Разработка тест-систем для идентификации и определения антибиотикочувствительности возбудителей микоплазмоза: Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Рока Вильчес Вашингтон

• Рока Вильчес Вашингтон
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Рока Вильчес Вашингтон

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

1 АНАЛИТИЧЕСКИЙ ОБЗОР.

1.1 Систематика Микоплазм.

1.2 Семейство Mycoplasmataceae.

1.2.1 Морфология микоплазм.

1.2.2 Чувствительность микоплазм к физическим и химическим факторам.

1.2.3 Биохимические свойства урогенитальных микоплазм

1.2.4 Культуральные свойства.

1.2.5 Антигенная структура.

1.3 Микоплазмозы человека.

1.3.1 Микоплазмы, инфицирующие человека.'.

1.3.1.1 Mycoplasma pneumoniae.

1.3.1.2 Mycoplasma fermentans.

1.3.1.3 Mycoplasma hominis.

1.3.1.4 Ureaplasma urealyticum.

1.3.2 Факторы патогенности.

1.3.3 Патогенез.

1.3.4 Эпидемиология.

1.3.5 Клинические проявления.

1.3.5.1 Здоровых женщин.

1.3.5.2 Микоплазмоз беременных.

1.3.6 Лечение.

1.4 Чувствительность микоплазм к антибиотикам. Резистентность

1.4.1 Критерии для определения чувствительности Чп vivo\

1.4.1.1 Клиническая эффективность.

1.4.1.2 Уровень антибиотика в сыворотке крови.

1.4.1.3 Изменение чувствительности у микроорганизмов одного вида.

1.4.2 Механизмы резистентности.

1.4.3 Методы определения чувствительности Чп vitro'.

1.4.3.1 Методы диффузии.

1.4.3.2 Методы разведения.

1.5 Классификация антибиотиков.

1.5.1 Группа тетрациклинов.

1.5.2 Группа макролидов.

1.5.3 Группа хинолонов/фторхинолонов.

1.5.4 Группа линкозамидов.

1.5.5 Группа аминогликозидов.

1.5.6 Чувствительность антибиотиков разных классов к урогенитальным микоплазмам.

1.6 Лабораторная диагностика.

1.6.1 Бактериологические методы диагностики.

1.6.2 Серологические методы.

1.6.3 Методы молекулярной биологии.

1.7 Сравнение методов анализа.

2 ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВAI1ИЯ.

2.1 Объекты исследования.

2.2 Микробиологические методы исследования.

2.3 Физико-химические методы исследования.

2.4 Вспомогательные материалы, используемые при исследовании.

3 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

3.1 Усовершенствование жидкой питательной среды «МИКО-ПЛАЗМА-50».

3.1.1 Подбор системы индикаторов.

3.1.2 Определение точки эквивалентности выбранной смеси индикаторов.

3.1.3 Поиск и определение антибиотиков для подавления роста посторонней микрофлоры.

3.2 Определение минимальной подавляющей концентрации (МПК).

3.2.1 Приготовление жидких питательных сред МИКОПЛАЗМА-50 и УРЕАПЛАЗМА-50.

3.2.2 Определение МПК для М. hominis.

3.2.3 Определение МПК для U.urealyticum.

3.2.4 Разработка Тест-системы для определения антибиоти-кочувствительности к возбудителям урогенительных мико-плазмозов.

3.3 Сравнительная оценка эффективности разработанной Тест-системы

4 РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ.

4.1 Результаты по усовершенствованию жидкой питательной среды «МИКОПЛАЗМА-50».

4.2 Результаты по определению минимальной подавляющей концентрации (МПК).

4.3 Результаты по апробации разработанной Тест-Системы.

5. ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка тест-систем для идентификации и определения антибиотикочувствительности возбудителей микоплазмоза: Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum»

Микоплазмы, более раннее название - организмы подобные возбудителю плевропневмонии (Pleuropneumonia like organism PPLO) были впервые выделены от животных в 1898 году, а от человека в 1937 году. В 1937 году Dienes и Edsall описали случай инфицированности человека. Речь шла о генитальной инфекции, абсцессе Бартолиевой железы, вызванной микоплазмой, которая, вероятнее всего являлась Mycoplasma hominis. В 1954 году, при диагностике уретрита Shepard впервые, кроме Mycoplasma hominis, изолировал Ureaplasma urealyticum или Т-штаммы (от английского - "tiny-form PPLO colonies"). Микоплазмы давно известны в качестве возбудителей заболеваний многих видов животных, птиц и растений, однако их роль в инфекционной патологии человека стала предметом интенсивных исследований только с 1962 года, когда было доказано, что этиологическим агентом первичной пневмонии является микоплазма. В дальнейшем была установлена этиологическая связь нескольких видов микоплазм с различными заболеваниями дыхательных и мочеполовых путей.

Заболевания человека, вызываемые микоплазмами, объединяют в группу микоплазмозов, большая часть которых относится к заболеваниям урогениталь-ного тракта. В последнее время резко возросла частота хламидийной, вирусной, микоплазменной и смешанной инфекции, передающиеся главным образом половым путем, борьба с которыми представляет значительные трудности в связи с развивающейся устойчивостью к антибиотикам и особенностями ответных реакций организма.

