Разработка технологии получения биопрепарата для переработки кератинсодержащих отходов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 05.18.04, кандидат наук Линник, Анна Игоревна

• Линник, Анна Игоревна
• кандидат наук
• 2015

Оглавление диссертации кандидат наук Линник, Анна Игоревна

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

1. АНАЛИТИЧЕСКИЙ ОБЗОР

1.1 .Состав и свойства кератинов

1.2.Анализ штаммов микроорганизмов, содержащих ген кератиназы

1.3 Способы технологической переработки кератинсодержащего сырья

1.4. Заключение по обзору литературы и задачи исследования

2. МЕТОДИКА ВЫПОЛНЕНИЯ РАБОТЫ

2.1. Организация выполнения работы

2.2. Объекты исследования

2.3. Методы исследований

3.РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Идентификация штамма, полученного из природного источника, и изучение его свойств

3.2. Изучение влияния технологических параметров культивирования на кератинолитическаую активность Bacilluspumilus

3.3. Подбор оптимального состава питательной среды для культивирования штамма Bacillus pumilus

4. ПРАКТИЧЕСКАЯ РЕАЛИЗАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

4.1 .Технологическая схема по производству биопрепарата для переработки

отходов птицеперерабатывающей промышленности в кормовую добавку

4.2.Состав, свойства и продолжительность хранения биопрепарата

4.3. Экономическая эффективность выработки биопрепарата

ВЫВОДЫ И РЕЗУЛЬТАТЫ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ

ПРИЛОЖЕНИЯ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка технологии получения биопрепарата для переработки кератинсодержащих отходов»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность работы. Рост численности населения планеты и урбанизация являются причинами увеличения количества и разнообразия отходов, образуемых промышленными и сельскохозяйственными предприятиями. На 2002 год количество отходов оценивалось в 12 млрд. тонн, из которых 11 млрд. тонн составляли промышленные отходы и 1,6 млрд. тонн - твердые бытовые отходы. К 2025 году аналитики предполагают увеличение количества отходов до 90 млрд. тонн [67,145].

Аграрно-животноводческий комплекс в современных условиях продолжает быть важным загрязнителем почвы и других элементов окружающей среды: отходы сточных вод животноводческих комплексов, ферм и птицефабрик, использование ядохимикатов и пестицидов. Существуют трудности осуществления контроля сельскохозяйственных объектов, разбросанных на обширных территориях. Состояние почвы и всей окружающей среды в сельской местности, согласно государственным докладам об охране окружающей среды, остается тревожным, ряд регионов обладает признаками зон чрезвычайной экологической ситуации или экологического бедствия [16, 156].

В тоже время отходы агропромышленного комплекса являются ценным сырьем при рациональном использовании и вторичной переработке могут служить источниками для получения жирных кислот, биодизеля, аминокислот, белка, новых высокопитательных продуктов. Животноводство, несомненно, является основным источником биологически полноценного белка в питании населения высокоразвитых стран. Не умаляя роли и значения производства говядины, свинины, баранины, молока, рыбы, особое внимание во всем мире уделяется роли птицеводства в решении проблем обеспечения населения белком животного происхождения [111, 161].

Вклад птицеводческой отрасли в производство мяса в России составляет 1,2 млн. т в год. При этом образуется 0,4 млн. тонн отходов потрошения птицы, что создает значительную проблему для перерабатывающей отрасли и требует решения следующих задач: обеспечение биологической безопасности; обеспечение экологической безопасности; производство полезных для человека продуктов (белков, жира, биологически активных веществ и т.д.);производство энергии [6].

Среди всех отходов потрошения птицы наибольший интерес представляет перопуховое сырье, в котором содержится около 65% кормового белка. Решение проблемы перевода основного белка пера в усвояемую форму имеет первоочередное значение как с позиции мобилизации резервов животного белка, так и с точки зрения охраны окружающей среды [42].

Для успешного развития птицеводства и животноводства одним из определяющих факторов является создание кормовой базы. Основой кормовой базы служит растениеводство. Вместе с тем, кормам животного происхождения отводится важная роль в обеспечении потребности незаменимыми аминокислотами, прежде всего потребности растущих организмов и поддержании высокой продуктивности животных и птицы. При этом решающая роль в развитии и укреплении кормовой базы отводится созданию новых кормовых смесей и добавок, улучшению качества кормов. Рост производства мяса в стране требует дополнительных объемов комбикорма для откорма сельскохозяйственных животных и птицы. Уменьшить потребность в комбикормах можно за счет повышения его питательной ценности при использовании кормов животного происхождения[61].

Таким образом, важным направлением современной биотехнологии являются исследования, направленные на расширение возможностей переработки ке-ратинсодержащего сырья с целью обеспечения экологичности производств за счет создания безотходных и малоотходных технологий при максимальном вовлечении побочных продуктов переработки в основное производство. В связи с этим актуальны исследования, направленные на использование ферментативных процессов переработки кератинсодержащего сырья, в том числе с применением ре-комбинантных штаммов микроорганизмов [33].

На данном этапе технологического прогресса наибольший интерес представляет процесс микробного ферментативного гидролиза сырья. При ферментативном гидролизе максимально сохраняется питательная ценность получаемых продуктов, значительно повышаются их растворимость и усвояемость [127].Ферментативный гидролиз позволяет сохранить полный набор аминокислот, находящихся в составе белков.

Многие широко распространённые микроорганизмы секретируют значительное количество протеолитических биокатализаторов в окружающую среду, что значительно облегчает задачу их выделения и очистки. Возможность управления образованием ферментов за счёт подбора соответствующей питательной среды и условий культивирования позволяет не только увеличить выход протеолитических ферментов, но и получать ферментные препараты с определёнными свойствами. Методы селекции и генной инженерии значительно увеличивают возможности целенаправленного биосинтеза ферментов. Существенна способность микроорганизмов вырабатывать ферменты, уникальные по своей субстратной специфичности (кератиназы, коллагеназы, эластазы) [35].

Более глубокое знание биологических процессов, основанных на законах микробиологии и их применение в технологии утилизации птицеводческих отходов, позволит полнее и с большим эффектом использовать закономерности протекания процессов биоферментации [45].

Ферментативный гидролиз кератинов приобретает большое значение в связи с возможностью создания на его основе различных белковых добавок и гидро-лизатов не только кормового, но и пищевого значения. В связи с этим открытие высокоэффективных продуцентов и производство на их основе ферментных препаратов приобретает чрезвычайно актуальную задачу [51].

Степень разработанности. Вопросам переработки вторичных сырьевых ресурсов мясной промышленности на пищевые и кормовые цели посвящены работы Л.В.Антиповой, В.Г. Волика, И.А. Глотовой, Г.В. Гуринович, А.И. Жаринова, Г.П. Казюлина, Г.И. Касьянова, Л.С. Кудряшова, А.Б. Лисицына, О.С. Осминина,

В.М. Позняковского, H.H. Потипаевой, И.А. Рогова, В.А. Тутельяна, Ч.Ю. Шам-ханова, и др.

Цели и задачи исследований. Целью работы является изучение микроорганизмов, выделенных из естественной среды обитания и разработка технологии получения биопрепарата на их основе для переработки кератинсодержащих отходов птицеперерабатывающей промышленности.

Для достижения поставленной цели сформулированы основные задачи исследований:

- исследовать генетические, фенотипические особенности и биохимические свойства штамма Bacillus pumilus-,

- изучить влияние технологических параметров культивирования на ферментные системы штамма Bacillus pumilus',

- подобрать оптимальный состав питательной среды для культивирования штамма Bacillus pumilus',

- разработать рецептуру и технологическую схему получения биопрепарата и кормовой добавки с его применением;

- изучить состав и свойства кормовой добавки;

- разработать техническую документацию на биопрепарат и кормовую добавку;

- рассчитать ожидаемую экономическую эффективность, провести промышленную апробацию технологии.

