Сравнительная характеристика бактерицидных систем нейтрофилов при псевдотуберкулезной и листериозной инфекциях тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.25, кандидат биологических наук Охотина, Софья Владимировна

• Охотина, Софья Владимировна
• кандидат биологических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Охотина, Софья Владимировна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. Обзор литературы 11 1.1. Современные представления о бактерицидных системах нейтрофилов

1.1.1. Кислородзависимая система

1.1.2. Кислороднезависимая система

1.1.3. Нитроксидсинтаза и реактивные нитрогенные радикалы при бактери- 29 альных инфекциях

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА 2. Материалы и методы

2.1. Материал

2.1.1. Инфекционные агенты

2.1.2. Экспериментальные животные

2.2. Методы

2.2.1. Методы выделения фагоцитирующих клеток и их культивирования

2.2.2. Методы оценки функциональной активности нейтрофилов 43 А) Спектрофотометрические 43 Б) Гистохимические и иммуноцитохимичекие

2.2.3. Методы статистической обработки данных

ГЛАВА 3. Характеристика кислородзависимой и кислороднезависимой бак- 53 терицидных систем нейтрофилов при заражении Y. pseudotuberculosis и L. monocytogenes в системе in vitro

3.1. Характеристика кислородзависимой и кислороднезависимой систем 56 нейтрофилов человека при заражении Y. pseudotuberculosis и L. monocytogenes

3.2. Характеристика кислородзависимой и кислороднезависимой систем 61 нейтрофилов воспалительного экссудата мышей при заражении Y. pseudotuberculosis и L. monocytogenes

3.3. Сравнительная характеристика бактерицидных систем нейтрофилов 68 воспалительного экссудата мышей и крови доноров при заражении клеток

Y. pseudotuberculosis и L. monocytogenes

3.4. Сравнительная характеристика кислородзависимой и кислороднезави- 76 симой систем лейкоцитов крови и перитонеального экссудата интактных морских свинок при заражении Y. pseudotuberculosis и L. monocytogenes

ГЛАВА 4. Характеристика кислородзависимой и кислороднезависимой 83 бактерицидных систем лейкоцитов животных, зараженных Y. pseudotuberculosis и L. monocytogenes

ГЛАВА 5. Нитроксидсинтаза и реактивные нитрогенные радикалы в ней- 94 трофилах при псевдотуберкулезной и листериозной инфекциях

5.1. Нитроксидобразующая активность нейтрофилов при псевдотуберку- 94 лезной и листериозной инфекциях в системе in vitro

5.2. Нитроксидобразующая активность лейкоцитов животных, зараженных 108 Y. pseudotuberculosis и L. monocytogenes

ГЛАВА 6. Взаимосвязь нитроксидобразующей, кислородзависимой и кисло- 113 роднезависимой бактерицидных системам нейтрофилов при псевдотуберкулезной и листериозной инфекциях

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Сравнительная характеристика бактерицидных систем нейтрофилов при псевдотуберкулезной и листериозной инфекциях»

Актуальность. Активная и мгновенная реакционная способность ней-трофильных лейкоцитов на раздражитель определяет их важную роль при различных воспалительных процессах. В двоякой функции нейтрофилов, объединяющей воспалительную и противоспалительную активность, отражено понятие воспаления как совокупности воспалительных и противовоспалительных реакций [139; 142; 236]. Нейтрофилы являются первыми клеточными элементами, которые задолго до моноцитов и лимфоцитов мигрируют через эндотелии сосудов, вблизи очага воспаления. Спектр биологически-активных веществ нейтрофилов включает свободные кислородные радикалы, протеиназы, бактерицидные протеины и цитокины, которые как по отдельности, так и в совокупности, оказывают влияние на регуляцию процессов воспаления.

В конце 1970-х гг. были выявлены и изучены четыре бактерицидных системы нейтрофильных гранулоцитов. В. Е. Пигаревским была предложена следующая их классификация: 1) миелопероксидазная система; 2) лизоцим; 3) лактоферрин; 4) неферментные катионные белки [34]. В дальнейшем, в связи с многочисленными исследованиями, представления о микробицидных системах нейтрофилов несколько изменились [184]. На данный момент сочли необходимым считать миелопероксидазу ферментом кислородзавимой системы, а лизоцим и лактоферрин составляющими кислороднезависимой системы. Кроме того, в связи с открытием молекулы оксида азота, была выделена нитроксидобразующая система. Таким образом, на данный момент для нейтрофилов обозначены три основные бактерицидные системы: 1) кисло-родзависимая система, в состав которой входят система НАДФН-производных оксидантов и Н2О2 — миелопероксидазная система; 2) нитроксидобразующая система, включающая реактивные посредники азота, производные NO-синтазы; 3) система белков нейтрофильных гранул (антимикробные белки, протеазы, серинпротеиназы, металлопротеиназы) [184].

Основным компонентом бактерицидных систем нейтрофилов, является фермент миелопероксидаза. Наряду с катионными белками, этот фермент относится к специфическим маркерам нейтрофила и характеризует качественные стороны гранулярной зернистости клетки. В современной литературе акцентировано внимание на новых направлениях исследований молекул-эффекторов, производных нейтрофилов, рассмотренных на примере миело-пероксидазо-производных оксидантов, действующих на значительном расстоянии от воспалительного очага.

Вопрос о значении оксида азота в обеспечении бактерицидности фагоцитов при различных инфекциях в последнее десятилетие активно изучается в отношении моноцитов/макрофагов, что освящено в обзорах С. Fang [109], С. Nathan [179], N. Zamora с соавт. [244], Ю.Н. Гончарук [15]. Кроме того, показано значение реактивных промежуточных продуктов азота (нитратов и нитритов) при различных патологических процессах у человека, но при этом не достаточно выяснен механизм их эндогенного образования. Также на настоящий момент до конца не раскрыты причины различия нитрооксидобра-зующей активности у нейтрофилов человека и животных.

В исследованиях, проведенных в НИИ СО РАМН ранее, представлена морфофункциональная характеристика нейтрофилов и их влияние на макрофаги при псевдотуберкулезной инфекции [39; 40]. До настоящего времени в литературе отсутствуют сведения о сравнительной характеристике бактерицидных систем нейтрофилов, а также о значении оксида азота в бактерицидности нейтрофилов при бактериальных инфекциях, в частности при псевдотуберкулезе и листериозе. Работ по цитоморфологическим исследованиям NO-синтазной активности нейтрофилов при данных инфекционных заболеваниях в доступной нам литературе не обнаружено.

Цель исследования В сравнительном аспекте охарактеризовать бактерицидные системы нейтрофилов и оценить их значение на ранних этапах псевдотуберкулезной и листериозной инфекций.

Задачи исследования

1. В системе in vitro определить активность компонентов кислородзави-симой ферментной системы нейтрофилов доноров и интактных животных при заражении их Yersinia pseudotuberculosis и Listeria monocytogenes.

2. В системе in vitro исследовать нитроксидобразующую активность нейтрофилов доноров и интактных животных при их взаимодействии с Y. pseudotuberculosis и L. monocytogenes.

3. В системе in vivo исследовать активность нитроксидобразующей, ки-слородзависимой и кислороднезависимой ферментных систем нейтрофилов морских свинок, зараженных Y. pseudotuberculosis и L. monocytogenes.

4. Провести корреляционный анализ между показателями активности нитроксидобразующей, кислородзависимой и кислороднезависимой систем нейтрофилов различных биологических моделей при обеспечении их бактерицидной функции на ранних этапах псевдотуберкулезной и листериозной инфекций.

Научная новизна

• Установлена активность нитроксидсинтазы и образование метаболитов оксида азота в нейтрофилах человека и животных при псевдотуберкулезной инфекции.

• В сравнительном аспекте показана реактивность нитроксидобразующей, кислородзависимой и кислороднезависимой бактерицидных систем нейтрофилов различных биологических моделей при их заражении Y. pseudotuberculosis и L. monocytogenes.

• На основании цитохимических исследований установлены различия в динамике активности составляющих ферментов дыхательной цепи нейтрофилов в зависимости от вида возбудителя, что свидетельствует о дифференцированных путях образования активных метаболитов кислорода в нейтро-филах при псевдотуберкулезной и листериозной инфекциях.

• Установлена корреляция между показателями активности нитроксидобразующей, кислородзависимой и кислороднезависимой бактерицидных систем нейтрофилов при псевдотуберкулезной и листериозной инфекциях.

Теоретическая и практическая значимость работы

Теоретическая значимость диссертационной работы заключается в том, что полученные в ней новые данные расширяют понятие о морфофункцио-нальном состоянии нейтрофильных лейкоцитов в зависимости от вида патогенных бактерий, а также о нитроксидобразующей способности этих клеток при бактериальных инфекциях.

Практическая ценность работы определяется тем, что тестирование активности бактерицидных ферментных систем нейтрофилов, относящихся к первой линии антиинфекционной защиты организма, может быть использовано для выявления гранулоцитарных иммунодефицитов и для контроля эффективности коррекции этих состояний. Положения, выносимые на защиту

1. На ранних этапах псевдотуберкулезной и листериозной инфекций антимикробная защита обеспечивается за счет комплексного реагирования кислородзависимой, кислороднезависимой и нитроксидобразующей бактерицидных систем нейтрофилов человека и животных, активность которых зависит от вида возбудителей и физиологического состояния этих клеток при разных условиях экспериментов.

2. Различия в динамике активности ферментов дыхательной цепи нейтрофилов изученных биологических моделей свидетельствуют о дифференцированных путях образования активных метаболитов кислорода в этих клетках при контакте с Y. pseudotuberculosis и L. monocytogenes, отличающимися по механизмам фагоцитирования.

3. Установлена взаимосвязь между кислородзависимой, кислороднезависимой и нитроксидобразующей бактерицидными системами нейтрофилов при указанных инфекциях, с преимущественно прямой корреляцией показателей активности этих систем в ответ на воздействие Y. pseudotuberculosis и обратной корреляцией - на воздействие L. monocytogenes.

