Регуляция роста, развития и клубнеобразования в культуре тканей стахиса (Stachys sieboldii Mig. ) при микроклональном размножении тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.12, кандидат биологических наук Попова, Галина Альбертовна

• Попова, Галина Альбертовна
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Попова, Галина Альбертовна

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Стахис - овощное и лекарственное растение

1.1.1 Биологическая характеристика стахиса

1.1.2. Химический состав и лекарственное значение видов рода стахис (Stachys L.)

1.1.3. Технология производства стахиса

1.1.4. Болезни и вредители стахиса, меры борьбы с ними

1.1.5. Уборка, послеуборочная доработка и закладка клубней стахиса на хранение

1.2. Регуляция клубнеобразования

1.2.1 Влияние фотопериодических и температурных условий на процесс клубнеобразования

1.2.2. Гормональная регуляция клубнеобразования

1.2.3. Олигосахариды растительной клетки - регуляторы роста, развития, размножения растений

1.2.4. Роль углеводной регуляции

1.2.5. Взаимодействие систем контроля клубнеобразования 1.2.6 Влияние ретардантов на процесс клубнеобразования

1.3. Клональное микроразмножение растений

2. ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Объект

2.2. Подготовка лабораторного материала и питательных сред

2.3. Выделение эксплантов и условия культивирования in vitro

2.4. Условия культивирования in vivo

2.5. Учет результатов

3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 51 Разработка методов микроклонального размножения стахиса

3.1. Эксплантироваиие исходной ткани растения

3.1.1. Поиск эффективных способов стерилизации 51 3.1.2 Влияние происхождения экспланта и его размера на формирование органогенных структур

3.2. Микроразмножение стахиса адвентивным побегообразованием

3.2.1 Влияние состава питательных сред на адвентивное 55 побегообразование

3.2.2. Рост и укоренение микропобегов стахиса

3.3. Индукция каллусогенеза

3.4. Микроразмножение стахиса индукцией роста пазушных почек 64 3.4.1. Влияние консистенции и минерального состава среды на рост пазушных побегов стахиса in vitro

3.4.2 Влияние различных концентраций сахарозы на рост пазушных побегов

3.5. Адаптация асептических растений стахиса к условиям in vivo

3.6. Микроразмножение стахиса клубнями 73 3.6.1. Влияние различных концентраций сахарозы на процесс

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Регуляция роста, развития и клубнеобразования в культуре тканей стахиса (Stachys sieboldii Mig. ) при микроклональном размножении»

Актуальность темы. Привлечение интродуцируемых в среднюю полосу России культур для производства диетических и лекарственных средств является актуальной проблемой сельского хозяйства.

К числу наиболее интересных в этом плане растений относится стахис клубненосный (81аскуз ягеЬоШи С одной стороны, стахис древнейшая овощная культура, высокие вкусовые и диетические достоинства которой обеспечили ей распространение в странах Европы и Америки, с другой стороны, стахис веками успешно применяется в китайской и тибетской народной медицине.

Эта культура, способная культивироваться в средней полосе России, богата углеводами, белками, витамином С, а также рядом хмакро- и микроэлементов.

В большой степени лечебное действие стахиса обусловлено наличием в его составе стахиозы, обладающей гипогликемической активностью. Во Всероссийском институте лекарственных растений создана настойка, получаемая из клубней стахиса, под действием которой на 40 - 60% усиливается процесс утилизации глюкозы в крови. Оказалось, что настойка обладает также ярко выраженным г ипотензивным действием, снижает свертываемость крови на 70%, уменьшает число тромбоцитов на 14-44%, снижает количество триглицеридов на 30%, уменьшает уровень холестерина.

Извлечения из стахиса ингибируют метастатический процесс, что обусловлено способностью этого растения накапливать большое количество селена, содержание которого в биологически доступных формах может достигать 25 мг/кг сырого веса (Голубкина, Соколов, 1997). По сравнению с используемым за рубежом селен-обогащенным 6 чесноком клубни стахиса аккумулируют в 1,4 раза больше селена. Показательно, что в отличие от чеснока селен в стахисе не является летучим и хорошо адсорбируется тканями организма человека. По последнему показателю стахис имеет явное преимущество перед селен-обогощешшми пекарскими дрожжами, используемыми для ликвидации селенового дефицита. Нормальный уровень селена в крови человека -115 - 120 мкг/л, а значительно дефицитный - менее 50 мкг/л. Снижение уровня селена приводит к серьезным нарушениям иммунной системы, поэтому представляется целесообразным культивировать, обогащать селеном и использовать в пищу стахис.

