Влияние дельта-эндотоксина Bacillus thuringiensis на клетки крови животных in vivo и in vitro тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.02.03, кандидат биологических наук Феклина, Марина Сергеевна
- Специальность ВАК РФ03.02.03
- Количество страниц 112
Оглавление диссертации кандидат биологических наук Феклина, Марина Сергеевна
Введение.
ГЛАВА 1. Обзор литературы
1.1. Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 как продуцент дельта-эндотоксина.
1.2. Области применения Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki Z-52.
1.3. Лейкоциты периферической крови.
1.3.1. Бактерицидные системы нейтрофилов.
1.3.2. Лимфоциты.
1.3.3. Моноциты.
1.3.4. Нейтрофилъные лейкоциты.
1.3.5. Эозинофилъные лейкоциты.
1.3.6. Лейкоцитарная формула.
1.4. Роль перекисного окисления липидов и системы антиоксидантной защиты при интоксикациях.
1.5. Аланинаминотрасфераза и аспартатаминотрансфераза как показатель повреждения тканей организма.
1.6. Токсичность дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 для теплокровных животных.
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
ГЛАВА 2. Материалы и методы исследований.
ГЛАВА 3. Результаты и их обсуждение
3.1. Выделение дельта-эндотоксина Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki Z-52.
3.2. Влияние дельта-эндотоксина на кислородзависимые и кислороднезависимые бактерицидные системы нейтрофилов in vitro.
3.3. Действие in vivo дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 на лимфоциты крови лабораторных мышей.
3.4. Действие in vivo дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Zна субпопуляционный состав нейтрофилов.
3.5. Влияние дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 in vivo на кислородзависимые и кислороднезависимые бактерицидные системы нейтрофилов крови лабораторных мышей.
3.6. Влияние дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 на активность трансаминаз, лактатдегидрогеназы в сыворотке крови лабораторных мышей.
3.7. Влияние дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Zна показатели системы ПОЛ-антиоксидант в сыворотке крови мышей.
Рекомендованный список диссертаций по специальности «Микробиология», 03.02.03 шифр ВАК
Антимикробное действие дельта-эндотоксина Bacillus thuringiensis в отношении ряда фитопатогенных бактерий2001 год, кандидат биологических наук Климентова, Елена Георгиевна
Действие дельта-эндотоксина Bacillus thuringiensis на перевиваемые культуры клеток2009 год, кандидат биологических наук Каменек, Дмитрий Валерьевич
Особенности действия дельта - эндотоксинов Bacillus thuringiensis на микробиоценоз толстого кишечника животных2011 год, кандидат биологических наук Купцова, Анна Александровна
Антибиотическое действие дельта-эндотоксинов Bacillus thuringiensis против Phytophthora infestans и Fusarium oxysporum2011 год, кандидат биологических наук Терпиловский, Максим Александрович
Дельта-эндотоксин Bacillus thuringiensis: Строение, свойства и использование для защиты растений1998 год, доктор биологических наук Каменек, Людмила Кирилловна
Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние дельта-эндотоксина Bacillus thuringiensis на клетки крови животных in vivo и in vitro»
Актуальность темы. Изучение метаболитов микроорганизмов является актуальным направлением в прикладной микробиологии. Особый интерес представляют исследования токсинов бактерий, особенностей их патогенетического действия на организм человека и животных и возможности практического использования в производстве медико-биологических препаратов (Монастырский, 2003; Новожилов, 2003). Энтомопатогенные препараты на основе спорово-кристаллических комплексов Bacillus thuringiensis широко используются для защиты сельскохозяйственных растений (Харвуд, 1992). В настоящее время до 9095% мирового рынка биоинсектицидов занимают препараты на основе Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki Z-52. Дельта-эндотоксин В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 проявляет активность в отношении насекомых благодаря способности связываться с чувствительными рецепторами на цитоплазматических мембранах клеток кишечного эпителия, а затем проникать в них, формируя каналы-поры (Hodgman & Ellar, 1990; Smith & Ellar, 1994). Также этот дельта-эндотоксин проявляет активность в отношении ряда микроорганизмов, в том числе и фитопатогенных (Егоров, Юдина, Баранов, 1990; Юдина, Милько, Егоров, 1996). Уникальная избирательность взаимодействия дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 с мембранами клеток насекомых дает возможность использовать его для защиты агроценозов и лесных массивов от листогрызущих насекомых-вредителей (Иванова, 2005).
В России в настоящее время используются разнообразные препараты на основе В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 лепидоцид-50, дипел, битоксибациллин (для защиты деревьев, кустарников, овощей и лекарственных трав против бабочек), новодор, поражающий колорадского жука на посадках картофеля, томатов, баклажанов (Иванова, 2004). Разработаны так же новые препараты на основе очищенного от спор и других балластных веществ и предварительно активированного эндотоксина Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 (Каменек 1998; 2005).
В этой связи особую актуальность приобретает вопрос токсичности этих препаратов для разных видов животных.
Существуют данные о безвредности дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 для млекопитающих, основанные на изучении его прямой токсичности (Хеймпел, 1976; Киль и др., 2002). Однако в литературных источниках отсутствуют биохимические исследования крови под действием дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 на лабораторных животных.
