-related decrease of thymic secretion and its consequences on T-cell function // Gerontology. 1979. Vol. 25. P. 159160.

80. Beetz A., Messer G., Oppel Т., van Beuningen D., Peter R.U., Kind P. Induction of interleukin 6 by ionizing radiation in a human epithelial cell line: control by corticosteroids // Int. J. Radiat. Biol. 1997. Vol. 72, N 1. P. 33-43.

81. Bellamy D. The thymus in relation to problems of cellular growth and aging // Gerontologia. 1973. Vol. 19. P. 162-184.

82. Berthiaume F., Aparicio C.L., Eungdamroung J., Yarmush M.L. Age- and disease-related decline in immune function: an opportunity for "thymus-boosting" therapies // Tissue Eng. 1999. V. 5, № 6. P. 499-514.

83. Bodey В., Bodey B.Jr., Siegel S.E., Kaiser H.E. Involution of the mammalian thymus, on of the leading regulators of aging // In Vivo. 1997. Vol. 11, N 5. P. 421-440.

84. Bodey В., Bodey B.Jr, Siegel S.E., Kaiser H.E. Review of thimic hormones in cancer diagnosis and treatment // Internal J. Immunopharm. 2000. Vol.22. P. 261-273.

85. Bukaeva I., Smimova E., Probatova N., Baronin A., Makanin M., Raikhlin N. Diagnostic value of AgNORs in endocrine tumours: A study a series of thyroid and adrenal cortical tumours // Virchows Archiv. 2001. Vol. 439, N 3. P. 256258.

86. Casarett G,W. Ratiation histopathology // Boca Raton: CRC Press. 1980. Vol. 1. P. 160- 176.

87. Conolly K.M., Bogdanffy M.S. Evaluation of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) as an endogenous marker of cell proliferation in rat liver: a dual-stain comparison with 5-bromo-2'-deoxyuridine // J. Histochem. Cytochem. 1993. Vol. 41, N1. P. 1-6.

88. CrocKer J. Nucleolar organizer regions // Curr. Top. Pathol. 1990. Vol. 82. P. 91-149.

89. Dardenne M. Role of thymic peptides as transmitters between the neuroendocrine and immune systems // J.Ann.Med. 1999. Vol. 31. P. 34-39.

90. Derenzini M. Rationale for the use ofinterphase AgNOR parameters m tumour pathology // Virchows Archiv В. 1995. Vol. 427. P. 331-333.

91. Derenzini M., Pession A., Trere D. Quantity of nucleolar silver-stained proteins is related to proliferating activity m cancer cells // Lab. Invest. 1990. Vol. 63. P. 137-140.

92. Derenzini M., Trere D. Importance of inter phase nucleolar organizer regions m tumor pathology //'Virchows Arch. 1991. Vol. 61. P. 1-8.

93. Derenzini M., Sirri V., Trere D., Ochs R.L. The quantity of nucleolar proteinsif"nucleolin and protein B23 is related to cell doubling time in human cancer cells ~-//Lafc-lnvest. 1995. Vol. 73, N 4. P. 497-502.

94. Feuerstein N., and.Mond J.J. "Numatrin", a nuclear matrix protein associated with induction of proliferation in В lymphoeytes // J. of Biological Chemistry. 1987. Vol. 262, N23. P. 11389-11397.

95. Galand P., Degraef C. Cyclin PCNA immunostaining as an alternative to tritiated thymidine pulse labelling for marking S phase cells in paraffin sections from animal and human tissues // Cell & Tissue Kinetics. 1989.Vol. 22, N5. P. 383-392.

96. Ginaldi L, De Martinis M, D'Ostilio A. et al. The immune system in the elderly: II. Specific cellular immunity // Immunol Res. 1999. Vol. 20, N 2. P. 109-115.

97. Goya RG., Bolognani F. Homeostasis, thymic hormones and aging // Gerontology. 1999. Vol. 45. P. 174-178.

98. Hadden J.W. Thymic endocrinology // Ann N Y Acad Sci. 1998. Vol. 840, N 1. P. 352-358.

99. Hernandez-Verdun D. The nucleolus today // J. Cell Sci. 1991. Vol. 99. P. 465471.

100. Hernandez-Verdun D., Roussel P. Cell biological basis of AgNOR staininy // Virchows Archiv B. 1995. Vol. 427. P. 326-327.

