Возрастная динамика экспрессии гормонов в тимусе человека тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.03, кандидат биологических наук Чернышова, Елена Викторовна

• Чернышова, Елена Викторовна
• кандидат биологических наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Чернышова, Елена Викторовна

Список сокращений.

Введение.

Обзор литературы.

Глава 1. Современные представления о тимусе как нейроиммуноэндокринном органе.

1.1. Анатомия, особенности онтогенеза и гистофизиология тимуса.

1.1.1. Анатомия вилочковой железы.

1.1.2. Особенности развития тимуса в онтогенезе.

1.1.3. Гистофизиология вилочковой железы.

1.1.3.1. Субкапсулярная зона.

1.1.3.2.Кортикальная зона.

1.1.3.3.Медуллярная зона.

1.1.3.4.Внутридольковые периваскулярные пространства.

1.2. Динамика возрастной инволюции тимуса человека.

1.3. Функциональные расстройства тимуса у детей.

1.3.1. Акцидентальная инволюция.

1.3.2. Тимомегалия.

1.4. Функциональная роль нейроиммуноэндокринных взаимодействий в тимусе.

1.5. Особенности экспрессии серотонина в тимусе и ее функциональное значение.

1.6. Экспрессия эндотелина-1 в тимусе и ее значение в деятельности тимуса.

1.7. Особенности экспрессии гормонов инсулина и глюкагона в тимусе.

1.7.1. Экспрессия инсулина в тимусе.

1.7.2. Экспрессия глюкагона в тимусе.

1.8. Экспрессия хромогранина А в тимусе и ее значение в деятельности тимуса.

Результаты собственных исследований.

Глава 2. Материал и методы исследования.

2.1. Характеристика исследуемого материала.

2.2. Обработка стекол.

2.3. Протокол постановки иммуногистохимического (авидин-биотинового) метода.

2.4. Компьютерный анализ микроскопических изображений и статистическая обработка результатов.

Результаты исследования и их обсуждение.

Глава 3. Возрастная динамика экспрессии гормонов в тимусе человека.

3.1. Морфологическая структура тимуса у людей разного возраста.

3.2. Иммуногистохимическое исследование особенностей экспрессии хромогранина А в клетках тимуса людей разного возраста.

3.3. Иммуногистохимическое исследование особенностей экспрессии серотонина в клетках тимуса людей разного возраста.

3.4. Иммуногистохимическое исследование особенностей экспрессии эндотелина-1 в клетках тимуса людей разного возраста.

3.5. Иммуногистохимическое исследование особенностей экспрессии инсулина в клетках тимуса людей разного возраста.

3.6. Иммуногистохимическое исследование особенностей экспрессии глюкагона в клетках тимуса людей разного возраста.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Возрастная динамика экспрессии гормонов в тимусе человека»

Актуальность темы

Тимус является ключевым органом в системе нейроиммуноэндокринной'регуляции, выполняет роль иммунного органа и эндокринной железы, осуществляя при этом важные функции, обеспечивающие структурное и функциональное созревание иммунокомпетентных клеток. Основная функция тимуса направлена на> формирование рециркулирующего пула зрелых Т-лимфоцитов, что включает в себя дифференцировку Т-лимфоцитов (в частности, появление у них антиген-распознающих рецепторов), разделение Т-клеток на субпопуляции и отбор (селекцию) клонов Т-лимфоцитов, способных распознавать чужеродные антигены. Указанные процессы контролируются сигнальными молекулами клеток микроокружения4 путем их влияния на предшественники Т-лимфоцитов и созревающие тимоциты.

Реализуя эндокринную- функцию, тимус способен продуцировать различные биологически активные вещества, играющие ведущую роль не только в иммунологических, но и в других физиологических процессах. В тимусе животных и человека была обнаружена экспрессия хромогранина A [Brelinska R., Ostalska D., Zabel M., 2000], который играет роль кофактора во внутриклеточной продукции гормонов. Также показано, что в тимусе птиц и млекопитающих синтезируется ряд биогенных аминов и пептидных гормонов, характерных для других органов и тканей. Ранее в тимусе была показана экспрессия серотонина, мелатонина, глюкагона, инсулина, гастрина [Гордон Д.С., Сергеева В.Е., Зеленова И.Г., 1982; Milicevic N.M., Appassamy P.M., Glic M., et al., 1994; Kvetnoy I.M., Polyakova V.O., Trofimov A.V., et al., 2003].

Известно, что возрастные изменения тимуса играют ключевую роль в ослаблении системы клеточного и гуморального иммунитета у лиц пожилого и старческого возраста [Полякова В.О., Кветной И.М., Коновалов С.С., и др., 2007]. Сосудистое русло является неотъемлемым компонентом всех органов и играет чрезвычайно важную роль в их функционировании. Таким образом, возрастные изменения сосудов микроокружения могут в значительной степени отразиться на функции тимуса. Основным вазоактивным, гормоном является эндотелии-1, однако данных об экспрессии эндотелина-1 в тимусе в литературе' не обнаружено.

