Сравнительное изучение эффективности методов иммунодиагностики урогенитального хламидиоза тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.46, кандидат медицинских наук Аликберов, Шавкет Ахметович

• Аликберов, Шавкет Ахметович
• кандидат медицинских наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Аликберов, Шавкет Ахметович

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ГЛАВА 1. МЕТОДЫ ИММУНОДР1АГНОСТИКИ ИППП.

ГЛАВА 2. СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ МЕТОДОВ

ИММУНОДИАГНОСТИКИ УРОГЕНИТАЛЬНОГО ХЛАМИДИОЗА.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ГЛАВА 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

3.1. Обследованный контингент и материал для исследования.

3.2. Антигены.

3.3. Методы иммунодиагностики с применением коммерческих тест - систем.

3.4. Реактивы и буферные растворы.

3.5. Методы иммуноанализа.

3.5.1. Варианты ТИФА.

3.5.2. Иммуноблот.

3.6. Электрофорез в денатурирующих условиях.

3.7. Оборудование и приборы.

3.8. Статистическая обработка.

ГЛАВА 4. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ ИММУНОДИАГНОСТИКУМОВ

НА ОСНОВЕ ПОЛИ - И МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ

ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИГЕНОВ С. TRACHOMATIS

У БОЛЬНЫХ УРОГЕНИТАЛЬНЫМ ХЛАМИДИОЗОМ.

4.1. Сравнительное изучение чувствительности иммунофлюоресцентных тест - систем на основе поли -и моноклональных антител для выявления антигенов

С. trachomatis в клиническом материале от больных с урогенитальным хламидиозом.

4.2. Сравнительная эффективность обнаружения антигенов С. trachomatis в клиническом материале от больных с моно -и микст - инфекцией в ПИФ с применением поли и моноклональных антител.

ГЛАВА 5. СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ИММУНОДИАГНОСТИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИГЕНОВ И СПЕЦИФИЧЕСКИХ АНТИТЕЛ К

С. TRACHOMATIS.

5.1. Детекция специфических антихламидийных IgA и IgG антител в сыворотках пациентов с подозрением на урогенитальный хламидиоз.

5.2. Сравнительный анализ чувствительности методов иммунодиагностики для выявления специфических хламидийных антигенов и антител к С. trachomatis в сыворотках больных урогенитальным хламидиозом.

5.3. Сравнительный анализ эффективности методов иммунодиагностики для выявления антигенов и антител к С. trachomatis в сыворотках больных урогенитальным хламидиозом.

ГЛАВА 6. ИММУНОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА И ИММУНОРЕАКТИВНОСТЬ СПЕЦИФИЧЕСКИХ АНТИТЕЛ В СЫВОРОТКАХ БОЛЬНЫХ УРОГЕНИТАЛЬНЫМ ХЛАМИДИОЗОМ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Сравнительное изучение эффективности методов иммунодиагностики урогенитального хламидиоза»

Актуальность проблемы. Хламидийные инфекции являются серьезной проблемой национальных и международных служб здравоохранения вследствие их широкого распространения и выраженного влияния- на репродуктивное здоровье населения. По данным многочисленных исследований, уретральным хламидиозом поражено- от 30 до 60% женщин и около 50% мужчин с негонококковыми поражениями урогенитального тракта [1, 2, 9, 20, 21, 25, 30, 41, 56, 57, 69, 85, 96, 104, 123, 136,. 144]. В большинстве случаев урогенитальный хламидиоз (УГХ) протекает бессимптомно (по данным ряда авторов. [1, 9, 33, 41, 58, 65, 76, 77, 83, 86, 87, 91, 95, 98, 99, 102, 105, 124,Л25, 127, 133, 150, 161, 163, 167, 169, 227, 250, 256, 257] у 40% женщин и 20 - 30% мужчин), что существенно затрудняет диагностику и, следовательно, способствует как, распространению болезни, так и развитию осложнений. В целом, в настоящее время среди наиболее распространенных осложнений- хламидийной" инфекции (эпидидимитов* и сальпингитов) УГХ выявляется не более, чем у 1 - 3% мужчин и 15% женщин, соответственно. Более того, выраженный полиморфизм клинических проявлений; преобладание хронических персистирующих форм хламидийной' инфекции, асимптомных, скрытых вариантов течения на фоне большого количества.микст -инфекции, урогенитального тракта также осложняют клиническую диагностику хламидиоза. Поэтому в настоящее время решающее значение в обнаружении возбудителя хламидийной инфекции отводят методам лабораторной диагностики.

Хотя для4 выявления1 Chlamydia trachomatis разработано довольно много диагностических тестов,- в настоящее время не существует единого алгоритма в схеме диагностического обследования пациентов с подозрением на хламидиоз. В основном это связано с высокой зависимостью результатов диагностики от выбора соответствующего метода лабораторного исследования, адекватной подготовки пациента к исследованию, правильного забора материала и т. д. [8, 9, 17, 33, 56, 61, 71, 83, 91, 95, 103, 116, 125, 136, 169, 225, 268]. По мнению большинства специалистов, нет ни одного 100% надежного теста выявления хламидий, а предложенные методы неравноценны по диагностической значимости и могут быть использованы только в дополнении один к другому из-за сложности интерпретации-результатов [9, 54, 69, 103, 124, 133]. В настоящее время используется пять групп методов: морфологические, культуральные, иммунологические, молекулярно-генетические и серологические, среди которых наибольшее распространение при массовых обследованиях больных хламидиозом завоевали прямая иммунофлюоресценция (ПИФ) и твердофазный иммуноферментный анализ (ТИФА). Как известно, главным достоинством ПИФ является возможность проведения прямой- индикации- хламидий в пораженных клетках больного УГХ, визуально контролируемой в* люминесцентном микроскопе [32, 41, 65, 106, 109, 124], что позволяет до сих пор считать его золотым стандартом несмотря на меньшую чувствительность и специфичность по сравнению с культуральным методом [32], особенно после замены поликлональных антител к групповому орнитозному антигену, липополисахариду (ЛПС) или МОМР (основной белок наружной мембраны от англ. Major outer membrane protein), на моноклональные реагенты [54, 73, 74, 80, 103, 115, 148, 158, 170, 176, 181, 232, 236, 245, 283]. Основным преимуществом ТИФА является высокая информативность, простота технического выполнения и регистрации результатов, стабильность, реагентов, относительная дешевизна, особенно» по сравнению с молекулярно — генетическими методами, и возможность использования?, для скрининговых исследований расширенного1 контингента обследуемых за счет приборной и объективной регистрации результатов анализа; Особенно? удобным^ ТИФА' считается при выявлении специфических, антихламидийных антител, в связи; с чем он остается ведущим; методом; для серологических: исследований данной инфекции [8, 81, 83, 84, 92, 95, 116,. 141, 161, 178, 184, 205, 206, 220, 238, 246, 247, 250]. В тоже время диагностическая значимость методов4 значительно варьирует в зависимости, от того; какие именно '< диагностические тест - системы были использованы; для лабораторного обследования? пациентов; что зачастую? является принципиально важным для практического здравоохранения.

В связи с вышеизложенным, целью настоящей работы явилось сравнение эффективности^ w диагностической значимости? нескольких; коммерческих тест — систем;, применяющихся; для лабораторной: диагностики урогенитального хламидиоза; отличающихся наибольшей чувствительностью и специфичностью ПИФ на основе поликлональных антител к специфическому орнитозному антигену, моноклональных антител (МКА) к ЛПС С. trachomatis и ТИФА для определения специфических хламидийных антител классов G и А. Задачи исследования: 1. Провести сравнительную! оценку эффективности практического-использования иммунодиагностических методов на основе, поли - и: моноклональных антител для выявления антигенов С. trachomatis у пациентов с УГХ, а также больных с микст — инфекцией урогенитального тракта.

2. Исследовать сыворотки пациентов с УГХ на наличие или отсутствие специфических хламидийных иммуноглобулинов классов G и А соответствующими коммерческими иммуноферментными тест - системами. Определить диагностическую эффективность указанных серологических тестов в зависимости от стадии заболевания.

3. Сравнить диагностическую эффективность иммунодиагностикумов, направленных на выявление антигенов и специфических антител к С.' trachomatis.

4. С помощью методов молекулярной иммунологии и иммунохимии, исследовать иммунореактивность и специфичность сывороток больных УГХ с максимальным титром специфических антител.

Научная новизна. Впервые проведено комплексное исследование диагностической значимости четырех иммунодиагностических препаратов для> лабораторной диагностики УГХ (коммерческие тест - системы для ПИФ, ХламиСкан и ХлаМоноСкрин, и ТИФА, «ИммуноКомб Хламидия трахоматис (Chlamydia trachomatis IgG)» и «ИммуноКомб Хламидия трахоматис (Chlamydia trachomatis IgA)») с использованием клинического материала от пациентов с УГХ и микст - инфекцией. Важным является получение сведений о большей эффективности использования ХламиСкана, основанного на обнаружении специфического хламидийного антигена (С - антигена) С. trachomatis с помощью гомологичных поликлональных антител, по сравнению с ХлаМоноСкрином, моноклонального реагента, направленного на обнаружение ЛПС возбудителя хламидийной инфекции. Показана важность комплексного подхода к обследованию пациентов с УГХ, сочетающего параллельное применение методов индикации и серодиагностики данной инфекции. Доказана значительно большая информативность иммуносерологических методов у больных с УГХ независимо от формы заболевания, особенно определения специфических хламидийных антител класса О. По результатам исследования в различных вариантах ДИА и иммуноблота получены приоритетные данные о предоминировании среди сывороточных антихламидийных иммуноглобулинов у пациентов' с: УГХ на острой или прогрессирующей стадиях заболевания антител к углеводному компоненту С - антигена, а при хроническом течении - антител* к МОМР.

Представлены экспериментальные доказательства присутствия в сыворотках пациентов с хронической УГХ антиидиотипических антител к МОМР в детектируемых в ТИФА количествах.

Практическая значимость работы заключается в разработке алгоритмов практического использования иммунодиагностических тест - систем, направленных на обнаружение специфических хламидийных антигенов и антител у пациентов с УГХ. Полученные в настоящем исследовании сведения о различной диагностической ценности иммунодиагностических тестов на разных стадиях заболевания могут служить основой оптимизации схемы лабораторной диагностики УГХ для повышения эффективности выявления возбудителя данной инфекции клиническими лабораториями практического здравоохранения в РФ.

По результатам настоящего исследования разработаны «Методические рекомендации по оценке качества коммерческих иммунодиагностических тест — систем», утвержденные ректором СЕМУ 31.03.07 г. и предлагаемые к использованию в практическом здравоохранении, на основе определения: специфичности, чувствительности^ объективности, простоты и надежности получения результатов и других критериев.

Основные положения; выносимые на защиту: 1. Антитела диагностические флюоресцирующие поликлональные к поверхностному специфическому антигену» G. trachomatis (G - антигену) для реакции прямой иммунофлюоресценции (ХламиСкан) позволяют более эффективно выявлять, гомологичный антиген возбудителя УГХ в клиническом материале ' больных с хламидийной инфекцией, урогенитального тракта по сравнению' с антителами диагностическими флюоресцирующими хламидийными родоспецифическими: моноклональными к ЛПС хламидий (ХлаМоноСкрин). 21 Параллельное использование тест - систем иммуноферментных для выявления IgG и IgA антител; к Хламидии трахоматис («ИммуноКомб Хламидия трахоматис (Chlamydia trachomatis IgG и IgA)», соответственно) является удобным: инструментом серодиагностики УГХ и позволяет быстро идентифицировать этиологический фактор у пациентов с хламидийной инфекцией; независимо от фазы: инфекционного процесса. При этом определение хламидийных иммуноглобулинов, класса G является более информативным.

