Роль селектинов в формировании и прогрессировании хронических заболеваний печени тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.04, кандидат наук Гилязова, Гузель Ирековна

• Гилязова, Гузель Ирековна
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Гилязова, Гузель Ирековна

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ 6 ГЛАВА 1. СЕЛЕКТИНЫ В НОРМЕ И ПРИ ЗАБОЛЕВАНИЯХ

ПЕЧЕНИ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1. Роль молекул адгезии в воспалении и иммунном ответе

1.2. Показатели селектинов при заболеваниях печени

1.2.1. Структура и роль селектинов в реализации воспаления и иммунного ответа

1.2.2. Е-селектин при патологии печени

1.2.3. Р-селектин и хроническая патология печени

1.2.4. Ь-селектин при воспалительных заболеваниях печени

1.3. Роль селектинов в развитии ремоделирования печени

1.4. Взаимоотношения противовирусной терапии с селектинами при хронических вирусных заболеваниях печени

1.5. Показатели селектинов в прогнозировании течения цирроза печени

ГЛАВА 2. КЛИНИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА БОЛЬНЫХ

ГЛАВА 3. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Морфологическое исследование печени

3.2. Получение биологических образцов для специального исследования

3.3. Методы исследования селектинов в крови

3.3.1. Определение содержания Е-селектина в крови

3.3.2. Определение содержания Ь-селектина в крови

3.3.3. Определение содержания Р-селектина в

крови

3.4. Статистический анализ данных

ГЛАВА 4. КЛИНИКО-ПАТОГЕНЕТИЧЕСКОЕ И ПРОГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ СЕЛЕКТИНОВ ПРИ ХРОНИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ ПЕЧЕНИ (СОБСТВЕННЫЕ НАБЛЮДЕНИЯ)

4.1. Селектины при хронической патологии печени

4.2. Взаимосвязь селектинов и гистологических изменений при хронических вирусных заболеваниях печени

4.3. Взаимосвязь селектинов с противовирусной терапией хронических вирусных заболеваний печени

4.3.1. Влияние противовирусной терапии на показатели семейства селектинов в крови

4.3.2. Взаимосвязь исходных показателей селектинов с результатами противовирусной терапии

4.4. Взаимосвязь селектинов с исходами цирроза печени (результаты трехлетнего наблюдения)

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

БИБЛИОГРАФИЯ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АлАТ - аланиновая аминотранфераза

АсАТ - аспарагиновая аминотрансфераза

ВРВП - варикозное расширение вен пищевода

ДИ - доверительный интервал

ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота

ИГА - индекс гистологической активности

ИФ - индекс фиброза

ИФА - иммуноферментный анализ

ИФН - интерферон

МВС - мезенхимально-воспалительный синдром

ОАГ - острый алкогольный гепатит

ОШ - отношение шансов

ПГ - портальная гипертензия

ПЦР - полимеразная цепная реакция

РНК - рибонуклеиновая кислота

УВО - устойчивый вирусологический ответ

ФНО-а - фактор некроза опухоли-а

ХВГ - хронический вирусный гепатит

ХВЗП - хронические вирусные заболевания печени

ХЗП - хронические заболевания печени

ЦП - цирроз печени

ЭГДС - эзофагогастродуоденоскопия

Ас - точность

НВУ - вирус гепатита В

НСУ - вирус гепатита С

1САМ-1 - молекула межклеточной адгезии 1 типа

ТчПРУ - отрицательная предсказательная ценность

РЕСАМ - молекула адгезии тромбоцитов и эндотелиоцитов

РРУ - положительная предсказательная ценность

Р8вЬ - Р-селектин-гликопротеиновый лиганд 1 типа

8е - чувствительность

8р - специфичность

УСАМ-1 - молекула адгезии сосудистого эндотелия 1 типа

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Роль селектинов в формировании и прогрессировании хронических заболеваний печени»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы

Хронические вирусные заболевания печени являются важнейшей проблемой гастроэнтерологии. Маркеры НВУ-инфекции регистрируются у 350 миллионов человек в мире, ежегодно умирает около 1 миллиона людей от связанных с ней осложнений [85, 230]. Приблизительно 130-170 миллионов людей страдают хроническим вирусным гепатитом С [25], удельный вес лиц с маркерами НСУ-инфекции увеличился за последние два десятилетия до 2,8% [103], что сопровождается ростом частоты цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы [151]. Преобладание среди пациентов лиц трудоспособного возраста указывает не только на медицинскую, но и на высокую социальную значимость хронической патологии печени.

Внедрение гепатотропного вируса в организм сопровождается развитием воспалительной реакции и активацией иммунной системы, направленной против чужеродного агента. Известно, что для полноценной элиминации вируса необходим сбалансированный иммунный ответ. Селектины, экспрессируемые и секретируемые активированными клетками, отвечают за взаимоотношения эндотелиоцитов, лейкоцитов и тромбоцитов, что обеспечивает миграцию клеток крови в очаг воспаления [14, 20,239, 243]. Однако аккумуляция иммунокомпетентных клеток в печеночной паренхиме может вызывать как элиминацию вируса, так и, наоборот, усиливать повреждение печени и дальнейшее прогрессирование воспалительного процесса [108].

Несмотря на многочисленные свидетельства нарушений медиаторов межклеточных взаимодействий при патологии печени [172, 182, 183, 215, 220, 241], мнение в отношении значимости этих отклонений противоречиво. Остаются неуточненными механизмы, позволяющие гепатотропным вирусам

персистировать в организме и ускользать от «иммунного надзора». Это является основанием для рассмотрения новой клинической парадигмы расстройств межклеточных взаимодействий при патологии печени.

Разработка комплексной оценки нарушений селектинов при хронической патологии печени находится в стадии поиска решения проблемы. Сохраняются противоречия в отношении характера и выраженности отклонений молекул адгезии при хроническом гепатите и циррозе печени. Отсутствуют убедительные сведения о сопряженности изменений баланса селектинов с этиологией и клиническими составляющими патологии печени, в том числе с формированием пищеводных флебэктазий. Отсутствуют данные о взаимосвязи опосредованного селектинами иммунного гомеостаза с процессами воспаления, фиброза и тканевого ремоделирования - ключевыми проблемами патогенеза хронической вирусной патологии печени.

Нет данных о влиянии противовирусной терапии на показатели селектинов, что позволило бы расширить понимание механизмов реверсии печеночного воспаления и фиброза и прогнозировать возникновение и стабильность вирусологической ремиссии. Практически отсутствуют работы, посвященные изучению предикторной роли медиаторов межклеточных взаимодействий в прогнозе ХВЗП.

В связи с этим изучение клинико-патогенетического и прогностического значения селектинов при хронической патологии печени представляет несомненный теоретический и практический интерес как с точки зрения их взаимосвязи с клиническими проявлениями заболеваний, так и с позиции совершенствования дифференциально-диагностических, лечебных и прогностических программ.

Цель исследования. Определить клинико-патогенетическое и прогностическое значение селектинов при хронических заболеваниях печени.

Задачи исследования:

1. Изучить содержание в крови Е-, Ь- и Р-селектина у больных хроническим вирусным гепатитом и циррозом печени.

2. Установить взаимосвязь селектинов с этиологией заболевания, генофенотипическими особенностями гепатотропных вирусов, основными клинико-лабораторными синдромами патологии печени.

3. Выявить взаимосвязь отклонений молекул адгезии с выраженностью стеатоза, гистологической активностью и степенью печеночного фиброза и установить возможности их применения в неинвазивной диагностике активности воспаления и фиброза печени, в диагностике варикозного расширения вен пищевода.

4. Определить сопряженность селектинов с результатами противовирусной терапии хронических вирусных заболеваний печени для выработки предикторов эффективности лечения.

5. У больных циррозом печени сопоставить изучаемые показатели с характером течения заболевания, создать прогностические индикаторы и сформировать группы риска больных в отношении неблагоприятного прогноза.

Научная новизна работы

Впервые на большом клиническом материале проведено изучение и установлены закономерности нарушений селектинов при хронической патологии печени. Раскрыты новые особенности сдвигов молекул адгезии в зависимости от этиологии заболевания. Впервые получены данные о том, что наиболее выраженные изменения уровней Е- и Р-селектина в крови присущи циррозу печени. Впервые отмечены максимальные отклонения медиаторов межклеточных взаимодействий при алкогольном циррозе печени, особенно в случаях сочетания с острым алкогольным гепатитом. Впервые показано

углубление отклонений со стороны селектинов с усилением цитолиза, наличием мезенхимального воспаления и холестаза, с тяжестью цирроза, развитием гиперспленизма. Впервые определены повышенные уровни Р-селектина при высоких градациях пищеводных венэктазий. Доказана информативность показателя Р-селектина для целенаправленного поиска варикозного расширения вен пищевода.

Впервые установлена вовлеченность молекул адгезии в процессы воспаления и фиброза и выявлена весомая роль в ремоделировании печени увеличенных значений селектинов в крови. Впервые оценена информативность показателей Е-, Ь- и Р-селектина как параметров неинвазивной диагностики гистологической активности и печеночного фиброза.

Впервые выявлен более выраженный нормализующий эффект противовирусных средств на показатели селектинов у больных хроническим вирусным гепатитом С и С-вирусным циррозом печени, достигших в ходе противовирусного лечения устойчивого вирусологического ответа. Впервые оценена роль исходных значений Е-, Ь- и Р-селектинов как прогностических критериев стабильной авиремии при хронической НСУ-ассоциированной патологии печени. Впервые выявлены особенности нарушений медиаторов межклеточных взаимодействий, имеющие диагностическое значение и оценивающие неблагоприятный прогноз цирроза печени, определены группы риска его развития на основе изучения показателей селектинов.

Практическая значимость работы

С учетом установленной взаимосвязи Р-селектина с выраженностью пищеводных флебэктазий оптимизированы возможности неинвазивной диагностики степени варикозного расширения вен пищевода у больных циррозом печени.

Взаимосвязь селектинов с морфологическими проявлениями воспаления и фиброза позволила осуществлять неинвазивную оценку

умеренной и высокой гистологической активности и тяжелого фиброза/цирроза у больных хронической вирусной патологией печени, что имеет большое значение для планирования лечебных мероприятий.

Установленная зависимость результатов противовирусной терапии от исходных значений молекул адгезии составила основу прогностических критериев устойчивого вирусологического ответа у больных хроническими С-вирусными заболеваниями печени.

Факт влияния отклонений медиаторов межклеточных взаимодействий на прогноз (в частности, на летальный исход у больных циррозом печени в течение 1 и 3 лет наблюдения) обосновывает использование показателей Е- и Р-селектина для формирования групп риска данного исхода в указанные сроки наблюдения.

Основные положения, выносимые на защиту:

- особенности отклонений в содержании селектинов крови у больных хроническим вирусным гепатитом и циррозом печени вирусной и алкогольной этиологии;

- влияние типа вируса и фенотипических особенностей НВУ на показатели молекул адгезии и отсутствие их зависимости от степени виремии и генетических особенностей НСУ; более значительные отклонения Е-селектина у пациентов с алкогольным циррозом печени по сравнению с вирусным;

- сопряженность отклонений молекул адгезии с выраженностью цитолитического, наличием мезенхимально-воспалительного и холестатического синдромов, с прогностически тяжелыми вариантами цирроза печени, с общим прогнозом заболевания;

- взаимосвязь высоких градаций пищеводных венэктазий с высокими значениями Р-селектина; возможности применения Р-селектина в диагностике варикозного расширения вен пищевода при циррозе печени;

- возможность использования показателей молекул адгезии для оценки прогноза летального исхода в течение 1 и 3 лет наблюдения;

- взаимосвязь уровней селектинов в крови с воспалением и фиброзом; диагностическая значимость показателей Е-, Ь- и Р-селектина в неивазивной оценке гистологической активности и степени фиброза печени;

- способность противовирусной терапии вызывать улучшение показателей молекул адгезии максимально выраженная в случаях формирования устойчивого вирусологического ответа.

Внедрение в практику

Результаты исследования внедрены в практику работы отделений ГБУЗ СК «Ставропольский краевой клинический центр специализированных видов медицинской помощи» г. Ставрополя, ГБУЗ «Республиканская клиническая больница им. Г. Г. Куватова» г. Уфы. Итоговые материалы работы используются в лекциях и на практических занятиях со студентами, клиническими ординаторами, врачами и аспирантами кафедр госпитальной терапии и поликлинической терапии Ставропольского государственного медицинского университета.

Публикации и апробация работы

По теме диссертации опубликовано 20 научных работ, из них 3 работы в изданиях, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ для публикации результатов кандидатских диссертаций: «Медицинский вестник Северного Кавказа» (2013).

Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на XX итоговой научной конференции молодых ученых с международным участием (Ставрополь, 2012), IV научной медицинской конференции студентов и молодых ученых с международным участием на английском языке (Ставрополь, 2012), 186-м Фальк-симпозиуме (Майнц, 2012), 18-й Российской гастроэнтерологической неделе (Москва, 2012), XVIII Ежегодном конгрессе «Гепатология сегодня» (Москва, 2013), V научной

медицинской конференции студентов и молодых ученых с международным участием на английском языке, посвященной 75-летию Ставропольского государственного медицинского университета (Ставрополь, 2013), IX Межрегиональной научно-практической конференции Российского научного медицинского общества терапевтов (Пятигорск, 2013), XIII международном Евроазиатском конгрессе хирургов и гастроэнтерологов (Баку, 2013), 191-м Фальк-симпозиуме (Лондон, 2013), 19-й Российской гастроэнтерологической неделе (Москва, 2013), на совместном заседании кафедр госпитальной терапии и медицинской реабилитации Ставропольского государственного медицинского университета (Ставрополь, 2013).

ГЛАВА 1. СЕЛЕКТИНЫ В НОРМЕ И ПРИ ЗАБОЛЕВАНИЯХ ПЕЧЕНИ

(ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1. Роль молекул адгезии в воспалении и иммунном ответе

Воспаление - реакция организма на внедрение чужеродного антигена или физическое повреждение тканей, обеспечивающая привлечение лейкоцитов и растворимых компонентов плазмы в очаги инфекции или повреждения ткани [16].

