Разработка автоматизированного количественного агглютинационного теста (АКАТ) для иммунодетекции возбудителей и диагностики инфекций тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат медицинских наук Коноплева, Мария Вениаминовна

• Коноплева, Мария Вениаминовна
• кандидат медицинских наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Коноплева, Мария Вениаминовна

ОГЛАВЛЕНИЕ.,.,„„.„„„„,.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Развитие н совершенствован не иммунологических методов на основе феномена ar глютннаини.

I. I Теориа rspciuuiirnupiii и агглютинации ■ иммунохимии m

12 Рмрабогм с и пси «ггочашшщи it объективизации «тлютянМИОпинх twtob

2 Применение агглютннаинонных тестов для серодиагностики сифилиса, а икже для нммунодетсь'цни возбудителей бруцеллеза и ТуДЩрЙНЯн.им.1шшшш

2.1 Методы серодивгноетики сифилиса

2.2 Методы выявление бр> цели. ——. , —-. Ц

2J Метода выявлениа FianctMllaЩЬгешЬ ,, ,,

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

3 Материалы.„.

3,1 Шпшмы бактерий и бактериальные акгигеиы. , ,—.,,,, И

J.2 Лнтисыйороткк и антитела..

3.3 Форталишпиромнные эритроциты барвиа-„

3.4 Клинический материей——.и.—™

3.5 Диагностические твСТ"СИСта« ——— . .——. , ■■—

36 Коыялеюу юшле агтаратио-програычного комплекс* «Критерий 2т „™™.— $

4 Методы исследования.

4.1 Иымуияианив мышей —. .—.

4.2 Получение гибриден . ■ Я

4.3 Выделение моиокпаиалышх н Пйлия.-ююлы1нк аапнтож

4.4 НФА ала определения ЛЯС Сдовдя

4.5 ИФА для определении ЛПС Ftulnremij-—,---—

4 6 Приготовление тссторик и контрольны* трмтриадп-ои лая РПГА.

4,7 РПГА ли определенна ЛПС и микробных клеток бруиелл н F.tularciuia.

4 g РПГА .via ■uis.ieitict янтитрепонемныл антител.

4.9 Лппярчтно-прогрпччниИ кочгиекс «Критерий 2м и чеса дика ашочатюировашмт о количественного определенна реакции агглютинации.

4.10 Клинические исмедоииш* АПК «Критерий 2»

4.11 Статистические методы.-.-.——.-.

РЕЗУЛЬТАТЫ-------------------------------—----------«

5 Обшаи характеристика прог раммы анализа изображений РПГА «Критерий .ш„„„.»„

6 Разработка РПГА-АКАТ для серодиагностики снфнлиса.

7 Разработка РПГА~АКАТ и системы сравнения на основе И ФА для иммунолетекцин бруцелл.IIIK)WMMMHm

7 1 Получение н нАраапернспгм монжломальмых airmrtn. специфичны* к ЛПС бручма- ------.-9)

1.2 Р.првГчпткп рефереыемою ИФЛ ДМ nuu\ нпдетеырш fipyilc^l.

7.3 PinjwSoTiui РПГА-АКАТ ял» мчмутодетечиим бруиедд ., .,,.—

7.4 Определение чуктпгтаыюстя и специфичности РПГА-АКАТ лги иымунодегекшш бруислл ■ сравнении с рсфсрсжиич тестом ИФА —„

8 Разработка РПГА-АКАТ и системы сравнения на основе ИФА для нмиунодстекций F.lularensis.

S I РалршЧтгкп рсферСИСНОГО ИФА ДЫ мычунодстекши F lularensis ] IS

S2 Разработка РПГА-АКАТ ДМ кимунодпехции F-ialmsi*.—--------.—

ОБСУЖДЕНИЕ.-.—.

ВЫ ВОДЫ.««■.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка автоматизированного количественного агглютинационного теста (АКАТ) для иммунодетекции возбудителей и диагностики инфекций»