3. ХламиСкан и ХлаМоноСкрин обеспечивают высокую эффективность лабораторной диагностики УГХ у пациентов в острый период заболевания или на этапе прогрессирования хламидийной инфекции, в то время как иммуноферментные тест - системы «ИммуноКомб Хламидия трахоматис (Chlamydia trachomatis IgG и IgA)» позволяют успешно диагносцировать УГХ практически независимо от стадии заболевания или его давности.

4. Сыворотки больных УГХ содержат различающиеся по специфичности антитела. В острый период среди сывороточных иммуноглобулинов превалируют антитела к углеводному компоненту С — антигена, при хроническом течении хламидийной инфекции — антитела к МОМР. Апробация работы. Материалы диссертации были представлены на:

- VII Конгрессе «Проблемы качества жизни в здравоохранении» с международным участием, Турция, Кемер, 2005;

- Межрегиональной конференции дерматовенерологов «Актуальные вопросы дерматовенерологии», посвященной 1000 - летию г. Казани, Казань, 2005;

- VIII Конгрессе «Паллиативная медицина», Египет, 2006;

- X Всероссийской конференции дерматовенерологов «Организация оказания дерматовенерологической помощи в современных условиях», посвященной 85 — летию ЦНИКВИ, Москва, 2006;

- Втором съезде врачей медико-профилактического профиля вооруженных сил Российской Федерации «Современные проблемы военной профилактической медицины, пути их решения и перспективы развития», Санкт - Петербург, 2006;

- 3-й бинарной научной конференции научного общества хламидиологов США по фундаментальным исследованиям (СВЯБ), Луисвилл, Кентукки, США, 2007.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 8 научных работ, из них 2-е - в рекомендованных ВАК изданиях. Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы (2 главы), собственных исследований (4 главы), заключения, выводов и списка литературы, включающего 303 источника, из них зарубежных - 167.

Заключение диссертации по теме «Клиническая лабораторная диагностика», Аликберов, Шавкет Ахметович

Заключение

В настоящее время УГХ является одним из самых распространенных заболеваний среди ИППП [1, 4, 9, 17, 25, 30, 41, 54, 57, 65, 69, 71, 96, 110, 111, 124, 125, 128, 144, 150, 181, 225, 231, 256, 258, 266, 267]. Среди особенностей клинических проявлений УГХ одно из главных мест занимает латентное мало - и асимптомное течение этой инфекции, что приводит к позднему обращению пациентов в учреждения здравоохранения, когда заболевание принимает форму хронической вялотекущей урогенитальной инфекции [2, 9, 10, 11, 16, 18, 19, 21, 22, 26, 27, 28, 36, 37, 40, 44, 45, 59, 68, 72, 76, 80, 81, 84, 85, 86, 87, 91, 102, 103, 104, 105, 106, 112, 120, 122, 151, 152, 153, 154; 161, 163, 167, 204, 208, 227, 238, 257, 268, 269, 293]. Как правило, у таких пациентов- отмечаются серьезные нарушения репродуктивной функции и инфекционные осложнения в виде воспалительных заболеваний органов малого таза, невынашивания, трубного бесплодия, внематочной беременности, нарушения менструального цикла и т. д. Зачастую' персистирующая хламидийная инфекция влияет на внутриутробное развитие плода, исход родов и течение послеродового периода, причем в 40 - 60% случаев дети, рожденные от матерей' с УГХ, имеют клинические проявления хламидийной инфекции [9, 49, 54, 65, 71, 78, 125, 168, 225, 268]. По данным литературы, в России УГХ диагносцирован у 6% женщин [11, 17, 58, 125]. Своевременное выявление пациентов5 с УГХ, особенно, на ранней стадии заболевания, может быть залогом профилактики развития персистенции и латентных форм УГХ, а также эффективности этиотропной и клинической терапии [3, 33, 58, 61, 68, 71, 78, 82, 90, 99, 102, 123, 128, 134, 169]. Стертая клиническая картина и преобладание хронических форм хламидийной инфекции» предопределяют ключевую роль, методов лабораторной диагностики этого заболевания в постановке диагноза. Действительно, начиная с середины 90 — х годов благодаря * появлению новых высокочувствительных методов лабораторной диагностики ИППП, в том числе, УГХ, не только в крупных городах, но и в областных, районных кожно-венерологических диспансерах или специализированных кабинетах территориальных медицинских объединений наметилась положительная тенденция снижения»заболеваемости ИППП [58, 128]. Однако, если по другим нозологическим формам количество больных за три года 2002 - 2004 сократилось, на 16,3 - 33,9%* (гонорея, трихомониаз, сифилис), то число больных УГХ за тот же период изменилось незначительно (+ 1,1%) [57]. По мнению большинства специалистов, это связано, в первую очередь с недостатками самих методов лабораторной диагностики' УГХ. Так, хотя это заболевание лидирует по количеству предлагаемых в практику отечественного* здравоохранения коммерческих и экспериментальных диагностических тест — систем, в настоящее время отсутствует единственный, удовлетворяющий всем требованиям, стопроцентно надежный метод выявления С. trachomatis в клиническом материале у больных [9, 54, 56, 61, 65, 103, 123, 125, 169]. Это связано^ с появлением в последние годы новых антибиотикорезистентных и атипичных штаммов С. trachomatis, в том' числе, бесплазмидных вариантов, возбудителя [185], что диктует необходимость, тщательного подбора-качественных иммунодиагностикумов для проведения массового скрининга населения путем проведения сравнительной оценки диагностической значимости предлагаемых отечественным здравоохранением тестов: для лабораторной диагностики этой инфекции [56]. Поэтому целью настоящей работы явилось сравнение эффективности применения в практическом здравоохранении комплекса коммерческих тест - систем для лабораторной диагностики УГХ.

Как известно, в настоящее время разработаны и рекомендованы к применению различные скрининговые тесты, (РСК, РЛ, ПИФ;. ТИФА, иммунохроматографический анализ, 11ЦР, ЛЦР и т. д.), которые различаются по специфичности и чувствительности в зависимости от базовых компонентов, составляющих ту или иную систему [5, 6, 8, 9, 18, 26, 32, 31, 37, 40, 44, 53, 54, 56, 63, 65, 68; 71, 73, 74, 77, 80; 81, 83, 84, 91,92, 93, 95, 103, 110; 115; 116; 120, 122, 124, 125, 130, 131, 132, 141, 145, 147, 161, 163, 165, 166; 168; 169; 184, 194, 195; 196; 200, 204, 205, 213, 220; 222, 223, 225, 226;.227, 242, 245, 246, 247, 250;.254, 256; 258; 261, 262, 263; 268; 269; 271, 272, 283, 285,.291, 293, 297]. Культуральный метод считается- наиболее специфичным, но? менее: чувствительным;, т.к. не: превышает 40 - 50% особенно при хронических формах УГХ,. когда возбудитель практически отсутствует в организме пациента [9, 40, 65, 85, 86, 91, 104, 105, 120;. 122, 177, 178, 243, 258, 266, 267, 278, 279,. 280; 281]. По мнению-ряда, авторов;, идеальным было бы применение комплекса лабораторных методов исследования - ПИФ, ТИФА, культурального и т. д. [9, 20, 24, 54, 65, 77, 90, 128, 136, 168, 225, 268]. Однако в практическом здравоохранении; помимо высокой стоимости такой? диагностики для; пациента, такой подход требует высокой профессиональной подготовки врача - лаборанта и- оснащениям соответствующего учреждения» здравоохранения дорогостоящим современным оборудованием. В первую очередь ¡это относится к культуральному и генодиагностическим методам. Поэтому наиболее широкое распространение получили методы иммунодиагностики, в,том числе, серодиагностики [6, 9, 10, 18, 26, 32, 36, 41, 54, 56, 68, 76, 81, 83, 84, 86; 91, 93, 98, 103, 120, 122, 125, 141, 145, 147, 150, 161, 163, 167, 168, 169, 177, 178, 184, 205, 206, 220, 225, 227, 246, 247, 256, 258, 268, 281, 293]. Простота постановки, отсутствие необходимости в дополнительных помещениях и специальном оборудовании, информативность и небольшая продолжительность анализа (от 1,5 до 5 - 6 часа с момента забора материала у пациента) предопределили востребованность этих методов для лабораторной диагностики УГХ. Наиболее доступным и в то же время*чувствительным (98%) и специфичным (90%) остается ПИФ с применением специфических антихламидийных поли - и моноклональных антител [32, 54, 73, 74, 80, 103', 115; 128, 148, 158; 170, 176, 181,-232, 236; 245, 283]. Преимуществом этого метода является- возможность одновременного визуального подтверждения присутствия возбудителя УЕХ в- исследуемом' материале от больных. Поэтому первоначально-в настоящей-работе нами были использованы две наиболее хорошо зарекомендовавшие себя; в-, практическом^ здравоохранении отечественные диагностические флюоресцирующие тест — системы на основе поликлональных антител к С - антигену, основному поверхностно локализованному антигену С. trachomatis [8, 65, 116, 128, 184] -ХламиСкан, и на основе моноклональных антител к ЛПС возбудителя УГХ — ХлаМоноСкрин, поскольку бактериальные ЛПС являются одним, из основных диагностически значимых антигенов^ возбудителей патогенных для человека инфекций [64, 73, 74, 113, 114, 118, 135, 155, 156, 158, 175, 177, 178, 183, 197, 198, 201, 224, 230, 232, 233, 240; 255]. Объектом- исследования служили образцы уретрального и вагинального отделяемого мужчин и женщин с признаками моно-и микст УГИ, обратившихся в Балаковский кожно-венерологический диспансер, или декретированного контингента людей, направленных на профилактический медицинский осмотр: Среди обследованных пациентов были отобраны образцы, условно разделены на четыре группы. В" первую группу были объединены образцы больных с ранее установленным диагнозом УГХ, во вторую - другими ИППП, третью и четвертую - кожными заболеваниями и заведомо здоровые доноры, соответственно. При предварительном тестировании данных клинических образцов с заранее известным диагнозом было получено совпадение по положительным и отрицательным результатам в обоих тест - системах в 100% случаев, что подтвердило высокую специфичность обоих вариантов- ПИФ? и явилось основанием для исследования клинического материала от остальных пациентов. Согласно анализу основных демографических показателей, среди обследованных превалировали мужчины (61,23 ± 6,96%), жители города (93,87 ± 3,42%) в возрасте от 23 до 67 лет, состоящие в браке (71,43 ± 6,45%), работающие (63,26 ± 6,89%). Последующее параллельное изучение их клинических образцов двумя методами ПИФ продемонстрировало выраженную разницу в результатах. Так, с помощью ХламиСкана было выявлено в 1,3 раза больше положительных ответов, чем ХлаМоноСкрином, что составило 26,53 и 20,4%, соответственно. Это в целом соотносится с аналогичными параметрами для ПИФ тест - систем и, как правило, связывается с определенной субъективностью полученных результатов^ при визуальной, а не автоматизированной оценке флюоресцентного свечения при постановке реакции [128]. По нашему мнению, в большей степени решающую роль могло играть применение в указанных ПИФ тест - системах различных диагностических реагентов, поли - или моноклональных антител, а также направленность этих антител к разным по своей природе и, следовательно, диагностической значимости, антигенам С. trachomatis [8, 54, 73, 74, 80, 103, 115, 116, 148, 158, 170, 176, 181, 232, 236, 245, 283]. Чувствительность ХламиСкана относительно культурального метода по литературным данным [71, 128] составляет 90 - 95% и даже до 98%: Чувствительность ХлаМоноСкрина относительно культурального метода и ХламиСкана оказалась на уровне 76,89% и 75,35%, соответственно, что является довольно высоким показателем [123, 125].

