Разработка и стандартизация иммобилизованных лекарственных форм на основе биологически активных веществ побегов и коры облепихи крушиновидной и энтеросорбента СУМС-1 тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 15.00.01, кандидат фармацевтических наук Сухотерина, Надежда Витальевна

• Сухотерина, Надежда Витальевна
• кандидат фармацевтических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат фармацевтических наук Сухотерина, Надежда Витальевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ИММОБИЛИЗАЦИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ НА СОРБЕНТАХ КАК СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ ДЕЙСТВИЯ И СТАБИЛЬНОСТИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ.

1.1. ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ О ПРОЦЕССЕ ИММОБИЛИЗАЦИИ.

1.2. НОСИТЕЛИ ДЛЯ ИММОБИЛИЗАЦИИ БАВ.

1.2. 1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА. КЛАССИФИКАЦИИ.

1.2.2. ЭНТЕРОСОРБЕНТЫ КАК ПОТЕНЦИАЛЬНЫЕ НОСИТЕЛИ БАВ.

1.3. НАПРАВЛЕНИЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ЭНТЕРОСОРБЕНТОВ В

МЕДИЦИНЕ И ФАРМАЦИИ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка и стандартизация иммобилизованных лекарственных форм на основе биологически активных веществ побегов и коры облепихи крушиновидной и энтеросорбента СУМС-1»

Актуальность проблемы. Одним из перспективных источников биологически активных веществ (БАВ) является уникальное растение Сибирского региона - облепиха крушиновидная (Hippophae rhamnoides L.), сем. лоховые (Elaeagnaceae). традиционным сырьем которой являются плоды. В последние годы сотрудниками кафедры фармацевтической технологии АГМУ. НИИ фармакологии г. Томска и ЗАО «Алтайвитамины» в качестве источников получения препаратов противоопухолевого и противоязвенного действия предложены кора и побеги указанного растения (приложение I). В ходе экспериментальных исследований был разработан ряд жидких и сухих экстракционных препаратов [62. 135], в основе которых лежат вещества, содержащие в своей структуре свободные фенольные гидроксилы, такие как алкалоид серотонин и конденсированные дубильные вещества (Турецкова В.Ф., Зуева Е.П. с соавт.) [133. 136].

Установлено, что выраженным противоопухолевым действием обладает только жидкий экстракт. Включение стадии сушки в технологическую схему получения экстракционных препаратов из данных видов сырья приводит к потере противоопухолевого действия при сохранении противоязвенной активности (Турецкова В.Ф., с соавт.) [134, 135]. что, по-видимому, обусловлено разрушением нативного комплекса БАВ. Вместе с тем, жидкий экстракт побегов и коры облепихи, несмотря на высокую эффективность действия, как и все жидкие экстракты, имеет ряд недостатков: непортативность и трудность использования в процессе изготовления дозированных лекарственных форм; выпадение осадка при длительном хранении ввиду большой насыщенности БАВ и сопутствующими веществами; недостаточно приятный вяжущий и горьковатый вкус.

Из данных литературы известно. что современное развитие фармацевтической технологии позволяет устранить перечисленные недостатки различными способами. Так. одним из перспективных направлений в настоящее время является использование процесса иммобилизации БАВ на сорбентах разнообразной химической природы в процессе изготовления различных, в том числе и твердых, лекарственных форм, что в значительной мере повышает их стабильность за счет включения в разветвленную структуру полимера или в результате адсорбции на носителе, но и в значительной мере увеличивает эффективность препарата за счет возможности потенцирования действия активных компонентов и носителя. [29, 58, 59, 68. 106].

Наличие в побегах и коре облепихи комплекса соединений, содержащих в своей структуре свободные фенольные гидроксилы, позволяет предположить в отношении экстракта побегов и коры облепихи крушиновидной жидкого и другие виды фармакологической активности, так как одним из механизмов действия фенольных соединений является способность ингибировать свободнорадикальные реакции в организме [18, 22, 51, 52]. Обращает на себя внимание тот факт, что антиоксидантные свойства являются предпосылкой разнообразных видов действия, в том числе и гепатопротекторного [7. 118], и то, что многие энтеросорбенты, в том числе СУМС-1 и полифепан, используются в комплексном лечении токсических повреждений печени [34, 102, 103, 145].

Принимая во внимание вышеизложенное, а также учитывая широкое распространение в настоящее время заболеваний, вызванных токсическими поражениями печени, проведение исследований по разработке гепатопротекторного препарата в виде твердых лекарственных форм за счет использования процесса иммобилизации БАВ побегов и коры облепихи крушиновидной на энтеросорбенте является актуальной проблемой.

Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования является создание оригинального иммобилизованного препарата с гепатопротекторной активностью на основе биологически активных веществ побегов и коры облепихи крушиновидной и энтеросорбента.

Для реализации поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Изучить кинетику сорбции и десорбции БАВ побегов и коры облепихи крушиновидной на энтеросорбентах СУМС-1 и полифепан.

2. Выбрать оптимальный носитель для иммобилизации БАВ побегов и коры облепихи крушиновидной.

3. Разработать оптимальную технологию иммобилизованного препарата БАВ побегов и коры облепихи крушиновидной, а также его таблетированной и капсулированной лекарственных форм с высокой фармацевтической и биологической доступностью.

4. Провести стандартизацию, изучить стабильность иммобилизованного препарата и разработанных лекарственных форм.

5. Изучить антиоксидантную и гепатопротекторную активность иммобилизованного препарата.

6. Разработать проекты нормативной документации на иммобилизованный препарат и лекарственные формы.

Научная новизна работы. Теоретически обоснована и экспериментально подтверждена целесообразность использования коры и побегов облепихи крушиновидной как источника БАВ с антиоксидантной и гепатопротекторной активностью.

Впервые проведены исследования по иммобилизации алкалоида серотонина, суммы конденсированных дубильных веществ и катехинов на сорбентах СУМС-1 и полифепан. Выявлено, что сорбция изучаемых БАВ возможна в обоих случаях.

Установлено, что процесс сорбции на сорбенте СУМС-1 подчиняется мономолекулярной теории Ленгмюра, на сорбенте полифепан - полимолекулярной теории БЭТ. Изучены процессы десорбции БАВ коры и побегов облепихи с сорбентов СУМС-1 и полифепан в кислую, щелочную и нейтральную среды. Доказано, что практически полная десорбция иммобилизованных БАВ с сорбента СУМС-1 осуществляется только в кислую среду. Установлено, что оптимальным носителем для БАВ побегов и коры облепихи крушиновидной является гранулированная фракция энтеросорбента СУМС-1.

Теоретически и экспериментально обоснованы оптимальный состав и технология получения таблеток «ЭкоСорб» методом прямого прессования. Установлены оптимальные технологические параметры для получения капсулированной лекарственной формы, обеспечивающие высокие показатели фармацевтической доступности.

Впервые разработаны методики качественного и количественного определения алкалоида серотонина методом ВЭЖХ в гранулах, таблетках и капсулах «ЭкоСорб».

Выявлены антиоксидантная и гепатопротекторная активность разработанного препарата «ЭкоСорб». Установлено, что иммобилизация БАВ побегов и коры облепихи приводит к повышению их антиоксидантного и гепатопротекторного действия.

Практическая значимость. Разработана рациональная технология получения гранул «ЭкоСорб» способом пропитки, в основе которой лежит иммобилизация БАВ побегов и коры облепихи крушиновидной на энтеросорбенте СУМС-1.

Выявлен способ повышения антиоксидантного и гепатопротекторного действия БАВ побегов и коры облепихи за счет их иммобилизации на энтеросорбенте СУМС-1.

В результате проведенных экспериментов созданы стабильные иммобилизованные препараты на основе БАВ коры и побегов облепихи и энтеросорбента СУМС-1 в виде капсулированной и таблетированной лекарственных форм, которые после дополнительных доклинических и клинических испытаний могут быть предложены в качестве гепатопротекторных средств.

По результатам исследований разработаны следующие проекты ФСП: «ЭкоСорб гранулы», «ЭкоСорб капсулы 500 мг», «ЭкоСорб таблетки 500 мг» и проекты лабораторных регламентов: «ЭкоСорб гранулы», «ЭкоСорб капсулы 500 мг». «ЭкоСорб таблетки 500 мг». В ЦЗЛ ЗАО «Алтайвитамины» проведена апробация предлагаемых технологий гранул, капсул и таблеток «ЭкоСорб» по схемам лабораторных регламентов. Установлена стабильность показателей качества гранул в течение 3,5 лет, таблеток и капсул «ЭкоСорб» - 2,5 лет.

Результаты исследований по разработке технологии и стандартизации гранул, капсул, таблеток «ЭкоСорб» используются в лекционном курсе, на лабораторных занятиях по фармацевтической технологии и фармацевтической химии (акты внедрения).

На защиту выносятся результаты экспериментального и теоретического обоснования получения иммобилизованного препарата «ЭкоСорб» на основе БАВ коры и побегов облепихи, изучения его антиоксидантной и гепатопротекторной активности и разработки таблетированной и капсулированной лекарственных форм.