Заключение диссертации по теме «Гистология, цитология, клеточная биология», Охотина, Софья Владимировна

ВЫВОДЫ

1. В сравнительном аспекте дана характеристика активности компонентов кислородзависимой, кислороднезависимой и нитроксидобразующей бактерицидных систем нейтрофилов человека и животных при псевдотуберкулезной и листериозной инфекциях.

2. В экспериментах in vitro установлены различия в динамике активности ферментов кислородзависимой системы нейтрофилов изученных биологических моделей, свидетельствующие о дифференцированных путях образования активных метаболитов кислорода в нейтрофилах при этих инфекциях: при заражении Y. pseudotuberculosis по пути комплексов II и IV дыхательной цепи с участием соответственно лактатдегид-рогеназы, сукцинатдегидрогеназы и цитохромоксидазы; при заражении L. monocytogenes только по пути комплекса IV с участием цитохромоксидазы.

3. В экспериментах in vivo у морских свинок, зараженных Y. pseudotuberculosis и L. monocytogenes выявлено достоверное повышение суммарной активности ферментов дыхательной цепи (НСТ-тест) и высокая активность миелопероксидазы вначале в лейкоцитах очага воспаления /перитонеальный экссудат/, а через 5 - 7 ч после заражения в лейкоцитах периферической крови. При этом имелись различия степени активности сукцинатдегидрогеназы и цитохромоксидазы в разные временные периоды при этих инфекциях.

4. Показаны различия степени активности компонентов кислороднезависимой системы нейтрофилов при заражении Y. pseudotuberculosis и L. monocytogenes. Повышение уровня катионных белков в нейтрофилах очага воспаления и периферической крови животных при контакте с иерсиниями обеспечивалось за счет клеток с высокой активностью специфических гранул, тогда как при листериозной инфекции преобладали клетки со средней и низкой степенью их активности.

5. Обнаружено, что активность нитроксидобразующей системы нейтрофилов разных биологических моделей зависит от физиологического состояния этих клеток. В экспериментах in vivo наиболее высокие показатели метаболитов оксида азота выявлены в лейкоцитах перитонеального экссудата морских свинок, зараженных указанными видами бактерий, особенно при контакте с листериями. В экспериментах in vitro повышение продукции метаболитов оксида азота и активность нит-роксидсинтазы были более выраженными в нейтрофилах крови доноров и лейкоцитах интактных животных в ответ на стимуляцию интер-фероном-у и бактериями обоих видов.

6. С помощью корреляционного анализа установлено, что при псевдотуберкулезной и листериозной инфекциях компоненты кислородзависимой / СДГ, ЛДГ, ЦХО, МПО, НСТ-тест /, кислороднезависимой / кати-онные белки / и нитроксидобразующей бактерицидных систем нейтрофилов человека и животных дифференцированно реагируют в ответ на заражение бактериями по принципу изменяющихся во времени прямых и обратных связей. При этом отмечена преимущественно прямая корреляция показателей в ответ на заражение Y. pseudotuberculosis и обратная корреляция в ответ на заражение L. monocytogenes.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

По физиологическому потенциалу нейтрофильные гранулоциты рассматриваются как клетки, обладающие уникальными возможностями, которые реализуются как в условиях нормы, так и при развитии патологии [207; 142]. Данные функции нейтрофилов обусловлены наличием у них комплекса бактерицидных систем, играющих главную роль в киллинге микроорганизмов при развитии антиинфекционной защиты. Благодаря возросшему интересу к изучению молекулярных основ фагоцитоза, в конце 1990-х - начале 2000-х гг. расширилось представление о бактерицидных механизмах фагоцитирующих клеток [18; 27; 43; 93; 115; 147; 164; 166]. В классификацию бактерицидных систем нейтрофилов была внесена нитроксидобразующая система [184]. Несмотря на это остается недостаточно широким спектр патогенов, в отношении которых раскрыты особенности ферментного реагирования фагоцитов, в частности нейтрофилов, а также продукции лейкоцитами нитро-генных радикалов.

В настоящей работе приведены данные сравнительного изучения активности бактерицидных систем нейтрофилов, зараженных патогенными бактериями Y. pseudotuberculosis и L. monocytogenes в экспериментах in vivo и in vitro. Для комплексной оценки активности кислородзависимой и кислороднезависимой бактерицидных систем нейтрофилов нами были проведены цитохимические исследования активности ферментов миелопероксидазы, сукцинатдегидрогеназы, лактатдегидрогеназы, цитохромоксидазы, суммарной активности ферментов дыхательной цепи в НСТ-тесте, а также катионных белков.

При проведении сравнительного анализа были выявлены различия в динамике активности составляющих компонентов кислородзависимой системы нейтрофилов разных биологических моделей в зависимости от вида возбудителя. Это свидетельствует о дифференцированных путях образования активных метаболитов кислорода (АМК) в нейтрофилах в ответ на воздействие патогенов [111; 122; 164; 177; 203; 243].

Известно, что к образованию АМК приводит нарушение передачи электронов по электронно-транспортной цепи при стимуляции нейтрофила [13]. Из-за малого времени существования АМК их действие улавливается субстратами, которые используют для определения активности ферментов [14; 20]. В экспериментах in vitro нами установлено, что в нейтрофилах крови доноров в ответ на заражение как Y. pseudotuberculosis , так и L. monocytogenes образование АМК происходит с участием сукцинатдегидрогеназы и лактатдегидрогеназы, что косвенно отражает наработку активных метаболитов кислорода при взаимодействии нейтрофилов с этими видами бактерий. При этом необходимо отметить, что повышение активности СДГ, которая принадлежит к цитратному циклу, отражает запуск комплекса II дыхательной цепи, а участие ЛДГ указывает на образование АМК с участием НАДФ [20].

При контакте нейтрофилов воспалительного экссудата мышей с Y. pseudotuberculosis в образовании АМК задействованы сукцинатдегидрогеназа и лактатдегидрогеназа, а также комплекс IV дыхательной цепи с участием цитохромоксидазы, активность которой отражает непосредственно образование основного аниона 0{ [20], Одновременно имеет место активации миело-пероксидазы, субстратом для которой является перекись водорода, образующаяся наряду с кислородным радикалом при стимуляции клеток, а значит, повышение активности МПО отражает защитную реакцию клетки в ответ на внедрение бактерий [139]. При контакте указанных клеток с L. monocytogenes образование АМК протекает только по пути комплекса IV при нерезкой активации МПО. Эти факты, по нашему мнению, указывают на сниженную защитную реакцию нейтрофилов воспалительного экссудата мышей в ответ на заражение L. monocytogenes и отражают более активное образование ими основного аниона Ог" в ответ на заражение их Y pseudotuberculosis.

В популяции лейкоцитов крови интактных морских свинок, среди которых наблюдалось процентное преобладание нейтрофилов, при заражении in vitro Y. pseudotuberculosis и L. monocytogenes активность ферментов кислородзависимой системы была выше по сравнению с таковой в нейтрофилах крови доноров. В целом изменения показателей НСТ-теста, активности СДГ, ЦХО и МПО носили однонаправленный характер. Причем отмечались более высокие показатели ферментативной активности Нф в ответ на заражение L. monocytogenes. Это свидетельствовало об активной наработке этими клетками АМК с участием комплексов II и IV дыхательной цепи. В популяции лейкоцитов перитонеального экссудата интактных морских свинок, где преобладали макрофаги, также выявлено повышение активности исследованных ферментов за исключением ЦХО, слабая активность которой свидетельствовала о присутствии цитотоксического действия на клетки большого количества образованных АМК [138; 139].

Таким образом, следует отметить, что в экспериментах in vitro имелись количественные различия степени активации отдельных компонентов кислородзависимой системы нейтрофилов с преобладанием суммарной активности ферментов дыхательной цепи в НСТ-тесте при листериозной инфекции.

При сравнении активности кислороднезависимой системы нейтрофилов воспалительного экссудата мышей и нейтрофилов крови доноров (в экспериментах in vitro) выявлено, что в ответ на бактериальную инфекцию, как псевдотуберкулезную, так и листериозную, показатели активности катионных белков были отрицательными и их динамика носила волнообразный характер. По данным Ю. А. Мазинга [24], это свидетельствует о расходовании катионных белков в процессе взаимодействия Нф с бактериями. При этом в нейтрофилах крови доноров степень дегрануляции была выражена более интенсивно, чем в нейтрофилах воспалительного экссуД&ташы^шментах in vivo у морских свинок, зараженных внутрибрю-шинно Y. pseudotuberculosis и L. monocytogenes, активность ферментов кислородзависимой системы лейкоцитов периферической крови также зависела от вида бактерий. Так, в ответ на заражение животных Y. pseudotuberculosis уже в первые часы (2 ч) снижалась суммарная активность ферментов дыхательной цепи в НСТ-тесте при нарастающем повышении активности МПО, тогда как, через 7 ч после заражения L. monocytogenes, выявлено повышение показателей НСТ-теста. В лейкоцитах очага воспаления (перитонеальный экссудат) у зараженных животных выявлено достоверное повышение суммарной активности ферментов дыхательной цепи и активности миелоперок-сидазы. При обеих инфекциях повышение показателей активности кислородзависимой системы наблюдалось вначале в лейкоцитах перитонеального экссудата (в очаге воспаления), а спустя 5 - 7 ч после заражения в лейкоцитах периферической крови.

Исходя из вышеизложенного, следует заключить, что показатели суммарной активности ферментов дыхательной цепи нейтрофилов разных биологических моделей свидетельствуют о различиях в интенсивности респираторного метаболизма в ответ на заражение Y. pseudotuberculosis и L. monocytogenes в условиях in vivo и in vitro. Это подтверждает известный факт [31; 56; 57; 63], что при заражении различными видами бактерий, фагоцитирующие клетки в опытах in vitro проявляют ферментативную активность, отличную от таковой в клетках зараженного организма (in vivo) [31].