Последующий комплексный анализ клинико-анамнестических данных подтвердил большую, по крайней мере, в 1,2 раза, эффективность ПИФ с применением поликлональных антител к С - антигену по сравнению с моноклональным диагностикумом, направленным на детекцию ЛПС возбудителя УГХ в клиническом материале обследованных нами пациентов. Подавляющее число пациентов (97,96%) было обследовано впервые. При этом в 100% случаев наблюдалось совпадение положительных или отрицательных ответов в обоих тестах, ХламиСкан и ХлаМоноСкрин, с наличием или отсутствием, жалоб у обследованных людей. Однако совпадение по положительным* результатам ХламиСкана у пациентов* с подтвердившимся диагнозом УГХ наблюдалось в 63,16%, по отрицательным — в 59,18%, в то время- как в ХлаМоноСкрине аналогичные показатели составили 52,63% и 59,"18%, соответственно. Расхождение с диагнозом в ПИФ с поликлональными антителами обнаружено у 36,84% больных с УГХ, когда клинический* диагноз не был подтвержден обнаружением возбудителя в ХламиСкане. В ХлаМоноСкрине специфический гомологичный антиген С. trachomatis не был выявлен у 40,91% обследованных людей с УГХ. Сходная тенденция зарегистрирована и при параллельном обследовании- двумя вариантами ПИФ пациентов с микст - инфекциией. Так, ХламиСканом определялось в 1,67 раза больше положительных результатов по сравнению с ХлаМоноСкрином. Более того, в первой иммунодиагностической тест - системе наблюдалось полное-(в 100% случаев) совпадение с диагнозом как по положительным, так и по отрицательным результатам. Положительная реакция в ХлаМоноСкрине впоследствии была подтверждена только у 60% больных с микст -' инфекцией, у 40% обследованных людей с УГХ регистрировалась ложноотрицательная реакция и наблюдалось расхождение с данными, полученными в ХламиСкане. Полученные данные указывают на большую чувствительность поликлонального варианта ПИФ, направленного на детекцию С антигена, по сравнению с моноклональным диагностикумом, позволяющего выявлять ЛПС С. trachomatis, что соотносится с данными литературы о более высокой диагностической значимости орнитозного антигена [8, 116, 184]. Очевидна важность обнаруженной нами эффективности ХламиСкана у пациентов с сочетанной формой УГХ и других ИППП ввиду значительных трудностей обнаружения хламидийных антигенов в случае «смешанных» инфекций урогенитального тракта другими коммерческими отечественными диагностикумами различных фирм - производителей, в том числе, с применением поли - и моноклональных реагентов [54, 56, 73, 74, 80, 103, 115, 148, 158, 168, 179, 176, 181, 225, 232, 236, 245, 268, 283]. В то же время в ХламиСкане у 2,04% пациентов регистрировался ложноположительный результат, т. к. полученные в этом варианте иммуноанализа данные о наличии специфического антигена С. trachomatis не были впоследствии подтверждены другими клинико-лабораторными методами. В ХлаМоноСкрине не регистрировалось ложноположительных реакций, что свидетельствует о более высокой специфичности этого иммунотеста.

Одной из причин недостаточной эффективности диагностикумов, направленных на обнаружение возбудителя хламидийной инфекции или антигенов возбудителя УГХ, является их отсутствие в исследуемом материале пациентов с хроническими формами заболевания в результате позднего обращения в учреждения здравоохранения [65, 120, 177]. В этот период только наличие или отсутствие у пациентов специфических антител играет решающее значение для постановки диагноза УГХ [6, 9, 26, 32, 31, 36, 41, 54, 61, 65, 68, 71, 81, 91, 98, 110, 120, 122, 125, 141, 147, 150, 152, 154, 163, 166, 167, 168, 177, 178, 184, 205, 208, 220, 225, 227, 266, 257, 258, 263, 268, 293]. Однако выявление анти

С. trachomatis антител не является»абсолютным диагностическим критерием ввиду невысокой антигенной активности хламидий и, в результате зачастую невысокими титрами определяющихся в сыворотках гомологичных антител [21, 28, 44, 65,95]. Тем не менее, применение серологических иммунодиагностических методов в большинстве случаев может играть определяющую, хотя* и второстепенную' роль в* лабораторной диагностике УГХ, хронической, персистирующей УГИ или ВЗОМТ [9, 10, 11, 16, 21, 25, 27, 54; 59, 61, 71, 72, 81, 86, 93, 95, 99, 102,'110, 116, 120, 122, 145, 150, 152; 161, 177, 178, 206, 220, 227, 238, 247, 250; 257, 261, 262, 281]'. В настоящем исследовании5 нами-, были использованы две иммунодиагностические иммуноферментные тест - системы; «ИммуноКомб Хламидия трахоматис (Chlamydia, trachomatis IgG)» и «ИммуноКомб Хламидия трахоматис (Chlamydia- trachomatis IgA)»; предназначенных для идентификации и количественного определения в сыворотках людей специфических антихламидийных антител классов IgG и IgA, по величине.титров-которых судят о форме УГХ и давности инфицирования [33, 84, 147, 169]. В качестве сенситина в-обеих'тест - системах задействованы L2 серотиповые инактивированные антигены С. trachomatis. Как и при работе с ПИФ тест - системами, нами также предварительно были оценены специфичность и чувствительность ТИФА тест - систем для серодиагностики УГХ с применением образцов от больных с подтвержденным диагнозом, другими ИППП, кожными заболеваниями, а также здоровых людей. Ни в одном из- случаев не было зарегистрировано- ложноположительных или ложноотрицательных результатов, что также указывало на высокую* диагностическую значимость выбранных нами для работы иммунодиагностических тест - систем. Последующее их использование1 для обследования выбранного нами контингента пациентов позволило выявить положительную реакцию в обоих иммунотестах у 57,14% обследованных людей. Причем, в сыворотках 92,86% из них обнаруживались специфические антихламидийные иммуноглобулины класса G, в то? время как у 42,86% серопозитивных образцов содержали-* IgA антитела к антигенам С. trachomatis. Совпадение по положительным ответам в двух иммунотестах было 35,72% всех серопозитивных сывороток, по отрицательным - 42,86%, что полностью соответствовало количеству пациентов,, не имеющих по данным ТИФА специфических хламидийных антител указанных классов. Среди-* серопозитивных сывороток 85,72% содержали антитела IgG и IgA против антигенов возбудителя УГХ в диагностическом титре (> 1 : 32), из них одновременно высокими титрами обладали 7, 14% пациентов. Сыворотки 26,31% имели IgA в низких (1 : 8 - 1»: 16),- a IgG - в высоких (1 : 32 - 1 : 128) титрах, т. е., согласно литературным данным, могли иметь острую форму УГХ [9, 18, 33, 44, 54, 65, 68, 78, 81, 85, 86, 91, 98, 120, 169]. У всех (5,26%) больных с высокими' титрами хламидийных IgA антител (> 1 : 32) одновременно регистрировались высокие титры (1 : 32 — 1 : 128) антихламидийных IgG антител; что, видимо, указывало на прогрессирование заболевания м переходом в хроническую форму. Среди сывороток, негативных на присутствие специфических IgA, в 5,27% случаев определялись относительно низкие (1 : 16), в 36,84% - диагностически значимые (1 : 32 - 1 : 128) титры антихламидийных антител класса G. Как правило; такой уровень антител является- характерным признаком хронического течения УГХ [9, 18, 33, 78, 84, 91, 98, 120; 150, 163, 169, 188, 205, 206; 208, 220, 238, 246, 250, 291].'

При сопоставлении данных,, полученных' четырьмя иммунотестами, направленными на обнаружение специфических хламидийных антигенов, и антител оказалось, что у 21,42% пациентов с УГХ одновременно определялись и С - антиген; и ЛПС, и; иммуноглобулины обоих классов против.поверхностных компонентов С. trachomatis. У 7,Г4% обследованных выявлялся С - антиген, и хламидийные антитела. Такое же количество пациентов с УГХ, также, имеющих сывороточные специфические антихламидийные иммуноглобулины, давало положительную реакцию на ЛПС С. trachomatis. Хотя 17,85% больных УГХ не было» выявлено' иммунодиагностикумами, обеспечивающими, детекцию специфических хламидийных антигенов, однако в сыворотках этих, пациентов определялись диагностически значимые титры.антител соответствующих классов. В'то же время, при исследовании сывороток на наличие специфических антител к С. trachomatis у 46,43%- всех- обследованных регистрировался^ ложноположительный результат, поскольку детальное клинико-лабораторное обследование таких пациентов не выявило у них каких-либо признаков1 хламидийной УГИ.

При анализе диагностической^ значимости каждого, из использованных в настоящем, исследовании иммунодиагностикумов была- установлена большая чувствительность, обоих, иммунотестов, направленных на обнаружение специфических хламидийных антигенов при индикации возбудителя УГХ при' острой или прогрессирующей форме* болезни, но не в случае хронического течения УТИ. При этом подтвердилась большая чувствительность ХламиСкана по сравнению с ХлаМоноСкрином (по крайней мере, в 1,2 раза). Диагностическая-значимость определения- специфических хламидийных антител по положительным ответам достигала1 73,69%, 1§А. - 52,63%, по отрицательным — 26,32% и 47,37%, соответственно. При оценке,чувствительности; серологических тестов в зависимости от формы течения заболевания, при острой форме [9, 41, 84, 169] выявление иммуноглобулинов в составило 64,29% по положительным, результатам и 35,72% по отрицательным, иммуноглобулинов А - 50;0% и 50,0%), соответственно; При хронической форме [9, 41, 84, 169] определялись у 100,0% пациентов, 1§А - только у 50,0%, что указывает на большую-диагностическую значимость и большую эффективность- использованиям именно-' ТИФА, направленного на; обнаружение специфических антихламидийных иммуноглобулинов класса

При детальном изучении иммунореактивности сывороток пациентов с УРХ с максимальными, титрами специфических антител на острой и хронической стадии заболевания« [9, 4% 84, 169]: с помощью методов молекулярнош иммунологии была; выявлена' разница в специфичности сывороточных иммуноглобулинов. Так, в ? ДИА и иммуноблоте у больных с острой формой УГХ превалировали антитела к углеводному компоненту С - антигена и / или ЛПС [8, 116], в то время как у пациентов с хронической формой хламидийной инфекции урогенитального тракта,. помимо указанных,. обнаруживались антитела к МОМР. Причем последний обладал выраженной антигенной активностью и вызывал при-длительном хроническом течении; болезни у больных индукцию гомологичных антител в детектируемых количествах, т. е. обеспечивал выработку антител второго порядка или антиидиотипических антител [101, 114, 117]. Это нашло свое подтверждение в системе иммунохимических реакций с ксеногенными сыворотками [8, 116].

1. Проведена сравнительная оценка эффективности и диагностической значимости коммерческих иммунодиагностических тестов на основе поли — и моноклональных антител, ХламиСкана и ХлаМоноСкрина, направленных на выявление специфических антигенов С. trachomatis - С - антигена и ЛПС. При исследовании клинических образцов пациентов с УГХ установлена большая (в 1,3 раза) эффективность использования поликлонального иммуноглобулинового реагента (ХламиСкана).