Апробация работы. Основные положения диссертации обсуждались на Итоговой научной конференции АГМУ (Барнаул, 2002); Городской конференции

Молодежь-Барнаулу», медицинский раздел (Барнаул. 2002. 2003. 2004. 2005); Научной и Учебно-методической конференции, посвященной 20-летию фармацевтического факультета Башгосмедуниверситета (Башкирия. 2002); Всероссийской конференции «Молодые ученые-медицине» (Самара. 2003); 59-й, 61-ой региональной конференции по фармации и фармакологии (Пятигорск, 2004, 2006): Конференции студентов и молодых ученых «Международный форум молодых ученых и студентов» (Анталия (Турция), 2004); Научной конференции, посвященной 50-летию Алтайского государственного медицинского университета (Барнаул. 2004); И конференции студентов, молодых ученых и специалистов «Современные проблемы науки и образования» (Хургада (Египет), 2005); Всероссийской научно-практической конференции «Современные проблемы фармакологии и фармации» (Новосибирск. 2005); Юбилейной научной конференции, посвященной 30-летию фармацевтического факультета АГМУ (Барнаул. 2005); Всероссийской научно-практической конференции «Современные принципы и технологии разработки лекарственных средств» (Москва. 2006).

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ Алтайского государственного медицинского университета по медико-биологическим проблемам, раздел «Фармация» (№ Гос. регистрации 01200301413).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 16 печатных работ, в том числе 2 - в зарубежной (Турция, Египет) и 1 статья в ведущем рецензируемом журнале.

Автор выражает благодарность сотрудникам Сибирского государственного медицинского университета (г. Томск), в частности зав. кафедрой фармацевтической технологии, доктору фарм. наук, профессору B.C. Чучалину. за проведение фармакологических испытаний разработанных иммобилизованных препаратов: сотрудникам кафедры фармакологии АГМУ (доктору мед. наук, профессору Я.Ф. Звереву) за помощь в проведении фармакологических исследований: сотрудникам ООО «Сорби-Фарм». г. Новосибирск (И.И. Фроловой) за помощь в проведении некоторых физико-химических исследований, а также сотрудникам ЗАО «Алтайвитамины» (ген. директору, доктору фарм. наук Ю.А. Кошелеву. главному технологу Н.И. Кулешовой, зав. ЦЗЛ О.А. Захарьевой).

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ГЛАВА 1. ИММОБИЛИЗАЦИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ НА СОРБЕНТАХ КАК СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ ДЕЙСТВИЯ И

Заключение диссертации по теме «Технология лекарств и организация фармацевтического дела», Сухотерина, Надежда Витальевна

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. Изотермы сорбции БАВ побегов и коры облепихи крушиновидной на микрограну лированном и гранулированном энтеросорбенте СУМС-1 удовлетворительно описываются уравнением Ленгмюра, что свидетельствует об образовании моноадсорбционного слоя; изотермы сорбции на полифепане характерны, согласно теории БЭТ, для полимолекулярной адсорбции БАВ.

2. Практически не смываемый монослой БАВ побегов и коры облепихи крушиновидной на микрогранулированнном энтеросорбенте СУМС-1 составил 48,6 мг/г сорбента, гранулированном энтеросорбенте СУМС-1 - 22,0 мг/г сорбента; полислой полифепана был значительно выше (300 мг\г сорбента), в связи с чем количество БАВ (с учетом фармакологически активной дозы БАВ побегов и коры облепихи 50 мг) для нанесения на 1 г сорбента методом пропитки соответствовало: 98,6 мг/г, 72 мг/г и 350 мг/г сорбентов.

3. Десорбция фармакологически активной дозы БАВ побегов и коры облепихи крушиновидной (50 мг) со всех изучаемых сорбентов полностью происходит только в кислую среду (0,1 М раствор кислоты хлористоводородной): за первые 5 минут с энтеросорбентов СУМС -1 и за 20 мин с энтеросорбента полифепан высвобождается более 75 % БАВ.

4. Для иммобилизации БАВ коры и побегов облепихи методом пропитки возможно использование сорбентов СУМС-1 и полифепан, но, учитывая меньшую величину монослоя и полную десорбцию фармакологически активной дозы БАВ, целесообразно использование гранулированной фракции энтеросорбента СУМС-1.

5. При количественном определении серотонина в гранулах, таблетках и капсулах «ЭкоСорб» предпочтительно применение метода ВЭЖХ, который более прост в исполнении, занимает меньшее количество времени и имеет незначительную ошибку опыта - 1,007 %, по сравнению со спектрофотометрическим методом.

6. В результате комплекса технологических и биофармацевтических исследований выбран оптимальный состав, разработаны рациональные технологии, проведена стандартизация, определены сроки годности (3, 2 и 2 года соответственно) и составлены технологические схемы получения иммобилизованного препарата «ЭкоСорб» в виде гранул и его таблетированной и капсулированной лекарственных форм с высокими показателями фармацевтической доступности.

7. В фармакологических экспериментах установлена антиоксидантная и гепатопротекторная активность гранул «ЭкоСорб» и его составляющих (экстракт побегов и коры облепихи крушиновидной и энтеросорбент СУМС-1) и, при этом показано, что иммобилизация БАВ побегов и коры облепихи повышает эффективность указанных видов действия. Также выявлено, что исследуемый препарат - гранулы «ЭкоСорб» практически не токсичен (4 класс - «вещества малоопасные»).

8. Результаты исследований положены в основу создания проектов ФСП на гранулы, таблетки и капсулы «ЭкоСорб».

Заключение

Анализ данных литературы позволяет сделать вывод, что иммобилизация биологически активных соединений широко используется в различных областях медицины. Данный процесс лежит в основе получения современных лекарственных форм и при этом позволяет не только повысить стабильность лекарственных препаратов, но и в значительной мере увеличить эффективность их действия. Иммобилизация лекарственных веществ значительно изменяет их фармакокинетику в организме: пролонгирует или ускоряет высвобождение из лекарственной формы, усиливает терапевтическое действие, обеспечивает целенаправленную доставку к органу-мишени, снижает токсическое и побочное влияние. В основе иммобилизации лежат физические или химические взаимодействия между включенным веществом и носителем.

Успех использования иммобилизованных препаратов в значительной мере определяется правильным выбором носителя и метода иммобилизации. В настоящее время известно большое число сорбентов, в том числе и энтеросорбентов. которые могут выступать в качестве носителей для иммобилизации БАВ. При выборе носителя наиболее важными характеристиками являются величина удельной поверхности и характер распределения пор по размерам. Перспективными энтеросорбентами для иммобилизации гидрофильного комплекса БАВ побегов и коры облепихи крушиновидной, в первую очередь благодаря сродству, достаточно большой удельной поверхности, наличию мезо- и микропористой структуры, следует считать углеродминеральные энтеросорбенты и природные полимеры.

В практической медицине России в качестве энтеросорбентов используются препараты активированного угля, кремния диоксида, лигнина гидролизного. метилкремниевой кислоты и алюминия гидроксида с активированным углем, которые нашли широкое применение в комплексной терапии заболеваний ЖКТ, в т.ч. и при лечении заболеваний, сопровождающихся нарушением функций печени. Энтеросорбенты в последние годы используются не только как самостоятельные препараты для энтеросорбции экзо- и эндотоксинов, но и как матрицы-носители для иммобилизации БАВ и биообъектов. Наиболее широко в нашей стране в настоящее время в качестве носителя для иммобилизации БАВ нашел энтеросорбент СУМС-1, благодаря не только своим физико-химическим свойствам, но и минимальным количеством побочных эффектов.

Вышеизложенное свидетельствует о целесообразности создания стабильного комплексного иммобилизованного лекарственного препарата на основе БАВ с гепатопротекторной активностью и энтеросорбентов, который был бы способен нормализовать метаболизм, функцию и структуру паренхимы печени.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объекты исследования.

Объектами исследования служили экстракт побегов и коры облепихи крушиновидной жидкий, полученный по технологии, разработанной В.Ф. Турецковой с соавт. [62], и отвечающий требованиям проекта ФСП 42- ; энтеросорбент СУМС-1 (ФС 42-3283-96) и полифепан (ФСП 42-0085-1858-01).

Экстракт побегов и коры облепихи крушиновидной жидкий. Сырьем для получения экстракта побегов и коры облепихи крушиновидной жидкого служила смесь одно-, двухлетних побегов и коры облепихи в соотношении 8:2, что соответствует реальному соотношению между компонентами сырья, сформировавшемуся естественным образом в процессе проведения агротехнических мероприятий при возделывании облепихи. Рациональность использования побегов и коры облепихи крушиновидной в качестве источника получения лекарственных препаратов обусловлена значительным накоплением надземной биомассы облепихи крушиновидной в виде неиспользуемых отходов -до 50 тонн в год в садах промышленного назначения Алтайского края [134. 135].

Существенным аргументом в пользу актуальности использования побегов и коры облепихи крушиновидной в медицине является разнообразный состав БАВ указанных видов сырья с преобладанием гидрофильной фракции. Особый интерес вызывает наличие в данном виде сырья алкалоидов, основным из которых является серотонин, наличие которого впервые обнаружено в коре облепихи крушиновидной П.С. Массагетовым в 1947 году [86] и подтверждено в дальнейших исследованиях такими авторами, как М.Ф. Петрова. Г.П. Меньшиков и П.С. Кранц (1964 год) [97], R.Y. Ambaye и М.А. Indap (1970 год) [151], В.Ф. Турецкова (2000 год) [133]. Количественное содержание суммы алкалоидов, определенное В.Ф. Турецковой с соавт. спектрофотометрическим методом с использованием способности индольных алкалоидов образовывать комплексы с п-диметиламинобензальдегидом. в коре облепихи варьирует в пределах 0,84+0,004%. 1.03+0,05%, в побегах облепихи - 0,70+0.03%. 1,00±0.033%. Обращает на себя внимание наличие в изучаемых видах сырья значительного количества полифенольиых соединений, которые представлены флавоноидами группы катехина и лейкоцианидина. гликозидами кверцетина. кемпферола и изорамнетина, а также конденсированными и гидролизуемыми дубильными веществами (до 20,03 %) [2. 133, 136].