Научная новизна работы заключается в следующем:

- изучены физиолого-биохимические, фенотипические и генетические свойства штамма Bacillus pumilus, штамм депонирован в ВКПМ ФГУП «ГосНИИ-генетика» с целью пополнения коллекции и правовой защиты штамма, обладающего кератиназной активностью;

- установлено, что штамм относится к роду Bacillus,а генетический анализ позволил определить на 99 % вид микроорганизма; учитывая проведенные иссле-

дования н особенности штамма, его можно идентифицировать как Bacillus pumilus;

- на основании полученных результатов выбраны технологические параметры культивирования штамма Bacillus pumilus. Температура составляет 50 °С, pH среды 7,0-8,0, объем аэрации 1,150 дм3/мин, скорость перемешивания от 50 до 100 об/ мин;

- оптимизирован состав питательной среды, обеспечивающий максимальную продуктивность штамма Bacillu spumilus при культивировании: триптон12%, панкреатический гидролизат 12%, хлорид натрия 0,2%, хлорид кальция 0,6 %, фруктоза 0,5%;

- установлено, что культивирование на подобранной питательной среде в течение 12 ч при 37°С приводит к повышению протеолитической активности ферментов, которая составляет 24,13 Е/мг

Практическая значимость работы. На основании полученных результатов описаны основные параметры получения кератиназы из штамма Bacillus /?г/ш/7г«.Разработан способ получения биопрепарата с использованием распылительной сушки при следующих параметрах: температура сушки 60°С; продолжительность сушки 6 ч. Разработана техническая документация (ТУ 9225-09602054145-2014), регламент и рецептура биопрепарата. Проведена промышленная апробация технологии в компании ООО «Кера-Тех».

Методология и методы исследований. При проведении исследований использовали общепринятые, стандартные и оригинальные методы биохимического, физико-химического, микробиологического и генетического анализа, в том числе спектрофотометрия, электрофорез в полиакриламидном геле по Лэммли, хроматография, метод Дюма.

Положения, выносимые на защиту:

- генетические, фенотипические особенности и биохимические свойства штамма Bacillus pumilus',

- влияние технологических параметров культивирования на активность штамма Bacillus pumilus;

- состав питательной среды и условия культивирования штамма Bacillus pumilus с кератиназной активностью;

- рецептура и технологическая схема получения биопрепарата и кормовой добавки с применением штамма Bacillus pumilus.

Стенень достоверности и апробация работы. Основные положения и результаты работы были предметом докладов и обсуждений на международных и межрегиональных научно-практических конференциях, семинарах, конгрессах: I Международной научно-практической конференции молодых ученых (Таганрог,2011).Всероссийской научно-практической конференции студентов, аспирантов и молодых ученых с международным участием «Технологии и оборудование химической, биотехнологической и пищевой промышленности» (Бийск,2011);IV Всероссийской конференции с международным участием студентов, аспирантов и молодых ученых «Пищевые продукты и здоровье человека» (Кемерово, 2011);Школе-конференции молодых ученых «Фундаментальная наука для биотехнологии и медецины-2011», Институт биохимиии им. А.Н. Баха РАН (Москва,2011); Всероссийской научно-практической конференции «Биомедицинская инженерия и биотехнология», (Курск,2012); I Международной научно-практической конференции «Проблемы современной биологии», (Москва,2012); 16-ой Международной Пущиновской школы - конференции молодых ученых «БИОЛОГИЯ - НАУКА XXI ВЕКА» ( Пущино,2012); Конкурсе «Евразия - технология будущего» в номинации «Лучший экологический инновационный проект. Green progect 2012» (Екатеренбург,2012);Международном конкурсе «Молодой ученый Alltech»b области сельского хозяйства (Кентукки, 2012);VII Международного симпозиума «ЕС-Россия: сотрудничество в области биотехнологии, сельского, лесного, рыбного хозяйства и пищи в Седьмой Рамочной Программе» (Москва, 2012); Российской агропромышленной выставке «Золотая осень -2012»,( Москва, 2012); 6-ой Международной биотехнологической выставки — ярмарка «РосБиоТех — 2012» ( Москва,2012);У международной школе молодых ученых по молекулярной генетике «Непостоянство генома» (Звенигород,2012);VII Московского международного конгресса "Биотехнология: состояние и перспективы

развития", (Москва, 2013); Всероссийской молодежной научной конференции с международным участием «Современные проблемы фундаментальных и прикладных наук», (Кемерово,2013); 3rd International scientific conference "European Applied Sciences: modern approaches in scientific researches (Штутгарт, 2013).

ГЛАВА 1 .AHA JI ИТ И Ч Е СКИЙ ОБЗОР

В аналитическом обзоре рассмотрены состав и свойства кератинов, представлен анализ штаммов микроорганизмов, содержащих ген кератиназы. На основании анализа литературных данных сформулирована цель и направления собственных исследований.

1.1 Состав и свойства кератинов

Наибольший интерес из всех отходов потрошения птицы представляет пе-ропуховое сырье, так как оно составляет 30 % от массы всех отходов. Для его переработки необходимо подробное изучение строения и происхождения данного сырья, а также поиск альтернативного источника его деградации [131].

В статье О.Ф.Черновой, сотрудницы Института проблем экологии и эволюции им. Северцова РАН, дан широкий и содержательный обзор гипотез происхождения кератинсожержащего сырья, такого как перья и волосы, приведен перечень сходства и различия в их строении, разобраны некоторые конвергентные признаки [136,137].

В данной работе особый интерес представляет структура перьев для подбора оптимальных условий тотального гидролиза.

Перья и волосы развиваются из фолликула с участием эктодермы и мезодермы, сложены многослойными кератиновыми структурами, способными к регенерации. Регенерация обеспечивается стволовыми клетками, расположенными внутри фолликула[136,138].

Оказалось, что развитие перьев и волос регулируется сходным набором белков, работающих в единообразных сигнальных каскадах. Белок SNN - это сигнальный центр, Noggin - отвечает за деление клеток пера и волоса, WNT/?-

катенин - определяет дифференцировку стволовых клеток в зачатках. Облик кожных структур определяется градиентами сигнальных белков. Экспериментально показано, что все кожные придатки возникают как результат взаимодействия экто- и мезодермы; степень участия экто- и мезодермы при этом может различаться, то есть развитие, и дифференцировка кожных придатков представляют собой «вариации на общую тему»[136, 139].

Сходство функций и гипотетическая общность происхождения перьев и волос предполагают множество общих черт в их строении. Под общностью происхождения понимается участие одних и тех же тканевых структур в производстве перьев и волоса; это означает какие-то общие гистологические свойства и сходную биохимическую регуляцию. Перья и волосы эволюционировали по отдельности. Об этом говорит, в частности, различный состав кератинов перьев и волос (рисунок 1.1.1). Перья и чешуя современных пресмыкающихся сложены двумя видами кератинов: а- и ^-кератинами, включая и специфичную форму /?-кератина - ф-кератин (анализировали соответствующие ткани аллигатора). У современных видов млекопитающих волосы сложены только а-кератином [92].

Кератины (от греч. кегав, род. падеж кегМоя - рог) - это структурные фибриллярные белки, состоящие из параллельных полипептидных цепей, имеющих конформацию а-спирали или /?-структуры (структуры складчатого листа), а-Кератины (часто их называют просто кератины) - основной тип белков, из которых образуются наружные защитные покровы позвоночных. Кератин является типичным представителем класса волокнистых белков. Он содержится в тканях эпидермального происхождения, к которым относятся шерсть, волос, а также рога, когти, перья, копыта, китовый ус и др. [40, 62]. Все перечисленные выше ткани представляют собой сложные многокомпонентные биологические образования, состоящие из отдельных клеток, формирующих их различные гистоструктурные элементы [144].

Сходство задач при раздельной эволюции неизбежно приводит к конвергентному сходству конструктивных признаков. Чтобы проиллюстрировать конвергентные признаки перьев и волос, О.Ф.Чернова рассмотрела тонкую конструк-

цию их слоев. Остевые волосы и иглы (видоизменение волос) млекопитающих, как и бородки опахала перьев птиц, представляют собой трехслойные кератино-вые цилиндры Первый слой - это кутикула, второй слой - корковый, а третий -сердцевина. Все эти слои хорошо различимы на срезах перьев и волос [32, 66].

Рисунок 1.1.1 -Сравнение тонкого строения перьев и волос: мозаичная кутикула (а) бородки пера у серого журавля - в центре каждой чешуйки видны вмятины от ядра, и (б) иглы американского дикобраза; раструбная кутикула (в) бородки второго порядка пуха покровного пера полевого жаворонка и (г) нижней части остевого волоса мышевидного опоссума, ячеистая сердцевина стержня (д) покровного пера кедровки и (е) иглы американского дикобраза.