Основной задачей иммунной системы является разрушение чужеродных антигенов независимо от их патогенности, для чего ее компоненты проникают к месту локализации патогена, преодолевая барьер из эндотелиальных клеток сосудов. Гуморальные факторы переносятся током крови и попадают в ткани вследствие повышенной проницаемости и усиленного кровенаполнения сосудов микроциркуляторного русла в очаге воспаления. Трансэндотелиальная миграция иммунных клеток из крови в субэндотелиальное пространство к месту воспалительного очага обусловлена молекулами адгезии, которые экспрессируются на поверхности лейкоцитов, тромбоцитов и эндотелиоцитов [14, 131, 201].

Миграция лейкоцитов к месту воспаления состоит из нескольких этапов, протекающих с участием адгезивных молекул [14, 243]. На первом этапе движение лейкоцитов вдоль сосудистой стенки замедляется и возникает роллинг (перекатывание) их по поверхности активированных эндотелиоцитов, обусловленный влиянием селектинов, что пролонгирует контакт с сосудистой стенкой и увеличивает взаимодействие с хемокинами [14, 139, 140, 142, 239]. Однако роллинг не обеспечивает прочной адгезии лейкоцитов к эндотелию, но приводит к последующей активации интегринов. В отсутствие воспаления роллинг не наблюдается, а сигналом для его начала служит действие провоспалительных агентов (гистамин, тромбин, свободные радикалы), переводящих эндотелий в активированное состояние [5].

Второй этап включает активацию остановленных лейкоцитов и переход их в состояние повышенной адгезивности, приводящее к изменению формы клеток [5, 239] и образованию прочных связей с эндотелиоцитами, что возможно благодаря экспрессии интегринов и молекул суперсемейства иммуноглобулинов на поверхности клеток [14, 140, 142].

Третий этап - проникновение лейкоцитов через пространства между эндотелиоцитами или сквозь них (трансэндотелиальная миграция) в субэндотелиальное пространство [14, 139]. Плотная адгезия лейкоцитов к эндотелию под влиянием 1САМ-1 и УСАМ-1 вызывает увеличение внутриклеточного кальция и активацию различных сигнальных молекул, что облегчает миграцию путем сокращения эндотелиоцитов и ослабевания связей между ними [238]. В этом процессе активное участие принимает молекула адгезии тромбоцитов и эндотелиоцитов (РЕСАМ-1), влияющая на уровень внутриклеточного кальция и изменяющая цитоскелет клетки [5]. Мигрируя, клетки выделяют ферменты, лизирующие базальную мембрану эндотелия, что позволяет им проникнуть в ткани и достигнуть очага воспаления [51].

Эти стадии связаны с различными адгезивными молекулами, последовательность и время экспрессии которых на эндотелии и лейкоцитах различно. Во время воспаления хемокины и цитокины усиливают презентацию на поверхности эндотелиоцитов и тромбоцитов молекул адгезии, которые взаимодействуют с лейкоцитарными рецепторами и усиливают миграцию лейкоцитов из кровотока в места воспаления [16, 51].

Молекулы адгезии - это связанные с плазматической мембраной гликопротеины, экспрессируемые на многих клетках и обеспечивающие лейкоцитарно-тромбоцитарно-эндотелиальные взаимодействия. Играя роль рецепторов, они участвуют в развитии иммунного ответа посредством усиления межклеточных взаимодействий и адгезии клеток к другим клеткам или белкам внеклеточного матрикса [14, 23, 233, 242].

Молекулы адгезии передают стимулирующий сигнал в двух направлениях: 1) внутрь клетки, благодаря чему наступает пролиферация

клетки и секреция цитокинов; 2) сигнал может передаваться изнутри клетки, что вызывает конформационные изменения адгезивного рецептора и повышает его сродство к лиганду [3].

Все медиаторы межклеточных взаимодействий можно разделить на несколько семейств структурно-родственных молекул: селектины, интегрины, суперсемейство иммуноглобулинов [14, 20, 135].

Будучи присоединенными к цитоскелету, адгезивные молекулы пронизывают мембрану клетки, и с их помощью клетки подтягиваются к другим клетками или к внеклеточному матриксу. Во многих случаях отдельная молекула благодаря разным участкам связывания способна взаимодействовать с несколькими лигандами. Хотя связывание молекул адгезии со своими лигандами обычно происходит с низким сродством, авидность взаимодействия может быть высокой за счет кластерного расположения молекул на поверхности клеток. Адгезия клеток может повышаться в результате увеличения числа молекул адгезии на клеточной мембране, обусловленного большими запасами медиаторов во внутриклеточных везикулах, либо связанного с дополнительным индуцированным синтезом и переносом их на поверхность [16].

В физиологических условиях эндотелиальная клетка практически не экспрессирует молекулы адгезии. Механизмы индукции адгезивных молекул у разных популяций лимфоцитов и клеток эндотелия на различных участках сосудистого русла тонко различаются, что обеспечивает точную настройку миграции лейкоцитов сквозь эндотелий при воспалении и последовательное прибытие в очаг различных клеточных популяций. Растворимые молекулы адгезии лишены цитоплазматической и трансмембранной части и позитивно коррелируют с их экспрессией на клетках [89].

Таким образом, молекулы адгезии играют важную роль в функционировании иммунной системы. Оказывая влияние на процессы воспаления и репарации, они обеспечивают постоянство внутренней среды и

устойчивость физиологических функций организма. Отклонения медиаторов межклеточных взаимодействий на фоне любой патологии организма с неизбежностью приводят к усугублению ее течения.

1.2. Показатели селектинов при заболеваниях печени

1.2.1. Структура и роль селектинов в реализации воспаления и иммунного ответа

Селектины относятся к кальцийзависимым трансмембранным гликопротеинам, расположенным на поверхности лейкоцитов, тромбоцитов и эндотелиоцитов. Они обеспечивают селективный хоминг клетки через стенку сосуда и стимулируют воспалительный процесс путем облегчения проникновения лейкоцитов в очаг воспаления [20, 86, 140, 171, 242].

Семейство селектинов представлено Е-, Р-, и Ь-селектином. Е-селектин (СБ62Е) в норме эндотелием не экспрессируется за исключением микрососудов кожи, но быстро синтезируется под влиянием провоспалительных цитокинов. Р-селектин (СБ62Р) содержится в а-гранулах тромбоцитов и тельцах Вейбла-Палада эндотелиоцитов и перемещается в процессе активации к их поверхности. Ь-селектин (СЮ62Ь) экспрессируется на гранулоцитах, моноцитах и большинстве лимфоцитов [14, 86, 135, 143].

Все селектины - мономерные молекулы, состоящие из внеклеточной, трансмембранной и цитоплазматической частей. Внеклеточная часть содержит короткий домен, подобный эпидермальному ростовому фактору, две (Ь-), шесть (Е-) или девять (Р-селектин) последовательностей, гомологичных комплемент-регуляторным белкам, а также кальцийзависимый лектиноподобный домен [20,87, 135, 143, 242].

Селектины имеют значительную гомологичность последовательностей между собой (за исключением трансмембранной и цитоплазматической частей) и между разновидностями (молекулы человека, мыши, коровы).

Наиболее выражена гомологичность у лектиноподобного домена, связывающегося с углеводными остатками, свидетельствующая, что все три селектина соединяются с одинаковыми углеводными структурами. Трансмембранная и цитоплазматическая части схожи между разновидностями селектинов, но не совпадают между видами селектинов. Они ответственны за прикрепление молекулы к различным участкам клетки: Р-селектина - к секреторным гранулам, Е-селектина - к цитоплазматической мембране, L-селектина - к верхушкам микроскладок лейкоцитов [143].

Молекулы адгезии связываются с углеводными остатками, экспрессируемыми на поверхности лейкоцитов, тромбоцитов и эндотелиальных клеток [14, 239]. Лигандами для селектинов являются адрессины [20]. Несмотря на множество лигандов для селектинов к настоящему времени только Р-селектин-гликопротеиновый лиганд 1 типа охарактеризован на молекулярном, клеточном и функциональном уровнях. Мыши, не имеющие гена, кодирующего этот лиганд, имели отсроченное перемещение нейтрофилов в ткани, сопоставимое со случаями дефицита Р-селектина. PSGL-1 также может выступать в качестве лиганда для L-селектина и Е-селектина [190].

В большинстве органов миграция лейкоцитов протекает в виде каскада включающего роллинг, адгезию и миграцию клеток в ткани. В результате действия селектинов движение лейкоцитов с током крови прекращается и наступает первая фаза миграции или роллинг лейкоцитов [16, 138, 149]. Имеются также свидетельства участия L- и Е-селектина в других сигнальных событиях миграции лейкоцитов [141].

Однако селектины обеспечивают слабую адгезию клеток, достаточную только для селективной остановки клетки в органе, но недостаточную для проникновения сквозь стенку сосуда и перемещения по внеклеточному матриксу. Для более сильных взаимодействий нужны молекулы суперсемейства иммуноглобулинов и интегрины, которые обеспечивают

контакт лимфоцитов с антигенпредставляющими клетками и лимфоцитов-эффекторов с их клетками-мишенями или клетками-партнерами [20, 142].

1.2.2. Е-селектин при патологии печени

Е-селектин - гликопротеин с молекулярной массой 115 кДа, экспрессируемый на эндотелиальных клетках в результате синтеза de novo после активации провоспалительными цитокинами и эндотоксинами [242]. Впервые был выделен в 1987 году в культуре эндотелиоцитов на фоне стимулирующего действия интерлейкина-1 и ФНО-а [86, 88]. Опосредуя адгезию нейтрофилов и моноцитов к активированному эндотелию, он обеспечивает развитие воспалительного процесса. Также медиатор взаимодействует с лигандами Т-лимфоцитов, позитивных к кожному лимфоцитарному антигену, что способствует их хомингу в кожу [143].

Лигандами для Е-селектина являются Lewisx и Lewis3 антигены, N-ацетил-лактозамины, которые экспрессируются на циркулирующих лейкоцитах многих субпопуляций и некоторых опухолевых клетках и соединяются с молекулой адгезии при помощи сиализированной формы углеводной детерминанты Lewisx, ассоциированной с белком CD 15 [16]. Кроме того, Е-селектин контактирует с Е-селектин-гликопротеиновым лигандом 1 типа и Р-селектин-гликопротеиновым лигандом 1 типа [143, 239, 242].

Экспрессия Е-селектина на поверхности активированного эндотелия начинается на ранней стадии воспалительной реакции (через 1 час), достигает максимума через 4-8 часов и заканчивается через 24-48 часов после активации эндотелиоцитов. Остановка нейтрофилов и моноцитов при участии Е-селектина является первым шагом к их миграции в очаги воспаления [16, 242].

Протеолитическое расщепление Е-селектина ведет к повышению уровней его растворимой формы в крови, которое коррелирует с

выраженностью экспрессии на эндотелиальных клетках. Растворимый Е-селектин может функционировать как хемоаттрактант для нейтрофилов, а также активировать лейкоцитарные J32 интегрины [88].

В норме экспрессия Е-селектина в печени не выявляется [53, 212], однако развитие острого воспалительного процесса в печеночной ткани сопровождается усилением экспрессии молекулы преимущественно на синусоидальных клетках [212]. При хронических воспалительных заболеваниях печени экспрессия медиатора наблюдается на эндотелиоцитах вблизи воспалительных областей [53, 208].

При циррозе печени тканевая экспрессия Е-селектина носит ограниченный характер, преимущественно в областях перисептального воспаления [212]. Имеется мнение, что нарушенные роллинг, адгезия и миграция лейкоцитов при циррозе печени обусловлены сниженной эндотелиальной экспрессией Е-селектина [66].

По данным ряда авторов, у больных хроническим вирусным гепатитом на фоне HBV- или HCV-инфекции уровни Е-селектина в крови были увеличены [53, 81, 182, 208, 220]. Повышение плазменного содержания ICAM-1 и Е-селектина, наблюдаемое у детей с хроническим вирусным гепатитом В, объяснялось активирующим влиянием на их продукцию провоспалительных цитокинов [4]. Рост плазменных уровней Е-селектина был отмечен при острой печеночной недостаточности [210].

Установлено, что полиморфизм гена Е-селектина не оказывал влияния на частоту и темпы формирования хронической HBV-инфекции [86], однако генотип АС гена Е-селектина был связан с более высокой виремией HBV по сравнению со случаями АА генотипа [38].

Коинфекция вируса гепатита С с ВИЧ-инфекцией сопровождалась возрастанием количеств Е-селектина в крови, что подчеркивает триггерную роль HCV в развитии эндотелиальных нарушений [220]. У гемодиализных пациентов, инфицированных вирусом гепатита С, содержание Е-селектина в крови было значительно выше, чем в случаях отсутствия маркеров вируса

[129]. Вместе с тем, корреляции плазменных уровней Е-селектина со степенью виремии HCV выявлено не было [81].

Гиперактивация эндотелия, имеющаяся у больных циррозом печени [68], способствует повышенному образованию молекул адгезии в эндотелиальных клетках под влиянием провоспалительных цитокинов [31]. Сывороточная концентрация Е-селектина была увеличена при циррозе печени [154, 171, 183, 207, 215]. Повышенные уровни медиатора в крови, определяемые при B-вирусном циррозе печени, коррелировали с увеличенной частотой С аллеля (АС и СС) А561С гена Е-селектина [182].

Невирусные заболевания печени также характеризовались развитием дисбаланса в системе межклеточных посредников. Так, сывороточное содержание и тканевая экспрессия Е-селектина, будучи повышенными при аутоиммунном гепатите [212, 214], снижались на фоне применения глюкокортикоидов [212]. Вместе с тем, имеются данные о нормальных показателях Е-селектина при аутоиммунной патологии печени [54].