Актуальность проблемы Существует множество методов, применяемых для иммунодетекции различных маркеров возбудителей инфекций и иммунодиагностики инфекционных заболеваний Каждый метод имеет свои преимущества и недостатки Методы, основанные на разных принципах, дополняют друг друга в верификации результатов иммуноанализа Иммунологические методы могут обладать высокой чувствительностью и специфичностью, сравнимой в предельных значениях с молекулярно-биологическими тестами [23, 135] Метод нммуноферментного анализа (ИФА), основанный на принципе иммуносорбции, где антитела взаимодействуют с антигеном на твердой фазе, а несвязавшийся избыток реагентов удаляется, обладает высокой чувствительностью и специфичностью, однако этот метод многоэтапный, требует специального оборудования и высокой квалификации персонала Агглютинационные тесты, основанные на принципе иммунопреципитации (агглютинации), где взаимодействие антител и антигенов происходит в оптимальном соотнощении в растворе с образованием «решетки» из антигенов и антител, удобны и просты в постановке, в принципе могут обладать сравнимой с ИФА чувствительностью но имеют один существенный недостаток субъективизм учета результатов [38, 160] В современных условиях, когда требования доказательной медицины направлены на исключение ошибок лабораторного персонала путем автоматизации и даже роботизации диагностических методологий, методы твердофазного иммуноанализа подверглись более интенсивному развитию, чем агглютинационные тесты, поскольку больше соответствовали предъявляемым требованиям В связи с этим, в ходе непрерывного совершенствования иммунодиагностических методов вообще для агглютинационных тестов наиболее актуальным становится их объективизация, автоматизация, стандартизация, разработка аналитических количественных характеристик [54, 160] Попытки автоматизации и даже роботизации агглютинационых тестов предпринимались неоднократно, но только фирме Olympus (Япония) удалось создать роботизированную систему для учета результатов реакции пассивной гемагглютинации (РПГА) и зарегистрировать ее для применения в лабораторной практике, успешно пройдя испытания в FDA (США) [100] Система Olympus применяется для серодиагностики сифилиса и цитомегаловируса, а также при определении групп крови Остальные, весьма разнообразные по принципу, попытки автоматизации агглютинационных тестов не получили практического приложения Однако система Olympus, несмотря на использование очень дорогостоящего оборудования и компьютерного программного обеспечения, не обладает возможностями количественного анализа результатов Olympus лишь объективизирует учет результатов РПГА и выражает его в трех вариантах (положительный, отрицательный и неопределенный), а еще в 30-50-е годы прошлого века в классических исследованиях Heidelberger и Kendall, Zmsser, Jones и Pol было доказано, что преципитация и агглютинация, лежащие в основе агглютинационных тестов, являются аналитическими количественными реакциями Метод количественной агглютинации, разработанный в 19291935 гг Heidelberger и Kendall, позволяет осуществить точное аналитическое определение общего весового количества агглютининов в антисыворотках Реакция количественной агглютинации была использована для исследования антисывороток к бруцеллам, пневмококкам, гемолитическим стрептококкам, стафилококкам, менингококкам, гонококкам, дизентерийным микробам, дрожжам, Н influenzae В и В pertussis, Bproteus и Styphosa [11] Поэтому становится очевидным, что для того чтобы решать многие научные и иммунодиагностические задачи, используя наряду с иммуносорбентными методами количественные агглютинационные тесты, необходимо разработать методологию количественной, объективной и автоматизированной оценки результатов этих тестов, удобную для применения не только в научных целях, но и в клинической практике Агглютинационные методы прямой иммунодетекции возбудителей инфекционных заболеваний бактериальной и вирусной природы широко используются Эти тесты применяют для обнаружения возбудителей хеликои кампилобактерной инфекции [130] менингококковой инфекции [104], пищевых токсикоинфекций [124], в том числе холерного токсина и энтеротоксина Е coli [89], трихомониаза [29], а также ВИЧ [77], аденовирусов [105], герпесвирусов и ротавирусов [114, 167], и возбудителей других инфекций Кроме того, эти тесты используют для определения групп крови с помощью моноклональных антител [177] В России, согласно приказу МЗ РФ Хо 64 от 2102 2000 «Об утверждении номенклатуры клинических лабораторных исследований», для диагностики 85 инфекций, вызываемых вирусами, бактериями, грибами, гельминтами и простейшими, используют 165 агглютинационных тестов, из которых доля РПГА составляет 32% Однако до сих пор агглютинационные тесты используют либо в качественном, либо в полуколичественном варианте (определение титра) с визуальным субъективным способом оценки их результатов [54, 63] Большинство возбудителей инфекций, диагностируемых с помощью агглютинационных тестов, требуют постоянного эпидемиологического надзора и ранней диагностики инфекционных заболеваний Массовый серологический скрининг населения в России на маркеры сифилиса (около 70 миллионов анализов ежегодно) проводится в подавляющем числе случаев с использованием морально устаревших субъективных методов реакция Вассермана (РВ), реакция микропреципитации (РМП), реакция иммунофлюоресценции (РИФ), а также РПГА с визуальным учетом результатов Однако известно, что РПГА - очень удобный простой метод, высокочувствительный и специфичный к Тpallidum В настоящее время в условиях перехода на современные методы диагностики сифилиса в России (Приказ МЗ РФ № 87 от 26 03 2001 «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса»), этот метод является альтернативой ИФА и может широко применяться как скрининговый или подтверждающий тест Главный недостаток РПГА - отсутствие объективного автоматизированного учета результатов А это противоречит основным требованиям, предъявляемым к современным методам иммунодиагностики [54] В настоящее время в России сохраняется опасность эпизоотических вспышек бруцеллеза и туляремии, а также существует возможность осуществления актов биотерроризма, связанных с этими инфекциями.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Коноплева, Мария Вениаминовна

выводы

1. Впервые на модели РПГА разработана методология автоматизированного количественного агглютинаинонного теста (АКАТ), применимая для различных научных н нммуиоднагностнческих целей, в частности, для иммунодетекцин возбудителей и диагностики инфекций. Методология основана на количественной оценке результата реакции агглютинации путем компьютерной обработки оцифрованного изображения реакции в 96-луночном планшете, вычислении зависимого от интенсивности реакции коэффициента регрессии, а также на введении отсекающего значения (cut-off).

2. Впервые разработан аппаратно-программный комплекс (АПК «Критерий 2»), включающий модифицированный сканер, компьютер, принтер, базовое и специализированное программное обеспечение с базой данных для количественного учета результатов агглютинаинонных тестов (на модели РПГА), применимый для иммунодетекцин возбудителей и диагностики инфекций.

3. Разработан вариант РПГА-АКАТ для определения антн-трепонемных антител в сыворотке крови человека, Проведены клинические испытания АПК «Критерий 2» и РПГА в формате АКАТ для серодиагностики сифилиса с помощью тест-системы «Люнс РПГА тест» на 26000 сывороток. Продемонстрировано повышение чувствительности (на 43%) н специфичности (в 12 раз) РПГА-АКАТ по сравнению с РПГА с визуальным учетом данных.