Кутикула построена из чешуек, которые состоят из ороговевших клеток. Конструкция чешуек перьев и волоса может быть очень похожей. Например, мозаичная кутикула: клетки ее не перекрываются, а располагаются встык, имеют вид пяти- или шестиугольников. У млекопитающих мозаичная кутикула находится в наиболее тонкой, прикорневой части волоса, а также покрывает, например, иглы дикобраза. У птиц она часто встречается на бородках опахала пера[96]. Считается, что такая структура придает волосу или перу особую прочность. Но у птиц чешуйка-мозаика составлена только одной клеткой, и даже виден след от круглого ядра в центре, а чешуйка-мозаика волоса млекопитающих состоит из нескольких клеток, и ядер в ней не видно[11, 27].

Покровные перья и пуховые волосы должны быть тонкими и гибкими. Эти свойства обеспечиваются сходным конструктивным решением. Кутикула этого типа перьев и волос представляет собой кольцевые сегменты, вставленные друг в друга: в расширенную часть нижнего сегмента вставлена зауженная часть верхнего. Получается членистая структура наподобие раздвижного телескопа.Только у перьев междоузлие длиннее, чем у волоса[26, 133].

Корковый слой состоит из плотно соединенных веретеновидных клеток. Кора и волос, и перьев может содержать воздушные полости. Воздушные полости улучшают теплозоляцнонные свойства покровов. Та же теплозащитная функция предопределила и сходное строение третьего слоя - сердцевины. Сердцевинный слой устроен по принципу сетки или ячеек, ограниченных клеточными стенками. Воздух внутри ячеек обеспечивает снижение теплопроводности, а ячеистая структура повышает механическую прочность[14, 130].

Отдельные морфологические компоненты пера образованы белковыми веществами, относящимися к группе твердых или мягких кератинов. Содержание этих протеинов составляет более 85% по массе. Твердые кератины отличаются повышенной химической устойчивостью, высоким содержанием серы, значительной термоустойчивостыо и тенденцией к образованию ориентированных упорядоченных структур. Мягкие кератины характеризуются пониженной устойчиво-

стью к химическим и термическим воздействиям, крайне низким содержанием серы, слабой структурированностью[37,125].

Аминокислотный состав различных кератинов не постоянен и значительно варьируется в зависимости от происхождения сырья (таблица 1.1.1).

При исследовании аминокислотного состава кератина установлено, что в нем содержатся все незаменимые аминокислоты, причем в незначительных количествах [19, 45,69].

Таблица 1.1.1-Количественный состав аминокислот различного видакератинсо-держащего сырья.

Аминокислоты Человеческий волос Волос лошади Овечья шерсть Куриное перо

Алании 6,88 1,50 4,40 5,21

Валин - 0,90 2,80 6,02

Лейцин 12,12 7,10 11,50 10,83

Аспарагиновая кислота - 0,30 2,30 7,04

Глутаминовая кислота 8,00 3,70 12,90 14,03

Пролин - 3,40 4,40 -

Фенил аланин 0,62 - - 4,74

Тирозин 3,30 3,20 2,90 5,06

Серии - 0,60 0,90 5,28

Цистин 11,55 - 7,30 5,28

Аминокислотный состав кератина представлен из 19 аминокислотами. Среди них нет оксипролина и оксилизина, которые являются основными аминокислотами коллагена, а вместо них присутствуют серосодержащие аминокислоты цис-тин и цистеин [5, 22, 74].

Различия в аминокислотном составе кератина различных животных обуславливаются особенностями процесса ороговения эпителиальных тканей. В ряде

случаев это связано с образованием различных по своехму морфологическому характеру типов волоса. Так, например, волос кролика отличается от тонкорунной овечьей шерсти пониженным количеством серосодержащих аминокислот и повышенным содержанием аминокислот основного характера [98,43].

Это все указывает на то, что кератины представляют собой не индивидуальное химическое вещество, а целую группу белковых веществ.

Существенным отличием кератинов пигментированных волос и перьев животных от непигментированной тонкорунной овечьей шерсти, куриного пера, является повышенное содержание в первых тирозина. Так, в волосе ондатры находится приблизительно 10-14% тирозина, а в волосе белки 6-12%.Интересно отметить, что аминокислотный состав кератинов волоса пушных животных изменяется в соответствии с сезонной изменчивостью (линькой) волосяного покрова^,58,114].

Известно, что остатки аминокислот в белках соединяются друг с другом посредством пептидной связи, образуя так называемые полипептндные цепочки, агрегация которых приводит к формированию макромолекулы белка. Таким образом, следующим шагом в понимании структуры белка после расшифровки его аминокислотного состава являются вопросы о порядке чередования аминокислотных остатков в полипептидных цепочках, размерах полнпептидных цепочек и природе остатков, находящихся в концевых участках цепочек.

Сведения, позволяющие судить о молекулярном весе макромолекул белка, минимальном числе образующих их полипептидов и об их характере, могут быть получены посредством определения аминокислот, образующих конечные участки полипептидных цепочек[80,101,138].

Аминокислотный состав кератина дает представление о строении его основных структурных единиц - молекулярных цепей, а также об активных группах, участвующих в образовании межмолекулярных связей и в значительной степени определяющих свойства кератина и их изменения под влиянием различных реагентов (рисунок 1.1.2)[ 108,113].

Рисунок 1.1.2- Структурная организация кератинов

/МСератины отличаются от а-кератинов отсутствием поперечных ди-сульфидных связей между соседними полипептидными цепями. Последние обычно имеют антипараллельную ориентацию, которая стабилизируется водородными связями и гидрофобными взаимодействиями. Группы Я аминокислотных остатков имеют сравнительно небольшие размеры. /^-Кератины не растворяются в воде, устойчивы к действию органических растворителей, разбавленных кислот и щелочей; их волокна более гибки, чем у а-кератинов, но не эластичны. Полипептидные цепи содержат большое количество остатков глицина, аланина и серина (около 87% от всех аминокислотных остатков; каждый второй аминокислотный остаток глицин); остатки цистеина и метионина отсутствуют. В полипептидной цепи преобладает повторяющаяся последовательность -01у-8ег-С1у-А1а-С1у-А1а- [54,108,124].

Наличие в составе кератинов значительного количества остатков дикарбо-новых аминокислот (аспарагиновой и глутаминовой) и аминокислот основного характера (лизина, аргинина и гистидина) определяет их амфотерный характер,

обусловливающий возможность активного взаимодействия с реагентами основного и кислотного характера, а также ионного взаимодействия между отдельными фрагментами структуры кератинов (как внутримолекулярного, так и межмолекулярного). Присутствие в кератинах гидроксилсодержащих аминокислот (серина, треонина, тирозина) позволяет им взаимодействовать с веществами, вступающими в реакцию по месту расположения гидроксильных групп, а также способствует образованию в структуре кератинов интенсивно развитой системы водородных связей, оказывающей существенное влияние на физико-механические, физико-химические и другие свойства кератинсодержащего сырья[7,56,86,112].

Огромное влияние на особенности структуры кератинов и проявление ими определенных физико-химических особенностей оказывает содержащей в них аминокислоты цистина. Важная роль в формировании структуры кератина принадлежит также аминокислотным остаткам с углеводородной боковой цепью -глицину и пролину [57, 163].

Известно, что остатки аминокислот в белках соединяются друг с другом посредством пептидной связи, образуя так называемое полипептидные цепочки, агрегация которых приводит к формированию макромолекулы белка. Эти полипептиды можно разделить на две группы:

1) обладающие более высоким содержанием цистина и имеющие молекулярную массу около 10000 Да;

2) обладающие низким содержанием цистина и имеющие молекулярную массу от 50000 до 80000 Да.

Взаимосвязь полипептидных цепочек в кератинах, обусловливающая их ассоциацию в гигантскую макромолекулу, осуществляется за счет взаимодействия между главными цепями, а также между боковыми цепями посредством разнообразных типов химических связей [71,136].

Существенное значение в образовании макромолекулярной структуры кератинов имеет интенсивно развитая система водородных связей, которые могут возникать между карбонильными и имидными группами, карбонильными и гидро-ксильными группами, фенольными гидроксильными и аминогруппами; свобод-

ными карбоксильными группами, амидными группами соседних полипептидных цепочек [12,72].