Кроме гидрофильной фракции БАВ. которая по данным В.Ф. Турецковой с соавт. составляет превалирующую часть активных соединений экстракта побегов и коры облепихи жидкого, в коре и побегах облепихи обнаружено наличие липофильных веществ (до 3.28 %). Липофильная фракция веществ представлена такими классами соединений, как каротиноиды (до 19.11 мг%); тритерпеновые соединения (содержание урсоловой кислоты достигает 0.29 %): кумарины (до 0.44 %). среди которых идентифицирован псорален и жирные кислоты (линолевая. линоленовая. олеиновая. бегеновая. миристиновая. пальметиновая. пальмитолеиновая. стеариновая) [2. 136].

Детальное изучение химического состава как гидрофильной, так и липофильной фракции БАВ было проведено В.Ф. Турецковой с соавт. [133. 135] Данные проведенных исследований положены в основу разработки технологии экстракта побегов и коры облепихи крушиновидной жидкого. Фармакологические исследования, проведенные в НИИ фармакологии г. Томска, выявили наличие противоопухолевого. противометастатического и противоязвенного действия у экстракта побегов и коры жидкого [62. 134, 136].

Экстракт побегов и коры облепихи крушиновидной жидкий, полученный способом противоточного многоступенчатого экстрагирования с законченным циклом в батарее из шести диффузоров, соответствовал требованиям проекта ФСП 42- [135], которые представлены в таблице 2.1.

Спецификация «Облепихи побегов и коры экстракт жидкий»

Показатель Метод Требования НД Экспериментальные данные

1 2 3 4

1. Описание Визуально Прозрачная жидкость красно-бурого цвета, своеобразного запаха Соответствует

2. Подлинность ТСХ, пластинка «Сорбфил». реактив п-диметиламино-бензальдегид Пятно синего цвета с Rf около 0,6 Соответствует

3. Тяжелые металлы ГФ XI, вып. 2, с. 161 Не более 0,01% Не обнаружено

4. Количественное определение Спектрофотометрия Содержание суммы алкалоидов в пересчете на серотонин от 0,35 % до 0,44 % 0,37 ±0,01 -0,38 ±0,01 %

5. Спирт ГФ XI. вып. 2, с. 26 Не менее 34 % 36.4 ±1,3-38,1 + 1,1 %

6. Сухой остаток ГФ XI, вып. 2, с. 161 Не менее 13 % 28,7 ± 1,1 -29,2 + 0,9 %

7. Микробиологическая чистота ГФ XI. вып. 2, с. 187 и Изменение №2 Категория ЗБ Соответствует

Энтеросорбенты. При разработке технологии иммобилизованных препаратов БАВ побегов и коры облепихи мы исходили из того, что к носителю предъявляются следующие требования: во-первых, необходимо, чтобы его адсорбционная емкость по отношению к данному БАВ была высокой; во-вторых, при иммобилизации на этом носителе биологическая активность БАВ должна практически полностью сохраняться; в-третьих, прочность связывания БАВ с поверхностью должна быть такой, чтобы обеспечивать частичную десорбцию вещества в течение необходимого времени. причем концентрация десорбировавшегося БАВ должна быть достаточной для проявления лечебного эффекта [68, 106].

В качестве носителей для БАВ коры и побегов облепихи нами выбраны сорбенты с достаточно высокой удельной поверхностью и развитой мезо- и макропористой структурой, обеспечивающей их умеренные адсорбционные свойства по отношению к таким низкомолекулярным соединениям, как. например, глюкозе, витаминам, гормонам. В то же время наличие в структуре крупных транспортных пор способствует более целенаправленной сорбции средне- и высокомолекулярных БАВ, таких, например, как алкалоиды и дубильные вещества [108]. Кроме того, данные сорбенты, по нашему мнению, с экономической точки зрения, относительно недорогие, что благоприятно отразится на конечной рыночной цене разработанных препаратов.

По результатам предварительных исследований и данных литературы (см. раздел 1.2.) нами были выбраны микрогранулированная и гранулированная фракции энтеросорбента СУМС-1 (Регистрационный номер МЗ РФ 93/174/7), который представляет собой ядро окиси алюминия, покрытое углеродной пленкой. Сорбент производится в виде микросферических гранул размером 0,1 - 0,2 мм и гранул размером 0,2 - 1 мм без запаха и вкуса. Энтеросорбент СУМС- 1 не растворяется в воде, органических и биологических средах [43].

Выбор данного сорбента был обусловлен тем, что он, кроме вышеизложенного, способствует выведению из организма тяжелых металлов, не токсичен, количественно выводится из организма в течение 24-28 часов, не метаболизируется и оказывает одинаковое детоксицирующее действие во всех отделах желудочно-кишечного тракта [90. 103]. Критерием в пользу выбора сорбента СУМС-1 явились также многочисленные экспериментальные и клинические данные о том. что он не нарушает равновесий водно-солевого баланса в организме (в отличие от активированного угля, сорбентов, содержащих цеолит) [103, 108]. Кроме того, были приняты во внимание те факты, что для энтеросорбента СУМС-1 установлена гепатопротекторная активность и его характерной особенностью является обратимая сорбция белковых молекул, низкомолекулярных органических веществ и бактериальных клеток, что позволяет использовать его одновременно в качестве носителя для лекарственных препаратов и энтеросорбента[102. 103].

В качестве второго экспериментального носителя использовали поливалентный неспецифический энтеросорбент на основе природных полимеров - полифепан (Регистрационный номер МЗ РФ 80/1211/4), в основе которого лежат производные фенилпропана. Данный сорбент представляет собой влажный мелкодисперсный порошок коричневого цвета, практически нерастворимый в воде и органических растворителях. Имеет развитую поверхность и значительный набор функциональных групп, что позволяет сорбировать БАВ (возможна сорбция нейромедиаторов (серотонина), алкалоидов, жирных кислот, сахара, стероидных гормонов, тяжелых металлов и др.). Не менее важным фактором, послужившим основой для выбора данного сорбента, явились данные о том. что по показателю сорбции низко- и среднемолекулярных токсинов полифепан не уступает углям [43, 108].

Вспомогательные вещества. При разработке технологии таблетированной лекарственной формы «ЭкоСорб» в качестве вспомогательных использовали вещества, разрешенные к применению в медицине и отвечающие требованиям соответствующей нормативной документации: кальция стеарат (ТУ 6-09-17-317-96) лактоза (ГФ X, с. 589) натрий-карбоксиметилцеллюлоза очищенная (Бланозе MF. Франция) поливинилпирролидон низкомолекулярный (ФС 42-1194-98) целлюлоза микрокристаллическая (ФС 42-3722-99).

2.2. Методы исследования, используемые при качественном анализе БАВ.

1). Десорбцию алкалоида серотонина и его очистку от сопутствующих веществ для качественного обнаружения методом ТСХ проводили с использованием жидкостной экстракции. При этом извлечение алкалоида из экспериментальных препаратов осуществляли органическим растворителем (смесь хлороформ-бутанол (1:1) в щелочной среде (магния оксид), с последующей очисткой от сопутствующих веществ путем реэкстракции 1% водным раствором кислоты хлороводородной [39, 135].

2). Тонкослойную хроматографию (ТСХ) проводили с использованием пластинок «Сорбфил ПТСХ-П-А-УФ» (10x10 см) (Краснодар АО «Пластмаш) - для обнаружения серотонина; пластинок «Силуфол УФ-254» (15x15 см) (УСФР) - для дубильных веществ [39, 135,146].

3). Все приведенные значения Rf являются средними величинами 5-6 измерений.

4). Для приготовления хроматографических систем применяли растворители марок ч.д.а. и х.ч. Соотношения растворителей, обозначенные цифрами, взяты в объемных единицах.

5). Хроматографирование в тонком слое сорбента для выявления алкалоида серотонина проводили в системе растворителей н-бутанол-уксусная кислота-вода (БУВ) (5:1:4); для выявления дубильных веществ - в системе растворителей БУВ (40:12:28), выбранных ранее в качестве оптимальных в исследованиях В.Ф Турецковой для экстракта побегов и коры жидкого [135].

6). Детектирование серотонина на хроматограммах осуществляли после обработки раствором п-диметиламинобензальдегида; дубильных веществ -раствором натрия персульфата, 1% раствором ванилина, раствором п-диметиламинобензальдегида [17. 51, 52, 140].

7). В качестве рабочего стандартного образца (РСО), свидетеля серотонина, здесь и далее был использован 0,1% раствор серотонина-креатинина сульфата («Reanal», Венгрия).

8). Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) был использован при обнаружении серотонина, входящего в состав иммобилизованных препаратов.

Исследование проводили на микроколоночном жидкостном хроматографе Милихром А-02 («ЭкоНова», Новосибирск, Россия) с УФ-детектором, колонкой 2 х 7.5 мм и сорбентом ProntoSIL-120-5-С18, размер частиц 5 мкм, с одновременной детекцией пиков при длинах волн 200, 250, 276, 322 нм. Полярный характер анализируемого соединения, его хорошая растворимость в водных растворах [84] и ацетонитриле были положены в основу выбора элюентов в качестве подвижной фазы. Оптимальные условия определения серотонина найдены при градиентном хроматографировании стандарта и экстракта в следующих условиях: элюент А

100% ацетонитрил. элюент Б - фосфатный буферный раствор в концентрации 0.025 М с рН=6,86, температура колонки 35 С. При этом использовали градиентное элюирование со скоростью 100 мкл/мин. Показания детектора снимали с интервалом 0.34 сек.

2.3. Методы количественного определения БАВ.