Известно, что в организме насекомого дельта-эндотоксин В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 разобщает процессы окислительного фосфорилирования и дыхания (Heimpel, 1977; Faust, 1984; Aronson et al., 1986; Gill et al., 1992; Himeno et al., 1985; Каменек, 1998). Попадая в организм животного, дельта-эндотоксин может всасываться в кишечнике и взаимодействовать с элементами крови. При длительном воздействии токсических веществ в концентрациях, не вызывающих внешне обнаруживаемого эффекта, могут выявляться скрытые изменения ряда биохимических показателей системы крови, которая является чувствительным индикатором, отражающим состояние организма в целом.
Для оценки действия дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 на организм теплокровных животных необходимо исследовать изменение биохимических процессов, в частности активности ферментов аспартатаминотрансферазы (АсАТ), аланинаминотрансферазы (АлАТ) и лактатдегидрогеназы (ЛДГ), активности миелопероксидазы и лизосомально-катионных белков нейтрофилов, что может служить показателем развития и интенсивности воспалительных процессов (Голиков 1986; Релева, 2007).
Таким образом, актуальной на настоящий момент является оценка действия дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 на состояние организма животного, что дает возможность охарактеризовать безопасность применения препаратов на его основе.
Цель настоящего исследования — изучить влияние дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 на клетки крови лабораторных мышей в условиях in vivo и in vitro.
Задачи исследования:
1. Изучить влияние дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 in vitro на активность кислородзависимых и кислороднезависимых бактерицидных систем нейтрофилов лабораторных животных.
2. Изучить влияние дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 in vitro на содержание и жизнеспособность эритроцитов периферической крови мышей.
3. Установить влияние дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 на количественный состав форменных элементов крови (лейкоцитов, эозинофилов, палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов, моноцитов) и значение лейкоцитарного индекса интоксикации лабораторных мышей.
4. Оценить действие дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 на активность ферментов в сыворотке крови лабораторных мышей в условиях in vivo.
5. Изучить влияние дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 на активность процессов перекисного окисления липидов и ферментативного звена антиоксидантной защиты (каталазы) в крови лабораторных мышей in vivo.
Научная новизна. Впервые проведена оценка воздействия различных доз дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 на механизмы киллинга в нейтрофилах лабораторных мышей, процентное содержание форменных элементов крови, жизнеспособность эритроцитов, активность ферментов в сыворотке крови, соотношение антиоксидантной системы.
Впервые установлена способность дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 в очень высоких дозах (1000; 500; 250 мг на кг массы животного) in vivo угнетать активность ферментов лизосом (миелопероксидазы, лизосомальных катионных белков), характеризующих кислородзависимые и кислороднезависимые бактерицидные процессы в нейтрофилах/ в дозе 50 мг на кг массы животного - стимулировать активность миелопероксидазы, лизосомально-катионных белков, а также увеличивать количество моноцитов и лимфоцитов. В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 в дозе 25 мг/кг вызывал активацию механизма киллинга периферической крови животных in vivo.
Впервые показано отсутствие влияния сравнительно низких доз дельта-эндотоксина на активность ферментов ЛДГ, АсАТ, АлАТ и антиоксидантную систему сыворотки крови экспериментальных животных.
Практическая значимость работы. Полученные данные вносят вклад в понимание механизма патогенетического действия дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 на организм животного. Результаты работы позволяют дать рекомендации по обеспечению безопасности при производстве биоинсектицидов, содержащих дельта-эндотоксин В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52. Материалы диссертационной работы используются в учебном процессе при чтении лекций по микробиологии, биотехнологии, биохимии, проведении лабораторно-практических занятий и написании курсовых и дипломных работ в Ульяновском государственном университете.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Дельта-эндотоксин В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 не влияет в условиях in vitro на активность миелопероксидазы, катионных белков, фагоцитарной активности нейтрофилов и на содержание жизнеспособных эритроцитов.
2. Дельта-эндотоксин В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 in vivo в очень высоких дозах 1000; 500; 250 мг/кг массы животного вызывает угнетение активности миелопероксидазы и катионных белков лизосом до 81% и 75% соответственно.
3. Дельта-эндотоксин В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 в дозах 25-100 мг/кг не влияет на содержание эозинофилов, моноцитов, палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов, активность каталазы и уровень вторичного продукта перекисного окисления липидов - малонового диальдегида в крови лабораторных мышей.
4. Пероральное введение дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 дозе 100 мг/кг вызывает снижение в крови лабораторных животных числа лимфоцитов на 31%. Действие дельта-эндотоксина в дозах 25 и 50 мг/кг вызывает увеличение числа этих форменных элементов и не вызывает изменений показателей лейкоцитарного индекса интоксикации.
5. Дельта-эндотоксин Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 после шестикратного перорального введения испытуемых доз до 100 мг/кг не влияет на активность ферментов ЛДГ, АсАТ и АлАТ в сыворотке крови лабораторных животных.
Апробация работы. Материалы диссертации были представлены на: 11-й Международной Пущинской школе-конференции молодых ученых «Биология — наука XXI века» (Пущино, 2007); Всероссийской научно-практической конференции «Проблемы экологии и охраны природы. Пути их решения» (Ульяновск, 2007); научном семинаре «Геоэкологические проблемы Среднего Поволжья» (Ульяновск, 2008); научно-практической конференции «Постгеномная эра в биологии и проблемы биотехнологии» (Казань, 2008); межкафедральных семинарах экологического факультета Института медицины, экологии и физической культуры Ульяновского государственного университета (2007-2009).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 11 работ, из них 1 статья в журнале, рекомендованном ВАК РФ.
Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы и экспериментальной части, включающей
Похожие диссертационные работы по специальности «Микробиология», 03.02.03 шифр ВАК
Биологическое разнообразие бактерий Bacillus thuringiensis из естественных экосистем2003 год, кандидат биологических наук Калмыкова, Галина Васильевна
Формирование иммунного ответа макроорганизма на введение белковолипополисахаридного комплекса Francisella tularensis разных подвидов: экспериментальное исследование2012 год, кандидат биологических наук Войткова, Валентина Владимировна
Особенности антибактериального действия дельта-эндотоксинов Bacillus thuringiensis как перспективного агента защиты растений2005 год, кандидат биологических наук Левина, Татьяна Александровна
Сравнительная характеристика бактерицидных систем нейтрофилов при псевдотуберкулезной и листериозной инфекциях2007 год, кандидат биологических наук Охотина, Софья Владимировна
Воздействие эндотоксинов Bacillus thuringiensis ssp. israelensis на кишечный эпителий личинок комаров Anopheles stephensi и Aedes aegypti2007 год, кандидат биологических наук Дронина, Мария Алексеевна
Заключение диссертации по теме «Микробиология», Феклина, Марина Сергеевна
ВЫВОДЫ
1. Показано, что дельта-эндотоксин В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 in vitro не оказывает статистически значимого влияния на активность катионных белков, миелопероксидазы, фагоцитарную активность нейтрофилов, на содержание жизнеспособных эритроцитов.
2. Установлено, что дельта-эндотоксин В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 in vivo в больших дозах (500-1000 мг/кг) вызывает снижение активности миелопероксидазы и катионных белков лизосом до 81 и 75% соответственно.
3. Отмечено, что дельта-эндотоксин В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 в дозах 25 и 50 мг/кг не оказывает влияния на количественный состав эозинофилов, моноцитов, лейкоцитов, палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов крови лабораторных мышей. Отмечено увеличение сегментоядерных нейтрофилов на 20% при пероральном введении дельта-эндотоксина в дозе 100 мг/кг.
4. Выявлено, что при введении лабораторным мышам всех исследованных доз дельта-эндотоксина В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 не отмечено изменений активности ферментов ЛДГ, АсАТ и АлАТ в сыворотке крови животных, что подтверждает отсутствие разрушения клеток под его действии.
5. Показано, что дельта-эндотоксин В. thuringiensis subsp. kurstaki Z-52 in vivo во всех изученных дозах не оказывает влияние на уровень вторичного продукта ПОЛ - МДА и активность антиоксидантного фермента — каталазы в крови лабораторных мышей.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В настоящее время микробные препараты считаются экологически безопасными, однако в связи с их широким распространением появилась необходимость провести детальную оценку экологического риска и рисков, связанных с продовольственной безопасностью дельта-эндотоксина В. ^иг^гепзгз яиЬяр. кигБ(аЫ 2-52 способного приносить потенциальную пользу населению.
Эндотоксины являются консервативными патогенассоциированными молекулами, которые распознаются клетками естественной иммунной системой организма (моноциты, гранулоциты). Иммунная система обладает способностью к группоспецифическому распознаванию антигенов. Так как для индукции специфически адаптивного ответа требуется длительное время (несколько дней), на начальных этапах инфицирования борьбу с патогенами осуществляет естественная иммунная система, которая регулирует и направляет иммунный ответ путём фагоцитоза, презентации антигенов клеткам адаптивной иммунной системы.
Колоссальный опыт использования вакцинных препаратов позволил установить, что микроорганизмы (в том числе и патогенные) могут являться в определенных дозах источником иммуностимуляции, оказывающими как специфическое, так и неспецифическое действие на иммунную систему организма. В связи с массовым применением препаратов на основе В. йиЬйр. киШаМ 2-52 потребовало проведения тщательных исследований по доказательству безопасности и выявления наиболее безопасных доз для млекопитающих животных.
Таким образом, для доказательства безопасности действия дельта-эндотоксина В. 1кигт^1еп518 яиЬзр. ки^аЫ Х-52 были проведены выше изложенные исследования, на основании которых можно сделать заключение о безопасности использования препаратов и трансгенных растений модифицированных геном токсинообразования. Однако, отмечаем, что действие дельта-эндотоксина В. гНигт&ет'^ зиЬхр. киШаЫ Z-52 носит явный дозозависимый характер; в высоких дозах он вызывал снижение активности миелопероксидазы и катионных белков лизосом до 81 и 75% соответственно, что связанно, вероятно, с неспецифической реакцией организма на чужеродный белок, способный проникать в кровоток.
Наиболее безопасными установлены дозы 25 и 50 мг/кг, дельта-эндотоксин не оказывал влияния на количественный состав эозинофилов, моноцитов, лейкоцитов, палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов и стимулировал рост числа лимфоцитов, что возможно связано с неспецифической реакцией на чужеродный белок и подтверждает данные литературы о бактериальных белковых эндотоксинах как стимуляторов иммунитета. Также в этих дозах происходит резкий подъем активности миелопероксидазы и лизосомально-катионных белков, что свидетельствует об активации антимикробной системы нейтрофилов мышей.
Как показывают результаты исследования, не отмечено существенных изменений активности ЛДГ в сыворотки крови животных во всех исследуемых дозах на протяжении всего эксперимента. Однако прослеживается устойчивая тенденция к снижению активности данного фермента к окончанию эксперимента с увеличением дозы дельта-эндотоксина В. БиЪзр. ки^акг Z-52. На наш взгляд, подобное статистически незначимое снижение связано с усилением аэробности условий, которое может быть вызвано действием дельта-эндотоксина. Последний факт является положительным воздействием на организм дельта-эндотоксина. Изученные процессы перекисного окисления липидов также подтверждает нормальное функционирование клеточного аппарата и отсутствия 'развитей разнообразных патологий в средних дозах дельта-эндотоксина 25-50 мг/кг.