При оценке активности миелопероксидазы и катионных белков нейтрофилов морских свинок, зараженных Y. pseudotuberculosis и L. monocytogenes, с помощью ДЦК, который отражает наличие клеток с разной степенью активности ферментов, выявлены следующие различия. Повышение уровня МПО и КБ в нейтрофилах периферической крови и очага воспаления животных, зараженных Y. pseudotuberculosis, обеспечивалось за счет клеток с высокой активностью этих ферментов, а при листериозной инфекции преобладали клетки со средней и низкой степенью активности. По данным В.Е. Пи-гаревского и Ю.А. Мазинга [37], кислородзависимая миелопероксидазно

Н202 - хлоридная система в присутствии йода оказывает более выраженное противолистериозное действие, нежели катионные белки - лактоферрин и дефенсины.

Оксид азота (N0) - молекула со свойствами радикала - широко задействована в системах антипатогенной активности клеток, участвующих в обеспечении резистентности организма к проникновению и развитию инфекций. Особый интерес вызывает участие N0 в уничтожении возбудителей, характеризующихся внутриклеточным паразитированием [31; 56; 57; 60; 63; 108]. Большинство исследованных патогенов проявляют чувствительность к метаболитам оксида азота в инфицированном организме. Тем не менее, по данным некоторых авторов [56; 57; 88; 234], существует ряд микроорганизмов, в том числе L. monocytogenes, для гибели которых продукция N0 необязательна. По мнению X.-Q Wei с соавт. [56] это может быть связано с особенностями экспериментальных моделей (in vitro/ in vivo) или с биологическим видом (клетки грызунов / человека) [56; 57].

Исследования in vivo [152; 153] и in vitro [81; 89; 237] показали, что при некоторых бактериальных инфекциях провоспалительные цитокины (TNF-a и INF-y) способны регулировать продукцию N0 в нейтрофилах. В качестве моделей в основном использовали нейтрофилы крови доноров. Нами не найдено сравнительных работ по изучению нитроксидобразующей активности нейтрофилов человека и животных при бактериальных инфекциях. В связи с этим, был проведен ряд экспериментов по исследованию активности нитро-ксидзависимой системы нейтрофилов крови доноров и нейтрофилов животных. Перед внесением бактерий в клеточную культуру нейтрофилы в течение 16 ч были стимулированы INF-y.

В системе in vitro при адгезии клеток выявлена активная продукция N0 нестимулированными нейтрофилами крови доноров и лейкоцитами перито-неального экссудата интактных морских свинок, что подтверждает данные С.Е. Wright с соавт. [242] и J.L. Webb с соавт. [237]. В то же время нами в нейтрофилах воспалительного экссудата мышей накопление метаболитов N0 не установлено, что, по нашему мнению, связано с предварительной стимуляцией данной популяции клеток введением в брюшную полость раздражающего агента (в нашем случае мясопептонного бульона), вследствие чего нитроксидобразующая активность нейтрофилов значительно снижалась. Этот факт согласуется с выявленным нами значительным повышением количества метаболитов N0 в нейтрофилах крови доноров и лейкоцитах перитонеального экссудата интактных животных в ответ на стимуляцию гамма-интерфероном и бактериальными агентами Y. pseudotuberculosis и L. monocytogenes, причем в нейтрофилах воспалительного экссудата мышей отмечалось их снижение непосредственно после стимуляции INF-y. Все вышесказанное свидетельствует о зависимости активности NO-образующей системы нейтрофилов различных биологических моделей от их физиологического состояния.

В экспериментах in vivo в лейкоцитах периферической крови животных, зараженных внутрибрюшинно бактериями, выявлена выраженная продукция оксида азота, причем, показатели метаболитов N0 находились на более высоком уровне при заражении L. monocytogenes, чем при заражении Y. pseudotuberculosis. В лейкоцитах перитонеального экссудата морских свинок, зараженных Y. pseudotuberculosis и L. monocytogenes, также выявлено повышение уровня метаболитов N0.

Нами установлено, что у морских свинок, зараженных Y. pseudotuberculosis и L. monocytogenes, основной объем N0, продуцируемого лейкоцитами в динамике инфекции, обеспечивается клетками моноцитарного ряда. Тем не менее, высокое количество NOS- положительных нейтрофилов указывает на их нитроксидобразующую активность при этих инфекциях.

Цитохимическое исследование внутриклеточного содержания NO-синтазы в нейтрофилах показало аналогичную зависимость активности фермента от физиологического состояния клеток. Необходимо отметить, что некоторыми исследователями [69] указывалось на отсутствие синтеза индуци-бельной NO-синтазы и продукции нитритов в интактных нейтрофилах крови человека и крысы. При этом отмечалось, что только в нейтрофилах воспалительного экссудата крыс продуцировались нитриты. На этом основании авторами был сделан вывод о различных путях активации гена экспрессии инду-цибельной NO-синтазы в нейтрофилах человека и крыс. Нами с помощью цитохимического метода была выявлена значительная активность NO-синтазы как в нейтрофилах доноров, так и в нейтрофилах мышей, зараженных Y. pseudotuberculosis и L. monocytogenes. На основании этого можно считать, что нитроксидобразующая способность нейтрофилов проявляется при стимуляции их этими видами бактерий. На наличие активности NO-синтазы в экстравазальных нейтрофилах человека при бактериальных инфекциях указывали в своих работах и другие авторы [48; 69; 77; 89; 113; 237].

Продукция оксида азота в нейтрофилах выявлена нами также после предварительной инкубации клеток с провоспалительным цитокином - интерфероном у, причем в нейтрофилах человека она была более выраженной, чем в нейтрофилах животных. Повышение внутриклеточного содержания NO-синтазы можно объяснить тем, что в нейтрофилах присутствуют как конститутивные, так и индуцибельная формы NO-синтазы, которые суммарно могут проявлять свою активность в интактных и стимулированных клетках [48; 69; 86; 96; 124; 141; 145].

Для определения взаимосвязи между показателями активности кислородзависимой, кислороднезависимой и нитроксидобразующей бактерицидных систем нейтрофилов различных биологических моделей при псевдотуберкулезной и листериозной инфекциях нами был проведен корреляционный анализ полученных данных.

В динамике взаимодействия нейтрофилов крови доноров с Y. pseudotuberculosis на протяжении всех временных периодов исследования обнаружена корреляция между показателями МПО и содержанием метаболитов N0, при этом отмечена смена фаз прямой и обратной связи между этими показателями. Выявлена также синхронная корреляция между показателями активности ЦХО и продукцией N0. По другим показателям (НСТ-тест, СДГ, ЛДГ) взаимосвязь с содержанием метаболитов N0 была менее регулярной, а в некоторые временные периоды носила оппозиционный характер, по сравнению с корреляцией между N0, ЦХО и МПО. Необходимо отметить отсутствие достоверной связи между показателями активности ЛДГ и содержанием метаболитов N0 в период от 15 мин до 2 ч, при наличии корреляции между содержанием метаболитов N0 и показателями активности СДГ.

При взаимодействии нейтрофилов крови доноров с L. monocytogenes также выявлена фазность корреляции между показателями содержания метаболитов N0 и компонентами кислородзависимой системы. Так, отмечалось чередование периодов синхронной прямой или обратной связи между продукцией N0 и активностью составляющих ферментов дыхательной цепи (суммарная активность ферментов в НСТ-тесте, активность СДГ и ЛДГ). Преимущественно обратная связь была выявлена между показателями продукции N0, показателями активности СДГ и ферментов дыхательной цепи в НСТ-тесте. Между показателями содержания метаболитов N0 и активности МПО - фермента азурофильных гранул нейтрофилов, бактерицидное действие которой реализуется внутри фагосом, - характер корреляционной связи (прямая или обратная) изменялся синхронно с корреляцией между нитрокси-добразующей способностью клеток и активностью ферментов СДГ и ЛДГ в период от 5 мин до 2 ч после заражения L. monocytogenes. Характер корреляции между показателями активности ЦХО и образованием метаболитов N0 в период от 5 мин до 35 мин контакта Нф доноров с L. monocytogenes находился в противофазе с показателями для вышеуказанных ферментов. Вероятно, такая картина отражает особенности фагоцитарного процесса в отношении листерий, для которых свойственна как внутрифагосомальная, так и цито-плазматическая (вне фагосом) локализация в клетках [123; 159].

При контакте нейтрофилов воспалительного экссудата мышей с Y pseudotuberculosis in vitro в период от 5 мин до 15 мин выявлена обратная связь содержания метаболитов N0 с активностью СДГ, ЛДГ, ЦХО и МПО, а от 1 ч до 5 ч - сильная прямая связь с показателями активности всех исследованных ферментов. Также преимущественно прямая связь наблюдалась между показателями содержания метаболитов N0 и НСТ-теста. Это указывало на сопряженность генерации метаболитов N0 и кислорода и подтверждало полученные ранее данные других исследователей об участии в образовании молекулы оксида азота НАДФ-оксидазного комплекса [74; 108; 109; 177; 178; 213]. При заражении L. monocytogenes взаимосвязь продукции N0 с активностью ферментов кислородзависимой системы была преимущественно обратной. Прямая взаимосвязь нитроксидобразующей активности установлена в сроки от 35 мин до 1 ч с активностью СДГ, ЛДГ и МПО. Кроме того, на протяжении всего срока наблюдения при контакте нейтрофилов воспалительного экссудата мышей с L. monocytogenes была установлена прямая взаимосвязь между продукцией N0 и активностью катионных белков.

В наших исследованиях установлена корреляционная связь между содержанием метаболитов N0 и активностью бактерицидных компонентов нейтрофилов крови и перитонеального экссудата интактных морских свинок при заражении in vitro Y. pseudotuberculosis и L. monocytogenes. Необходимо отметить, что при контакте с Y. pseudotuberculosis связь нитроксидобразующей активности лейкоцитов крови была выявлена с МПО, а при контакте с L. monocytogenes - с катионными белками. В лейкоцитах перитонеального экссудата, напротив, показатели содержания метаболитов N0 при заражении иерсиниями коррелировали с активностью катионных белков, а при заражении листериями - с активностью МПО.