Между полипептидными цепочками возникают также гетерополярные ионные связи, осуществляющие взаимодействие боковых цепочек аминокислот основного (лизина, аргинина) и кислотного характера (аспарагиновой и глутам и новой). Ионныесвязи, как и водородные, играют существенную роль в образовании макромолекулярной структуры кератинов. А также во взаимодействии друг с другом отдельных макромолекул и даже различных морфологических компонентов кератинсодержащего сырья[116,143].

Основным типом ковалентной связи между полипептидными цепочками в макромолекуле кератинов считается дисульфидная связь, образуемая остатками цистина, входящим своими двумя половинками в две различные полипептидные цепочки. Цистин является диамино-дикарбоновой кислотой и может участвовать в образовании четырех различных пептидных связей, образуя две различные полипептидные цепочки, соединенные дисульфидной связью[118].

Заключение диссертации по теме «Технология мясных, молочных и рыбных продуктов и холодильных производств», Линник, Анна Игоревна

ВЫВОДЫ И РЕЗУЛЬТАТЫ

1 .Установлено что микроорганизмы полученные из гниющего мяса по фе-нотипическим и биохимическим признакам относятся к бактериям рода Bacillus и устойчивы у антибиотику лизоцим. Филогенетический анализ подтвердил родовую принадлежность, а так же позволил определить вид pumilus.

2. Изучено влияние технологических параметров культивирования на активность штамма Bacillus pumilus. Установлено, что при температуре 50 °С накопленный микроорганизмами фермент наиболее активен (28,47 Е/мг), оптимальным диапазоном pH среды для культивирования является 7,0-8,0, при скорости перемешивания от 50 до 100 об/мин.

3. Подобран оптимальный состав ферментационной среды для культивиро-

л

вания штамма Bacillus pumilus, который включает фруктозу - 5 г/дм , триптон - 12

Т 1 л

г/дм , хлорид натрия - 6 г/дм , хлорид кальция - 2 г/дм .

4. Разработаны рецептура и технологическая схема получения кормовой белковой добавки из кератинсодержащего сырья. Кормовая добавка соответствует санитарно-гигиеническим требованиям, обладает высокой биологической ценностью

5.Рассчитали ожидаемую экономическую эффективность. Для производства и реализации 1 т белковой кормовой добавки предприятию необходимо затратить 14,06 тыс. руб. Выручка от данной продукции после вычета из нее затрат за работу и услуги, связанные с производством и реализацией, составить 3,04 тыс. руб. Следовательно, полученная прибыль позволит предприятию - изготовителю продолжить выпуск данного вида белковой добавки. Так же предприятие может поднять отпускную цену до 30 - 50 руб. так как существующие аналоги намного дороже их стоимость составляет от 65 до 1750 руб.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Линник, Анна Игоревна, 2015 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ

1. Андреева, Е.В. Биогазовые технологии и высокоэффективные органические удобрения / Е.В. Андреева // Инженерно-техническое обеспечение АПК. - 2005. -№ 1. - С. 23.

2. Андреева, Е.В. Возможности и источники использования возобновляемых и нетрационных источников энергии в АПК Республики Беларусь (газогенераторы для твердого топлива и бытовых отходов) / Е.В. Андреева // Инженерно-техническое обеспечение АПК. - 2010. - №3. - С. 654.

3. Андреева, Е.В. Перспективы применения биогазовых установок в республике Беларусь / Е.В. Андреева // Экологическая безопасность в АПК. - 2007. - №4. -С. 884-884.

4. Андреева, Е.В. Перспективы применения энергосберегающей кавитацион-ной обработки материалов в технологических процессах АПК / Е.В. Андреева // Инженерно-техническое обеспечение АПК. - 2011. - №2. - С. 368.

5. Архипченко И.А. Производство и применение микробного гранулированного удобрения бамил / И.А. Архипченко // Докл. РАСХН, 1996. - №2. - С. 32-34.

6. Архипченко И.А. Использование отходов животноводства для производства удобрений / И.А. Архипченко, И.И. Баболина, П.Л. Дерикс // Докл. РАСХН, 1998. -№6. - С. 18-19.

7. Архипченко И.А. Полифункциональные микробные удобрения / И.А. Архипченко // Наука в России. - 1999. - №6. - С. 62-64.

8. Архипченко И.А. Оптимизация процессов компостирования и влияние био-компостов на урожай / И.А. Архипченко, О.В. Орлова // Агрохимический вестник. -2001. - №5.-С. 22-24.

9. Ассонов, A.M. Проблемы очистки животноводческих стоков на фермах и комплексах и пути их решения. / A.M. Ассонов, Т.Е. Мерзлая, В.В. Бондаренко. -Минск, 1990. - С. 7-8.

10. Багаев Г.В. Мировой продовольственный кризис и аграрная стратегия России / Г.В. Багаев // На пути к теории аграрного производства: инт.-конф. - ВЭГУ. -2008 г.- С. 49-54.

11. Бакулов И.А. Обеззараживание навозных стоков в условиях промышленного животноводства / И.А. Бакулов, В.А. Кокурин, В.М. Котляров. - М.: Росагро-промиздат, 1998. - 126 с.

12. Балашова, Т.Д. Краткий курс химической технологии волокнистых материалов / Т.Д. Балашова и др. - М.: Легкая и пищевая промышленность, 1986. -200 с.

13. Барболина И.И. Влияние биоудобрения бамил на почвенную микрофлору и урожай сельскохозяйственных культур: автореф. дис. ... канд. биол. наук : 06.01.04 / Барболина Ирина Ивановна - СПб., 1997,- 20 с.

14. Бананов, И.Н. Уборка и утилизация навоза на свиноводческих комплексах / И.Н. Бацанов, ИИ. Лукьянов,- Россельхозиздат, 1977. - С. 31-33.

15. Берлин, А.Х. Оценка топоферментативной активности целлюлаз и ксиланаз / А.Х. Берлин, Д.Ф. Тихомиров, Б.Р. Гутьеррес и др. // Прикладная биохимия и микробиология. - 1998. - Т .34. - №3. - С. 382-387.

16. Биркин, С.М. Переработка отходов животноводства на фермерских хозяйствах / С.М. Биркин // Сельский механизатор. - 2009. - № 4. - С. 26.

17. Биркин, С.М. Совершенствование системы анаэробной переработки отходов животноводства / С.М. Биркин, Н.М. Антонов // Вестник Красноярского государственного аграрного университета. - 2009. - № 4. - С. 197-202.

18. Биологический энциклопедический словарь / Гл. ред. М. С. Гиляров; Ред-кол.: А. А. Баев, Г. Г. Винберг, Г. А. Заварзин и др. - 2-е изд., исправл. - М.: Сов. Энциклопедия, 1986. - 864 с.

19. Биохимия: Учеб. для вузов / Под ред. Е.С. Северина. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2003. - 779 с.

20. Буклагина, Г.В. Биологическая утилизация навоза на свинокомплексах / Г.В. Буклагина// Инженерно-техническое обеспечение АПК. - 2001. - № 2. - С. 541.

21. Веротченко, М.А. Биопереработка свиного навоза - основа получения хитина и хитозана / М.А. Веротченко, А.П. Терещенко, Ф.И. Злочевский // Аграрная Россия. - 2000. - № 5. - С.57-59.

22. Власова, Е.Я. Экологические проблемы агропромышленного комплекса в условиях урбанизации / Е.Я. Власова, Я.Я. Яндыганов // Успехи современного естествознания. - 2008. - № 2. - С. 28-29.

23. Волчатова, И.В. Применение углеродсодержащих твердых отходов в качестве нетрадиционных удобрений / И.В. Волчатова, С.А. Медведева // Химия в интересах устойчивого развития. - 2001. - №9. - С. 533-540.

24. Волчатова, И.В. Продуктивность агроценозов при использовании продуктов биоконверсии гидролизного лигнина / И.В. Волчатова, С.А. Медведева, М.В. Бу-тырин // Агрохимия. - 2005. - №5. - С. 55-58.

25. Ворошилов, Ю.И. Животноводческие комплексы и охрана окружающей среды / Ю.И. Ворошилов, С.Д. Дурдыбаев и др. - М.: Агропромиздат, 1991. - С. 68-95.