Полученные данные позволяют говорить об отсутствии рисков связанных с продовольственной безопасностью для теплокровных животных препаратов и генетически-модифицированных растений на основе дельта-эндотоксина В. Жигт&етгй БиЪБр. кигз1аЫ Z-52.
97
Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Феклина, Марина Сергеевна, 2009 год
1. Арчаков, А. И. Микросомалыгое окисление / А. И. Арчаков. М. : Наука, 1975.-327 с.
2. Башенина, Н. В. Руководство по содержанию и разведению новых видов мелких грызунов / Н. В. Башенина. М. : Изд-во МГУ, 1975. - 164 с.
3. Бахов, Н. И. Механизмы защиты организма от вирусных инфекций : нейтрофильные лейкоциты / Н. И. Бахов, Ю. Ф. Майчук, А. Ф. Корнев // Успехи современной биологии. 2000. - Т. 120, № 1. - С. 23-35.
4. Бережная, М. Н. Нейтрофилы и иммунологический гомеостаз / М. Н. Бережная. Киев, 1988. - 192 с.
5. Бессмельцев, С. С. Новый способ оценки реологических свойств эритроцитов у хирургических больных с эндогенной интоксикацией / С. С. Бессмельцев, И. М. Царапкин, 3. Б. Федорова // Вестник хирургии им. Грекова. 1997. - Т. 156, № 4. с. 32-36.
6. Блюгер, А. Ф. Диагноз и дифференцированный диагноз хронического гепатита и цирроза печени / А. Ф. Блюгер, И. Н. Новицкий // Клиническая медицина. 1985. - Т. 63, № 2. - С. 134-140.
7. Бобырев, В. Н. Антиоксиданты в клинической практике / В. Н. Бобырев, О. Н. Воскресенский // Терапевтический архив. 1989. - № 6. - С. 122125.
8. Борисова, А. М. Действие низкоинтенсивного лазерного излучения на иммунную систему / А. М. Борисова, Н. В. Хорошилова, Г. И. Булгакова // Терапевтический архив. 1992. -№5.-С. 111-115.
9. Бочкарева, А. В. Изменение активности лактатдегидрогеназы печени крыс при действии гепарина в условиях in vitro / А. В. Бочкарева, Ю. В. Зимин, А. Е. Хомутов // Биология. 2008. - № 5. - С. 86-88.
10. Брюховецкий, А. Г. Состояние коронарного резерва и концентрация продуктов перекисного окисления слюны у больных гипертоническойболезнью / А. Г. Брюховецкий, А. Б. Абаник // Клиническая медицина. -1985.-Т. 63, № 1. С. 38-41.
11. Бурлакова, Е. Б. Биоантиоксиданты в лучевом поражении в злокачественном росте / Е. Б. Бурлакова, А. В. Алексеенко. М. : Наука, 1975.-294 с.
12. Бухарин, О. В. Лизоцим и его роль в биологии и медицине / О. В. Бухарин, П. В. Васильев. Томск : Изд-во Томск, ун-та, 1974. - 207 с.
13. Вершинина, В. И. Продукты на основе микробной биомассы / В. И. Вершинина, Ф. К. Алимова // Микробная биотехнология / науч. ред. И. Б. Лещинская. Казань : Унипресс : ДАС, 2000. - С. 368.
14. Викторов, А. Г. Влияние В1:-растений на почвенную биоту и плейотропную биоту и плейоропный эффект с1-эндотоксин кодирующих генов / А. Г. Викторов // Физиология растений. 2008. - Т. 55, №6.-С. 823-833.
15. Владимиров, Ю. А. Регуляция цепных реакций перекисного окисления липидов в мембранах / Ю. А. Владимиров // Известия АН СССР. 1972. -№4.- С. 489-501.
16. Владимиров, Ю. А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах / Ю. А. Владимиров, А. И. Арчаков. М. : Наука, 1972. - 252 с.
17. Владимиров, Ю. А. Свободные радикалы и антиоксиданты / Ю. А. Владимиров // Вестник РАМН. 1998. - № 7. - С. 43-47.
18. Воскресенский, О. Н. Биооксиданты облигатные факторы питания / О. Н. Воскресенский, В. Н. Бобырев // Вопросы медицинской химии. - 1992. -№ 4.-С. 21-26.
19. Гаврилов, О. К. Клетки костного мозга и периферической крови / О. К. Гаврилов, Г. И. Козинец, Н. Б. Черняк. М. : Медицина, 1985. - 286 с.
20. Голиков, С. Н. Общие механизмы токсического действия / С. Н. Голиков, И. В. Саноцкий. Л. : Медицина, 1986.-280с.
21. Гюлазян, Н. М. Индуцированный липополисахаридный апоптозгранулоцитов периферической крови больных, перенесших сальмонеллезную инфекцию / Н. М. Гюлазян, Т. К. Давтян, С. Г. Пак // Клиническая лабораторная диагностика. 2006. - № 8. - С. 25-28.
22. Дейл, М. М. Руководство по иммунофармакологии / М. М. Дейл, Дж. К. Формен // . -1998. С. 237-246.
23. Долгушин, И. И. Нейтрофилы и гомеостаз / И. И. Долгушин, О. В. Бухарин. Екатеринбург : УрО РАН, 2001. - 284 с.