Алкогольная болезнь печени сопровождалась возрастанием значений Е-селектина в крови [83], что являлось отражением увеличенной экспрессии медиатора в печеночной ткани на фоне воспалительного процесса [83, 202]. Случаи злоупотребления алкоголем в отсутствие этанол-ассоциированных заболеваний приводили к росту сывороточных уровней Е-селектина и ICAM-1, коррелирующих с суточной дозой алкоголя [86].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Гилязова, Гузель Ирековна, 2013 год

БИБЛИОГРАФИЯ

1. Алкогольная болезнь печени / А.И. Хазанов [и др.]. - М.: «Люкс Принт», 2008.-318 с.

2. Болезни печени и желчевыводящих путей: Руководство для врачей / Под. ред. В.Т. Ивашкина. - 2-е изд. - М.: Издат. дом «М-Вести», 2005. -536 с.

3. Витковский, Ю.А. Патогенетическое значение лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии / Ю.А. Витковский, Б.И. Кузник, A.B. Солпов // Медицинская иммунология. - 2006. - Т. 8, № 5-6. - С. 745-753.

4. Галич, А.Б. Особенности клинического течения, динамика цитокинов и адгезинов при противовирусном лечении хронического гепатита В у детей: Автореф. дис... к-та мед. наук / А.Б. Галич. - М., 2005. - 27 с.

5. Жерносеков, Д.Д. Адгезивные белки в процессе воспаления / Д.Д. Жерносеков // Бюпол1мери i юптина. - 2007. - № 6. - С. 483-488.

6. Корой, П.В. Влияние противовирусной терапии на показатели фибринолиза при хронической вирусной патологии печени / П.В. Корой, A.B. Ягода // Мед. вест. Северного Кавказа. - 2010. - № 1. - С. 45-50.

7. Корой, П.В. Влияние противовирусной терапии на функциональные показатели эндотелия при HCV-ассоциированной патологии печени / П.В. Корой, A.B. Ягода // Мед. вест. Северного Кавказа. - 2009. - №2. -С. 43-48.

8. Корой, П.В. Клинико-патогенетическое и прогностическое значение нарушений гемостатического гомеостаза при хронических заболеваниях печени: Автореф. дис... д-ра мед. наук / П.В. Корой. -С., 2010.-41 с.

9. Корой, П.В. Молекулы межклеточной адгезии и гистологическая картина при хронических вирусных заболеваниях печени / П.В. Корой, И.С. Мухорамова, A.B. Ягода // Медицинский вестник Северного Кавказа. -2012. -№ 2. -С. 48-51.

Ю.Корой, П.В. Предикторная роль молекул адгезии в ответе на противовирусную терапию хронического гепатита С / П.В. Корой, A.B.

Ягода, И.С. Мухорамова // Медицинский вестник Северного Кавказа. -2012.-№3.-С. 38-41.

11 .Мухорамова, И.С. Показатели суперсемейства иммуноглобулинов как предикторы неблагоприятного течения цирроза печени / И.С. Мухорамова, П.В. Корой // Вестник молодого ученого. - 2013. - № 2. -С. 9-13.

^.Непосредственные причины смерти у больных циррозом печени по данным многопрофильного стационара / С.А. Белякин, А.Н. Бобров, C.B. Плюснин, А.И. Хазанов // Росс. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. Материалы 14-й Росс. конф. «Гепатология сегодня». -2009.-№ 1.-С. 7.

1 З.Никитин, И. Г. Рекомендации по диагностике и подходам к лечению хронического гепатита В / И. Г. Никитин // Клин, перспект. гастроэнтерол., гепатол. - 2008. - № 2. - С. 2-15.

14.Основы клинической иммунологии / Э. Чепель, М. Хейни, С. Мисбах, Н. Сновден / Перевод с англ. - 5-е изд. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. -416 с.

15.Пак, С. Г. Патогенетические аспекты интоксикационного синдрома при морфофункциональном поражении печени и пути его коррекции / С. Г. Пак, Е. В. Волчкова, О. Ф. Белая // Клин, гепатол. - 2008. - № 4. - С. 310.

16.Ройт, А. Иммунология / А. Ройт, Дж. Бростофф, Д. Мейл // Пер. с англ. - М.: Мир, 2000.-592 с.

17. Современные схемы лечения больных хроническим вирусным гепатитом С / В.Т. Ивашкин, М.В. Маевская, М.А. Морозова, Е.О. Люсина // Росс. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. - 2012. -№ 1. - С. 36-44.

18. Сравнительные данные об этиологии циррозов печени с благоприятным и неблагоприятным исходами / С.А. Белякин, А.Н. Бобров, C.B. Плюснин, А.И. Хазанов // Росс. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. Материалы 14-й Росс. конф. «Гепатология сегодня». - 2009. - № 1. - С. 7.

19.Структура осложнений и летальность у больных циррозом печении / Г.И. Сторожаков H.H. Мерзликина, И.Г. Федоров [и др.] // Росс. журн.

гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. Материалы 14-й Росс. конф. «Гепатология сегодня». - 2009. - №1. - С. 19.

20.Хаитов, P.M. Иммунология. Норма и патология. / P.M. Хаитов, Г.А. Игнатьева, И.Г. Сидорович / Учебник. - 3-е изд., перераб. и доп. - М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2010. - 752 с.

21.Ягода А.В., Корой П.В. Патология печени и функция тромбоцитов (клинико-патогенетический анализ). - Ставрополь. Изд.: СтГМА, 2008. -273 с.

22.Ягода, А.В. Влияние интерферонотерапии на функциональную активность тромбоцитов при хроническом вирусном гепатите и циррозе печени / А.В. Ягода, П. В. Корой // Тер. архив. - 2004. - №8. -

C. 72-75.

23.1,4-dihydroxyxanthone modulates the adhesive property of endothelial cells by inhibiting intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1), vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) and E-selectin / B. Madan, A.K. Prasad, V.S. Parmar, B. Ghosh // Bioorg. Med. Chem. - 2004. - Vol. 12. - P. 14311437.

24. A sustained virologic response reduces risk of all-cause mortality in patients with hepatitis С / L.I. Backus, D.B. Boothroyd, B.R. Phillips [et al.] // Clin. Gastroenterol. Hepatol. - 2011. - Vol. 9. - P. 509-516.

25.A systematic review of hepatitis С virus epidemiology in Europe, Canada and Israel / M. Cornberg, H.A. Razavi, A. Alberti [et al.] // Liver/ Int. -2011. - Vol. 31, Suppl. 2. - P. 30-60.

26.A systematic review of the quality of liver biopsy specimens / E. Cholongitas, M. Senzolo, R. Standish [et al.] // Am. J. Clin. Pathol. - 2006. -Vol. 125.-P. 710-721.

27.Absence of P-selectin, but not intercellular adhesion molecule-1, attenuates neointimal growth after arterial injury in apolipoprotein E-deficient mice /

D.R. Manka, R.G. Collins, K. Ley [et al.] // Circulation. - 2001. - Vol. 103. -P. 1000-1005.

28.Activation of platelets in chronic hepatitis and liver cirrhosis. P-selectin expression on blood platelets and secretory activity of beta-thromboglobulin and platelet factor-4 / A. Panasiuk, D. Prokopowicz, J. Zak [et al.] // Hepatogastroenterol. - 2001. - Vol. 48, № 39. - P. 818-822.

29.Acute viral hepatitis increases liver stiffness values measured by transient elastography / U. Arena, F. Vizzutti, G. Corti [et al.] // Hepatology. - 2008. -Vol. 47.-P. 380-384.

30.Adhesion molecules and C-reactive protein are associated to adverse events in angina pectoris / O. Eschen, J.H. Christensen, S.P. Johnsen [et al.] // Scand. Cardiovasc. J. - 2010. - Vol. 44, № 3. - P. 153-160.

31 .Adhesion molecules as a prognostic marker of liver cirrhosis / J.A. Giron-Gonzalez, C. Martinez-Sierra, C. Rodriguez-Ramos [et al.] // Scand. J. Gastroenterol. - 2005. - Vol. 40, № 2. - P. 217-224.

32.Afdhal, N.H. Diagnosing fibrosis in hepatitis C: is the pendulum swinging from biopsy to blood test? / N.H. Afdhal // Hepalogy. - 2003. - Vol. 37. - P. 972-974.

33.Afford, C. Cell and molecular mechanisms in the development of chronic liver inflammation in liver diseases / C. Afford, F. Lalor // In: Liver Diseases Biochemical Mechanisms and New Therapeutic Insights, S. Ali, S.L. Friedman and D.A. Mann (eds.). - 2006. - P. 147-163.

34. Alterations of bone marrow sinusoidal endothelium in rat and patients with liver cirrhosis / S. Zhao, Y.M. Fu, X.F. Li [et al.] // Dig. Dis. Sci. - 2010. -Vol. 55, №3.-P. 654-661.

35. An IL28B polymorphism determines treatment response of hepatitis C virus genotype 2 or 3 patients who do not achieve a rapid virologic response / A. Mangia, A.J. Thompson, R. Santoro [et al.] // Gastroenterology. - 2010. -Vol. 139.-P. 821-827.

36. Antiviral therapy decreases GpIIb/IIIa activation of platelets in patients with chronic hepatitis C / W. Sieghart, M. Homoncik, B. Jilma [et al.] // Thromb. Haemost. - 2006. - Vol. 95, № 2. - P. 260-266.

37.Assessment of platelet activation in coupled schistosomiasis and viral hepatitis infection: contribution to complexity of course and development pf complications / N.A. Hussein, H.H. El-Sayed, H.R. El-Khayat, N.M. Zahran // J. Egypt. Soc. Parasitol. - 2006. - Vol. 36, № 3. - P. 845-866.

38. Association between polymorphisms of the E-selectin gene, hepatitis B virus DNA copies and preS 1 antigen in patients with chronic hepatitis B infection / W.J. Cai, L. Yin, D. Zhou [et al.] // Molecular. Medicine. Reports. - 2012. -Vol. 6, №5.-P. 1069-1074.

39.Association between sustained virological response and all-cause mortality among patients with chronic hepatitis C and advanced hepatic fibrosis / A.J. van der Meer, B.J. Veldt, J.J. Feld [et al.] // JAMA. - 2012. - Vol. 308. - P. 2584-2593.

40.Atorvastatin attenuates remnant lipoprotein-induced monocyte adhesion to vascular endothelium under flow conditions / A. Kawakami, A. Tanaka, K. Nakajima [et al.] // Circ. Res. - 2002. - Vol. 91. - P. 263-271.

41.Bertola, A. Chronic plus binge ethanol feeding synergistically induces neutrophil infiltration and liver injury: A critical role for E-selectin / A. Bertola, O. Park, B. Gao // Hepatology. - 2013. - Vol. 3. - P. 375-376.

42.Blood platelet and monocyte activations and relation to stages of liver cirrhosis / A. Panasiuk, J. Zak, E. Kasprzycka [et al.] // World. J. Gastroenterol. - 2005. - Vol. 11, № 18. - P. 2754-2758.

43.Boceprevir for previously treated chronic HCV genotype 1 infection / B.R. Bacon, S.C. Gordon, E. Lawitz [et al.] // N. Engl. J. Med. - 2011. - Vol. 364.-P. 1207-1217.

44.Boceprevir for untreated chronic HCV genotype 1 infection / F. Poordad, J.Jr. McCone, B.R. Bacon [et al.] // N. Engl. J. Med. - 2011. - Vol. 364. - P. 1195-1206.

45.Calvaruso, V. 2011 European association of the study of the liver hepatitis C virus clinical practice guidelines / V. Calvaruso, A. Craxi // Liver. Inter. -2012.-Vol. 32, Suppl. l.-P. 2-8.

46.Candidate selection for liver transplantation / M. Prieto, V. Aguilera, M. Berenguer [et al.] // Gastroenterol. Hepatol. - 2007. - Vol. 30, № 1. - P. 4253.

47.Castera, L. Noninvasive diagnosis of liver fibrosis in patients with chronic hepatitis C / L. Castera, J.-M. Pawlotsky // Med. Gen. Med. - 2005. - Vol. 7, №4.-P. 39-45.

48.CD62L is critical for maturation and accumulation of murine hepatic NK cells in response to viral infection / H. Peng, R. Sun, L. Tang [et al.] // J. Immunol. - 2013. - Vol. 190, № 8. - P. 4255-4262.

49.Cell adhesion molecules regulate fibrotic process via Thl/Th2/Thl7 cell balance in a bleomycin-induced scleroderma model / A. Yoshizaki, K.

Yanaba, Y. Iwata [et al.] // J. Immunol. - 2010. - Vol. 185, № 4. - P. 25022515.

50.Circulating activated platelets exacerbate atherosclerosis in mice deficient in apolipoprotein / Y. Huo, A. Schober, S.B. Forlow [et al.] // E. Nat. Med. -2003.-Vol. 9.-P. 61-67.

51. Circulating adhesion molecules in patients with virus-related chronic diseases of the liver / C.M. Bruno, C. Sciacca, D. Cilio [et al.] // World. J. Gastroenterol. - 2005. - Vol. 11, № 29. - P. 4566-4569.

52.Circulating CD62E+ microparticles and cardiovascular outcomes / S.-T. Lee, K. Chu, K.-H. Jung [et al.] // PLoS ONE. - 2012. - Vol. 7, № 4. - P. e35713.

53.Circulating E-selectin levels in chronic hepatitis C patients with normal or elevated transaminase before and after alpha-interferon treatment / G. Montalto, L. Giannitrapani, M. Soresi [et al.] // Inflammation. - 2001. - Vol. 25, №2.-P. 101-108.

54.Circulating intercellular adhesion molecule-1 in autoimmune liver disease and evidence for the production of intercellular adhesion molecule-1 by cytokine-stimulated human hepatocytes / A.W. Thomson, S. Satoh, A.K. Nussler [et al.] // Clin. Exp. Immunol. - 1994. - Vol. 95, № 1. - P. 83-90.

55.Circulating sICAM-1 and sE-Selectin as biomarker of infection and prognosis in patients with systemic inflammatory response syndrome / R. de Pablo, J. Monserrat, E. Reyes [et al.] // Eur. J. Intern. Med. - 2013. - Vol. 24, №2.-P. 132-138.