4. Разработан РПГА-АКАТ на основе моноклональных антител для определения антигенов бруцелл со 100% специфичностью и чувствительностью 104 м.к./мл для бактериальных клеток и 0,1-ОД иг/мл для ЛПС. В прямых экспериментах по сравнению РПГА-АКАТ и ИФА показана более высокая чувствительность РПГА-АКАТ для бактериальных клеток и одинаковая чувствительность для ЛПС.

5. Разработан РПГА-АКАТ на основе полнклональных антител против ЛПС Ftularensis со 100% специфичностью и чувствительностью 10* -103 т.кУмл для бактериальных клеток и 0,25 нг/мл для ЛПС. Продемонстрирована большая чувствительность РПГА-АКАТ по сравнению с ИФА.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Коноплева, Мария Вениаминовна, 2007 год

1. Лабораторные методы диагностики бруцеллеза. М. - 1968. - С- 4-11,

2. Нммунодиагностикум эрнтроцитарный для выявления поверхностного антигена вируса гепатита «В» в РПГА жидкий // Экспериментально-производственный регламент Jfe 7), М., Мнн. Здрав. СССР- - 1987.

3. Кожные и венерические болезни И Руководство для врачей. под ред. СкрнпкннаЮ.К. -М. Медицина, 1996.-Т.4.-С. 3-138,

4. Королюк и др. Способ оценки реакции гемагглютинации И Патент SU 1327004 АI.- 1987.

5. Краткий определитель бактерий Берги // Под ред. Дж Хоупта. Пер. с англ. М., 1980-С. 135-136,1 1, Кэбот Е„ Мсйср М. Реакция преципитации. Агглютинация И Гл. 2 и 3 в кн. Экепериментальная иммунохимия. М., 1968. - С. 29-139,

6. Леви МЛ, Басова Н.Н. Эритроиитарные диагностикумы и их применение в серологии // Проблемы особо опасных инфекций. -Саратов, 1970. Вып. 2, №12, - С. 207-213.

7. Леви М.И. Басова Н.Н., Сучков Ю.Г. Реакция пассивной гемагглютинацнн и реакция нейтрализации антител при некоторых инфекциях // ЖМЭИ, 1962. - № 10. - С. 40-45.

8. Лямкнн ГЛ., Ляпустина Л.В., Малецкая О.В., Соколова И,А., Таран И,Ф„ Ткаченко Л И., Дальвадянц В.Г., Тамбовцев А.В. Состояние и перспективы лабораторной диагностики бруцеллеза // Клин. Лаб. Диагностика. 2002. - № 12. - С. 46-49.

9. Меринов С.П., Меринова Л.В,, Шишкина Л.П, Выявление антигенов туляремийного микроба и антител к нему нммуноферментным методом И Тез. Докл. Всссоюз. Конф, Ставрополь, 26-27 мая 1986 г. -Ставрополь, 1986. Ч. I.-С. 210-213.

10. Методические указания по профилактике и лабораторной диагностике бруцеллеза людей»< МУ 3.1.7.1189-03) МЗ // Москва. 2003.

11. Мещерякова И.С- Таксономия, идентификация и иммунологическая диагностика возбудителя туляремии И Автор, днсс. докт. биол. наук -1990.

12. Мешерякова И.С., Емельянова О.С. Реакция нейтрализации антител при туляремии // ЖМЭИ, 1968. - Л* I I. - С. 43-48.

13. Мещерякова И.С., Кормилицына М,И,, Родионова И.В., Константинова К.Д. Характеристика новых видов патогенных микроорганизмов I/ ЖМЭИ-1995 -№5.-С. 3-9.

14. Носков Ф.С., Коиннковд Р.Е., Баяр Г,А, Лнофнлизированные эритроиитарные днагностикумы для реакции непрямой гемагглютинаини // Воен. мел. жури. 1973. - № 5. -С 52-53

15. Оноприенко Н.Н. Сравнительная характеритнка липополисахаридов бактерий рола Francisella Н Автор, днсс. кан. бнол.иаук 2001. - С, 20,

16. Пнненова М.Н,, Гречушкииа КН., Азова Л,Г., Семенова Е.В., Мыльникова СИ. // Руководство к практическим занятиям по микробиологии: практическое пособие под ред. Егорова Н.С. -М., нзд-во Моек, ун-та, 1983. - С. 133-134,

17. Скворцов В. Т., Бондаренко В. М. Определение ультрамикроколнчеетв антител к бактериофагу, основанное на специфическом извлечении комплексов фаг-антитело с помощью нммуносорбснтов // Вопр. вирусол. 1971. - №4. - С 603-605.

18. Ум нова Н.С., Желудков М.М., Павлова И.П., Шихан una K.J1. Выявление антигенов возбудителя бруцеллеза иммуноферментным метолом И ЖМЭИ. 1987. - te 9, - С, 103-107.

19. Фримель Г, // Иммунологические методы. М. Медицина, 1987.

20. Ширяев Д.Т., Токарев С.А., Шевченко С-Ф- Использование реакции нейтрализации антител для ретроспективной диагностики эпнзоотнй туляремии II ЖМЭИ. 1964. - № 5. - С. 50-53.

21. Шмутер МФ,, Айкимбасв М.А,Т Тлеугабылов М,К, Использование туляреми Иного антительного днагностнкума для выявления специфического антигена в трупах павших грызунов // Проблемы особо опасных инфекций. Саратов, 1973. - Вып. I. - С. 190-194.