24. Ефуни, С. Н. Руководство по гипербарической оксигенации / С. Н. Ефуни. М. : Медицина, 1986. - 416 с.
25. Жданов, Г. Г. Свободнорадикальные процессы, гипоксия и приминение антиоксидантов в реаниматологии / Г. Г. Жданов, В. Н. Нечаев, И. Л. Недель // Анестезиология и реаниматология. 1989. - № 4. - С. 63-68.
26. Жученко, А. А. Адаптивная система селекции растений (эколого-генетические основы) : в 2-х т. / А. А. Жученко ; Рос. акад. с.-х. наук. -М.: Изд-во Рос. ун-та дружбы народов : Агрорус, 2001.
27. Соколов, М. С. Потенциальный риск возделывания трансгенных растений и потребления их урожая / М. С. Соколов, А. И. Марченко // Сельскохозяйственная биология. 2002. - № 5. - С. 3-23.
28. Зенков, Н. А. Внутриклеточный окислительный стресс и апоптоз / Н. А. Зенков и др. // Успехи современной биологии. 1999. - Т. 119, № 5. - С. 440-450.
29. Истаманова, Т. С. Функциональная гематология / Т. С. Истаманова, В. А. Алмазов, С. В. Канаев. Л.: Медицина, 1973. - 310 с.
30. Кагава, Я. Биомембраны / Я. Кагава. М. : Высшая школа, 1985. - 303 с.
31. Каган, В. Е. Окислительные процессы при гамма-нейтронном облучении организма / В. Е. Каган, О. Н. Орлов, П. Л. Прищепко // Итоги науки и техники. Сер. Биофизика. 1986. - Т. 18. - С. 5-136.
32. Каган, В. Е. Механизмы структурно-функциональной модификации биомембран при перекисном окислении липидов : автореф. дис. . д-ра мед. наук / В. Е. Каган. М., 1981. - 23 с.
33. Калинина, Н. М. Нарушения иммунитета при рецидивирующем фурункулезе / Н. М. Калинина // Цитокины и воспаление. 2003. - № 1. -С. 41-44.
34. Калиф, Я. Я. О лейкоцитарном индексе интоксикации и его практическом значении / Я. Я. Калиф // Врачебное дело. 1941. - № 1. -С. 31-33.
35. Каменёк, Л. К. Разобщающее действие дельта-эндотоксина Bacillus thuringiensis / Л. К. Каменёк, М. В. Штерншис // Интегрированная защита растений от болезней и вредителей в Сибири : сб. науч. трудов. -Новосибирск, 1986. С. 80-85.
36. Каменёк, Л. К. Дельта-эндотоксин Bacillus thuringiensis : строение, свойства и использование для защиты растений : дис. . д-ра биол. наук / Л. К. Каменёк. М., 1998. - 345 с.
37. Каменёк, Л. К. Дельта-эндотоксин Bacillus thuringiensis: строение, свойства и использование для защиты растений : автореф. дис. . д-ра биол. наук / Л. К. Каменёк. М„ 1998. - 40 с.
38. Каменёк, Л. К. Влияние дельта-эндотоксина Bacillus thuringiensis на активный транспорт ионов у насекомых / Л. К. Каменёк, М. В. Штерншис // Известия СО АН СССР. Сер. Биологическая. 1984. - Вып. З.-С. 80-85.
39. Каменёк, JT. К. Изучение механизма действия дельта-эндотоксина Bacillus thuringiensis на насекомых : автореф. дис. . канд. биол. наук / Л. К. Каменёк. Л., 1985. - 19 с.
40. Каменёк, Л. К. Разобщающее действие 8-эндотоксина Bacillus thuringiensis / Л. К. Каменёк, М. В. Штерншис // Интегрированная защита растений от болезней и вредителей в Сибири. Новосибирск, 1985. - С. 148-154.
41. Каменёк, Л. К. Выделение и очистка кристаллов Bacillus thuringiensis / Л. К. Каменёк // Бюллетень научно-технической информации. Новосибирск, 1980.-№2(3).-С. 1-15.
42. Кандыбин, Н. В. Бактериальные средства борьбы с грызунами и вредными насекомыми / Н. В. Кандыбин. М. : Агропромиздат, 1989. -172 с.
43. Карпищенко, А. И. Медицинские лабораторные технологии : справочник : в 2 т. Т. 2 / А. И. Карпищенко ; под ред. А. И. Карпищенко. СПб. : Интермедика, 1999. - 653 с.
44. Карташова, О. Я. Моделирование патологических процессов в печени /
45. Я. Карташова // Основы гепатологии. Рига, 1975. - С. 84-86.
46. Киль, В. И. Генетически модифицированный картофель, устойчивый к колорадскому жуку / В. И. Киль, В. Д. Надыкта // Arpo XXI. 2002. - №1.-С. 12-15.
47. Коваленков, В. Г. Преодолима ли резистентность вредителей к пиретроидам / В. Г. Коваленков, М. С. Соколов ; Всероссийский НИИ биологической защиты растений // Arpo XXI. 1999. - № 2. - С. 18-19.
48. Кожевников, Ю. Н. О перекисном окислении липидов в норме и патологии / Ю. Н. Кожевников // Вопросы медицинской химии. 1985. -№5.-С. 2-7.
49. Кожевников, Ю. Н. О перекисном окислении липидов в норме и паталогии / Ю. Н. Кожевников // Вопросы медицинской химии. 1985. -№ 5. - С. 160-179.