У морских свинок, зараженных внутрибрюшинно Y. pseudotuberculosis, установлена прямая взаимосвязь между содержанием метаболитов N0 в лейкоцитах периферической крови и активностью МПО и КБ, тогда как в лейкоцитах очага воспаления корреляция выявлена только с МПО. У животных, зараженных L. monocytogenes, продукция метаболитов N0 в нейтрофилах периферической крови коррелировала с показателями активности только одного фермента - МПО.

Представленные в работе результаты сравнительных исследований обосновывают значение ферментативных механизмов, обеспечивающих бактерицидный потенциал нейтрофильных лейкоцитов при псевдотуберкулезной и листериозной инфекциях. С помощью корреляционного анализа установлено, что компоненты бактерицидных ферментных систем нейтрофилов (кислородзависимой, кислороднезависимой и нитроксидобразующей) дифференцированно реагируют в ответ на инфекции по принципу изменяющихся во времени прямых и обратных связей в процессе генерации активных метаболитов кислорода и азота. Это согласуется с данными Ю. Н. Гончарук [15] о состоянии бактерицидных ферментных систем макрофагов при стафилококковой и листериозной инфекциях. Вероятно, указанный механизм лежит в основе сопряженных ферментативных реакций фагоцитирующих клеток при развитии антиинфекционной защиты организма.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Охотина, Софья Владимировна, 2007 год

1. Афанасьев, Б.В. Родоначальные кроветворные клетки человека Текст. / Б.В.Афанасьев, В.А. Алмазов Л.: Наука, 1985. -202 с.

2. Бережная, Н.М. Нейтрофилы и иммунологический гомеостаз Текст. / Н.М. Бережная. Киев, Наукова думка, 1988. - 187с.

3. Бондаренко, И.Г. Оптимизация оценки активности миелопероксидазы в нейтрофилах крови Текст. / И. Г. Бондаренко // Лабораторное дело. -1986. -№ 5. С. 313 -314.

4. Бутаков, А.А. Разработка комплекса экспресс-методов оценки фагоцитарного звена иммунитета для иммуноэпидемиологических исследований Текст.: дис. канд. мед. наук: 14.00.36 / А.А. Бутаков М., 1991. -131с.

5. Ванин, А. Ф. Оксид азота в биомедицинских исследованиях Текст. / А. Ф. Ванин // Вестник РАМН. 2000. - № 4. - С. 3 - 5

6. Ванин, А.Ф. Оксид азота регулятор клеточного метаболизма Текст. / А.Ф. Ванин // Соросовский образовательный журнал.- 2001.- Т. 7, №11. - С. 7-12.

7. Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах Текст. / Ю.А. Владимиров // Соросовский образовательный журнал. -2000.- Т.6, №12.-С. 13-19.

8. Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы в живых системах Текст. / Ю.А Владимиров, О.А. Азизова, А.И Деев и др. // Итоги науки и техники. Серия биофизика, Т.29.; сб. науч. трудов / ВИНИТИ; М., 1991. С. 3-250.

9. Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы и антиоксиданты Текст. / Ю.А. Владимиров // Вестник РАМН.- 1998. № 7.- С. 43 - 51.

10. Воробьев, А. И. Руководство по гематологии, Т. 1. Текст. / А. И. Воробьев М., 2002 - 350 с.

11. Галанкин, В. Н. Принципы морфофункциональной классификации гранулоцитарных дефицитов Текст. / В. Н. Галанкин, А. М. Токмаков, Н. М. Харченко // Архив патологии 1990. - Т. 52, №6. - С. 39 - 43.

12. Галанкин, В.Н. Проблемы воспаления с позиций теории и практики Текст. / В.Н. Галанкин, A.M. Токмаков. М.: Универ. дружбы народов, 1991.- 120с.

13. Гамалей, И.Ф. Перекись водорода как сигнальная молекула Текст. / И.Ф. Гамалей, И.В. Клюбин // Цитология. 1996. - Т. 38, №12. - С. 1223 - 1247.

14. Герасимов, И.Г. Кинетика реакции восстановления нитросинего тетра-золия нейтрофилами крови человека Текст. / И.Г. Герасимов, О.А. Калуцкая // Цитология. 2000. - Т. 42, №2. - С. 160 - 165.

15. Гончарук, Ю. Н. Кислородзависимая и нитроксидзависимая ферментные системы макрофагов при стафилококковой и листериозной инфекциях Текст.: / автореф. дис. канд. мед. наук: 03.00.25 / Ю. Н. Гончарук. Владивосток, 2005. - 26с.

16. Динамика иммунологических показателей полостного смыва у больных острыми абсцессами легких Текст. / Ю. П. Селезнев, С.В.Иванов, В.И.Темирбулатов и др. // Научно-медицинский вестник Центрального Черноземья. 2004. - № 18, IV кв.

17. Кашкин, К. П. Цитокины иммунной системы: основные свойства и иммунобиологическая активность (лекция) Текст. / К. П. Кашкин // Клиническая лабораторная диагностика. 1998. - № 11. - С.21 - 32.

18. Клебанов, Г. И. Клеточные механизмы прайминга и активации фагоцитов Текст. / Г.И. Клебанов, Ю. А. Владимиров // Успехи современной биологии. 1999. - Т. 119, №5 - С.462 - 475.

19. Козлов, В.А. Стволовая кроветворная клетка и иммунный ответ Текст. / В.А. Козлов, И.Н. Журавкин, И.Г. Цирлова. Новосибирск: Наука, 1982.

20. Кольман, Я. Наглядная биохимия Текст. / Я. Кольман, К.-Г. Рем. М.: Мир, 2000. - 467с.

21. Кулинский, В.И. Активные формы кислорода и оксидативная модификация макромолекул: польза, вред и защита Текст. / В.И. Кулинский //Соросовский образовательный журнал. 1999. - №1. - С.2-7.

22. Лакин, Г.Ф. Биометрия Текст. / Г. Ф. Лакин. М.: Высшая школа, 1990.-С. 225 -303.

23. Лойда, 3. Гистохимия ферментов лабораторные методы Текст. / 3. Ллойда, Р. Госсрау, Т. Шиблер. М.: Мир, 1982. - 270с.

24. Мазинг, Ю.А. Нейтрофильные гранулоциты и система защиты организма Текст. / Ю.А. Мазинг // Архив патологии. 1991. - Т. 53, № 9. -С.70-73.

25. Маянский, Д. Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге Текст. / Д. Н. Ма-янский, А. Н. Маянский . Новосибирск: Наука, 1989. - 344с.

26. Маянский, Д. Н. Хроническое воспаление Текст. / Д. Н. Маянский. М.: Медицина, 1991.-С.98.

27. Меныцикова, Е. Б. Оксид азота и NO-синтаза в организме млекопитающих при различных функциональных состояниях Текст. / Е. Б. Меныцикова, Н. К. Зенков, В. П. Реутов // Биохимия. 2000. - Т.65, вып.4. - С.485 - 503.

28. Мисюк, Н.С. Корреляционно-регрессионный анализ в клинической медицине Текст. / Н.С. Мисюк, А.С. Мастыкин, Г.П. Кузнецов. М.: Медицина, 1975. - 192 с.

29. Нагоев, Б.С. Очерки о нейтрофильном гранулоците Текст. / Б.С. Наго-ев Нальчик: Изд-во Эльбрус, 1986.

30. Нестеренко, В.Г. Определение завершенности фагоцитарной реакции с помощью выявления лизомальных катионных белков Текст. / В.Г. Нестеренко // Лабораторное дело. 1982. - №5. - С. 11-12.

31. Оксид азота в механизмах патогенеза внутриклеточных инфекций Текст. / С. Я. Проскуряков, С. И. Бикетов, А. И. Иванников и др. // Иммунология. 2000. - №4. - С.9-20.

32. Осипов, А.Н. Образование гидроксильных радикалов при взаимодействии гипохлорида с ионами железа Текст. / А.Н. Осипов // Биофизика. 1993.-Т.38,№3.-С. 390-396.

33. Пигаревский, В.Е. Возрастные иммунодефицита системы нейтро-фильных гранулоцитов Текст. / В.Е Пигаревский, Ю.А.Мазинг, В. Н. Кокряков // Архив патологии. 1990. - Т. 52, №6. - С. 43 - 46.

34. Пигаревский, В. Е. Зернистые лейкоциты и их свойства Текст. / В. Е. Пигаревский. М.: Медицина, 1978. - 128 с.

35. Пигаревский, В. Е. К методике применения лизосомально-катионного теста в лабораторно-диагностической практике Текст./ В. Е. Пигаревский, Ю. А. Мазинг// Лабораторное дело. 1981. -№10. - С.579-584.

36. Пигаревский, В.Е. Клиническая морфология нейтрофильных гранулоцитов Текст. / В. Е. Пигаревский. -Л., 1988. С.87-101.

37. Пигаревский, В.Е. Поиск и разработка новых диагностических тестов неспецифической резистентности Текст. / В.Е. Пигаревский, Ю.А. Мазинг // ДСП. Отч. закл. НИИ эксперимент, мед. АМН. 1985. - 56 с.

38. Плехова, Н. Г. Бактерицидная активность фагоцитов Текст. / Н. Г. Плехова // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. -2006,-№6.-С. 89-96.

39. Плехова, Н. Г. Функциональное состояние полиморфноядерных лейкоцитов и их влияние на функции макрофагов при некоторых бактериальных инфекциях Текст.: / автореф. дис. канд. биол. наук: 03.00.11 / Н. Г. Плехова. Владивосток, 1996. - 23с.

40. Плехова, Н.Г. Электронно-цитохимическая характеристика процесса взаимодействия нейтрофилов и макрофагов с Yersinia pseudotuberculosis Текст. / Н.Г Плехова, Л.М. Исачкова // Мед. журн. России. 1998. -№1-2.-С. 61-65.

41. Ройт, А. Основы иммунологии Текст. / А. Ройт. М.: Мир, 1991. -328с.

42. Саркисов, Д. С. Электронномикроскопическая радиография клетки Текст. / Д. С. Саркисов, А. А. Пальцын, Б. В. Втюрин . М., 1980.

