Применение аутологичных стромальных клеток из жировой ткани для восстановления объёма кости альвеолярных отростков/частей верхней и нижней челюстей тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.14, кандидат медицинских наук Чаусская, Ирина Юрьевна

• Чаусская, Ирина Юрьевна
• кандидат медицинских наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Чаусская, Ирина Юрьевна

Список сокращений Введение

Глава 1. 1.

Глава 2. 2. аутологичных альвеолярного части нижней

Обзор литературы

Современный взгляд на механизм регенерации костной ткани

Использование трансплантатов при восстановлении костных дефектов альвеолярных отростков верхней и нижней челюстей

Тканевая инженерия с использованием стромальных клеток из жировой Материал и методы исследования

Методы восстановления объема кости отростка верхней челюсти и альвеолярной челюсти

Материалы, используемые в качестве носителей аутологичных стромальных клеток из жировой ткани Метод выделение и культивирование СКЖТ Получения первичной культуры СКЖТ человека Подготовки аутологичной сыворотки крови пациента Сравнительная оценка пролиферации клеток СКЖТ при культивировании с использованием сред АёуапсеБТЕМ™ и БМЕМ, фетальной бычьей сыворотки и аутологичной сыворотки крови пациента Метод цитофлуориметрического исследовани Оценка уровня апоптоза методом цитофлуориметрии.

Характеристика экспрессии поверхностных маркеров СКЖТ методом цитофлуориметри Метод оценки мультипотентности и пролиферативного потенциала выделяемой и культивируемой популяции аутологичных СКЖТ

Доказательство мультипотентных свойств выделяемой и культивируемой популяции аутологичных СКЖТ

Оценка способности СКЖТ, дифференцированных в остеогенном направлении культивированных с использованием сред разного состава, к остеогенной дифференцировке, и их пролиферативной активности.

Подготовка тканеинженерных конструкций к трансплантации

Метод гистологического анализа биопсий

Метод иммуногистохимического анализа биопсий

Метод морфометрии костной ткани

Метод дентальной объемной томографии (ДОТ) проточной клеточных

Глава 3.

3.6 Глава 4.

Результаты и обсуждение лабораторных исследований. 55 Фенотипические и функциональные характеристики СКЖТ. Создание тканеинженерных конструкций.

Сравнение пролиферативной активности СКЖТ при 57 культивировании в средах AdvanceSTEM или DMEM в присутствии аутологичной сыворотки или 10% фетальной бычьей сыворотки.

Оценка уровня апоптоза и распределения клеток СКЖТ по 58 фазам клеточного цикла.

Характеристика экспрессии поверхностных клеточных 59 маркеров СКЖТ методом проточной цитофлуориметрии. Оценка мультипотентных свойств СКЖТ при 63 культивировании с использованием AdvanceSTEM™ с аутологичной сывороткой.

Оценка пролиферативной активности стромальных клеток 66 жировой ткани в условиях индукции остеогенной дифференцировки при культивировании в среде AdvanceSTEM™ с аутологичной сывороткой Анализ способности СКЖТ адгезировать на «КоллапАн-Г» 70 и ГАП. Создание тканеинженерных конструкций Результаты пилотного клинического исследования.

Обзор клинического материала по результатам лечения 73 пациентов с дефектами и атрофией альвеолярных отростков/частей верхней и нижней челюстей с использованием тканеинженерных конструкций на основании СКЖТ и остеогенных носителей.

Результаты клинического исследования введения 77 тканеинженерных конструкций при лечении пациентов с дефектами и атрофией альвеолярных отростков верхних челюстей.

Результаты клинического исследования введения 100 тканеинженерных конструкций при лечении пациентов с дефектами и атрофией альвеолярных частей нижних челюстей.

Гистологический анализ биопсий.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Применение аутологичных стромальных клеток из жировой ткани для восстановления объёма кости альвеолярных отростков/частей верхней и нижней челюстей»

Актуальность исследования.