50. Козинец, Г. И. Клетки периферической крови и экологические факторы / Г. И. Козинец, Д. Ф. Каюмова // Клиническая лабораторная диагностика. 1993. -№ 1.-С. 14-20.
51. Козлов, Ю. П. Свободнорадикальное окисление липидов в норме и при патологии / Ю. П. Козлов // Биоантиокислители. М. : Наука, 1975. - С. 5-14.
52. Козлов, А. В. Роль эндогенного свободного железа в активации перекисного окисления липидов при ишемии / А. В. Козлов, JT. И. Шинкаренко, Ю. А. Владимиров // Бюллетень экспериментальной биологии. 1985.-№ 1.-С. 38-41.
53. Колесова, О. Е. Перекисное окисление липидов и методы определения продуктов липопероксидации в биологических средах / О. Е. Колесова, А. А. Маркин, Т. Н. Федорова // Лабораторное дело. 1984. - № 7. - С. 540-546.
54. Колосова, Н. Г. Микрометод УФ-спектрофотометрии диеновых конъюгатов / Н. Г. Колосова, Л. Б. Ким, В. Ю. Куликов // Лабораторное дело.- 1988.-№9.-С. 73-74.
55. Киль, В. И. Генетически модифицированный картофель, устойчивый к колорадскому жуку / В. И. Киль, В. Д. Надыкта // Arpo XXI. 2002. - № 1.-С. 12-15.
56. Кумерова, А. О. Возможность использования ферментов эритроцитов в качестве индикаторов, характеризующих течение болезни у больных гемобластозами / А. О. Кумерова // Т . 1996. - № 2. - С. 144-147.
57. Лазарева, Д. Н. Стимуляторы иммунитета / Д. Н. Лазарева. М.:1. Медицина, 1985.-423 с.
58. Льюис, С. М. Практическая и лабораторная гематология / С. М. Льюис, Б. Бэйн, И. Бэйтс ; пер с англ. под ред. А. Г. Румянцева. М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. - 670 с.
59. Малов, В. А. Бактериальные токсины: старые функции, новое применение / В. А. Малов, С. Г. Пак // Терапевтический архив. 1997. -Т. 66, №11.-С. 85-89.
60. Мансурова, И. Д. Определение содержания высших жирных кислот в сыворотке крови здоровых и больных хроническим панкреатитом методом газовой хроматографии / И. Д. Мансурова, У. К. Султанова // Лабораторное дело. 1985. - № 9. - С. 524-527.
61. Маянский, А. Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге / А. Н. Маянский, Д. Н. Маянский. Новосибирск : Наука (Сиб. отд.), 1989. - 344 с.
62. Маянский, А. Н. Реактивность нейтрофила / А. Н. Маянский, А. Н. Галлиулин. Казань, 1984. - 158 с.
63. Меерсон, Ф. 3. Адаптивная медицина : механизмы и защитные эффекты адаптации / Ф. 3. Меерсон. М. : Медицина, 1993. - 234 с.
64. Меньшиков, В. В. Лабораторные методы исследования в клинике / В. В. Меньшиков. М., 1987. - 197 с.
65. Морозова, В. Т. Клиническое значение гематологических исследований /
66. B. Т. Морозова // Клиническая лабораторная диагностика. 1993. - № 1.1. C. 24-30.
67. Мурашко, В. В. Перекисное окисление липидов у больных с заболеваниями желудка и двенадцатиперстной кишки / В. В. Мурашко, А. К. Журавлев, Ч. И. Шылде // Клиническая медицина. 1984. - № 10. -С. 47-50.
68. Нагоев, Б. С. Катионный белок лейкоцитов и его значение : методические указания / Б. С. Нагоев. — Нальчик, 1982. — 67 с.
69. Подымова, С. Д. Механизмы алкогольного повреждения печени / С. Д. Подымова // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1998. - № 5. - С. 26-29.
70. Пигаревский, В. Е. Цитохимия антибактериальных катионных белков лейкоцитов при фагоцитозе и воспалении / В. Е. Пигаревский // Архив патологии. 1975. - № 9. - С. 3-9.
71. Пигаревский, В. Е. Зернистые лейкоциты и их свойства / В. Е. Пигаревский. М. : Медицина, 1978. - 128 с.
72. Реброва, О. Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ БТАТШТЮА / О. Ю. Реброва. М. : Медиа Сфера, 2002. - 312 с.
73. Рулева, Н. Ю. Миелопероксидаза : биологические функции и клиническое значение / Н. Ю. Рулева, М. А. Звягинцева, С. Ф. Дугин // Современные наукоемкие технологии. 2007. - № 8. - С. 1-4.
74. Северин, С. Е. Функциональная активность ферментов и пути ее регуляции : сб. ст. / С. Е. Северин, Г. А. Кочетова ; под ред. С. Е. Северина, Г. А. Кочетова. М. : Изд-во МГУ, 1981.-204 с.
75. Славин, М. Б. Методы системного анализа в медицинских исследованиях / М. Б. Славин. М. : Медицина, 1989. - 304 с.
76. Славинский, А. А. Цитоплазматическая зернистость нейтрофильных лейкоцитов / А. А. Славинский // Клиническая лабораторная диагностика. 2002. - № 3. - С. 39-43.
77. Славинский, А. А. Комьютерный анализ изображения нейтрофильных лейкоцитов : миелопероксидаза / А. А. Славинский, Г. В. Никитина // Клиническая лабораторная диагностика. 2000. - № 1. - С. 21-24.
