Зерновая дробина как основа для получения биологически активных добавок с пробиотическими свойствами тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Касаткина, Арина Николаевна

• Касаткина, Арина Николаевна
• кандидат биологических наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Касаткина, Арина Николаевна

Введение.

Глава 1: Обзор литературы «Целлюлозосодержащие отходы как сырье для получения БАВ».

1.1. Биотехнология переработки целлюлозосодержащих материалов.

1.2. Характеристика зерновой дробины как сырья для получения кормовых белково-углеводных БАД.

1.3. Способы биодеградации целлюлозосодержащих отходов.

1.3.1.Грибы рода Trichoderma как биодеструкторы лигноцеллюлозных материалов.

1.3.2. Мультиэнзимные композиции. Область применения и перспективы использования в сельском хозяйстве.

1.3.3. Алкилоксибензолы как регуляторы активности ферментов.

1.4.1. Биологически активные добавки для кормления сельскохозяйственных животных.

1.4.2. Способы обогащения микробной биомассы селеном и йодом.

1.5. Пробиотики, роль в организме животных и людей и способы их получения

Глава 2. Экспериментальная часть.

Объекты и методы исследования.

Глава 3. Исследование ферментативных гидролизатов зерновой дробины как основы для получения белково-углеводных кормовых добавок.

3.1. Исследование способов предподготовки зерновой дробины.

3.1.1. Биодеградация зерновой дробины грибом Trichoderma viride.

3.1.3. Ферментативный гидролиз зерновой дробины мультиэнзимными композициями.

3.1.5. Биодеградация зерновой дробины бактериями рода Bacillus.

Глава 4. Гетерофазное культивирование микроорганизмов на ферментативных гидролизатах зерновой дробины.

Глава 5. Получение белково-углеводных кормовых добавок, обладающих пробиотическими свойствами.

5.2. Аэробно-анаэробный способ получения белково-углеводной кормовой добавки с пробиотическими свойствами.

5.3. Двухстадийная последовательная твердофазная ферментация на дробине штамма бактерий Bacillus cereus БП-46 и молочнокислых культур.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Зерновая дробина как основа для получения биологически активных добавок с пробиотическими свойствами»

Эффективность использования возобновляемых источников сырья — одна из важнейших глобальных экономических и экологических проблем современности.

Разработка способов получения биологически активных соединений и белково-углеводных кормовых продуктов из целлюлозосодержащих материалов является одним из актуальных направлений развития современной биотехнологии. Опыт, накопленный в России, показывает эффективность использования методов микробиологического синтеза в решении проблемы обеспечения животноводства высокоценным белком при использовании в качестве сырья целлюлозосодержащих отходов сельского хозяйства, лесной, деревообрабатывающей, пищевой промышленности и др. [JI.K. Эрнст, 1988].

К настоящему времени разработан ряд биотехнологических способов переработки целлюлозосодержащих отходов, основанных на предварительном их гидролизе с последующим глубинным, поверхностным, твердофазным или гетерофазным культивированием микроорганизмов [В.И. Шарков и др., 1973; В.А. Быков, Ф.А. Прищепов, 1985; Е.Г. Борисенко и др., 2003; В.И. Панфилов, 2004].

Широкое использование антибиотических и других фармацевтических средств в настоящий период развития человечества в условиях напряженного состояния окружающей среды обусловило важность использования пробио-тических препаратов для сохранения здоровья человека и животных. Большое внимание исследователей и практиков уделяется получению пробиоти-ческих продуктов для животноводства, что связано, в первую очередь, с проблемами отечественного кормопроизводства. В последние годы структура фуражных кормов в стране претерпела значительные изменения, которые привели к вынужденному введению в комбикорма трудно перевариваемых и низкокалорийных компонентов (отруби, рожь, овес, ячмень, просо, пивная дробина и др.). При этом отрицательное влияние на биологическую ценность фуражных кормов оказывает также использование в их составе белков растительного происхождения (соевый, подсолнечный и рапсовый шроты, горох и др.), что приводит к увеличению доли трудно перевариваемых компонентов в кормах [Э.В. Удалова и др., 2004]. Разработка способов повышения степени усвояемости этих компонентов — одна из важных биотехнологических задач.

Одним из промышленных крупномасштабных трудноусвояемых целлю-лозосодержащих отходов является зерновая дробина — отходы пивоваренного и спиртового производства, которые в настоящее время направляются либо на очистные сооружения, либо сливаются на поля орошения и в водоемы, что наносит экологический ущерб окружающей среде.

Дробина в нативном состоянии не является биологически ценным кормовым продуктом, так как в ее составе преобладают целлюлоза, гемицеллюлозы и трудноперевариваемый протеин. Дробина является источником лишь ряда питательных веществ, в частности, углеводов и минеральных веществ, и очень важно, что она не обладает токсичностью. Это определяет возможность ее непосредственного использования в кормовых целях.