2. Показана высокая прогностическая значимость выявления специфических хламидийных IgA и IgG антител в сыворотках пациентов, с УГХ. Одновременное определение титров указанных иммуноглобулинов позволяет четко дефференцировать острую прогрессирующую или хроническую форму заболевания у 71,43% и 100% пациентов с УГХ, соответственно. Установлена большая диагностическая эффективность детекции в ТИФА специфических иммуноглобулинов к антигенам С. trachomatis класса G (64,29% при острой форме и 100% при хронической) по сравнению с иммуноглобулинами класса А (50,0% и 50,0%, соответственно).

3. Сопоставление методов индикации и серодиагностики выявило большую эффективность последних при хроническом течении УГХ (100% при использовании коммерческой отечественной иммуноферментной тест-системы «ИммуноКомб Хламидия трахоматис (Chlamydia trachomatis

IgG)»), в то время как ХлаМоноСкрин и ХламиСкан позволяли выявлять 71,43 - 85,72% пациентов с острой формой УГХ и оказались полностью неэффективны для лабораторной диагностики хронической формы данного заболевания (0% положительных результатов).

4. Для постановки лабораторного диагноза УГХ наиболее целесообразным является сочетанное обследование пациентов ХламиСкан и «ИммуноКомб Хламидия трахоматис (Chlamydia trachomatis IgG)».

5. С помощью методов молекулярной иммунологии (различных вариантов ДИА, иммуноблота с применением в качестве лигандов нативных и депротеинизированных препаратов С-антигена) установлено превалирование в сыворотках больных с острой формой УГХ антител к углеводному компоненту С-антигена, у пациентов с хроническим течением хламидийной инфекции - антител к МОМР.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Аликберов, Шавкет Ахметович, 2007 год

1. Адаскевич В.П. Инфекции, передаваемые половым путем. Нижний Новгород: Изд - во НГМА, Москва: Мед. книга. - 2001. - С. 144 - 147.

2. Аковбян В.А. Европейское совещание по хламидиям // Вестник дерматологии и венерологии. 1997. - № 1. - С. 76.

3. Аковбян В.А. Азитромицин (сумамед), как препарат первого выбора при лечении урогенитального хламидиоза // Клинич. дерматология и венерология. — 2006. № 1.-С. 18-23.

4. Актуальные микробиологические и клинические проблемы хламидийных инфекций. Сб.тр. под ред. А. Шаткина и Дж. Орфила. М., 1990. - 82 с.

5. Аракелова О.Н. Метод непрямой иммунофлюоресценции для диагностики хламидийной инфекции // Лаб. дело. 1991. - № 8. - С. 68 - 69.

6. Аракелова О.Н., Воропаева С.Д. Сравнительная оценка методов диагностики хронического сальпингоофорита // Актуальные вопросы дерматовенерологии. 1993. - С 44 - 46.

7. Ашмарин И. А., Воробьев A.A. Статистические методы в микробиологических исследованиях // Л.: Медгиз, 1986. 180 с.

8. Банникова В.А. Разработка твердофазного иммуноферментного анализа для лабораторной диагностики хламидиоза: Автореф. . канд. мед наук. -Саратов, 2004. 24 с.

9. Баткаев Э.А., Липова Е.В. Урогенитальный хламидиоз. Пособие для врачей. -М., 2004.

10. Батыршина С.В., Щербинов А.Е. Бесплодие женщин и хламидийная инфекция // Актуальные вопросы диагностики и лечения хламидийных инфекций. -М., 1990.-С. 13-14.

11. Башмакова М.С. Современные проблемы хламидиоза в акушерстве // Там же. С. 8 - 10.

12. Беднова В.Н., Бабий A.B., Топоровский JI.M., Чистякова Т.В. Иммуноферментный анализ с капиллярной кровью при серодиагностике сифилиса // Вест, дерматол. и венерол. 1990. - № 10. - С. 21 - 24.

13. Беднова В.Н., Бабий A.B. Двухразовое использование трепонемного антигена в ИФА на сифилис // ЗППП. 1994. - № 2. - С. 48.

14. Беднова В.Н., Дмитриев A.B., Бабий A.B., Милонова Т.И. Новая тест -система ИФА на сифилис // Вест, дерматол. и венерол. 1994. - № 4. - С. 51.

15. Беднова В.Н., Дмитриев A.B., Бабий A.B. и др. Новая тест система иммуноферментного анализа для серодиагностики сифилиса // Вест, дерматол. венерол. - 1995. - № 1. - С. 19-20.

16. Битги B.JL, Моррисон Р.П., Бирн Д.И. Персистенция хламидий: от клеточных культур до патогенеза хламидийной инфекции // ЗППП. 1995. - № 6. -С. 3-18.

17. Богуш П.Г., Скрипкин Ю.К. Диагностика микоуреплазмозов и хламидийной инфекции в условиях московского кожно-венерологического клинического диспансера // Клинич. дерматология и венерология. 2005. - № 3. -С. 87-91.

18. Бойцов А.Г., Порин A.A., Ластовка О.Н., Ришук C.B., Шилова Е.А., Белоусова JI.E. Оценка эффективности серодиагностики хламидийной инфекции с помощью иммуноферментного анализа // Вестник дерматологии. 2002. — № 1. — С. 43 - 45.

19. Брагина Е.Е., Орлова O.E. Заболевания, передаваемые половым путем. — М., 1998.-T. 1.-С.З-9.

20. Бутов Ю.С., Васенова В.Ю., Новик Ф.К., Аверкиев В.Г. Лечение хемомицином больных урогенитальным хламидиозом с хроническим осложненным течением // Российский журн. кожных и венерических болезней. — 2005.-№4.-С. 59-62.

21. Бутов Ю.С., Сухих Г.Т., Евсеева О.Т., Матвеева Н.К. и др. Некоторые клинические и иммунные показатели у супружеских пар, страдающих хламидиозом // Российский журнал кожных и венерических болезней. — 1998. № 4.-С. 55-58.

22. Васильев М.М., Николаева Н.В. Хламидийная инфекция. Проблема антибиотикорезистентности // Вестник дерматологии. 2003. -№3.-С. 18-21

23. Вербов В.Н., Артюхов А.И., Шендерова Р.И., Якунова O.A., Винакмен Р.Ю. Модификация иммуноферментного метода обнаружения противотуберкулезных антител // Тез. докл. I съезда иммунологов России. -Новосибирск, 1992. С. 75.

24. Ганенко В.А., Наумов K.M. Опыт терапии урогенитального хламидиоза авелоксом (моксифлоксацином) // Вестник дерматол. и венерол. 2003. - № 3. — С. 50-51.

25. Гасанова Т.А. Хламидийная инфекция и репродуктивная функция // Вестник дерматологии. 2001. — № 1.-С. 11-15.

26. Гасанова Т.А. Лабораторная диагностика инфекций, передающихся половым путем, при хронических воспалительных заболеваниях репродуктивной системы // ЖМЭИ. 2001. - № 2. - С. 60-65.

27. Глазкова Л.К., Акилов O.E. Практические аспекты персистирующей хламидийной инфекции // ИППП. 1999. - № 4. - С. 29 - 34.

28. Глазкова Л.К., Герасимова Н.М. Клинико-иммунологические критерии развития нарушений репродуктивной системы у женщин с генитальной хламидийной инфекцией // ЗППП. 1997. - № 2. - С. 18 - 20.

29. Глухов А.И., Гордеев С.А., Аврамова Л.В., Киселев В.И., Северин Е.С. Детекция инфекционных агентов вирусной и бактериальной этиологии методом полимеразной цепной реакции // Клин. лаб. диагн. 1996. - № 1. - С.

30. Гомберг М.А. Научно практическая конференция дерматовенерологов и акушер - гинекологов России // ЗППП. - 1999. - № 1. - С. 77 - 79.

31. Гомберг М.А., Есаулова И.Н., Гладкова Н.С. ИФА тесты для диагностики хламидоза // Вест, дерматол, и венерол. - 1988, - № 9. - С. 37 - 39.

32. Гомберг М.А., Машкиллейсон A. JL, Делекторский В.В. Применение антихламидийных антител для диагностики урогенитального хламидиоза // Вестник дерматологии. — 1986. № 8. - С. 57 - 61.

33. Гомберг М.А., Орлова O.E. Хламидийная инфекция: Особенности и диагностические возможности. М., 1999.

34. Гомберг М.А., Соловьев A.M., Черноусов А.Д. Обоснование иммунотерапии при лечении рецидивирующего урогенитального хламидиоза // ИППП. 2000. - № 2. - С. 30 - 35.

35. Горовиц Э.С., Тимашева O.A. Использование реакции непрямой гемагглютинации для изучения орнитозной инфекции // Журн. микробиол. 1976. -№12.-С. 120- 124.

36. Горовиц Э.С. Обоснование, разработка и апробация серологических методов диагностики хламидиозов: Автореф. . дисс. докт. мед. наук. -М., 1985. -22 с.

37. Горовиц Э.С. Опыт серологической диагностики хламидиозов // Актуал. микробиол. и клин, пробл. хламидийн. инфекций. -М., 1990. С. 15.

38. Горовиц Э.С., Тимашева O.A. Использование реакции непрямой гемагглютинации для изучения орнитозной инфекции // Журн. микробиол. 1978. - № 2. - С. 68-71.

39. Горовиц Э.С., Тимашева O.A. Обоснование рациональной схемы серодиагностики спородического орнитоза // Сб. научн. трудов, под ред. Шаткина A.A. -М., 1982.-С. 27-29.

40. Горовиц Э.С., Тимашева O.A., Петров В.Ф., Карпунина Т.И. Диагностика хламидийных инфекций человека и животных // Журн. микробиол. — 1998.-№2.-С. 72-75.

41. Гранитов В.М. Хламидиозы. Москва: Мед. книга, Н.Новгород: Изд-во НГМА, 2002.-С. 49-71.

42. Грачева Л.И., Гончаров Д.Б. Современные методы иммунологической диагностики токсоплазмоза // Клин. лаб. диагностика. — 1997. — № 6. — С. 62 — 63.

43. Грашкин В.А. Эффективность использования различных вариантов иммуноферментного анализа для диагностики гонореи и трихомониаза: Автореф. . диссертации канд. мед. наук . Саратов, 2000. - 22 с.

44. Делекторский В.В., Яшкова Г.Н., Мазурчук С.А., Галяутдинов Ш. Д. Лабораторная диагностика урогенитального хламидиоза // Клин. лаб. диагн. — 1995.- №6. -С. 108-109.

45. Делекторский В.В., Рукавишникова В. М., Яшкова Г.Н., Хабаров В.А. Роль хламидий в патологии урогенитального тракта // Вестник дерматологии. — 1984.-№4.-С. 28-35.

46. Дзантиев Б.Б., Егоров A.M. Иммуноферментный анализ // Журн. Всесоюз. хим. об-ва им. Д.И.Менделеева. 1982. - Т. 27. - № 4. - С. 82 - 89.

47. Дзантиев Б.Б., Жердев A.B., Попов В.О., Венгеров Ю.Ю., Старовойтова Т.А. Системы экспрессной иммунодетекции биологически активных соединений (лекция) // Клин. лаб. диагностика. 2002. - № 8. - С. 25 - 32.ч

48. Дмитриев Г.А. Лабораторная диагностика бактериальных урогенитальных инфекций. М., Медицинская книга, Н. Новгород: изд-во НГМА, 2003.

49. Дмитриев Г.А., Фриго Н.В. Сифилис. Дифференциальный клинико-лабораторный диагноз. М., «Мед. книга», 2004. - С. 26 - 45.