Несмотря на то, что в последнее время большое внимание уделяется изучению эндогенных факторов, препятствующих возрастной инволюции < тимуса, в частности, неспецифических тимусных гормонов, роль неспецифических гормонов в тимусе остается малоизученной, хотя для некоторых показано наличие рецепторов на клетках иммунной системы. Учитывая тот факт, что локальная продукция* гормонов, а также присутствие рецепторов к ним на* иммунокомпетентных клетках могут играть существенную роль в регуляции возрастных изменений в тимусе, верификация и изучение возрастной динамики экспрессии неспецифических гормонов в тимусе является актуальной проблемой современной биогеронтологии.

Цель и задачи исследования.

Целью диссертационного исследования является верификация и изучение возрастной динамики экспрессии гормонов серотонина, эндотелина-1, инсулина, глюкагона и хромогранина А в тимусе человека на разных этапах онтогенеза.

Для достижения указанной цели были поставлены и последовательно решены следующие задачи:

1. Верифицировать экспрессию серотонина, эндотелина-1, инсулина,. глюкагона и хромогранина А в тимусе человека на разных этапах онтогенеза;

2. Изучить возрастную динамику экспрессии серотонина, эндотелина-1, инсулина, глюкагона и хромогранина А в тимусе человека;

3. Выявить корреляции между динамикой экспрессии указанных гормонов и старением у человека;

4. Оценить вклад возрастных изменений экспрессии исследуемых гормонов в процессы старческой инволюции тимуса.

Научная новизна

В работе впервые верифицирована экспрессия гормонов -хромогранина А, серотонина, инсулина, глюкагона и эндотелина-1 в тимусе человека на всех этапах онтогенеза и установлена возрастная динамика их паракринной секреции. Установлена гистогенетическая и топографическая-вариабельность секреции указанных гормонов на всех этапах онтогенеза и показана возможность выработки гормонов во всех клеточных и тканевых компартментах тимуса.

Впервые зарегистрирована- корреляция между интенсивностью экспрессии гормонов и возрастом, при этом показано, что гормональная активность тимуса продолжает сохраняться на высоком уровне даже при возрастной инволюции органа. Усиление экспрессии ключевого нейроэндокринного маркера хромогранина А в тимусе человека при возрастной инволюции органа свидетельствует о сохранении гормональной функции тимуса в стареющем организме. Установлено, что уровни экспрессии серотонина и глюкагона в тимусе человека постоянны на всех этапах онтогенеза, тогда как интенсивность экспрессии эндотелина-1 и инсулина достоверно увеличивается с возрастом.

Эти факты свидетельствуют о компенсаторной гиперфункции тимуса для гормонотропной регуляции процессов иммуногенеза при старении. Стабильный уровень экспрессии глюкагона и усиление синтеза инсулина в тимусе человека в процессе старения отражает их важное значение'не только в локальной регуляции иммуногенеза, но и как общегомеостатических гормонов, играющих значительную роль в эндогенных геропротекторных механизмах.

Достоверное усиление экспрессии вазоактивного и иммунотропного гормона эндотелина-1 в тимусе человека с возрастом, наряду с сохранением высокого уровня экспрессии серотонина, также обладающего иммунотропными свойствами, является важным, звеном в сигнальных механизмах поддержания иммунных процессов у пожилых и» старых людей.

Результаты исследования свидетельствуют о важной роли неспецефических гормонов в паракринной регуляции развития и функционирования тимуса человека на всех этапах онтогенеза, в том числе при старении.

Практическая значимость

Впервые зарегистрирована возрастная компенсаторная эндокринная' гиперфункция тимуса, направленная на обеспечение гормонотропной' регуляции процессов иммуногенеза при старении. Результаты исследования^ свидетельствуют о важной роли тимуса не только как иммунного, но и как эндокринного органа, обеспечивающего поддержание гормональной регуляции в стареющем организме, несмотря на развитие инволюционных процессов. Полученные данные открывают перспективы для разработки подходов к стимуляции угасающих иммунных процессов при старении через регуляцию локальной секреции гормонов в тимусе человека.

Положения, выносимые на защиту

1. Тимус человека является активно функционирующим эндокринным органом. На всех этапах онтогенеза в тимусе зарегистрирована экспрессия хромогранина А, серотонина, инсулина, глюкагона, эндотелина-1.

2. Экспрессия указанных гормонов гистогенетически вариабельна и верифицируется в различных клеточных и тканевых элементах тимуса: тимоцитах, эпителиальных клетках, клетках микроокружения, сосудах, структурах жировой и соединительной ткани.

3. Гормональная^ активность, тимуса' не подвергается возрастной инволюции. Для хромогранина А, эндотелина-1 и инсулина < зарегистрировано даже усиление их секреции с возрастом.

4. Возрастная. эндокринная гиперфункция тимуса носит компенсаторный характер и направлена на обеспечение гормонотропнойрегуляции процессов иммуногенеза при старении.