Высокая инфицированность населения микоплазмами, широкий спектр заболеваний, вызываемый ими, заставляет исследователей все более внимательно изучать эту группу микроорганизмов. Лабораторная и клиническая диагностика, лечение и профилактика этих инфекций в настоящее время приобретает все более важное значение в современном здравоохранении.

Урогенитальные микоплазмы Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealy-ticum вызывают такие распространенные инфекции, как негонококковые уретриты, воспаления органов малого таза, эндометриты и бактериальные вагинозы. Они могут также вызывать преждевременные роды, рождения детей с малым весом и клиническими проявлениями заражения крови, болезнями респираторного тракта и неврологическими расстройствами. У микоплазм также как и у других микроорганизмов может проявляться антибиотикорезис-тентность за счет генетических мутаций или путем приобретения нового генетического материала. Поэтому при назначении антибиотикотерапии важным является проведение тестов на сравнительную чувствительность антибиотиков различных групп. Стандартизированными методами для определения антибио-тикочувствительности микоплазм являются только методы серийных разведений в агаре или в жидкой питательной среде. Диффузионный метод на дисках не может использоваться для Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum, так как эти культуры растут очень медленно и антибиотики успевают раньше распределиться в слое агара прежде чем колонии вырастут и дадут определенную зону ингибирования роста.

Предварительное определение антибиотикочувствительности при назначении лечения микоплазменных и уреаплазменных инфекций позволяет снизить удельный вес положительных результатов при повторном обследовании после курса антибиотикотерапии с 37 % до 7-8 %.

Целью лабораторной диагностики является идентификация возбудителей, вызывающих различные микоплазмозы, а также установление их чувствительности или устойчивости к антибактериальным средствам, используемым по общепринятым схемам терапии.

Разработка Тест-системы для идентификации и определения антибиотикочувствительности возбудителей урогенитальных микоплазмозов Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum и послужило объектом данного исследования.

Таким образом, цель настоящего исследования состоит в разработке тест-системы для идентификации и определения антибиотикочувствительности , возбудителей урогенитальных микоплазмозов: Mycoplasma hominis и Urea-plasma urealyticum. Тест-система должна удовлетворять следующим условиям: чувствительность селективность, надежность, быстрота и простота исполнения.

Для достижения поставленной цели были сформулированы следующие задачи:

• Поиск подходящей системы индикаторов, улучшающей наглядное определение результатов качественной реакции на рост Mycoplasma hominis.

• Поиск и определение концентрации антибиотиков для подавления роста посторонней бактериальной и грибной микрофлоры.

• Изучение чувствительности возбудителей урогенитальных микоплазмозов Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum к антибиотикам разных групп в исспытаниях in vitro.

• Определение минимальной подавляющей концентрации (МПК) антибиотиков: 2-х тетрациклинов (тетрациклин, доксициклин), 2-х фтор-хинолонов (офлоксацин, ципрофлоксацин), 2-х макролидов (эритромицин, кларитромицин), линкозамида (клиндамицин), аминогли-козида (гентамицин) - для ингибирования роста урогенитальных микоплазм Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum.

• Изучение сравнительной активности антибиотиков разных групп к Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum.

• Проведение сравнительной оценки эффективности разработанной Тест-системы для идентификации и определения антибиотикочувствительности возбудителей урогенитальных микоплазмозов Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum при сравнении с зарубежным аналогам.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Рока Вильчес Вашингтон

5 ВЫВОДЫ

1. Разработана усовершенствованная питательная среда для идентификации Mycoplasma hominis, имеющая следующие преимущества:

• оптимальное значение рН для роста Mycoplasma hominis;

• новая система индикаторов, обуславливающая четкий цветовой переход для облегчения визуального наблюдения результатов;

• более высокая селективность питательной среды, обеспеченная добавлением антибиотиков.

2. Изучение активности антибиотиков и чувствительности возбудителей урогенитальных микоплазмозов показали, что наиболее активными в отношении как Mycoplasma hominis, так и Ureaplasma urealyticum является группа тетрациклинов и фторхинолонов. В отношении Mycoplasma hominis наиболее активным является клиндамицин, а наименее активным - гентамицин. В отношении Ureaplasma urealyticum активность макролидов сравнима с активностью тетрациклинов и фторхинолонов, а наиболее активным проявил себя гентамицин, в то время как наименее активным оказался клиндамицин. Однако нужно отметить, что процент появления штаммов устойчивых к макролидам, клиндамицину и гентамицину высок.

3. Обработка полученных данных по МПК антибиотиков позволила нам создать диагностическую тест-систему для идентификации и определения антибиотико-чувствительности возбудителей урогенитальных микоплазмозов Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum в виде экспресс-диагностикума с использованием лиофильно-высушенной питательной среды и сорбированных антибиотиков в одноразовых полистироловых стрипах от разборных планшетов.