Несмотря на высокую ценность клубней стахиса, в нашей стране его пока не выращивают в производственных масштабах. Это объясняется тем, что культивирование стахиса, например, в Нечерноземной зоне сопряжено с рядом трудностей, обусловленных особенностями этой культуры. Стахис имеет длинный вегетационный период, уборка урожая производится до середины октября, когда в нашей зоне уже бывают заморозки. Более ранняя уборка влечет значительные потери урожая. В условиях Нечерноземья стахис цветет, но всхожих семян не формирует, таким образом, размножать его можно только вегетативно. Как известно, вегетативное размножение приводит к накоплению в посадочном материале различных фитопатогенов, что вызывает снижение урожая и качества продукции. Стахис способен не только передавать весь комплекс уже имеющихся патогенов, но и накапливать их в ряде последующих поколений, что ведет к частичному или полному вырождению сорта.

Эти проблемы можно преодолеть с помощью методов культуры тканей, в частности, клонального микроразмножения, позволяющего размножать оздоровленный растительный материал значительно эффективнее, чем традиционными методами. Полученные таким 7 методом растения могут быть использованы как посадочный материал, сокращающий сроки вегетации. Более раннее формирование клубней можно индуцировать культивированием посадочного материала при определенных условиях in vitro. Культура изолированных клеток и тканей открывает широкие возможности для селекционеров: клеточная селекция с использованием каллусной ткани, соматическая гибридизация, применение методов генной инженерии.

Культура изолированных растительных тканей и клеток является удобной моделью для изучения путей вторичного метаболизма у растений. В последние годы большой интерес привлекает получение ценных природных соединений методом культуры клеток и тканей растений. Это обусловлено, прежде всего, перспективностью промышленного использования культивируемых клеток растений для получения соединений специализированного обмена растений. Особую актуальность этот вопрос приобретает в связи с возрастающей остротой экологических проблем. Только в медицине 25% всех применяемых лекарств содержат соединения растительного происхождения. Если прибавить к этому потребности пищевой промышленности, парфюмерии, сельского хозяйства, то становится очевидной необходимость замены плантационного, а тем более, дикорастущего сырья на гарантированно получаемую промышленным способом биомассу культивируемых клеток, содержащую необходимые соединения в достаточном количестве.

Каллусные и суспензионные культуры стахиса, по-видимому, могут стать перспективным источником ценных лекарственных веществ. Однако основные элементы технолог™ получения таких культур пока не разработаны, поэтому разработка методов культуры тканей стахиса является актуальной проблемой биотехнологии растений. 8

Цель и задачи исследования. Целью данной работы было получение культуры тканей стахиса, изучение регуляции роста, развития и клубнеобразования в этой культуре и разработка метода микроклонального размножения этого растения.

В этой связи были поставлены следующие задачи:

- оптимизировать условия введения стахиса в культуру in vitro, отобрать наиболее перспективные экспланты;

- изучить влияние фитогормонов, минеральных и углеводных компонентов среды на рост и развитие растений in vitro;

- индуцировать столоно- и клубнеобразование, выяснить некоторые детали механизма этих процессов в культуре тканей стахиса.

Научная новизна работы. Проведена разработка методов массового микроклонального размножения стахиса. Изучались механизмы столоно- и клубнеобразования в культуре тканей стахиса и влияние на эти процессы различных углеводов. Впервые проанализирован моно- и олигосахаридный состав столонов и клубней стахиса, полученных in vitro.

Практическая значимость. Результаты исследований могут быть использованы для разработки высокоэффективной технологии получения качественного посадочного материала стахиса и быстрого размножения его ценных клонов. Результаты и теоретические обобщения, сделанные в работе, могут быть использованы в курсах лекций для студентов биологических факультетов университетов и вузов.

Апробация работы. Результаты исследований докладывались на семинарах кафедры ботаники и физиологии растений; на Научно-практической конференции РУДН (1997); на втором и третьем 9

Международных симпозиумах «Новые нетрадиционные растения и перспективы их практического использования» (Пущино, 1997; 1999); на Всероссийских научно-производственных конференциях «Интродукция нетрадиционных и редких сельскохозяйственных растений» (Пенза, 1998; 2000); на научной конференции студенческого научного общества аграрного факультета РУДН (Москва, 2000).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 6 работ.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из обзора литературы, описания объекта и методов исследований, изложения полученных результатов и их обсуждения, выводов и списка литературы.

Диссертационная работа изложена на 116 страницах машинописного текста, содержит 18 таблиц, 19 рисунков. Список литературы включает 142 наименования, из которых 72 на иностранном языке.