50. Егоров A.M., Осипов А.П., Дзантиев Б.Б., Гаврилова Е.М. Теория и практика иммуноферментного анализа. М.: Высш. школа, 1991. С. 3 - 8, 202 — 2 03.

51. Егоров A.M. Современное состояние и перспективы развития иммуноферментного анализа // Сб. тр. Моск. НИИВС им. И.И. Мечникова «Методы иммуноферментного анализа в биологии и медицине». М., 1983. — С. 3 -24.

52. Захаренко Л.П., Рябчикова Е.И., Колодина Н.Н. и др. Сравнительный анализ методов диагностики хламидиоза // Клин. лаб. диагностика. 2001. - № 2. -С. 36-38.

53. Зильман С. Л. Ускоренный метод РИФ-абс с кровью для серодиагностики мочеполового трихомоноза // Вестник дерматол. и венерол. — 1978.-№5.-С. 26-28.

54. Зоерман В.М. Опыт диагностики инфекций, передающихся половым путем, в условиях диагностического центра // Матер. Всероссийск. научн-практич. конф. «Медицинская микробиология XXI век» (28 - 30 сент. 2004 г., Саратов). - Саратов, 2004. - С. 102 - 103.

55. Иванова М.А. Заболеваемость инфекциями, передаваемыми половым путем в Российской Федерации: 2002-2004 годы // Клинич. дерматология и венерология. 2005. - № 4. - С. 9 - 12.

56. Иванова М.А. Профилактические медицинские осмотры и скрининговое исследование донорской крови, как один из путей контроля и профилактики инфекций, передаваемых половым путем // Клинич. дерматология и венерология. 2006. - № 2. - С. 4 - 6.

57. Ильин И.И., Глузман М.И. Ковалев Ю.И., Лысенко О.В. Хламидийный простатит: реальность или фикция? // Вестник дерматологии. 1991. - № 3. - С. 50-54.

58. Иммуноферментный анализ и его применение в инфекционной патологии. Под ред. В.И. Покровского, Е.П. Голубинского. М., 1986.

59. Инфекции, передающиеся половым путем. Учебно методическое пособие. Под ред.: Короткого Н.Г., Уджуху В.Ю.- М., 2005. - С.35 - 41.

60. Киселев В.И., Латыпова М.Ф., Дмитриев Г.А., Бакалова Л.А., Бурцев О.А., Абудуев Н.К. Полимеразная цепная реакция в качестве критерия излеченности урогенитального хламидиоза // Вестник дерматологии. 2001. - № 4.-С.4-5.

61. Книрель Ю.А., Кочетков Н.К. Строение липополисахаридов грамотрицательных бактерий. 1. Общая характеристика липополисахаридов и структура липида А (Обзор) // Биохимия. 1993. - Т. 58, вып. 2. - С. 166-181.

62. Козлова В.И., Пухнер А.Ф. Вирусные, хламидийные и микоплазменные заболевания гениталий. Руководство для врачей // М.: «Триада X», 2003. - С. 267-287.

63. Коллинз У.П. Новые методы иммуноанализа // М. 1991. - С. 9 - 10.

64. Короткий Н.Г., Уджуху В.Ю., Шарова Н.М., Казакова М.А., Кубылинский А.А., Куликова О.Д., Петрунин Д.Д., Тихомиров А.А. Инфекции, передаваемые половым путем. Учебно методическое пособие. - М., 2006. - 87 с.

65. Кротов С.А., Кротова В.А., Юрьев С.Ю. Хламидиозы: эпидемиология, характеристика возбудителя, методы лабораторной диагностики, лечение генитального хламидиоза. Кольцове, 1995. — 34 с.

66. Кубанова А.А. Стратегия и перспектива развития дерматовенерологической службы в Российской Федерации в 2001 2005 гг. (материалы доклада на, VIII съезде дерматовенерологов России) // Вестник дерматологии. - 2002. - № 1. - С. 4 - 8.

67. Кубанова А.А., Врожденный сифилис в Российской Федерации: совершенствование мер профилактики. М., 2004. - С. 5.

68. Кузьмин В.Н. Современные аспекты диагностики и лечения-хламидийной инфекции в акушерско-гинекологической практике // Consilium* Medicum. 2005. - Т. 5. - № 3. - С. 159 - 162.

69. Куляш Г.Ю. Персистирующая урогенитальная хламидийная • инфекция: возможности и нерешенные вопросы лабораторной и клинической диагностики // ИППП. 2003. - № 3. - С. 3 - 7.

70. Кутлин А.В., Дробышевская Э.И., Шаткин А.А. Иммунохимические и биологические свойства моноклональных антител к Chlamydia Trachomatis // Журнал микробиол. 1996. - № 1. - С. 3 - 6.

71. Кутлин А.В., Шаткин А.А, Дробышевская Э.И. Иммунодиагностические препараты на основе моноклональных антител к Chlamydia Trachomatis // Журнал микробиол. 1996. - № 6. - С. 42 - 44.

72. Кэтти Д. Антитела. Методы. М.: «Мир», 1991. Т. 1,2.

73. Кяушас С.П. Клинико-экспериментальная оценка реакции непрямой гемагглютинации как метода серологической диагностики урогенитальных хламидиозов: Автореф. . дисс. канд. мед. наук. Челябинск, 1990. - 23 с.

74. Липова Е.В. Урогенитальный хламилиоз: современные клинико-лабораторные подходы // Вестник дерматол. и венерол. — 2002. № 5. - С. 46 - 48.

75. Липова Е.В. Клинико-диагностическое обследование женщин на инфекции, передаваемые половым путем, с учетом анатомо физиологических особенностей мочеполовой системы. Пособие для врачей. - М., 2004.

76. Ломоносов К.М. Актуальное интервью. Новое в диагностике и терапии сифилиса / ИППП. 2002. - № 2. - С. 25 - 29.

77. Лысенко О.В. Применение флюоресцирующих моноклональных антител хламидиасан в диагностике урогенитального хламидиоза у детей с артритами // Вестник дерматологии. 1993. - № 5. - С. 54 - 56.

78. Мавров И.И. Вопросы терапии урогенитальных хламидиозов. // Актуальные вопросы диагностики и лечения хламидийных инфекций. М., 1990. -С. 80-83.

79. Манзенюк И.Н., Воробьева М.С., Никитюк Н.М., Васильев М.М. Иммуноферментный анализ в серодиагностике инфекций, вызываемых С. trachomatis // Вестник дерматол. и венерол., 2004. № 1. - С. 23 — 27.

80. Мартынова В.Р., Колкова Н.И., Шаткин А.А. Хламидии и хламидиозы: клиника, биология и диагностика // Росс. мед. вестн. 1997. - № 3. - С. 49 - 55.

81. Мартынова В.Р., Машкиллейсон А.Л., Гомберг М.А. Урогенитальные хламидийные инфекции. Диагностика и лечение: Руководство для врачей. М.: Ниармедик Плюс, 1998. - 44 с.

82. Машкиллейсон А.Л., Гомберг М.А., Соловьев A.M. К проблеме урогенитальных хламидиозов // 3111111. 1995. - № 5. - С. 28 - 33.

83. Медведев Б.И., Астахова Т.В., Лысенко C.B., Канаева Е.Ю., Узлова Т.В. Роль хламидийной инфекции в генезе трубно-перитонеального бесплодия у женщин // Акуш. и гинекол. 1993. - № 5. - С. 36 - 39.

84. Миколаускас В.П. Исследование клеточного иммунитета у больных урогенитальным хламидиозом // Клин. Лаб. диагностика. 2004. - № 4. - С. 36 -38.

85. Молочков В.А., Аксенова O.A., Побединский Н.М., Молочков A.B., Петрова М.С. Азитрал в комплексном лечении урогенитального хламидиоза // Клинич. дерматология и венерология. 2005. - № 3. - С. 97 - 99.

86. Морс С.А., Бек Cano K.M., Мардх П.-А. Рекомендации по лабораторной диагностике ЗППП // ЗППП. - 1998. - № 4. - С. 50 - 55.

87. Назарова Е.К., Созаева Л.Г., Шафранский Ю.А. Диагностика урогенитального хламидиоза с использованием иммуноферментного экспресс-метода TESTPACK CHLAMYDIA фирмы «ABBOTT» // Клин. лаб. диагн. 1996. -№ 5. - С. 39-40.

88. Патрушева Н.Б., Рогачей Л.Н., Дегтярева Г.Н., Бейкин Я.Б. Скрининговый КСР для диагностики сифилиса // Клин. лаб. диагн. 1997. - № 6. -С. 66-67.

89. Поздняк А.Л., Шестаев А.Ю., Нуралова Н.В., Михайлов Н.В., Сидорчук С.Н., Мудрицкий В.М., Яковлев А.Л. Особенности лабораторной диагностики хламидиозов с системными проявлениями // Клин. Лаб. диагностика. 2002. - № 6.-С. 42-45.

90. Прохоренков В.И., Шапран М.В. О классификации урогенитального хламидиоза // ИППП. 2002. - № 2. - С. 3 - 6.

91. Приказ МЗ РФ № 87 от 26.03.2001 «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса».

92. Ремезов А.П., Неверов В.А., Семенов Н.В. Хламидийные инфекции (клиника, диагностика, лечение). СПб., 1995. — 43 с.

93. Ремезов А.П., Неверов В.А., Коняхин Д.Е., Кенбеков С.Ш. Хроническая хламидийная урогенитальная инфекция: вопросы клиники и лечения // Terra medica. 1996. - № 4. - С. 36-38.

94. Родионов А.Н. Сифилис: Руководство для врачей. СПб., 1997. - С. 199-200.

95. Ройт А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология. М.: Мир, 2000. - 592с.

96. Савичева A.M., Башмакова М. А. Урогенитальный хламидиоз у женщин и его последствия. Под ред. чл.-корр. РАМН Э.К. Айламазяна. — Изд-во НГМА, 1998.-181 с.

97. Сидорович С.Ю., Латыпова М.Ф., Коликова Т.Г., Вахнина Т.Е., Киселев В.И. Сравнительный анализ методов лабораторной диагностики урогенитального хламидиоза // Вестник дерматологии. 2001. - № 1 - С. 9 - 10.

98. Скрипкин Ю.К., Кубанова A.A., Аковбян В.А. и др. Проблема диагностики и лечения урогенитального хламидиоза в России // Антибиот. и химиотер. 1996. - № 4. - С. 5 - 8.

99. Скрипкин Ю.К., Кубанова A.A., Дмитриев Г.А. и др. Современные подходы к диагностике хламидиоза // Вестн. дерматол. 1996. - № 4. - С. 26 - 29.

100. Скрипкин Ю.К., Мордовцева В.Н: Кожные и венерические болезни. Руководство для врачей. М., 1999. - С. 675 - 682.

101. Стари А. Европейское руководство по ведению больных с хламидийной инфекцией // ИППП. 2002. - № 1. - С. 25 - 28.

102. Суворов А.П., Румянцева Е.В., Бакулев A.JI. Лабораторная диагностика сифилиса в практике дерматовенеролога. Учебно методические рекомендации. — Саратов, 2004. - 15 с.

103. Суворова К.Н., Куклин В.Т., Рукавишникова В.М. Детская дерматология // Руководство для врачей курсантов последипломного образования. - Казань, 1996. - С. 365 - 382.

104. Тейлор-Робинсон Д., Рентой А. Какие тесты для диагностики инфекций, передаваемых половым путем следует использовать в индустриально развитых странах // ЗГШП. 1998. - № 5. - С. 23 - 26.

105. Тищенко М.С., Серебряков М.Ю., Чайка H.A. Хламидийная инфекция. -СПб., 1996.-40 с.