56.Circulating soluble intercellular adhesion molecule-1 in lung cancer: a systematic review / X. Gu, C. Ma, D. Yuan, Y. Song // Transl. Lung. Cancer. Res.-2012.-Vol. l.-P. 36-44.

57.Combined use of D-dimer and P-selectin for the diagnosis of splenic or portal vein thrombosis following splenectomy / L. Wang, G.-J. Liu, Y.-X. Chen [et al.] // Thromb. Res. - 2010. - Vol. 125, № 5. - P. 206-209.

58.Concanavalin-A-induced liver injury is severy impaired in mice deficient in P-selectin / A. Massaguer, S. Perez-Del-Pulgar, P. Engel [et al.] // J. Leukoc. Biol. - 2002. - Vol. 72, № 2. - P. 262-270.

59.Conformational activation of CDllb without shedding of L-selectin on circulating human neutrophils / Y. Orr, J.M. Taylor, S. Cartland [et al.] // J. Leukoc. Biol. - 2007. - Vol. 82. - P. 1115-1125.

60.Correlation between the levels of circulating adhesion molecules and atherosclerosis in hypertensive type-2 diabetic patients // A.F. Rubio-Guerra, H. Vargas-Robles, A.M. Serrano [et al.] // Clin. Experiment. Hypertension. -2010.-Vol. 32, № 5.-P. 308-310.

61. Correlation of transient elastography with APRI and FIB-4 in a cohort of patients with congenital bleeding disorders and HCV or HIV/HCV coinfection / N. Vidovic, R.S. Lochowsky, G. Goldmann [et al.] // Haemophilia.-2010.-Vol. 16.-P. 778-785.

62.C-reactive protein, interleukin-6, secretory phospholipase A2 group IIA and intercellular adhesion molecule-1 in the prediction of late outcome events after acute coronary syndromes / M. Hartford, O. Wiklund, L. Mattsson [et al.] // J. Intern. Med. - 2007. - Vol. 262. - P. 526-536.

63.Cytokine stimulated vascular cell adhesion molecule-1 ectodomain release is regulated by TIMP-3 / R.J.R. Singh, J.C. Mason, E.A. Lidington [et al.] // Cardiovascular. Research. - 2005. - Vol. 67, № 1. - P. 39-49.

64.Cytokines, cytokine antagonists and soluble adhesion molecules in patients with ocular Behcet's disease treated with human recombinant interferon-alpha2a. Results of an open study and review of the literature /1. Kotter, S. Koch, R. Vonthein [et al.] // Clin. Exp. Rheumatol. - 2005. - Vol. 23, № 4, Suppl. 38.-P. S20-26.

65.D'Amico, G. Natural history and prognostic indicators of survival in cirrhosis: a systematic review of 118 studies / G. D'Amico, G. Garcia-Tsao, L. Pagliaro // J. Hepatol. 2006. - Vol. 44, № 1. - P. 217-231.

66.Decreased leukocyte recruitment in the mesenteric microcirculation of rats with cirrhosis is partially restored by treatment with peginterferon: An in vivo study / A.M. Geerts, K.-J. Cheung, H. Van Vlierberghe [et al.] // J. Hepatol. - 2007. - Vol. 46, № 5. - P. 804-815.

67.Detection of platelet Ca2+(i), CD62P, CD63 and plasma CD62P in cirrhosis patients / Z. Tang, J.G. Zhuo, W.F. Huang, M.Q. Yang // Zhonghua. Gan. Zang. Bing. Za. Zhi. - 2003. - Vol. 11, № 7. - P. 412-414.

68.Determination of reliability criteria of liver stiffness evaluation by transient elastography / J. Boursier, J.P. Zarski, V. de Ledinghen [et al.] // Hepatology. - 2013. -Vol. 57, №3.-P. 1182-1191.

69.Dexamethasone inhibits tumor necrosis factor-a-induced cytokine secretion from spiral ligament fibrocytes / K. Maeda, K. Yoshida, I. Ichimiya, M. Suzuki // Hearing Research. - 2005. - Vol. 202, № 1-2. - P. 154-160.

70.Differential role of von Willebrand factor and P-selectin on microvascular thrombosis in endotoxemia / K.N. Patel, S.H. Soubra, R.V. Bellera [et al.] // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2008. - Vol. 28. - P. 2225-2230.

71.Disturbance of hepatic and intestinal microcirculation in experimental liver cirrhosis / S.M. Maksan E. Ryschich, Z. Ülger [et al.] // World J. Gastroenterol. - 2005. - Vol. 11, № 6. - P. 846-849.

72.Down-regulation of adhesion molecules and other inflammatory biomarkers after moderate wine consumption in healthy women: a randomized trial / E. Sacanella, M. Vázquez-Agell, M.P. Mena [et al.] // Am. J. Clin. Nutr. -2007. - Vol. 86, № 5. - P. 1463-1469.

73.Durand, F. Assessment of the prognosis of cirrhosis: Child-Pugh versus MELD / F. Durand, D. Valla // J. Hepatol. - 2005. - Vol. 42. - P. S100-S107.

74.E- and P-selectins synergistically inhibit bleomycin-induced pulmonary fibrosis / M. Horikawa, M. Fujimoto, M. Hasegawa [et al.] // Am. J. Pathol. - 2006. - Vol. 169, № 3. - P. 740-749.

75.EASL clinical practice guidelines: management of chronic hepatitis B. European Association for the Study of the Liver // J. Hepatol. - 2012. - Vol. 57.-P. 167-185.

76.EASL clinical practice guidelines: management of hepatitis C virus infection. European Association for the Study of the Liver // J. Hepatol. -2011.-Vol. 55.-P. 245-264.

77.Effect of Carvedilol on portal hypertension depends on the degree of endothelial activation and inflammatory changes / R. Bruha, L. Vitek, J. Petrtyl [et al.] // Scand. J. Gastroenterol. - 2006. - Vol. 41, № 12. - P. 14541463.

78.Effect of simvastatin on monocyte adhesion molecule expression in patients with hypercholesterolemia / C.V. Serrano, V.M. Yoshida, M.L. Venturinelli [et al.] //Atherosclerosis.-2001.-Vol. 157.-P. 505-512.

79.Effects of thalidomide on the expression of adhesion molecules in rat liver cirrhosis / P. Lv, S.C. Paul, Y. Xiao [et al.] // Mediators. Inflamm. - 2006. -№4.-P. 93253.

80.Efficiency and safety of bosentan in child C cirrhosis with portopulmonary hypertension and renal insufficiency / F. Barth, P.J. Gerber, J. Reichen [et al.] // Eur. J. Gastroenterol. Hepatol. - 2006. - Vol. 18, № 10. - P. 11171119.

81.Elevated levels of serum soluble E-selectin in patients with chronic hepatitis B: correlation with T lymphocyte subsets, NK cells and liver inflammation / M.-X. Yan, H.-T. Mao, L. Qian [et al.] // Hepatol. Res. - 2006. - Vol. 35, № 2. - P. 111-117.

82.Elevated levels of von Willebrand factor in cirrhosis support platelet adhesion despite reduced functional capacity / T. Lisman, T. Bongers, J. Adelmeijer [et al.] // Hepatology. - 2006. - Vol. 44. - P. 53-61.

83.Endothelial activation and circulating adhesion molecules in alcoholic liver disease / D.H. Adams, P. Burra, S.G. Hubscher [et al.] // Hepatology. -1994. - Vol. 19, № 3. - P. 588-594.

84.Enhanced endothelial activation in diabetic patients with unstable angina and non-Q-wave myocardial infarction / N.T. Mulvihill, J.B. Foley, R.T. Murphy [et al.] // Diabet. Med. - 2001. - Vol. 18, № 12. - P. 979-983.

85.Epidemiology of hepatitis B and associated liver diseases in China / Y. Zhang, H. Zhang, A. Elizabeth, X.Q. Liu // Chin. Med. Sei. J. - 2013. - Vol. 27, №4.-P. 243-248.

86.E-selectin gene polymorphisms in Iranian chronic hepatitis B patients / M. Hajilooi, A.-H. M. Alizadeh, M. Ranjbar [et al.] // Hep. Mon. - 2007. - Vol. 7, №4.-P. 211-216.

87.E-Selectin polymorphism associated with myocardial infarction causes enhanced leukocyte-endothelial interactions under flow conditions / M. Yoshida, Y. Takano, T. Sasaoka [et al.] // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2003. - Vol. 23. - P. 783-788.

88.E-Selectin S128R polymorphism leads to severe asthma / E. Nadi, M. Hajilooi, F. Zeraati [et al.] // Iran. J. Allergy. Asthma. Immunol. - 2007. -Vol. 6, №2.-P. 49-57.

89.Ethnic differences in circulating soluble adhesion molecules: the Wandsworth Heart and Stroke Study / M.A. Miller, G.A. Sagnella, S.M. Kerry [et al.] // Clin. Sei. - 2003. - Vol. 104. - P. 591-598.

90.Evaluation of tumor necrosis factor-a (TNF-a), soluble P-selectin (sP-Selectin), gamma-glutamyl transferase (GGT), glutathione S-transferase Pi (GST-Pi) and alphafetoprotein (AFP) in patients with hepatocellular carcinoma before and during chemotherapy / M. Moustafa, M. Mors, A. Hussein [et al.] // Turk. J. Cancer. - 2005. - Vol. 35, № 1. - P. 5-11.

91.Evaluation of tumour necrosis factor-alpha, soluble P-selectin, gamma-glutamyl transferase, glutathione S-transferase-pi and alpha-fetoprotein in patients with hepatocellular carcinoma before and during chemotherapy / M.I. Morsi, A.E. Hussein, M. Mostafa [et al.] // Br. J. Biomed. Sei. - 2006. -Vol. 63, №2.-P. 74-78.

92.Expert opinion on boceprevir- and telaprevir-based triple therapies of chronic hepatitis C / C. Sarrazin, T. Berg, M. Cornberg [et al.] // Z. Gastroenterol. - 2012. - Vol. 50. - P. 57-72.

93.Factors that predict survival in patients with cirrhosis considered for liver transplantation / M. Samada, J.C. Hernández, L. Ramos [et al.] // Transplantation. Proceedings. - 2008. - Vol. 40, № 9. - P. 2965-2967.

94.Feasibility of histological grading and staging of chronic viral hepatitis using specimens obtained by thin-needle biopsy / D. Petz, S. Klauck, F.W. Röhl [et al.] // Virchows. Arch. - 2003. - Vol. 442. - P. 238-244.

95.Five years of treatment with tenofovir DF (TDF) for chronic hepatitis B (CHB) infection is associated with sustained viral suppression and significant regression of histological fibrosis and cirrhosis / P. Marcellin, M. Buti, E.J. Gane [et al.] // Hepatology. - 2011. - Vol. 54. - P. 1011 A.

96.Food intake increases liver stiffness in patients with chronic or resolved hepatitis C virus infection / I. Mederacke, K. Wursthorn, J. Kirschner [et al.] //Liver. Int.-2009.-Vol. 29.-P. 1500-1506.

97.Fraquelli, M. Reproducibility of transient elastography in the evaluation of liver fibrosis in patients with chronic liver disease / M. Fraquelli // Gut. -2007. - Vol. 56. - P. 968.

98.Friedman, S.L. Hepatic fibrosis 2006: report of the Third AASLD Single Topic Conference / S.L. Friedman, D.C. Rockey, D.M. Bissell // Hepatology. - 2007. - Vol. 45. - P. 242-249.

99.Friedman, S.L. Hepatic stellate cells: protean, multifunctional, and enigmatic cells of the liver / S.L. Friedman // Physiol. Rev. - 2008. - Vol. 88.-P. 125-172.

100. Friedman, S.L. Liver fibrosis- from banch to bedside / S.L. Friedmann // J. Hepatol. - 2003. - Vol. 30. - P. 38-53.

101. Functional variants of eNOS and iNOS genes have no relationship to the portal hypertension in patients with liver cirrhosis / J. Petrtyl, K. Dvorak, M. Jachymova [et al.] // Scand. J. Gastroenterol. - 2013. - Vol. 48, № 5. - P. 592-601.

102. Genetic variation in IL28B is associated with chronic hepatitis C and treatment failure: a genome-wide association study / A. Rauch, Z. Kutalik, P. Descombes [et al.] // Gastroenterology. - 2010. - Vol. 138. - P. 13381345.

103. Global epidemiology of hepatitis C virus infection: New estimates of age-specific antibody to hepatitis C virus seroprevalence / K.M. Hanafiah, J. Groeger, A.D. Flaxman, S.T. Wiersma // Hepatology. - 2013. - Vol. 57, № 4.-P. 1333-1342.

104. Graham, S.M. Clinical utility of biomarkers of endothelial activation and coagulation for prognosis in HIV infection. A systematic review / S.M. Graham, R. Mwilu, W.C. Liles // Virulence. - 2013. - Vol. 4, № 6. - P. 1-8.

105. Granulocyte colony-stimulating factor improver deficient in vitro neutrophil tansendothelial migration in patients with advanced liver cirrhosis / C. Fiuza, M. Salcedo, G. Clemente, J. M. Tellado // Clin. Diagn. Lab. Immunol. - 2002. - Vol. 9, № 2. - P. 433-439.

106. Gressner, A.M. Modern pathogenesis concepts of liver fibrosis suggest stellate cells and TGF-b as major players and therapeutic targets / A.M. Gressner, R. Weiskirchen // J. Cell. Mol. Med. - 2006. - Vol. 10. - P. 76-99.

107. Hassoba, H. Alterations in neutrophil surface expression of L-selectin (CD62L) and soluble L-selectin (sL-selectin) in hemodialysis patients: relation to HCV / H. Hassoba, M. Mahmoud, A. El-Gohary // Egypt. J. Immunol.-2007.-Vol. 14, №2-P. 101-110.

108. HCV-specific cytokine induction in monocytes of patients with different outcomes of hepatitis C / R.P. Woitas, U. Petersen, D. Moshage [et al.] // World. J. Gastroenterol. - 2002. - Vol. 8. - P. 562-566.

109. Hemmerich, S. Carbohydrate sulfotransferases in lymphocyte homing / S. Hemmerich, S.D. Rosen / Glycobiology. - 2000. - Vol. 10. - P. 849856.