10

Заключение диссертации по теме «Физиология и биохимия растений», Попова, Галина Альбертовна

ВЫВОДЫ

Результаты проведенных исследований позволяют сделать следующие выводы:

1. Разработаны методы введения и поддержания стахиса в культуре in vitro.

2. На жидкой питательной среде с 3% сахарозы и пониженной концентрацией солей удалось добиться коэффициента размножения -1:5-1:8 при микроклональном размножении побегов.

3. В темновой культуре высокие концентрации сахарозы в питательной среде (5 или 8% - в агаризованной, и 3, 5 или 8% - в жидкой среде) стимулируют образование столонов и клубней, а также синтез стахиозы. Другие углеводы (фруктоза, глюкоза и галактоза) также эффективны как индукторы столоно- и клубнеобразования стахиса.

4. Состав Сахаров в клубнях, выращенных in vitro и in vivo, совпадает.

5. Рассада из микрорастений или миниклубней стахиса хорошо приживалась в поле и сформировала урожай быстрее, чем растения, выращенные из обычных клубней.

6. Таким образом, растения и клубни стахиса, полученные in vitro согласно предложенной технологии, могут использоваться как посадочный материал, повышающий эффективность производства этой культуры.

100

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Попова, Галина Альбертовна, 2000 год

1. Ансиок П.И. Микроудобрения. Л.: Колос, 1978. 272 с.

2. Блинова К.Ф., Яковлева Т.П. Ботанико-фармакогностический словарь. М.: Высшая школа, 1990. С. 71.

3. Борзенкова P.A., Собянина Е.А., Поздеева A.A., Яшков М.Ю. Действие фитогормонов на крахмалсинтезирующую способность в процессе роста клубней картофеля // Физиология растений. 1998. Т. 45. № 4. С. 557 566.

4. Бунин М.С. Интродукция новой овощной культуры стахиса {Stachys sieboldii Mig.) в Нечерноземье: Автореф. дис. . канд. с.-х. наук. 1982. 17 с.

5. Бутенко Р.Г. Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза растений. М.: Наука, 1964. 272 с.

6. Бутенко Р.Г. Культура тканей и клеток растений. М.: Знание, 1971. 46 с.

7. Бутенко Р.Г. Использование культуры тканей растений в сельскохозяйственной науке и практике // Сельскохозяйственная биология. 1979. Т. 14. № 3. С. 306 -314.

8. Бутенко Р.Г. Клеточные технологии для получения экономически важных веществ растительного происхождения // Культура клеток растений и биотехнология. М.: Наука, 1986. С. 3-20.

9. Бутенко Р.Г. Некоторые физиологические проблемы при культивировании in vitro картофеля // Регуляция роста и развития картофеля. М.: Наука, 1990. С. 88-98.

10. Гинс В.К., Голубкина H.A., Кононков П.Ф. Накопление селена стахисом // Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования: Тез. докл. Первого международного симпозиума. Пущине, 1995. С. 749 -750.

11. Глухов А.Г. Вкусный стахис // Сельское хозяйство Белоруссии. 1986. № 8. С. 43.

12. Головко Т.К., Маркаров A.M., Табаленкова Г.Н. Влияние фотопериода на морфофункциональные характеристики картофеля //Научные доклады. Сыктывкар, 1992. Вып. 282. 21 с.102

13. Еородецкий В.К., Михайлов В.И. Современные методы в биохимии. М.: Медицина, 1977. 391 с.

14. Деркач А.И., Комиссаренко Н.Ф., Пакалн Д.А. Иридоиды некоторых видов Stachys L. // Раст. ресурсы. 1989. Т. 23. Вып. 1. С. 92 95.

15. Досон Р., Эллиот Д., Эллиот У., Джонс К. Справочник биохимика: Пер. с англ. М.: Мир, 1991. 544 с.

16. Доспехов Б.А. Методика полевого опыта (с основами статистической обработки результатов исследований). М.: Агропромиздат, 1989. 351 с.

17. Звездина Т.Н. Оздоровление и микроклональное размножение стахиса // Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования: Тез. докл. Второго международного симпозиума. Пущино, 1997. С. 305 -306.

18. Катаева Н.В., Аветисов В.А. Клональное размножение растений в культуре ткани // Культура клеток растений. М.: Наука, 1981. С. 137- 149.

19. Катаева Н.В., Бутенко Р.Г. Клональное микроразмножение растений. М.: Наука, 1983. 96 с.

20. Кононков П.Ф., Бунин М.С. Биология развития и клоновая селекция стахиса в условиях Нечерноземья // Тр. по селекции овощных культур. М., 1981. Вып. 14. С. 100 -106.