4. По проведенной оценке эффективности разработанной нами тест-системы МИКОПЛАЗМА-АЧ, при сравнении с итальянским набором GENITAL SYSTEM можно сказать, что наша Тест-система по чувствительности и специфичности вполне соответствуют общепринятым в практике микробиологических исследований стандартам и с успехом может применяться для обнаружения, идентификации и определения чувствительности к антибиотикам урогенитальных микоплазм - Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum. 5. Результаты исследования и разработанная тест-система «МИКОПЛАЗМА-АЧ» внедрены в линию производства диагностических препаратов Отдела новых технологий ФГУН «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Пастера» (Приложение А).

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Рока Вильчес Вашингтон, 2005 год

1. Автушенко С.С. Идентификация микоплазм, выделенных из мочеполового тракта женщин// Лабораторное дело.- 1975.- № 5.- С. 310-312.

2. Адаскевич В.П. Инфекции, передаваемые половым путем: Руководство для врачей М.: Мед. кн.; Н.Новгород: НГМА, 1999.-416 с.

3. Антибактериальная терапия: практическое руководство/ Под ред. Л.С. Страчунского, Ю. Б. Белоусова, С. Н. Козлова- М.: Медицина, 2000192 с.

4. Асонов Н.Р. Практикум по микробиологии — М.: Агропромиздат, 1988.155 с.

5. Асратян А.А. Распространение М. hominis инфекции и ее значене в патологии респираторного тракта: Автореф. дис. . канд. мед. наук/ М.-1977.- 20 с.

6. Асратян А.А., Козлова О. В. Серо-эпидемиологическая характеристика инфекции, вызванной М. hominis// Микоплазмы и микоплазмозы: Сб. науч. тр./ М.- 1985.- С. 31-35.

7. Башмакова М.А., Кошелева Н.Г., Калашникова Е.П. Инфекция и бактериальная колонизация урогениталий у беременных, влияние на течение беременности, плод и новорожденного ребенка// Акушерство и гинекология.- 1995.- №1 С. 15-18.

8. Бойцов А.Г., Ластовка О.Н., Горин А.А. Вопросы качества при лабораторной диагностике урогенитальных инфекций// Клиническая лабораторная диагностика.- 2000.-№2 С. 37-38.

9. Бриан Л.Е. Бактериальная резистентность и чувствительность к химио-препаратам,- М.: Медицина, 1984.- 274 с.

10. Венерические болезни: Руководство/ А.А. Антоньев, Р.С. Бабаянц, Т.В. Васильев и др.; Под пед. O.K. Шапошникова.- М.: Медицина, 1991.- 544 с.

11. Возбудители инфекций урогенитального тракта и их чувствительности к различным группам антибактериальных препаратов/ А.Ф. Мороз, В.А. Макарова, Е.Е. Бабаева и др.// Клиническая лабораторная диагностика-2001.-№ П.-С. 37-38.

12. Выявление тетрациклин и эритромицинустойчивых штаммов микоплазм с помощью ПЦР/ С.В. Соловьева, Е.Г. Цой, Н.А. Зигангирова и др.// Ж-л микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии 1998.- № 6 - С. 3-7.

13. Гамова Н.А. Чувствительность к лекарственным препаратам U. urealyticum, персистирующих в организме больных при хронических воспалительных заболеваниях урогенитального тракта// Ж-л микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии 2003.- №4 - С. 81-85.

14. Горина Л.Г., Гончарова С.А., Игумнов А.В. Лабораторная диагностика микоплазмозов человека// Вестник АМН СССР.- 1991.- № 6.- С. 44-47.

15. Диагностика хламидийной и гарднерезной инфекции у больных с острыми гинекологическими заболеваниями/ Е.Б. Лазарева, С.С. Селицкая, Н.И. Тихомирова и др.// Клиническая лабораторная диагностика 1997.-№3.-С. 21-23.

16. Дмитреев Г.А. Урогенитальные бактериальные инфекции: диагностика// Инфекции и антимикробная терапия — 2003— Т.5, №1— С.5-11.

17. Дюскалиева Д.У. Экспресс-индикация Mycopasma pneumoniae с помощью антительных эритроцитарных диагностикумов// Лабораторное дело.-1987.-№7.- С. 325-327.

18. Ефремова И.И., Козлова О.В., Якоби Г.В. Сравнительная характеристика инфекции, вызванной М. hominis// Микоплазмы и микоплазмозы: Сб. науч. тр./ М.- 1985.- С. 35-43.

19. Злыдников Д.М., Казанцев А.П., Шаламова М.Г. Микоплазмоз человека.-Л.: Медицина, 1975.- 232 с

20. Индикаторы: В 2 т.- Т. 1; Под ред. Э. Бишоп; Пер с англ. Под ред. И.А. Марова.- М.: Мир, 1976.- 496 с.

21. Информативность методов лабораторной диагностики инфекций урогенитального тракта микоплазменной этиологии/ В.Е. Маликов, А.А. Бурова, О.Н. Зайцева и др.// Кремлевская медицина. Клинический вестник.- 2001.- №1.- С. 53-55.