110. Hemodialysis-induced leukocyte expression of adhesion molecules, MAC-1 and L-Selectin, and sL-Selectin in hepatitis C-virus infected patients with end stage renal disease under intermittent hemodialysis / A.E.D.S. Abd El Humid, A.M.I. El-Gohary, N.A. Fawaz [et al.] // Suez. Canal. Univ. Med. J.-2001.-Vol. 4,№ l.-P. 27-37.

111. Hepatic platelet accumulation in Fas-mediated hepatitis in mice / Y. Ohtaki, K. Yamaguchi, Z. Yu [et al.] // Int. Immunopharmacol. - 2009. -Vol. 9, №9.-P. 1071-1080.

112. Hepatic platelet and leukocyte adherence during endotoxemia / R.S. Croner [et al.] // Crit. Care. - 2006. - Vol. 10. - P. 10-16.

113. Hepatitis C virus related cirrhosis: time to occurrence of hepatocellular carcinoma and death / F. Degos, C. Christidis, N. Ganne-Carrie [et al.] // Gut. - 2000. - Vol. 47, № l.-P. 131-136.

114. Hepatocellular carcinoma in cirrhosis: incidence and risk factors / G. Fattovich, T. Stroffolini, I. Zagni, F. Donato // Gastroenterology. - 2004. -Vol. 127 (5). - S. 35-50.

115. Hepatology 2013. A Clinical Textbook. Editors: S. Mauss, T. Berg, J. Rockstroh, C. Sarrazin, H. Wedemeyer. Fourth Edition. - Germany: Flying Publisher, 2013.-574 p.

116. Hezode, C. Boceprevir and telaprevir for the treatment of chronic hepatitis C: safety and management in clinical practice / C. Hezode // Liver. Inter.-2012.-Vol. 32, Suppl. l.-P. 32-38.

117. High D-dimer plasma levels predict poor outcome in esophageal variceal bleeding / M. Prigminani, A. Dell'Era, P. Bucciarelli [et al.] // Dig. Liver. Dis. - 2008. - Vol. 40, № 11. - P. 874-881.

118. High serum levels of endothelial adhesion molecules E-selectin, ICAM-1 and VCAM in fatty liver patients / T.E. Mosa, A.S. Shehatta, A.A. Khayyal [et al.]//Asian. J. Biochem. - 2011. - Vol. 6.-P. 160-170.

119. Huo, T. Selecting an optimal prognostic system for liver cirrhosis: the model for end-stage liver disease and beyond / T. Huo, S.-D. Lee, H.-C. Lin // Liver. Inter. - 2008. - Vol. 28, № 5. - P. 606-613.

120. IL28B polymorphisms, IP-10 and viral load predict virological response to therapy in chronic hepatitis C / G. Fattovich, L. Covolo, S. Bibert [et al.] // Aliment. Pharmacol. Ther. - 2011. - Vol. 33. - P. 11621172.

121. Impact of IL28B genotype on the early and sustained virologic response in treatment-na'ive patients with chronic hepatitis C / A.F. Stattermayer, R. Stauber, H. Hofer [et al.] // Clin. Gastroenterol. Hepatol. -2011. - Vol. 9, № 4. - P. 344-350.

122. Impact of pegylated interferon and ribavirin on morbidity and mortality in patients with chronic hepatitis C and normal aminotransferases in France / S. Deuffic-Burban, G. Babany, I. Lonjon-Domanec [et al.] // Hepatology. - 2009. - Vol. 50.-P. 1351-1359.

123. Importance of IL28B gene polymorphisms in hepatitis C virus genotype 2 and 3 infected patients / C. Sarrazin, S. Susser, A. Doehring [et al.] // J. Hepatol. - 2011. - Vol. 54. - P. 415-421.

124. Increased levels of soluble adhesion molecules in the serum of patients with hepatitis C. Correlation with cytokine concentrations and liver inflammation and fibrosis / G. Kaplanski, C. Farnarier, M.J. Payan [et al.] // Dig. Dis. Sci. - 1997. - Vol. 42, № 11. - P. 2277-2284.

125. Increased oxidative stress in cirrhotic rat livers: a potential mechanism contributing to reduced nitric oxide bioavailability / J. Gracia-Sancho, B. Lavina, A. Rodriguez-Vilarrupla [et al.] // Hepatology. - 2008. - Vol. 47. -P. 1248-1256.

126. Increased soluble P-selectin levels in hepatitis C virus-related chronic hepatitis: correlation with viral load / P. Ferroni, A. Mammarella, F. Martini [et al.] // J. Invest. Med. - 2001. - Vol. 49, № 5. - P. 407-412.

127. Increased von Willebrand factor over decreased ADAMTS13 activity may contribute to the development of liver disturbance and multiorgan failure in patients with alcoholic hepatitis / T. Matsuyama, M. Uemura, M. Ishikawa [et al.] // Alcoholism: Clin. Exp. Res. - 2007. - Vol. 31, Suppl. 1. -P. 27-35.

128. Inflammatory markers and serum lipids in idiopathic dilated cardiomyopathy / T. Sampietro, D. Neglia, A. Bionda [et al.] // Am. J. Cardiol. - 2005. - Vol. 96. - P. 1718-1720.

129. Influence of hepatitis C virus infection on soluble cellular adhesion molecules in hemodialysis patients / Y.S. Peng, C.K. Chiang, S.P. Hsu [et al.] // Blood. Purif. - 2005. - Vol. 23. - P. 106-112.

130. Inhibition of activated blood platelets by interferon alpha 2b in chronic hepatitis C / A. Panasiuk, D. Prokopowicz, J. Zak [et al.] // Hepatogastroenterol. - 2004. - Vol. 51, № 59. - P. 1417-1421.

131. Innate and adaptive immunity in the pathogenesis of atherosclerosis / G.K. Hansson, P. Libby, U. Schonbeck, Z.Q. Yan // Circ. Res. - 2002. -Vol. 91.-P. 281-291.

132. Intercellular adhesion molecule-1 and L-selectin regulate bleomycin-induced lung fibrosis / Y. Hamaguchi, Y. Nishizawa, M. Yasui [et al.] // Am. J. Pathol. -2002. - Vol. 161, №5. -P. 1607-1618.

133. Iredale, J.P. Models of liver fibrosis: exploring the dynamic nature of inflammation and repair in a solid organ / J.P. Iredale // J. Clin. Invest. -2007.-Vol. 117.-P. 539-548.

134. Jang, J.W. Current status of liver diseases in Korea: liver cirrhosis / J.W. Jang // Korean. J. Hepatol. - 2009. - Vol. 15, Suppl. 6. - P. S40-S49.

135. Juliano, R.L. Signal transduction by cell adhesion receptors and the cytoskeleton: functions of integrins, cadherins, selectins, and immunoglobulin-superfamily members / R.L. Juliano // Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. - 2002. - Vol. 42. - P. 283-323.

136. Klintman, D. Important role of P-selectin for leukocyte recruitment, hepatocellular injury, and apoptosis in endotoxemic mice / D. Klintman, X.

Li, H. Thorlacius // Clin. Diagn. Lab. Immunol. - 2004. - Vol. 11, № 1. - P. 56-62.

137. Lack of interleukin-1 a or interleukin-1 (3 inhibits transformation of steatosis to steatohepatitis and liver fibrosis in hypercholesterolemic mice / Y. Kamari, A. Shaish, E. Vax [et al.] // J. Hepatol. - 2011. - Vol. 55, № 5. -P. 1086-1094.

138. Leukocyte adhesion deficiency II: therapy and genetic defect / M.K. Wild, K. Liihn, T. Marquardt [et al.] // Cells. Tissues. Organs. - 2002. - Vol. 172.-P. 161-173.

139. Leukocyte and endothelial adhesion molecules in patients with hypercholesterolemia: the effect of atorvastatin treatment / T. Stulc, M. Vrablik, Z. Kasalova [et al.] //Physiol. Res. - 2008. - Vol. 57. - P. 185-194.

140. Leukocyte recruitment in hepatic injury: selectin-mediated leukocyte rolling is a prerequisite for CD 18-dependent firm adhesion / D. Klintman, R. Schramm, M.D. Menger, H. Thorlacius / J. Hepatol. - 2002. - Vol. 36. - P. 53-59.

141. Ley, K. Integration of inflammatory signals by rolling neutrophils / K. Ley // Immunol. Rev. - 2002. - Vol. 186. - P. 8-18.

142. Ley, K. Selectins in T-cell recruitment to non-lymphoid tissues and sites of inflammation / K. Ley, G.S. Kansas // Nat. Rev. Immunol. - 2004. -Vol. 4.-P. 325-335.

143. Ley, K. The role of selectins in inflammation and disease / K. Ley // TRENDS in Molecular Medicine. - 2003. - Vol. 9, № 6. - P. 263-268.

144. Li, T. Research progress of vasculopathy in portal hypertension / T. Li, Z. Yang // World. J. Gastroenterol. - 2005. - Vol. 11, № 39. - P. 60796084.

145. Liver stiffness measurement in children using FibroScan: feasibility study and comparison with Fibrotest, aspartate transaminase to platelets ratio index, and liver biopsy / V. de Ledinghen, B. Le Bail, L. Rebouissoux [et al.] // J. Pediatr. Gastroenterol. Nutr. - 2007. - Vol. 45. - P. 443-450.

146. Longitudinal application of the platelet count/spleen diameter ratio to rule out the presence of esophageal varices during follow-up of cirrhotic patients / E. Giannini, F. Botta, P. Borro [et al.] // J. Hepatol. - 2005. - Vol. 42, Suppl. 2.-P. 80.

147. Long-term prognosis of patients with alcoholic liver cirrhosis: a 15-year follow-up study of 100 norwegian patients admitted to one unit / H. Bell, J. Jahnsen, E. Kittang [et al.] // Sc.and. J. Gastroenterol. - 2004. - Vol. 39, № 9.-P. 858-863.

148. Long-term treatment with entecavir induces reversal of advanced fibrosis or cirrhosis in patients with chronic hepatitis B / E.R. Schiff, S.S. Lee, Y.C. Chao [et al.] // Clin. Gastroenterol. Hepatol. - 2011. - Vol. 9. - P. 274-276.

149. Lowe, J.B. Glycosylation in the control of selectin counter-receptor structure and function / J.B. Lowe // Immunol. Rev. - 2002. - Vol. 186. - P. 19-36.

150. L-selectin and intercellular adhesion molecule-1 regulate the development of Concanavalin A-induced liver injury / A. Kawasuji, M. Hasegawa, M. Horikawa [et al.] // J. Leukoc. Biol. - 2006. - Vol. 79, № 4. -P. 696-705.

151. Maasoumy, B. Natural history of acute and chronic hepatitis C / B. Maasoumy, H. Wedemeyer // Best. Pract. Res. Clin. Gastroenterol. - 2012. -Vol. 26.-P. 401-412.

152. McHutchison, J.G. Current therapy for hepatitis C: pegylated interferon and ribavirin / J.G. McHutchison, M.W. Fried // Clin. Liver. Dis. -2003. Vol. 7.-P. 149-161.

153. MELD score and serum sodium in the prediction of survival of patients with cirrhosis awaiting liver transplantation / M.C. Londoco, A. Cerdenas, M. Guevara [et al.] // Gut. - 2007. - Vol. 56, № 9. - P. 12831290.

154. Modulation of endothelial cell inflammatory integrins and stress markers with Rh-factor Vila in patients with advanced chronic hepatitis C / D.H. Van Thiel, A. Anantharaiu, A.L. Mindikoqlu [et al.] // J. Vir. Hep. -2003.-Vol. 10, №4.-P. 310-317.

155. Monson, K.M. CXC-chemokine regulation and neutrophil trafficking in hepatic ischemia-reperfusion injury in P-selectin/ICAM-1 deficient mice / K.M. Monson, S. Dowlatshahi, E.T. Crockett // J. Inflamm. - 2007. - Vol. 24.-P. 4-11.

156. Mukerji, A.N. Improving survival in decompensated cirrhosis / A.N. Mukerji, V. Patel, A. Jain // Int. J. Hepatol. - 2012. - Vol. 14. - P. 5-11.

157. Myers, R.P. Utilization rates, complications and costs of percutaneous liver biopsy: a population-based study including 4275 biopsies / R.P. Myers, A. Fong, A.A. Shaheen // Liver. Int. - 2008. - Vol. 28. - P. 705-712.

158. Neutrophil P-selectin-glycoprotein-ligand-1 binding to platelet P-selectin enhances metalloproteinase 2 secretion and platelet-neutrophil aggregation / H. Abou-Saleh, J.F. Theoret, D. Yacoub, Y. Merhi // Thromb. Haemost. - 2005. - Vol. 94. - P. 1230-1235.

159. New insights into the coagulopathy of liver disease and liver transplantation / M. Senzolo, P. Burra, E. Cholongitas, A. K. Burroughs // World. J. Gastroenterol. - 2006. - Vol. 12, № 48. - P. 7725-7736.

160. On-treatment monitoring of liver fibrosis with transient elastography in chronic hepatitis B patients / G.L. Wong, V.W. Wong, P.C. Choi [et al.] // Antivir. Then- 2011. -Vol. 16.-P. 165-172.

161. Page, A.V. Biomarkers of endothelial activation/dysfunction in infectious diseases / A.V. Page, W.C. Liles // Virulence. - 2013. - Vol. 4, № 6.-P. 1-10.

162. Panasiuk, A. Monocyte chemotactic protein-1 and soluble adhesion molecules as possible prognostic markers of the efficacy of antiviral treatment in chronic hepatitis C / A. Panasiuk, D. Prokopowicz, B. Panasiuk // World. J. Gastroenterol. - 2004. - Vol. 10, № 24. - P. 3639-3642.

163. Participation of platelets in the process of fibrosis in patients with mansonic schistosomiasis / S. Soares, V. Rodrigues Júnior, D.T. Silva [et al.] //Rev. Soc. Bras. Med. Trop. - 2007. - Vol. 40, № 3. - P. 321-325.