Повышение усвояемости и биологической ценности дробины как крупнотоннажного зернового отхода (до 35 млн. т/год в РФ) является значимым направлением исследований в решении кормовой проблемы при условии снижения себестоимости производства этих продуктов.

Повышение экономической эффективности производства БАД на основе целлюлозосодержащего сырья возможно за счет совершенствования технологии производства и повышения биологической ценности продукта.

Анализ литературы показывает, что повышение биологической ценности БАД возможно за счет увеличения содержания высокоценного белка в продукте, что зависит от степени гидролиза целлюлозных компонентов сырья, от культивируемого на гидролизатах штамма микроорганизмов, от разработки способов повышения содержания биологически активных компонентов в продукте и от биосинтетической активности культивируемых микроорганизмов.

Экономическая эффективность производства БАД может быть повышена за счет совершенствования способов гидролиза сырья, направленных на повышение степени конверсии субстрата; снижения расхода энергетических затрат на аэрирование среды культивирования микроорганизмов на гидролиза-тах, то есть при переходе от аэробных к микроаэрофильным условиям и др.

Целью настоящей работы явилось исследование способов получения бел-ково-углеводной кормовой добавки с пробиотическими свойствами на основе зерновой дробины.

В задачи работы входило:

- изучение гидролиза зерновой дробины при использовании нативных целлю-лолитических ферментов микроорганизмов и промышленных мультиэнзимных композиций;

- разработка режимов гетерофазного глубинного культивирования дрожжей на ферментативных гидролизатах зерновой дробины с целью получения белково-углеводной кормовой добавки и добавки, обогащенной селеном и йодом;

- твердофазное культивирование бактерий рода Bacillus на зерновой дробине;

- культивирование молочнокислых бактерий и их ассоциаций на нативной дробине и ее ферментолизатах;

- исследование возможных способов получения БАД, обладающих пробиотическими свойствами.

Научная новизна результатов исследований. Исследована возможность получения БАД с различными функциональными свойствами (белково-углеводная добавка, белково-углеводная добавка, обогащенная селеном и йодом и белково-углеводная добавка, обладающая пробиотическими свойствами) на основе зерновой дробины при культивировании дрожжей и молочнокислых бактерий. Впервые изучено влияние культуральной жидкости гриба Tricho-derma viride, целевых мультиэнзимных композиций и бактерий рода Bacillus на ферментативную деструкцию зерновой дробины. Исследовано стабилизирующее действие химических аналогов факторов микробного анабиоза — алки-локсибензолов — на комплекс ферментов, входящих в состав мультиэнзимной композиции. Исследован углеводный состав ферментативных гидролизатов дробины, показано, что наибольшую долю углеводов составляют пентозы.

Впервые показан активный рост молочнокислых микроорганизмов на фермен-толизатах дробины, обогащенных автолизатом предварительно культивируемых микроорганизмов (дрожжей, грибов и бактерий). Показана наибольшая активность инокулята ассоциативных культур кефирных грибков при культивировании на ферментативных гидролизатах зерновой дробины.

Практическая значимость. Разработаны технологические режимы переработки зерновой дробины - отходов пивоваренного производства — для получения белково-углеводной кормовой добавки, исследованы двухстадийные процессы культивирования дрожжей и молочнокислых культур на ферменто-лизатах дробины, включающих стадию автолиза дрожжевых клеток, а также показана возможность переработки дробины в анаэробных условиях при использовании штамма бактерий Bacillus cereus БП-46, обладающего целлюло-литической активностью.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Касаткина, Арина Николаевна

Выводы

1. Исследован ферментативный гидролиз отходов пивоваренного производства - зерновой дробины — под действием целлюлолитического комплекса ферментов грибов Trichoderma viride, бактерий Bacillus cereus БП-46 и технических мультиэнзимных композиций, включающих целлюлолитические и протеолити-ческие ферменты;

- определены условия культивирования гриба Tr. viride на зерновой дробине в глубинной культуре, при накоплении целлюлолитических ферментов в среде до 25 ед./см и снижении содержания «сырой» клетчатки в дробине с 19,0 до 15,0% а.с.в.; показана возможность использования посевного материала гриба в виде спор и вегетативных клеток;

- показана биодеструкция зерновой дробины как при твердофазном культивировании гриба Trichoderma viride, так и при использовании его культу-ральной жидкости, обеспечивающая снижение в дробине «сырой» клетчатки на о

6% и накопление в среде РВ до 16,0 г/дм ;

- методом мультисубстратного тестирования проведена таксономическая идентификация штамма бактерий Bacillus БП-46, показана его принадлежность к виду В.cereus. При твердофазном культивировании бактерий Bacillus cereus БП-46 на измельченной дробине «сырая» клетчатка в субстрате снижалась на 11,5%.