Связь с научно-исследовательскошработой Института

Диссертационная* работа является логическим продолжением, исследований, проводимых при выполнении магистерской диссертации В; лаборатории клеточной биологии и патологии СПб ИБГ СЗО РАМН.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, 3 глав, выводов и указателя литературы. Глава 1 (обзор литературы) представляет собой анализ данных литературы по функциональной морфологии тимуса и роли гормонов в регуляции иммунных и эндокринных функций железы. Глава 2 посвящена описанию материалов и методов, используемых в данном исследовании. Глава 3 представляет собственные экспериментальные данные изучения возрастной динамики экспрессии гормонов в тимусе человека. В разделе «заключение» обсуждаются полученные результаты. Текст диссертации изложен на 128 страницах, содержит 8 таблиц, иллюстрирован 37 рисунками. Список литературы содержит 149

Заключение диссертации по теме «Эндокринология», Чернышова, Елена Викторовна

7. Результаты исследования свидетельствуют о важной роли неспецефических гормонов в паракринной регуляции развития и функционирования тимуса человека на всех этапах онтогенеза, в том числе при старении.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Проведено сравнительное исследование внутритимусной экспрессии неспецифических гормонов на разных этапах онтогенеза человека. Гормон хромогранин А является классическим маркером нейроэндокринных клеток, анализ его экспрессии, помимо оценки уровня самого хромогранина А, дает возможность оценить общий гормональный статус ткани. В нашем исследовании хромогранин А был выявлен как в тимусах детей, так и в области тимуса людей 60-90 лет и более, причем на фоне уменьшения нейроэндокринных клеток тимусе, подвергшемся возрастной инволюции, оптическая плотность окрашивания к хромогранину А достоверно возрастала, что свидетельствует о важной и еще не установленной функции самого гормона в поддержании иммунного статуса организма.

Серотонин демонстрирует стимулирующее влияние на пролиферацию тимоцитов в корковом веществе тимуса. В нашем исследовании уровень экспрессии серотонина оказался одинаковым у плодов, умерших антенатально, детей первого года жизни, людей пожилого возраста, старческого возраста и долгожителей.

Можно предположить, что локально экспрессируемый инсулин вовлечен в поддержание функций иммунной системы после возрастной инволюции тимуса. Гормон эндотелии-1, помимо общеизвестных вазоактивных эффектов, вовлечен в развитие тимусных эпителиальных клеток на ранних этапах эмбриогенеза. Также, этот гормон стимулирует пролиферацию тимоцитов. Нами зарегистрирована достоверное усиление экспрессии гормона в тимусе человека при старении.

Серотонин и эндотелии-1 обладают вазоактивными свойствами, способны регулировать кровоснабжение тимуса и стимулировать иммунную функцию органа благодаря иммунотропным свойствам. Оба гормона экспрессируются в тимусе на одинаково высоком уровне на ранних этапах развития и в преклонном возрасте. Для эндотелина в нашем исследовании установлено достоверное усиление экспрессии в пожилом возрасте и после 90 лет. Учитывая присущие серотонину и эндотелину-1 иммунотропные свойства, основным из которых является активация фунуции Т-лимфоцитов, можно предположить, что при возрастной инволюции тимуса усиление экспрессии этих гормонов отражает их комплексную роль, направленную на поддержание иммунитета в стареющем организме.

Считавшиеся ранее тканеспецифичными гормоны инсулин и глюкагон сегодня обнаружены во многих тканях организма млекопитающих (Brimnes М.К., Jensen Т., Jorgensen T.N. et al., 2002; Kojima H., Fujimiya M., Matsumura K. et al., 2004). Внутритимусная экспрессия этих гормонов чрезвычайно важна на ранних этапах развития организма, когда происходит становление иммунной толерантности к антигенам собственного организма. Инсулину отводят стимулирующее влияние на пролиферацию тимоцитов (Freitas C.S., Dalman S.R., Abdelhay Е., 2004). В поддержку этих данных выступают и наши результаты, выявляющие достоверное усиление экспрессии инсулина, в тимусе человека с возрастом. Влияние глюкагона на клетки иммунной системы остается мало изученным, хотя рецепторы к этому гормону уже обнаружены на клетках лимфоидного и миелоидного ряда. Нами выявлен неизменный уровень экспрессии глюкагона в тимусе человека на этапе внутриутробного развития, в первый год жизни, после 60 лет, после 75 лет и у долгожителей.

Таким образом, результаты проведенных нами исследований демонстрируют, что локально экспрессируемые в тимусе гормоны важны на всех этапах онтогенеза человека, играя важную роль не только в становлении иммунной аутотолерантности, но и в осуществлении паракринной сигнальной регуляции функций тимуса - ключевого органа иммунной и эндокринной систем.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Чернышова, Елена Викторовна, 2008 год

1. Анисимова В.П. Роль морфофункциональных перестроек тимуса в обменно- эндокринных нарушениях организма // Рос. вестник перинатологиии педиатрии-1994—Т.39, №1.-С.35.

2. Балаболкин М.И. Эндокринология.-М: Универсум паблишинг, 1998.-333 с.

3. Белецкая Д.В., Гнездицкая Э.В. Структурно-функциональная организация тимуса // Успехи современной биологии—1986.—Т. 102, вып.1.-С. 25.

4. Быков B.JI. Частная гистология человека / СПб.: Сотис, 1997.-207 с.

5. Банков В.П., Пёткбва Л.Б. Вилочковая железа / М.: Медицина, 1974.-235 с.

6. Галактионов В.Г. Очерки эволюционной иммунологии / М.: Наука, 1995.-256 с.

7. Гистология / Под ред. Э.Г. Улумбекова, Ю.А. Челышева.-М.: Медицина, 1998.-960 с.

