Биологический потенциал и методы создания исходного материала якона (Polymnia sonchifolia Poepp. & Endl.) при интродукции в ЦЧР тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.01.05, кандидат биологических наук Колесникова, Елена Олеговна

• Колесникова, Елена Олеговна
• кандидат биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Колесникова, Елена Олеговна

Введение.

Глава I. Обзор литературы.

1.1. Роль селекции в интродукции растений.

1.2. Новое инулиноносное растение якон (Polymnia son-chifolia) как объект интродукции.

Глава II. 2.1. Условия и методика проведения исследований.

2.2. Агроклиматические ресурсы и метеорологические условия в годы проведения эксперимента.

Глава III. Биоморфологические и биохимические особенности якона при выращивании в условиях ЦЧР.

3.1. Особенности роста и развития якона в полевых условиях.

3.2. Изменение биометрических показателей надземной и подземной части якона под влиянием регуляторов роста и удобрений.

3.3. Биохимическая характеристика якона.

Глава IV. Индукция полиплоидии якона в культуре in vitro.

4.1. Влияние стерилизации и состава питательной среды на прямую регенерацию побегов якона.

4.2. Колхицинирование якона в культуре ткани.

4.3. Получение форм якона с изменённой плоидностью.

Глава V. Разработка способа получения сомаклонов якона в условиях культуры тканей.

5.1. Влияние минерального и гормонального состава питательной среды на каллусогенез якона.

5.2. Влияние условий культивирования на пути морфогенеза якона.

5.3. Регенерация сомаклонов якона.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биологический потенциал и методы создания исходного материала якона (Polymnia sonchifolia Poepp. & Endl.) при интродукции в ЦЧР»

Актуальность темы. Важным направлением селекции является обогащение генофонда сахароносных культур путём создания новых форм, сортов и гибридов. Успех этой работы в значительной степени определяется интродукцией полезных растений малоизвестных видов и сортов, произрастающих в различных районах земного шара.

Ценным объектом для интродукции в России является якон (Polymnia sonchifolia Роерр. & Endl.). Это многолетнее растение из Южной Америки в своих корневых клубнях содержит до 60% инулина и имеет урожайность 28 — 100 т/га (Grau, Rea, 1997), что делает его ценным сырьём для пищевой и лекарственной промышленности. Поскольку цветение даже на родине затруднено, якон размножается преимущественно вегетативным путём. В связи с этим селекционная работа с ним проводится путём отбора клонов по массе клубней, по содержанию инулина. Вместе с тем это растение отзывчиво к культивированию в условиях in vitro, что открывает широкие возможности для создания исходного селекционного материала с использованием современных методов биотехнологии. В Российской Федерации имеются единичные публикации по размножению якона путём микроклонирования (Таратонов, Знаменская, Корниенко, 1997; Тюкавин, Кононков, 1997), а также по выявлению его биологических особенностей и адаптационных свойств при интродукции на Среднем Урале (Багаутдинова, Федосеева, Рымарь, 1999), в Подмосковье (Тюкавин, 1999), в Краснодаре (Гуйда, 2007). Работы по интродукции и селекции данного растения в условиях Центрально-Черноземного региона! (ЦЧР) не проводились.

В связи с этим актуальным является выявление биологического потенциала и адаптивных свойств якона при выращивании в ЦЧР, а также специфических условий, способствующих формированию регенерантов в условиях in viti'o и получению новых форм с помощью методов биотехнологии. Такой подход будет способствовать расширению генетического разнообразия якона и проведению селекционных исследований по данной культуре.

Цель работы: выявить биоморфологические и биохимические особенности якона при выращивании в условиях ЦЧР и разработать методы создания нового исходного материала с использованием культуры тканей.

Задачи исследований:

1. Изучить особенности морфологического развития и биохимических свойств якона при выращивании в ЦЧР.

2. Определить оптимальные условия культивирования якона in vitro.

3. Изучить влияние колхицина на образование полиплоидов якона в условиях культуры ткани.

4. Разработать способ получения нового исходного материала якона на основе индуцирования каллусогенеза и получения сомаклональных вариантов.

Научная новизна. Впервые в климатических условиях ЦЧР установлено, что развитие якона отражает способность растения вегетировать без плодоношения, а строение побега подчиняется общим закономерностям изменения метамеров растений. Выявлено, что адаптационный потенциал якона зависит от гидротермического коэффициента, и нормальное развитие растения в полевых условиях возможно при ГТК не менее 1,1. Положительное влияние на ростовые процессы якона оказывает применение удобрений N50P50K50 совместно с ретардантом 577 (0,05 мл/л), что позволяет получать клубни урожайностью до 22 т/га. Установлен химический состав растения (содержание белка — 3,7%, инулина - 42%, антиоксидантная активность — 117,5 мг/кг), что подтверждает ценность культуры для интродукции и использования в пищевых и лекарственных целях.