- на основании сравнительной оценки эффективности воздействия на зерновую дробину трех мультиэнзимных композиций Ф-ПД-1, Ф-ПД-2 и Ф-ПД-3, отличающихся составом и соотношением уровней активности в мультисисте-мах, был отобран препарат Ф-ПД-3, определены условия его применения, обеспечивающие при 2-х часовой экспозиции накопление РВ в ферментолизате до 35,0 г/дм3, снижение «сырой» клетчатки и «сырого» протеина в твердой фазе с 19,0 до 8,5% и с 25,0 до 15,0%, соответственно.

2. При исследовании влияния химических аналогов факторов микробного анабиоза — алкилоксибензолов (С7- и С12-АОБ) на стабильность ферментативной активности мультиэнзимной композиции Ф-ПД-3 показано, что гомолог С7

АОБ в концентрации 1,0 мг/см стабилизировал активность ферментов, входящих в состав Ф-ПД-3 , при этом уровень продуктов гидролиза — редуцирующих о

Сахаров — повышался до 40,0 г/дм . Препарат С12-АОБ практически не оказывал положительного влияния на ферментативную активность Ф-ПД-3.

3. Исследована активность роста семи молочнокислых бактерий на глюкозе и ферментолизатах зерновой дробины. Отобраны культуры, наиболее активно развивающиеся на ферментолизатах зерновой дробины - бактерии Lactobacillus casei и ассоциативная культура кефирного грибка G, при этом ассоциативная культура кефирного грибка G обладала большей активностью молочнокислого брожения.

4. Разработаны способы получения БАД с функциональными свойствами:

- белково-углвводной добавки, содержащей до 32,0% «сырого» протеина, а также белково-углеводной добавки, обогащенной микроэлементами: селеном (35,2 мг/кг) и йодом (32,7 мг/кг) при гетерофазном культивировании дрожжей Yar-rowia lipolytica на ферментолизатах дробины;

- белково-углеводных добавок с содержанием «сырого» протеина не менее -30,0%, «сырой» клетчатки не более 10,0%, обладающих пробиотическими свойствами, на основе двухстадийного культивирования дрожжей Y. lipolytica, или грибов Tr. viride, или бактерий В. cereus, автолиза их клеток и последующего выращивания молочнокислых бактерий;

- белково-углеводной кормовой добавки при двухстадийном твердофазном процессе культивирования Bacillus cereus БП-46 на измельченной зерновой дробине в анаэробных условиях, автолизе клеток бактерий и последующем выращивании молочнокислых микроорганизмов. Получен продукт с содержанием «сырой» клетчатки не более 8,0% и «сырого» протеина не менее 34,0% при о плотности популяции молочнокислых культур не менее 10 КОЕ/г. 6. По стандартным методикам определена пробиотическая активность полученных БАД, показано, что культуры молочнокислых микроорганизмов, содержащиеся в продуктах были терморезистентны при t=60-65°C, устойчивы к действию поваренной соли, желчи и пищеварительных ферментов.

Заключение

Сравнительная оценка возможных способов получения биологически активных добавок, обладающих пробиотическими свойствами, на основании системного подхода [В.А. Быков и др., 1985] показывает, что наименее затратным является третий способ (табл. 5.3.1.4.), основанный на последовательном твердофазном культивировании бацилл и молочнокислых бактерий.

Первый способ характеризуется наибольшей продуктивностью по образованию белка в продукте и по снижению содержания клетчатки (табл. 5.3.1.4.), однако он является более энергоемким по сравнению с другими способами. Наиболее энергоемкой является стадия глубинного аэробного культивирования о микроорганизмов (на 1 м жидкой фазы, в среднем, расходуется энергии 2,5-3,0 кВт).

Большой дефицит высокоценного белка в составе кормов, а также значимость проблемы утилизации отходов сельского хозяйства и обрабатывающей промышленности, потенциально не обладающих токсичностью для животных, определяет экономическую целесообразность и социальную значимость ис пользования зерновой дробины для получения белково-углеводных БАД, обладающих пробиотическими свойствами.

Высокая влажность зерновой дробины, образующейся как отход пивоваренного производства, затрудняет решение вопроса ее транспортировки. Экономически целесообразным является организация процесса сушки на пивоваренном производстве. Технология получения БАД на ее основе может быть реализована как у производителей пива, так и потребителей БАД — в животноводческих хозяйствах.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Касаткина, Арина Николаевна, 2008 год

1. Авцын А.П., Жаворонков А.А., Риш Ш.А., Строчкова JI.C. Микроэлеме-тозы человека. М.: Медицина. 1991. - С. 196-231.

2. Бабусенко Е.С., Эль-Регистан Г.И., Градова Н.Б. и др. Исследование мем-бранотропных ауторегуляторных факторов метанокисляющих бактерий. // Усп. химии. 1991. - Вып. 11. - С.2362-2373.

3. Банникова Л.А. Селекция молочнокислых бактерий и их применение в молочной промышленности. М.: Пищевая промышленность. - 1975. — 229 с.