22. Козлова В.И., Пухнер А.Ф. Вирусные, хламидийные и микоплазменные заболевания гениталий: Руководство для врача.- М.: Авицена ЮНИТИ, 1995.-317с.

23. Кругликов В.Т. Использование реакции непрямой иммунофлюорес-ценции в диагностике инфекции, вызванной Mycoplasma pneumoniae// Ж. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии.- 1989.- № 2.- С. 75-79.

24. Лабинская А.С. Микробиология с техникой микробиологических исследований.- М.: Медицина, 1978 394 с.

25. Лабораторная диагностика микоплазмоза и уреаплазмоза у урологических и гинекологических больных/ Ю.В. Вульфович, И.В. Раковская, Н.А. Гамова и др.// Ж-л микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии.-1995.-№5.- С. 97-100.

26. Ленинджер А. Биохимия: Молекулярные основы структуры и функций клетки/ Пер с англ. Под ред. А.А. Баева, Я.М. Варшавского.- М.: Мир, 1974.- 1236 с.

27. Лечение вильпрафеном и доксициклином микоплазменных и уреаплаз-менных инфекций/ Н.Н. Захаревич, Л.Н. Новикова, Е.А. Михнина и дрю// Акушерство и гинекология — 2002.- №2 С. 55-56.

28. Лурье Ю.Ю. Справочник по аналитической химии: 5-е изд., перераб. И доп.-М.: Химия, 1979.-489 с.

29. Медицинская лабораторная диагностика (программы и алгоритмы). Справочник/ Под ред. А.И. Карпищенко. — Спб.: Интермедика. — 1997. -304с.

30. Медицинская лабораторная диагностика (програмы и алгоритмы). Справочник/ под ред. А.И. Карпищенко.- Санкт-Петербург: Интермедика, 1997.-304 с.

31. Медицинская микрбиология/ Под пед. В.И. Покровкого, В.А. Поздеева.-М.: ГЭОТАР Медицина,- 1999.- 1200 с.:ил.

32. Мейнелл Дж., Мейнелл Э. Экспериментальная микробиология (Теория и практика)/ Под ред. А.С. Кривиского, В.Ю. Урбаха.- М.: Мир- 1967348 с.

33. Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) новое слово в диагностике инфекционных заболеваний/ А.А. Бонецкий, P.P. Тухватшин, А.И. Филипченко, A.M. Митина// Здравоохранение Кыргыстана - 1999.- №1-С. 42-45.

34. Механизмы персистенции урогенитальных микоплазм и методы их выявления/ И.В. Раковская, Л.Г. Горина, Н.А. Зигангирова и др.// Ж-лмикробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии.- 2000.- № 4 (прил.).-С. 47-52.

35. Микоплазмы./ Борхсениус С.Н., Чернова О.А., Чернов В.М., Вонский М.С.- СПб.: Наука, 2002.- 320 с.

36. Определитель бактерий Берджи в 2т./Под ред. Дж. Хоулта, Н. Крига, П. Снита и др.; Пер с англ. Под ред. Г.А. Заварзина.- М.: Мир, 1997.-800с.:ил.

37. Опыт применения различных методов диагностики респираторного микоплазмоза/ И.В. Раковская, Л.Г. Горина, Н.А. Зигангирова и др.// Ж-л микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии.- 2002.- № 5.— С. 5762.

38. Перламутров Ю.Н., Чернова Н.И., Савостьянова Н.Ю. Опыт применения Спафло при лечении урогенитального микоплазмоза и уреаплзамоза// Антибиотики и химиотерапия.- 2002 — Т.47, № 9.— С. 22-23.

39. Персистенция микоплазм в инфицированном организме: наблюдения, причины и механизмы, диагностика/ С.В. Прозоровский, И.В. Раковская, Л.Г. Горина и др.// Ж-л микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии.- 1997.- № 4.- С. 47-51.

40. Покровский В.Н. Антибиотики и бактерии. М.: Знание, 1990. - 66с.

41. Применение ПЦР для выявления тетрациклинустойчивых штаммов урогенитальных микоплазм/ С.В. Соловьева, Е.Г. Цой, Н.А. Зигангирова и др.// Клиническая лабораторная диагностика.- 2000.- № 1.- С. 43-46.

42. Прозоровский Н.С. Микоплазмозы, М.: Медицина.- 1978.- 74 с.

43. Прозоровский С.В., Покровский В.И., Васильева В.И. Микоплазма пневмонии. Инфекция.-М.: Медицина, 1978.-312 с.

44. Прозоровский С.В., Раковская И.В., Вульфович Ю.В. Медицинская микоплазмология.- М.: Медицина, 1995.- 288 с.

45. Профилактика невынашивания беременности при урогенитальной инфекции у супругов/ Н.В. Башмакова, Л.П. Заварзина, Л.К. Глазкова, В.Д. Головко// Акушерство и гинекология.- 1998.- №4- С. 15-17.