21. Кононков П.Ф. Стахис эликсир здоровья // Советская Россия. 1988. 23 ноября.

22. Кононков П.Ф. Технология выращивания и использования стахиса. М.: Агропромиздат, 1989. 17 с.

23. Кононков П.Ф. Заморская диковина // Животновод. 1992. №8-9. С. 25 -27.

24. Кононков П.Ф., Бунин М.С., Коненкова С.Н. Корне- и клубнеплодные растения // Новые овощные растения. М.: Нива России, 1992. С. 50 57.

25. Кононков П.Ф., Гужов Ю.Л. Приусадебное овощеводство. М.: Колос, 1992. С. 165 -172.

26. Кононков П.Ф., Гинс В.К., Медведев В.В. О накоплении химических элементов в листьях и семенах периллы красной и клубеньках стахиса // Прикладная биохимия и микробиология. 1994. Т. 30. Вып. 4-5. С. 682 685.

27. Кононков П.Ф., Васякин И.Н. Стахис ценное овощное и лекарственное растение // Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования: Тез. докл. Первого международного симпозиума. Пущино, 1995. С. 746 -748.104

28. Кононков П.Ф. Обогащение селеном клубеньков стахиса Stachys sieboldii Mig. //Агрохимия. 1998. №8. С. 65 67.

29. Коровкин O.A. Морфогенез вегетативных органов Stachys sieboldii Mig. при выращивании из клубней // Известия Тимирязевской с.-х. Академии. 1985. Вып. 4. С. 60 65.

30. Костюченко О.И. Химический состав и фармакологические свойства видов Stachys L. // Раст. ресурсы. 1983. Т. 19. Вып. 3. С. 407-413.

31. Кротова С.А. Интродукция новой овощной культуры стахиса в Северном Казахстане // Вопросы селекции и интродукции растений Центрального Казахстана. Караганда, 1988. С. 49-52.

32. Маслова С.П. Физиолого-морфологические особенности Stachys sieboldii Mig. // Актуальные проблемы биологии: Тез. докл. IV Молодежной научной конференции Института биологии. Сыктывкар, 1996. С. 83 84.

33. Маслова С.П. Морфофизиология Stachys sieboldii Mig. В условиях средней тайги европейского северо востока // Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования: Тез. докл. III Международного симпозиума. Москва - Пущино, 1999. С. 336 - 339.

34. Маслова С.П. Структурно-функциональная организация подземных побегов клубнеобразующих растений: Автореф. дис. . канд. биол. наук. 2000. 24 с.105

35. Машковский М.Д. Лекарственные средства: В 2-х томах. М.: Медицина, 1987. ТА. С. 529.

36. Мелик-Саркисов О.С., Фадеева И.Н. Использование эффекта клубнеобразования в биотехнологии картофелеводства // Вестник с.-х. науки. М.: Агропромиздат, 1989. № 9. С. 86 92.

37. Мещерякова Н.И., Бажанов В.Ф. Гормональная регуляция побегообразования в изолированной культуре апикальных меристем розы эфиромасличной // Регуляторы роста и развития растений. М.: Наука, 1981. С. 166- 167.

38. Миляева Э.Л., Никифорова В.Ф., Сидоркина К.В. Олигосахарины в регуляции цветения растений // Физиология растений наука III тысячелетия: Тез. докл. IV съезда общества физиологов растений России. Москва, 1999. С. 636.

39. Михайлова Н.В., Слепян Л.И. Питательная среда для выращивания культуры тканей Polyscias filicifolia Bailey // Раст. ресурсы. 1984. Вып. 2. С. 83 84.

40. Мокроносов А.Т. Клубнеобразование и донорно-акцепторные связи у картофеля // Регуляция роста и развития картофеля. М.: Наука, 1990. С. 6-12,

41. Муромцев Г.С., Бутенко Р.Г., Тихоненко Т.И., Прокофьев М.И. Основы сельскохозяйственной биотехнологии. М.: Агропромиздат, 1990. С. 219-228.

42. Мухин В.Д. Справочник овощевода любителя. М.: ИПК Московская правда, 1995. С. 49 -50.

43. Пакалн Д.А., Комиссаренко Н.Ф., Шеремет И.П., Деркач А.И. Предварительная хемотаксонамическая оценка кавказских видов рода чистец // Полезные растения106природной флоры и использование их в народном хозяйстве. Киев: Наукова Думка, 1980. С. 82 85.

44. Пивоваров В.Ф., Кононков П.Ф., Никулыпин В.П. Стахис -овощ и лекарство // Овощи новинки на вашем столе. М.: Союз, 1995. С. 38 -42.