4. Бекер М. Е., Швинка Ю. Э., Лука В. Т. и др.; под ред. Бекера М. Е. Трансформация продуктов фотосинтеза. — Рига: Зинатне, 1984. — 252 с.

5. Беспалов М. М., Колпаков А. И. И др. Функции аутоиндукторов анабиоза микроорганизмов при создании метаболического блока в клетке. -Микробиология. 2000. - 217-233 с.

6. Билай В. И., Билай Т. И., Мусич Е. Г. Трансформация целлюлозы грибами. Киев, 1982.-295 с.

7. Билай В.И. Микроскопические грибы продуценты антибиотиков. - Киев: Наука, 1961.- 145 с.

8. Билай В.И. Основы общей микробиологии. Киев: Высш. шк., 1987. -289 с.

9. Борисенко Е.Г., Солдатова С.Ю. Состояние и перспективы биоконверсии растительного сырья в продукты лечебно-профилактического назначения.//

10. Сборник докладов Всероссийской научно-технической конференции-выставки «Высокоэффективные пищевые технологии, методы и средства их реализации». М.,2003. С.20-26.

11. Быков В.А., Манаков В.И. и др. Производство белковых веществ./ Москва. «Высшая школа» Т.5. - 1987 г. - 140с.

12. Быков В.А., Винаров А.Ю., Шерстобитов В.В. Расчет процессов микробиологических производств. К.: Технпса, 1985. - 245 с.

13. Вторичные материальные ресурсы пищевой промышленности. Справочник. М., 1984.

14. Горбатова К.К. Биохимия молока и молочных продуктов.: 2-е издание переработанное и дополненное: Учеб. пособие. М.: Колос., 1997. - 288 с.

15. Готтшалк Г. Метаболизм бактерий. Пер. с англ. Мирошниченко Г.П., Пе-реслени Т.Ю.; под ред. Кондратьевой Е.Н. — М.: Мир, 1982. — С. 131.

16. Грачева И. М., Кривова А. Ю. Технология ферментных препаратов. — 3-е изд., перераб. и доп. М.: Изд-во «Элевар», 2000. 512 с.

17. Громов И.М., Ербаева М.А. «Млекопитающие фауны России и сопредельных территорий» (зайцеобразные и грызуны) (определитель) СПб., ЗИН РАН, 1995 г.

18. Дамберг Б.Э., Апсите М.Р. Получение селеносодержащих дрожжей Sac-charomyces cerevisiae и их биологическая ценность. // Сб.: «Микробиология и биотехнология производства кормов». Рига: Зинатне., 1990. С. 160.

19. Досон Р., Элиот Д., Элиот У. и Джонс К. Справочник биохимика. — М.: Мир, 1991.-С. 396-401.

20. Дудкин М.С., Сайгадак Т.В., Щелкунов Л.Ф. Комплексы белков и пищевых волокон, обогащенных йодом.// Известия вузов. Пищевая технология. -2001.-№2-3.-С.18-21.

21. Егоров Н.С. Основы учения об антибиотиках: Учеб. для студентов биолог. спец. ун-тов. 4-е изд., перераб и доп. — М.: Высш. шк., 1986. — с. 137-138.

22. Ермаков В.В., Ковальский В.В. Биологическое значение селена. М.: Наука, 1971.298 с.

23. Жильцова Т.С., Шолова М.Е., Голубкина Н.А. Исследование резистентности дрожжей p.Candida к соединениям селена // Прикладная биохимия и микробиология. 1996. - Т.32. - №5. - С. 567-570.

24. Жубанова А.А., Тулемисова Ж. К., Чижаева А.В. Пути использования молочнокислых бактерий в с.-х. биотехнологии // Материалы междун. н-п. конф. — Алматы, 2000. 93 с.

25. Калунянц К. А. Химия солода и пива. — М. «Агропромиздат», 1990. 176 с.

26. Калунянц К.А., Шаненко Е.Ф., Зайцева JI.B. Современные способы ферментативного гидролиза целлюлозосодержащих материалов // Итоги науки и техники. Сер. хим. и технол. пищ. прод. М., 1988. - Т.7. - 187 с.

27. Капрельянц А. С. и др. Структурно-функциональные изменения в бактериальных и модельных мембранах под действием фенольных липидов. Биологические мембраны, 1987. - 254-261 с.

28. Капрелянц А.С., Скрыпин В.И., Элъ-Регистан Г.И. и др. Изменениеструктурного состояния мембран A. lysodeikticus под влиянием ауторегулятор-ных факторов dj. // Прикладная биохимия и микробиология. 1985. - Т.21. -№31.-С. 378-381.

29. Ким А.А. Производство глутамата натрия при использовании отходов пивной промышленности. — Докл. междунар. науч. -техн. конф. «Пищевой белок и экология». М., 2000. - С. 139-141.

30. Кислухина О.В., Калунянц К.А., Аленова Д.Ж. Ферментативный лизис микроорганизмов. Учебное пособие: г. Алма-Ата, Изд-во «Руан», 1990 г. С. 56-127.