164. Peginterferon alfa-2b or alfa-2a with ribavirin for treatment of hepatitis C infection / J.G. McHutchison, E.J. Lawitz, M.L. Shiffman [et al.] // N. Engl. J. Med. - 2009. - Vol. 361. - P. 580-593.

165. Percutaneous liver biopsy in hemophiliac children with chronic hepatitis C virus infection / K.B. Schwarz, A. Zellos, L. Stamato [et al.] // J. Pediatr. Gastroenterol. Nutr. - 2008. - Vol. 46. - P. 423-428.

166. Phenyl methimazole inhibits TNF-a-induced VCAM-1 expression in an IFN regulatory factor-1-dependent manner and reduces monocytic cell

adhesion to endothelial cells / N.M. Dagia, N. Harii, A.E. Meli [et al.] // J. Immunol. - 2004. - Vol. 173, № 3. - P. 2041-2049.

167. Physiology and pathophysiology of liver inflammation, damage and repair / G. Ramadori, F. Moriconi, I. Malik, J. Dudas // J. Physiol. Pharmacol.-2008.-Vol. 59, Suppl. l.-P. 107-117.

168. Pinzani, M. Fibrosis in chronic liver diseases: diagnosis and management / M. Pinzani, K. Rombouts, S. Colagrande // J. Hepatol. -2005.-Vol. 42.-P. 22-36.

169. Plasma nitrate/nitrite and endothelin-1 in patients with liver cirrhosis / A. Curgunlu, P. Vural, M. Canbaz [et al.] // J. Clin. Lab. Anal. - 2005. -Vol. 19, №5.-P. 177-181.

170. Plasma profiles of circulating granulocyte-macrophage colony-stimulating factor and soluble cellular adhesion molecules in acute myocardial infarction. Contribution to post-infarction left ventricular dysfunction / J.T. Parissis, S. Adamopoulos, K. Venetsanou [et al.] // Eur. Cytokine. Netw. - 2004. - Vol. 15. - P. 139-144.

171. Plasma P-selectin levels are elevated in patients with chronic liver disease / F. Tacke, P. Schoffski, C. Trautwein [et al.] // Blood. Coagul. Fibrinolysis.-2003.-Vol. 14, №4.-P. 319-325.

172. Platelet activation and vascular endothelial growth factor 165 release in hepatocellular cancer / P. Ferroni, A. Spila, R. D'Alessandro [et al.] // Clin. Chim. Acta. - 2011. - Vol. 412, № 5-6. - P. 450-454.

173. Platelet activation in patients with alcoholic liver disease / F. Ogasawara, H. Fusegawa, Y. Haruki [et al.] // Tokai. J. Exp. Clin. Med. -2005.-Vol. 30, № l.-P. 41-48.

174. Platelet activation in patients with chronic hepatitis C / H. Fusegawa, K. Shiraishi, F. Ogasawara [et al.] // Tokai. J. Exp. Clin. Med. - 2002. - Vol. 27, №4.-P. 101-106.

175. Platelet P-selectin is required for pulmonary eosinophil and lymphocyte recruitment in a murine model of allergic inflammation / S.C. Pitchford, S. Momi, S. Giannini [et al.] // Blood. - 2005. - Vol. 105. - P. 2074-2081.

176. Platelet sparing effect of COX II inhibition used with pegylated interferon alfa-2a for the treatment of chronic hepatitis C: a short term pilot

study / M.M. George, S.D. Li, A.L. Mindikoglu [et al.] // Cytokine. - 2004. -Vol. 27, №6.-P. 159-165.

177. Platelet-dependent accumulation of leukocytes in sinusoids mediates hepatocellular damage in bile duct ligation-induced cholestasis / M.W. Laschke, S. Dold, M.D. Menger [et al.] // Br. J. Pharmacol. - 2008. - Vol. 153.-P. 148-156.

178. Platelet-derived growth factor C induces liver fibrosis, steatosis, and hepatocellular carcinoma / J.S. Campbell, S.D. Hughes, D.G. Gilberson [et al.] // PNAS. - 2005. - Vol. 102, № 9. - P. 3389-3394.

179. Platelets are necessary for airway wall remodeling in a murine model of chronic allergic inflammation / S.C. Pitchford, Y. Riffo-Vasquez, A. Sousa [et al.] // Blood. - 2004. - Vol. 103. - P. 639-647.

180. Platelets mediate cytotoxic T lymphocyte-induced liver damage / M. Iannacone, G. Sitia, M. Isogawa [et al.] // Nature. Medicine. - 2005. - Vol. 11.-P. 1167-1169.

181. Pockros, P. J. Noninvasive markers of fibrosis in chronic hepatitis patients / P. J. Pockros // J. Clin. Gastroenterol. - 2006. - Vol. 40, № 6. - P. 461-463.

182. Polymorphisms and plasma soluble levels of E-selectin in patients with chronic hepatitis B virus infection / S. Wu, X. Zhou, H. Yang [et al.] // Clin. Chem. Lab. Med. - 2009. - Vol. 47, № 2. - P. 159-164.

183. Portal vein thrombosis and haematemesis in chronic liver disease. Are P-selectin and PSGL-1 clues? / H.A. Sadek, B.S. Madkour, I.A. Shaheen [et al.] // Arab. J. Gastroenterol. - 2010. - Vol. 11, № 3. - P. 124-129.

184. Prediction of esophageal varices in patients with cirrhosis / R. Madhotra, H. E. Mulcahy, I. Willner, A. Reuben // J. Clin. Gastroenterol. -2002.-Vol. 34, № l.-P. 81-85.

185. Predictors of virologic response with telaprevir-based combination treatment in HCV genotype 1-infected patients with prior peginterferon/ribavirin treatment failure: post-hoc analysis of the phase III realize study / T. Berg, P. Andreone, S. Pol [et al.] // Hepatology. - 2011. -Vol. 54.-P. 375A-376A.

186. Prognostic value of quantitative liver function tests in viral cirrhosis: a prospective study / L. Addario, G. Scaglione, G. Tritto [et al.] // Eur. J. Gastroenterol. Hepatol. - 2006. - Vol. 18, № 7. - P. 713-720.

187. Prognostic value of serum CD44, intercellular adhesion molecule-1 and vascular cell adhesion molecule-1 levels in patients with indolent non-Hodgkin lymphomas / N. Shah, F. Cabanillas, B. Mclntyre [et al.] // Leuk. Lymphoma.-2012.-Vol. 53, № l.-P. 50-56.

188. Prophylaxis, diagnosis and therapy of hepatitis B virus infection - the German guideline / M. Cornberg, U. Protzer, J. Petersen [et al.] // Z. Gastroenterol.-2011.-Vol. 49.-P. 871-930.

189. Prophylaxis, diagnosis and therapy of hepatitis C virus (HCV) infection: the German guidelines on the management of HCV infection / C. Sarrazin, T. Berg, R.S. Ross [et al.] // Z. Gastroenterol. - 2010. - Vol. 48. -P. 289-351.

190. P-selectin glycoprotein ligand-1 deficient-mice have impaired leukocyte tethering to E-selectin under flow / L. Xia [et al.] // J. Clin. Invest. - 2002. - Vol. 109. - P. 939-950.

191. P-selectin mediates leukocyte rolling in concanavalin-A-induced hepatitis / S. March, J.C. Garsia-Pagan, A. Massaguer [et al.] // Liver. Int. -2005. - Vol. 25, № 5. - P. 1053-1060.

192. P-selectin suppresses hepatic inflammation and fibrosis in mice by regulating interferon gamma and the IL-13 decoy receptor / T.A. Wynn, M. Hesse, N.G. Sandler [et al.] // Hepatology. - 2004. - Vol. 39, № 3. - P. 676687.

193. Quantitation of pretreatment serum interferon-gamma- inducible protein-10 improves the predictive value of an IL28B gene polymorphism for hepatitis C treatment response / J.M. Darling, J. Aerssens, G. Fanning [et al.]// Hepatology. -2011. -Vol. 53.-P. 14-22.

194. Ramaiah, S.K. Role of neutrophils in the pathogenesis of acute inflammatory liver injury / S.K. Ramaiah, H. Jaeschke // Toxicol. Pathol. -2007.-Vol. 35.-P. 757-766.

195. Relationship between hepatitis C virus (HCV) and insulin resistance, endothelial perturbation, and platelet activation in HIV-HCV-coinfected patients under highly active antiretroviral treatment / G.F. de Larrañaga,

S.D. Wingeyer, L.M. Puga [et al.] // Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. -2006. - Vol. 25, № 2. - P. 98-103.

196. Review article: blood platelet number and function in chronic liver disease and cirrhosis / P. Witters, K. Fresón, C. Verslype [et al.] // Aliment. Pharmacol. Ther. - 2008. - Vol. 27. - P. 1017-1029.

197. Risk stratification in unstable angina and non-Q wave myocardial infarction using soluble cell adhesion molecules / N.T. Mulvihill, J.B. Foley, R.T. Murphy [et al.] // Heart. - 2001. - Vol. 85, № 6. - P. 623-627.

198. Rockey, D.C. Antifibrotic therapy in chronic liver disease / D.C. Rockey // Clin. Gastroenterol. Hepatol. - 2005. - Vol. 3, № 2. - P. 95-107.

199. Role of LPS in the hepatic microvacsular dysfunction elicited by cecal ligation and puncture in mice / G. Singer J. Houghton, C. Rivera [et al.] // J. Hepatol. - 2007. - Vol. 47. - P. 799-806.

200. Roles of platelets and macrophages in the protective effects of lipopolysaccharide against concanavalin A-induced murine hepatitis / Z. Yu, H. Otsuka, K. Yamaguchi [et al.] // Biochim. Biophys. Acta. - 2011. - Vol. 1812, №9.-P. 1069-1079.

201. Rosenfeld, M.E. Leukocyte recruitment into developing atherosclerotic lesions / M.E. Rosenfeld // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2002. - Vol. 22. - P. 361-363.

202. Sacanella, E. The effect of alcohol consumption on endothelial adhesion molecule expression / E. Sacanella, R. Estruch // Addict. Biol. -2003. - Vol. 8, № 4. - P. 371-378.

203. Samada, M. Prognostic factors for survival in patients with liver cirrhosis / M. Samada, J.C. Hernández // Liver Transplantation - Basic Issues, Prof. Hesham Abdeldayem (Ed.). - 2012. - 418 p.

204. Sampling variability on percutaneous liver biopsy in patients with chronic hepatitis C virus infection / I. Siddique, H.A. El-Naga, J.P. Madda [et al.] // Scand. J. Gastroenterol. - 2003. - Vol. 38. - P. 427-432.

205. Schirmacher, P. Biopsy diagnosis of chronic hepatitis / P. Schirmacher, W.E. Fleig, H.P. Dienes // Z. Gastroenterol. - 2004. - Vol. 42. -P. 175-185.

206. Sepsis-associated cholestasis is critically dependent on P-selectin-dependent leukocyte recruitment in mice / M. Laschke, M.D. Menger, Y.

Wang [et al.] // Am. J. Physiol. Gastroenterol. Hepatol. Physiol. - 2007. -Vol. 292.-P. G1396-G1402.

207. Serial analysis of serum and ascetic fluid levels of soluble adhesion molecules and chemokines in patients with spontaneous bacterial peritonitis / J.A. Giron-Gonzalez, C. Rodriguez-Ramos, J. Elvira [et al.] // Clin. Exp. Immunol.-2001.-Vol. 123, № l.-P. 56-61.

208. Serum concentration of E-selectin in patients with chronic hepatitis, liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma / M. Cervello, L. Virruso, G. Lipani [et al.] // J. Cancer. Res. Clin. Oncol. - 2000. - Vol. 126, № 6. - P. 345-351.

209. Serum level of soluble vascular cell adhesion molecule 1 is a valuable prognostic marker in colorectal carcinoma / Y. Okugawa, C. Miki, Y. Toiyama [et al.] // Dis. Colon. Rectum. - 2009. - Vol. 52, № 7. - P. 13301336.

210. Serum levels of soluble adhesion molecules as prognostic factors for acute liver failure / A. Ohnishi, Y. Miyake, H. Matsushita [et al.] // Digestion. - 2012. - Vol. 86, № 2. - P. 122-128.

211. Shiffman, M.L. Triple therapy for genotype 1 infection: telaprevir or boceprevir / M.L. Shiffman, R. Esteban // Liver. Inter. - 2012. - Vol. 32, Suppl. l.-P. 54-60.

212. Simpson, K.J. Soluble adhesion molecules in immune mediated liver disease / K.J. Simpson, P.C. Hayes // Gut. - 1995. - Vol. 36. - P. 806-808.

213. Soluble adhesion molecule profiling in preoperative infants with biliary atresia / M. Davenport, C. Gonde, B. Narayanaswamy [et al.] // J. Pediatr. Surg. - 2005. - Vol. 40, № 9. - P. 1464-1469.

214. Soluble adhesion molecules and interleukin-2 receptor concentrations in patients with autoimmune chronic hepatitis / K.J. Simpson, A.L. Jones, A.F. Howie, P.C. Hayes // Eur. J. Gastroenterol. Hepatol. - 1995. - Vol. 7, № 5.-P. 455-460.

215. Soluble P selectin levels in chronic liver disease: relationship to disease severity / E. Vardareli, T. Saricam, C. Demirusru, Z. Gulbas // Hepatogastroenterol. - 2007. - Vol. 54, № 74. - P. 466-469.

216. Sources of variability in histological scoring of chronic viral hepatitis / M.C. Rousselet, S. Michalak, F. Dupre [et al.] // Hepatology. - 2005. -Vol. 41.-P. 257-264.

217. Stepwise combination algorithms of non-invasive markers to diagnose significant fibrosis in chronic hepatitis C / G. Sebastiani, A. Vario, M. Guido [et al.] // J. Hepatol. - 2006. - Vol. 44. - P. 686-693.

218. Sublobular veins as the main site of lymphocyte adhesion/transmigration and adhesion molecule expression in the porto-sinusoidal-hepatic venous system during concanavalin A-induced hepatitis in mice / H. Morikawa, K. Hachiya, H. Mizuhara [et al.] // Hepatology. -2000.-Vol. 31.-P. 83-94.