1). Для определения суммы БАВ побегов и коры облепихи (серотонин, катехины и конденсированные дубильные вещества) в пересчете на катехин при изучении процессов сорбции и десорбции (при разработке иммобилизованных препаратов) было использовано прямое спектрофотометрическое определение при длине волны 276 нм. Расчеты производили с использованием удельного показателя поглощения катехина (Е -135,0) [39].

Целесообразность данного определения суммы БАВ в пересчете на катехин обосновывалась и тем, что ранее в эксперименте В.Ф.Турецковой с соавт. [39, 135] установлено, что алкалоиды в экстракте побегов и коры облепихи жидком и исходном сырье находятся в виде комплексных соединений с катехинами и лейкоцианидинами и имеют общий максимум поглощения 276 нм.

2). Для количественного определения серотонина спектрофотометрическим методом в иммобилизованных экспериментальных препаратах, полученных при разработке оптимальных технологий, были применены ранее разработанные В.Ф.Турецковой с соавт. методики для экстракта побегов и коры облепихи жидкого с некоторыми модификациями, которые заключались в выборе оптимальных количеств навесок препаратов, позволяющих получить растворы с оптической плотностью 0.3-0,8 единиц после их экстрагирования органическим растворителем (хлороформ-бутанол 1:1) в щелочной среде (магния оксид), с последующей очисткой от сопутствующих веществ путем реэкстракции 1% водным раствором хлороводородной кислоты. Далее методика основывалась на способности индола и некоторых его производных, в частности серотонина, образовывать с п-диметиламинобензальдегидом окрашенные комплексы [39, 135]. Оптическую плотность раствора комплексного соединения определяли при длине волны 590 нм, так как данный максимум характерен для комплексов алкалоидов реэкстра1сга и серотонина гидрохлорида с п-диметиламинобензальдегидом. Расчеты производили с использованием удельных показателей поглощения комплекса серотонина гидрохлорида с п-диметиламинобензальдегидом, определенных ранее В.Ф.Турецковой в эксперименте (Х= 590 нм, Е -56,0) [135].

3). Количественное определение серотонина с использованием метода ВЭЖХ было проведено без предварительного выделения из смеси БАВ (раздел 2.2.8). При этом разработанная методика позволяет одновременно проводить качественное и количественное определение серотонина, так как при найденных условиях хроматографирования наблюдается четкое разделение пиков. Относительная ошибка определения не превышала 2 %.

4). Статистическую обработку данных технологических исследований (Р = 95%) проводили при помощи критерия Стьюдента с вычислением граничных значений доверительного интервала среднего результата и определением ошибки средней арифметической при различных значениях п (число результатов) по стандартным методикам ГФ XI с использованием для расчетов компьютерной программы Exel [41].

5). Реактивы, использованные при разработке методик анализа и стандартизации, описаны в ГФ XI вып. 1 и 2 [41. 42].

2.4. Методы исследования физико-химических и технологических свойств материала.

1). Фракционный (гранулометрический) состав определяли ситовым анализом. 100,0 г исследуемого материала просеивали через набор сит (диаметр отверстий 2,0, 1,0, 0,5, 0,25 и 0,1 мм). Навеску материала помещали на самое крупное (верхнее сито) и весь комплект сит встряхивали вручную в течение 5 мин. затем находили массу каждой фракции и ее процентное содержание [40, 42, 87].

2). Сыпучесть определяли на виброустройстве для снятия характеристик сыпучих материалов ВП - 12А, при этом, навеску препарата «ЭкоСорб» 50,0 г засыпали в сухую воронку с углом конуса 60° с носиком, срезанным под прямым углом на расстоянии 3 мм от конца конуса воронки. Включали секундомер и виброустройство одновременно при закрытой заслонке. После 20 сек. утряски, необходимой для получения стабильных показаний, открывали заслонку и отмечали время, за которое вытечет весь порошок. Сыпучесть определяли по формуле:

V - сыпучесть, г/сек: М - масса навески, г; Т - полное время опыта, сек; 20 - время утряски, сек [14.70].

3). С помощью прибора ВП - 12А определяли также угол естественного откоса - угол между образующей конуса из сыпучего материала и горизонтальной плоскостью.

Для определения угла естественного откоса навеску порошка 50.0 г засыпали в сухую воронку из нержавеющей стали с углом конуса 60° с носиком, срезанным под прямым углом на расстоянии 3 мм от конца конуса воронки, включали устройство, открывали заслонку. После истечения порошка выключали устройство, убирали излишки порошка и подводили угломер, определяя по шкале угол естественного откоса.

При интерпретации результатов экспериментов, учитывали то, что угол естественного откоса для хорошо сыпучих материалов должен изменяться в пределах от 25 до 30°. для связных материалов от 60 - 70° [14. 70. 87].

4). Насыпную массу (объемную плотность) определяли на устройстве для вибрационного уплотнения порошков 545Р - АК - 3 следующим образом: в стеклянный мерный цилиндр устройства насыпали исследуемый порошок навеской 5.0 г (точная навеска) и по шкале на цилиндре замеряли объем порошка. На приборе устанавливали амплитуду колебаний. Количество необходимых колебаний цилиндра определяли по времени, когда объем порошка в цилиндре перестанет изменяться. По шкале на цилиндре определяли объем уплотненного порошка. Объемную плотность (В. кг/м3) вычисляли по формуле:

В = где q - навеска исследуемого порошка, г;

V - объем после встряхивания, мл [14,70. 87].

5). Определение прочности таблеток на истирание проводили на приборе для истирания таблеток барабанного типа - фриабиляторе 545-Р-АК-8. 10 таблеток, обеспыленных и взвешенных с точностью до 0,001 г, помещали в барабан, привинчивали крышку и включали устройство на 5 мин., что соответствовало 100 оборотам барабана. По истечении установленного времени таблетки обеспыливали и определяли их массу с точностью до 0,001г.

Прочность таблеток на истирание в процентах (П) вычисляли по формуле:

Р1 и Р2 - масса таблеток до и после испытания соответственно в граммах.

Согласно требованиям ГФ XI издания статья «Таблетки» прочность таблеток на истирание должна быть не менее 97% [42, 78, 137].

6). Прочность на сжатие (прессуемость) определяли по следующей методике: навеску 0,3 г препарата «ЭкоСорб» спрессовывали в матрице с диаметром 9 мм на гидравлическом прессе типа П-10 при Р = 120 МПа. Перед заполнением матрицы порошком пуансоны и внутренние стенки матрицы протирали ватным тампоном, увлажненным раствором стеариновой кислоты в ацетоне и высушивали. После выталкивания таблетки из матрицы, определяли прочность на сжатие в кг нагрузки с помощью динамометра, которую пересчитывали в Н [14, 70].

7). Влажность (содержание влаги) определяли высушиванием навески «ЭкоСорб» 0,3 г (т.н.) в предварительно высушенном до постоянной массы и взвешенном бюксе в сушильном шкафу в течение трех часов. Влажность (X, %) в процентах вычисляли по формуле: м - масса порошка до высушивания, г: м | - масса порошка после высушивания, г [41].

8). Гигроскопичность (способность поглощать влагу) препарата «ЭкоСорб» проводили по выше описанной методике (определение влажности) после выдерживания бюкса с навеской в камере с относительной влажностью воздуха 100% в течение 24 часов [41]. где

2.5. Методы определения показателей фармацевтической доступности.

1). Определение распадаемости проводили на лабораторном идентификаторе процесса распадаемости таблеток 545Г-АК-1. Для проведения испытаний отбирали 18 образцов исследуемых таблеток определенной прописи, помещали по одному в каждую трубку прибора, прикрепляли к верхнему диску сетку из нержавеющей стали с размером отверстий 2 мм и помещали в сосуд с 0,1 М раствором кислоты хлористоводородной при температуре (37±2) С. Включали прибор и проводили определение времени, в течение которого все образцы должны полностью распадаться, о чем судили по отсутствию частиц на сетке диска. Если 1 или 2 образца не распались, повторяли испытание на оставшихся 12 образцах. Не менее 16 из 18 образцов должны полностью распасться. Согласно требованиям ГФ XI издания статья «Таблетки» время распадаемости таблеток, не покрытых оболочкой, должно быть не более 15 мин. [42, 128].

2). Определение растворения проводили на приборе для растворения лекарственных веществ из таблеток и капсул 545Р-АК-7 типа «Вращающаяся корзинка». Под растворением подразумевают количество действующего вещества, которое в стандартных условиях за определенное время должно перейти в раствор из твердой дозированной лекарственной формы. В качестве среды растворения использовали 0,1 н раствор кислоты хлористоводородной. Испытуемый образец (одну таблетку) помещали в сухую корзинку, которую опускали в среду растворения так. чтобы расстояние до дна сосуда было (20±2) мм. Сосуд закрывали крышкой, затем приводили корзинку во вращение, режим которого составлял 100 об/мин.

Процесс растворения изучали в динамике в течение 75 мин. Через каждые 5 мин отбирали пробу раствора. Фильтрат нейтрализовали свежепрокаленным порошком магния оксида до рН 5-6, перемешивали 5 мин и проводили количественное определение алкалоида серотонина методом ВЭЖХ (методика изложена в разделе 3.3.2.).

Для каждой таблетки определенной прописи рассчитывали количество вещества, перешедшего в раствор (в процентах от содержания в таблетке, которое принимали за 100%). как среднее для 5 таблеток. Интерпретацию результатов исследований проводили согласно требованиям ОФС 42-0003-00 «Растворение»: серия считалась удовлетворительной при растворении в течение 45 мин в среднем не менее 70 % действующего вещества (от содержания в таблетке) в 0.1 М растворе кислоты хлористоводородной, при режиме перемешивания 100 об/мин [42. 128. 137].