31. Клесов А.А., Григорян С.Ю. Микробиология и биохимия разложения растительных материалов. М.: Наука, 1988. - С. 110.

32. Коваленко Н.М., Коваленко Г.Д. Триходермин // Защита растений. -1993.-№6.-С.40-43.

33. Колпаков А. И., Ильинская, О. Н. и др. Стабилизация ферментов аутоин-дукторами анабиоза как один из механизмов устойчивости покоящихся форм микроорганизмов. Микробиология, 2000. — с. 224-230.

34. Коновалов С.Б., Васильев С.А. Технико-экономические аспекты производства кормовых биодобавок из отходов пивоваренного производства // Сборник научных трудов. Выпуск 7. Воронежская государственная технологическая академия. Воронеж, 1977.

35. Кононова Н.М. Органическое вещество почвы.- М.: Наука, 1963.-186с.

36. Крашенинин П.Ф., Гаврилова Н.Б., Скрипникова JI.B. Ассоциация молочнокислых культур и бифидобактерий в кисломолочных продуктах // Молочная промышленность.—М.: Молочная промышленность, 1996. №7.-С. 25.

37. Крюков B.C. Популярно о кормовых ферментных препара-тах.//Ветеринарная газета — 1996.- №24 (112).

38. Ленкова Т.Н. Мультиэнзимные композиции в комбикормах, содержащих нетрадиционные компоненты.// Птица и птицеводство. — 2007. № 2. — С. 46-49.

39. Летунова С.В., Ковальский В.В., Алтынбаев Р.В.//С6.: «Биологическая роль микроэлементов и их применение в сельском хозяйстве и медицине». JL: Наука. 1979. С.409.

40. Лиепинып Г.К., Дунце М.Э. Сырье и питательные среды для промышленной биотехнологии. Рига: Зиматнэ, 1986. - 150 с.

41. Макарцев Н.Г. Кормление с/х животных.- К.:ГУП «Облиздат», 1999. -С.255-259.

42. Мануковский Н.С. Кинетика биоконверсии лигноцеллюлоз. Новосибирск: Наука, 1990.- 26 с.

43. Матасар И.Т., Салий Н.С., Ермолова Ю.В. Йодная недостаточность — причина многих заболеваний для настоящего и будущего поколений // Здоровье и питание. 1998. №3-4. С. 8-10.

44. Менх Л.В. Научные и практические основы производства плавленых сыров с зерновыми добавками: Автореф. дис. канд. техн. наук. Кемерово, 1996. — 15с.

45. Мирчник Т.Г. Почвенная микробиология. М.: МГУ, 1976.- 206 с.

46. Мохнач В.О. Иод и его связи с растениями и значение для медицины и сельского хозяйства. // Растительные ресурсы. 1967 г. Т. 3. - С. 157.

47. Мухина Н.В. и др. Корма и биологически активные кормовые добавки для животных / Н.В. Мухина, А.В. Смирнова, З.Н. Черкай, И.В. Талалаева; Под общей ред. Н.В. Мухиной. М.: КолосС, 2008. - 271 с.

48. Огарков В.И., Киселев О.И., Быков В.А. Биотехнологические направления использования растительного сырья// Биотехнология. 1985. - № 3. - С. 115.

49. Осипова И.Г., Михайлова Н.А., Сорокулова И.Б., Васильева Е.А., Гайде-ров А.А. Споровые пробиотики.//Ж. микробиол. — 2003. №3. — С. 113-119.

50. ОСТ 10-1-86 «Дробина пивная. Технические условия»

51. ОСТ 18-341-79 «Дробина пивная сырая»

52. Панфилов В.И. Биотехнологическая конверсия углеводсодержащего сырья для получения продуктов пищевого и кормового назначения. Автореферат на соискание ученой степени доктора технических наук. Москва. 2004. С. 19.

53. Патент РФ № 2002101208, А 21 D 8/02,2003.

54. Патент РФ № 2002101209, А 21 D 13/ 08, 2003.

55. Патент РФ № 2018534, С 12 N 9/42, 1994.

56. Патент РФ № 2046141, С 12 N 9/42, 1995.

57. Патент РФ № 2067994, С 12 N 1/20, 1996.

58. Патент РФ № 2087512, С 09 К 7/00, 1997.

59. Патент РФ № 2104302, С 12 N 1/18, 1998.

60. Патент РФ № 2109059, С 13 К 013/00, 1998.

61. Патент РФ № 210958, С 12 Р7/06, 1998.

62. Патент РФ №2119952, С 12 N 1/18, 1999.

63. Патент РФ № 2159047, А 23 К 1 /16, 2000.

64. Патент РФ № 2159549, А 21 D 8/ 02, 2000.

65. Патент РФ № 2165975, С 12 N 1/18, 2001.