22. Adu-Sarkodie Y^ Opoku BJt., Danso K.A., Weiss H,A„ Mabey D. Comparison of latex agglutination, wet preparation, and culture for thedetection of Trichomonas vaginalis И Sex. Transm. Infect. 2004. - V, 80, N. 3. - P.201-203,

23. Al Dahouk S. Tomaso H., Nockler K„ Ncubauer H, The detection of Brucella spp. using PCR-ELFSA and real-time PCR assays // Clin. Lab. -2004, V, 50, N. 7-8. - P 387-394.

24. Al Dahouk S, Tomaso H-, Nockler K„ Ncubauer H. Frangoulidis D. Laboratory-based diagnosis of brucellosis a review of the literature. Part II: serological tests for brucellosis U Clio. Lab. - 2003. - V, 49, N. 11-12.- P. 577-589.

25. Al-Qudah A.A., Mostratos A. Reiter haemagglutination test: a screening test for syphilis ii Br. J. Vener. Dis. 1982. - V. 5S, N. 5. - P. 281 -285.

26. Al-Shamahy H,A„ Wright S,G. Enzyme-linked immunosorbent assay for brucella antigen detection in human sera tt J. Med. Microbiol. 1998. - V. 47, N. 2.-P. 169-172.

27. Araj G.F Human brucellosis: a classical infectious disease with persistent diagnostic challenges Я Clin, Lab. Sci. 1999. - V. 12. N. 4. - P. 207-212.

28. Augcnbraun M. Rolfs R„ Johnson R. Joesoef R., Pope V. Treponemal specific tests for the serodiagnosis of syphilis. Syphilis and HIV Study Group // Sex. Transm, Dis. 1998. - V. 25, N. 10. - P, 549-552.

29. Bemoco D., Mottu A. Waltz L. (Hoffman-La Roche Inc.) Apparatus and analysis for agglutination reaction II Patent US 4148607. 1979.

30. Bobrovnik S.A. Analysis of dose-dependent antibody titration curves И Ukr. Biokhtm. Zh. 2003. - V. 75, N. 4. - РЛ39-145.

31. Boivin A., Mesrobcanu L, Cootributiona I'etude de la composition chimique des bacteries substance azotes et phosphorccs "acido-solubles" H Compt. Rend. Soc. Biol. -1933. V. 112, - P. 76.162

32. Bowden RA., Cloeckaert A., Zygmunt M.S., Dubray G. Outer-membrane protein- and rough lipopolysaccharide-speciftc monoclonal antibodies protect mice against Brucella ovis // J, Med. Microbiol. — 1995. V, 43, N. 5. - P. 344-347.

33. Bricker В J. PCR as a diagnostic tool for brucellosis // Vet, Microbiol. -2002. V. 90, N. 1-4. - P. 435-446.

34. Castro R.R., Prieto E.S., Santo Azevedo J., Exposto F.L, E%'aluation of the passive particle agglutination test in the serodiagnosis and follow-up of syphilis // Am. J. Clin. Pathol. 2001. - V. 116, N, 4, - P, 581-585.

35. Chand P., Gupta R.K., Kharnia R,N„ Sadana J.R, Detection of brucella antigen in bovine fetal stomach contents by agar gel precipitation and counter-immunoelectiophoresis И Res.Vet Scl 1987. - V. 43. N. 1. - P, 132-133.

36. Cloeckaert A., Jacques L, Bowden R.A., Dubray G. Limet J.N. Monoclonal antibodies to Brucella rough lipopolysaccharide: characterization and evaluation of their protective effect against B. abortus // Res. Microbiol. -1993. -V. 144,N. 6.-P.475-484.

37. Coppola N. New diagnostic frontiers in Brucellosis // lnfez. Med. 2001. -V. 9, N. 3. - P. 130-136.

38. Corbel MJ, Brucellosis: an Owerview H Emerging Infectious Diseases. -1997, V. 3. N. 2. - P. 213-221.

39. Cox P.M., Logan L.C., Noris L.C. Automated, quantitative microhemagglutination assay for Treponema pallidum antibodies H Appl. Microbiol. 1969 - V. 18, N. 3. - P.485-489,

40. Delamaire M. A utomation of the immunohematology laboratory 1! Transfus, Clin. Biol. 2005. - V. I2T N. 2. - P. 163-168.

41. Dobrokhotov B,P., Stcfanova T-A,T Malenkova E,A. Detection of Pasteurella peslis antigens in the pellets of birds of prey as a method of revealing plague epizootics // Zh- Mikrobiol. Epidemiol. Immunobiol. 1971. - V. 48, N. 1, -P. 132-135.

42. Dorigo-Zetsma J.W., Belewu D.+ Meless H„ Sanders E„ Coulinho R,A„ Schaap A„ Wolday D. Performance of routine syphilis serology in the

43. Ethiopian cohort on HIV/AIDS U Sex, Transm. Infect. 2004. - V. 80, N, 2. - P. 96-99.

44. Ebel A.r Bachelart L., Alonso J.M. Evaluation of a new competitive immunoassay (BioElisa Syphilis) for screening for Treponema pallidum antibodies at various stages of syphilis If I. Clin. Microbiol. 1998. - V. 36, N.I-P. 358-361.

45. Ebel A., Vanneste L„ Cardinaels M„ Sablon E., Samson L, De Bosschere K„ Hulstaen F„ Zrein M, Validation of the INNO-LIA syphilis kit as a confirmatory assay for Treponema pallidum antibodies И J. Clin. Microbiol. -2000.-V. 38,N. I.-P. 215-219.