46. Раковская И.В., Горина Л.Г. Лабораторная диагностика микоплазмозов человека// Клиническая лабораторная диагностика 2000.- № 8- С. 5053.

47. Ремпель Е.Г., Шаманин В.А. Сравнение методов разных ПЦР-тестов для выявления Clamytia trachomatis, U. urealyticum и M. hominis у женщин с нарушениями репродуктивной функции// Ж-л микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии.- 2000.- № 6 — С. 76-78.

48. Роль микоплазмы пневмонии при менингитах и менингоэнцефалитах/ В.В. Кононенко, А.А. Руденко, В.Т. Кругликов, Л.Д. Жаркова// Врачеб. дело.- 1987,- №3.- С. 108-111.

49. Саламова Р.Э. Разработка и сравнительная оценка микрометодов лабораторной диагностики микоплазмозов человека: Автореф. дис. . канд. мед. наук/ М. 1986.- 20 с.

50. Семенова В.А., Стеценко О.Г., Баймуратова М.А. Экспресс-диагностика инфекции Mycoplasma pneumoniae с помощью реакции встречного иммуноэлектрофореза.// Лабораторное дело 1986.- № 5.- С. 291-293.

51. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования/ Под ред. М.О. Биргера М.: Медицина, 1982.- 464 с.

52. Тимаков В.Д., Каган ГЯ. L-формы бактерий и семейство Mycoplasmataceae в потологиию- М.: Медицина, 1973.- 392 с.

53. Ускоренная лабораторная диагностика микоплазмы гоминис с помощью антительного эритроцитарного диагностикума/ М.С. Байжомартов, Г.У. Дюскалиева, М.Г. Булегенова, О.Г. Андрусева// Здравоохранение Казахстана.- 1991.-№8.- С. 37-39.

54. Черкес Ф.К., Богоявленская Л.Б.,Бельская Н.А. Микробиология/ Под ред. Ф.К. Черкес-М.: Медицина, 1986.- 512 с.

55. Чувствительность к антибиотикам урогенитальных микоплазм и уреа-плазм/ И.Л. Жилина, Н.М. Шустрова, Е.Н. Денисова, Л.И. Зыкина// Клиническая лабораторная диагностика.- 1998.- №9- С. 12.

56. Экспресс-диагностика инфекции Mycoplasma pneumoniae с помощью реакции встречного иммуноэлектрофореза/ В.А. Семенова, О.Г. Стецен-ко, М.А. Баймуратова, М.С. Байжомартов// Лабораторное дело.- 1986.- № 5.-С. 291-293.

57. Экспресс-индикация Mycoplasma pneumoniae с помощью антительных диагностикумов/ М.С. Байжомартов, В.А. Шамардин, Г.У. Дюскалиева и др.// Лабораторное дело.- 1982,- № 6.- С. 49-51.

58. Юцковская Я.А., Юцковский А.Д., Беседнова Н.Н. Чувствительность к антибиотикам штаммов U. urealyticum, выделенных на территории Приморского края.// Антибиотики и химиотерапия 2002,— Т. 47 № 3 - С. 14-17.

59. Afecciones genitourinarias у micoplasmas/ J. A. Sanchez Hernandez, J. A. Rivera Tapia, S. A. Cortez Martinez у col.// Rev. Мех. Patol. Clin.- 2003.- V. 50, №2.- P. 71-76.

60. Barry A.L., Thornberry C. Susceptibility Tests: Diffusion Test Procedures// Manual of clinical microbiology. 5th. ed.-Washington D. C.: American Society for Microbiology, 1991-P. 1117-1125.

61. Bebear C., Bouanchaud D. H. A review of the in-vitro activity of quinupristin/dalfopristin against intracellular pathogens and mycoplasmas// Journal of Antimicrobial Chemotherapy.- 1997.- № 39.- Suppl. A.- P. 59-62.

62. Bebear C., Robertson J. Determination of minimal inhibitory concentration// Molecular and diagnostic procedures in mycoplasmology.- Volume II: Diagnostic Procedures / J. G. Tully, S. Razin. Eds.- CALIFORNIA: Academic Press, 1996.- P. 189-199.

63. Bygdeman S. M., Mardh P. A. (1983). Antimicrobial susceptibility and susceptibility testing of Mycoplasma hominis: a review// Sexually transmited diseases.- 1983.- № 10, Suppl. 4.- P. 366-370.

64. Cassel G. H., Gambill G., Duffy L. ELISA in respiratory infections of humans// Molecular and diagnostic procedures in Mycoplasmology.- New York: ACADEMIC PRESS, 1996.- P. 123-136.

65. Characterization of Mycoplasma hominis mutations involved in resistance to fluoroquinolones/ С. M. Bebear, J. M. Bove, C. Bebear, J. Renaudin.// Antimicrobial Agents and Chemotherapy.- 1997.- № 41.-P. 269-273.