101. Hirokawa K. The thymus and aging.- In: Immunology and aging. // New York; London. 1977. P.51-72.

102. Howell W.M., Black D.A. Controlled silver-staining of nucleolus organizer regions with a protective colloidal developer: a one step method // Experientia. 1980. Vol. 36, N8. P.-1014-1015.

103. Kvetnoy I.M., Yuzhakov V.V., Molotkov A.O., et al. Diffuse neuroendocrine system: structural and functional effects of radiation injury to APUD-cells // Scanning Micr. 1996. Vol.10, N 1. P. 1-12.

104. Morozov V.G., Khavinson V. Kh. Natural and synthetic peptides as therapeutics for immune dysfunction // Int. J. Immunopharmacology. 1997. Vol. 19, N9/10. P. 501-505.

105. Nabarra В., Andrianarison I., Ultrastructural study of thymic microenvironment involution in aging mice // Exp Gerontol. 1996. Vol. 31, N 4. P. 489-506.

106. Oberfield S.E., Nirenberg A., Allen J.C., Cohen H., Donahue В., Prasad V., Schiff R., Pang S., Ghavimi F., David R., Chrousos G., Sklar C. Hypothalamic-pituitary-adrenal function following cranial irradiation // Horm. Res. 1997. Vol. 47, N1. P. 9-16.

107. Ouyang Q., Cicek G., Westendorp R.G.J, et al. Reduced INF-y production in elderly people following in vitro stimulation with influenza vaccine and endotoxin // Mech. Age. Dev. 2000. Vol. 121. P. 131-137.

108. Pawelec G., Effros R.B., Caruso C. et al. T-cells and aging //Frontiers in Bioscience. 1999. Vol. 4. P. 216-269.

109. Perlstein R.S., Mehta N.R., Mougey E.H., Whitnall M.H., Neta R. Whole-body irradiation transiently diminishes the adrenocorticotropin response to recombinant human interleukin-1 alpha // Radiat. Res. 1995. Vol. 141, N3. P. 336-341.

110. Ropke C. Thymic epithelial cell culture // Microsc. Res.& Techn. 1997. Vol. 38, N. 3. P. 276-286.

111. Roussel P., Andre Ch., Comai L., and Hernandez-Verdun D. The r DNA transcription machinery is assembled during mitosis in active NORs and absent in inactive NORs. // J. of Cell Biol. 1996. Vol.133, N 2. P. 235-246.

112. Roussel P., Hemandez-Verdun D. Identification of AgNOR proteins markers of proliferation related to ribosomal gene activity // Exp. Cell Res. 1994. Vol. 214, N 2. P. 465-472.

113. Sirri V., Pession A., Trere D., Montanaro L., Derenzini M. Proportionally constant quantitative transmission of nucleolin and protein B23 in cycling cancer cells // J. Clin. Pathol. 1995. Vol. 48. P. 264-268.

114. Tollervey D. Trans-acting factors in ribosome synthesis I I Exper. Cell. Res. 1996. Vol. 229. P. 226-232.

115. Wachtler F., Ellinger A., Schwarzacher H.G. Nucleolar changes in human phytohaemagglutinin-stimulated lymphocytes // Cell Tissue Res. 1980. Vol. 213. P. 351-360.

116. Wachtler F., Hopman A.H.N., Wiegant J. and Schwarzacher H.G. On the position ofhucleolus organizer regions (NORs) in interphase nuclei. Studies with a new, non-autoradiographic in situ hybridization method // Exp. Cell Res. 1986. Vol. 25. P. 227-240.

117. Wachtler F., and Stahl A. The Nucleolus: a structural and functional interpretation // Micron. 1993. Vol. 24, N 5. P. 473-505.

118. Wang J., Klein J.R. Hormone regulation of murine T cells: potent tissue-specific immunosuppressive effects of thyroxine targeted to gut T cells // Int. Immunol. 1996. Vol. 8, N2. P. 231-235.

119. Wang X., Matsumoto H., Okaichi K., Ohnishi T. p53 accumulation in various organs of rats after whole-body exposure to low-dose X-ray irradiation // Anticancer Res. 1996. Vol. 16, N4A. P. 1671-1674.