8. Голованова Т.А., Кривохарченко A.C., Каулен Д-Р- Роль онтогонистически различных тимоцитов и субпопуляций Т-клеток в высвобождении гуморального лимфоцитарного фактора // Онтогенез—1981 —Т. 12, №1.-С. 27-33.

9. Гордон Д.С., Сергеева В.Е., Зеленова И.Г. Нейромедиаторы лимфоидных органов / Л.: "Наука", 1982. 48 с.

10. Гордон Д.С., Сергеева В.Е., Леонова Л.К., Любовцева Л.А. Взаимодействие нервной и имунной системы / Л., Ростов н/Д, 1990. -94 с.

11. Гордон Д.С., Сергеева В.Е., Смородченко А.Т., Кириллов И.А. Выявление биоаминпродуцирующих клеток в тимусе // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2001. - т. 132, №7. - С. 118-120.

12. Гунин А.Г., Гордон Д.С., Сысоева Е.А., ЗеленоваИ.Т. Морфология и развитие органов имунной системы / М., Пермь: изд. Пермск. мед. ин-та, 1988.-88 с.

13. Ивановская Т.Е., Зайратьянц О.В., Леонова Л.В., Волощук И.Н. Патология тимуса у детей / СПб: СОТИС, 1996.-272 с.

14. Капитонова М.Ю., Кузнецов С.Л., Клаучек C.B., Мохд Измаил З.И., Уллах М., Федорова О.В. Акцидентальная инволюция тимуса в растущем организме при воздействии различных типов стрессоров II Морфология.-2006.-Т.130, №6.-С. 56-61.

15. Кветной И.М., Южаков В.В. Окрашивание ткани эндокринных желез и элементов АПУД-системы, Микроскопическая техника: Руководство / М.: Медицина, 1996.-532 с.

16. Кемилева 3., Вилочковая железа / М., 1984.-105 с.

17. Куклина Е.М., Молекулярные механизмы дифференциации тимоцитов // 0нтогенез.-2003.-Т.34, №5.-С. 342-357.

18. Любовцева Л.А., Гордон Д.С. Биогенные амины в лимфоидных органах//Арх.анат. 1988. - Т.95, №11. - С. 61-64.

19. Медуницын Н.В. Макрофаги лимфоидных органов // Иммунология. 1995. -№5.-С. 17-21.

20. Москалев Ю.И. Отдаленные последствия воздействия ионизирующих излучений / М.: Медицина, 1991.-464 с.

21. Начала физиологии. Учебник для вузов / Под ред. акад. А.Д. Ноздрачева.-СПб.: Лань, 2001.-1088 с.

22. Ноздрачев А.Д., Колосова Л.И, Моисеева А.Б., Рябчикова О.В. Роль периферической нервной системы во взаимодействии иммунной системы с мозгом // Росс Физиол Ж Им И M Сеченова.-2000.-Т.86, №6.-С. 728-742.

23. Перцева М.Н., Шпаков А.О. Консерватизм инсулиновой сигнальной системы в эволюции позвоночных и беспозвоночных животных // Ж Эвол Биохим Физиол.-2002.-Т.З8, №5.-С. 430-441.

24. Полаю Дж., Ван* Норден С. Введение в иммуноцитохимию: современные методы и проблемы / М.: Мир, 1987—74 с.

25. Полякова В.О., Кветной И.М., Хавинсон.В.Х., Марьянович А.Т. Тимус и старение // Успехи Геронтологии—2001.-Вып.8.-С. 50-57.

26. Райхлин Н.Т., Кветной И.М., Осадчук М.А. АРЦГ)-система (общие патологические и онкологические аспекты). / Обнинск, 1993—260 с.

27. Сергеева В.Е. Сезонные изменения аминосодержащих структур тимуса в первый час антигенного-воздействия // Бюл. экспер. биол. -1992.-Т. 113, №3.-С. 311-314.

28. Сергеева В.Е., Гордон Д.С., Гунин А.Г. Сочетание свойств макрофагов и клеток АПУД-серии в моноаминсодержащих премедуллярных клетках тимусной дольки // Морфология. 1994. — Т. 106, №1-3. - С. 159-163.

29. Сергеева В.Е., Кляшева Р.И., Александрова Н.В., Порфирьева С.А. Влияние гидрокортизона на содержание аминов в тимусе // Бюл. экспер. биол. и мед. 1997. - Т. 123, №6. - С. 677-679.

30. Серов В.В., Зайратьянц О.В. Физиология и патология тимуса // Акуш. иГинекол.-1987.-№5.-С. 8-12.

31. Хавинсон В.Х., Кветной И.М., Южаков В.В., Попучиев В.В. Пептидергическая регуляция гомеостаза / СПб.: Наука, 2003.-200 с.

32. Халматова В.Т. Иммунологическая реактивность и состояние активационных маркеров у детей с тимомегалией при острых бронхолегочных заболеваниях // Вестник врача общей практики.-2005.- №1.-С. 21-22.

33. Чернышева М.П. Гормоны животных. Введение в физиологическую эндокринологию / СПб.: "Глаголь", 1995.-530 с.

34. Чистяков Д.А., Дедов И.И. Локус генетической предрасположенности к диабету 1 типа IDDM2 // Сахарный диабет. -1999.- №4.-С. 23-29.

35. Швец И.В. // Вестник российской диабетической ассоциации.-2005.-№1.-С. 11-14.