ГЛАВА 3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ОБОСНОВАНИЕ ТЕХНОЛОГИИ И СТАНДАРТИЗАЦИЯ ИММОБИЛИЗОВАННОГО ПРЕПАРАТА «ЭКОСОРБ» НА ОСНОВЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ ПОБЕГОВ И КОРЫ ОБЛЕПИХИ КРУШИНОВИДНОЙ

Современное развитие фармацевтической технологии и широкий ассортимент вспомогательных веществ позволяет выйти на новые направления в создании лекарственных средств. Одним из перспективных направлений в настоящее время является использование процесса иммобилизации БАВ на сорбентах различной природы, что в значительной мере повышает их стабильность и позволяет сохранить в нативном состоянии за счет включения в разветвленную структуру полимера или в результате адсорбции на носителе. Вместе с тем, большое разнообразие сорбентов представляет возможность выбора оптимального носителя для иммобилизации БАВ побегов и коры облепихи.

3.1. Изучение процессов адсорбции БАВ побегов и коры облепихи на энтеросорбентах СУМС-1 и полифепан.

Дня изучения адсорбционных свойств БАВ побегов и коры облепихи на двух фракциях энтеросорбента СУМС-1 - микрогранулированной и гранулированной и полифепане нами была использована теория адсорбции Ленгмюра. в основе которой лежит мономолекулярная адсорбция (образование адсорбционного слоя на поверхности сорбента толщиной в одну молекулу). Уравнение изотермы адсорбции Ленгмюра справедливо для широкого интервала концентраций и для границ раздела, как подвижных (жидкость - газ, жидкость - жидкость), так и твёрдых (твердое тело - газ, твердое тело - жидкость). Согласно данной теории, важнейшей характеристикой сорбционного процесса является графическая зависимость количества сорбированного вещества от равновесной концентрации при постоянной температуре (T=const) или изотерма адсорбции.

Уравнение Ленгмюра (3.1):

А = Amax b Ср/(1 + ЬСР), (3.1) где А - экспериментальная адсорбционная емкость при определенной равновесной концентрации Ср, позволяет рассчитать предельную сорбционную емкость Атах в предположении монослойной адсорбции, а также константу Ь, определяющую энергетику сорбции в данном образце. Линеаризация изотермы - в координатах Ср/ А - Ср [54].

Построение изотермы адсорбции для выбранных нами сорбентов осуществляли по методике, разработанной в Новосибирском институте катализа им. Г.К. Борескова СО РАН [68].

3.1.1. Микрогранулированный СУМС-1.

Методика адсорбции БАВ побегов и коры облепихи заключалась в следующем:

Адсорбцию проводили при постоянной (комнатной) температуре. Растворы адсорбатов, представляющих собой смеси экстракта побегов и коры облепихи жидкого и 40 % спирта этилового (экстрагент при получении экстракта) в различных концентрациях. смешивали с сорбентом в соотношении 1:10. Полученные растворы выдерживали на встряхивателе АВУ- 6с в течение 24 часов до установления равновесия в системе сорбент - раствор. Затем растворы декантировали, разбавляли до необходимой оптической плотности (0,3 - 0,8). Оптическую плотность исходного (Со) и осветлённого раствора (Ср - равновесную концентрацию) определяли на спектрофотометре СФ-46 при длине волны 276 нм (см. глава 2.3.) - максимуме поглощения серотонина и полифенольных соединений коры и побегов облепихи (основных БАВ, обеспечивающих фармакологическое действие) [39]. В качестве раствора сравнения использовали адсорбат чистого экстрагента (40 % спирт этиловый), полученный в тех же условиях. Равновесную концентрацию (Ср). определяли по формуле (3.2): VxDx 1000 VxDx 10 .

Ср =-=- , (3-2) ax Ex 100 axE где:

Ср - равновесная концентрация осветленного раствора, мг/мл;

V-объем мерной колбы, мл:

D-оптическая плотность осветленного раствора: а -объем пробы, мл;

Е - удельный показатель поглощения суммы БАВ побегов и коры облепихи в пересчете на катехин (Е -135,0).

По разнице между исходной концентрацией адсорбата (Со) и равновесной концентрацией адсорбата в осветлённом растворе (Ср) определяли количество адсорбированного вещества А (мг/r сорбента) (3.3).

А= Со- Ср (3.3)

По полученным результатам строили графическую зависимость (изотерму адсорбции) в координатах (А : Ср). которая характеризует максимальное количество адсорбата. которое способен адсорбировать сорбент при данном соотношении масса (М) сорбента : объем (V) раствора.

Полученные данные представлены в табл. 3.1.

Список литературы диссертационного исследования кандидат фармацевтических наук Сухотерина, Надежда Витальевна, 2007 год

1. Автандилов. Г.Г. Медицинская морфометрия: руководство / Г.Г. Автандилов. М.: Медицина, 1990. - 384 с.

2. Азарова. О.В. Кора и побеги облепихи крушиновидной новый сырьевой источник биологически активных веществ: автореф. дис. . канд. биол. наук / О.В. Азарова. -Барнаул, 1998. - 20 с.

3. Алюшин, М.Т. Синтетические полимеры в отечественной фармацевтической практике / М.Т. Алюшин, А.И.Артемьев. Ю.Г. Тракман. М: Медицина, 1974. -152 с.

4. Анализ и стандартизация водорастворимых витаминов / А.И. Лутцева, Л.Г. Маслов, Н.С. Евтушенко и др. // Фармация. 1998. - № 5 - С. 22-29.

5. Антиоксидантная активность видов флоры Алтая / А.Л. Шаварда, И.И. Чемесова, Л.М. Беленовская и др. // Растительные ресурсы. 1998.- Т. 34, № 5. - Вып. 2.- С. 1-8.

6. Антиоксидантная активность отваров из растений семейства Грушанковых / Я.С. Арбузова, В.М. Брюханов, Я.Ф. Зверев и др. // Молодежь Барнаулу: материалы науч.-практ. конф. - Барнаул, 2004. - С.190-191.

7. Антиоксидантная и гепатопротекторная активность комбинаций лохеина и эплира /

8. A.С. Саратиков. Ю.А. Литвиненко. B.C. Чучалин и др. // Хим.-фарм. журн. 2001.- Т. 35, № 6. - С.48-49.

9. Арзамасцев. А.П. Валидация методики количественного определения бензонала в таблетированных лекарственных формах / А.П. Арзамасцев, Н.П. Садчикова, Т.Ю. Лутцева // Вопр. биол. мед. и фарм. химии. 2001. - № 4. - С. 29-31.

10. Афиногенов. Г.Е. Антимикробные полимеры I Г.Е. Афиногенов, Е.Ф. Панарин. СПб.: Гиппократ. 1993. - 264 с.

11. Багхи, Д. Антиангиогенные, антиоксидантные и антиканцерогенные свойства нового, богатого антоцианином препарата из экстракта ягод / Д. Багхи, К. Сен. М. Аталай // Биохимия. 2004. - Т. 69. - С. 58-60.

12. Бакибаев, А.А. Антиоксидантные свойства органических соединений / А.А. Бакибаев,

13. B.Н. Горшкова. А.С. Саратиков // Хим. фарм. журнал. - 1997. - № 2 - С. 43-47.

14. Беленький, Л.М. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта / Л.М. Беленький. Л.: Медгиз, 1963.-С. 81-106.

15. Белоусов, В.А. Основные закономерности прессования хим. фарм. порошков / В.А. Белоусов // Хим.-фарм. журнал. - 1974. - № 5. - С. 49.

16. Белоусов, В.А. Основы дозирования и таблетирования лекарственных порошков / В.А. Белоусов, М.Б. Вальтер. М.: Медицина. 1980. - 216 с.

17. Белоусов, В.А. Прессование негранулированных порошков / В.А. Белоусов // Хим-фарм. журнал. 1987. - № 1. - С. 135 - 161.

18. Биомиметический принцип конструирования экдистероидсодержащих липосом / JI.A. Ковлер, В.В. Володин. Н.К. Политова и др. // Докл. РАН. 1998. - Т. 363, № 5. - С. 641644.

19. Биохимические методы анализа растений / Под ред. М.Н. Запрометова. М.: Иностранная литература. I960. - С. 76.

20. Бобров, М.Ю. Амиды дофамина и серотонина с полиеновыми жирными кислотами как нейропротекторы при окислительном стрессе / М.Ю. Бобров, Н.А. Грецкая, А.А. Лыжин Электронный ресурс. Режим доступа: http: // www. fundecology. ru

21. Большаков, В.И. Вспомогательные вещества в технологии лекарственных форм / В.И. Большаков. Л., 1991. - 37 с.

22. Борзунов, Е.Е. Влияние композиции вспомогательных веществ на распадаемость таблеток / Е.Е. Борзунов // Фармация. 1969. - № 2. - С. 20-23.

23. Борзунов, Е.Е. Исследования в области физико-химической механики таблетирования лекарственных порошкообразных веществ: автореф. дис. . докт. фармац. наук / Е.Е. Борзунов. Львов, 1972. - 41 с.

24. Бунятян, Н.Д. Эксперементальное обоснование клинического применения новых растительных антиоксидантов полифенольной природы: автореф. дис. докт. фармац. наук. М., 1999.-45 с.

25. Бурлакова, Е.Б. Изучение аддитивного антиокислительного действия суммы природных липидов / Е.Б. Бурлакова, Н.М. Сорожок. Н.Г. Храпова // Вопр. мед. химии. 1990. -Т.36. - № 4. - С. 72-74.