Актуальной проблемой стоматологии и челюстно-лицевой хирургии является поиск наиболее эффективных средств и методов костной пластики, создающих оптимальные условия для репаративного остеогенеза.

При восстановлении костной ткани большое значение имеет вторая стадия репаративной регенерации, заключающаяся в пролиферации и остеогенной дифференцировке собственных стромальных клеток, формировании клеток остеобластического ряда, образующих костную ткань (А.А.Кулаков, А.С.Григорян, 2007). Поэтому одной из актуальных задач в стоматологии и челюстно-лицевой хирургии является создание необходимого количества стромальных клеток, условий для их остеогенной дифференцировки и доставки в зону регенерации. Тканевая инженерия решает данную задачу путем создания тканеинженерных конструкций на основе стромальных клеток из разных источников и остеогенного носителя для дальнейшей трансплантации их в зону дефекта.

ТТрпрттртгхт/тнт-тлд г/ггхпиигл тттта пптт\щрн1ла ртпгшятп.нму ь-пртт/

-А. X А XX X Л А. АХ V/ 111 / у ■ ' ■ 11^1. ^ XXX 1/1 V X V/ 111М^11«111/1/ V IV./ X V X V IV является жировая ткань. Известно, что в жировой ткани человека сконцентрирована популяция мультипотентных фибробластоподобных клеток мезенхимального происхождения (СКЖТ), экспрессирующих маркеры стволовых клеток СБ 105, СБ73, СЭ90 и способных дифференцироваться в нескольких направлениях, в том числе в остеогенном и эндотелиальном (АкИаш! О. е1 а1., 1992; 81а81ю\уег М. е1 а1., 1999; Бо1штс1 е1 а1., 2006). Наиболее важным преимуществом стромальных клеток из жировой ткани является то, что они могут быть выделены в большем количестве, с минимальными болезненными ощущениями для пациента. Стромальные клетки из жировой ткани хорошо адгезируют к пластику и пролиферируют, что позволяет при относительно небольшом сроке культивирования получить достаточное для трансплантации количество клеток (гик Р.А. е1 а1., 2002; ЯеИтап I. & а1., 2004; Р1апа1-Вепагс1 V. & а1., 2004). Перечисленные свойства этих клеток позволяют предполагать, что использование аутологичных стромальных клеток жировой ткани в сочетании с остеогенным носителем способно ускорить образование полноценного костного регенерата, что особенно важно для пациентов со значительными по размеру дефектами. Цель исследования.

Обосновать и разработать технологию создания и применения тканеинженерных конструкций на основе аутологичных стромальных клеток из подкожной жировой клетчатки и остеогенного носителя для регенерации костной ткани у пациентов с атрофией и дефектами альвеолярных отростков/частей верхней и нижней челюстей. Задачи исследования.

1. Разработать методику выделения, культивирования и подготовки к трансплантации аутологичных стромальных клеток из жировой ткани пациентов.

2. Охарактеризовать экспрессию поверхностных маркеров аутологичных стромальных клеток из жировой ткани.

3. Изучить жизнеспособность и способность аутологичных стромальных клеток из жировой ткани к адгезии на носителях (ГАП и «КоллапАн-Г»).

4. Оценить влияние аутологичных стромальных клеток из жировой ткани на носителях (ГАП и «КоллапАн-Г») на динамику заживления костного дефекта челюстей у людей.

5. Разработать методику индукции дифференцировки стромальных клеток из жировой ткани в остеогенном направлении.

6. Исследовать влияние тканеинженерных конструкций на основе аутологичных стромальных клеток из жировой ткани и стромальных клеток из жировой ткани, индуцированных в остеогеогенном направлении, в сочетании с остеогенным носителем на морфологию формирующейся костной ткани в динамике при замещении костных дефектов челюстей людей.

7. Разработать алгоритм применения данной методики в клинической практике.

Научная новизна.