36. Ярилин А.А., Пинчук В.Г., Гриневич Ю.А. Структура тимуса и дифференцировка Т-лимфоцитов / Киев: Наукова думка, 1991.-237 с.

37. Ярилин А.А. Презентация антигена как запуск иммунного ответа // Усп. Физиол. Наук.-2000.-Т.З, №4.-С. 38-45.

38. Akher N., Robayashi М., Hoshino Т. // Cell. Tissue. Res. 1993. - Vol. 271, №1.-p. 103-106.

39. Ardavin C., Thymic dendritic cells // Immunol. Today. 1997. - Vol. 18. -P. 350-361.

40. Askin D.F., Young S. The thymus gland // Neonatal Network.-2001 .-V20, №8.-P. 7-15.

41. Barst R.J. Sitaxsentan: a selective endothelin-A receptor antagonist, for the treatment of pulmonary arterial hypertension // Expert Opinion on Pharmacotherapy.-2007.-V.8, №1.-P. 95-109.

42. Beetz A., Messer G., Oppel Т., van Beuningen D. Induction of interleukin-6 by ionizing radiation in a human epitelial cell line: control by corticosteroids // Int. J. Radiat.Biol. 1997.-V.72, № l.-P. 33-43.

43. Bhakta N.R., Lewis R.S. Real-time measurement of signaling and motility during T cell development in the thymus // Seminars in immunology.-2005 .-V. 17.-P.411 -420.

44. Brelinska R., Ostalska D., Zabel M. Subtypes of thymic epithelial cells defined by neuroendocrine markers // Histochem Cell Biol.-2000.-Vl 14, №3.-P. 239-244.

45. Brimnes M.K., Jensen T., Jorgensen T.N., Michelsen B.K., Troelsen J., Werdelin O. Low Expression of Insulin in the Thymus of Non-obese Diabetic Mice // Journal of Autoimmunity.-2002.-V.19, №4.-P. 203-213.

46. Cavalotti C., Artico M., Cavalotti D.Occurence of adrenergic nerve fibers and of noradrenaline in thymus gland of juvenile and aged rats // Immunology Letters.-1999.-V.70.-P. 53-62.

47. Chentoufi A.A., Palumbo M., Polychronakos C. Proinsulin expression by Hassall's corpuscles in the mouse thymus // Diabetes.-2004.-V.53, №2.-P. 354-359.

48. Chentoufi A.A., Polychronakos C. Insulin expression levels in the thymus modulate insulin-specific autoreactive T-cell tolerance: The mechanism by which the IDDM2 locus may predispose to diabetes // Diabetes.-2002.-V.51, №5.-P. 1383-1390.

49. Csaba G, Karabelyos c., Inczefl-Gonda A., Pallinger E. Three-generation investigation on serotonin content in rat immune cells long after beta-endorphin exposure in late pregnancy // Horm Metab Res.-2005.-V.37, №3.-P. 172-177.

50. Csaba G., Kovacs P. Perinuclear localization of biogenic amines (serotonin and histamine) in rat immune cells // Cell Biol Int.-2006.-V.30, №11.-P. 861-865.

51. Csaba G., Kovacs P., Buzas E., Mazan M., Pallinger E. Serotonin content is elevated in the immune cells of histidine decarboxylase gene knock-out (HDCKO) mice. Focus on mast cells // Inflammation Research.-2007.- V.56, №2.-P. 89-92.

52. Csaba G., Kovacs P., Pallinger E. Influence of in vitro and in vivo insulin treatment on the hormone (histamine, serotonin, endorphin and triiodothyronine) content of thymus and spleen cells // Life Sci.-2006.-V.78, №10.-P. 1034-1037.

53. Csaba G., Kovacs P., Pallinger E. Changes in the endorphin and serotonin content of rat immune cells during adulthood following maternal exposure to ethanol during pregnancy and lactation // Alcohol.2006.-V.38, №2.-P.lll-116.

54. Csaba G., Kovacs P., Pallinger E. In vitro effect of biogenic amines on the hormone content of immune cells of the peritoneal fluid and thymus. Is there a hormonal network inside the immune system? // Cell Biol Int.2007.-V.31, №3.-P. 224-228

55. De Leeuw F.-E., Jansen G.H., Batanero E., Van Wichen D.F., Huber J., Schuurman H.-J. The neural and neuro-endocrine component, of the human thymus: I. Nerve-like structures // Brain, Behavior, and Immunity.-1992.-V6, №3.-P. 234-248.

56. Dunphy J.L., Taylor R.G., Fuller P.J. Tissue distribution of rat glucagon receptor and GLP-1 receptor gene expression // Mol Cell Endocrinol.-1998.-V.141, №l-2.-P. 179-186.

57. Farr A.G., Dooley J.L., Erickson M. Organization of thymic medullary epithelial heterogeneity: implications for mechanisms of epithelial differentiation // Immunol Rev.-2002.-V.189.-P. 20-27.

58. Ferrari L., Seregni E., Bajetta E. The Biological Characteristics of Chromogranin A and its Role as a Circulating Marker in Neuroendocrine Tumours //Anticancer Res.-1999.-V.19, №4.-P. 3415-3427.