45. Пузина Т.И., Киррилова И.Г. Градиенты содержания свободных фитогормонов в стебле картофеля в связи с клубнеобразованием // Физиология растений. 1996. Т. 43. №6. С. 915-919.

46. Пузина Т.И. Гормональная регуляция как основа целостности и продуктивности растительного организма: Автореф. дис. . докт. биол. наук. 1999. 36 с.

47. Разумов В.И. Влияние переменной продолжительности дня на клубнеобразование // Тр. по прикл. ботанике, генетике и селекции. М., 1931а. Вып. 27. № 5. С. 3 46.

48. Разумов В.И. О локализации фотопериодического раздражения // Тр. по прикл. ботанике, генетике и селекции. М., 19316. Вып. 27. № 5. С. 249 280.

49. Рекославская Н.И., Жукова В.М., Чеканова Е.Г., Саляев Р.К., Мапелли С.П., Гаманец J1.B. Ауксиновый статус трансформированных растений Solanum в связи с устойчивостью к 2,4-Д и продуктивностью // Физиология растений. 1999. Т. 46. №5. С. 699-710.

50. Родов B.C., Давыдова O.A. Размножение растений мяты методом культуры меристем // Тр. ВНИИ эфиромасличных культур. Симферополь, 1987. Т. 18. С. 78-83.

51. Табаленкова Г.Н., Маркаров A.M., Головко Т.К. Регуляция клубнеобразования Solanum andigenum cv. Zhukovskii // Физиология растений. 1998. Т. 45. №1. С. 33 36.107

52. Трумпе Т.Е. Стахис эффективное средство против сахарного диабета // Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования: Тез. докл. Первого международного симпозиума. Пущино, 1995. С. 754 -756.

53. Уэринг П.Ф. Физиология клубнеобразования и роль фитогормонов // Гормональная регуляция онтогенеза растений. М.: Наука, 1984. С.55 70.

54. Хадеева Н.В. Влияние фитогормонов на морфогенетические процессы в культуре ткани стахиса // Биология клеток растений in vitro, биотехнология и сохранение генофонда: Тез. докл. VII Международной конференции. Москва, 1997. С. 177 178.

55. Хадеева Н.В., Еордон Н.Ю. Некоторые закономерности столонообразования при культивировании стахиса in vitro II Физиология растений. 1998. Т. 45. №2. С. 301-307.

56. Харипарай Р.П., Долгих Ю.И., Гужов Ю.Л. Выбор оптимальных сред для массовой регенерации растений сахарного тростника из каллусной культуры // Физиология растений. 1996. Т. 43. № 1. С. 111 115.

57. Харченко H.A., Лобанова З.И. Микроэлементы, поступление, транспорт и физиологические функции в растениях. Киев: Наукова Думка, 1987. С. 162- 175.

58. Холодова В.П. Рост и метаболизм углеводов в культуре ткани растений // Культура клеток растений. М.: Наука, 1981. С. 17-36.

59. Чайлахян М.Х. Целостность организма в растительном мире // Физиология растений. 1980. Т. 27. №5. С. 917-941.108

60. Чайлахян М.Х. Фотопериодическая и гормональная регуляция клубнеобразования у растений. М.: Наука, 1984. 67 с.

61. ШаминаЗ.Б. Развитие биотехнологии в СССР клеточная инженерия и культура тканей растений // Гос. Ком. СССР по науке и технике. М., 1988. 11 с.

62. Шевелуха B.C., Калашникова Е.А., Дегтярев С.В., Кочиева Е.З., Прокофьев М.И., Новиков Н.Н., Ковалев В.М., Калашников Д.В. Сельскохозяйственная биотехнология. М.: Высшая школа, 1998. 416 с.

63. Эльберсгейм П., Дарвил А.Г. Олигосахарины // В мире науки. 1985. 11 ноября. С. 16-24.

64. Юсуфова М.А. Сравнительное изучение процессов регенерации у растительных объектов разной степени сложности: Автореф. дис. . канд. биол. наук. Вильнюс: Институт ботаники АН ЛитССР, 1986. 24 с.

65. Banfalvi Z., Molnar A., Kostyal Z., Lakatos L., Molnar G. Comparative studies on potato tuber development using an in vitro tuber induction system // Acta boil. hung. 1997. Vol. 48. №1. P. 77-86.

66. Chandra R., Chaudhary D.R., Upadhya M.D. A simplified low cost medium for potato micropropagation // J. Indian Potato. 1993. Vol. 20. №3-4. P. 270-272.109

67. Chapman H.W. Tuberisation in potato plant // Physiol. Plant. 1958. Vol. 11. P. 215 -224.

68. Chu C.Y., Knight S.L., Smith M.A.L. Effect of liquid culture on the growth and development of miniature rose (Rosa chinensis Jacq. Minima) // Plant Cell Tissue Organ Cult. 1993. Vol.32. №3. P. 329-334.