Впервые научно обоснованы условия стерилизации эксплантов анолитом и баланс гормонального состава питательных сред для разных этапов культивирования якона в условиях in vitro. Установлено, что реализация тотипотентности клеток якона в культуре тканей сопровождается регуляцией процессов, определяющих морфогенез путём прямой регенерации или через каллусогенез с последующим органогенезом. Данные исследования имеют теоретическое и прикладное значение при целенаправленном индуцировании изменчивости растений и ускоренном размножении в неограниченном количестве материала в селекционных целях.

Установлен оптимальный состав питательной среды и концентрация колхицина для получения микроклонов якона с повышенной плоидностью и жизнеспособностью. На основе этого разработан оригинальный метод получения растений с изменённым набором хромосом и новыми морфологическими признаками.

Показано, что наиболее эффективным способом индукции сомаклональной изменчивости якона in vitro является регенерация через каллусогенез с частотой побегообразования свыше 80%. На основании данного подхода разработан метод получения сомаклональных вариантов якона.

Практическая значимость результатов исследований. Выявленные биоморфологические и биохимические особенности якона можно широко использовать в селекционной работе для проведения оценки и отборов новых форм.

Разработанные параметры состава питательной среды позволяют ускоренно размножать ценный исходный материал, свободный от бактериальных и грибных заболеваний.

Разработанный метод полиплоидии путём колхицинирования якона в культуре ткани позволил получить 4 полиплоидных линии, которые можно использовать в селекционной работе.

Методом получения из каллусных культур сомаклональных вариантов создано 5 линий якона, представляющих практический интерес для селекции.

Выявленные оптимальные концентрации удобрений и регуляторов роста можно использовать для повышения урожайности якона при выращивании в полевых условиях по однолетнему циклу.

Полученные патенты на способы получения добавки-подсластителя путём экстрагирования углеводного комплекса якона и желе с данным экстрактом (№ 2345543, 2007; № 2358447, 2007) предназначены для производства пищевых продуктов диетического и лечебного направления.

Разработанные методические подходы могут быть использованы в селекционной работе с яконом, а также в учебных программах по селекции, биологии и биотехнологии в высших и средних учебных заведениях.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы были представлены на Межрегиональной научно-практической конференции «Вклад молодых учёных в решение проблем аграрной науки» (Воронеж, 2005), I (IX) Международной конференции молодых ботаников (Санкт-Петербург, 2006), Межрегиональной научно-практической конференции молодых учёных «Достижения молодых учёных — будущее в развитии АПК» (Воронеж, 2007), VIII Международной научно-практической конференции «Интродукция нетрадиционных и редких растений» (Мичуринск, 2008), IX Молодёжной научной конференции «Биотехнология в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии» (Москва, 2009), Всероссийской научно-практической конференции «Инновационные технологии и технические средства для АПК» (Воронеж, 2009), VIII Международном симпозиуме «Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования» (Москва, 2009) и на заседаниях Учёного Совета ГНУ ВНИИСС (Рамонь, 2004 - 2009).

По теме диссертации опубликовано 12 научных работ, в том числе в изданиях, рекомендованных ВАК.

Положения, выносимые на защиту.

1. Биоморфологические особенности якона,, позволившие выявить биологический потенциал и адаптивные свойства культуры при интродукции в ЦЧР.

2. Установленные параметры стерилизации апикальной и пазушной меристемы и гормональный баланс питательной среды являются основой для индукции морфогенеза, сохранения и быстрого размножения ценного исходного материала.

3. Использование полиплоидии в условиях in vitro обеспечивает получение растений якона с изменённым генотипом в качестве исходных форм для селекции.

4. Способ получения сомаклональных вариантов якона, позволяющий индуцировать сомаклональную изменчивость, приводит к разнообразию исходного материала.

Личный вклад автора. Автор принимал личное участие в формулировании проблемы, постановке цели и задач, планировании и выполнении экспериментов. Автор участвовал в выполнении всех анализов, в обобщении и интерпретации результатов, в написании научных публикаций.

Структура и объём работы. Диссертация изложена на 143 страницах компьютерного текста, состоит из введения, 5 глав, основных выводов, практических рекомендаций и библиографического списка, включающего 149 наименований, в том числе 30 на иностранных языках. Работа содержит 21 таблицу и 65 рисунков, включая фотоснимки и приложения.

Заключение диссертации по теме «Селекция и семеноводство», Колесникова, Елена Олеговна

ВЫВОДЫ

1. Биологические особенности и адаптивные свойства якона при выращивании в ЦЧР позволяют получать клубни урожайностью до 22 т/га с содержанием инулина 42 %. В климатических условиях ЦЧР растения развиваются без плодоношения, поэтому выращивание якона осуществляется рассадным методом по однолетнему циклу.

2. Изменение структурной организации побега в процессе роста подчиняется общим закономерностям изменения метамеров растений, при этом размеры основных конституционных элементов - междоузлий и листьев -сначала увеличиваются до определённого значения, а затем уменьшаются при продвижении от основания к вершине.

3. Показано, что адаптационная способность якона при интродукции в зоне неустойчивого увлажнения зависит от конкретных погодных условий года. Для нормального развития культуры необходимо оптимальное сочетание температуры и влажности, обеспечивающие ГТК не менее 1,1. Снижение ГТК до 0,7 уменьшает все биометрические показатели растений, в том числе высоту на 38 %, массу клубней на 78 %.