Впервые разработана методика выделения, культивирования и подготовки к трансплантации стромальных клеток жировой ткани человека с использованием среды AdvanceSTEM™ (среда для поддержания роста недифференцированных мезенхимальных стромальных клеток) с добавлением аутологичной сыворотки крови пациента. Для создания тканеинженерных конструкций использовали: 1. стромальные клетки жировой ткани, культивированные в среде AdvanceSTEM™ с аутологичной сывороткой (АС), для получения культуры, обладающей регенеративным потенциалом и способностью стимулировать рост сосудов; 2. впервые использовали смесь стромальных клеток жировой ткани, культивированные в среде AdvanceSTEM™ с аутологичной сывороткой (АС), со стромальными клетками жировой ткани, культивированными в остеоиндуктивных условиях в течение 3-х недель. Смесь культивированных стромальных клеток жировой ткани в дальнейшем инкубировали в присутствии остеогенных носителей «КоллапАн-Г» или ГАП для создания тканеинженерных конструкций, пригодных для использования в клинике.

Впервые проводилась оценка эффективности применения тканеинженерных конструкций, полученных на основе аутологичных стромальных клеток жировой ткани, выращенных с использованием аутологичной сыворотки крови пациента и остеогенного носителя при восстановлении объема костной ткани у пациентов с дефектами и атрофией альвеолярных отростков/частей верхней и нижней челюстей. Практическое значение.

1. Проведенные исследования позволили разработать методику создания и применения тканеинжинерных конструкций на основе стромальных клеток жировой ткани в клинической практике.

2. Доказана, эффективность использования тканеинженерных конструкций на основе аутологичных стромальных клеток из жировой ткани и стромальных клеток из жировой ткани, индуцированных в остеогеогенном направлении, в сочетании с «КоллапАн-Г» в качестве носителя при замещении костных дефектов челюстей пациентов.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Разработана методика культивирования стромальных клеток жировой ткани с использованием среды для поддержания роста недифференцированных мезенхимальных стромальных клеток с добавлением аутологичной сыворотки крови пациента.

2. Создана и оптимизирована тканеинженерная конструкция на основе стромальных клеток жировой ткани, культивированные в среде Ас1уапсе8ТЕМ™ с аутологичной сывороткой (АС) и на основе комбинации стромальных клеток жировой ткани, культивированные в среде АсЬ/апсеБТЕМ™ с аутологичной сывороткой (АС), с стромальными клетками жировой ткани, культивированными в остеоиндуктивных условиях.

3. Результаты использования созданных тканеинженерных конструкций в клинике для восстановления объема кости альвеолярных отростков/частей верхней и нижней челюстей.

Апробация работы

Работа апробирована 1 июля 2011г на совместном заседании кафедр госпитальной хирургической стоматологии и челюстно-лицевой хирургии, хирургической стоматологии и челюстно-лицевой хирургии ФПДО, кафедра ортодонтии и детского протезирования (протокол №19)

Структура и объем диссертации.

Диссертация изложена на 146 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, 2 глав собственных исследований, заключения, выводов и практических рекомендаций. Работа проиллюстрирована 48 рисунками и 2таблицами. Библиография включает работ 171 работ, из которых 68отечественных и 103 зарубежных авторов.

Заключение диссертации по теме «Стоматология», Чаусская, Ирина Юрьевна

ВЫВОДЫ

1. Разработана методика выделения, культивирования и подготовки к трансплантации СКЖТ человека с использованием среды AdvanceSTEM™ (HyClone)/ Antibiotic/Antimycotic Solution ЮОх (HyClone) с добавлением 10% сыворотки крови донора жировой ткани (аутологичной сыворотки).

2. Полученная культура СКЖТ обладает высокой способностью адгезировать к пластику и экспессировать характерные для стромальных клеток СКЖТ поверхностные маркеры PDGFbR, CD 105, CD90, CD49a. Культура СКЖТ обладает мультипотентными свойствами, то есть способностью дифференцироваться в адипоцитарном, остеогенном, хондрогенном и эндотелиальном направлениях.