59. Galand P., Degaref C. Cyclin PCNA immunostaining as an alternative to tritiated thymidine pulse labelling for marking S phase cells in parafin sections from animal and human tissues // Cell Tiss. Kinet.-1989.-V.22, №5.-P. 383-392.

60. Geenen V. The thymic insulin-like growth factor axis: involvement in physiology and disease // Horm Metab Res.-2003.-V.35, №11-12.-P. 656-663.

61. Geenen V., Brilot F. Role of the thymus in the development of tolerance and autoimmunity towards the neuroendocrine system // Ann N Y Acad Sci.-2003.-V.992.-P. 186-195.

62. Geenen V., Brilot F., Louis C., Hansenne I., Renard Ch., Martens H. Importance of a thymus dysfunction in the pathophysiology of type 1 ' diabetes //Rev Med Liege.-2005.-V.60, №5-6.-P. 291-296.

63. Ginaldi L, De Martinis M., D'Ostilio A. The immune system in the elderly: 11. Spesific cellular immunity // Immunol. Res.-1999.-V.20, №2. -P. 109-115.

64. Ginda W.J., Gratzl M., Mayerhofer A., Warchol J.B. Chromogranin A immunoreactivity in epithelial cells of the thymus // Folia Histochem Cytobiol.-1996.-V.34, №2.-P. 91-93.

65. Giovanella L., La Rosa S., Ceriani L. Chromogranin-A as a Serum Marker for Neuroendocrine Tumors: Comparison With Neuron-Specific Enolase and Correlation With Immunohistochemical Finding // Int J Biol Markers.-1999.-V.14, №3.-P. 160-166.

66. Goldstein M., Kapur S., Kinkhabwala M. Analysis of failure in living donor liver transplantation: differential outcomes in children and adults // Transplant.-2001 .-V.233, №2.-P. 12-16.

67. Gordon D.S., Sergeeva V.E., Sysoeva L.A., Zelenova I.G. Neuromediator status of lymphoid organs in normal and antigen action // Acta Anatomica. 1984. - V.120, N 1-2. - P. 6-8.

68. Goronzy J.J., Weyand C.M. T cell development and receptor diversity during aging // Current Opinion in Immunology.-2005.-V.17.-P. 468475.

69. Goya R.G., Bolognani F. Homeostasis, thymic hormones and aging // Gerontology.-1999.-V.45 .-P. 174-178.

70. Gray H. Anatomy of the human body.-Philadelphia: Lea&Febiger, 1918.348 p.

71. Hansen L.H., Abrahamsen N., Nishimura E. Glucagon receptor mRNA distribution in rat tissues // Peptides.-1995.-V.16, №6.-P. 1163-1166.

72. Hemandez-Verdun D., Roussel P. Cell biological basis of AgNOR stain //Virchows Archiv B.-1995.-V.427.-P. 326-327.

73. Hendy G.N., Bevan S., Mattei M.G., Mouland AJ. Chromogranin A // Clin Invest Med.-1995.-V. 18, №1.-P. 47-65.

74. Holmdahl R. Aire-ing self antigen variability and tolerance // Eur J Immunol.-2007.-V.37, №3.-P. 598-601.

75. Howell W.M., Black D.A. Controlled silver-staining of nucleoids organizer regions with a protective colloidal developer: on a step method //Experientia.-1980.-V.36, №8.-P. 1014-1015.

76. Jenkinson W.E., Rossi S.W., Jenkinson E.J., Anderson G. Development of functional thymic epithelial cells occurs independently of lymphostromal interactions // Mechanisms of Development.-2005.-V.122.-P. 1294-1299.

77. Jensen P.E. Recent advances in antigen processing and presentation // Natlmmunol.-2007.-V.99, №6.-P. 1041-1048.

78. Jones G.V., Botham C.A., Clarke A.G., Kendall M.D. Immunoreactivity of Neural Crest-Derived Cells in Thymic Tissue Developing under the Rat Kidney Capsule // Brain, Behavior, and Immunity.- 1998.-V. 12, №3.-P. 163-180.

79. Kecha-Kamoun O., Achour I., Martens IT., Collette J., Lefebvre P.J., Greiner D.L., Geenen V. Thymic expression of insulin-related genes in an animal model of autoimmune type 1 diabetes // Diabetes Metab Res Rev.-2001.-V.17, №2.-P. 146-152.

80. Khavinson V.K. Effect of tetrapeptide on insulin biosynthesis« in rats with alloxan-induced diabetes // Bull Exp Biol Med.-2005.-V.140, №4.-P. 452-454.

81. Kojima H., Fujimiya M., Matsumura K., Nakahara T., Hara M., Chan L. Extrapancreatic insulin-producing cells in multiple organs in diabetes // Proc Natl Acad Sci U S A.-2004.-V.101, №8.-P. 2458-2463.

82. Koh W.S., Lee M., Yang K.H., Kaminski N.E. Expression of functional glucagon receptors on lymphoid cells // Life Sci,-1996,-V,58, №9.-P. 741-751.

83. Kont V., Laan M., Kisand K., Merits A., Scott H.S., Peterson P. Modulation of Aire regulates the expression of tissue-restricted antigens //Mol Immunol.-2008.-V.45, №1.-P. 25-33.