43. Тотолян, А. А. Клетки иммунной системы Текст. / А. А. Тотолян, И. С. Фрейдлин. СПб.: Наука, 2000. - 232 с.

44. Хэм, А. Гистология Текст.; Т.2 / А. Хэм, Д. Кормак. М.: Мир, 1983. - с.127- 149.

45. Циклические превращения оксида азота в организме млекопитающих Текст. / В.П. Реутов, Е.Г. Сорокина, В.Е. Охотин и др. М.: Наука, 1997. - 159с.

46. A contractive activity that closes phagosomes is macrophages Text. / J.A. Swanson, M.T. Johnson, K. Beningo et al. /J. Cell Sci. 1999. - Vol. 112. -P.307-316.

47. A large subset of neutrophils expressing membrane proteinase 3 is a risk factor for vasculitis and rheumatoid arthritis Text. / V. Witko-Sarsat, P. Le-savre, S. Lopez, et al. // J. Am. Soc. Nephrol. 1999. - № 10 - P. 12241233.

48. Activation of nitric oxide release and oxidative metabolism by leukotrienes B4, C4, and D4 in human polymorphonuclear leukocytes Text. / G. Larfars, F. Lantoine, M.-A. Devinck , J. Palmblad et.al // Blood. 1999. - Vol. 93, №4. - P.l399-1405.

49. Activation of the NADFH oxidase involves the small GTP-binding protein p21racl Text. / A. Abo, E. Pick, A. Hall et. al. // Nature. 1991. - Vol. 353. - P. 668-670.

50. Activities of LL-37, a cathelin-associated antimicrobial peptide of human neutrophils Text. / J. Turner, Y. Cho, N.N. Dinh et al.// Antimicrobial. Agents. Chemother. 1998. - Vol. 42. - P. 2206-2214.

51. Activity of protegrins against yeast-phase Candida albicans Text. / Y. Cho, J.S. Turner, N.N. Dinh et al. // Infect. Immun. 1998. - Vol. 66. - P. 2486-2493.

52. Adams, D.R Nitric oxide: physiological roles, biosynthesis and medical uses Text. / D.R. Adams, M. Brochwicz-Lewinski, A.R. Butler // Fortschr. Chem. Org. Naturst. 1999. - Vol. 76. - P. 1-211.

53. Albina, J.E. On the expression of nitric oxide synthase by human macrophages. Why no NO? Text. / J.E. Albina // J. Leukocyte Biol. 1995. -Vol. 58.-P. 643-649.

54. Alican, I. A critical role of nitric oxide in intestinal barrier function and dysfunction Text. /1. Alican, P.Kubes // Am. J. Phisiol. 1996. - Vol. 33. -G. 225.

55. Altered immune responses in mice lacking inducible nitric oxide synthase Text. / X.-Q. Wei I., G. Charles, A. Smith et al. // Nature (London). -1995,-Vol. 375.-P.408-411.

56. Altered responses to bacterial infection and endotoxic shock in mice lacking inducible nitric oxide synthase Text. / J.D.MacMicking, C.Nathan, G.Hom et al. // Cell. 1995. - Vol. 81. - P.641-650.

57. Alternative, nonapoptotic programmed cell death: mediation by arrestin 2, ERK2, and Nur77 Text. / S. Castro-Obregon, R. V. Rao, G. del Rio et al // J. Biol. Chem. 2004. - Vol. 279. - P.17543-17553.

58. Alving, К. Increased amount of nitric oxide in exhaled air of asthmatics / K. Alving, E. Weitzberg, J.M. Lundberg Text. //Eur. Resp. J. 1993. - Vol. 6. -P. 1368.

59. Andonegui, G. Effect of nitric oxide donors on oxygen-dependent cytotoxic responses mediated by neutrophils. Text. / G. Andonegui, A.S.Trevani // The J. of Immunol. 1999. - Vol. 162. - P.2922 - 2930.

60. Andrews, F. J. Protection against gastric ischemia-reperfiision injury by nitric oxide generators Text. / F. J. Andrews, M. Wilson, P.E. O'Brrien // Dig. Dis. Sci. - 1994 - Vol. 228. - P.439^142.

61. Antileukoprotease: An endogenous protein in the innate mucosal defense against fungi Text. / J.F. Tomee, P.S. Hiemstra, R. Heinzel-Wieland et al. // J. Infect. Dis. 1997. - Vol. 176. - P.740 - 747.

62. Arzumanian, V. Mechanisms of nitric oxide synthesis and action in cells Text. / V.Arzumanian, E.Stankevicius, A.Laukeviciene // Medicina. -2003. Vol. 39, № 6. - P.535 - 541.

63. Babior, B.M. Familial Mediterranean fever and the control of inflammation Text. / B.M Babior// Curr. Op. Hematol. 1998. - Vol. 5. - P. 1-2.

64. Babior, B.M. NADFH Oxidase: An Update Text. / B.M. Babior // Blood. -1999. Vol. 93, №5. - P.1464 - 1476.

65. Bacterial Infection Induces Nitric Oxide Synthase in Human Neutrophils Text. / M. A. Wheeler, S. D. Smith, G. Garcia-Cardena et al. // J. Clin. Invest. 1997.- Vol. 99, №1.-110-116.

66. Bactericidal properties of hydrogen peroxide and copper or iron-containing complex ions in relation to leukocyte function Text. / H. Elzanowska, R.G. Wolcott, D.M. Hannum et al. // Free Radic. Biol. Med. 1995. - Vol. 18. -P. 437-450.

67. Bannick, P. Nitric oxide ininhibits neutrophil p2 integrin function by inhibiting membrane-associated cyclic GMP synthesis Text. / P. Bannick, Q.Chen, Y.Hu //J. Cell. Physiol. 1997. - Vol. 172. - P.12.

68. Barnes, P.J. Nitric oxide and asthmatic inflammation Text. / P.J. Barnes, F.Y. Liew // Immunol. Today. 1995. - Vol. 16. - P.128.

69. Baud, L. Specificity and cellular distribution of human polymorphonuclear leucocyte receptors for leukotriene C4 Text. / L. Baud, C.H. Koo, E.J. Goetzl // Immunol. 1987. - Vol. 62. -P.53.

70. Beckmann, J.S. Nitric oxide, superoxide, and peroxinitrite: The good, the bad, and ugly Text. / J.S. Beckmann, W.H. Koppenol // Am. J. Phisiol. -1996.- Vol. 271. -P.1424- 1437.

71. Berton, G. Tyrosine kinases in neutrophils Text. / G. Berton // Curr. Opin. Hematol. 1999. - Vol. 6. - P.51-58.

72. Borregaard, N. Granules of the human neutrophilic polymorphonuclear leukocyte Text. / N.Borregaard, J.B. Cowland // Blood. 1997. - Vol. 89, №10. - P.3503-3521.

73. Bratt, J. Gyllenhammar H: The role of nitric oxide in lipoxin A4-induced polymorphonuclear neutrophil-dependent cytotoxicity to human vascular endothelium in vitro Text. / J. Bratt, H.Gyllenhammar //Arthritis Rheum. -1999.-Vol.38.-P.768.

74. Cassatella, M.A. Neutrophil-derived proteins: Selling cytokines by the pound Text. / M.A. Cassatella // Adv. Immunol. 1999. - Vol. 73. - P.369 -509.

75. Cassatella, M.A. The production of cytokines by polymorphonuclear neutrophils Text. / M.A. Cassatella // Immunol. Today. 1995. - Vol. 16. -P.21-26.

76. Clancy, R.M. Nitric oxide stimulates the ADP-ribosylation of actin in human neutrophils Text. / R.M. Clancy, J. Leszczynska-Piziak, S.B. Abram-son// Biochem. Biophys. Res. Commun. 1993. - Vol. 191. -P.847-852

77. Clark, RA. Activation of the neutrophil respiratory burst oxidase Text. / R.A. Clark//Infect. Dis. 1999. - Vol. 179. - S.309-317.

78. Conlan, J.W. Critical roles of neutrophils in host defense against experimental systemic infection of mice by Listeria monocytogenes, Salmonella typhi-murium, and Yersinia enterocolitica Text. / J.W. Conlan // Infect. Immunol.-1997.-Vol. 65.-P.630-635.

79. Constitutive and inducible nitric-oxide synthases incorporate molecular oxygen into both nitric oxide and citrulline Text. / A.M. Leone, R.M. Palmer, R.G. Knowles et al. // Ibid. 1991. - Vol. 266. - P.23790-23795.

80. Co-purification of 130 kd nitric oxide synthase and a 22 kd link protein from human neutrophils Text. / J.L. Bryant, P.Mehta, A. Vonderporten et al. //Biochem. Biophys. Res. Commun. 1992. - Vol. 189. - P.558.

81. Cytokine-treated human neutrophils contain inducible nitric oxide synthase that produces nitration of ingested bacteria Text. / T.J. Evans, L.D.K.Buttery, A. Carpenter et al. // Cell Biology 1996. - Vol. 93. - P. 9553-9558.

82. Defensins: key players or bystanders in infection, injury, and repair in the lung? Text. / S. van Wetering , P.J. Sterk , K.F. Rabe et al. // Clin. Immunol. 1999. - Vol. 104, №6.-P.l 131-1138.

83. DeGroote, M.A. NO inhibitions: antimicrobial properties of nitric oxide Text. / M.A, DeGroote, F.C. Fang // Clin. Infect. Dis. -1995. Vol. 21, №2. - P. 162 - 165.

84. DeLeo, F.R. Assembly of the phagocyte NADPH oxidase: molecular interactions of oxidase proteins Text. / F.R. DeLeo, M.T. Quinn // J. Leukoc. Biol.- 1996.- Vol.60. P.677-691.

85. Determination of mitochondrial reactive oxygen species: methodological aspects Text. / C. Batandier, E. Fontaine, C. Kriel et. al. // J. Cell. Mol. Med. -2002.-Vol. 6, №2. P.175-187.