78. Соколовский, В. В. Антиоксиданты и адаптация / В. В. Соколовский. Л. : ЛСГМИ, 1984.-64 с.
79. Степанова, Т. В. Штаммы В. thuringiensis, проявляющие множественную активность против широкого круга насекомых / Т. В. Степанова, 3. Ф. Барышникова, М. В. Чирков // Биотехнология. 1996. - № 12. - С. 17-22.
80. Титов, В. Н. Методические и диагностические аспекты исследования активности аминотрансфераз / В. Н. Титов, Н. А. Бочкова // Лабораторная диагностика. 1990. - № 8. - С. 4-12.
81. Титов, В. Н. Биохимические методы диагностики патологии печени / В. Н. Титов // Терапевтический архив. 1993. - Т. 65, № 2. - С. 85-89.
82. Титов, В. Н. Патофизиологические основы лабораторной диагностики заболевания печени / В. Н. Титов // Клиническая лабораторная диагностика. 1996. - № 6. - С. 3-6.
83. Уровни и тенденции изменения видового состава и внутрипопуляционной структуры, ареалы комплексов вредных и полезных организмов и прогноз опасных фитосанитарных ситуаций по зонам страны / под ред. К. В. Новожилова и В. А. Захаренко. СПб., 2000.- 100 с.
84. Федоров, Л. А. Пестициды удар по биосфере и человеку / Л. А. Федоров, А. В. Яблоков. - М. : Наука, 1999. - 462 с.
85. Фрейдлин, И. С. Иммунная система и ее дефекты / И. С. Фрейдлин. -СПб. : НТФФ «Полисен», 1998. 111 с.
86. Хазанов, А. И. Функциональная диагностика заболеваний печени / А. И. Хазанов. М. : Медицина, 1988, - 304 с.
87. Хазанов, А. И. Функциональные пробы печени и сопряженные тесты / А. И. Хазанов // Руководство по гастроэнтерологии. Т. 2. Болезни печении билиарной системы / под общ. ред. Ф. И. Комарова. М. : Медицина, 1995.-С. 40-51.
88. Хазанов, А. И. Основы функциональной диагностики и наиболее важные синдромы в гепатологии / А. И. Хазанов // Диагностика и лечение внутренних болезней. В 3 т. Т. 3 / под общ. ред. Ф. И. Комарова. М. : Медицина, 1996. - С. 193-205.
89. Хазанов, А. И. Из полувекового опыта наблюдения за больными циррозом печени / А. И. Хазанов // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1998. - № 2. - С. 5056.
90. Харвуд, К. Р. Бациллы. Генетика и биотехнология / К. Р. Харвуд. М. : Мир, 1992.-530 с.
91. Хеймпел, А. М. Безопасность энтомопатогенных микроорганизмов для человека и позвоночных животных / А. М. Хеймпел // Микроорганизмы в борьбе с вредными насекомыми и клещами. М. : Колос, 1976. - С. 373-390.
92. Честухина, Г. Г. Белки кристаллов дельта-эндотоксина В. Жиги^етгз / Г. Г. Честухина, Л. И. Костина, И. А. Залунин // Биохимия. 1977. - Т. 42, Вып. 9.-С. 1660-1667.
93. Шепелев, А. П. Влияние острого физического перегревания животных на процессы перекисного окисления липидов / А. П. Шепелев // Вопросы медицинской химии. 1976. - Т. 22, № 1. - С. 47.
94. Шведова, А. А. Модификация полиеновых липидов фоторецепторов молекулярным кислородом и ее роль в функционировании сетчатки : автореф. дис. . канд. биол. наук / А. А. Шведова. М., 1975. -25 с.
95. Штерншис, М. В. Спектрофотометрический метод определения концентрации микроорганизмов в суспензии / М. В. Штерншис // Бюллетень научно-технической информации. Новосибирск : СибНИИЗХим, 1976. - Вып. 16. - С. 44-50.
96. Шубич, М. Г. Щелочная фосфатаза лейкоцитов в норме и патологии / М.
97. Г. Шубин, Б. С. Нагоев. М. : Медицина, 1980. - 224 с.
98. Эндакова, Э. А. Состояние перекисного окисления липидов — антиоксиданстной системы молодых мужчин при переселении в дальневосточный регион / Э. А. Эндакова, Т. П. Новгородцева // Физиология человека. 1994. - Т. 20, № 2. - С. 149.
99. Abbas, А. К. / Cellular and Molecular Immunology / А. К. Abbas, A. H. Lichtman. 5-th edition. - Philadelphia : Saunders, 2005. - 562 p.
100. Almeda, R. P. Complementary DNA sequence of human neutrophils azurocidin, an antibiotic with extensive homology to serine proteases / R. P. Almeda, M. Melchior, D. Campanelli / Biochem. Biophys. Res. Commun. -1991.- Vol. 177.-P. 688-695.
101. Babior, В. M. Oxidants from phagocytes agents of defense and destruction / В. M. Babior //Blood. 1984. - Vol. 5. - P. 959-966.
102. Berliner, E. Uber die Schlaffsucht der Mehlmottenrouppe (Ephestia Kuhniella Zell.) und ihen Erreger Bacillus thuringiensis, n.sp. / E. Berliner // Z. Angew. Entomol. 1995. - Bd. 2. - S. 29-56.
103. Berliner, E. Uber die Schlaffsucht der Mehlmottenrouppe / E. Berliner // Ges. Getreidew.- 1991. Bd. 3. - S. 63-70.
104. Юб.Воггоп, W. F. Medical physiology / W. F. Borron, E. L. Boupaep. -Philadelphia : Saunders, 2004. 1344 p.