69. Dobranszki J., Mandi M. Induction of in vitro tuberization by shot day period and dark treatment of potato shoots grown on hormon-free medium // Acta boil. Hung. 1993. Vol. 44. № 4. P. 411-420.

70. El-Antably H.M.M., Wareing P.F., Hillman Y. Some physiological responses to D,L-Abscisin (dormin) // Planta. 1967. Vol. 73. P. 74-90.

71. Ewing E.E., Struik P.C. Tuber formation in potato: induction, initiation and growth // Horticult Rev. 1992. Vol. 14. P. 189 -198.

72. Ewing E.E. The role of hormones in potato (Solanum tuberosum L.J tuberisation // Plant Hormones, Physiology, Biocemistry and Molecular Biology / Ed. Davies P.G. Dordrecht: Kluwer Acad. Publ. 1995. P. 698 724.

73. Firman D.M. Gibberellic acid as a media additive for in vitro propagation of potato (Solanum tuberosum L.) // J. Agr. Sei. 1984. Vol. 103. № 3. P. 703 704.

74. Fry S.C., Aldington S., Hetherington P.R., Aitken J. Oligosaccharides as signals and substrates in the plant cell wall // Plant Physiol. 1993. Vol. 103. № 1. P. 1-5.

75. Garner W.W., Allard H.A. Effect of the relative length of day and night and other factors of the enironment on growth110and reproduction of plants // Agr. Res. 1920. Vol. 18. P. 553 -606.

76. Garner W.W., Allard H.A. Further studies in photoperiodism, the response of the plant to relative length of day and night // Agr. Res. 1923. Vol.23. №11. P. 871 920.

77. Gregory L.E. Some factors for tuberisation in the potato plant //Amer. J. Bot. 1956. Vol. 43. № 4. P. 281 288.

78. Grewal S., Koul S., Sachdeva U., Atal C.K. Regeneration of plants of Dioscorea deltoidea Wall, by apical meristem cultures // Ind. J. Exp. Biol. 1977. Vol. 15. №3. P. 201 -203.

79. Gunasena H.P.M., Harris P.M. The effect of CCC and nitrogen on yield of the second early potato variety Craig's Royal // J. Agr. Sci. 1969. Vol. 73. № 2. P. 245 259.

80. Gunasena H.P.M., Harris P.M. The effect of CCC, nitrogen and potassium on the growth and yield of the two varieties of potatoes // J. Agr. Sci. 1971. Vol.76. №1. P. 33 52.

81. Hamner K.C., Long E.M. Localization of photoperiodic perception in Helianthus tuberosus II Bot. Gaz. 1939. Vol. 101. P. 68 72.

82. Hansen S.E. Experiments with planting distances tuber sizes and GA treatment in potatoes // Tidsskr. Planteavl. 1973. Vol.73. №1. P. 61-70.

83. Harmey M.A., Crowley M.C., Clinch P.E.M. The effect of growth regulators on tuberization of cultured stem pieces of Solanum tuberosum II Eur. Potato J. 1966. Vol. 9. P. 146- 151.

84. HuC.Y., Wang P.J. In. Evans D. A. et al. (Eds.) Handbook of plant cell culture. Vol. 1. New York: Macmillan, 1983. P. 177-227.1.l

85. Hussey G. Stasey N. J. In vitro propagation of potato {Solanum tuberosum L.) // Ann. Bot. 1981. Vol.48. №6. P. 787 796.

86. Hussey G., Stasey N. J. Factors affecting the formation of in vitro tubers of potato (Solanum tuberosum L.) // Ann. Bot. 1984. Vol. 53. № 4. P. 565 578.

87. Jackson S.D. Multiple signaling pathways control tuber induction in potato // Plant Physiol. 1999. Vol.119. № 1. P. 1 -8.

88. Koda Y., Okazawa Y. Influences of environmental hormonal and nutritional factors on potato tuberisation in vitro // Japan. J. Crop Sei. 1983. Vol.52. №4. P. 582 591.

89. Koda Y., Takahashi K., Kikuta Y. Involvement of jasmonic acid and related compounds in the tuberization of Jerusalem artichoke plants (Helianthus tuberosus L.) // Japan. J. Crop Sc. 1994. Vol.63. №2. P. 333-338.