4. Установлено, что обработка рассады якона раствором ретарданта 577 в концентрации 0,05 мл/л с одновременным внесением минеральных удобрений М50Р5оК5о оказывает положительное влияние на ростовые процессы, повышая урожайность зелёной массы на 41 %, клубней на 34 %.

5. Получены новые данные, касающиеся биохимического состава якона, выращенного в ЦЧР. Корневые клубни содержат 3,7 % белка, в листьях белка значительно больше — 10,1 %. Запасающие органы якона содержат богатый набор аминокислот, включающий незаменимые. Наиболее высоко содержание пролина (0,44 %) и аргинина (0,43 %). В клубнях содержится в среднем 42 % инулина. Экстракт из клубней обладает антиоксидантной активностью, равной 117,5 мг/кг. Всё это подтверждает существующие представления о яконе как о ценной пищевой и кормовой культуре.

6. Разработан эффективный метод микроклонального размножения якона, основанный на прямой регенерации побегов, лимитирующими факторами которого являются: 100%-ная стерилизация эксплантов анолитом; использование питательной среды В5, содержащей 0,3 мг/л БАЛ; длительное сохранение и укоренение растений. Данный метод позволяет ускоренно размножать селекционный материал в количестве до 106 микроклонов в год.

7. Разработан метод получения полиплоидных форм якона, включающий введение в культуру in vitro эксплантов, микроразмножение растений, культивирование микроклонов на питательной среде с добавлением 0,05 % раствора колхицина в течение 48 часов, проведение отбора по количеству хромосом, размножение, укоренение и перевод в закрытый грунт полученных полиплоидов. Метод позволяет получать 100 % растений с изменённым генотипом (Зп, 4п) в качестве исходных форм для селекции.

8. Разработан метод получения сомаклональных вариантов якона в культуре in vitro, который заключается в каллусообразовании с последующей регенерацией побегов у стеблевых эксплантов на питательной среде MS с добавлением 0,3 мг/л 6-БАП и 1 мг/л ИУК при 16-ти часовом фотопериоде, пересадку на среду В 5 с 0,3 мг/л 6-БАП, черенкование, размножение, укоренение и перевод в грунт полученных сомаклонов.

9. Выявлены пути морфогенеза якона, основанные на реализации тотипотентности соматических клеток. Гормональный состав питательных сред регулирует ростовые процессы и определяет направления развития в условиях in vitro. Воспроизведение растений идёт путём прямой регенерации побегов и через каллусогенез, в котором реализация морфогенеза происходит по пути гистогенеза и органогенеза, приводящего к формированию ростовых почек и корней.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Разработанный метод микроклонального размножения якона рекомендуется для получения неограниченного количества микроклонов, идентичных растениям-донорам и длительного сохранения ценного селекционного материала в чистоте.

2. Разработанный метод получения полиплоидов в культуре in vitro рекомендуется применять в селекционной практике для получения полиплоидных форм в качестве исходного материала.

3. Разработанный метод индуцирования сомаклональной изменчивости следует использовать в селекционной работе при создании новых форм с изменёнными признаками.

4. В условиях открытого грунта ЦЧР рекомендуется выращивание якона по однолетнему циклу с использованием обработки рассады ретардантом 577 в концентрации 0,05 мл/л на фоне удобрений N50P50K50.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Колесникова, Елена Олеговна, 2009 год

1. Агаев М.Г. Интродукция растений как интегральная наука / М.Г. Агаев // Флористические и геоботанические исследования в Европейской России: Материалы Всерос. Научной конф. Саратов: Издательство Саратовского пед. института, 2000. — С. 290 - 292.

2. Агроклиматические ресурсы Воронежской области. JL: Агро-промиздат, 1972. - 108 с.

3. Артамонов В.И. Биотехнология агропромышленному комплексу / В.И. Артамонов. -М.: Наука, 1989. 160 с.

4. Атанасов А. Биотехнология в растениеводстве / А. Атанасов. -Новосибирск: ИЦиГ СО РАН, 1993. 242 с.

5. Багаутдинова Р.И. Морфометрические признаки и химический состав растений якона при интродукции на Среднем Урале / Р.И. Багаутдинова, Г.П. Федосеева, Г.Б. Тюкавин, В.П. Рымарь // Сельскохозяйственная биология. 2003. - № 1. - С. 46 - 53.

6. Барыкина Р.П. Справочник по ботанической микротехнике. Основы и методы / Р.П. Барыкина, Т.Д. Веселова, А.Г. Девятов, Х.Х. Джалилова, Г.М. Ильина, Н.В. Чубатова. М.: Изд. МГУ, 2004. - 312 с.

7. Безлер H.B. Биологическая активность препарата «Биоэнергия» в различных почвенно-климатических зонах // Н.В. Безлер, H.H. Цымбалов, М.А. Сумская, В.Н. Каржеманов. Воронеж: ВГУ, 2006. - 106 с.