219. Sustained virologic response decreases serum markers of angiogenesis, inflammation, and fibrosis in HIV/HCV-coinfected patients on hepatitis C virus therapy / M. Garcia-Alvarez, J. Berenguer, D. Micheloud [et al.] // AIDS. Patient. Care. STDS. - 2011. - Vol. 25, № 3. - P. 131-133.

220. Sustained virological response to interferon-a plus ribavirin decreases inflammation and endothelial dysfunction markers in HIV/HCV co-infected patients / M. Guzman-Fulgencio, J. Berenguer, I.F. de Castro [et al.] // J. Antimicrob. Chemother. - 2011. - Vol. 66. - P. 645-649.

221. Technology insight: noninvasive assessment of liver fibrosis by biochemical scores and elastography / M. Pinzani, F. Vizzutti, U. Arena, F. Marra // Nat. Clin. Pract. Gastroenterol. Hepatol. - 2008. - Vol. 5. - P. 95106.

222. Telaprevir for previously untreated chronic hepatitis C virus infection / I.M. Jacobson, J.G. McHutchison, G. Dusheiko [et al.] // N. Engl. J. Med. -2011.-Vol. 364.-P. 2405-2416.

223. Telaprevir for retreatment of HCV infection / S. Zeuzem, P. Andreone, S. Pol [et al.] // N. Engl. J. Med. - 2011. - Vol. 364. - P. 2417 -2428.

224. Thalidomide in rat liver cirrhosis: blockade of tumor necrosis factor-alpha via inhibition of degradation of an inhibitor of nuclear factor-kappaB / S.C. Paul, P. Lv, Y. Xiao [et al.] // Pathobiology. - 2006. - Vol. 73, № 2. -P. 82-92.

225. Thalidomide prevents rat liver cirrhosis via inhibition of oxidative stress / P. Lv, H.S. Luo, X.P. Zhou [et al.] // Pathol. Res. Pract. - 2006. -Vol. 202, № 11.-P. 777-788.

226. The effect of trandolapril and its fixed-dose combination with verapamil on circulating adhesion molecules levels in hypertensive patients with type 2 diabetes / A.F. Rubio-Guerra, H. Vargas-Robles, G. Vargas-Ayala [et al.] // Clin. Experiment. Hypertens. - 2008. - Vol. 30. - P. 682688.

227. The electrolytic inferior vena cava model (EIM) to study thrombogenesis and thrombus resolution with continuous blood flow in the mouse / J.A. Diaz, C.M. Alvarado, S.K. Wrobleski [et al.] // Thromb. Haemost.- 2013. -Vol. 109, №6.-P. 1158-1169.

228. The eNOS cofactor tetrahydrobiopterin improves endothelial dysfunction in livers of rats with CC14 cirrhosis / V. Matei, A. Rodriguez-Vilarrupla, R. Deulofeu [et al.] // Hepatology. - 2006. - Vol. 44. - P. 44-52.

229. The level endothelin-1 and nitric oxide in patients with chronic viral hepatitis B and C and correlation with histopatological grading and staging / Y. Ersoy, N. M. Bayraktarb, B. Mizrakc [et al.] // Hepatology. Research. -2006. - Vol. 34, № 2. - P. 111-116.

230. The state of hepatitis B and C in Europe: report from the hepatitis B and C summit conference / A. Hatzakis, S. Wait, J. Bruix [et al.] // J. Viral. Hepat.-2011.-Vol. 18, Suppl. l.-P. 1-16.

231. Thrombotic risk factors and extent of liver fibrosis in chronic viral hepatitis / G.V. Papatheodoridis, E. Papakonstantinou, E. Andrioti [et al.] // Gut. - 2003. - Vol. 52. - P. 404-409.

232. TNF-a-induced expression of adhesion molecules in the liver is under the control of TNFR1 - relevance for concanavalin A-induced hepatitis / D. Wolf, R. Hallmann, G. Sass [et al.] // J. Immunol. - 2001. - Vol. 166. - P. 1300-1307.

233. Tousoulis, D. Assessing inflammatory status in cardiovascular disease / D. Tousoulis, C. Antoniades, C. Stefanadis // Heart. - 2007. - Vol. 93. - P. 1001-1007.

234. Transcellular diapedesis is initiated by invasive podosomes / C.V. Carman, P.T. Sage, T.E. Sciuto [et al.] // Immunity. - 2007. - Vol. 26. - P. 784-797.

235. Transfer of tissue factor from platelets to monocytes: role of platelet-derived microvesicles and CD62P / T. Scholz, U. Temmler, S. Krause [et al.] // Thromb. Haemost. - 2002. - Vol. 88. - P. 1033-1038.

236. Transient elastography is unreliable for detection of cirrhosis in patients with acute liver damage / A. Sagir, A. Erhardt, M. Schmitt, D. Haussinger // Hepatology. - 2008. - Vol. 47. - P. 592-595.

237. Twenty-year audit of percutaneous liver biopsy in a major Australian teaching hospital / D. van der Poorten, A. Kwok, T. Lam, [et al.] // Intern. Med. J. - 2006. - Vol. 36. - P. 692-699.

238. Van Buul, J.D. Signaling in leukocyte transendothelial migration / J.D. van Buul, P.L. Hordijk //Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2004. -Vol. 24.-P. 824-833.

239. Vestweber, D. Adhesion and signaling molecules controlling the transmigration of leukocytes through endothelium / D. Vestweber // Immunol. Rev. - 2007. - Vol. 218.-P. 178-196.

240. Von Hundelshausen, P. Platelets as immune cells: bridging inflammation and cardiovascular disease / P. von Hundelshausen, C. Weber // Circ. Res. - 2007. - Vol. 100. - P. 27-40.

241. Von Willebrand factor levels predict clinical outcome in patients with cirrhosis and portal hypertension / V. La Mura, J.C. Reverter, A. Flores-Arroyo [et al.] //Gut.-2011.-Vol. 60, № 8.-P. 1133-1138.

242. Walzog, B. Adhesion molecules: the path to a new understanding of acute inflammation / B. Walzog P. Gaehtgens // News. Physiol. Sci. - 2000. -Vol. 15, №3.-P. 107-113.

243. Weber, C. The role of junctional adhesion molecules in vascular inflammation / C. Weber, L. Fraemohs, E. Dejana / Nat. Rev. Immunol. -2007.-Vol. 7.-P. 467-477.

244. Woo, C.-H. VCAM-1 upregulation via PKCS-p38 kinase-linked cascade mediates the TNF-a-induced leukocyte adhesion and emigration in the lung airway epithelium / C.-H. Woo, J.-H. Lim, J.-H. Kim // Am. J.

Physiol.-Lung. Cell. Mol. Physiol. - 2005. - Vol. 288, № 2. - P. L307-L316.

245. Wright, M. Construction of a predictive model to identify rapid fibrosis progression in patients with chronic hepatitis C virus infection / M. Wright, R. Goldin, M. Thursz // J. Hepatol. - 2003. - Vol. 38, Suppl. 2. - P. 47.

246. Yu, I. Predicting prognosis among cirrhotic patients: Child-Pugh versus APACHE III versus MELD scoring systems / I. Yu, L. Abola // Phil. J. Gastroenterol. - 2006. - Vol. 2. - P. 19-24.

247. Zarbock, A. Complete reversal of acid-induced acute lung injury by blocking of platelet-neutrophil aggregation / A. Zarbock, K. Singbartl, K. Ley // J. Clin. Invest. - 2006. - Vol. 116. - P. 3211-3219.

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего

профессионального образования «Ставропольский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ

На правах рукописи

04201 451992

ГИЛЯЗОВА ГУЗЕЛЬ ИРЕКОВНА

РОЛЬ СЕЛЕКТИНОВ В ФОРМИРОВАНИИ И ПРОГРЕССИРОВАНИИ ХРОНИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПЕЧЕНИ

14.01.04 - внутренние болезни

ДИССЕРТАЦИЯ

на соискание учёной степени кандидата медицинских наук

Научный руководитель:

доктор медицинских наук П.В. Корой

Ставрополь 2013 г.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ 4

ВВЕДЕНИЕ 6 ГЛАВА 1. СЕЛЕКТИНЫ В НОРМЕ И ПРИ ЗАБОЛЕВАНИЯХ

ПЕЧЕНИ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ) 13

1.1. Роль молекул адгезии в воспалении и иммунном ответе 13

1.2. Показатели селектинов при заболеваниях печени 16

1.2.1. Структура и роль селектинов в реализации воспаления и иммунного ответа 16

1.2.2. Е-селектин при патологии печени 18

1.2.3. Р-селектин и хроническая патология печени 22

1.2.4. Ь-селектин при воспалительных заболеваниях печени 27

1.3. Роль селектинов в развитии ремоделирования печени 29

1.4. Взаимоотношения противовирусной терапии с селектинами при хронических вирусных заболеваниях печени 33

1.5. Показатели селектинов в прогнозировании течения цирроза печени 36

ГЛАВА 2. КЛИНИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА БОЛЬНЫХ 41

ГЛАВА 3. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 59

3.1. Морфологическое исследование печени 60

3.2. Получение биологических образцов для специального исследования 61

3.3. Методы исследования селектинов в крови 61

3.3.1. Определение содержания Е-селектина в крови 61

3.3.2. Определение содержания Ь-селектина в крови 62

3.3.3. Определение содержания Р-селектина в

крови 63

3.4. Статистический анализ данных 64

ГЛАВА 4. КЛИНИКО-ПАТОГЕНЕТИЧЕСКОЕ И ПРОГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ СЕЛЕКТИНОВ ПРИ ХРОНИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ ПЕЧЕНИ (СОБСТВЕННЫЕ НАБЛЮДЕНИЯ) 66

4.1. Селектины при хронической патологии печени 66

4.2. Взаимосвязь селектинов и гистологических изменений при хронических вирусных заболеваниях печени 81

4.3. Взаимосвязь селектинов с противовирусной терапией хронических вирусных заболеваний печени 90

4.3.1. Влияние противовирусной терапии на показатели семейства селектинов в крови 90

4.3.2. Взаимосвязь исходных показателей селектинов с результатами противовирусной терапии 96

4.4. Взаимосвязь селектинов с исходами цирроза печени (результаты трехлетнего наблюдения) 105

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ 114

ВЫВОДЫ 137

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ 139

БИБЛИОГРАФИЯ 140

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АлАТ - аланиновая аминотранфераза

АсАТ - аспарагиновая аминотрансфераза

ВРВП - варикозное расширение вен пищевода

ДИ - доверительный интервал

ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота

ИГА - индекс гистологической активности

ИФ - индекс фиброза

ИФА - иммуноферментный анализ

ИФН - интерферон

МВС - мезенхимально-воспалительный синдром

ОАГ - острый алкогольный гепатит

ОШ - отношение шансов

ПГ - портальная гипертензия

ПЦР - полимеразная цепная реакция

РНК - рибонуклеиновая кислота

УВО - устойчивый вирусологический ответ

ФНО-а - фактор некроза опухоли-а

ХВГ - хронический вирусный гепатит

ХВЗП - хронические вирусные заболевания печени

ХЗП - хронические заболевания печени

ЦП - цирроз печени

ЭГДС - эзофагогастродуоденоскопия

Ас - точность

НВУ - вирус гепатита В

НСУ - вирус гепатита С

1САМ-1 - молекула межклеточной адгезии 1 типа

ТчПРУ - отрицательная предсказательная ценность

РЕСАМ - молекула адгезии тромбоцитов и эндотелиоцитов

РРУ - положительная предсказательная ценность

РЗвЬ - Р-селектин-гликопротеиновый лиганд 1 типа

8е - чувствительность

8р - специфичность

УСАМ-1 - молекула адгезии сосудистого эндотелия 1 типа

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы

Хронические вирусные заболевания печени являются важнейшей проблемой гастроэнтерологии. Маркеры НВУ-инфекции регистрируются у 350 миллионов человек в мире, ежегодно умирает около 1 миллиона людей от связанных с ней осложнений [85, 230]. Приблизительно 130-170 миллионов людей страдают хроническим вирусным гепатитом С [25], удельный вес лиц с маркерами НСУ-инфекции увеличился за последние два десятилетия до 2,8% [103], что сопровождается ростом частоты цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы [151]. Преобладание среди пациентов лиц трудоспособного возраста указывает не только на медицинскую, но и на высокую социальную значимость хронической патологии печени.

Внедрение гепатотропного вируса в организм сопровождается развитием воспалительной реакции и активацией иммунной системы, направленной против чужеродного агента. Известно, что для полноценной элиминации вируса необходим сбалансированный иммунный ответ. Селектины, экспрессируемые и секретируемые активированными клетками, отвечают за взаимоотношения эндотелиоцитов, лейкоцитов и тромбоцитов, что обеспечивает миграцию клеток крови в очаг воспаления [14, 20,239, 243]. Однако аккумуляция иммунокомпетентных клеток в печеночной паренхиме может вызывать как элиминацию вируса, так и, наоборот, усиливать повреждение печени и дальнейшее прогрессирование воспалительного процесса [108].

Несмотря на многочисленные свидетельства нарушений медиаторов межклеточных взаимодействий при патологии печени [172, 182, 183, 215, 220, 241], мнение в отношении значимости этих отклонений противоречиво. Остаются неуточненными механизмы, позволяющие гепатотропным вирусам

персистировать в организме и ускользать от «иммунного надзора». Это является основанием для рассмотрения новой клинической парадигмы расстройств межклеточных взаимодействий при патологии печени.

Разработка комплексной оценки нарушений селектинов при хронической патологии печени находится в стадии поиска решения проблемы. Сохраняются противоречия в отношении характера и выраженности отклонений молекул адгезии при хроническом гепатите и циррозе печени. Отсутствуют убедительные сведения о сопряженности изменений баланса селектинов с этиологией и клиническими составляющими патологии печени, в том числе с формированием пищеводных флебэктазий. Отсутствуют данные о взаимосвязи опосредованного селектинами иммунного гомеостаза с процессами воспаления, фиброза и тканевого ремоделирования - ключевыми проблемами патогенеза хронической вирусной патологии печени.