26. Бурлакова. Е.Б. Исследование синтетических и природных антиоксидантов in vitro и in vivo / Е.Б. Бурлакова, Н.А.Громова, Т.Г.Сторожок // Хим.-фарм. журн.- 1992. № 2. - С. 5-7.

27. Вальтер, М.Б. Постадийный контроль в производстве таблеток / М.Б. Вальтер. О.Л. Тютенков, Н.П. Филиппин. М.: Медицина, 1982. - 208 с.

28. Варшавский. Б.Я. Химия и биохимия свободнорадикального окисления / Б.Я Варшавский, Л.П. Галактионова, С.А. Ельчанинова. Барнаул. 2002. - С. 4-45.

29. Васильев, А.Е. Макромолекулярные терапевтические системы: проблемы и перспективы / А.Е. Васильев, А.Б. Давыдов // Журн. Всесоюз. хим. об-ва им. Д.И. Менделеева. 1985. - Т. 30, № 4. - С. 395-402.

30. Введение лекарственных веществ через кожу достижения и перспективы: обзор / П.Г. Мизина, В.А. Быков, Ю.И. Настина и др. // Вести. ВГУ: сер. Химия. Биология. Фармация. - 2004. - № 1. - С. 176-183.

31. Величко, Т.И. Иммобилизация некоторых антибиотиков и гепарина на коллагеновых материалах: автореф. дис. . канд. хим. наук / Т.И. Величко. М., 1991. - 22 с.

32. Вергейчик, Е.Н. ВЭЖХ в анализе сложных лекарственных препаратов, содержащих пропифеназон / Е.Н. Вергейчик, Н.С. Онегова // Фармация. 2001. - № 3. - С. 24-26.

33. Влияние гепатопротекторов, содержащих полифенолы, на течение экспериментального хронического гепатита / А.И. Венгеровский, Н.О. Батурина, B.C. Чучалин и др. // Хим.-фарм. журн. 1996. - Т. 30, №2. - С. 37-39.

34. Влияние энтеросорбентов на метаболические эффекты гепатопротектора лохеина при экспериментальном токсическом гепатите / А.И. Венгеровский, E.JI. Головина, B.C. Чучалин и др. // Вопр. биол., мед. и фарм. химии. 2000. - № 4. - С. 40-43.

35. Влияние энтеросорбентов на терапевтические эффекты гепатопротектора максара при экспериментальном токсическом гепатите / А.И. Венгеровский. EJI. Головина, B.C. Чучалин и др. // Хим.-фарм. журн. 2000. - Т. 34, № 5. - С. 9-11.

36. Воробьева, В.М. Методы биофармацевтической оценки лекарственных препаратов: методическое пособие / В.М. Воробьева, В.Ф. Турецкова. Барнаул. 1996. - С. 24-38.

37. Гаев, П.А. Энтеросорбент «полисорб МП»: методические рекомендации по клиническому применению / П.А. Гаев. Челябинск, 2001. - С. 6-8.

38. Галаев, И.Ю. "Умные" полимеры в биотехнологии и медицине / И.Ю. Галаев // Успехи биол. химии. -1995. Т. 64. - Вып. 5. - С. 505-524.

39. Галлиулина, Т.Н. Оптимизация состава и технологии таблеток, содержащих ацетилсалициловую кислоту, парацетамол и кофеин / Т.Н. Галлиулина // Фармация. -2001.-№6.-С. 12-14.

40. Государственная Фармакопея СССР. X издание / Под ред. Обоймаковой А.Н., Арзамасцева А.П. - М.: Медицина, 1969. - 1089 с.

41. Государственная фармакопея СССР: Вып. 1. Общие методы анализа / МЗ СССР. 11-е изд., доп. - М.: Медицина, 1987,- 336 с.

42. Государственная фармакопея СССР: Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырьё / МЗ СССР. 11-е изд., доп. - М.: Медицина. 1989. - 400 с.

43. Государственный реестр лекарственных средств. М., 2004. - T.I. - 1405 с. - Т.Н. - 1791 с.

44. Григорьева, Е.П. Совместная сорбционная иммобилизация гидролитических ферментов амилазы, протеазы Bacillus subtilis и витамина В12 на полимерном носителе: автореф. дис. . канд. биол. наук / Е.П. Григорьева. - М. 2001. - 17 с.

45. Громова, О.А. Элементный анализ и ферментативная антиокислительная активность нейрометаболических препаратов природного происхождения / О.А. Громова. О.М. Панасенко. А.В. Скальный // Фармация. 2001. - № 1. - С. 22-23.

46. Дараган. А.Г. Физика таблетирования и основные технологические процессы получения таблеток / А.Г. Дараган // Хим.-фарм. пр-во: обзорн. информация. М. 1983. - 38 с.

47. Дурнев, А.Д. Антиоксиданты как средства защиты генетического аппарата / А.Д. Дурнев, С.Б. Середенин // Хим.-фарм. журн. 2001,- № 5. - С. 95-99.

48. Евсеева, С.Б. Разработка присыпок с иммобилизованными фитопрепаратами ромашки и череды / С.Б. Евсеева // Студенческая наука экономике России: материалы межрегион, науч. конф. - Ставрополь, 2002. - С. 131-132.

49. Евсеева, С.Б. Разработка состава и исследование детских присыпок, содержащих фитокомпозиции / С.Б. Евсеева // Практическая фитотерапия. 2001. - № 2. - С. 20-24.

50. Егорова, Т.А. Основы биотехнологии / Т.А. Егорова. С.М. Клунова. М., 2003. - С. 8693.

51. Запрометов. М.Н. Биохимия катехинов/ М.Н. Запрометов. М.: Наука, 1964.- 296 с.

52. Запрометов, М.Н. Фенольные соединения / М.Н. Запрометов. М.: Наука, 1993,- 214 с.

53. Заривчацкий. М.Ф. Использование полисорба в хирургической практике. Применение Полисорба в медицине / М.Ф. Заривчацкий // Материалы науч. практ. конф. - Пермь. 1997.-С. 8-9.

54. Захарченко, В.Н. Коллоидная химия / В.Н. Захарченко. М: Высш. шк., 1989. - 238 с.

55. Зостерин-Ультра сорбент нового поколения: методические рекомендации для врачей / О.Д. Долгий, Г.Е. Полонская, С.Л. Бурова и др. Электронный ресурс. - Режим доступа: http: // www. zosterin. spb. ru.

56. Иммобилизация пихтового масла / Е.В. Севастьянова. Т.И. Давиденко. Ю.Е. Шапиро и др. // Хим. фарм. журн. -1992. - № 3. - С. 59-63.

57. Иммобилизация трипсина и карбоксипептидазы В на модифицированных кремнеземах и их применение в превращении рекомбинантного проинсулина человека в инсулин / Н.Е Кудрявцева, JI.C. Жигис, В.П. Зубов и др. // Хим. фарм. журн. - 1995. - № 1. - С. 61-64.

58. Иммобилизованные клетки микроорганизмов / А.П. Синицын. Е.И. Райнина. В.И. Лозинский и др. М., 1994,- 288 с.

59. Иммобилизованные ферменты / И.В. Березин. Н.Л. Клячко. А.В. Левашов и др. М: Высш. шк„ 1987.- 159 с.

60. Использование сорбентов для создания детских лекарственных форм / Г.Э. Елькин, А.В. Сульдин, Н.А. Софронова и др. // Актуальные проблемы создания новых лекарственных средств: тез. докл. всерос. науч. конф. СПб., 1996. - С. 88-89.

61. Ищенко, В.И. Исследование взаимосвязи технологических функций вспомогательных веществ и биодоступности солей алкалоидов и синтетических оснований: автореф. дис.докт. фарм. наук / В.И. Ищенко. Харьков. 1988.- 41 с.

62. Кабанов. А.В. Интерполиэлектролитные комплексы нуклеиновых кислот как средство доставки генетического материала в клетку: обзор / А.В. Кабанов, В.А. Кабанов // Высокомолекулярные соединения. 1994. Т. 36, № 2. - С. 198-211.

63. Кабанов, В.А. Физико-химические основы и перспективы применения растворимых интерполиэлектролитных комплексов: обзор / В.А. Кабанов // Высокомолекулярные соединения. 1994. - Т. 36, № 2. - С. 183-197.

64. Каган, В.Е. Антиоксиданты стабилизаторы ферментной системы транспорта кальция в мембранах саркоплазматического ретикулюма in vivo / В.Е. Каган, С.М. Иванова, А.А. Шведова // Хим. - фарм. журн. - 1998. - № 7. - С. 46 - 50.

65. Карпун. Н.А. Опыт ранней послеоперационной сорбции энтеросорбентом полисорб мп у больных с острым разлитым перитонитом. Новое о Полисорбе / Н.А. Карпун, П.А. Гаев. Челябинск. 2001. - С. 48 - 49.

66. Коваленко, Г.А. Адсорбция антисептиков (фурацилина, хлоргексидина) и витамина Е на углеродсодержащих сорбентах / Г.А. Коваленко. Е.В. Кузнецова // Хим.-фарм. журнал. 2000. - № 6. - С. 45 - 49.

67. Колб, В.Г. Справочник по клинической химии / В.Г. Колб. B.C. Камышников. Минск: Беларусь, 1982. - 336 с.

68. Кольман-Иванов, Э.Э. Таблетирование в химической промышленности / Э.Э. Кольман-Иванов. М.: Химия. 1976.- С. 103-122.

69. Компанцев, Д.В. Разработка технологии и стандартизация таблеток и мази глюкозамина гидрохлорида: автореф. дис. . канд. фармац. наук / Д.В. Компанцев. Пятигорск, 2003. - 24 с.