105. Carrol, J. Analysis of the large agueons pores produced by a Bacillus thuringiensis protein insecticide in Manduca sexta midgud brush - border-membranes vesicles / J. Carrol, D. J. Ellar // Eur. J. Biochem. - 1997. - Vol. 245.-P. 797-804.
106. Densen, P. Granulocytic phagocytes / P. Densen, W. R. Clark, W. M. Nauseff // Infectious Deseases. 5th ed. - 1995. - P. 78-101.
107. Elison, R. T. Killing of gramnegative bacteria by lactoferrin and lysozime / R. T. Elison, T. G. Gich//J.Clin. Invest. 1991. - Vol. 88. - P. 1080-1084.
108. Faust, R. M. Nature of pathogenic process of Bacillus thuringiensis // Compar. Pathol. 1984. - Vol. 7. - P. 91-141.
109. Fedhila, S. The InhA2 Metalloprotease of Bacillus thuringiensis Strain 407 Is Required for Pathogenicity in Insects Infected via the Oral Route / S. Fedhila, P. Nel, D. Lereclus // J. Bacteriol. 2002. - Vol. 184. - P. 3296-3304.
110. Foldes, P. S. Glutatione peroxidase activity of human erythrocyte membranes / P. S. Foldes, D. Mareteki // Acta Biol. Et Med. Germ. 1982. - Bd. 41, № 11. -S. 1003-1008.
111. Goldstein, I. M. Evidence that the superoxide-generating system of human leukocytes is associated with the cell surface / I. M. Goldstein, M. Cerqueira, S. Lind // J. Clin. Invest. 1977. - Vol. 59, № 2. - P. 249-254.
112. Goldberg, H. Plasma membrane rebox activitves / H. Goldberg // Biochem. Biophys. Acta. 1982. - Vol. 694, № 2. - P. 203-223.
113. Goldsby, R. Kuby Immunology / R. Goldsby, T. Kindt, B. Osborne. 5th ed. - N.Y. : W H Freeman and Company, 2000. - 670 p.
114. Grochulski, P., Masson L., Borisova S., Pusztai-Carey M., Schwartz J.L., Brousseau R., Cygler M. Bacillus thuringiensis CrylA(a) insecticidal toxin: crystal structure and channel formation // J. Mol. Biol. 1995. - Vol. 254. -P. 447-464.
115. Green, C. L. Pathogenesis and prevention of diabetic neurophaty and nephropaty / C. L. Green, G. Healing, S. Simpkin // Metabolism. 1986. -Vol. 37, № 2. - P. 25-29.
116. Hofmann C., Wolfersberger M. J., Luthu P. Visualisation of binding of Bacillus thringiensis delta-toxin, to invertebrate cells / C. Hofmann, M. J. Wolfersberger, P. Luthu // 2nd Europ. Workshop on bact. toxins. 1985. - P. 70-72.
117. Klebanoff, S. J. Myeloperoxidess. Oscurence and biological function / S. J. Klebanoff // Deroxidases in Chemistry and Biology. Boca raton, FL. 1991. - P. 136.
118. Pendleton, I. R. Separation of the spores and crystals or Bacillus thuringiensis /1. R. Pendleton, R. B. Morrison // Nature. 1966. - Vol. 212. - P. 228-729.
119. Perretti, M. Annexin I is stored within gelatinize granules of human neutrophils and mobilized on the cell surface upon adhesion but notphagocytosis / M. Perretti, H. Christian, S. K. Wheller // Cell Biol. Int. 2000. -Vol. 24, №3. - P. 163-174.
120. Ramasarma, T. Generation H202 in biomembrane / T. Ramasarma // Biochem. Biophys. Acta. 1982. - Vol. 694, № 2. - P. 203-223
121. Roubal, W. T. Damage to ATP by peroxidizing lipids / W. T. Roubal, A. L. Tappel //Biochim. Biophys. Acta. 1967. - Vol. 136. - P. 402-403.
122. Selsted, M. E. Indolicidin, a novel bactericidal tridecapeptide amide from neutrophils / M. E. Selsted, M. J. Novothy, W. L. Morris // J. Biol. Chem. -1992. Vol. 267. - P. 4292-4295.
123. Smolen, J. E. Function of neutrophils / J. E. Smolen, L. A. Boxer // Williams
124. Storici, P. Dequence analisis of an antibiotic dodecapeptive from neutrophils / P. Storici, G. Del Sal, C. Schneider // FEBS Lett. 1992. - Vol. 314. - P. 187.
125. Territo, M. C. Monocyte-hemotactic activity of defensins from human neutrophils // M. C. Territo, T. Ganz, M. E. Selsted // J. Clin. Invest. 1989. -Vol. 84.-P. 2017-2019.
126. Vel, W. A. Killing capacity of human polymorphonuclear leukocytes in aerobic and anaerobic conditions / W. A. Vel, F. Namavar, A. M. Verweij // Med. Microbiol. 1984. - Vol. 18, № 2. - P. 173-180.
127. Vladimirov, Yu. A. Free radicals / Yu. A. Vladimirov // A Practical Appraach / ed. N. A. Puchard., F. J. Kelly. Oxford, 1996. - P. 65-82.
128. Washburn, J. H. The role of free radikal reactions in the molecular patology of bio-degradative process / J. P. Washburn // Gerantologial. 1973. - Vol. 13, № 4. - P. 436-439.
Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.