84. Kowahara I.,Takan V., Sato O., Maeda T. // Arch. Histol. Cytol. 1992. -Vol. 55, №2.-P. 211-217.

85. Kurihara Y.,Kurihara Hi, Maemura K., Kuwaki T. Impaired development of the thyroid and thymus in endothelin-1 knockout mice // J Cardiovasc Pharmacol. 1995. - № 26, Suppl. 3.- P. 13-16.

86. Kvetnoi I.M., Ingel1 I.E. Hormonal function of nonendocrine cells: role of new biological phenomenon in the regulation of homeostasis // Bull Exp Biol Med.-2000.-V. 130, №11.-P. 1027-1030.

87. Kvetnoy I.M., Polyakova V.O., Trofimov A.V., Yuzhakov V.V. Hormonal: function and proliferative activity of thymic cells in humans: immunocytochemical correlations // Neuroendocrinol. Lett.-2003.-V.24, №3-4.-P. 157-162. <

88. Malendowicz L.K., Brelinska R., De Caro R., Trejer M. Endothelin-1, acting via the A receptor subtype, stimulates thymocyte proliferation in the rat//Life Sci.- 1998.-Vol. 62, №22.-P. 1959-1963.

89. Malendowicz L.K., Macchi V., Brelinska R., Trejer M. Endothelin-1 enhances thymocyte proliferation in monolaterally adrenalectomized rats with contralateral adrenocortical regeneration // Histol Histopathol; — 1998. Vol. 13, № 3. - P. 721-725.

90. Manley N.R. Thymus organogenesis and molecular mechanisms of thymic epithelial cell differentiation // Immunology.-2000.-V. 12.-P. 421428.

91. Manley N.R., Blackburn G.C. A developmental look at thymus organogenesis: where do the non-hematopoietic cells in the thymus come from? // Curr Opin Immunol .-2003 .-V. 15, №2.-P. 225-232.

92. Marchand L., Polychronakos C. Evaluation of polymorphic splicing in the mechanism of the association* of the insulin gene with diabetes // Diabetes.-2007.-V.56, №9.-P. 16-17.

93. Mathews C.E., Pietropaolo S.L., Pietropaolo M. Reduced thymic expression of islet antigen contributes to loss of self-tolerance // Ann N Y Acad Sci.-2003.-V. 1005.-P. 412-417.

94. Milicevic N.M., Appassamy P.M., Glic M, Milicevic E. // Immunobiology. 1994. - Vol. 190, №4-5. - P. 376-380.

95. Misery L. //Neuroimmunobiology. 1998. - Vol. 89, №1-2. - P. 83-87.

96. Moran C.A. Primary neuroendocrine carcinomas of the mediastinum: review of current criteria for histopathologic diagnosis and classification // Semin Diagn Pathol.-2005.-V.22, №3.-P. 223-229.

97. Moroy T., Karsunsky H. Regulation of Pre-T-cell development // Cell Mol Life Sci.-2000.-V.57.-P.957-975.

98. Morozov V.G., Khavinson V.Kh. Natural and synthetic peptides as therapeutics for immune disfunction // Int. J. Immunopharm.-1997.-V.19, № 9-10.-P. 501-505.

99. Nobels F.R., Kwekkeboom D.J., Bouillon R. Chromogranin A: Its Clinical Value as Marker of Neuroendocrine Tumours // Eur J Clin Invest.-1998.-V.28, №6.-P. 431-440.

100. Olangin O.I., Gordon D.S. // Int. J. Immunorehabilit. 1997. - №7. - P/ 167.

101. Oven I., Brdickova N., Kohoutek J., Vaupotic T., Narat M., Peterlin B.M. AIRE recruits P-TEFb for transcriptional elongation of target genes in medullary thymic epithelial cells // Mol Cell Biol.-2007.-V.27, №24.-P.8815-8823.

102. Pallinger E., Csaba G. Effect of serotonin-acting agents on the serotonin content of immune cells. A peculiar observation // Cell Biochem Funct.-2007.-V.25, №5.-P.581-583.

103. Pallinger E., Kovacs P., Csaba G Presence of hormones (triiodothyronine, serotonine and histamine) in the immune cells of newborn rats//Cell Biology International.-2005.-V.29:-P; 826-830.

104. Palumbo M.O., Levi D., Chentoufi A.A., Polychronakos C. Isolation and : characterization of proinsulin-producing medullary thymic epithelial cellclones //Diabetes.-2006.-V.55, №9.-P. 2595-2601.

105. Park Y. Functional evaluation of the type 1 diabetes (T1D) susceptibility candidate genes //Diabetes Res Clin Pract.-2007.-V.77 Suppl l.-P. 110115:

106. Pearse A.G.E. The cytochemistry and ultrastructure of polypeptide: hormone-producing cells of the APUD series and the embryologic, physiologic and pathologic implications of the concept // J. Histochem.

107. Ploton D., Menager M., Jeanesson P., Ilimber G. Improvement in the staining and in the visualisation of the argyrophillic proteins; in the nucleolar organizer region at the optical level // Histochemical J.-1986.-V.18.-P. 5-14.

108. Pugliese A. Central and peripheral autoantigen presentation in immune tolerance // Immunology.-2004.-V. I l l, №2.-P. 138-146.