Нет данных о влиянии противовирусной терапии на показатели селектинов, что позволило бы расширить понимание механизмов реверсии печеночного воспаления и фиброза и прогнозировать возникновение и стабильность вирусологической ремиссии. Практически отсутствуют работы, посвященные изучению предикторной роли медиаторов межклеточных взаимодействий в прогнозе ХВЗП.

В связи с этим изучение клинико-патогенетического и прогностического значения селектинов при хронической патологии печени представляет несомненный теоретический и практический интерес как с точки зрения их взаимосвязи с клиническими проявлениями заболеваний, так и с позиции совершенствования дифференциально-диагностических, лечебных и прогностических программ.

Цель исследования. Определить клинико-патогенетическое и прогностическое значение селектинов при хронических заболеваниях печени.

Задачи исследования:

1. Изучить содержание в крови Е-, Ь- и Р-селектина у больных хроническим вирусным гепатитом и циррозом печени.

2. Установить взаимосвязь селектинов с этиологией заболевания, генофенотипическими особенностями гепатотропных вирусов, основными клинико-лабораторными синдромами патологии печени.

3. Выявить взаимосвязь отклонений молекул адгезии с выраженностью стеатоза, гистологической активностью и степенью печеночного фиброза и установить возможности их применения в неинвазивной диагностике активности воспаления и фиброза печени, в диагностике варикозного расширения вен пищевода.

4. Определить сопряженность селектинов с результатами противовирусной терапии хронических вирусных заболеваний печени для выработки предикторов эффективности лечения.

5. У больных циррозом печени сопоставить изучаемые показатели с характером течения заболевания, создать прогностические индикаторы и сформировать группы риска больных в отношении неблагоприятного прогноза.

Научная новизна работы

Впервые на большом клиническом материале проведено изучение и установлены закономерности нарушений селектинов при хронической патологии печени. Раскрыты новые особенности сдвигов молекул адгезии в зависимости от этиологии заболевания. Впервые получены данные о том, что наиболее выраженные изменения уровней Е- и Р-селектина в крови присущи циррозу печени. Впервые отмечены максимальные отклонения медиаторов межклеточных взаимодействий при алкогольном циррозе печени, особенно в случаях сочетания с острым алкогольным гепатитом. Впервые показано

углубление отклонений со стороны селектинов с усилением цитолиза, наличием мезенхимального воспаления и холестаза, с тяжестью цирроза, развитием гиперспленизма. Впервые определены повышенные уровни Р-селектина при высоких градациях пищеводных венэктазий. Доказана информативность показателя Р-селектина для целенаправленного поиска варикозного расширения вен пищевода.

Впервые установлена вовлеченность молекул адгезии в процессы воспаления и фиброза и выявлена весомая роль в ремоделировании печени увеличенных значений селектинов в крови. Впервые оценена информативность показателей Е-, Ь- и Р-селектина как параметров неинвазивной диагностики гистологической активности и печеночного фиброза.

Впервые выявлен более выраженный нормализующий эффект противовирусных средств на показатели селектинов у больных хроническим вирусным гепатитом С и С-вирусным циррозом печени, достигших в ходе противовирусного лечения устойчивого вирусологического ответа. Впервые оценена роль исходных значений Е-, Ь- и Р-селектинов как прогностических критериев стабильной авиремии при хронической НСУ-ассоциированной патологии печени. Впервые выявлены особенности нарушений медиаторов межклеточных взаимодействий, имеющие диагностическое значение и оценивающие неблагоприятный прогноз цирроза печени, определены группы риска его развития на основе изучения показателей селектинов.

Практическая значимость работы

С учетом установленной взаимосвязи Р-селектина с выраженностью пищеводных флебэктазий оптимизированы возможности неинвазивной диагностики степени варикозного расширения вен пищевода у больных циррозом печени.

Взаимосвязь селектинов с морфологическими проявлениями воспаления и фиброза позволила осуществлять неинвазивную оценку

умеренной и высокой гистологической активности и тяжелого фиброза/цирроза у больных хронической вирусной патологией печени, что имеет большое значение для планирования лечебных мероприятий.

Установленная зависимость результатов противовирусной терапии от исходных значений молекул адгезии составила основу прогностических критериев устойчивого вирусологического ответа у больных хроническими С-вирусными заболеваниями печени.

Факт влияния отклонений медиаторов межклеточных взаимодействий на прогноз (в частности, на летальный исход у больных циррозом печени в течение 1 и 3 лет наблюдения) обосновывает использование показателей Е- и Р-селектина для формирования групп риска данного исхода в указанные сроки наблюдения.

Основные положения, выносимые на защиту:

- особенности отклонений в содержании селектинов крови у больных хроническим вирусным гепатитом и циррозом печени вирусной и алкогольной этиологии;

- влияние типа вируса и фенотипических особенностей НВУ на показатели молекул адгезии и отсутствие их зависимости от степени виремии и генетических особенностей НСУ; более значительные отклонения Е-селектина у пациентов с алкогольным циррозом печени по сравнению с вирусным;

- сопряженность отклонений молекул адгезии с выраженностью цитолитического, наличием мезенхимально-воспалительного и холестатического синдромов, с прогностически тяжелыми вариантами цирроза печени, с общим прогнозом заболевания;

- взаимосвязь высоких градаций пищеводных венэктазий с высокими значениями Р-селектина; возможности применения Р-селектина в диагностике варикозного расширения вен пищевода при циррозе печени;

- возможность использования показателей молекул адгезии для оценки прогноза летального исхода в течение 1 и 3 лет наблюдения;

- взаимосвязь уровней селектинов в крови с воспалением и фиброзом; диагностическая значимость показателей Е-, Ь- и Р-селектина в неивазивной оценке гистологической активности и степени фиброза печени;

- способность противовирусной терапии вызывать улучшение показателей молекул адгезии максимально выраженная в случаях формирования устойчивого вирусологического ответа.

Внедрение в практику

Результаты исследования внедрены в практику работы отделений ГБУЗ СК «Ставропольский краевой клинический центр специализированных видов медицинской помощи» г. Ставрополя, ГБУЗ «Республиканская клиническая больница им. Г. Г. Куватова» г. Уфы. Итоговые материалы работы используются в лекциях и на практических занятиях со студентами, клиническими ординаторами, врачами и аспирантами кафедр госпитальной терапии и поликлинической терапии Ставропольского государственного медицинского университета.

Публикации и апробация работы

По теме диссертации опубликовано 20 научных работ, из них 3 работы в изданиях, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ для публикации результатов кандидатских диссертаций: «Медицинский вестник Северного Кавказа» (2013).

Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на XX итоговой научной конференции молодых ученых с международным участием (Ставрополь, 2012), IV научной медицинской конференции студентов и молодых ученых с международным участием на английском языке (Ставрополь, 2012), 186-м Фальк-симпозиуме (Майнц, 2012), 18-й Российской гастроэнтерологической неделе (Москва, 2012), XVIII Ежегодном конгрессе «Гепатология сегодня» (Москва, 2013), V научной

медицинской конференции студентов и молодых ученых с международным участием на английском языке, посвященной 75-летию Ставропольского государственного медицинского университета (Ставрополь, 2013), IX Межрегиональной научно-практической конференции Российского научного медицинского общества терапевтов (Пятигорск, 2013), XIII международном Евроазиатском конгрессе хирургов и гастроэнтерологов (Баку, 2013), 191-м Фальк-симпозиуме (Лондон, 2013), 19-й Российской гастроэнтерологической неделе (Москва, 2013), на совместном заседании кафедр госпитальной терапии и медицинской реабилитации Ставропольского государственного медицинского университета (Ставрополь, 2013).

ГЛАВА 1. СЕЛЕКТИНЫ В НОРМЕ И ПРИ ЗАБОЛЕВАНИЯХ ПЕЧЕНИ

(ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1. Роль молекул адгезии в воспалении и иммунном ответе

Воспаление - реакция организма на внедрение чужеродного антигена или физическое повреждение тканей, обеспечивающая привлечение лейкоцитов и растворимых компонентов плазмы в очаги инфекции или повреждения ткани [16].

Основной задачей иммунной системы является разрушение чужеродных антигенов независимо от их патогенности, для чего ее компоненты проникают к месту локализации патогена, преодолевая барьер из эндотелиальных клеток сосудов. Гуморальные факторы переносятся током крови и попадают в ткани вследствие повышенной проницаемости и усиленного кровенаполнения сосудов микроциркуляторного русла в очаге воспаления. Трансэндотелиальная миграция иммунных клеток из крови в субэндотелиальное пространство к месту воспалительного очага обусловлена молекулами адгезии, которые экспрессируются на поверхности лейкоцитов, тромбоцитов и эндотелиоцитов [14, 131, 201].

Миграция лейкоцитов к месту воспаления состоит из нескольких этапов, протекающих с участием адгезивных молекул [14, 243]. На первом этапе движение лейкоцитов вдоль сосудистой стенки замедляется и возникает роллинг (перекатывание) их по поверхности активированных эндотелиоцитов, обусловленный влиянием селектинов, что пролонгирует контакт с сосудистой стенкой и увеличивает взаимодействие с хемокинами [14, 139, 140, 142, 239]. Однако роллинг не обеспечивает прочной адгезии лейкоцитов к эндотелию, но приводит к последующей активации интегринов. В отсутствие воспаления роллинг не наблюдается, а сигналом для его начала служит действие провоспалительных агентов (гистамин, тромбин, свободные радикалы), переводящих эндотелий в активированное состояние [5].

Второй этап включает активацию остановленных лейкоцитов и переход их в состояние повышенной адгезивности, приводящее к изменению формы клеток [5, 239] и образованию прочных связей с эндотелиоцитами, что возможно благодаря экспрессии интегринов и молекул суперсемейства иммуноглобулинов на поверхности клеток [14, 140, 142].

Третий этап - проникновение лейкоцитов через пространства между эндотелиоцитами или сквозь них (трансэндотелиальная миграция) в субэндотелиальное пространство [14, 139]. Плотная адгезия лейкоцитов к эндотелию под влиянием 1САМ-1 и УСАМ-1 вызывает увеличение внутриклеточного кальция и активацию различных сигнальных молекул, что облегчает миграцию путем сокращения эндотелиоцитов и ослабевания связей между ними [238]. В этом процессе активное участие принимает молекула адгезии тромбоцитов и эндотелиоцитов (РЕСАМ-1), влияющая на уровень внутриклеточного кальция и изменяющая цитоскелет клетки [5]. Мигрируя, клетки выделяют ферменты, лизирующие базальную мембрану эндотелия, что позволяет им проникнуть в ткани и достигнуть очага воспаления [51].

Эти стадии связаны с различными адгезивными молекулами, последовательность и время экспрессии которых на эндотелии и лейкоцитах различно. Во время воспаления хемокины и цитокины усиливают презентацию на поверхности эндотелиоцитов и тромбоцитов молекул адгезии, которые взаимодействуют с лейкоцитарными рецепторами и усиливают миграцию лейкоцитов из кровотока в места воспаления [16, 51].

Молекулы адгезии - это связанные с плазматической мембраной гликопротеины, экспрессируемые на многих клетках и обеспечивающие лейкоцитарно-тромбоцитарно-эндотелиальные взаимодействия. Играя роль рецепторов, они участвуют в развитии иммунного ответа посредством усиления межклеточных взаимодействий и адгезии клеток к другим клеткам или белкам внеклеточного матрикса [14, 23, 233, 242].

Молекулы адгезии передают стимулирующий сигнал в двух направлениях: 1) внутрь клетки, благодаря чему наступает пролиферация

клетки и секреция цитокинов; 2) сигнал может передаваться изнутри клетки, что вызывает конформационные изменения адгезивного рецептора и повышает его сродство к лиганду [3].

Все медиаторы межклеточных взаимодействий можно разделить на несколько семейств структурно-родственных молекул: селектины, интегрины, суперсемейство иммуноглобулинов [14, 20, 135].

Будучи присоединенными к цитоскелету, адгезивные молекулы пронизывают мембрану клетки, и с их помощью клетки подтягиваются к другим клетками или к внеклеточному матриксу. Во многих случаях отдельная молекула благодаря разным участкам связывания способна взаимодействовать с несколькими лигандами. Хотя связывание молекул адгезии со своими лигандами обычно происходит с низким сродством, авидность взаимодействия может быть высокой за счет кластерного расположения молекул на поверхности клеток. Адгезия клеток может повышаться в результате увеличения числа молекул адгезии на клеточной мембране, обусловленного большими запасами медиаторов во внутриклеточных везикулах, либо связанного с дополнительным индуцированным синтезом и переносом их на поверхность [16].

В физиологических условиях эндотелиальная клетка практически не экспрессирует молекулы адгезии. Механизмы индукции адгезивных молекул у разных популяций лимфоцитов и клеток эндотелия на различных участках сосудистого русла тонко различаются, что обеспечивает точную настройку миграции лейкоцитов сквозь эндотелий при воспалении и последовательное прибытие в очаг различных клеточных популяций. Растворимые молекулы адгезии лишены цитоплазматической и трансмембранной части и позитивно коррелируют с их экспрессией на клетках [89].

Таким образом, молекулы адгезии играют важную роль в функционировании иммунной системы. Оказывая влияние на процессы воспаления и репарации, они обеспечивают постоянство внутренней среды и

устойчивость физиологических функций организма. Отклонения медиаторов межклеточных взаимодействий на фоне любой патологии организма с неизбежностью приводят к усугублению ее течения.

1.2. Показатели селектинов при заболеваниях печени

1.2.1. Структура и роль селектинов в реализации воспаления и иммунного ответа

Селектины относятся к кальцийзависимым трансмембранным гликопротеинам, расположенным на поверхности лейкоцитов, тромбоцитов и эндотелиоцитов. Они обеспечивают селективный хоминг клетки через стенку сосуда и стимулируют воспалительный процесс путем облегчения проникновения лейкоцитов в очаг воспаления [20, 86, 140, 171, 242].