46. Egglstone ST., Turner A.J.L. Serological diagnosis of syphilis. PHLS Syphilis Serology Working Group. H Commun. Dis. Public Health. 2000. -V. 3t N. 3. - P. 158-162.

47. F.ichmann F.r Meyer J.C., Schmid E., Luger A-. Schmidt B.L. Specificity and sensitivity of the solid phase hemadsorption test; a study of treated and untreated syphilitic* HZ. Hautkr. 1983. - V. 58, N. 19. - P. 1369-1388,

48. Elfaki M.G., Lfz-Zaman Т., Al-Hokail A.A., Nakeeb S.M. Detection of Brucella DNA in sera from patients with brucellosis by polymerase chain reaction U Diagn. Microbiol. Infect. Dis. 2005. - V. 53, N. 1. - P. 1-7.

49. Ellis J., Oyston P C., Green M-, Titball R.W. Tularemia. // Clin. Microbiol. Rev. 2002. - V. 15, N. 4. - P-631-646,

50. Ellis R.W., Sobanski M.A. Diagnostic particle agglutination using ultrasound; a new technology to rejuvenate old microbiological methods // J. Med. Microbiol- 2000. - V, 49, N. 10, - P. 853-859.

51. Farshy C.E-, Hunter E.F., Helsel L.O.t Larsen S.A. Four-step enzyme-linked immunosorbent assay for detection of Treponema pallidum antibody И J-Clin- Microbiol. 1985. - V. 21, N. 3. - P, 387-389.

52. Fears MB., Pope V, Syphilis fast latex agglutination test, a rapid confirmatory test t! Clin. Diagn, Lab. Immunol. 2001. - V- 8, N. 4, - P, 841-842.

53. Fenton K.A., Lowndes C.M, Resent trends in the epidemiology of sexually transmitted infections in the European Union И Sex. Transm, Infect, 2004. - V. SO. - P. 255-263.

54. Forbes J,M., Anderson M.D., Anderson G.F,, Bteecker G.C., Rossi E.C., Moss G.S. Blood transfusion costs: a muhicenter study // Transfusion. -1991.-V. 31, N, 4.-P, 318-323.

55. Foreman M,. Sandstrom G., and Sjostedt A. Analysis of 16S ribosomal DNA sequence of Franc isella strain and utilization for determination of the genus and for identification of strain by PCR // Int. J. Syst. Bacteriol. 1994. - V. 44. - P. 38-46.

56. Fujimura K., Ise N., Ueno E„ Hort Т., Fujii N. Okada M. Reactivity of recombinant Treponema pallidum (r-Tp) antigens with anti-Tp antibodies in human syphilitic sera evaluated by ELISA U J. Clin, Lab. Anal. 1997. - V. IKN. 6.-P. 315-322,

57. Fulop M J„ Webber Т., Manchec R.J. Use of a zwittcrionic detergent for the restoration of the antibody binding capacity of immunoblotted Fnmcisella tularensis lipopotysaccharide И Artat. Biochem. 1992. - V. 203, N. I, - P, 141-145.

58. Galfre, G., Milstein, C. Preparation of monoclonal antibodies: strategies and procedures. // Mcth. Enzymol. 1981. - V, 73. - P. 3-45.

59. George R„ Pope V., Fears M., Monill В., Larsen S. An analysis of the value of some antigen-antibody interactions used as diagnostic indicators in a treponemal Western blot (TWB) test for syphilis // J. Clin, Lab. Immunol. -1998. -V. 50, N. t.-P. 27-44.

60. Geraci D., Locorotondo G., Parlato A., Cocchiara R-, Caracappa S„ Scarlata F., Cascio A. Enzyme-linked immunosorbent assay for Brucella rneJitensis-associated antigens U Microbiologica. 1988. - V. 11, N. 3. - P. 213-218.

61. Gcrbier G-, Garin-Bastuji В. Pouillot R. el al, False-positive serological reactions in bovine breccllosis: evidence of the rote of Yersinia enterocolitica 0:9 ft Vet, Res. 1997. - V. 28. - P. 375-383.

62. Gosbell 1.В., Sullivan E.A., Maidmcnt C.A. An unexpected result in an evaluation of a serological test to detect syphilis // Pathology. 1999. - V. 3LN.4.-P. 398-402,

63. Gurtlcr L, Difficulties and strategies of HIV diagnosis U Lancet. 1996. — V. 348, N. 9021. - P. 176-179.

64. Hagedom HJ., Kraminer-Hagedom A.t Dc Bosschere К. Hulstaert F,, Pottel H,, Zrein M. Evaluation of INNO-LIA syphilis assay as a confirmatory test for syphilis II}. Clin. Microbiol. -2002. V. 40, N. 3. - P. 973-978,

65. SO. Heidelberger M„ Kendall F.E, // J. Exp, Med 1929. - V.50. - P.809.81, Heidelberger M„ Kendall F,E. H J. Exp. Med. 1935, - V. 62. - P. 697,

66. Heidelberger M , Kendall F.E.+ Soo Hoo C.M, // J. Exp. Med. 1933. - V. 58.-P. 137.

67. Iarkov S.P., Skopinskaia S.N. Liposomal immunoassay as a method for detecting microorganism antigens and their antibodies // Vesui. Ross. Akad. Med. Nauk. 1999. - N. 8. - P. 39-43.

68. Ito T. Kuwahara S., Yokota T- Automatic and manual latex agglutination tests for measurement of cholera toxin and heat-labile enterotoxin of Escherichia coli // J. Clin. Microbiol. 1983. - V. 17. N. 1. - P. 7-12.