106. Федорова В.А., Громова, О.В., Девдариани З.Л., Джапаридзе М.Н. Иммунохимическая характеристика липополисахарида Vibrio cholerae 0139серовара и диагностическая значимость полученных к нему антител // Биотехнология. 1996. - № 11. - С. 33 - 37.

107. Федорова В.А. Теоретико-экспериментальные аспекты изучения белковых и углеводсодержащих антигенов возбудителей чумы и холеры с использованием поли и моноклональных антител: Автореф. . докт. мед наук. — Саратов, 2004.-41 с.

108. Федорова В.А., Банникова В.А., Елисеев Ю.Ю., Грашкин В.А. Получение препаративного количества мышиных диагностических антихламидийных антител путем направленного иммуногенеза // Биотехнология. -2005,-№2.-с. 82-90.

109. Федорова В. А., Девдариани 3.JI. Перспективы создания экспериментальных антиидиотипических вакцин против чумы // Иммунология. — 2006.-№3.-С. 144-148.

110. Финдлей Д., Эванз У. Биологические мембраны. Методы. М.:Мир, 1990.-424 с.

111. Фримель Г. Иммунологические методы. М.: «Медицина», 1987.472с.i I

112. Хламидиоз: клиника, диагностика, лечение: Методические рекомендации. М., 1998. - 22 с.

113. Хламидиозы. Руководство по эпидемиол. инф. бол. — М., 1993. Т. 1. — С. 357-372.

114. Хламидиозы: эпидемиология, характеристика возбудителя, методы лабораторной диагностики, лечение генитального хламидиоза. Метод, пособие. -Кольцово: Изд-во АО «Вектор Бест», 1995. - 35 с.

115. Хрянин A.A. Анализ полового поведения и частота выявления хламидийной и гонококковой инфекций у мужчин, обратившихся в кабинет анонимного обследования и лечения И111111// Клинич. дерматология и венерология. 2004. - № 3. - С. 72 - 75.

116. Хрянин A.A., Лыкова С.Г. Актуальные аспекты диагностики и лечения урогенитального хламидиоза // Вестник дерматологии. 2002. - № 6. - С. 52-53.

117. Хрянин A.A., Решетников О.В., Кривенчук H.A., Гущин А.Е., Алаева O.A. Хламидиоз у женщин: сопоставление разных методов диагностики, факторы риска и клинические проявления // Вестник дерматол. и венерол. 2006. - № 2. -С. 40-43.

118. Чакова Т.В., Немчанинова О.Б. ИФА диагностика сифилиса у беременных // Российск. журнал кожных и венерич. болезней. - 2007. - № 2. - С. 64-67.

119. Чеботарев B.B. Урогенитальный хламидиоз: современные проблемы диагностики, патогенеза, лечения // Журн. дерматовенерол. и косметол. 1997. — №2.-С. 5-10.

120. Чеботарев В.В. Персистенция хламидий от эксперимента к практике // Российский журн. кожных и венерических болезней. - 1998. - № 5. - С. 36 - 42.

121. Четвонский В.И., Попова О.М. Антиген для реакции связывания комплемента при орнитозе пситтакозе // Вопросы вирусологии. - 1959. - № 1. -С. 68-71.

122. Чураков A.A., Суворов А.П., Федотов А.П. и др. К диагностике урогенитального хламидиоза. // Тез. Докл. VII Рос. съезда дерматол. венерол. (5 -7 июня 1996 г.). Казань, 1996. - Ч. 3. - С. 121.

123. Чураков A.A., Куличенко А.Н., Попов Ю.А., Гаранина С.Б., Суворов А.П. Оптимизация основанного на полимеразной цепной реакции метода детекции хламидий в материале от больных // Вестник дерматологии. 1998. - № З.-С. 17-19.

124. Чураков A.A. Хронический простатит, ассоциированный с трихомониазом и хламидиозом: оптимизация обследования и лечения больных и их половых партнеров: Автореф. докт. мед наук. — Саратов, 2007. 31 с.

125. Шинский Г.Э. О путях усовершенствования профилактики урогенитального хламидиоза // Вестник дерматологии. 2001. - № 5 - С. 28 - 31

126. Якубович А.И., Чуприн А.Е., Ракитин Д.А. Этиотропное лечение урогенитального хламидиоза вильпрафеном // Российский журнал кожных и венерических болезней. 2001. - № 5. - С. 65 - 68.

127. Яровая JI.M., Алешкин В.А. Новые данные о химической структуре липополисахаридов и практические перспективы // ЖМЭИ. — 1991. № 3. — С. 73 -78.

128. Яцуха М.В., Мудренко О.С., Кулагин ВИ., Безручко А.С. Частота инфекций, передаваемых половым путем, при периодических медицинских осмотрах у женщин, занимающихся коммерческим сексом, в г. Москве // ИППП. — 1999.- №5.-С. 37-41.

129. Alderete J.F. Enzyme linked immunosorbent assay for detecting antibody to Trichomonas vaginalis: use of whole cells and aqueous extract as antigen // Br. J. Vener. Dis. 1984. - Vol. 60. - P. 164 - 70.

130. An Q., Radcliff D., Vassalo R. et al. // J. Clin. Microbiol. 1992. - Vol. 30. -P. 2814-21.

131. An Q., Olive D.M. // Mol. Cell. Probes. 1994. - Vol. 8. - P. 429 - 35.

132. Askienazy Elbhar M. Detection of antichlamydia trachomatic (CT)j secretory Ig A (sig A) in genital fluids. Comparison of ELISA and JFA // Paris. Ilnd

133. Atassi M.Z. Antigenic structures of proteins. Their determination has revealed important aspects of immune recognition and'generated strategies for synthetic mimicking of protein binding sites // Eur J Biochem. 1984. - Vol. 145. - P. 1 - 20.

134. Baehr W., Zhang Y.X., Joreph T., Su H., Nano F.E., Everett K.D., Caldwell H.D. Mapping antigenic domains expressed by Chlamydia trachomatis major outer membrane protein genes // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1988. - Vol. 85. - P. 4000 - 4.

135. Bailey RL, Hayes L, Pickett M, Whittle HC, Ward ME, Mabey DC. Molecular epidemiology of trachoma in a Gambian village // Br. J. Ophthalmol. — 1994. -Vol. 78.-P. 813-7.

136. Bas S., Genevay S., Schenkel M.C., Vischer T.L. Importance of species-specific antigens in the serodiagnosis of Chlamydia trachomatis reactive arthritis //■ Rheumatology (Oxford). 2002. ~ Vol. 41. - P. 1017 - 20.

137. Bas S, Muzzin P, Vischer TL. Chlamydia trachomatis serology: diagnostic value of outer membrane protein 2 compared with that of other antigens // J. Clin. Microbiol. 2001. - Vol. 39. - P. 4082 - 5.

138. Batteiger B.E., Newhall WJ., Terho P., Wilde C.E., Jones R.B. Antigenic analysis of the major outer membrane protein of Chlamydia trachomatis with murine monoclonal antibodies // Infect. Immun. 1986. - Vol. 53. - P. 530 - 3.

139. Black C.M. Current methods of laboratory diagnosis of Chlamydia trachomatis infections // Clin. Microbiol. Rev. -1997. -Vol. 10. P. 160 - 84.

140. Birkelund S. The molecular biology and diagnostics of Chlamydia trachomatis // Dan. Med. Bull. 1992. - Vol. 39. - P. 304 - 20.

141. Biro F.M., Reising S.F., Doughman J.A., Kollar L.M., Rosenthal S.L. A comparison of diagnostic methods in adolescent girls-with and without symptoms of Chlamidia urogenital infection // Pediatrics. 1994. - Vol. 93. - P. 476 - 80.

142. Biro F.M., Rosenthal S.L., Kiniyalocts M. Gonococcal and Chlamidial genitourinary infections in symptomatic and asymptomatic adolescent women // Clin. Pediatr. 1995. - Vol. 34. - P. 419 - 23.

143. Antigen) in inflammatory gynecological diseases due to Chlamydia trachomatis. // Akush-Ginekol-Sofiia. 1995. - Vol. 34. - P. 35 - 37.

144. Brade L., Schramek S., Schade U., Brade H. Chemical, biological, and immunochemical properties of the Chlamydia psittaci lipopolysaccharide // Infect Immun. 1986. - Vol. 54. - P. 568 - 74.

145. Brockhaus M., Magnani J.L., Blaszczyk M., Steplewski Z., Koprowski H., Karlsson K.A., Larson G., Ginsburg V. // J. Biol. Chem. 1981. - Vol. 256. - P. 13223 -225.

146. Caldwell H.D., Hitchcock P.J. Monoclonal antibody against a genus -specific antigen of Chlamydia species: location of the epitope on chlamydial lipopolysaccharide // Infect Immun. 1984. - Vol. 44. - P. 306 - 14.

147. Carball Mi, Dillon J.R., Lussier M., Mithporp P., Winston S., Brodeur B. Evaluation of urease based confirmatory enzymelinked immunosorbent assay for diagnosis of Neisseria donorrhoeae // J. Clin. Microbiol. - 1992. - Vol. 30. - P. 2181 -83.

148. Carney J.A., Unadkat P., Yule A., Rajakumar R., Lacey C.J., Ackers J.P. New rapid latex agglutination test for diagnosing Trichomonas vaginalis infection // J. Clin. Pathol. 1988. - Vol. 41. - P. 806 - 8.

149. Cengiz L., Kiyan M., Cengiz A.T., Aksoy A.M., Kara F., Seckin L., Kilic H. Chlamydia trachomatis antigens in endocervical samples and serum IgG; antibodies in sterile-infertile women using ELISA // Mikrobiyol. Bui. 1992. - Vol. 26. - P. 203 -13.

150. Chen X.S., Yin Y.P., Liang G.J., GongX.D., Li H.S., Poumerol G., ThuyN., Shi M.Q., Yu Y.H. Sexually transmitted1 infections among female sex workers in Yunnan, China // AIDS Patient Care STDS. 2005.- Vol. 19.- P. 853 - 60.

151. Claas H.C., Wagenvoot J.H. et al. Diagnostic value of the polymerase chain reaction for Chlamydia trachomatis as determined in a follow-up study // J. Clin. Microbioh 1991 - Vol. 29. - P; 42 - 45.

152. Clad A., Freidank H., Plunnecke J., Jung B., Petersen E.E. Chlamydia trachomatis species specific serology: ImmunoComb Chlamydia bivalent versus microimmunofluorescence (MIF) // Infection. 1994. — Vol. 22. - P. 165 - 73.

153. Claman P, Honey L, Peeling RW, Jessamine P, Toye B. The presence of serum antibody to the chlamydial heat shock protein (CHSP60) as a diagnostic test for tubal factor infertility // Fertil. Steril. 1997. - Vol. 67. - № 3. - P. 501 - 4.

154. Chlamydia trachomatis. Современные представления о возбудителе. Серодиагностика. ЗАО «Медико биологический союз», Новосибирск, 2003.

155. Cles L.D., Bruch К., Stamm W.E. Staining characteristics of six commercially available monoclonal immunofluorescence reagents for direct diagnosis of Chlamydia trachomatis infections // J. Clin. Microbiol 1988 - Vol. 26.- P. 1735- 7.

156. Comanducci M, Manetti R, Bini L, Santucci A, Pallini V, Cevenini R, Sueur JM, Orfila J, Ratti G Humoral immune response to plasmid protein pgp3 in patients with Chlamydia trachomatis infection // Infect. Immun 1994. - Vol. 62. - P. 5491 - 7.