86. DNA deaminating ability and genotoxicity of nitric oxide and its progenitors Text. / D.A. Wink, K.S. Kasprzak, C.M. Maragos et al. // Science (Wash. DC). 1991. - Vol. 254. - 1001-1003.

87. Druge, W. Free radicals in the physiological control of cell function Text. / W. Druge // Physiol. Rev. 2002 - Vol. 82, №1. - P. 47 - 95.

88. Effect of nitric oxide on staphylococcal killing and interactive effect with superoxide Text. / S.S. Kaplan, J.R. Lancaster, R.E. Basford et al. // Infect, and Immun. 1996. - Vol. 64, №1.- P.69-76.

89. Effects of exogenous nitric oxide on neutrophil oxidative function and vi-abilityText. / A.H. Daher, J.D. Fortenberry, M.L. Owens et al. // Am. J. Respir. Cell. Mol. Biol. 1997. - Vol. 16. - P. 407.

90. Effects of leukotrienes and f-met-leu-phe on oxidative metabolism of neutrophils and eosinophils Text. / J. Palmblad, H.Gyllenhammar, J.A. Lindgren et al. // J. Immunol. 1984. - Vol. 132. - P.3041.

91. Effects of nitric oxide synthase inhibitors on murine infection with Mycobacterium tuberculosis Text. / J. Chan, K. Tanaka, D. Carroll et al. // Infect. Immun. 1995. - Vol. 63. - P.736-740.

92. Effects of Staphylococcal Enterotoxins on Human Neutrophil Functions and Apoptosis Text. / D. A. Moulding, C. Walter, C. A. Hart S. W. Edwards et al.// Infection and Immunity. 1999. - Vol. 67, № 5. - P.2312-2318.

93. Electron microscopic study of phagocytosis of Echerichia coli by polymorphonuclear leukocytes Text. / M. Rozenberg-Arska, M.E. Salters, J.A.G. van Strijp et al. I I Infect. Immun. 1985. - Vol. 50, №6.- P.852-859.

94. Elsbach, P. What is the real role of antimicrobial polypeptides that can mediate several other inflammatory responses? Text. / P. Elsbach, American Society for Clinical Investigation // J. Clin. Invest. 2003. - Vol. 111, №11. - P.l643—1645.

95. Endogenous antimicrobial peptides and skin infections in atopic dermatitis Text. / P.Y. Ong et al. // N. Engl. J. Med. 2002. - Vol. 347. - P.1151 -1160.

96. Endogenous gamma interferon, tumor necrosis factor, and interleukin-6 in Staphylococcus aureus infection in mice Text. / A. Nakane, M. Okamoto, M. Asano et al. // Infect. Immun. 1995. - Vol. 63. - P. 1165-1172.

97. Enhanced host defense after gene transfer in the murine p47phox-deficient model of chronic granulomatous disease Text. / M. Mardiney, S.H. Jackson, S.K. Spratt et al. // Blood. 1997 - Vol. 89. - P. 2268 - 2275.

98. Extensive nitration of protein tyrosines in human atherosclerosis detected by immunohistochemistry Text. / J. S. Beckmann, Y. Z.Ye, P. G. Anderson et al. // Biol. Chem. Hoppe. Seyler. 1994. - Vol. 375. - P.81 - 88.

99. Fang, F.C. Antimicrobial reactive oxygen and nitrogen species: concepts and controversies Text. / F.C. Fang // Nat. Rev. Microbiol. 2004. - Vol. 2. -P.820-832.

100. Fang, F.C. Mechanisms of Nitric Oxide related antimicrobal activity Text. / F.C. Fang / J. Clinical Invest. - 1997. - Vol.99, №12. - P.2818-2825.

101. Free radicals and phagocytic cells Text. / G.M. Rosen, S. Pou, C.L. Ramos et al. // FASEB. J. 1995. - Vol. 9. - P.200 - 215.

102. Ganz, T. Defensins Text. / T. Ganz, R.I. Lehrer // Pharmacol. Ther. -1995. Vol. 66. - P.191-205.

103. Generation of nitric oxide by human neutrophils Text. / C.D. Wright, A Mulsch, R Busse et al./ // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1989. - Vol. 160, N2. - P.813-819.

104. Greenberg, S. Phagocytosis and innate immunity Text. / S. Greenberg, S. Grinstein // Curr. Opin. Immunol. 2002. - Vol. 14. - P. 136-145.

105. Griswold, D.E. Induction of plasma exudation and inflammatory cell infiltration by leukotriene C4 and leukotriene B4 in mouse peritonitis Text. / D.E.Griswold, E.F. Webb, L.M. Hillegass // Inflammation. 1991. - Vol. 15. -P.251.

106. Hampton M.B., Kettle A.J. Inside the Neutrophil Phagosome: Oxidants, Myeloperoxidase, and Bacterial Killing Text. / M.B. Hampton, A.J. Kettle // Blood. 1998. - Vol. 92, N.9. - P.3007-3017.

107. Hausladen, A. Superoxide and peroxynitrite inactivate aconitases, but nitric oxide does not Text. / A.Hausladen, I. Fridovich / J. Biol. Chem. 1994. -Vol. 269. - P.29405-29408.

108. Heimbtirger, M. Effects of leukotriene C4 and D4, histamine and bradykinin on cytostatic calcium concentrations and adhesiveness of endothelial cells and neutrophils Text. / M. Heimbiirger, J. Palmblad // Clin. Exp. Immunol. 1996.-Vol. 103.-P.454.

109. Heinecke, J.W. Is lipid peroxidation relevant to atherogenesis? Text. / J.W. Heinecke//J. Clin. Invest. 1999. - Vol. 104. - P. 135-136.

110. Hope, B.T. Histochemical characterization of neuronal NADPH-diaforase Text. / B.T. Hope, S.R. Vincent // J. Histochem. Cytochem. 1989. - Vol. 37. - P.653-661.

111. Host defense functions of proteolytically processed and parent (unprocessed) cathelicidins of rabbit granylocytes Text. / K.A Zazember, S.S. Katz, B. F. Tack et al. // Infect. Immun. 2002. - Vol. 70, №2. - P. 569 - 576.

112. Human and rat neutrophils constituvely express neural nitric oxide synthase mRNA Text. / S. S. Greenberg, J. Ouyang, X. Zhao et al. // Nitric Oxide -1998.-Vol.2.-P.203-212.

113. Human neutrophil defensin and serpins form complexes and inactivate each other Text. / A.V. Panyutich, P.S. Hiemstra, S. Van Wetering et al. // Am. J. Resp. Cell. Mol. Biol. 1995. - Vol.12. - P.351 - 357.

114. Human polymorphonuclear leukocytes lack detectable nitric oxide synthase activity Text. / L. Yan, R.W. Vandivier, A.F. Suffredini et al. //Biochem. Biophys. Res. Commun. 1994 - Vol. 153. - P.1825 - 1834.

115. Impaired innate immunity in the newborn: newborn neutrophils are deficient in bactericidal/permeability-increasing protein Text. / O. Levy, S. Martin, E. Eichenwald, T. Ganz, et al. // Pediatrics. 1999. - Vol. 104. - P. 1327 -1333.

116. Inducible expression of an antimicrobial peptide of the innate immunity in polymorphonuclear leukocytes Text. / L. Tomasinsig, M. Scocchi C. Di Loreto et al. //J. Leuk. Biol. 2002.- Vol. 72. - P. 1003-1010.

117. Inhibition by nitric oxide donors of human polymorphonuclear leucocyte function Text. / E. Moilanen, P. Vuorinen, H. Kankaanranta et al. // Br. J. Pharmacol. 1993. - Vol. 109. - P. 852.

118. Investigating antibody-catalyzed ozone generation by human neutrophils Text. / B.M., Babior, C. Takeuchi., J.Ruedi et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2003. - Vol. 100. - P. 3031-3034.

119. Jackson, S.H. The p47phox mouse knock-out model of chronic granulomatous disease Text. / S.H. Jackson, J.I. Gallin, S.M. Holland // J. Exp. Med. -1995.-Vol. 182. -P.751-758.

120. Kanner, J. Nitric oxide as an antioxidant Text. / J. Kanner, S. Harel, R. Granit //Arch. Biochem. Biophys. -1991. Vol. 289. - P.130-136.

121. Kim, C., Dinauer M.C. Rac2 is an essential regulator of neutrophil nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase activation in response to specific signaling pathways Text. / C. Kim, M.C. Dinauer // J. Immunol. 2001.-Vol. 166. P.1223-1232.

122. Klebanoff, S.J Oxygen metabolites from phagocytes Text. / S.J Klebanoff // Inflammation: basic principles and clinical correlates / By ed. J.I. Gallin, R. Snyderman. Philadelphia, Lippincott-Williams & Wilkins, 1999. - P. 345 -386.

123. Klebanoff, S.J. Myeloperoxidase: friend and foe Text. / S.J. Klebanoff // J. Leuk. Biol. 2005. - Vol. 77. - P. 598-625.

124. Klebanoff, S.J. Nitrite production of stimulated human polymorphonuclear leucocytes supplemented with azide and catalase Text. / S.J. Klebanoff, C.F. Nathan // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1993. - Vol. 197, №1. -P. 192-196.

125. Kubes, P. Nitric oxide: an endogenous modulator of leukocyte adhesion Text. / P. Kubes, M. Susuki, D. Grander // Proc. Nat. Acad. Sci. USA -1991.-Vol. 88.-P. 4651.

126. Labro, M.T. Interference of antibacterial agents with phagocyte functions: immunomodulation or "Immuno-Fairy Tales"? Text. / M.T. Labro //Clin. Microbiol. Rev. 2000. - Vol. 13, №4. -P.615 -650.

127. Larfars, G. Measurement of methemoglobin formation from oxyhemoglobins real-time, continuous assay of nitric oxide release by human polymorphonuclear leukocytes Text. / G. Larfars, H.Gyllenhammar // J. Immunol. Methods. 1999. - Vol. 184. - P.53.