69. Jenkins C.M., Johnson S,T., Bellissimo D.B. Gottschall J.L. Incidence of weak D in blood donors typed as D positive by the Olympus PK 7200 И ImmuTvohematol. 2005. - V. 21. N. 4. - P. 152-154.

70. Johansson A,. Foreman M., Sjostedt A. The development of tools for diagnosis of tularemia and typing of Francisella tularensis // APMIS. 2004. -V. 112.N. 11-12.-P.898-907.

71. Joint FAO.rWHO expert committee on brucellosis ft World Health Organ Tech. Rep. Ser. 1986. - V. 740. - P, 1-132.

72. Karal'nik B.V., Erkinbekova BJt, Studemsova V.K., Grushina T.A. The demonstration of bacterial antigens in mitk H Zh. Mikrobiol. Epidemiol, Immunobiol. 1994. -N. 6. - P, 96-97.

73. Kaufmann A.F., Mcltzer М.1., Schmid G.P. The economic impact of a bioterrorist attack: are prevention and postattack intervention programs justifiable? // Emerg. Infect. Dis, 1997. - V. 3t N. 2. - P. 83-94.

74. Khenscn P.V, Способ агглютинации частиц для одновременного исследования нескольких аналнтов в одном образце Н Patent RU 2111488 CI, GO 1 N33/53.- 1998.

75. Kocabeyoglu O. The antigenic relationship between Brucella abortus. Brucella melitensis and Yersinia enterocolitica serotype 0:3 and 0:9 H Mikrobiyol. Bui, 1990. - V. 24. N, 3. - P, 218-225.

76. KOhler G., Milstein C. Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specificity It Nature, 1975. - V. 256. - P. 495-497.

77. Laemmti U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 // Nature 1970. - V. 227. - P. 680-685.

78. Larsen S.A., Steiner B.M. Rudolph A.H. Laboratory diagnosis and interpretation of tests for syphilis // Clin. Microbiol, Rev. 1995. - V. 8, N. I.-P. 1-21,

79. Lefevre J.C . Bertrand M.A-, Bauriaud R. Evaluation of the Caprta enzyme immunoassays for detection of immunoglobulins G and M to Treponemapallidum in syphilis И У Clin. Microbiol. 1990. - V. 28, N. 8. - P. 17041707.

80. Lefevre P.C., Blancou J., Dedieu L.t Dialb A., Libcau G„ Thiaucourt F. Field diagnostic kits: a solution for developing countries? U Rev. Sci. Tech. -3993.-V. 12, N. 2. P. 451 -460,

81. Leinonen M-, Berva E. The latex agglutination test for the diagnosis of meningococcal and haemophilus influenzae meningitis. И Scand. J. Infect. Dis. 1977, - V. 9, N. 3.-P.I87-19I,

82. Lengyel A., Adam E. Nasz I. Latex agglutination and adenoviruses. II. Detection of antigens // Acta Microbiol, Hung. 1993. - V. 40, N. 2. - P. 85-90.

83. Levine S„ Puck T.T., Sagik B P Hi. Exp. Med. 1953. - V. 98. - P. 521.

84. Liakhov V.F., Borisenko K K., Potekaev N.S., Borisova T, K. Sidorova E.V. The dynamics of Treponema-specific blood immunoglobulins in early forms of syphilis // Vestn. Dermatol. Venerol. 1990, - N. 8, - P. 38-42,

85. Luber A., Schmidt B.L., Schonwald E. The SPHA technic (solid phase hemadsorption) in syphilis serology. A year's experience in routine laboratory procedure U Hautarzt, 1982, - v. 33, N. 3. - P. 138-144.

86. Luger AT,, Schmidt B.L, Kaulich M. Significance of laboratory findings for the diagnosis of neurosyphilis // Int. J. STD AIDS, 2000. - V. 11, N. 4. -P, 224-234.

87. Matte C, Method and apparatus for analyzing liquid substances likely to form agglutinates U Patent US3617222. 1971.

88. Mazeron M.C., Alain-Albcrtini S. Human cytomegalovirus infection: new methods for virological diagnosis U Pathol. Biol. Paris. - 1993. - V. 41, N. 5, - P. 487-494.

89. Medical and public health effects of attack with chemical or biological weapons II Health Aspects of Chemical and Biological Weapons 1st edition - WHO, Geneva. - 1970. - Annex 4.

90. Meshcheriakova I S., Umnova N.S., Shakhanina K.L., Pavlova I.P. Use of the ELISA immunoenzyme method for the detection of the causative agent of tularemia // Zh. Mikrobiol. Epidemiol. Immunobiol. 1988. - N. 2. - P-109-112.

91. Mohabir LA. Cytomegalovirus antibody screening on the Olympus PK7100 it Immunohematol. 1992. - V. 8, N. 2. - P. 41-43.

92. Muller F., Sinzig G. Specificity and sensitivity of immunological diagnosis of congenital neonatal syphilis by the !9S(IgM)-FrA-ABS test И Z. Hautkr. 1982.-V, 57, N. 13.-P 983-1001.

93. L Nakane P.K., Kawaoi A.J. Peroxidase-labeled antibody. A new method of conjugation // Hislochcm. Cytochem, 1974, - V, 22, N, 12, - P, 1084-I09I.

94. Nelson H.D. Screening for syphilis. U.S. Preventive Services Task Force (USPSTF): Brief update H Agency for Healthcare Research and Quality. -Rock ville, 2004, P. ЫЗ.

95. Norris S.J. Polypeptides of Treponema pallidum: progress toward understanding ihcir structural, functional, and immunologic roles // Microbiol. Rev. 1993. - V. 57. N. 3 . - P. 750-779.