8. Биотехнология растений: культура клеток / пер. с англ. В.И. Нег-рука / Под ред. Р.Г. Бутенко. — М.: Агропромиздат, 1989. — 280 с.

9. Блукет H.A. Ботаника с основами физиологии растений и микробиологии / H.A. Блукет, В.Т. Емцев. М.: Колос, 1969. - 512 с.

10. Бойко JI.A. Биологические основы интродукции растений / JI.A. Бойко. Л.: Наука, 1969. - С. 65 - 80.

11. Большая Советская энциклопедия / под. ред. A.M. Прохорова, 3-е издание. -М.: Советская энциклопедия, 1973. Т. 14. - С. 126.

12. Бондаренко A.M. Сомаклональная изменчивость и биотехнологические методы в селекции злаковых культур / А. М. Бондаренко // Физиология и биохимия культурных растений, 1991. Т. 23. - № 3. - С. 222 -232.

13. Бороевич С. Принципы и методы селекции растений / С. Бороевич,-М.: Колос, 1984.-344 с.

14. Бреславец Л.П. Полиплоидия в природе и опыте / Л.П. Бреславец. — М.: Изд. академии наук СССР, 1963. 364 с.

15. Бриггс Ф. Научные основы селекции растений / Ф. Бриггс, П. Ноулз. М.: Колос, 1972.-399 с.

16. Бугаенко И.Ф. Достижения в производстве и применении: сахара и подслащивающих веществ / И.Ф. Бугаенко // Итоги науки и техники. Химия и технология пищевых продуктов. 1990. - Т. 3. - С. 130.

17. Бутенко Р.Г. Культура изолированных клеток и физиология морфогенеза растений / Р.Г. Бутенко. М.: Наука, 1964. - 272 с.

18. Бутенко Р.Г. Индуцированный органогенез и характеристика растений, полученных в культуре ткани табака / Р.Г. Бутенко, З.Б. Шамина, Л.В. Фролова // Генетика. 1967. - 3. - № 3. - С. 23 - 39.

19. Бутенко Р.Г. Биология клеток высших растений in vitro и биотехнологии на их основе / Р.Г. Бутенко: Учеб. пособие. М.: ФБК-ПРЕСС, 1999. -160 с.

20. Вавилов Н.И. Избранные сочинения. Генетика и селекция. / Н.И. Вавилов. М.: Колос, 1966. - 559 с.

21. Вавилов Н.И. Закон гомологических рядов в наследственной изменчивости / Н.И. Вавилов. Л.: Наука, 1987. — 256 с.

22. Вавилов Н.И. Происхождение и география культурных растений / Н.И. Вавилов. Л.: Наука, 1987. - 429 с.

23. Витанова 3. Сомаклональная изменчивость / 3. Витанова, М. Вла-хова, П. Денчев, Е. Маринова, В. Витанов, А. Атанасов // Физиология и биохимия культурных растений. 1990. - Т. 22. - № 5. - С. 419 - 425.

24. Вульф Е.В. Мировые ресурсы полезных растений / Е. В. Вульф, О.Ф. Малеева. Л.: Наука, 1969. - 566 с.

25. Гапоненко А.К. Регенерация растений различных генотипов пшеницы Triticum aestivum L. in vitro / A.K. Гапоненко, M.A. Мунтян, Н.И. Маликова, A.A. Созинов // Докл. АН СССР. 1984. - 278. - № 5. - С. 1231 -1235.

26. Гафуров Р.Г. Зелёная революция по-русски / Р.Г. Гафуров // The Chemical Journal. 2004. - № 12. - С. 33.

27. Гафуров Р.Г. Стратегия химического дизайна фиторегуляторов и стресспротекторов с заданными свойствами / Р.Г. Гафуров // Доклады Академии наук. 2004. - Т. 399. - № 3. - С. 422 - 424.

28. Грати М.И. Сомаклональная изменчивость in vitro сортов и гибридов томата / М.И. Грати // Цитология и генетика. 1997. — Т.31. - № 5. - С. 32-37.

29. Гребинский С.О. Биохимия растений / С.О. Гребинский. Львов: Вища школа, 1975. - 280 с.

30. Гродзинский A.M. Интродукция растений в период научно-технической революции / A.M. Гродзинский // Теории и методы интродукции растений и зелёного строительства. — Киев: Наукова думка. — 1980. — С. 3-6.

31. Гужов Ю.Л. Что такое мутагенез и полиплоидия / Ю.Л. Гужов. -М.: Колос, 1967.- 159 с.

32. Гуйда А.Н. Якон против диабета / А.Н. Гуйда // Нива Кубани. -2007.-№47.-С. 1-2.

33. Доспехов Б.А. Методика полевого опыта / Б.А. Доспехов. М.: МГУ, 1985.-268 с.

34. Еникеев Е.И. Полевая практика по физиологии растений / Е.И. Еникеев. Казань: Казанский СХИ, 1967. - 42 с.

35. Жужжалова Т.П. О селекции стевии / Т.П. Жужжалова, В.В. Знаменская, A.B. Корниенко, O.A. Подвигина // Сахарная свёкла. 2004. - № 7. -С. 32-33.