128. Larfars, G. Nitric oxide (NO) production in human polymorphonuclear neutrophil granulocytes Text. / G. Larfars, H. Gyllenhammmar // Endothelium. 1993.-Vol. 1.-P.31.

129. Larfars, G. Stimulus-dependent transduction mechanisms for nitric oxide release in human polymorphonuclear neutrophil leukocytes Text. / G. Larfars, H. Gyllenhammar // J. Lab. Clin. Med. 1998. - Vol. 132. - P.54.

130. Lehrer, R.I. Antimicrobial peptides in mammalian and insect host defence Text. / R.I. Lehrer, T. Ganz // Curr. Opin. Immunol. 1999. - №11. -P.23-27.

131. Leukotriene B4 — a stereospecific stimulator for release of lysosomal enzymes from neutrophils. FEBS Text. / I.Hafstrom, J. Palmblad, C. Malm-sten et al. // Lett. -1981. Vol. 130. - P.146.

132. Leukotriene B4 is a complete sectretagogue in human neutrophils: A kinetic analysis Text. / N.C. Serhan, A. Radin, J.E. Smolen et al. // Biochem. Bio-phys. Res. Commun. 1982. - Vol. 107. - P. 1006.

133. Leukotriene B4 is a potent and stereospecific stimulator of neutrophil chemotaxis and adherence Text. / J Palmblad, C.L. Malmsten, A.M. Uden et al.// Blood. 1981. - Vol. 58. - P.658.

134. Levy, O. Antimicrobial proteins and peptides: anti-infective molecules of mammalian leukocytes Text. / 0. Levy // J. Leukoc. Biol. 2004. - Vol. 76. - P.909 - 925.

135. Levy, O.A Neutrophil-Derived Anti-Infective Molecule: Bactericidal/Permeability-Increasing Protein Text. / O.A Levy // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 2000. - Vol. 44, №1. - P.2925-2931.

136. Liew, F. Y. Regulation of nitric oxide synthesis in infectious and autoimmune diseases Text. / F. Y Liew// Immunol. Lett.- 1994. Vol. 43. - P.95-98.

137. Liew, F. Y. Tumor necrosis factor-a synergizes with IFN-g in mediating killing of Leishmania major through the induction of nitric oxide Text. / F. Y. Liew, Y. Li, S. Millot // J. Immunol. 1990. - Vol. 145. - P.4306-4310.

138. Lipopolysaccharide-related stimuli induce expression of the secretory leukocyte protease inhibitor, a macrophage-derived lipopolysaccharide inhibitor Text. / F. Jin, C.F. Nathan, D. Radzioch et al. // Infect. Immun. 1998. -Vol. 66.- P.2447-2452.

139. Lisozyme in human neutrophils and plasma. A parameter of myelopoetic activity Text. / K.Lollike, L.Kjeldsen, H.Sengelov at al. //Leukemia. 1995. -Vol.9. - P.159-171.

140. London, S.J. Myeloperoxidase genetic polymorphism and lung cancer risk Text. / S.J. London, T.A.Lehman, J.A. Taylor // Cancer Res. 1997. - Vol. 57. - P.5001-5003.

141. Long-term correction of phagocyte NADPH oxidase activity by retroviral-mediated gene transfer in murine X-linked chronic granulomatous disease Text. / M.C. Dinauer, L.L. Li, H. Bjorgvinsdottir et al. // Blood. 1999. -Vol. 94.-P.914-920.

142. Lorber, B. Listeriosis Text. / B. Lorber // Clin. Infect. Dis. 1997. - Vol.24. -P.l-11.

143. Lowy, F.D. Staphylococcus aureus infections Text. / F.D. Lowy // N. Engl. J. Med.-1998.-Vol. 339.-P.520-532.

144. Malech, H. L. Primary inherited defects in neutrophil function: Etiology and treatment Text. /Н. L. Malech, W.M. Nauseef// Semin. Hematol. 1997. -Vol.34. - P. 279-290.

145. Marietta, M.A. Nitric oxide synthase structure and mechanism Text. / M.A. Marietta // J. Biol. Chem. 1993. - Vol. 268. - P. 12231 - 12234.

146. Mayer-Scholl, A. How do neutrophils and pathogens interact? Text. / A. Mayer-Scholl, P. Averhoff, A. Zychlinsky // Curr. Oppin. Microbiol. -2004. Vol. 7 P.62 - 66.

147. McCall, T. Induction of nitric oxide synthase in rat peritoneal neutrophils and its inhibition by dexamethazome Text. / T. McCall, R.M.J. Palmer, S. Moncada // Eur. J. Immunol. 1991. - Vol. 21,- P.2523 - 2527.

148. McLennan, H.R. The contribution of mitochondrial respiratory complexes to the production of reactive oxygen species Text. / H.R. McLennan, M. Degli Esposti //J. Bioenerg. Biomembr. 2000. - Vol. 32. - P.153-162.

149. Mice lacking inducible nitric oxide synthase are not resistant to lipopolysac-charide-induced death Text. / V.E. Luabach, E.G. Shesely, 0. Smithies et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1995. - Vol. 92. -P.l0688-10692.

150. Michel, T. Perspective series: nitric oxide and nitric oxide synthases. Nitric oxide synthases: which, where, how and why? Text. / T. Michel, 0. Feron //J. Clin. Invest. 1997.-Vol. 100. - P.2146- 2152.

151. Miller, R.A. Role of oxidants in microbial pathophysiology Text. / R.A. Miller, B.E. Britigan // Clin. Microbiol. Rev. 1997. - Vol.10. - P.l-18.

152. Modulation of granulocyte survival and programmed cell death by cytokines and bacterial products Text. / F. Colotta, F. Re, N. Polentarutti et al. // Blood. 1992. - Vol. 80. - P.2012-2020.

153. Moncada, S. Nitric oxide: Physiology, pathology and pharmacology Text. / S.Moncada, R.M.J. Palmer, E.A. Higgs // Phamacol. Rev. 1991. - Vol. 43. -P.109.

154. Mouse model of X-linked chronic granulomatous disease, an inherited defect in phagocyte superoxide production Text. / J.D. Pollock, D.A. Williams, M.A. Gifford et al. // Nat. Genet. 1995. - № 9. - P.202-209.

155. Myeloperoxidase and horseradish peroxidase catalyze tyrosine nitration in proteins from nitrite and hydrogen peroxide Text. / J.B Sampson, Y. Ye, H. Rosen et al. // Arch. Biochem. Biophys. 1998. - Vol. 356. - P.207-213.

156. Myeloperoxidase-generated reactive nitrogen species convert LDL into an atherogenic form in vitro Text. / E.A.Podrez, D. Schmitt, H.F. Hoff et al. // J. Clin. Invest. 1999. - Vol. 103. - P.1547-1560.

157. NADF Oxidase activation and assembly during phagocytosis Text. / F.R. Deleo, L.-A.H. Allen, M. Apicella and William M. Nauseef // J. Immunol. -1999. -Vol. 163.-P. 6732-6740.

158. Nathan, C. Reactive oxygen and nitrogen intermediates in the relationship between mammalian hosts and microbial pathogens Text. / C.Nathan, M.U.Shiloch // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2000. - Vol. 97, №16. - P.8841 -8848.

159. Nathan, C. Regulation of biosynthesis of nitric oxide Text. / C. Nathan, Q.W. Xie // J. Biol. Chem. 1994. - Vol. 269. - P. 13725-13728

160. Nathan, C. Perspectives series: nitric oxide and nitric oxide synthases. Inducible nitric oxide synthase: what difference does it make? Text. / C. Nathan//J. Clin. Invest. 1997. - Vol. 100.- P. 2417-2423.

161. Nauseef, W.M. Effect of the R 569 missense mutation on the biosynthesis of myeloperoxidase Text. / W.M. Nauseef, M. Cogley, S. McCormick // J. Biol. Chem. 1996. - Vol. 271. - P.9546 - 9549.

162. Nauseef, W.M. Insights into myeloperoxidase biosynthesis from inherited deficiency Text. / W.M. Nauseef// J. Mol. Med. 1998. - Vol. 76. - P. 661 -668.

163. Neutrophil apoptosis is associated with a reduction in CD 16 (FcRIII) expression Text. /1. Dransfield, A. Buckle, J. S. Savill, A. McDowall, et al //J. Immunol. 1994. - Vol. 153. - P.1254-1263.

164. Neutrophils: molecules, functions and pathophysiological aspects Text. / V.Witko-Sarsat, P.Rieu, L.Descamps-Latscha, P. Lesavre, et al. // Laboratory Investig. 2000. - Vol. 80. - P.617-653.

165. Ney, P. Nitrovasolidator induced inhibition of LTB4 release from hu-manPMN may be mediated by cyclic GMP Text. / P. Ney, H. Schroder, K. Schror // Eicosanoids. - 1990. - №3. - P.243.

166. A^-methyl-L-arginine inhibits tumor necrosis factor-induced hypotension: implications for the involvement of nitric oxide Text. / Kilborn R. G., S. S. Gross, A. Jubran, et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1990. - Vol. 87. -P.3629-3632.

167. Nitric oxide (NO) protects against cellular damage by reactive oxygen species Text. / D.A. Wink, J.A. Cook, R. Pacelli et al. // Toxicol. Lett. 1995. - Vol. 82-83. -P.221 -226.

168. Nitric oxide and intracellular heme Text. / Y.-M. Kim, H.A. Bergonia, C. Muller et al.// J. Adv. Pharmacol. 1995. - Vol. 34. - P.277-291.

169. Nitric oxide diffusion in membranes determined by fluorescence quenching Text. / J.M. Denicola, A. Souza, R. Radi et al. // Arch. Biochem. Biophys. -1996.-Vol. 328. P.208-212.

170. Nitric Oxide Is Protective in Listeric Meningoencephalitis of Rats Text. / K. A. Remer, T. W. Jungi, R. Fatzer et al. // Infection and Immunity. 2001. -Vol. 69, №6. - P.4086 - 4093.

171. Nitric oxide produced during murine listeriosis is protective Text. / K.S. Boockvar, D.L. Granger, R.M. Poston et al. // Infect. Immun.-1994.-Vol. 62, №3.- P.1089-110.