66. Патент РФ № 2170522, А 23 L 1/ 314, 2001.

67. Патент РФ № 2175207, А 23 L 1/ 317, 2001.

68. Патент РФ №2191513, А 21 D 13/08,2002

69. Патент РФ № 2191522, А 23 К 1/16, 2000.

70. Патент РФ № 2202891, А 21 D 8/ 02, 2003.

71. Патент РФ № 2203941, С 12 N 1/18, 2003.

72. Патент РФ № 2204236, А 01 G 1/04, 2003.

73. Патент РФ № 2204263, А 23 К 1/ 06, 2001.

74. Патент РФ № 2213080, С 12 N 1/14, 2003.

75. Патент РФ № 2214723, А 23 К 1/16, 2001.

76. Патент РФ № 2222179, А 01 G 1/04, 2004.

77. Патент РФ № 2223327, С13 К1/02, 2004.

78. Патент РФ № 94039526, А 23 К 1/16, 1997.

79. Патент РФ № 98100002, А 23 К 1/16, 1999.

80. Передерий В.Г., Соловьева А.А. Йодная недостаточность — проблема государственная // Проблемы питания и здоровье. 1996. - № 3-4. - С. 4-5.

81. Похиленко В.Д., Перелыгин В.В. Пробиотики на основе спорообразую-щих бактерий.//Химическая и биологическая безопасность. — 2007. № 2-3 (32-33).-С. 20-41.

82. Р.4.1.1672-03 «Руководство по методам и анализам БАВ в пище».

83. Работнова И.Л. Роль физико химических условий в жизнедеятельности микроорганизмов. -М.: Наука, 1990. - 25 с.

84. Раменский В.А. К пониманию действия мультиэнзимного комплекса на превращение питательных веществ и энергии корма в организме животных.// Вестник ОГУ. 2005. - № 12. - С. 162-164.

85. Рензяева Т.В., Назимова Г.И., Кудинова В.М., Рензяев О.П. Растительное сырьё с функциональными свойствами для производства вафель. — В кн.: Переработка сельскохозяйственного сырья. — Кемерово, 1999. — С.64-65.

86. Рипачек В. Биология дереворазрушающих грибов. М,: Наука, 1967.-186 с.

87. Рудак В.Ф. Биологические основы получения биомассы микроводорослей и перспективы ее применения. Автореферат докторской диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук. М. 1986. 23 с.

88. Руденко Е.Ю. Современные тенденции переработки основных побочных продуктов пивоварения. // Пиво и напитки — 2007 № 2.

89. Санина Т.В., Лукина С.И., Черемушкина И.В., Пономарева Е.И. Комплексно обогащённый бисквит. //Кондитер, пр-во. — 2003. №2. — С. 16-17.

90. Сейкетов Г.Ш. Грибы рода Trichoderma и их использование в практике.-А- Ата: Наука, 1982.- 235 с.

91. Серебряный В.А. Ксиланаза Penicillum canescens: выделение гена, изучение его регуляции и создание штамма-продуцента. Автореферат кандидатской диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук. М., 2006, 26 с.

92. Синицын А.П., Гусаков А.В., Черноглазов В. М. Биоконверсия лигноцел-люлозных материалов: Учеб. пособие. М.: Изд-во МГУ, 1995. 224 с.

93. Смирнов В.В., Резник С.Р., Вьюницкая В.А., Сорокулова И.Б., Литвин В.П. Влияние комплексного пробиотика споролакта на микробиоценоз кишечника теплокровных. // Микробиол. ж. — 1995. — Т. 57. №4. — С. 42-49.

94. Смоляр В.И. Рациональное питание. Киев: Наукова Думка, 1991. 368 с.

95. Сницарь А., Кирилов М., Крохина А., Яхин А., Мурачев Д. Новая белко-во-минеральная добавка для поросят // «Свиноводство». 2000. - № 5.

96. Сницарь А.А., Сницарь А.И. Использование сухой пивной дробины при изготовлении хлеба, выпечки, колбасных изделий и полуфабрикатов. //Ж. «Практик экспертиза». — 2002. №3-4.

97. Сницарь А.И., Ващук Е.А., Минко Н.Д., Рыжов С.А., Траханова Е.М. Новая линия для производства муки из пивной дробины (к использованию в пищевых целях). //Мясная индустрия. — 2003. №4. — С. 16-17.

98. Сницарь А.И., Кирилов М., Анисимова Т.Н., Яхин А. Новая белково-минеральная добавка в состав стартерных комбикормов для телят // «Мясное и молочное скотоводство». 2000. - № 7.

99. Тулемисова Ж.К. Микробиологические основы создания и использования биопрепаратов пробиотического действия. Автореферат докторской диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук. — Казахстан, Алматы, 2002.

100. Тюльпанова В.А. Особенности роста и конидиегенез продуцента трихо-дермина при различных условиях культивирования/ В. А. Тюльпанова, Г.И.Громовых, Г.Л.Козлова и др. Красноярск, 94.-51 е.- Деп. В ВИНИТИ 10.09.94, №34-37, В-94.