36. Жуковский П.М. Новое растение в плане интродукции / П.М. Жуковский // Социальная реконструкция и наука. — 1932. Вып. 6. - С. 106.

37. Жученко A.A. Адаптивная система селекции растений (эколого-генетические основы): Монография. В двух томах / A.A. Жученко. М.: Изд. РУДН, 2001. - Т. 1. - 780 с.

38. Зауралов О.Д. Определение эффективности регуляторов роста для повышения холодоустойчивости теплолюбивых растений / О.Д. Зауралов // Агрохимия. 1997. - № 2. - С. 71-75.

39. Землянухин A.A. Практикум по биохимии / A.A. Землянухин. — Воронеж: Изд-во ВГУ, 1975.- 144 с.

40. Землянухин A.A. Малый практикум по биохимии: учеб. пособие для студентов по агрон. специальностям / A.A. Землянухин. — Воронеж: Изд-во ВГУ, 1985.- 128 с.

41. Зленко В.А. Теоретические и практические аспекты применения методов in vitro для интенсификации селекционного процесса у растений винограда / В.А. Зленко, И.В. Котиков, Л.П. Трошин // Сельскохозяйственная биология. 2005. - № 3. - С. 32 - 38.

42. Знаменская В.В. Микроклональное размножение сахарной свеклы: методические рекомендации / В.В. Знаменская, Т.П. Жужжалова, А.И. Корниенко. Воронеж, 1995. — 23 с.

43. Инге-Вечтомов С.Г. Генетика с основами селекции / С.Г. Инге-Вечтомов. -М.: Высшая школа, 1989. 591 с.

44. Инюткина А.Г. Каллусообразование в культуре in vitro Artemisia dracunculus L. / Инюткина А.Г., Егорова H.A. // Биология клеток растений in vitro и биотехнология: Тезисы IX Международной конференции. М.: ИД ФБК-ПРЕСС, 2008. - С. 146.

45. Карлос Хуэто К. Агрономическое и биохимическое изучение якона {Polymnia sonchifolia Роерр. et Endl.) / К. Карлос Хуэто; Русский перевод, 1995.-9 с.

46. Катаева Н.В. Клональное микроразмножение растений / Н.В. Катаева, Р.Г. Бутенко. М.: Наука, 1983. - 95 с.

47. Кононков П.Ф. Перспективность интродукции якона в России / П.Ф. Кононков, В.К. Гинс, О.В. Анулов, Н.И. Смирнова, В.Д. Щербухин / Доклады РАСХН. 1996. - № 5. - С. 17 - 88.

48. Кононков П.Ф. Об углеводном составе запасающих клубней интро-дуцированных растений якона / П.Ф. Кононков, В.К. Гинс, Н.И. Смирнова, В.Д. Щербухин // Сельскохозяйственная биология. 1997. - № 5. - С. 112 -114.

49. Кононков П.Ф. Экстрактивные сахара стеблей якона, интроду-цированного в Подмосковье / П. Ф. Кононков, В.К. Гинс, Н.И. Смирнова, В.Д. Щербухин // Селекция овощных культур: Сб. науч. трудов. М., 1998. -Вып. 35.-С. 32-36.

50. Кононков П.Ф. Якон перспективная культура для плёночных теплиц / П.Ф. Кононков, Г.Б. Тюкавин // Гавриш. - 1999. - № 2. - С. 10-12.

51. Коренман Я.И. Экстрагирование физиологически ценных компонентов натурального подсластителя якона / Я.И. Коренман, Е.С. Рудниченко,

52. Е.И. Мельникова, С.И. Нифталиев, М.О. Ширунов, Е.О. Колесникова // Химическая технология. 2008. - Т. 9. - № 12. - С. 626 - 627.

53. Котлярова Е.Б. Аспекты применения методов биотехнологии в селекции ярового рапса (Brassica napus L.): автореф. дис.канд. биол. наук / Е.Б. Котлярова; Всерос. НИИ рапса. Липецк, 2007. - 25 с.

54. Краткая географическая энциклопедия / под ред. A.A. Григорьева. — М.: Советская энциклопедия, 1960. Т. 1. — 564 с.

55. Краткая географическая энциклопедия / под ред. A.A. Григорьева. — М.: Советская энциклопедия, 1961. — Т. 2. — 592 с.

56. Краткая географическая энциклопедия / под ред. A.A. Григорьева. -М.: Советская энциклопедия, 1962. Т. 3. - 580 с.

57. Краткая географическая энциклопедия / под ред. A.A. Григорьева. -М.: Советская энциклопедия, 1966. Т. 5. - 544 с.

58. Кривченко В.И. Перспективы интродукции и внедрения в производство новых технических культур / В.И. Кривченко, Н.К. Лемешев // Сб. науч. тр. по прикладной ботанике, генетике и селекции. — СПб., 1989. — Т. 125.-С. 3-9.

59. Культиасов И.М. Экология растений: Учебник / И.М. Культиасов. -М.: МГУ, 1982.-384 с.