66. Cohen M. A., Huband M. D. In vitro susceptibilities of Mycoplasma pneumoniae, Mycoplasma hominis, and Ureaplasma urealyticum to clinafloxacin, PD 131628, ciprofloxacin and comparator drugs// J. Antimicrob. Chemother.-1997.- №40.- P. 308-309.

67. Color Test for the Measurement of Antibody to T-Strain Mycoplasmas/ R. H. Purcell, D. Taylor-Robinson, D. Wong, R. M. Chanock// Journal of Bacteriology.-1966.- V. 92, № 1.- P 6-12.

68. Comparative Activities of Telithromycin (HMR 3647), Levofloxacin and Other Antimicrobial Agents against Human Mycoplasmas/ C.M. Bebear, H. Renaudin, A. Bryskier, C. Bebear// Antimicrobial agents and Chemotherapy.— 2000.-V. 44, № 7.-P. 1980-1982.

69. Comparison of Commercially Available Media for Detection and Isolation of Ureaplasma urealyticum and Mycoplasma hominis/ N. L. Broitman, C.M. Floyd, C. A. Johnson, E.M. Peterson// Journal of Clinical Microbiology.-1992.- V. 30, №> 5.- P. 1335-1337.

70. Comparison of methods for the isolation of genital mycoplasmas from men/ P. I. Tarr, Y. H. Lee, S. Alpert et al. //J. Infect. Dis.-1976.- № 133.- P. 419-423.

71. Cooksey R.C. Mechanisms of Resistance to Antimicrobial Agents.// Manual of clinical microbiology. 5th. ed.-Washington D. C.: American Society for Microbiology, 1991.- P. 1099-1104.

72. Detection of Mycoplasma hominis and Ureaplasma urealyticum in women sexually active or not/ C. Gil-Juarez, B. A. Calderon, J. Montero et al.// Rev. Latinoam. Microbiol.- 1996.- V. 38, № 2.- P. 81-88.

73. Evaluation of the E-test for susceptibility testing of Mycoplasma hominis and Ureaplasma urealyticum/ E. Dosa, E. Nady, W. Falk et al.// Journal of Antimicrobial Chemotherapy.- 1999.- № 43 P.575-578.

74. Falk, L., Fredlund H., Jensen, J. S. Tetracycline treatment does not eradicate Mycoplasma genitalium!I Sex. Transm. Infect.- 2003.- V. 79.- P. 318-319.

75. Freudt E. A., Edward D. G. Classification and Taxonomy// The Mycoplasmas Vol. 1.- London: ACADEMIC PRESS LTD., 1979.- P. 23-28.

76. In vitro activity of BAY 12-8039, a new fluoroquinolone, against Mycoplasmas/ С. M. Bebear, H. Renaudin, A. Boudjadja, C. Bebear// Antimicrobial Agents and Chemotherapy.- 1998.- V. 42, № 3.-P. 703-704.

77. In vitro activity of grepafloxacin, a new fluoroquinolone, against mycoplasmas/ C.M. Bebear, H. Renaudin, T. Schaeverbeke et al.// Journal of Antimicrobial Chemotherapy.- 1999.- № 43- P. 711-714.

78. In vitro Susceptibilities of Mycoplasmas and Ureaplasmas to New Macrolides and Aryl-Fluoroquinolones/ К. B. Waites, G. H. Cassel, К. C. Canupp, P. B. Fernandes// Antimicrobial Agents and Chemotherapy.- 1988.- V. 32, № 10.- P. 1500-1502.

79. Is genital colonization with Mycoplasma hominis and Ureaplasma urealyticum associated with prematurity or low birth weight?/ R. Romero, M. Mazor, E. Oyarzun et al.// Obstetrics and Ginecology.- 1989.- № 73.- P. 532-536.

80. Isolation of genital mycoplasmas from blood obtained shortly after vaginal delivery/ W. M. McCormack, B. Rosner, Y. H. Lee et al.// Lancet.-1975.- № 1.- P. 596-599.

81. Isolation of Mycoplasma hominis from blood cultures in patients with post partum fever/ R. J. Wallace, S. Alpert, K. Browne et al.// Obst. Gynecol.-1978.- № 51.-P. 181-185.

82. Isolation of Mycoplasma pneumoniae from the human urogenital tract/ M. Goulet, R. Dular, J.G. Tully et al.// J. Clin. Microbiol.- 1995.- V. 33.- P. 2823-2825.

83. Jensen J. S., Borre M. В., Dohn B. Detection of Mycoplasma genitalium by PCR Amplification of the 16S rRNA Gene// Journal of Clinical Microbiology.-2003.-V. 41, № l.-P. 261-266.

84. Kenny G. E., Cartwright F. D. Effect of pH, inoculum size, and incubation time on the susceptibility of Ureaplasma urealyticum to erythromycin in vitro!I Clinical Infectous Diseases.- 1993.-№ 17-P. 215-218.

85. Kitson K., Wright К. C. The in vitro simulation of Mycoplasma hominis isolation using supplemented culture media in the BACTEC 9000 series blood culture system// British J. Of Biomedical Science.- 1998.- V. 55, № 1.- P. 9-12.