3. Полученная культура СКЖТ обладает высокой пролиферативной активностью, низким уровнем апоптоза и способна к адгезии на носителях ГАП и «КоллапАн-Г». Культивирование СКЖТ в присутствие остеогенных носителей «КоллапАн-Г» или ГАП позволило создать тканеинженерные конструкции, пригодные для использования в клинике.

4. Использование тканеинженерных конструкций на основе СКЖТ и ГАП, СКЖТ и «КоллапАн-Г» для восстановления объема кости у пациентов стимулирует регенерацию костной ткани, которая характеризуется недостаточной однородностью и минерализацией.

5. Разработана методика индукции дифференцировки стромальных клеток из жировой ткани в остеогенном направлении. Получаемая описанным способом культура СКЖТ обладает более высоким потенциалом дифференцировки в остеогенном направлении, чем культуры, получаемые стандартным способом.

6. Использование комбинированной тканеинженерной конструкции, полученной на основе «КоллапАн-Г» и сочетания СКЖТ, культивированных в среде AdvanceSTEM™ с АС, с СКЖТ, культивированных в остеоиндуктивных условиях, достоверно увеличивает содержание формирующейся костной ткани в регенерате и стимулирует образование кровеносных сосудов по сравнению с тканеинженерными конструкциями на основе СКЖТ, культивированных в среде АёуапсеБТЕМ™ с АС, в сочетании с ГАП или «КоллапАн-Г». Использование комбинированной тканеинженерной конструкции приводит к органотипическому восстановлению утраченной костной ткани, что делает возможным установку дентальных имплантатов через 3 месяца и позволяет сократить сроки реабилитации пациентов.

7. Разработан алгоритм создания тканеиженерных конструкций и их клинического применения.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для сокращения сроков органотипического восстановления утраченной костной ткани у пациентов рекомендована трансплантация в зону костного дефекта комбинированной тканеинженерной конструкции на основе сочетания СКЖТ, культивированных в стандартных услвоиях, и СКЖТ, преддифференцированных в остеогенном направлении (в соотношении 1:1), на носителе «КоллапАн-Г».

2. Для получения жировой ткани рекомендовано использовать методику липосакции подкожной жировой клетчатки из передней брюшной стенки справа и слева от белой линии живота без ее повреждения.

3. Учитывая особенности выделения, хранения и транспортировки жировой ткани, а так же особенности трансплантации тканеинженерных конструкций рекомендовано проведение данных манипуляций в специализированных клиниках хирургической стоматологии и челюстно-лицевой хирургии.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Чаусская, Ирина Юрьевна, 2011 год

1. Актуальные проблемы теоретической и клинической остеоартрологии / Ю.И. Денисов-Никольский, С.П. Смирнов, Н.П. Омельяненко, И.В. Матвейчук.- М. : ОАО «Типография «Новости», 2005. С.25

2. Андриасян Л.Г. Лечение воспалительных осложнений и профилактика атрофии альвеолярных отростков после удаления зубов с применением брефотрансплантационной костной ткани : Автореф. дис. .канд. мед. наук. -Ереван, 1989.- 19 с.

3. Бадалян В.А. Хирургическое лечение периапикальных деструктивных изменений с использованием остеопластических материалов на основе гидроксиапатита: Автореф. дис. . канд. мед. наук. М., 2000. - 22 с.

4. Бел озеров М.Н. Оценка остеопластических свойств различных биокомпозиционных материалов для заполнения дефектов челюстей (экспериментально-клиническое исследование) : дис. .канд. мед. наук. М., 2004. - 147 с.

5. Биоактивные гидроксиапатит содержащие биоимпланты в травматологии и ортопедии. / Г.Н. Берченко, З.И. Уразгильдеев, Г.А. Кесян и др. // Симпозиум по проблемам тканевых банков с международным участием.- М., 2001. - С.- 59.