60. Кунах В.А. Изменчивость числа хромосом в онтогенезе высших растений / В.А. Кунах // Цитология и генетика. 1978. - 12. — № 2. - С. 160 — 173.

61. Кунах В.А. Геномная изменчивость соматических клеток растений и факторы, регулирующие этот процесс / В.А. Кунах // Цитология и генетика. 1980. - 14. - № 1. - С. 73 - 81.

62. Кунах В.А. Генетическая изменчивость соматических клеток растений. Каллусообразование in vitro / В.А. Кунах // Биополимеры и клетка, 1997. -Т. 13.-№5.-С. 362.

63. Лапин М.М. Растениеводство с основами селекции и семеноводства / М.М. Лапин. -М.: Гос. изд. сельскохозяйственной лит., 1956. — 560 с.

64. Лапин П.И. Пути охраны и обогащения растительности / П.И. Лапин. М.: Знание, 1978. - 64 с.

65. Лапин П.И. Интродукция лесных пород / П.И. Лапин, К.К. Калуц-кий, О.Н. Калуцкая. М.: Лесная промышленность, 1979. - 224 с.

66. Лебедев С.И. Физиология растений / С.И. Лебедев. 3-е изд., доп. и перераб. -М.: Агропромиздат, 1988. - 544 с.

67. Ленинджер А. Биохимия / А. Ленинджер. М.: Мир, 1976. - 957 с.

68. Лесная энциклопедия / под ред. Г.И. Воробьёва. М.: Сов. энциклопедия, 1986.-631 с.

69. Мазуренко М.Т. Биоморфологические аспекты интродукции растений / М.Т. Мазуренко // Проблемы ботаники на рубеже ХХ-ХХ1 веков. -СПб. 1998. - Т. 2. - С. 307 - 308.

70. Марченко А.О. Реализация морфогенетического потенциала растительных организмов / А.О. Марченко // Успехи современной биологии. 1996. - Т. 116. - Вып. 3. - С. 34 - 47.

71. Машкин С.И. Биологические основы и система методов селекции растений / С.И. Машкин // Биологические основы секции растений: Сборник статей. Воронеж: ВГУ, 1985.- 172 с.

72. Методика выполнения измерений содержания антиоксидантов в биологически активных добавках, напитках, экстрактах растений / НТЦ «Хроматография». М.: ОАО НПО «Химавтоматика», 2004. - 20 с.

73. Моисейченко В.Ф. Основы научных исследований в агрономии / В.Ф. Моисейченко, М.Ф. Трифонова, А.Х. Заверюха, В.Е. Ещенко. М.: Колос, 1996.-320 с.

74. Муромцев Г.С. Основы сельскохозяйственной биотехнологии / Г.С. Муромцев. -М.: Агропроиздат, 1990.-381 с.

75. Некрасов В.И. Актуальные вопросы развития теории акклиматизации растений / В.И. Некрасов. М.: Наука, 1980. - 102 с.

76. Нижко В.Ф. Физиологически активные соединения и транспорт веществ в растениях / В.Ф. Нижко // Физиология и биохимия культурных растений.-1983.-Т. 15.- № 3. С. 211 -223.

77. Паушева З.П. Практикум по цитологии растений / З.П. Паушева. -М.: Колос, 1970.-256 с.

78. Паушева З.П. Практикум по цитологии растений / З.П. Паушева. — М.: Агропромиздат, 1988. 271 с.

79. Подвигина O.A. Индуцирование гаплоидии у сахарной свёклы: ав-тореф. дис.канд. с.-х. наук / O.A. Подвигина; Рамонь (Воронеж, обл.). -Рамонь, 1994. 18 с.

80. Подвигина O.A. Теоретическое обоснование и приёмы использования методов биотехнологии в селекции сахарной свёклы: автореф. дис.док. с.-х. наук / O.A. Подвигина; Воронеж. ГАУ. Воронеж, 2003. - 44 с.

81. Полевой В.В. Физиология растений / В.В.Полевой. — М.: Высшая школа, 1989. 464 с.

82. Редько В.И. Возможности биотехнологии в селекции цикория корнеплодного (Cichorium intybus L.) / В.И. Редько, В.А. Борисюк, К.А. Маковецкий, Н.С. Бех, Т.Н. Недяк, Н.П. Слуцкая // Сахарная свёкла. 2008. — №7.- С. 27-29.

83. Рейвн П. Современная ботаника: В 2 т. // П. Рейвн, Р. Эверт, С. Айкхорн. -М.: Мир, 1990. Т. 2. - 344 с.

84. Седов E.H. Селекция яблони на продуктивность и качество с использованием метода полиплоидии / E.H. Седов, Е.В. Ульяновская, Г.А. Седышева, З.М. Серова, Л.И. Дутова // Сельскохозяйственная биология. -2008.-№3.-С. 33-37.

85. Сельскохозяйственная энциклопедия / под ред. В.В. Мацкевич, П.П. Лобанова. 4-е изд., доп. и перераб. - М.: Советская энциклопедия, 1971. - Т. 2. - 1232 с.

86. Серебрякова Т.И. Морфогенез побегов и эволюция жизненных форм злаков / Т.И. Серебрякова. М.: Наука, 1971. - 360 с.