172. Nitric oxide synthase in circulating v. s. extravaseted polymorphonuclear leucocytes Text. / A.M. Miles, M.W. Owens, S. Milligan et al. // J. Leuk. Biol. 1995. - Vol. 58. - P.616 - 622.

173. Nitric oxide synthase localization in the rat neutrophils: immunocytochemi-cal, molecular, and biochemical studies Text. / R. Saini, S. Patel, R. Saluya et al. //J. Leukocyte Biol. 2006. - Vol. 79. - P. 1 - 10

174. Novikoff, A.B. Visualisation of peroxisomes (microbodies) and mitochondria with diaminobenzidine Text. / A.B. Novikoff, S. Goldfischer // J. His-tochem. Cytochem. 1969. - Vol. 17. - P.675-68.

175. Owen, C.A. The cell biology of leukocyte-mediated proteolysis Text. / C.A. Owen, E.J. Campbell // J. Leukocyte Biol. 1999. - Vol. 65. - P. 137— 150.

176. Oxygen radical-nitric oxide reactions in vascular diseases Text. / B.A. Freeman, C.R. White, H. Gutierrez et al. // Adv. Pharmacol. 1995. - Vol. 34. - P.45-69.

177. Pabst, M.J. Priming of neutrophils Text. / M.J. Pabst //Im-munopharmacology of neutrophils / By ed. P.J. Hellewell, T.J. Williams -London, Academic. Press, 1994. P. 195-221.

178. Pacelli, R. Nitric oxide potentiates hydrogen peroxide-induced killing of Escherichia coli Text. / R. Pacelli, D.A. Wink, J.A. Cook // J. Exp. Med.1995.-Vol. 182. P.1469-1479.

179. Padgett, E.L. Rat, mouse and human neutrophils simulated by a variety of activating agents produce much less nitrite than rodent macrophages Text. / E.L. Padgett, S.B. Pruett//Immunology. 1995. - Vol. 84. - P.135 - 141.

180. Pero, R.W. Hypochlorous acid/N-chloramines are naturally produced DNA repair inhibitors Text. / R.W. Pero, Y. Sheng, A. Olsson //Carcinogenesis.1996.-Vol. 17. P.13-18.

181. Petrides, P.E. Molecular genetics of peroxidase deficiency Text. / P.E. Pet-rides / J. Mol. Med. 1998. - Vol. 76. - P.688-698.

182. Phenotype of mice and macrophages deficient in both phagocyte oxidase and inducible nitric oxide synthase Text. / M.U. Shiloh, J.D. MacMicking, S. Nicholson et al. // Immunity. 1999. - №10. - P.29-38.

183. Pieper, G. Similatiry and ingibitory action of nitric oxide donor agents vs. nitrovasolidators on reactive oxygen production by isolated polymorphonu-clearleucocytes Text. / G. Pieper, A.Clarke, G.Gross // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1994.-V. 269-P. 451.

184. Presence of proteinase 3 in secretory vesicles: Evidence of a novel, highly mobilizable intracellular pool distinct from azurophil granules Text. / V. Witko-Sarsat, E.M. Cramer, C. Hieblot, G. J, Nusbaum, et al. // Blood. -1999. № 4. P.2487 - 2496.

185. Protective role of nitric oxide in Staphylococcus aureus infection of mice Text. / S. Sasaki, T. Miura, S. Nishikawa et al. //Infect. Immun. 1998. -P.1017-1022.

186. Protein kinase C5 is required for p47phox phosphorylation and translocation in activated human monocytes Text. / E.A. Bey, B. Xu, A. Bhattacharjee et. al. // J. Immunol. 2004. - Vol. 173. - P.5730-5738.

187. Radi, R. Nitric oxide, oxidants, and protein tyrosine nitration Text. / R. Radi // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -2004. Vol. 101, №12. - P.4003-4008.

188. Rat neutrophil function, and leukotriene generation in essential fatty acid deficiency Text. / H. Gyllenhammar, J. Palmblad, B. Ringertz et al. // Lipids. 1988.-Vol. 23.-P.89.

189. Reaction of superoxide and nitric oxide with peroxynitrite: Implications for peroxynitrite-mediated oxidation reactions in vivo Text. / D. Jourd'heuil, F.L. Jourd'heuil, P.S. Kutchukian et al. // J. Biol. Chem. 2001. - Vol. 276. -P.28799-28805.

190. Relations polynucleaires neutrophils et monocytes macrophages Text. / B. Descamps-Latscha, V. Witko-Sarsat //Rev. Fr. Allergol. - 1999. - Vol. 39.-P.241 -247.

191. Release of nitric oxide during T cell-independent proliferation pathway of macrophage activation, its role in resistance to Listeria monocytogenes Text. / K. P. Beckerman, H. W. Rogers, J. A. Corbett et al. //J. Immunol. -1993.-Vol. 150. P.888-895.

192. Romagnani, S. Lymphokine production by human T cells in disease state Text. / S. Romagnani // Annu. Rev. Immunol. 1994. - № 12. - P.227-257.

193. Schulz, K. Reevaluation of the Griess method for determining NO/NO*2 in aqueous and protein-containing samples / K. Schulz, S. Kerber, M. Kelm // J. Nitric Oxide.-1999.-Vol. 3, №3.-P.225-234.

194. Secretory leukocyte proteinase inhibitor is a major leukocyte elastase inhibitor in human neutrophils Text. / J.M. Sallenave, M. Si-Ta Har, G. Cox et al. // J. Leukoc. Biol. 1997. - Vol. 61. - P. 695 - 702.

195. Severe impairment in early host defense against Candida albicans in mice deficient in myeloperoxidase Text. / A.Y. Koyama, S. Nyui, K. et al. // Infect. Immun. 1999. - Vol. 67. - P. 1828-1836.

196. Smutzer, Gr. Research Tools for Nitric Oxide. A wide variety of reagents are available for nitric oxide research Text. / Gr. Smutzer // The Scientist. -2001.-Vol. 15, №6. P.23.

197. Spitznagel, J.K. Antibiotic proteins of human neutrophils Text. / J.K. Spitznagel // J. Clin. Invest. 1990. - Vol. 86. - P. 1381-1386.

198. Targeted disruption of the NF-IL-6 gene discloses its essential role in bacteria killing and tumor cytotoxicity by macrophages Text. / T. Tanaka, S. Akira, K. Yoshida et al. // Cell. 1995. - Vol. 80. - P.353 - 361.

199. The human antibacterial cathelicidin, hCAP-18, is synthesized in myelocytes and metamyelocytes and localized to specific granules in neutrophils Text. / 0. Sorensen, K. Arnljots, J.B. Cowland et al. // Blood. 1997. - Vol. 90. -P.2796 -2803.

200. The protective role of endogenously synthesized nitric oxide in staphylococcal enterotoxin B-induced shock in mice Text. / S. Florquin, Z. Amraoui, C. Dobois et al. // J. Exp. Med. 1994. - Vol. 180. - P. 1153-1158.

201. The role of protegrins and other elastase-activated polypeptides in the bactericidal properties of porcine inflammatory fluids Text. / J.Shi, T. Ganz // Infect. Immun. -1998. Vol. 66. - P.3611-3617.

202. Three-dimensional solution structure of lactoferricin B, an antimicrobial peptide derived from bovine lactoferrin Text. / P.M. Hwang, N. Zhou, X. Shan et al. // Biochemistry. 1998. - Vol.37. - P.4288-4298.

203. TNF-alpha and IFN-gamma stimulate a macrophage precursor cell line to kill Listeria monocytogenes in a nitric oxide-independent manner Text. / P.J. Leenen, B.P. Canono, D.A. Drevets et al. // Infect, and Immun. 2001. -Vol. 69, №6,- P.4086-4093.

204. Vallance, P. Nitric oxide as an antimicrobial agent: does NO always mean NO? Text. / P. Vallance, I. Charles // Gut. 1998. - Vol.42. - P.313-314.

205. Ward, P.A. The acute inflammatory response and its regulation Text. / P.A. Ward // Arch. Surg. 1999. - Vol. 134. - P.666-669.

206. Webb, J. L. Effect of aghesion on inducible nitric oxide synthase (iNOS) production in purified human neutrophils Text. / J.L. Webb, J.M. Polak, T.J. Evans // Clin. Immunol. 2001. - Vol. 123. - P. 42 - 48.

207. Weiss, S.J. Tissue destruction by neutrophils Text. / S.J. Weiss / N. Engl. J. Med. 1989. - Vol. 320. - P.365-376.

208. Werner, E. GTPases and reactive oxygen species: switches for killing and signaling Text. / E. Werner // J. Cell Science. 2004. - Vol. 117. - P.143-153.

209. Wink, D.A. Chemical biology of nitric oxide: Insights into regulatory, cytotoxic, and cytoprotective mechanisms of nitric oxide Text. / D.A. Wink, J.B. Mitchell // Free Radic. Biol. Med. 1998. - Vol. 25. - P.434-456.

210. Wright, C.E. The protective and pathological roles of nitric oxide in endotoxin shock Text. / C.E. Wright, D.D. Rees, S. Moncada // Cardiovasc. Res.-1992. Vol. 26. - P.48-57.

211. Yersenia pseudotuberculosis induced calcium signaling in neutrophils is blocked by the virulence effector YopH. Text. / Andersson K., Magnusson K.-E., Majeed M. O. Stendahl, et al. // Infec. and Immun. - 1999. - Vol. 67, №5. -P. 2567-2574.

212. Zamora, R. Inducible nitric oxide synthase and inflammatory diseases Text. / R. Zamora, V. Vodovotz, T. R. Billiar // Molec. Med. 2000. - Vol. 6, №5. - P.347-373.

213. Zhao, Y. X. Impact of interferon-g receptor deficiency on experimental Staphylococcus aureus septicemia and arthritis Text. / Y. X. Zhao, A. Tarkowski. // J. Immunol. 1995. - Vol. 155. - P.5736 - 5742.