96. Notermans S-, Wernars K. Immunological methods for detection of foodbome pathogens and their toxins /I Int. J, Food Microbiol, 1991. - V. 12, N. L- P. 91-102.

97. Novaretti M.C. Navarro S.P., Dorlhiac-Llacer P.E., Chamonc D.A. К phertotyping using a PK-7200 automated analyzer II ImmunohematoL -1998, -V. 14, N. L- P. 22-25,

98. Olympus PK TP System. Microhemagglutination test for detection of Treponema pallidum antibodies using the Olympus PK Instrument И User's guide. • 2003.

99. On S.L. Identification methods for Campylobacters, helicobacters, and related organisms H Clin. Microbiol. Rev. 1996. - V.9, N. 3. - P.405-422.

100. Onishchenko G.G., Monisov A.A,T Gul'chenko L.P,, Fedorov Iu.M. Morbidity from zooanthroponotic and natural-focus infections and the measures for their prevention U Zh. MrkrobioE. Epidemiol. Immunobioi. -1999,-N. 4--P. 14-18.

101. Ozlurk R., Mert A., Kocak F„ Ozaras R. Koksal F,, Tabak F., Bilir M., Aktuglu Y. The diagnosis of brucellosis by use of BACTEC 9240 blood culture system // Diagn. Microbiol. Infect Dis. 2002. - V. 44, N. 2. - P. 133-135.

102. Palmer KM. Higgins S,P„ Herring A J., Kingston M.A. Use of PCR in the diagnosis of early syphilis in the United Kingdom It Sex. Transm. Infect. -2003, V. 79, N, 6. - P. 479-483.

103. Pappas G., Panagopoulou P., Christou L^, Akritidis N. Brucella as a biological weapon // Cell. Mol. Life Sci. 2006. - V. 63, N. 19-20. - P. 2229-2236.

104. Pcrera V,Y,T Creasy M,T., Winter A J. Nylon bead enzyme-linked immunosorbent assay for dctcction of sub-picogram quantities of Brucella antigens// J, Clin. Microbiol. 1983. - V. 18, N, 3. - P. 601-608.

105. Perry M.B., Bundle D-R. I.tpopolysaccharide antigens and carbohydrates of Brucella // In L.G. Adams (ed.), Advances in brucwellosis research. Texas A&M University Press, College Station, Tex. - 1990. - P. 76-88.

106. Peruski A.H., Johnson L.H. 3rd, Peruski L.F. Jr. Rapid and sensitive detection of biological warfare agents using time-resolved fluorescence assays//J, Immunol.Methods. -2002.- V, 263. N. 1-2,-P.35-41.

107. Pfapp F.V.t Sinor L.T., Rachel J-M, The evolution of pretransfusion testing; from agglutination to solid-phase red cell adherence tests it Crit. Rev. Clin. Lab, Sci, 1989. - V, 27, N. 2. - P. 179-209.

108. Маслова с соавт. Характеристика структуры н антигенной активности лнпополисахаридов у разных видов Francisella. //Молек. генетика, микробиол, и вирусол. 1998. - №3. - С.26-29.

109. Potasman J., Even L., 13anai M., Cohen E., Angel D-, Jaffe M. Brucellosis: an unusual diagnosis for a seronegative patient with abscesses, osteomyelitis, and ulcerative colitis // Rev. Infect. Dis. 1991. - V. 13, N. 6 -P. 1039-1042.

110. Protcobacteria, part В it Bcrgey's manual of systematic bacteriology 2 and ed. Springes-Veriag, NY. 1984, - V.2.

111. RadclifTe K. European guidelines for STD. // Int. J, STD&AIDS. V. 12. Suppl. 3,

112. Rai G.P., Rao K.M. Preliminary studies on comparative efficacy of Brucella abortus antigens in indirect immunofluorescence technique // Indian J, Med. Res. 1986, - V. 84 . - P. 448-450.

113. Ratushna V.G„ Sturgill D,M,+ Ramamoonhy S., Reichow S.A., He Y., Lathigra R., Sriranganathan N. Hailing S.M., Boyle S.M., Gibas С J. Molecular targets for rapid identification of Brucella spp. // BMC Microbiol. -2006.-V. 6.-P. 13-33.

114. Reisner B.S. Mann L.M. Tholckcn C-A., Waitc R.T., Woods G-L. Use of the Treponema pallidum-specific captia syphilis IgG assay in conjunctionwith the rapid plasma reagin to test for syphilis U J, Clin. Microbiol. 1997.- V. 35, N.5.-P. 1141-1143.

115. Reiss R.F., Malavade V.t Johnson CX-, Hendricks E„ Rabin B.I., Marsh W.L. Blood grouping with the Olympus PK7I00 testing system // Clin. Lab. Haematol. 1988. -V. 10, N. 4. - P. 385-390.

116. Robinson-Dunn B. The microbiology laboratory's role in response to bioterrorism // Arch. Pathol. Lab, Med. 2002. - V. 126, N, 3. - P. 291-294

117. Robuchon-Merovak R.G., Robuchon-Merovak C-R. Apparatus for displaying the results obtained on an agglutination support tf Patent US4104031.-1978.

118. Rojas N. Freer E., Weintraub A. el aL Immunochemical identification of Brucella abortus lipopolysaccharide epitopes // Clin. Diagn. Lab. Immunol.- 1994. V. lt N. 2. - P. 206-213.