87. Сидоров В.А. Культура изолированных протопластов для получения новых форм картофеля / В.А. Сидоров, Е.Г. Лысенко, A.A. Кучко // Исследования по клеточной селекции картофеля. — 1984. — С. 108 — 114.

88. Сидоров В.А. Соматическая гибридизация паслёновых / В.А. Сидоров, Н.М. Пивень, Ю.Ю. Глеба, K.M. Сытник. — Киев: Наукова думка, 1985.-130 с.

89. Сидоров В.А. Биотехнология растений. Клеточная селекция / В.А. Сидоров. Киев: Наукова думка, 1990. - 280 с.

90. Сикорская С.Б. Биолого-морфологические особенности стевии (Stevia rebaudiana (Bertoni)) при интродукции в условиях ЦЧЗ России: автореф. дис.канд. биол. наук / С.Б. Сикорская; Глав. бот. сад им. Цицина РАН. Курск, 2004. - 21 с.

91. Тюкавин Г.Б. Клональное микроразмножение якона in vitro / Г.Б. Тюкавин, П.Ф. Кононков // Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования: Материалы докладов II Международного симпозиума. Пущино, 1997. - Т. 4. — 564 с.

92. Тюкавин Г.Б. Культура каллусной ткани якона in vitro / Г.Б.Тю-кавин // Новые нетрадиционные растения и перспективы их практического использования: Тезисы докл. II Международного симпоз. Пущино, 1997. — С. 505-507.

93. Тюкавин Г.Б. Якон перспективная овощная культура / Г.Б. Тюкавин // Картофель и овощи. — 1999. — № 4. — 22 с.

94. Тюкавин Г.Б. Введение в культуру якона (Polymnia sonchifolia Роерр. et Endl.) / Г.Б. Тюкавин // Изв. ТСХА. 2001. - №1. - С. 42 - 48.

95. Тюкавин Г.Б. Интродукция якона в России / Г.Б. Тюкавин. М.: Вымпел, 2001. - 272 с.

96. Тюкавин Г.Б. Якон. Надежда нового века / Г.Б.Тюкавин. СПб.: ДИЛЯ, 2004. - 64 с.

97. Цветова М.И. Эффективность различных способов колхициниро-вания растений (на примере злаков) / М.И. Цветова, А.Т. Ишин // Сельскохозяйственная биология. 1999. - № 5. - С. 110 - 121.

98. Цицин Н.В. Ботанические сады СССР / Н.В. Цицин. М.: Наука, 1974.-191 с.

99. Цупикова Л.А. Депонирование и рекультивирование сахарной свёклы в культуре in vitro: автореф. дис.канд. с.-х. наук / Л.А. Цупикова; Всерос. НИИ сахарной свёклы и сахара. пос. Рамонь (Вор. обл.), 2002. - 24 с.

100. Шайтан И.М. Интродукция и селекция южных и новых плодовых растений / И.М. Шайтан, П.А. Мороз, C.B. Клименко — Киев: Наукова думка, 1983.-216 с.

101. Шевелуха B.C. Сельскохозяйственная биотехнология / B.C. Шеве-луха, Е.А. Калашникова, C.B. Дегтярёв М.: Высш. школа, 1998. - 416 с.

102. Шевелуха B.C. Сельскохозяйственная биотехнология / Шевелуха B.C. М.: Высш. школа, 2003. - 340 с.

103. Шевченко А.Г. Влияние ретардантов-стресспротекторов на сохранность и продуктивность безвысадочных семенников MC гибридов / А.Г. Шевченко, В.А. Корсун, Г.Г. Гафуров // Сахарная свёкла. № 5. - 2005. - С. 32-34.

104. Якушкина Н.И. Влияние питания растений на содержание в них естественных гормонов / Н.И. Якушкина, Л.Н. Воронков // Агрохимия. -1968.-№Ю.-С. 77-84.

105. Якушкина Н.И. Физиология растений / Н.И. Якушкина, Е.Ю. Бахтенко. М.: Гуманитар, изд. центр ВЛАДОС, 2005. - 463 с.

106. Яшин А .Я. Определение природных антиоксидантов амперомет-рическим методом / А.Я. Яшин, Я.И. Яшин, Н.И. Черноусова // Пищевая промышленность. 2006. - № 2. — С. 10 - 12.

107. Bostid N.R.C. Yacon / N.R.C. Bostid // Lost crops of the Incas: Little-known plants of the Andes with promise for worldwide cultivation. Washington: National Academy Press, 1989. - P. 115 - 123.

108. Buvat R. Recherches sur la dedifferenciation des cellules vegetales / R. Buvat // Ann. Sci. Nat. Bot. 1944. - 5. - P. 1 - 130.

109. Calvino M. A new plant Polymnia edulis for forage or alcohol / M. Calvino // Industria Saccharifera Italiana. 1940. - 33. - P. 95 - 98.

110. Campion B. Spontaneous and induced chromosome doubling in gyno-genic lines of onion (.Allium сера L.) / B. Campion // Plant Breed. 1995. - 114, № 3. — P. 243-246.