101. Увилевич А.З., Ахмина Е.И., Раскин М.Н. Безотходное производство в гидролизной промышленности. М., 1982. С.4-40.

102. Удалова Э.В. и др. Создание многокомпонентных ферментных систем для ряда отраслей агропромышленного комплекса. /Микробные биокатализаторы и перспективы развития ферментных технологий в перерабатывающих отраслях АПК. М., 2004. - С. 279-285.

103. Удалова Э.В. и др. Энзиматическая конверсия растительного сырья и отходов сельскохозяйственного производства. — М., 1990. 34 с.

104. Ушакова Н.А. Изучение мутуалистических взаимодействий микроорганизмов и животных и использование микросимбионтов в биотехнологических целях. Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук — М., 2006.

105. Фаритов Т.А. Использование кормовых добавок в животноводстве.- Уфа.: БГАУ, 2002. С.84-105.

106. Фисинин В.И., Егоров И.А., Сницарь А.И., Мурачев Д.А. Белково-минеральная добавка на основе пивной дробины в рационах бройлеров // «Мясная индустрия». 2000. - № 8.

107. Цугкиева Е.Б. Разработка основ технологии комплексной переработки стевии. Автореферат кандидатской диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук. М., 2007, 23 с.

108. Шарков В.И., Сапотницкий С.А., Дмитриева О.А., Туманов И.Ф. Технология гидролизных производств.- М.: Лесная промышленность, 1973. С. 12-20.

109. Шлегель Г. Общая микробиология: Пер. с нем. — М.: Мир, 1987. — 567 с.

110. Эль-Регистан Г. И. Роль мембранных ауторегуляторных факторов в процессах роста и развития микроорганизмов. Автореферат докторской диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук М., 1988.

111. Эрнст JI. К., Науменко 3. М., Ладинская С. И. Кормовые продукты из отходов леса. М.: Лесн. пром-сть, 1982. - С. 13-15.

112. Adrjanowicz Е., Janczar, Pietkiewicz J. Kierunki zagospodarowania odpadow przemyslu piwowarskiego. //Przem.ferment.owoc.-warz. 1999. - V.43. - №11. -P.13-16.

113. Arnow D., Olesson J.J. and Williams J.H. The effect arginine on the nutrition of Chlorella vulgaris. //American Journal of Botany. 1953. V. 407. P. 100-104.

114. Barker S.B., William H. Summerson. The colorimetric determination of lactic acid in biological material. — The Journal of Biological Chemistry, USA, 1940. — P. 535-555.

115. Carpenter J.F., Crowe J.H. The mechanism of cryoprotection of proteins by solutes.// Cryobiology, 1988, V. 25, P. 244 255.

116. Eriksson К. E. Advances in enzymatic degradation of lignocellulosic materials//Proc. Int. Symp. on Ethanol, Canada. Oct. 1982. P. 345-370.

117. Falcone G., Nickerson W. J. Identification of protein disulfide reductase as a cellular division enzyme in yeasts. //Science. 1956. V. 124. N. 3225. P. 722-723.

118. Fels I.G. and Cheldelin V. H. Methionine in selenium poisoning. //Journal of Biological Chemistry. 1948. V. 176. P. 819-828.

119. Fels I.G. and Cheldelin V. H. Selenite inhibition studies. IV. Biochemical basis of selenate toxicity in yeast. //Journal of Biological Chemistry. 1950. V. 185. P. 803811.

120. Gennity J.M., Bottino N.R. at all. A selenite-induced decrease in the lipid content of a red alga.//Phytochemistry. 1985. V.24. -N.12. P. 2823-2830.

121. Godic Torcar K., Matijasic B.B. Partial Characterisation of Bacteriocins Produced by Bacillus cereus Isolates from Milk and Milk Products. // Food Technol. and Biotechnol. 2003. - Vol. 41, №2. - P. 121-129.

122. Gutmanis Т. Selenium yeast production. Universal Food Corp. U.S. US 4.530. 846 [CL 426-62; A23L1/28], 23 Jul. 1985, Appl. 466, 398. 15 Feb. 1983.

123. Halliwell G., Griffin M. Affinity chromatography of the cellulase system of Trichoderma koningii II Biochem. J. 1978.Vol. 169. P. 713-715.

124. Hirs C.H.W., Timasheff S.N. Meths. Enzymol., Enzyme Structure part B, Academic Press, New York, 1972, V. 25, P. 387 644.

125. Hosoi Т., Ametani A., Kuichi K., Kaminogawa S. Changes in fecal microflora induced by intubation of mice with Bacillus subtilis (natto) spores are dependent upon dietary components // Can. J. Microbiol. 1999. — Vol. 45. - P. 59-66.