26. Габбасова, И.М. Использование биогенных добавок совместно с биопрепаратом «Деворойл» для рекультивации нефтезагрязненных почв / И.М. Габбасова, P.P. Сулейманов, Т.Ф. Бойко и др. // Биотехнология. - 2002. - №2. - С 57-65.

27. Гайдашева, И.И. Перспективы использования новых биопрепаратов для защиты злаков в Средней Сибири / И.И. Гайдашева, B.C. Садыкова, П.Н. Бондарь // Вестник КрасГАУ. - 2008 .- №1(22). - С. 74-78.

28. Ганжара, Н.Ф. Современные способы биоконверсии органических отходов и получения высококачественных органических удобрений / Н.Ф. Ганжара, Р.Ф. Байбеков, Д.Ю. Колтыхов и др. // Известия Тимирязевской сельскохозяйственной академии. - 2007. - № 1. - С. 133-141.

29. Григорьев, М.А. Создание безотходной технологии в свете ответственности производителей за переработкой сырьевых на примере пивоваренного производства / М.А. Григорьев, J1.B. Римарева // Экология промышленных производств. -2009. -№1. - С. 43-46.

30. Дабаева, М. Д. Эколого-безопасная утилизация отходов : монография / М. Д. Дабаева, И. И. Федоров, А. И. Куликов; Бурят, гос. с.-х. академия. - Улан-Удэ : Изд-во БГСХА, 2001. - 94 с.

31. Дирина, E.H. Биодизель и биоконверсия отходов его производства // E.H. Дирина, А.Ю. Винаров, JI.B. Драчева // Масложировая промышленность. - 2008. -№ 5. - С. 36-39.

32. Доля, A.M. Утилизация навоза молочных ферм / A.M. Доля, Д.И. Згиров-ский // Техника и оборудование для села. - 2009. - № 4. - С. 39-42.

33. Егорова, Д.О. Грамположительные бактерии-деструкторыхлорированных бифенилов, перспективные для использования при биоремедиациизагрязненных почв / Д.О. Егорова, Е.Г. Плотникова // Биотехнология. - 2009. - №3. - С. 72-79.

34. Егорова, Т.А. Основы биотехнологии: учебное пособие / Т.А. Егорова. - М.: Высшая школа. 2003. - 268 с.

35. Заика, Н.А Твердофазная ферментация сибирских штаммов грибов рода Trichoderma / H.A. Заика, Т.Н. Громовых // Сибирский экологический журнал. -2007. - Т.- 14,- № 3. - С. 471-475.

36. Зариня, Д.Я. Подбор микробных ассоциаций и разработка способов компостирования мелкодисперсных древесных отходов / Д.Я. Зариня, Л.Я. Дубова, Т.Н. Диж-бите и др. // Дождевые черви и плодородие почв: мат. II Междунар. науч.-практ. конф. - Владимир, 2004. - С. 116.

37. Ильин, С.Н. Ресурсосберегающая технология переработки свиного навоза с получением биогаза: автореф. дис. ... канд. техн. наук: 05.20.01 / Ильин Сергей Николаевич. - Улан-Удэ, 2005. - 23 с.

38. Инкижинова, С. Птицеводы страхуются от конкуренции / С. Инкижинова // Эксперт. -2011. - №3.

39. Керженцев, A.C. Функциональная экология / A.C. Керженцев. - М.: Наука, 2006.-262 с.

40. Климова, Е В. Новые технологии биоконверсии отходов животноводства / Е.В. Климова // Экологическая безопасность в АПК. - 2006.- № 3.- С. 737.

41. Климова, Е.В. Мощный источник энергии (технология переработки навоза) / Е.В. Климова// Инженерно-техническое обеспечение АПК. - 2002. - № 3. - С. 847.

42. Клуге, Р. Биогаз: исследование химического состава отходов брожения / Р. Клуге // Новое сельское хозяйство. - 2010. - №2. - С. 80 - 83.

43. Ковалев, II.Г. Биоконверсия отходов животноводства / Н.Г. Ковалев // Вестник Российской академии сельскохозяйственных наук. - 2003. - №2. - С.28-30.

44. Ковалев, Н.Г. Утилизация органического сырья биоконверсией в удобрения / Н.Г. Ковалев, В.Г. Полозова, И.Н. Барановский // Техника и оборудование для села. -2009.-№1,-С. 25-27.

45. Кореньков, Д. А. Удобрения, их свойства и способы их использования // Д. А. Кореньков. - М., 1982. -415 с.

46. Константинов, В.Н. Мезофильная анаэробная ко-обработка городских твердых отходов со свиным навозом в пилотной биогазовой установке объемом 20 л / В.Н. Константинов // Инженерно-техническое обеспечение АПК. -2009. - №2. - С. 571-571.

47. Константинов, В.Н. Лабораторные опыты по производству биогаза из ко-субстратов: отходы пищевой промышленности и коровий навоз в разных пропорциях / В.Н. Константинов // Инженерно-техническое обеспечение АПК. - 2009. -№ 3. - С. 873-873.

48. Корзникова, М.В. Оценка степени конверсии органического вещества отходов животноводства и птицеводства в биогаз (на примере РФ) / М.В. Корзникова, А.Ю. Блохин, Ю.П. Козлов // Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация. - 2008. - №2- С. 108-111.

49. Корзникова, М.В. Получение и использование биогаза в Российской Федерации при переработке отходов сельскохозяйственного производства / М.В. Корзникова, А.Ю. Блохин, Ю.П. Козлов // Вестник Росс, у-та дружбы народов: экология и безопасность жизнедеятельности. - 2008. - № 3. - С. 17-22.

50. Королько, A.A. Получение биогаза на молочной ферме путем утилизации навоза и использование его для выработки электроэнергии с помощью микротур-

бинного генератора / A.A. Королько // Инженерно-техническое обеспечение АПК. -2006. -№ 2. - С. 581.

51. Костромин, Д.В. Анаэробная переработка органических отходов животноводства в биореакторе с барботажным перемешиванием : дис. ... канд. техн. наук : 05.20.01 / Костромин Денис Владимирович. - Йошкар-Ола, 2010. - 183 с.

52. Кошкин, М.В. Перспективы использования биогаза / М.В. Кошкин, И.В. Решетникова, A.B. Савушкин // Механизация и электрификация сельского хозяйства. - 2009. - №6. - С.33-34.

53. Кривых, Л.И. Утилизация отходов с животноводческих комплексов и ферм: практ. руководство / Л.И. Кривых. - Барнаул: РИО АИПКРС АПК, 2005. - 40 с.

54. Кутьева, Т.Ю. Биоудобрения из отходов животноводства (бамил, омуг, экуд, пудрет): влияние на продуктивность растений и свойства почв : дисс. ... канд. биол. наук : 06.01.04 / Кутьева Татьяна Юрьевна. - М., 2002 .- 187 с.

55. Кухаренко, A.A. Возможные пути интенсификации процесса брожения / A.A. Кухаренко, М.Н. Дадашев, В.М. Короткий и др. // Производство спирта и ли-кероводочных изделий. - 2008. - № 2. - С. 16-18.

56. Лазарчик В.М. Вермикомпосты на основе разных субстратов / В.М. Лазарчик, A.M. Головков, В.Е. Лазарчик и др. //Агрохимический вестник. - 2005. - №3. - С. 14-17.

57. Ленинджер, А. Основы биохимии / А. Лешшджер. -М: Мир, 1985. - 367 с.

58. Лозановская, И.Н. Теория и практика использования органических удобрений / И.Н. Лозановская, Д.С. Орлов, П.Д. Попов. - М.: Агропромиздат, 1987. - 95 с.

59. Лысенко. В.П. Подготовка, переработка помета на птицефабриках и использование его в земледелии / В.П. Лысенко. - ВНИТИП : Сергиев Посад. - 2001. - 108 с.

60. Лысенко В. Утилизация органических отходов / В. Лысенко // Животноводство России. - 2007. - № 3. - С. 8-9.

61. Мартынов, АЛО. Переработка органических отходов мясокомбинатов методом анаэробного сбраживания / А.Ю. Мартынов, Л.Л. Никифоров, Г.С. Руденко // Мясная индустрия. - 2003. - №28. - С. 14-17.