157. Crha I., Pospisil L., Stroblova H., Ventruba P., Zakova J., Huser M. Antibodies against the chlamydial heat shock protein in women with periadnexal adhesions // Ceska Gynekol. 2006. - Vol. 71. - № 2. - P. 127 - 31.

158. Deak J., Nedelkovics Z. Foldes Comparative studies in the diagnosis of Chlamydia trachomatis infections // Orv. Hetil. 1994. - Vol. 135. - P. 465 - 8.

159. Deak J., Nedelkovics Z. et al. Comparison of cultivation, indirect immunofluorescent method and LPS ELISA for diagnosis of Chlamydia trachomatis infections // Europ. Soc. Chlamyd. Research. 1992. - P. 220.

160. Demetrion E., Sackett R., Welch D.F., Kaplan D.W. Evaluation on enzyme immunoassay for detection of Neisseria donorrhoeae in adolescent population // FAMA. 1989. - Vol. 252 - P. 247 - 50.

161. Diamandis E.P. // Clin. Biochem. 1990. - Vol. 23. - P. 437 - 43.

162. Edet E.E. The prevalence of Chlamydia trachomatis infections among gynaecological patients // Br. J. Clin. Pract. 1993. - Vol. 47. - P. 21 - 22.

163. Erridge C., Bennett Guerrero E., Poxton I.R. Structure and function of lipopolysaccharides // Microb. and Infect. - 2002. - Vol. 4. - P. 837 - 51.

164. Evans R.T, Taylor Robinson D. Development and evaluation of an enzyme - linked immunosorbent assay (ELISA), using chlamydial group antigen, to detect antibodies, to Chlamydia trachomatis // J. Clin. Pathol. - 1982. - Vol. 35. - P. 1122 - 8.

165. Farencena A., Comanducci M., Donati M., Ratti G., Cevenini R. Characterization of a new isolate of Chlamydia trachomatis which lacks the common plasmid and has properties of biovar trachoma // Infect Immun. 1997. - Vol. 65. — P. 2965-9.

166. Feodorova V.A., Samelija J.G., Devdariani Z.L. Heat stable serogroup -specific proteins of Yersinia pseudotuberculosis // J. Med. Microbiol. - 2003. - Vol. 52. -P. 389-95.

167. Figneroa J.P., Ward E., Luthi T.E., Vermund S.H., Brathwaite A.R., Burk R.D. Prevalence of human papilloma virus among STD clinic attenders in Jamaica: association of yuonger age increased sexual activity // STD. - 1995. - Vol. 22. - P. 114 -18.

168. Geng Yu, Zhao Yungi, Lu Jingshi, Yong Chonghua. Identification of Ig M and Ig G antibodies of typhoid fever by microimmunoperoxidase test // Weisheng wuxue tongbao Microbiology. 1992. - Vol. 19. - P. 160-3.

169. Giries A.A., Carrick F.N., Lavin M.F. Remarkable sequence relatedness in the DNA encoding the major outer membrane protein of Chlamydia psittaci (koala type I) and Chlamydia pneumoniae // Gene. 1994. - Vol. 138. - P. 139 - 42.

170. Glynn A.A., Ison С. Serological* diagnosis of gonorrhoea by an enzyme — linked immunosorbent assay (Elisa) // Br. J. Vener. Dis. 1978. - Vol. 54. - P. 97 - 2.

171. Hallsworth P.G., Hefford C., Waddell D.L. Comparison of antigen detection, polymerase chain reaction and culture for detection of Chlamydia trachomatis in genital infection // Pathology. 1995. - Vol. 27. - P. 168 - 1.

172. Hitchcock P.J., Brown T.M. Morphological heterogeneity among Salmonella lipopolysaccharide chemotypes in silver stained polyacrylamide gels // J. Bacteriol. ~ 1983.-Vol. 154.-P. 269-7.

173. Hoffman T.A., Damus A.J., Sands L. Evaluation of a gonococcal serologic test // Am. J. Clin. Pathol. 1979. - Vol. 71. - P. 184 - 9.

174. Holland S.M., Gaydos C.A., Quinn T.C. Detection and differentiation of Chlamydia trachomatis, Chlamydia psittaci, and Chlamydia pneumoniae by DNA amplification // J. Infect. Dis. 1990. - Vol. 162. - P. 984 - 7.

175. Hosseinzadeh S., Pacey A.A., Eley A. Chlamydia trachomatis induced death of human spermatozoa is caused primarily by lipopolysaccharide // J. Med. Microbiol.-2003.-Vol. 52.-P. 193-200.

176. Iskandar N.M., Naguib M.B. Chlamydia trachomatis: an underestimated cause for rhinitis in neonates // Int. J. Pediatr. Otorhinolaryngol. 1998. - Vol. 42. - P. 233-7.

177. Ison C.A., Glynn A.A. Classes of antibodies in acute gonorrhoea // Lancet. -1979. Vol. l.-P. 1165-8.

178. Jaschek G., Gaydos C.A., Welsh L., Quinn T.C. Direct detection of C. trachomatis in urine specimens from symptomatic and asymptomatic men by using a rapid PCR assay // J. Clin. Microbiol. 1993. - Vol. 31. - P. 1209 - 2.

179. Jenum PA. Antibodies against Chlamydia measured by an ELISA method // Acta. Pathol. Microbiol. Immunol. Scand C. 1985. - Vol. 93. - P. 175 - 82.

180. Jones H.M., Schachter J., Stephens R.S. Evaluation of the humoral immune response in trachoma to Chlamydia trachomatis major outer membrane proteins by sequence-defined immunoassay // J. Infect. Dis. 1992. - Vol. 166. - P. 915 - 9.

181. Jones R.B., Van Der Pol B., Wools K. Chlamydia trachomatis infection of the female urethra in the absence of detectable cervical infection // Abst. Book of Meeting of the 3th European Society for Chlamydia Research. M. - 1996. - P. 144.

182. Jongejan F., Bax R., Meddens M.J., Quint W.G. Cowdria ruminantium is recognized by a monoclonal antibody directed against the major outer membrane protein of Chlamydia trachomatis // Vet. Microbiol. 1991. - Vol. 27. - P. 115 - 23.

183. Komoda T., Ohsima T., Ashida A., Bannai H., Motomura R., Akita H., Iwata S., Sato Y., Sunakawa K. Detection of antibodies by immunoblotting using Chlamydia trachomatis serovars // Kansenshogaku. Zasshi. 2007. - Vol. 81. - P. 133 -137.

184. Ladany S., Black C.M. Farshy C.E., Ossewaarde J.M., Barnes R.C. Enzyme immunoassay to determine exposure to Chlamydia pneumoniae (strain TWAR) // J. Clin. Microbiol. 1989. - Vol. 27. - P. 2778 - 83.

185. Laemmli U.K. Cleavage of Structural proteins during the assembly of the Head of Bacteriophage T4 // Nature. 1970. - Vol. 227. - P. 680 - 685.

186. Land J.L., Gijsen A.P., Kessels A.G., Slobbe M.E., Bruggeman C.A. Performance of five serological Chlamydia antibody tests in subfertile women // Hum. Reprod. 2003. - Vol. 18. - P. 2621 - 2627.

187. Larsen S.A., Steiner B.M., Rudolph A.H. Laboratory diagnosis and interpretation of tests for syphilis // Clin. Microbiol. Rev. 1995. - Vol. 8 - P. 219.

188. Lindner L.E., Geerling S., Nettum J.A., Miller S.L., Atman K.H., Wechter S.R. Identification of Chlamydia in cervical smears by immunofluorescence: technic, sensitivity, and specificity // A. J. Clin. Pathol. 1986. - Vol. 85. - P. 180 - 185.

189. Lisi P.J., Dondero R.S., Kwiatkoski D., Spence M.R., Rein M.F., Alderete J.F. Monoclonal — antibody based enzyme - linked immunosorbent assay for Trichomonas vaginalis // J. Clin. Microbiol. - 1988. - Vol. 26. - P. 1684 - 6.

190. Ludwig M., Hausmann G., Hausmann W.et al. Chlamydia trachomatis antibodies in serum and ejaculate of male patients without acute urethritis // Ann. Urol. (Paris). 1996. -Vol. 23.-P. 208.

191. Luo M., Zhang L., Xiao Y. The prevalence of Chlamydia trachomatis and Ureaplasme urealyticum cervical infection in infertility women and the observation of therapeutic efficacy // Human. Yi. Ke. Da. Xue. Xue. Bao. 1998. - Vol. 23. - P. 444 -446.

192. Mahoney J.B., Luinstra K.E. et al. Comparison of plasmid and chrosome — based chain reaction assays for detecting Chlamydia trachomatis nucleic acids // J. Clin. Microbiol. - 1993. - Vol. 31.-P. 1753 - 1758.

193. Mamat U., Baumann M., Schmidt G., Brade H The genus specific lipopolysaccharide epitope of Chlamydia is assembled in C. psittaci and C. trachomatis by glycosyltransferases of low homology // Mol. Microbiol. - 1993. - Vol. 10. - P. 935 -41.

194. Mania-Pramanik J, Potdar S, Kerkar S. Diagnosis of Chlamydia trachomatis infection // J. Clin. Lab. Anal. 2006. - Vol. 20. - № 1. - P. 8 - 14.

195. McMillan A., McNeillage G., Young H., Bain S.S. Detection of antigonococcal IgA in cervical secretions by indirect immunofluorescence: an evaluation as a diagnostic test // Br. J. Vener. Dis. 1980. - Vol. 56. - P. 223 - 6.

196. Melles H.H., Colombo S., Linhares I.M., Siqueira L.F. Evaluation of parameters for laboratory diagnosis of genital female infection by Chlamydia thachomatis // Rev. Soc. Bras. Med. Trop. 2000. - Vol. 33. - P. 355 - 361.

197. Morse S.A., Beck C.M., Mardh P.A. Issues in Laboratory diagnosis of STD // Sexually Transm Dis. 1998. - Vol. 4. - P. 53.

198. Nano F.E., Caldwell H.D. Expression of the chlamydial genus — specific lipopolysaccharide epitope in Escherichia coli // Science. 1985 - Vol. 228 — P.742 — 4.

199. Newhall W.J. Antigenic structure of surface exposed regions of the major outer - membrane protein of Chlamydia trachomatis // Rev. Infect. Dis. - 1988. — Suppl. 2.-P. 386-390.

200. Ngampasutadol J., Rice P.A., Walsh M.T., Gulati S. Characterization of a peptide vaccine candidate mimicking an oligosaccharide epitope of Neisseria gonorrhoeae and resultant immune responses and function // Vaccine. 2006. - Vol. 24. -P. 157-170.

201. Ni A., Everson S., Li Y., Ward M.E. Species specific monoclonal antibodies against the major outer membrane protein (MOMP) of Chlamydia trachomatis // Zhongguo Yi Xue Ke Xue Yuan Xue Bao. - 1995. - Vol. 17. - P. 428 -433. (Chinese).

202. Ngeow Y. F. Limitations of serodiagnosis in chlamydial genital tract infections // Ann. Acad. Med. (Singapore). 1996. - Vol. 25. - P. 300 - 304.

203. Numazaki K., Kusaka T., Chiba S. Perinatal complications are associated with seropositivity for Chlamydia trachomatis during pregnancy // Clin. Infect. Dis. -1996.-Vol. 23.-P. 208.

204. Nurminen M., Leinonen M., Saikku P., Makela P.H. The genus specific antigen of Chlamydia: resemblance to the lipopolysaccharide of enteric bacteria // Science. - 1983. - Vol. 220. - P. 1279 - 1281.