119. Romanowski В., Sutherland R-, Fick G.H., Moorvcy D., Love E.J. Serologic response to treatment of infectious syphilis // Ann. Intern. Med. 1991, - V. 114, N. 12.-P. 1005-1009.

120. Roop R,M. 2nd, Preston-Moore D., Bagchi Т. Schurig G.G, Rapid identification of smooth Brucella species with a monoclonal antibody // J. Clin. Microbiol. 1987. - V. 25, N. II. - P, 2090-2093.

121. Sandstrom G., Tftrnvik A., Wolf-Watz H. Lofgren S. Antigen from Francisella tularensis: nonidentity between determinants participating in cell-mediated and humoral reactions // Infect. Irnrnun. 1984, - V. 45, N. 1, -P, 10Ы06.

122. Sandstrtim G.E., Wolf-Watz H„ Tamvik A. Duct ELISA for detection of bacteria in fluid samples // J. Microbiol. Methods. 1986, - V. 5. - P. 4147.

123. Sam mi С., Baiocchi P., Berardelli A„ Vcnditti M-, Sena P. A case of brain abscess due In Brucella melitensis // Clin. Infect. Dis. 1994. - V. 19. N. 5. -P. 977-978.

124. Sato Т., Kubo E., Yokota M., Kayashima T-, Tomizawa T. Treponema patlidum specific IgM hacroagglutmation test for serodiagnosis of syphilis // Br. J. Vener. Dis. 1984. - V. 60, N. 6. - P. 364-370.

125. Scientific Committee on Animal Health and Animal Welfare. Brucellosis in Sheep and Goats // SANCO.C.2/AH/R23/200I. 2001. - P. 31.

126. Sequeira PJ. Serological diagnosis of untreated early syphilis. Importance of the differences in THA, TPHA, and VDRL test titres Я Br. J, Vener, Dis. -1983. -V. 59, N. 3. P. 145-150.

127. Shakir R-A., At-Din A.S., Araj G.F., Lulu A.R., Mousa A.R., Saadah M.A. Clinical categories of neurobrucellosis. A report on 19 cases // Brain. -1987. V. 110, PL 1. - P. 213-223.

128. Sharma Y. Method for detecting immunological agglutination and biochemical agent therefore // Patent US4319882. 1982.

129. Stcmshorn B.W- Recent progress in the diagnosis of brucellosis It Dev. Biol. Stand, 1984. - V. 56. - P, 325-340.

130. Tilrnvik A., Lofgren S., Ohlund L., Sandstrom G. Detection of antigen in urine of a patient with tularemia it Eur, J. Clin. Microbiol. 1987. - V. 6, N. 3.-P. 318319.

131. Tret'iakov S.I., Iarkov S.P., Zlobin V.N., Kalinin 1u.T. The use of solid-phase liposomal immunoassay for determining a bacterial antigen of Upopolysaccharide nature // Zh, Mikrobtol. Epidemiol, lmmunobiol. 1992, -N- I M2. - P. 43-46.

132. Vizcaino N. Chordi A„ Fernandez-Lago L, Characterisation of smooth Brucella Ii^polysaccharides and polysaccharides by monoclonal antibodies, it Res. Microbiol. 1991. - V. 142. N. 9. - P. 971-978.

133. Voak D, Monoclonal blood group antibodies // Beitr, Inlusionsther. 1989. -V. 24. - P. 200-213.

134. Wenger JD, Mollis DG. Weaver RE, Baker CN, Brown GR, Brenner DJ, Broome CV. Infection caused by Francisella phtlomiragia (formerly Yersinia philomiragia). A newly recognized human pathogen I/ Ann. Intern. Med. 1989. - V. 110t N. 11. - P. 888-892.

135. Weynants V., Gilson D., Cloeckaert el al. Characterization of smooth lipopotysaccharides and О polysaccharides of Brucella species by competition binding assays with monoclonal antibodies I/ Infect. Immunol. -1997 -V. 65,-P. 1939-1943,

136. World Health Organization. Treponema infections /I Technical report series. -Geneva, WHO, 1982.-674.

137. Young E.J, An overview of human brucellosis И Clin. Infect. Dis. 1995. -V,21, N.2.-P.283-290.

138. Young H, Guidelines for serological testing for syphilis H Sex. Transm. Infect, 2000. - V. 76, N. 5. - P. 403-405.

139. Young Н., Henrichsen С., Robertson H,H. Treponema pallidum haemagglutination test as a screening procedure for the diagnosis of syphilis U Вт. J. Vener. Dis. 1974. - V. 50, - P. 341-346.

140. Young H., Moyes A-, McMillan A., Patterson J. Enzyme immunoassay for anti-treponemal IgG; screening or confirmatory test? // J. Clin. Pathol. -1992. V. 45, N. I. - P. 37-41.

141. Young H., Moyes A., Scagar L., McMillan A. Novel recombinant-antigen enzyme immunoassay for serological diagnosis of syphilis ft J. Clin. Microbiol. 1998. - V. 36, N. 4. - P. 913-917.

142. Zimmerman S.J., Gillikin S., Sofat N., Bartholomew W.R., Amsterdam D. Case report and seeded blood culture study of Brucella bacteremia // J. Clin. Microbiol. 1990. - V, 28, N, 9. - P. 2139-2141.

143. Zinsser H. // J. Immunol. 1930, - V, 18. - P, 483,

144. Zrcin M., Maure I., Boursier F., Soufftet L, Recombinant antigen-based enzyme immunoassay for screening of Treponema pallidum antibodies in blood bonk routine H J. Clin. Microbiol. 1995. - V. 33, N. 3. - P. 525-527,