62. Мерзлая Г.Е. Методика и результаты исследований эффективности компо-стов и вермикомпостов / Г.Е. Мерзлая // Дождевые черви и плодородие почв: мат. II Междунар. науч.-практ. конф. - Владимир, 2004. - С. 150-152.

63. Мерзлая, Г.Е. Птичий помет - ценное сырье / Г.Е. Мерзлая // Птицеводство. -2009. - №6. - С. 13-14.

64. Мерзлая, Г.Е. Технологии утилизации помета / Г. Мерзлая, Н. Корнева, В. Тюрин и др. // Птицеводство. - 2009. - №1. - С. 48-50.

65. Милевская, И.А. Приемы воспроизводства плодородия мелиорированных почв с использованием нетрадиционных удобрений / И.А. Милевская // Экологическая безопасность в АПК. - 2005. - № 4. - С. 898.

66. Мокрушина, Н.С. Биоконверсия древесных отходов методом компостирования с получением органического удобрения / Н.С. Мокрушина, Т.С. Тарасова, И.В. Дар-мов // Известия Самарского научного центра РАН. - 2009. - Т. 11. - № 1. - С. 228-231.

67. Монастырский, O.A. Влияние биопрепаратов натразвитие и токсинообразова-ние полевых штаммов Fusarium qraminearum / O.A. Монастырский, В.А. Ярошенко // Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. - 2002. - №3. - С.22-23.

68. Морозова А.И. Переработка вторичного кератинсодержащего сырья и получение белковых гидролизатов на пищевые и кормовые цели / А.И. Морозова, О.О. Бабич, И.С. Разумникова, и др. // Техника и технология пищевых производств. -Кемерово, 2011. - №2 (21 ). - С. 7- 11.

69. Морозов Н.М. Экологические требования к средствам механизации уборки и переработки навоза / Н.М. Морозов, В.А. Денисов // Вестник Российской академии сельскохозяйственных наук. - 2003. - №1. - С.21-24.

70. Мякиньков, А.Г. Получение коллагеновых субстанций на основе ферментативной обработки вторичного сырья мясной промышленности / А.Г. Мякиньков // Пищевая и перерабатывающая промышленность. - 2003. - № 2. - С. 786.

71. Никольская, С.А. Химическое строение и свойства текстильных волокон /A.C. Никольская, О.Г. Цирнкина . - Иваноская государственная текстильная академия, Иваново, 2003. - 24 с.

72. Новородовская, T.C. Краткий курс химической технологии волокнистых материалов / Т.С. Новородовская, С.Ф. Садов. - М.: Легпромбытиздат, 1986. - 200 с.

73. О реализации федеральной целевой программы "Социальное развитие села до 2013 года: Приказ Минсельхоз РФ от 26.12.2012 г. №27481 // Собрание законодательства РФ. -2012. - № 12. - С 1420.

74. Олива, Т.В. Опыт применения нетрадиционных кормовых добавок / Т.В. Олива, И.В. Николаева//Успехи современного естествознания. - 2007. - № 12. - С. 228-228.

75. Осипова, Н.И. Ветеринарно-санитарные и гигиенические меры по сбору и утилизации органических отходов / Н.И. Осипова // Экологическая безопасность в АПК. -2007. -№ 1. - С. 177.

76. Осипова, Н.И. Новые технологии в утилизации органических отходов и реабилитации почвы / Н.И. Осипова // Ветеринария. - 2009. - № 2. - С. 281-281.

77. Осипова, Н.И. Санитарно-бактериологическая оценка органических отходов животноводческих предприятий / Н.И. Осипова // Ветеринария. - 2008. - № 1. - С. 4.

78. Пат. №2347808 РФ, МПК7 C12N1/20. Биопрепарат из эффективных микроорганизмов для деградации органических отходов / Афанасьев, E.H. -№2007129820/13; заявл.06.08.2007; опубл. 27.02.2009.

79. Пат. РФ № 2167829 МПК 7 С02 F3/00 2F11/04. Установка комплексной переработки навоза сельхозотходов / Тумченок В.И. - 99107619/13; заявл. 12.04.1999; опубл. 27.05.2001.

80. Пат. РФ № 2136615 МПК6 С02 Fl 1/12. Способ переработки жидких отходов в биотопливо / Торккели Э. - 98101196/25; заявл. 26.06.1996; опубл. 10.09.1999.

81. Пат. №2286982 РФ, MnK7,C05Fl 1/08. Способ приготовления бактериального удобрения на основе биогумуса / Кощаев, А.Г. - №2004135696/13; за-явл.06.12.2004; опубл. 20.05.2006.

82. Пат. РФ №2314693 МПК7 А01 С12 N001/20. Ассоциация бактерий для получения биопрепарата, биопрепарат, повышающий плодородие почвы и оздорав-ливающий ее, обладающий противогрибковыми и стимулирующими рост расте-

ний свойствами, и способ его получения / Буяновский Э. К., Кудряшова Е. Б., Санцевич И. И. - 2005124138/13; опубл. 20.01.2008.

83. Пат. РФ №95106326 МПК6 С12М1/10. Биоконверсионная установка / Соколов Д.П. Винаров А.Ю. Смирнов В.Н. - 95106326/13; опубл. 27.01.1997.

84. Пат. РФ №2294319 МПК7 C05F9/00. Способ переработки твердых бытовых отходов / Лихачев Ю. М., Гарабаджиу А. В., Козлов Г. В. - 2005124209/12; опубл. 27.02.2007.

85. Пат. РФ №1477694 МПК7 Установка для сбраживания отходов животного и растительного происхождения с образованием биогаза / Семененко И. В. -4299995; опубл. 07.05.1989.

86. Патент №2286980 РФ, МПК7, C05F11/08. Способ получения микробиологического удобрения / Кощаев, А.Г. - №2004135694/13; заявл. 06.12.2004; опубл. 20.05.2006.

87. Пат. №2409537 РФ, МПК7, C05F3/00. Способ переработки птичьего помета и свиного навоза в органическое удобрение / Подгорнов, П.А. - №2009126086/05; заявл. 07.07.2009; опубл. 20.01.2011.

88. Пат. РФ №2441720 МПК7 В09 ВЗОО Cl . Способ комплексной переработки органических отходов / Смирнов Ю.Д., Ковшов C.B., Никулин А.Н. и др. -2010132505/13; заявл. 02.08.2010; опубл. 02.08.2010.

89. Пат. РФ №116011 МПК7 A01G. Биокомплекс / Яруткин А.В., Разин Д.В. -Заявл. 09.12.2011; опубл. 20.05.2012.

90. Пат. РФ № 69698 МПК7 ДОЮ. Биокомплекс / Кабилов З.А. - Заявл. 31.07.2007; опубл. 10.01.2008.

91. Пат. РФ № 2249580 МПК7 С05 F3/00. Способ переработки и утилизации ор-ганосодержащих отходов / Чертес К.Л., Быков Д.Е., Тупицына О.В и др. -2003101872/12; заявл. 23.01.2003; опубл 27.09.2004.

92. Пат. РФ № 2151133 МПК7 C05F3 00, А23К1 00. Способ биоконверсии органических отходов в кормовую добавку / Ковалев Н.Г., Рабинович Г.Ю., Степанок В.В. и др. - 98121120/13; заявл. 17.11.1998; опубл. 20.06.2000.

93. Пат. №2186753 РФ, МПК7, C05F11/08. Способ биоконверсии органических отходов для получения модифицированного удобрения и питательного субстрата / Чекасина, Е.В. - №2000115249/13; заявл. 15.06.2000; опубл. 10.08.2002.

94. Пат. №93030782 РФ, МПК6, C05F11/08. Способ биологической переработки птичьего помета / Чекасина, Е.В. - №93030782/13; заявл. 17.06.1993; опубл. 20.04.1997.

95. Пат. РФ № 2150198 МПК 7 А01 К67033 С05 F3/06. Установка для переработки навоза на белковый корм и удобрение / Коноводов A.A. - 99121544/13; заявл. 18.10.1999; опубл. 10.06.2000.

96. Патент РФ №2192403 МПК7 С05 Fl 1/08. Способ получения органо-минералыюго удобрения / И.В. Волчатова, С.А. Медведева, Э.И. Коломиец и др. -2000116745/13; заявл. 23.06.2000; опубл: 10.11.2002.