126. Hosoi Т., Ametani A., Kuichi K., Kaminogawa S. Improved growth and viability of lactobacilli in the presence of Bacillus subtilis (natto), catalase, or subtilisin // Can. J. Microbiol. 2000. - Vol. 46. - P. 892-897.

127. Hosoi Т., Kuichi K. Natto — A food made by fermenting cooked soybeans with Bacillus subtilis (natto) II Handbook of Fermented Functional Foods / Farnworth E.R. (editor). Boca Raton, Fla.: CRC Press, 2003. - P. 227-245.

128. Hugo W.B., Newton J.M. The adsorbtion of iodine from salutation by microorganisms and by serum. // J. Pharm. Pharmachol. 1964. Vol. 16. P.49.

129. Jadamus A., Vahjen W., Simon O. Studies on the mode of action of probiotics: effects of the sporespecific dipicolinic acid on selected intestinal bacteria. // J. Agr. Sci. 2005. - Vol. 143. - P. 529-535.

130. Klibanov A.M. Enzyme stabilization: A review.// Anal. Biochem., 1979, T. 93, P. 1-25.

131. Korhonen H., Harri M. Growth, body composition and fur quality of farmed minks and polecats on brewers mash and basal diets. //J.Anim.Physiol. Anim.Nutrit. 1988. - V.59. - #2. - P. 107-112.

132. Liqi X., Zheng Q., Xiuzhen X. Assimilation of inorganic selenium by yeast. //Weishengwu Xuebao. 1990. V.30. N.l. P.30-33.

133. Martinek K., Mozhaev V.V. Immobilization of enzymes, an approach to fundamental studies in biochemistry.// hi: Advances hi Enzymology, New York, 1985, V. 57, P. 179-249.

134. Mosbach К. Immobilized enzymes and cells: Parts В, C.// Methods Enzymol, V. 135 and 136, Academic Press, New York, 1987,120 p.

135. Mozhaev V.V., Melik-Nubarov N.S., Siksnis V., Martinek K. Strategy for stabilizing enzymes. Part two: Increasing enzyme stability by selective chemical modification.// Biocataly-sis, 1990, V.3, P. 189-196.

136. Nosoh Y., Sekiguchi T. Protein engineering for thermostability.// Trends Bio-technol, 1990, T. 8, P. 16-20.

137. Nosoh Y., Sekiguchi T. Protein Stability and Stabilization Through Protein Engineering.// Ellis-Horwood, Chichester, UK, 1991 P. 89-102.

138. Pengra R.M., Berry E.C. Growth of Saccharomyces cerevisiae in the presence of selenium arsenic and selenium-arsenic mixtures. //Proceeding Sauce Dakota Academician Science. 1953. V.32. N.l. P.120-123.

139. Podgorska E., Bujak S. Effect of selenium on the growth of the yeasts Saccharomyces cerevisiae and Candida tropicalis. IIActa. Alimentary Polonica. 1985. V.57. N.3.P. 323-331.

140. Profy A.T., Schimmel P. Complementary use of chemical modification and site-directed mutagenesis to probe structure-activity relationships in enzymes.// Prog. Nucl. Acids Res. Mol. Biol., 1988, T. 35, P. 1-26.

141. Schein C.H. Solubility as a function of protein structure and solvent components.// Biotechnology, 1990, V. 8, P. 308 317.

142. Sharp R.J., Scawen M.D., Atkinson T. Fermentation and downstream processing of Bacillus J'/Biotechnology Handbook: Bacillus / Harwood C.R. (editor). — New York: Plenum Press, 1989. P. 255-292.

143. Shrift A. Metabolism of selenium by plants and microorganisms. In D.L. Klayman and W.H.H. Gunther ed. Organic selenium compounds: their chemistry and biology. John Wiley. Sons. Inc. New-York. 1973. P. 760-814.

144. Technik der Weinbergsbegrunung. //Dt.Weinmag. 1998. - №15. - P.25-33.

145. Ushakova N.A., Kotenkova E.V., Kozlova A.A., and Nifatov A.V. A Study of the Mechanisms of Probiotic Effect Of Bacillus subtilis Strain 8130. Prikladnaya Bi-okhimiya i Mikrobiologiya, 2006, Vol. 42, No. 3, pp. 285-291.

146. Wells J.A., Estell D.A. Subtilisin: An enzyme designed to be engineered.// Trends Biochem. Sci. 1987 - T. 13. - P. 291-297.

147. Wong S.S. Wong L.C. Chemical crosslinking and the stabilization of proteins and enzymes.//Enzyme Microb. Technol. 1992. - V. 14. - P. 866-874.165. www.intercharm.ru166. www.sibbio.ru167. www.vostokbio.com

148. Zvyagilskaya R.A., Parkhomenko A.O., Gordeeva A.V. et al. Bioenergetics of Yarrowia lipolytica cells grown at alkaline conditions. // Bioscience reports. — 2004. -Vol. 24.-№2.-P. 117-118.