86. Krausse D. C., Taylor-Robinson D. Mycoplasmas which infect humans// Mycoplasmas: Molecular Biology and Pathogenesis! 417-445.

87. Manchee R. J., Taylor-robinson D. Enhanced Growth of T-Strain Mycoplasmas with N-2- Hydroxyethylpiperazine-N' -2-Ethanesulfonic Acid Buffer// Journal of Bacteriology.- 1969.- V. 100, №> l.-P. 78-85.

88. McCormack W.M. Susceptibility of mycoplasma to antimicrobial agents. Clinical Implications.// Clin. Infect. Dis.- 1993.- № l.-P. 200-201.

89. McCoy R.E., Caudwell A., Chang C.J. Plant diseases associated with mycoplasma-like organisms// The Mycoplasmas./ Eds R.F. Whitcomb, J.G. Tully.- New York: ACADEMIC PRES, 1989.- Vol.5.- P. 545-560.

90. Mechanisms of Macrolide resistance in Ureaplasma urealyticum: a study on collection and clinical strains// G. Palu, S. Valisena, M. F. Barile, G. A. Melony// European Journal of Epidemiology.- 1989.- № 5.- P. 146-153.

91. Merino L. A., Ronconi M. C., Bojanich M. V. Presencia de micoplasmas urogenitales en mujeres en edad fertil// Enfermedades Infecciosas у Microbio-logia Clinica.- 1997.- V. 15, № 10.- P. 566-567.

92. Methodologic investigations and prevalence of genital mycoplasmas in pregnancy/ P. Braun, J. O. Klein, Y. H. Lee, E. H. Kass// J. Infect. Dis.- 1970.- № 121.-P. 391-400.

93. Mycoplasmas: molecular biology and pathogenesis./ J. Maniloff, R.N. McElhaney, L.R. Finch, J.B. Baseman.- Washington: ACADEMIC PRESS, 1992.- 654 p.

94. Persistence of Mycoplasma hominis after therapy: importance of tetracycline resistance and of coexisting vaginal flora/ L. A. Koutsky, W. E. Stamm, R. C. Brunham et al.ll Sexually transmited diseases.- 1983.- № 10, Suppl. 4.-P. 374381.

95. Renaudin H., Bebear С. Evaluation des SYSTEMES Mycoplasma Plus et SIR Mycoplasma pour la detection quantitative et l'etude de la sensibilite aux antibiotiques des mycoplasmes genitaux// Patol. Biol. (Paris).- 1990.- V. 38, № 5.- P. 431-435.

96. Renaudin H., Tully J. G., Bebear C. In Vitro Susceptibilities of Mycoplasma genitalium to Antibiotics// Antimicrobial Agents and Chemotherapy.- 1992.-V. 36, № 4.- P. 870-872.

97. Roberts M. C. Antibiotic resistance// Mycoplasmas: Molecular Biology and Pathogenesis/ J. Maniloff Ed.- Washington D. C.: American Society for Microbiology, 1992.- P. 513-523.

98. Roberts, M. C., Hillier, S. L. (1990). Genetic basis of tetracycline resistance in urogenital bacteria// Antimicrobial Agents and Chemoterapy.- 1990.- № 34.- P. 261-264.

99. Robertson J. A. Bromothymol blue Broth: Improved Medium for Detection of Ureaplasma urealyticum (T-Strain Mycoplasma)// Journal of Clinical Microbiology.- 1978.- V. 7, № 2. P. 127-132.

100. Robertson J. A., Alfa M., Boatman E. S. Morphology of the cells and colonies of Mycoplasma hominis// Sex. Transmit. Dis- 1983.- V. 10- P. 232-239.

101. Rodwell A. W., Mitchell A. Nutrition, Growth and reproduction Mycoplasmas// The Mycoplasmas Vol. 1.- London: ACADEMIC PRESS LTD., 1979.-P. 67-78.

102. Rosengarten R., Wise K. Phenotypic switching in mycoplasmas phase variation of diverse surface lipoproteins// Science.- 1990.- Vol. 247 P. 316-318.

103. Sahm D.F., Washington J.A. Antibacterial Susceptibility Tests: dilution Methods// Manual of clinical microbiology. 5th. ed. .-Washington D. C.: American Society for Microbiology, 1991P. 1105-1116.

104. Senterfit Lawrence B. Antibiotic sensitivity testing of Mycoplasmas// Methods in Mycoplasmology Vol. 2.- New York: ACADEMIC PRESS, 1983.- P. 397401.

105. Shepard M. С., Masover G. К. Special features of Ureaplasmas// The Mycoplasmas Vol. 1.- London: ACADEMIC PRESS LTD., 1979.- P. 583-589.

106. Small repeating units within the Ureaplasma urealyticum MB antigen gene encode serovar specificity and are associated with antigen size variation/ X. Zheng, L.J. Teng, H.L. Watson et al.// Infect. Immun.- 1995.- V. 63.- P. 891898.