97. Пат. №2153262 РФ, МПК7, А23К1/00. Способ получения кормовой добавки биоконверсией органических отходов / Ковалев Н.Г. - №99100876/13; заявл. 14.01.1999; опубл. 27.07.2000.

98. Пат. №2003138195 РФ, МПК7, С12Р1/00. Способ получения биологически активного средства биоконверсией органического сырья / Рабинович Г.Ю. -№2003138195/13; заявл. 31.12.2003; опубл. 10.06.2005.

99. Пат. №2034924 РФ, МПК7, С 12 N 9/50. Штамм Streptomyces ornatus продуцент кератиназы / Бандоян А.К. - № 93011685/13; заявл. 03.03.93; опубл. 10.05.95.

100. Пискурева, В.А. Использование отходов сельскохозяйственного производства для получения белково-углеводных кормовых добавок с разными функциональными свойствами / В. А. Пискурева, И. А. Гнеушева, Н.Е. Павловская // Вестник ОрелГАУ. - 2010. - №6. - С. 109-111.

101. Покровская, С.Ф. Использование дождевых червей для переработки органических отходов и повышения плодородия почв: автореф. дис. ... канд. биол. наук.-Москва, 1991.-22 с.

102. Попова, Е.Б. Технология ускоренного производства биокомпостов / Е.Б. Попова // Инженерно-техническое обеспечение АПК. - 2004. - № 1. - С. 194.

103. Просеков, А.Ю. Опыт кафедры «Бионанотехнология» Кемеровского техно-

логического института пищевой промышленности в области биотехнологии получения рекомбинантных ферментных препаратов / А.Ю. Просеков, О.О. Бабич, JI.C. Солдатова // Техника и технология пищевых производств,- 2012,- Т. 3.- № 26,-С. 102-111.

104. Прудова, J1.IO. К вопросу характеристики пленкообразных структур, получаемых в процессе биоконверсии отходов птицепепрерабатывающей отрасли / Л.Ю. Прудова, Т.Е. Данилова, В.Ж. Цыренов и др. // Вестник Восточно -Сибирского государственного технологического университета. - 2010. - № 4. - С. 89-95.

105. Рабинович, Г.Ю. Роль биодобавок в интенсификации процесса биоферментации / Г.Ю. Рабинович, Н. Г. Ковалев, Э.М. Сульман // Докл. РАСХН, 1999. -№4. - С. 57-60.

106. Репин, П.С. Биоконверсия отходов масложировой промышленности липазой дрожжей Yarrowialipolytica / П.С. Репин, О.С. Корнеева, О.В. Карманова // Фундаментальные исследования. - 2010. - № 12. - С. 147-152.

107. Решетникова, И.В. Отходы - на службу сельской энергетике / И.В. Решетникова, М.А. Валиулин, С.П. Игнатьев // Механизация и электрификация сельского хозяйства. - 2008. - №12. - С.56-57.

108. Савушкин, A.B. Альтернативное топливо в сельском хозяйств / A.B. Савуш-кин, B.C. Вохмин, И.В. Решетникова// Механизация и электрификация сельского хозяйства. - 2009. - №4,- С.37-38.

109. Садыкова, B.C. Антагонистическая и ростстимулирующая активность штаммов родов Trichoderma и перспективы их использования в биоконтроле / B.C. Садыкова, И.Н. Третьякова, Н.Е. Носкова и др. // Иммунопатология, аллергология, инфектология. - 2009. - №2. - С. 71-72.

110. Санжаровская, М.И. Биоконверсия органических отходов как способ повышения экологической чистоты производства и окружающей среды / М.И. Санжаровская // Инженерно-техническое обеспечение АПК. - 2008,- № 3. - С. 710-710.

111. Санжаровская, М.И. Технологии и оборудование для переработки навоза / М.И. Санжаровская // Инженерно-техническое обеспечение АПК. - 2009. - № 1. - С. 275-275.

112. Сенько, O.B. Переработка отходов сельского хозяйства в коммерчески значимые продукты / О.В. Сенько, H.A. Степанов, Д.А. Гудков. // Образование и наука X-XJ. века: 8-я междунар. научн.-практ. конф. - Болгария, 2012. - Т. 42. - С. 55-57.

113. Серегина, Е.В. Переработка дождевыми червями некоторых с/х отходов в биогумус / Е.В. Серегина, Д.Г. Звягинцев и др. // Микроорганизмы в с/х: тезисате»т докл. конф,- Пущино, 1992. - 183 с.

114. Сидоренко, О.Д. Биологические технологии утилизации отходов животнг<1>— водства: учеб. пособие / О.Д. Сидоренко, Е.В. Черданцев. - М.: Изд - во МСХА, 2001. -74 с.

115. Сидоренко, О.Д. Технология биоконверсии отходов сельскохозяйствен!io:r~o производства: учебное пособие. - М.: ФГОУ ВПО МСХА им. Тимирязева, 2006. - 83

116. Сидоренко, О.Д. Проблемы эффективного использования отходов сельског-о хозяйства / О. Д. Сидоренко // Агрохимия. - 2009. - №2. - С. 87-92.

117. Смирнова, В.Д. Интенсификация процесса биоконверсии отходов пищевой промышленности в дрожжевую массу кормового назначения / В.Д. Смирнов^э__, И.В. Балакирев, Е.В. Башашкина и др. // Химическая промышленность сегодня- — 2010. -№ 8. - С. 10-15.

118. Сорокин, O.A. Переработка отходов сельскохозяйственных производств (5ис<=>— кокнверсией / O.A. Сорокин //Промышленная энергетика. - 2005. - № 8. - С. 39-44.

119. Соуфер, С. Биомасса как источник энергии / С. Соуфер, О. Замойски. - IVX_ i Мир, 1985.- 368 с.

120. Стабникова, Е.В. Скрининг носителя для бактерий, очищающих почву от нефтяных загрязнений / Е.В. Стабникова // Микробиологический журнал. - 1998 _ — 60. - № 2. - С. 85-90.

121. Стадник, Б.Г. Новое направление в биологизации земледелия / Б.Г. Стаднигзс // Химия в сельском хозяйстве. - 1994. - №3. - С. 23-24.

122. Степень, P.A. Альтернативные пути рациональной переработки древеснь-т^с отходов / P.A. Степень, С.М. Репях // Инвестиционный потенциал лесопромы uzt— ленного комплекса Красноярского края: мат. науч.-практ. конф. - Красноярску 2001. - С. 14-19.

123. Тарханов O.B. На пути к теории аграрного производства / О.В. Тарханов. -Уфа: Изд-во ВЭГУ, 2008. - С. 189.

124. Тарханов, О.В. Основы теории аграрного производства / О.В. Тарханов. -Уфа: Изд-во Системы и технологии, 2008. - С. 33.

125. Тарханов, О.В. Органо-минеральные удобрения на основе свежезаконсерви-рованной органики / О.В. Тарханов, J1.C. Тарханова, В.М. Валеев // Почвы, жизнь, благосостояние. - 2000. - С. 424.

126. Тарханов, О.В. Плодородие без гумуса и удобрений / О.В. Тарханов // Химия и жизнь. - 2008. - № 3. - С. 24.

127. Тарханов, О.В. Технологическая реформа сельского хозяйства как средство против войны / О.В. Тарханов. - М. : Книга и Бизнес, 2006. - 218 с.

128. Тарханов, О.В. Экология и агроценоз / О.В. Тарханов // Экология и жизнь. -2011. -№ 2,- С. 12-19.

129. Тен, Х.М. Влияние компостной закваски на ускорение компостирования органических веществ / Х.М. Тен, В.Ф. Чень, E.JT. Имранова // Агрохимия. - 2004. -№2. - С. 63-66.

130. Тимофеевская С.А. Биоконверсия твердой фазы сточных вод мясокомбинатов / С.А. Тимофеевская // Пищевая и перерабатывающая промышленность. -2006. -№4.-С. 1245-1245.

131. Фадеева, И.В. Отработка условий биоконверсии отходов спиртовой промышленности с помощью молочнокислых бактерий и базидиальных грибов / И.В. Фадеева, H.A. Атыкян, В.В. Ревин // Вестник Нижегородского университета им. Н.И. Лобачевского. - 2009. - №6. - С. 113-119.