111. Edallo S. Chromosomal variation and frequency of spontaneous mutation associated with in vitro culture and plant regeneration in maize / S. Edallo, C. Zucchinali, M. Perenzin, F. Salamini // Maydica. 1981. - 26. - P. 39 — 56.

112. Gamborg O.L. Culture method and detection of gluconate in suspension cultures of wheat and barley / O.L.Gamborg, D. Eveling // Can.J.Biochem. — 1968. -46.-P. 417-421.

113. Grau A. Yacon, Smallanthus sonchifolius (Poepp. et Endl.) H. Robinson / A. Grau, Rea J. // Andean roots and tubers: ahipa, arracacha, maca and yacon. -Rome, 1997.-P. 199-242.

114. Green C.E. Plant regeneration from tissue cultures of maize / C.E. Green, R. Phillips // Ibid. 1975. - 15. - P. 417 - 421.

115. D'Amato F. Chromosome number variation in cultured cells and regenerated plant / F. D'Amato // Frontiers of plant tissue culture 1978. — Galgary: IAPTC, 1978. P. 287 - 295.

116. Hansen N.J.P. In vitro chromosome doubling with colchicines during microspore culture in wheat (Triticum aestivum L.) / N.J.P. Hansen, S.B. Andersen // Euphitica. 1998. - Vol. 102. - № 1. - P. 101 - 108.

117. Heiser C. Numeration cromosomica de plantas ecuatorianas / C. Heiser // Ciencia y Naturaleza. 1963. - 6. - P. 2 - 6.

118. Karp A. Chromosome variation in wteat plants regenerated from cultured immature embryos / A. Karp, S.E. Maddock // Ibid. 1984. - 67, № 3. - P. 249-255.

119. Kehrer J. Free radical as mediators of tissue injury and desease / J. Kehrer // Critical reviews in toxicology. 1993. - V. 23. - № 1. - P. 21 - 48.

120. Leon J. Plantas alimenticias andinas / J. Leon // Boletín Tecnino No. 6 HCA. Lima, 1964.-P. 14.

121. Murashige T. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures / T. Murashige, F. Skoog // Physiol plantarum. 1962. - v. 15.-P. 473-497.

122. Murashige T. Tissue culture as a potential tool in obtaining polyploidy plants / T. Murashige, R. Nakano // J. Hered. 1966. - 57. - P. 114 - 118.

123. Nabors M.W. Long-duration, high frequency plant regeneration from cereal tissue culture / M.W. Nabors, J.N. Heyser, T.A. Dykes, K.J. De Mott // Planta. 1983. - 157, N 5. - P. 385 - 391.

124. Naylor A. W. Mitosis and cell enlargement without cell division in excised tobacco pith tissue / A. W. Naylor, G. Sander, F. Skoog // Physiol. Plant. -1954.-7.-P. 25-29.

125. O'Hara J. F. Wheat callus culture. The initation, growth and organogenesis of callus, derived from various explant sources / J. F. O'Hara, H.E. Street // Ann. Bot. (Gr. Brit.). 1978. - 42, N 181. - P. 1029.

126. Ohyama T. Composition of storage carbohydrate in tubers of yacon (Polymnia sonchifolia) / T. Ohyama, O. Ito, S. Yasuyoshi, T. Ikarashi, K. Minamisawa, M. Kubota, T. Tsukihashi, T. Asami // Soil Sci. Plant Nutr. 1990. -Vol. 36.-№l.-P. 167-171.

127. Reddy B., Hamid R., Rao C. Effect of dietary oligofructose and inulin on colonie preneoplastic aberrant ciypt foci inhibition / B. Reddy, R. Hamid, C. Rao // Division of Nutritional Carcinogenesis, USA. 1997 Jul. - 18(7). - P. 1371 -1374.

128. Salgado Moreno V.X. Evaluation y caracterización citogenetica de 16 estradas de Jicama {Polymnia sonchifolia Poepp. et Endl.) de Sudamerica / V.X. Salgado Moreno // Tesis de Grado, Universidad Central del Ecuador, 1996. P. 57.

129. Sears R.G. Tissue culture variability in wheat: callus induction and plant regeneration / R.G. Sears, E.L. Deckard // Crop Sci. 1982. - 22. - P. 546 -550.

130. Skirvin R.M. "Velvet Rose" Pelargonium, a scented geranium / R.M. Skirvin, J. Janick // Hort. Sci. 1976. - 11. - P. 61 - 62.

131. Talledo D. Caracterización cariotipica de germoplasma RTA / D. Tal-ledo, M. Escobar// Laboratorio de Biologia Celular y Genetica. Memorias, 1996. -P. 48-56.

132. White Ph. Potentially unlimited growth of excised plant callus in an artificial nutrient / Ph. White // Amer. j. Bot., 1963. v. 26. - P. 59 - 64.

133. Zardini E. Entonobotanical notes on «Yacon», Polymnia sonchifolia (Asteraceae) / E. Zardini // Econ. Bot. 1991. - Vol. 45. - № 1. - P. 72 - 85.