6. Воложин А.И., Максимовский Ю.М., Князев С.Н. Клиника, патогенез и лечение болезней зубов и тканей пародонта у больных с классической гемофилией // Зубоврачебный вестник.- 1993.- № 3.- С.13-18.

7. Воложин А.И., Попов В.К., Краснов А.П. и др. Физико- механические и морфологические характеристики новых композитов на основе сверхвысокомолекулярного полиэтилена и гидроксиапатита // Новое в стоматологии. 1999.- № 8.- С.35-43.

8. Воложин А.И., Топольницкий О.З., Попов В.К. и др. Модификация акриловой пластмассы введением в нее гидроксиапатита с последующей очисткой сверхкритической двуокисью углерода // Новое в стоматологии.-1999.-№3.- С.32-40.

9. Гончаров И.Ю., Базикян Э.А., Бычков А.И. Применение гидроксиапола при восполнении костных дефектов челюстей и стимуляции остеогенеза // Стоматология. 1996. - №5. - С. 54-56.

10. Гречуха А. М. Применение биоактивного стеклокристаллического материала "Биоситалл-11" для замещения костных дефектов лицевого скелета (экспериментально-клиническое исследование) : дис. . канд. мед. наук.- М., 2009.- 92 с.

11. Гречуха А.М. Экспериментальное обоснование применения биоактивного стеклокристаллического материала «Биоситалл-11» для замещения костных дефектов челюстных костей. / А.М. Гречуха, С.Д.

12. Беззубик // Стоматология.- 2009.- № 3, т. № 88.- С.26-30.

13. Дробышев А.Ю. Экспериментальное обоснование и практическое применение отечественных биокомпозиционных материалов при костно-восстановительных операциях на челюстях.: Дис. . д-ра. мед. наук.- М., 2001.- 237 с.

14. Ермолаев И.И., Спекторов В.А. Костная брефопластика при лечении одонтогенных кист челюстей. // Стоматология. 1968. - №1. - С. 42-45.

15. Замещение дефектов лицевого скелета деминерализованными костными аллотрансплантатами / П.Г. Сысолятин и др. // Стоматология.- 1988.- № 1.-С.38-41.

16. Зуев В.П., Панкратов A.C. Остеорепарация посттравматических дефектов нижней челюсти под воздействием гидроксиапатита ультравысокой дисперсности // Стоматология. -1999. № 1. - С.37-41.

17. Иванов С.Ю., Панин A.M. Использование препарата КоллапАн при лечении поздних осложнений дентальной имплантации: Сб. Новые технологии в стоматологии. М., 1998.- С. 149-150.

18. Иванов С.Ю., Панин A.M., Кузнецов Г.В. Изучение свойств остеопластических материалов «Биоматрикс» и «Алломатрикс Имплант» в эксперименте.// V Международная конференция челюстно - лицевых хирургов и стоматологов : Матер, конф.- СПб., 2002.- С. 66.

19. Ильин В.А. Пластическое замещение дефектов нижней челюсти костной23. щебенкой : Дис. .канд. мед. наук. Архангельск. - 1953. - 160 с.

20. Кац А.Г. Регенерация костной ткани после удаления кисты челюсти // Стоматология. -1965. №5. - С. 52-57.

21. Клиническая апробация препаратов на основе гидроксиапатита в стоматологии / А.И. Воложин, C.B. Дьякова, 0.3. Топольницкий и др. // Новое в стоматологии. -1993. № 3. - С. 29-31.

22. Корневая паста на основе гидроксиаола фирмы «Полистом» / А.И. Воложин, Г.М. Барер, A.C. Григорян и др. // Вестник стоматологии.- 1996.- № 5(41).- С.З.

23. Костная брефопластика как метод стимуляции репаративного остеогенеза челюстей. / Г.П. Рузин, Ю.С. Захаров, Д.Д. Ботов и др. // Вопросы аллотрансплантации в стоматологии : Тр. МОНИКИ.- М., 1979. т. 24. - С. 53-56.