132. Филиппова, A.B. Влияние птичьего помета, используемого в качествекор-мовой базы, на численность красного калифорнийского гибрида дождевых червей / A.B. Филиппова // Ветеринария и кормление. - 2009. - № 5. - С. 26-27.

133. Филиппова, A.B. Использование отходов для улучшения почв орошаемых участков/A.B. Филиппова, Н.М. Глунцов//Плодородие.-2003.- №4(13).-С. 271-273.

134. Фисин, В.И. Использование птичьего помета для получения микробных удобрений с полифункциональными свойствами / В.И. Фисин, И.А. Архипченко, Э.В. Попова, ИЗ// Докл. РАСХН, 1998. - №4. - С. 32-34.

135. Химическая энциклопедия: В 5 т.: т. 1: А-Дарзана /Редкол.: Кнунянц И. JI. (гл. ред.) и др. -М.: Сов. энцикл., 1988. - 623 с

136. Чернова, О.Ф. Атлас волос млекопитающих. (Тонкая структура остевых волос и игл в сканирующем электронном микроскопе) / О.Ф. Чернова, Т.Н. Целико-ва. - М.: Товарищество научных изданий КМК, 2004. - 428 с.

137. Чернова, О.Ф. Новый пример морфологической конвергенции: сходство архитектоники волоса и пера / О.Ф. Чернова // Докл. АН. - 2005. - Т. 405. - № 3.- С. 425-429.

138. Чернова, О.Ф. Полиморфизм архитектоники дефинитивных покровных перьев / О.Ф. Чернова // Докл. АН. - 2005. - Т. 405. - № 3. - С. 1-7.

139. Чернова, О.Ф. Эволюционные аспекты полиморфизма волос / О.Ф. Чернова // Изв. РАН. Сер. биол. - 2006. - № 1. - С. 52-63.

140. Юданова, А.В. Повышение эффективности производства удобрений путем оптимизации параметров двухстадийной биоферментации навоза и помета / А.В. Юданова//Инженерно-техническое обеспечение АПК. - 2001. - № 1. - С. 255.

141. Agunwamba, J.C. Solid waste management in Onitsha, Nigeria / J.C. Agunwamba, O.K. Ukpai, I.C. Onyebucnyi // Waste Management and Research. - 1998. - 16 (1). - P. 23-31.

142. Ander, P. Selective degradation of wood components by whiterot fungi / P. Ander, K.E. Eriksson//Physio. Plant. - 1977. - 41. - P. 239-248.

143. Angelidaki, I.A Mathematical Model for Dynamic Simulationof Anaerobic Digestion of Complex Substrates: Focusing on Ammonia Inhibition / I. Angelidaki, L. Ellegaard, B.K. Ahring//Biotechnology and Bioengineering. - 1993. - 42. - P. 159-166.

144. Angelidaki, I.A Comprehensive Model of AnaerobicBioconversion of Complex Substrates to Biogas / I. A. Angelidaki, L. Ellegaard, B.K. Ahring // Biotechnology and Bioengineering. - 1999. - 63 (3). - P. 363-372.

145. Angelidaki, I. Thermophilic anaerobic digestion of source-sorted organic fraction of household municipal solid waste: Startup procedure for continuously stirred tank reactor /1. Angelidaki, X. Chen, J. Cui, et al // Water Research. - 2006. -40. - P. 2621-2628.

146. Bajpai, P. Application of xylanases in prebleaching bambookraft pulp / P. Bajpai, P.K. Bajpai // Tappi J. - 1996. - 79. - P. 225-230.

147. Bahukhandi, D. Cultivation of Pleurotus sp. on different agricultural residues / D. Bahukhandi, R.L.Munjal // Indian Phytopath. - 1989. - 42(4). - P. 492-495.

148. Bhandari, T.P.S. Cultivationof oyster mushroom on different substrates / T.P.S. Bhandari, R.N. Singh, B.L.Verma // Indian Phytopath. - 44(4). - P. 555-557.

149. Bisaria, V.S. Bioprocessing of Agro-residues to glucose and chemicals / V.S. Bisaria // Elsevier. - 1991. - P. 210-213.

150. Burns, R.T. Moody. Development of a standard method for testing mechanical manure solids separators / R.T. Burns, L.B. Moody. - ASAE St. Joseph: MI., 2003

151. Burton, C.H. Manure Management / C.H. Burton, C. Turner // Treatment Strategies for Sustainable Agriculture. - 2003. - №2. - P. 451

152. Das, N. Cultivation of Pleurotusostreatiis on weed plants / N. Das, M. Mukherjee // Biores. Technol. - 98(14).- P. 2723-2726.

153. Edelmann. w. Environmental aspects of the anaerobic digestion of the organic fraction of municipal solid wastes and of solidagricultural wastes / W. Edelmann, U. Baier, H. Engeli // Modern Technol. of Agro Processing and Agricultural Waste Products. -2001,-Vol.52-P.203.

154. Eduljee, G.H. The effect of changing waste management practices on PCDD/PCDT releases from household waste recycling and disposal processes / G.H. Eduljee, P. Dyke, P.W. Cains // Chemosphere. - 1997. - 34 (5-7). - P. 1615-1622.

155. Kabak, B. Binding of aflatoxin Mi by Lactobacillus and Bifidobacterium / B. Kabak, I. Var//Milchwissenschaft. - 2004. - №5. - P.301-303.

156. Kakeya, Ii. Biotransformation of the mycotoxin, zearalenone, to a non-estrogenic compound by a ftmgal strain of clonostachys sp. / H. Kakeya, N. Takahashi-Ando, M. Kimura // Biosci. Biotechnol. and Biochem. 2002. - №12. -P.2723-2726.

157. Kadota, J.Modified lignophenols to polyuretans glues / J. Kadota, K. Hasegawa, M. Funaoka//Nippon setchaku gakkaishi J. Adhes. Soc. Jap. - 2004. - Vol. 40. - №9. -P. 380-384.

158. Labrie, C. Effect of waste-based composts produced by two-phase composting on two oomycete plant pathogens / C. Labrie, P. Leclers, C. Beaulieu // Plant and soil. -2001,-Vol. 235. - P. 27-34.

159. Leschine, S.B. Cellulose degradation in anaerobic environments / S.B. Leschine // Annu. Rev.Microbiol. - 1995. - 49. - P. 399-426.

160. Linnik, A.I. Optimization of cultivation parameters Bacillus subtilis / A.I. Linnik, O.O. Babich, A.J. Prosekov, P.V. Mitrohin // 3rd International scientific conference "European Applied Sciences: modern approaches in scientific researches". - Germany: Stuttgart, 2013. - Vol. 2. - P. 35-37.

161. Mansfield, S.D. Characterization ofendoglucanases from the brown rot fungi Gloeophyllum sepiarium and Gloeophyllum trabeum / S.D. Mansfield, J.N. Saddler, G.M. Gübitz // Enzyme Microb Technol. - 1998. -Vol. 23. - P. 133-140.

162. Schink, B. Energetics of syntrophic cooperation in methanogenic degradation / B. Schink // Microbiologyand Molecular Biology Reviews. - 1997. - 61 (2). - P. 262-280.

163. Schweizer, J. New consensus nomenclature for mammalian keratins / J. Schweizer, P.E. Bowden, P.A. Coulombe, L. Langbein, E.B. Lane, T.M. Magin, L. Maltais, M.B. Omary, D A. Parry, M.A. Rogers, M.W. Wright // J Cell Biol. - 2006. -174(2): P. 169-174. D01:10.1083/jcb.200603161

164. Shi, C. Action nitrogen-fixed microorganisms on the contents of nitrogen in compost / C. Shi, J. Pu, Z. Zheng // Chin. J. Appl. and Environ. Biol. - 2002. - Vol. 8, №4. P. 419-421.

165. Stiller, H.A. Co-processing of agricultural and biomass waste with coal / A.H. Stiller, D.B. Dadyburjor, J-P. Wann // Fuel Processing Technology. - 1996. - Vol. 49. -P. 167-175.

166. Svensson, K. The fertilizing effect of compost and biogas residues fromsource separated household waste / K. Svensson, M. Odlare, M.J. Pell // Agric. Sei. - 2004. -142. - P. 461-467.