107. Susceptibilities of genital mycoplasmas to the newer quinolones as determined by the agar dilution method/ G. E. Kenny, Т. M. Hooton, M. C. Roberts et al.// Antimicrobial Agents and Chemoterapy.- 1989.- № 33.- P. 103-107.

108. Susceptibility of genital mycoplasmas to antimicrobial agents/ P. Braun, J. O. Klein, E. H. Kass et al.// Appl. Microbiol.- 1970.- № 19.- P. 67-70.

109. Taylor-Robinson D. and Furr P. M. Clinical antibiotic resistance of Ureaplasma urealyticum!/Pediatric Infectious diseases.- 1986.- № 5, Suppl. 6.-P. 335-337.

110. Taylor-Robinson D. Metabolism inhibition tests// Methods in Mycoplasmology: Mycoplasma characterization Vol. I/ S. Razin, J. G. Tully Eds.- London: Academic Press, 1983.- P. 411-417.

111. Taylor-Robinson D., Addey J. P., Goodwin C. S. Comparison of techniques for the isolation of T-strain mycoplasmas// Nature (London).- 1969.- № 222.- P. 274-275.

112. Taylor-Robinson D., Bebear C. Antibiotic susceptibilities of mycoplasmas and treament of mycoplasmal infections// Journal of Antimicrobial Chemotherapy.- 1997.- № 40.- P. 622-630.

113. Taylor-Robinson D., Furr P.M. Recovery and identification of human genital tract mycoplasmas// Isr. J. Med. Sc.- 1981.- № \ p. 648-653.

114. Taylor-Robinson D., Horner P. J. The role of Mycoplasma genitalium in nongonococcal urethritis// Sex. Transm. Inf.- 2001.-V. 77.- P. 229-231.

115. Taylor-Robinson D., McCornack W.M. Mycoplasmas in Genitourinary Infections// The Mycoplasmas Vol. 2.- London ACADEMIC PRESS LTD., 1979.- P. 307-366.

116. Taylor-Robinson D., Sobeslavsk O., Chanock R. M. Relationship of Mycoplasma pneumoniae to Other Human Mycoplasma Species Studied by Gel Diffusion//Journal of Bacteriology.- 1965.- V. 90, № 5,- P. 1432-1437.

117. Taylor-Robinson D., Somerson N. L., Turner H. C. Serological relationships among human mycoplasmas as shown by complement-fixation and gel diffusion// J. Bacterid.- 1965.- V. 85, № 1.- P. 1261-1273.

118. Tetracycline-resistant Mycoplasma hominis strains contain streptococcal tetM sequences/ M.C. Roberts, L.A. Koutsky, K.K. Holmes et al.// Antimicrob Agents Chemother.- 1985.- № 28.-P. 141-143.

119. The association of Mycoplasma hominis with arthritis/ D. Taylor-Robinson, B. J. Thomas, P. M. Furr, A. C. KeatII Sexually transmited diseases.-1983.- № 10, Suppl. 4.- P. 341-344.

120. The Mycoplasmas: In 3 volumes.- Vol. 1: Cell Biology.- 560 p.- Vol. 2: Human and Animal Mycoplasmas.- 494 р./ M. F. Barile, S. Razin, J. G. Tully, R. F. Whitcomb.- London: ACADEMIC PRESS LTD., 1979.

121. Thornberry C. Antimicrobial Susceptibility Testing: General Considerations.// Manual of clinical microbiology. 5th. ed.-Washington D. C.: American Society for Microbiology, 1991.- P. 1059-1064.

122. Tully Joseph G. Molecular and diagnostic procedures in Mycoplasmology: diagnostic procedures.- New York: ACADEMIC PRESS, 1996.- 427 p.

123. Tully Joseph G., Razin Shmuel Methods in Mycoplasmology: In 2 Volumes.-Vol. 1: Mycoplasma Characterization.- 504 p.- Vol. 2: Diagnostic Mycoplasmology.- 440 p.- New York: ACADEMIC PRESS, 1983.

124. Ureaplasma urealyticum role in prematurity and disease in newborns/ G.H. Cassell, K.B. Waites, H.L. Watson et al.// Clin. Microbiol. Rev.- 1993- V. 6.-P. 69-87.

125. Viabilidad de micoplasmas de interes medico en presencia de diferentes antibioticos/ J. A. Rivera Tapia, O. Romero Arenas, M. del R. Santellan Olea у col.// Rev. Fac. Med. UNAM.- 2001.- V. 46, № 3.- P. 97-100.

126. Waites K.B., Canupp K.C., Kenny G. E. In Vitro Susceptibilities of Mycoplasma hominis to Six Fluoroquinolones as Determined by E TestII Antimicrobial Agents and Chemotherapy.- 1999.- V. 43, № 10.- P. 2571-2573.

127. Whitfield C. Bacterial extracellular polysaccharides.// Canad. J. Microbiol-1988.-V. 34.-P. 415-420.

128. Yao J. D., Moellering R. C. Antibacterial Agents.// Manual of clinical microbiology. 5th. ed.-Washington D. C.: American Society for Microbiology, 1991.-P. 1065-1098.