205. Okadome A., Notomi T., Nomura S., Nagavama A. Reactivity of a dual amplified chlamydia immunoassay with different serovars of Chlamydia trachomatis // Int. J. STD. AIDS. 1999. - Vol. 10. - P. 460 - 463.

206. Opaneye A.A., Muttu K.M., Rashid S. Screening for genital Chlamydia trachomatis infection in female patients // Genitourin. Med. 1994. - Vol. 70. - P. 71.

207. Oranje A.P., Reimann K., van Eijk R.V., Schouten HJ., de Roo A., Tideman G.J., Stolz E., Michel M.F. Gonococcal serology. A comparison of three different tests // Br. J. Vener. Dis. 1983. - Vol. 59. - P. 47 - 52.

208. Ossewaarde J.M., de Vries A., van den Hoek J.A., van Loon A.M. Enzyme immunoassay with enhanced specificity for detection of antibodies to Chlamydia trachomatis // J. Clin. Microbiol. 1994. - Vol. 32. - P. 1419 - 26.

209. Ouchi K., Hasegawa K., Maki R. et al. Evaluation of a synthetik peptide based species specific EIA kit for detection of antibodies to Chlamydia trachomatis with clinical specimens // Kansenshogaku Zasshi. 1998. - Vol. 72. - P. 249 - 57.

210. Paavonen J. Cost — benefit analysis of Chlamydia trachomatis screening program // IUSTI Europ. Congr. 1998 on STDs and Genital. Dermatol, Goteborg, Sweden, (4-5 September). 1998. - P. 23.

211. Patel S.R., Wiese W., Patel S.C., Ohl C., Byrd J.C., Estrada C.A. Systematic review of diagnostic tests for vaginal trichomoniasis // Infect. Dis. Obstet. Gynecol. -2000.-Vol. 8.-P. 248-57.

212. Piura B., Sarov I., Sarov B. et al. Serum IgG and IgA antibodies specific for Chlamydia trachomatis in salpingitis patients as determinded by the assay immunoperoxidase // Eur. J. Epidemiol. 1985. - Vol. l.-P. 110-116.

213. Portig I., Goodall J.C., Bailey R.L., Gaston J.S. Characterization of the humoral immune response to Chlamydia outer membrane protein 2 in chlamydial infection // Clin. Diagn. Lab. Immunol. 2003. - Vol. 10. - P. 103 - 7.

214. Price G.A., Hobbs M.M., Cornelissen C.N. Immunogenicity of gonococcal transferrin binding proteins during natural infections // Infect. Immun. 2004. — Vol. 72.-P. 277-83.

215. Raetz C.R., Whitfield C. Lipopolysaccharide endotoxins // Annu. Rev. Biochem. 2002. - Vol. 71. - P. 635 - 700.

216. Rai A., Mahajan V.M. Comparison of four serological methods fordetecting antibodies to Chlamydia trachomatis // Eur. J. Clin. Microbiol. 1983. - Vol. 2. - P. 129-34.

217. Robertson J.N., Hogston P., Ward M.E. Gonococcal and chlamydial antibodies in ectopic and intrauterine pregnancy // Br. J. Obstet. Gynaecol. — 1988. — Vol. 95.-P. 711-6.

218. Robinson A .J., Ridgway G.L. Modern diagnosis and management of genital Chlamydia trachomatis infection // Brit. J. Hospital. Med. 1996. - Vol. 55. - P. 388 -393.

219. Sarafian S.K., Young H. Detection of gonococcal antigens by an indirect sandwich enzyme — linked immunosorbent assay // J. Med. Microbiol. 1982. - Vol. 15.-P. 541-50.

220. Schillinger M., Domanovits H., Mlekusch W., Bayegan K., Khanakah G., Laggner A.N., Minar E., Stanek G. Anti chlamydia antibodies in patients with thoracic and abdominal aortic aneurysms // Wien. Klin. Wochenschr. 2002: - Vol. 11'4. - P. 972 - 7. ■:■

221. Sheffield P.A., Moore D.A., Voigt L.F., Scholes D., Wang S.P., Grayston J.T., Daling J.R. The association between Chlamydia trachomatis serology and pelvic damage in women with tubal ectopic gestations // Fertil. Steril. 1993. - Vol. 60. - P. 970-975.

222. Sillis M., White P., Caul E.O., Paul I.D., Treharne J.D. The differentiation of Chlamydia species by antigen detection in sputum specimens from patients with community-acquired acute respiratory infections // J. Infect 1992 - Vol.25.- P.77- 86.

223. Skolnik N. Screening for Chlamydia trachomatis infection // Am. Fam. Physican.- 1995.-Vol. 51.-P. 820-821.

224. Smith N., Barton S., Purkayastha S., Smith JR. Screening for chlamydia infection // Lancet. 1993. - Vol. 342. - P. 687 - 688.

225. Stanczak JJ, Majchrzak MJ, Stanczak GP. Modern diagnostics of Chlamydia trachomatis infections. // Med. Wieku. Rozwoj. 2005. - Vol. 9. - № 1. - P. 9 - 20

226. Stephens R.S., Wagar E.A., Schoolruk G.K. High-resolution mapping of serovar specific and common antigenic determinants of the major outer membrane protein of Chlamydia trachomatis // J. Exp. Med. - 1988. - Vol. 167. - P. 817 - 31.

227. Storey C.C., Mearns G., Richmond SJ. Immune dot blot technique for diagnosing infection with Chlamydia trachomatis // Genitourin. Med. 1987. - Vol. 63. -P. 375-9.

228. Stothard D.R., Williams J.A., Van Der Pol B., Jones R.B. Identification of a Chlamydia trachomatis serovar E urogenital isolate which lacks the cryptic plasmid // Infect. Immun. 1998. -- Vol. 66. - P. 6010 - 3.

229. Su H., Caldwell H.D. Immunogenicity of a chimeric peptide corresponding to T helper and B cell epitopes of the Chlamydia trachomatis major outer membrane protein // J. Exp. Med. 1992. - Vol. 175. - P. 227 - 35.

230. Sutcliffe S., Giovannucci E., Alderete J.F., Chang T.H., Gaydos C.A., Zenilman-J.M., De Marzo A.M., Willett W.C., Platz E.A. Plasma antibodies against Trichomonas vaginalis and subsequent risk of prostate cancer // Cancer. -2006. Vol. 15.-P. 939-45.

231. Taha N.S., Focchi J., Ribalta J.C., Castelo A., Lorincz A., Döres G.B. Universal Collection Medium (UCM) is as suitable as the Standard Transport Medium (STM) for Hybrid Capture II (HC-2) assay // J. Clin. Virol. 2006.- Vol.36. - P.32 - 5.

232. Taylor-Robinson D. Chlamydia diagnosis: are the advances answering the problems of clinical practice? // J. Eur. Acad. Dermatol. Veneriol. 1995. - Vol. 5. - P. 109-110.

233. Taylor Robinson D. Chlamydia trachomatis and sexually transmitted disease // BMJ. - 1994. - Vol. 308. - P. 150 - 151.

234. Taylor — Robinson D., Thomas B.J. Laboratory technigues for the diagnosis of chlamydial infections // Genitourine Med. 1991. - Vol. 67. - P. 256 - 266.

235. Thiele D., Karo M., Krauss H. Monoclonal antibody based capture ELISA/ELIFA for the detection of Chlamydia psittaci in veterinary clinical specimens // Zentralbl. Bakteriol. 1992. - Vol. 277. - P. 39 - 48.

236. Towbin H., Gordon J. Immunoblotting and dot immunobinding-Current status and outlook // J. Immunol. Methods. 1984. - Vol. 72. - P. 313 - 340.

237. Toye B., Zhong G.M., Peeling R., Brunham R.C. Immunologic characterization of a cloned fragment containing the species specific epitope from the major outer membrane protein of Chlamydia trachomatis // Infect. Immun. - 1990. -Vol. 58.-P. 3909-13.

238. Tyl J. Is there a link between chronic chlamydial infection and childhood asthma? // Med. Wieku. Rozwoj. 2004. - № 8. - P. 411 - 7.

239. Van Weemen B.K., Schuurs A.H. Immunoassay using antigenenzyme conjugate //FEMS Letters. 1971. - Vol. 15. - P. 232 - 236.

240. Veldkamp J., Visser A.M. Application of the Enzyme linced Immunosorbent Assay (ELISA) in the Serodiagnosis of syphilis // Brit. J. Vener. Dis. -1975.-Vol. 51.-P. 227-231.

241. Vecsei P.V., Kircher K., Reitner A., Khanakha G., Stanek G. Chlamydia in anterior ischemic optic neuropathy // Ophthalmologica. 2002. - Vol. 216. - P. 215 -20.

242. Verkooyen R.P., Peeters M.F., van Rijsoort-Vos J.H., van der Meijden W.I., Mouton J.W. Sensitivity and specificity of three new commercially available Chlamydia trachomatis tests // Int. J. STD. AIDS. 2002. - Vol. 13. - P. 23 - 5.

243. Watson E.J., Templeton A., Russell I., Paavonen J., Mardh P.A., Stary A., Pederson B.S. The accuracy and efficacy of screening tests for Chlamydia trachomatis: a systematic review // J. Med. Microbiol. 2002. - Vol. 51. - P. 1021 - 1031.

244. Watt R.M., Philip A., Wos S.M., Sam GJ. Rapid assay for immunological detection of Trichomonas vaginalis // J. Clin. Microbiol. 1986. - Vol. 24. - P. 551 - 5.

245. Wong K.C., Ho B.S., Egglestone S.I., Lewis W.H. Duplex PCR system for simultaneous detection of Neisseria gonorrhoeae and Chlamydia trachomatis in clinical specimens // J. Clin. Pathol. 1995. - Vol. 48. - P. 101 - 4.

246. Yoon K., Kim K.M., Ahn M.H., Min D.Y., Cha D.S. Detection of IgG antibodies with immunofluorescent antibody technique in human trichomoniasis // Kisaengchunghak Chapchi. 1987. - Vol. 25. - 7 - 12.

247. Yule A., Gellan M.C., Oriel J.D., Ackers J.P. Detection of Trichomonas vaginalis antigen in women by enzyme immunoassay // J. Clin. Pathol. 1987. - Vol. 40.-P. 566-8.

248. Zhang Y.X., Watkins N.G., Stewart S., Caldwell H.D. The low-molecular-mass, cysteine-rich outer membrane protein of Chlamydia trachomatis possesses both biovar and species - specific epitopes // Infect. Immun - 1987. - Vol.55. - P.2570 - 3.

249. Zhang Y.X., Stewart S.J., Caldwell H.D. Protective monoclonal antibodies to Chlamydia trachomatis serovar and serogroup-specific major outer membrane protein determinants // Infect Immun. - 1989. - Vol. 57. - P. 636 - 8.

250. Zhong G., Brunham R.C. Antibody responses to the chlamydial heat shock proteins hsp60 and hsp70 are H-2 linked // Infect. Immun. 1992. - Vol. 60. - P. 3143 -9.

251. Zhong G.M., Reid R.E., Brunham R.C. Mapping antigenic sites on the major outer membrane protein of Chlamydia trachomatis with synthetic peptides // Infect. Immun. 1990. - Vol. 58. - P. 1450 - 5.

252. Zhongguo Ji., Sheng Chong, Xue Yu., Ji Sheng, Chong Bing, Za Zhi. Preparation, characterization and preliminary application of recombinant protein AP33 of trichomonas vaginalis // Epidemiol. Biomarkers. Prev. 2006. - Vol. 24. - P. 31 - 4.