109. Raica M., Encica S., Motoc A., Cimpean A.M., Scridon T., Barsan M. Structural heterogeneity and immunohistochemical profile of Hassall corpuscles in normal human thymus // Annals of Anatomy.-2006.-V.188, №4.-P. 345-352.

110. Rezzani R., Rodella L., Milanesi S., Bianchi R. // Int. J. Exp. Pathol. -1996. Vol. 77, №5. - P. 191-196.

111. Sacedon R., Varas A., Jimenes E., Munoz J J. Accclcratcd maturation of the thymic stroma in the progeny of adrenalectomized pregnant rats // Neuroimmunomodulation. 1999. - №6. - P. 23-30.

112. Satoh S., Toda S., Narikawa K., Watanabe K., Tsuda K., Kuratomi Y., Sugihara H., Inokuchi A. Spindle epithelial tumor with thymus-like differentiation (SETTLE): youngest reported patient // Pathol Int.-2006.-V.56, №9.-P. 563-567.

113. Shanker A. Is thymus redundant after adulthood? // Immunology letters.-2004.-V.91.-P. 79-86.

114. Shiraishi J., Nomori H., Orikasa H., Mori T., Yamazaki K. Atypical thymoma (WHO B3) with neuroendocrine differentiation: report of a case // Virchows Arch.-2006 .-V.449, №2.-P. 234-237.

115. Soga H., Nakamura M., Yagi H., Raeba S. // Arch. Histol. Cytol. 1997. -Vol. 60, №1.-P. 53-63.

116. Sullivan B.A., Kraj P., Weber D.A., Ignatowitcz L., Jensen P^E. Positive selection of a Qa-1-restricted T cell receptor with specificity for insulin // Immunity.-2002.-V. 17, №1.-P. 95-105.

117. Tarbell K.V., Yamasaki S., Steinman R.M. The interactions of dendrotic cells with antigen-specific, regulatory T cells that suppress autoimmunity // Seminars in Immunology.-2006.-V.18.-P. 93-102.

118. Taubert R., Schwendemann J., Kyewski B. Highly variable expression of tissue-restricted self-antigens in human thymus: implications for selftolerance and autoimmunity // Eur J Immunol.-2007.-V.37, №3.-P. 838848.

119. Taupenot L., Harper K.L., O'Connor D.T. The Chromogranin-Secretogranin Family // The new England journal of medicine.-2003.-V.348, №12.-P. 1134-1143.

120. Throsby M., Homo-Delarche F., Chevenne D., Goya R., Dardenne M., Pleau J.M. Pancreatic hormone expression in the murine thymus: localization in dendritic cells and macrophages // Endocrinology.-1998.-V.139, №5.-P. 2399-2406.

121. Throsby M., Pleau J., Dardenne M., Homo-Delarche F. Thymic expression of the pancreatic endocrine hormones // Neiroimmunomodulation.-1999.-V.6, №>l-2.-P. 108-114.

122. Vafiadis P., Bennett S.T., Todd J.A., Nadeau J., Grabs R, Goodyer C.G., Wickramasinghe S., Colle E., Polychronakos C. Insulin expression in human thymus is modulated by INS VNTR alleles at the IDDM2 locus // Nature Genetics.-1997.- №15.-P. 289-292.

123. Velcheti V., Govindan R. Insulin-Like Growth Factor and Lung Cancer // Journal of Thoracic Oncology.-2006.-V.l, №7.-P. 607-610.

124. Walter D.J., Bader M. A unique central tryptophan hydroxylaze isoform // Biochem Pharmacol. 2003. - Vol. 66, №9. - P. 1673-1680.

125. Woodhead V.E., Binks M.H., Cyan B.M., Katz D.R. // Immunology. -1998. Vol. 94, №4. - P. 552-559.

126. Wu L., Li C., Shortman K. Tymic dendritic cell precursor: Relationships to the T lymphocyte lineage and phenotype of the dendritic cell progeny // J exp. med. 1996. - Vol. 184. - P. 903-911.

127. Wu L, Nichogiannapoulou A, Shortman K, Georgopoulos K. Cell-autonomus defects in dendritic cell populations of Ikaros mutant mice point to developmental relationship with the lymphoid lineage // Immunity. 1997. - №7. - P. 483-492.

128. Yarilin A.A, Belyakov I.M. Cytokines in the thymus: production and biological effects // Curr Med Chem.-2004.-V. 11, №4.-P. 447-464.

129. Yarilin A.A, Sharova N.I, Dzutzev A.K. Interaction between T Lymphocytes and Epithelial Cells in Thymus // Russ J Immunol.-1999.-V.4, №3.-P. 224-228.

130. Zediak V.P, Bhandoola A. Aging and T cell development: Interplay between progenitors and their environment // Seminars in Immunology.-2005.-V.17.-P. 337-346.

131. Zoltowska A, Pawelczyk T, Stopa M, Skokowski J, Stepinski J, Roszkiewicz A, Nyka W. Myoid cells and neuroendocrine markers in myasthenic thymuses // Arch Immunol Ther Exp (Warsz).-1998.-V.46, №4.-P. 253-257.

132. Zou D, Silvius D, Davenport J, Jrifone R, Marie P, Xu P.X. Patterning of the third pharyngeal pouch into thymus/parathyroid by Six andEyal // Dev. Biol.-2006.-V.293, №2.-P. 499-512.b y