70. Компанцева, Е.В. Получение и исследование комплексов включения лекарственных веществ с Р циклодекстрином / Е.В. Компанцева. - Пятигорск. 1992.- С. 17.

71. Компанцева. Е.В. Производные Р циклодекстрина и перспективы их использования в фармации: обзор / Е.В. Компанцева, М.В. Гаврилин. JI.C. Ушакова // Хим. - фарм. журнал. - 1996. - № 4. - С. 43-46.

72. Копеечек, И. Полимеры с управляемой биодеградируемостью как носители биологически активных веществ / Й. Копеечек // Журн. Всесоюз. хим. об-ва им. Д.И. Менделеева. 1985. - Т. 30, № 4. - С. 372-378.

73. Коршак, В В. Полимеры в процессах иммобилизации и модификации природных соединений / В.В. Коршак. М.И. Штильман. М.: Наука. 1984. - 261 с.

74. Круглякова, К.Е. Общее представление о механизме действия антиоксидантов / К.Е. Круглякова, J1.H. Шишкина. М.: Наука, 1992. - С. 6-17.

75. Кузнецов, А.В. Разработка методов оптимизации выбора вспомогательных веществ при таблетировании прямым прессованием / А.В. Кузнецов // Фармация. 2002. - № 5. - С. 21-23.

76. Кузнецов, А.В. Связывающие вспомогательные вещества в производстве таблеток / А.В. Кузнецов. Пятигорск, 2006. - 24 с.

77. Кузнецов, А.В. Экспериментально теоретическое обоснование выбора способа прессования и вспомогательных веществ в технологии таблетированных лекарственных форм: автореф. дис. докт. фармац. наук / А.В. Кузнецов. - Пятигорск. 2002. - 48 с.

78. Кузнецов, А.П. Валидация методик количественного определения ортофена в мягких лекарственных формах / А.П. Кузнецов // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. Пятигорск. 2004. - Вып. 59. - С. 190-192.

79. Кузнецова, О.Г. Электрохимическая иммобилизация биологически активных веществ при электроокислении и электросшивании поливинилового спирта: автореф. дис. . канд. хим. наук / О.Г. Кузнецова. М., 1992. - 21 с.

80. Липосомы и другие наночастицы как средство доставки лекарственных веществ / А.П. Каплун, Ле Банг Шон, Ю.М. Краснопольский и др. // Вопр. мед. химии. 1999. - Т. 45, Вып. 1. - С. 3-13.

81. Лурье, Ю.Ю. Справочник по аналитической химии / Ю.Ю. Лурье. 5-е изд. - М.: Химия, 1979.-480 с.

82. Мазунина, Т.А. Разработка методов анализа и технологии лекарственных форм пироксикама, их биофармацевтическое и фармакологическое изучение: автореф. дис. . канд. фармац. наук / Т.А. Мазунина. Пермь. 1996. - 21 с.

83. Матафонов, И.И. Облепиха (влияние на организм животного) / И.И. Матафонов. -Новосибирск: Наука. Сиб. отд-ние, 1983.- С. 1-56.

84. Махкамов, С.М. Основы таблеточного производства / С.М. Махкамов 2-е изд. -Ташкент: Фан. 2004. - 148 с.

85. Машковский. М.Д. Лекарственные средства / М.Д. Машковский. 15-е изд. перераб., испр. и доп. - М., 2005. - 1200 с.

86. Меркулов. М.Г. Курс патологогистологической техники / М.Г. Меркулов. СПб.: Медицина, 1969 - 424 с.

87. Микробиоценоз кишечника: методические рекомендации для врачей / Под ред. С.А. Курилович. Новосибирск, 1998.- С. 25.

88. Моин, В.М. Простой и специфический метод определения активности глутатионпероксидазы в эритроцитах / В.М. Моин // Лабораторное дело.- 1986. № 12. -С. 724-727.

89. Новое в коррекции дисбактериоза! БАД «Экофлор» // Сибирский консилиум. 2004. -Т.38. № 8. - С. 18.

90. О влиянии биологически активных веществ на антиоксидантную активность фитопрепаратов / Е.Н. Шкарина, Т.В. Максимова, И.Н. Никулина и др. // Хим. фарм. журн. - 2001. - Т 35, № 6.- С. 40-47.

91. Определение антиокислительной активности химических соединений / С.Г. Благородов. А.П. Шепелев. Н.А. Дмитриева и др. // Хим.-фарм. журн. 1987. - № 3. - С. 292-294.

92. Оценка показателей антиоксидантной активности препаратов на основе лекарственного растительного сырья / А.П. Арзамасцев. Е.И. Шкарина, Т.В. Максимова и др. // Хим. -фарм. журнал.-1999.-№ 11.-С. 17-18.

93. Петрова, М.Ф. Метод получения серотонина из Hippophae rhamnoides / М.Ф. Петрова, Г.П. Меньшиков. П.С. Кранц //Журн. прикл. химии.- 1964.- Т. 37.- С. 2763-2764.

94. Полимерные системы для контролируемого выделения биологически активных соединений / Л.И Валуев, Т.А. Валуев, И.Л. Валуев и др. // Успехи биол. химии. 2003.- Т. 43. С. 307-328.

95. Политова, Н.К. Интерполиэлектролитные комплексы: получение, строение и перспеетивы их применеия: обзор / Н.К. Политова. И.В. Бешлей // Вестн. ИБ. 2002. -№6.-С. 9-12.

96. Получение и биологическая активность комплекса включения тризофлана с Р -циклодекстрином и его композиции с пектином / Г.Н. Шестаков. Ю.К. Василенко, В.А. Компанцев и др. II Фармация. -1998. № 4. - С. 40-42 .

97. Получение и исследование комплекса включения силибора с Р циклодекстрином / Е.В. Компанцева, Т.Н. Максименко, Г.Н. Шестаков и др. // Фармация. - 1994. - № 3. - С. 61-63.

98. Поспелова, Т.И. Лечение поражений печени у больных гемобластозами в отдаленном периоде клинико-гематологической ремиссии: методические рекомендации для врачей и студентов / Т.И. Поспелова, Г.С. Солдатова, Т.А. Агеева. Новосибирск, 1999. - 13 с.

99. Применение энтеросорбента СУМС-1 в клинической практике: докл. науч.-практ. конф. / Под ред. Л.Д. Сидоровой. Л.Д. Бородина, А.К. Ровиной и др. Новосибирск, 1995.-34 с.

100. Промыслов, М.Т. Модификация метода определения суммарной антиоксидантной активности сыворотки крови / М.Т. Промыслов // Вопр. мед. химии. 1990. - Т.36, № 4.- С. 42-44.

101. Радушкевич, Л.В. Основные проблемы теории физической адсорбции / Л.В. Радушкевич. М: Наука, 1970.- С. 270.

102. Разработка лекарственных форм с использованием различных способов иммобилизации на сорбентах / Э.Ф. Степанова, Л.С. Кузнецова, С.Б. Евсеева и др. //

103. Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. -Пятигорск, 2004. Вып. 59. - С. 127.

104. Разработка состава, технологии и исследования таблеток эплира / Т.П. Прищеп, А.И. Венгеровский. Т.Г. Хоружая и др. // Фармация. 1998. - № 4. - С.38-40.

105. Рачковская, JI.H. Углеродминеральные сорбенты для медицины / J1.H. Рачковская. -Новосибирск, 1996. 234 с.

106. Регистр лекарственных средств России: энциклопедия лекарств / Под ред. Ю.Ф Крылова. 11-е изд. - М.: РЛС-2004.2004.- 1502 с.

107. Решетников. В.И. Методология разработки лекарственных форм препаратов с иммунобиологической и адсорбционной активностью: автореф. дис. . док. фармац. наук / В.И. Решетников. Пермь, 2005. - 51 с.

108. Решетников, В.И. Разработка лекарственных форм препаратов с иммунобиологической и сорбционной активностью / В.И. Решетников // Фармация. -2002.- №5. -С. 40 -44.

109. Родионова, Т.И. Применение препаратов с антиоксидантными свойствами в лечении тяжелого диффузного токсического зоба, осложненного миокардиодистрофией / Т.И. Родионова, М.А. Костенко // Клинич. фармакология и терапия. 2003.- № 12. - С. 14-18.

110. Саратиков. А.С. Экстракт солянки холмовой (лохеин) эффективная защита печени / А.С. Саратиков. А.И. Венгеровский, В.С Чучалин. - Томск: STT, 2000. - 114 с.

111. Селиванчикова. И.Б. Изучение компонентного состава флавоноидов и фенолкарбоновых кислот в гомеопатических настойках туи методом ВЭЖХ / И.Б. Селиванчикова. З.П. Костенникова // Фармация. 2001. - № 4. - С. 21-22.

112. Современные аспекты использования вспомогательных веществ в технологии лекарственных препаратов / В.Л. Багирова, Н.Б. Демина, И.А. Девяткина и др. // Фарматека. 1998. - № 6. - С. 34-37.

113. Сокольская, Т.Н. Антиоксидантные свойства комплексного гепатопротекторного препарата «силибохол» / Т.Н. Сокольская, Л.И. Иванова, А.Н. Лебедев // Растительные ресурсы. 2001. - № 3. - С. 69-73.

114. Соловкин, Т.Г. О некоторых вспомогательных веществах для прямого прессования в производстве таблеток / Т.Г. Соловкин, Ю.Г. Транкман // Фармация. 1980. - № 1. -С.53-56.

115. Солодкая, Т.И. Особенности получения и свойства таблеток микалипта / Т.И. Солодкая, В.Я. Лебеденко, В.Д. Солодовина // Фармация. 1983. - № 4. - С. 29-31.