90. Kostrika P., Polreichova B., Domkarova J. Vyuziti tuberizace in vitro k uchovavani genetickych zdroju bramboru // Sb. UVTIZ. Genet. a slechteni. 1985. Vol.21. №4. P. 269 278.

91. Kudou R., Fujime Y., Amimoto K. Effects of plant growth regulators and sampling positions on organ formation of garlic // Techn. Bull. Fac. Agr. Kagawa Univ. 1995. Vol. 47. № 1. P. 15 -22.

92. Kumar D., Wareing P.F. Factors controlling stolon development in the potato plant // New Phytol. 1972. Vol. 71. P. 639-648.

93. Kumar D., Wareing P. F. Studies on tuberisation in Solanum andigena. L. Evidence for the existence and movement of aspecific tuberisation stimulus // New Phytol. 1973. Vol. 72. P. 283 287.

94. Lagarde J. Influence of temperature on tuberization of not-dormant japanese artichoke (Stachys sieboldii) // II Physiol. Veget. 1971. Vol.9. №3. P. 40 43.

95. Leclerc Y., Donnelly D.J., Seabrook J.E.A. Microtuberization of layered shoots and nodal cuttings of potato: the influence of growth regulators and incubation periods // Plant Cell Tissue Organ Cult. 1994. Vol.37. №2. P. 113-120.

96. Lundergan C.A., Janick J. Regulation of apple shoot proliferation and growth in vitro II Hort. Res. 1980. Vol. 20. № 1. P. 19-24.

97. Mares D.J., MarschnerH., Krauss A. Effect of gibberellic acid and carbohydrate metabolism of developing tubers of potato 0Solanum tuberosum) H Phisiol. Plant. 1981. Vol.52. P. 267 -274.

98. Marga F., Vebret L., Morvan H. Agar fractions could protect apple shoots cultured in liquid media against hyperhydricity // Plant Cell Tissue Organ Cult. 1997. Vol. 49. № 1. P. 1 -5.

99. Marinus J., Box P.O. Description of methods and experience of in vitro multiplication of potatoes in the Netherlands // Neth. J. Agr. Sci. 1985. Vol.33. №3. P. 322-324.

100. Matsuki T., Tazaki H., Fujimori T., Hogetsu T. The influences of jasmonic acid methyl ester on microtubules in potato cells113and formation of potato tubers // Biosc. Biotechnol. Biochem. 1992. Vol.56. №8. P. 1329- 1330.

101. Mauk C. S., Langille A. R. Physiology of tuberization in Solatium tuberosum L. // Plant Physiol. 1978. Vol.62. № 3. P. 438 442.

102. Melis R.J.M., van Staden J. Tuberization and hormones // Z. Pflanzenphysiol. 1984. Vol.113. P. 271 -283.

103. Menzel C.M. Tuberization in potato at high temperatures: interaction between temperature and irradiance // Ann. Bot. 1985. Vol. 55. P. 35 -39.

104. Murashige T., Skoog F. A Revised Medium for Rapid Growth and Bioassays with Tobacco Tissue Culture // Physiol. Plant. 1962. Vol. 15. №4. P. 473-497.

105. Murashige T. Plant tissue culture and its bio-technological application // Springer-Verl. 1977. P. 392-403.

106. Obata-Sasamoto H., Suzuki H. Activities of enzymes relating to starch synthesis and endogenous levels of growth regulators in potato stolon tips during tuberization // Physiol. Plant. 1979. Vol. 45. P. 320 324.

107. Okazawa V., Chapman H.W. Regulation of tuber formation in the potato plant // Physiol., Plant, 1962. Vol, 11 P. 413 -419.

108. Okazawa Y. Phyziological studies on the tuberization of potato plants // J. Fac. Agr. Hokkaido Univ. 1967. Vol. 55. P. 267-275.

109. Palmer C.E., Smith O.E. Effect of kinetin on tuber formation on isolated stolons of Solarium tuberosum L. cultured in vitro // Plant Cell Physiol. 1970. Vol.11. №2. P. 303 311.

110. Palmer C.E., Barker W.G. Influence of ethylene and kinetin on tuberization and enzyme activity in Solanum tuberosum L.114stolons cultured in vitro /7 Ann. Bot. 1973. Vol. 37. P. 85 -93.

111. Park W.D. Molecular approaches to tuberization in potato // The molecular and cellular biology of the potato. Melksham, UK.: C.A.B. International, Redwood Press Ltd., 1990. P. 43 -56.

112. Pett B., Thieme R. Untersuchungen zur depothaltung eines kartoffelsortimentes in vitro // Potato Res. 1981. Vol. 24. № 1. P. 105 -110.