116. Сорбция эфирного масла душицы на бентоните / Н.Д. Бунятян, Д.Р. Халифаев. Б.М. Холназаров и др. // Фармация. 2003. - № 6. - С. 26-27.

117. Софронова, Н.А. Разработка технологии и стандартизация лекарственных препаратов с регулируемым высвобождением действующих веществ на основе ионитов и ВМС: автореф. дис. . док. фармац. наук / Н.А. Софронова. Пермь, 2001. - 44 с.

118. Справочник Видаль. Лекарственные препараты в России. 11-е изд. - М.: "Астра Фарм Сервис", 2005. - 1536 с.

119. Спрыгни, В.Г. Антиоксидантное действие олигомерных проантоцианидов, выделенных из калины, при поражении печени четыреххлористым углеродом и профилактике его токсического эффекта / В.Г. Спрыгин // Гигиена и санитария. 2003. - № 4. - С. 34-39.

120. Сравнительное изучение антиоксидантной активности витаминов Е, А и р каротина // И.В. Кутузова, Н.М. Сторожок, И.П. Рудакова и др. // Фармация. - 1997. - № 4. - С. 1517.

121. Стабилизация липидных препаратов составом, содержащим альфатокоферол. бензафлавин и лецитин / И.В. Кутузова, Н.М.Сторожок. И.П.Рудакова и др. // Фармация. -1997.- № 6.- С. 11-14.

122. Структура мембран поливинилового спирта, содержащих иммобилизованный при отрицательной температуре пепсин / Р.Ю Косенко, А.Л. Иорданский. Л.И. Булатникова и др. // Хим. фарм. журн. - 1995. - № 5. - С. 51 -54.

123. Тенцова А.И. Лекарственная форма и терапевтическая эффективность лекарств: введение в биофармацию / А.И. Тенцова. И.С. Ажгихин. М.: Медицина, 1974. -334 с.

124. Терапевтическая эффективность энтеросорбентов при экспериментальном токсическом гепатите / А.И. Венгеровский. ЕЛ. Головина, B.C. Чучалин и др. // Эфферентная терапия. 2000. - Т. 6. №1. . с. 47-50.

125. Технология получения густого экстракта водянки и его антиоксидантная и антигипоксическая активность / Е.В. Ермилова, Т.В. Кадырова, Е.Н.Краснов и др. // Хим.-фарм. журн. 2001. - № 11. - С. 26.

126. Торчилин. В.П. Иммобилизованные ферменты в медицине / В.П. Торчилин. М.: ВНТИЦ, 1994. -198 с.

127. Трансдермальные терапевтические системы доставки лекарственных веществ: обзор / А.Е. Васильев, И.И. Краснюк. С. Равикумар и др. // Хим.-фарм. журн. 2001. - Т. 35. № 11. - С. 29-42.

128. Турецкова, В.Ф. Изучение полифенольных соединений коры и побегов облепихи крушиновидной / В.Ф. Турецкова // Актуальн. пробл. теории и практики фармации: сб. науч. ст. Барнаул, 2000. - С. 147 - 149.

129. Турецкова, В.Ф. Поиск новых перспективных источников препаратов противоязвенного действия / В.Ф. Турецкова. О.В. Азарова. Е.П. Зуева // Фарм. вестник Алтая. 1998. - № 4. - С. 6-7.

130. Турецкова, В.Ф. Теоретическое и экспериментальное обоснование рационального использования коры и побегов облепихи крушиновидной и коры осины обыкновенной: дис. докт. фармац. наук / В.Ф. Турецкова. Барнаул, 2001. - 317 с.

131. Турецкова, В.Ф. Теоретическое и экспериментальное обоснование рационального использования коры и побегов облепихи крушиновидной и коры осины обыкновенной: автореф. дис. . докт. фармац. наук / В.Ф. Турецкова. Пермь, 2001. - 49 с.

132. Устройство контроля «прочности таблеток на истирание» и «растворение» / В.М. Осипов, В.Д. Викторов, М.В. Гвирц и др. // Хим. фарм. журнал. - 1996. - № 2. - С. 4547.

133. Хасанова, С.Ф. Антиоксиданты и биологически активные вещества сборов / С.Ф Хасанова // Фармация. 2003.- № 4. - С. 27-28.

134. J 39. Химические свойства структурных компонентов сополимеров N винилпирролидона и N - винил - у - аминомасляной кислоты / А.И. Сливкин, B.J1. Лапенко, Л.И. Искра и др. // Вести. ВГУ: сер. Химия. Биология. Фармация. - 2003. - № 2. - С. 228-234.

135. Химический анализ лекарственных растений / Под ред. Н.И. Гринкевич, Л.Н. Сафронич. М.: Высшая школа, 1983. - 176 с.

136. Цеолиты: эффективность и применение в сельском хозяйстве / Под ред. Г.А. Романова. М„ 2000. - 286 с.

137. Чевари, С. Определение антиоксидантных параметров крови и их диагностическое значение в пожилом возрасте / С. Чевари. Т. Андял. Я. Штренгер //Лаб. дело. 1991. -№ 10.-С. 11-13.

138. Чепель, В.Ф. Основы физики биополимеров: учебное пособие / В.Ф. Чепель. -Барнаул, 1996. -155 с.

139. Чучалин, B.C. Рациональные лекарственные формы гепатопротекторов растительного происхождения / B.C. Чучалин, Т.Г. Хоружая. Г.П. Андреева // Материалы междунар. конф. Томск, 2000. - С. 244-245.

140. Чучалин, B.C. Фармакологические и технологические аспекты разработки новых гепатопротективных препаратов природного происхождения: автореф. дис. . док. фармац. наук / B.C. Чучалин. Пятигорск, 2003. - 43 с.

141. Шаль Э. Хроматография в тонких слоях / Э. Шаль. М.: Иностранная литература, 1965.-375 с.

142. Штильман. М.И. Полимеры в биологически активных системах / М.И. Штильман // Соросовский образовательный журнал. -1998. Т. 4, № 5. - С. 48-53.

143. Энтеросорбция / Под ред. Н.А. Белякова. Л., 1991.-330 с.

144. Adsorption of staphylococus on carbomineral sorbents / V.B. Fenelonov, J.L. Chtrnov, L.N. Rachkovskaya et al. // React. Kind. Catal. lett. 1984. - Vol. 25. - P. 225-229.

145. Alving, C.R. The use of liposome-encapsulated drugs in leishmaniasis / C.R. Alving, E.A. Steck // Trends Biochem. Sci. 1979. - Vol. 4. - P. 175-177.

146. Ambaye, R.Y. Chemical examination of Hippophae Salicifolia D. Don / R.Y. Ambaye, M.A. Indap // Indian Journal of Pharmacy. 1970. - Vol. 32, № 5. - P. 130-131.

147. Brekkan, E. Immobilized biomembrane chromatography / E. Brekkan. Uppsala, 1997. - 28 P

148. Brena, B.M. Reversible immobilization of enzymes using agarose-bound group-specific ligands / B.M. Brena. Uppsala, 1996. - 52 p.

149. Bucke, M. Effects of catechins and citrus flavonoids on invasion in vitro / M. Bucke, B. Vyncke, G. Optenakkar // Clin, and Exp. Metast. 1991. - Vol. 9, № 1.- P. 13-25.

150. Cell immortalization / Ed.: Macieira-Coelho A. Berlin: Springer, 2000. - 207 p.

151. Chang, T.M. Artificial cells / T.M. Chang. Springfield, 1972. - P. 40-58.

152. Chang, T.M. Haemoperfusion over microencapsulated adsorbent in a patient with hepatic coma / T.M. Chang // Lancet. 1972. - Vol. 2. - P. 1371-1372.

153. Chang, T.M. Removel of endogenous and exogenous toxins by a miceopcapsulated adsorbent / T.M. Chang // Canad. J. Physiel. Pharmacol. 1969. - Vol. 47. - P. 10431045.

154. Chang, T.M. Semipermiable microcapsules / T.M. Chang // Science. 1964. - Vol.146. -P. 524-525.

155. Cillard, J. Composes phemoliques et radicaux bibrex / J. Cillard. P.Cillard // Sci. Teen. Pharm. 1988. - Vol. 65, № 4. - P. 592-596.

156. De Bour, J.H. The Shapes of Cappllaries / J.H. De Bour // In: Structure and properties of porous materials. London: Butter Worths, 1958. - P. 68-94.

157. Dunea, G. Clinical expererience with the Yatzidis Char-coal artificial Kidney /

158. G. Dunea, W.J. Kolft // Trans. Amer. Soc. Artif. Intern. Organs, 1965. Vol. 11. - P. 178182.

159. Immobilization of enzymes and cells / Ed. by G. F. Bickerstaff. Totowa: Humana, 1997. -XIV - 367 p.

160. Jatzidis, H. Recherches sur Tepuration extrarenal d'laide du carbon actif /

161. H. Jatzidis //Nephron. 1964. - Vol.1. - P.310-312.

162. Komiyama, M. Molecular imprinting: from fundamentals to applications / M. Komiyama. -Weinheim: Wiley-VCH, 2003. 147 p.

163. Phillips, C.R. Immobilization of cells / C.R. Phillips, Y.C. Poon. Berlin: Springer, 1988. -167 p.

164. Shtilman, M.I. Immobilization on Polymers / M.I. Shtilman // Utrecht. Токио: VSP, 1993. -P. 60-78.

165. Slama, R. Insect hormones ecdysteroids: their presence and actions in vertebrates / R. Lafont // Eur. J. Entomol. - 1995. - Vol. 92. - P. 355-377.

166. Yang, Q. Immobilization of liposomes in gel beads for chromatography / Q. Yang. -Uppsala, 1993.-43 p.176