113. Philip R. White. A Handbook of plant tissue culture. 1943. 246 p.

114. Phillips I.D.J. Apical dominance. Ann. Rev. // Plant Physiol. 1975. Vol.26. P. 341 -367.

115. Qualset C.O. Plant biotechnology, plant breeding, population biologi and genetic resources perspectives from a university scientist // NABC Rep./ Nat. Agr. Biotechnol. Council., Jthaca (N.J.). 1991. №3. P. 81-90.

116. Ranalli P., Bizarri M., Borghi L., Mari M. Genotypic influence on in vitro induction, dormacy length, advancing age and agronomical performance of potato microtubers {Solanum tuberosum L.) // Ann. appl. Boil. 1994. Vol. 125. № 1. P. 161 -172.

117. Rech E.L., Pires M.J.P. Tissue culture propagation of mentha spp. by the use of axillary buds // Plant Cell Reports. 1986. Vol. 5. № 1. P. 17-18.

118. Rosell G., De Bertoldi F.G., Tizio R. In vitro mass tuberisation as a contribution to potato micropropagation // Potato Res. 1987. Vol. 30. № 1. P. Ill 116.115

119. Roy R.D., Machado V.S., Alan S.M.M., Ali A. Greenhouse production of potato (Solanum tuberosum L. cv. Desiree) seed tubers using in vitro plantlets and rooted cuttings in large propagation beds // Potato Res. 1995. Vol. 38. № 1. P. 61-68.

120. Ryan C.A., Farmer E.E. Oligosaccharide signals in plants: A current assessment II Ann. Rev. Plant Physiol. Plant molec. Biol. Palo Alto, Calif. 1991. Vol.42. P. 651 -674.

121. Salehi H., Khosh-Khui M. Effects of expiant length and diameter on in vitro shoot growth and proliferation rate of miniature roses // J. hortic. Sc. 1997. Vol. 72. № 5. P. 673 -676.

122. Seabrook J. E. A., Coleman S., Levy D. Effect of photoperiod on in vitro tuberization of potato (Solanum tuberosum L.) // Plant Cell, Tissue and Organ Culture. 1993. Vol. 34. № 1. P. 43-51.

123. Seabrook J.E.A., Douglass L.K. Reduction in vigour of leafless potato cutting in vitro II Potato Res. 1994. Vol. 37. №4. P. 365-371.

124. Simko J. Effects of kinetin, paclobutrazol and their interactions on the microtuberization of potato stem segments cultured in vitro in the light II Plant Growth Regular. 1993. Vol. 12. №'/2. P. 23-27.

125. Smith O.E., Rappaport L. Gibberellins, inhibitors and tuber formation on stolons of Solanum tuberosum L. I ! Amer. Potato J. 1969. Vol. 46. P. 185- 191.

126. Smith O.E., Palmer C.E. Cytokinin-induced Tuber formation on stolons of Solanum tuberosum II Physiol. Plant. 1970. Vol. 23. № 3. P. 599 606.116

127. Stallknecht G.F., Farnsworth S. The effect of nitrogen on the coumarininduced tuberization of potato axillary shoots cultured in vitro II Am. Potato J. 1979. Vol.56. №11. P. 523 530.

128. Stallknecht G.F., Farnsworth S. Stallknecht G.F., Farnsworth S. General characteristics of coumarin induced tuberization of axillary shoots of Solanum tuberosum L. cultured in vitro. // Amer. Potato! 1982. Vol.59. №1. P. 17-32.

129. Stallknecht G.F. Tuber initiation in Solanum tuberosum: effect of phytohormones and induced changes in nucleic acid and protein metabolism // Potato Physiology. London: Academic press. 1985. P. 231 -260.

130. Vreugdenhil D., Helder H. Hormonal and metabolic control of tuber formation // Progress in Plant Growth Regulators. Dordrecht: Kluwer Acad. Publ. 1992. P. 393 -400.

131. Wang P.J., Hu C.Y. In vitro mass tuberization and virus-free seedpoato production in Taiwan // Am. Potato J. 1982. Vol. 59. № 1. P. 33 -37.

132. Wareing P.F., Jennigs A. The hormonal control of tuberisation in potato // Plant growth substances. B.: Springer, 1980. P. 293 -300.

133. Wellensiek S.J. The physiology of tuber formation in Solanum tuberosum // Meded. Landbouwhogeschool Wageningen. 1929. Vol.33. P. 6 42.

134. Xin Xu, Andre A. M., Vermeer E., Vreugdenhil D. The Role of gibberellin, abscisic acid, and sucrose in the regulation of potato tuber formation in vitro // Plant Physiol. 1998. Vol. 117. P. 575 584.