24. Котова-Лапоминская Н.В. Применение стеклокристаллического остеоапластического материала «Биосит СР Элкор» в хирургической и ортопедической стоматологии: дис. . канд. мед. наук.- СПб., 2006. 143 с.

25. Котова Н.В., Лысенок Л.Н. Отдаленные результаты клинического применения биоситалла М31 в хирургической стоматологии. // V Международная конференция челюстно-лицевых хирургов и стоматологов. -СПб., 2000. - С. 74.

26. Курдюмов С.Г. Гидроксиапол и колапол: применение в стоматологической хирургической практике. // Военно-медицинский журнал. -1997.-№6.- С. 48-49.

27. Лапшин С.Д. Опыт применения гидроксиапатита в хирургической стоматологической практике. // Стоматология. 1999. - № 2. - С.59-61.

28. Леонтьев В.К. Биологически активные синтетические кальцийфосфатсодержащие материалы для стоматологии // Стоматология. -1996.-№5.- С. 4-12.

29. Максимовский Ю.М., Чиркова Т.Д., Воложин А.И. Новый отечественный препарат гидроксиапол при хирургическом лечении пародонтита // Зубоврачебный вестник.- 1993.- № 3.- С.19-22.

30. Махова Ф. М. Сравнительная эффективность применения отечественных остеопластических материалов "Биоматрикс" и "Остеоматрикс" в комплесном лечении пародонтита : дис. . канд. мед. наук.-М., 2008.- 135 с.

31. Механизм стимуляции ангиогенеза в ишемизированном миокарде с помощью стромальных клеток жировой ткани. / К.А. Рубина и др. // Кардиология.- 2010.- № 2.- С.58-66.

32. Никитин A.A., Басченко Ю.В. Коллапан для челюстно лицевой хирургии и стоматологии.// Медицинская газета.- 1996.- № 34- С. 35.

33. Новое поколение биокомпозиционных материалов для замещения дефектов костной ткани / С.Ю. Иванов, Л.И. Риллер, А.Ф.Бизяев и др. // Новое в стоматологии. -1999. № 5. - С. 47-50.

34. О влиянии гидроксиапатита на пролиферативную активность клеток костной ткани / В.П. Зуев, П.В. Сергеев, И.В. Мелихов и др. // Хим.-фарм. журнал. -1994. -№ 2. С. 10-14.

35. Панасюк А.Ф., Ларионов Е.В., Саващук Д.А., Кравец В.М. Биоматериалы для тканевой инженерии и хирургической стоматологии.- М.: «ООО Конектбиофарм», 2004.- 16 с.

36. Панасюк А.Ф., Ларионов Е.В. Хондроитинсульфаты и их роль в обменехондроцитов и межклеточного матрнкса хрящевой ткани. // Научно-практическая ревматология. 2000.- № 2.- С. 46-55.

37. Паникаровский В.В., Григорьян A.C., Фиалко H.H. Динамика заживления костных дефектов челюсти при введении в них аллогенного состава. // Стоматология. 1983. - № 3. - С. 7-9.

38. Панин A.M. Новое поколение биокомпозиционных остеопластических материалов ( разработка, лабораторно клиническое обоснование, клиническое внедрение ): автореф. дис. д-р. мед. наук.- 2004.- М., 48 с.

39. Первый опыт применения в клинике костной патологии биокомпозиционного материала «Остеоматрикс». / М.В. Лекишвили, A.B. Балберкин, М.Г. Васильев и др. // Вестник травматологии и ортопедии им. H.H. Приорова.- 2002.- № 4. С.80-83.

40. Применение новых препаратов гидроксиапола и колапола в клинике / В.К. Леонтьев, А.И. Воложин, Ю.Н. Андреев и др. // Стоматология. - 1995. -№5.-С. 69-71.

41. Применение препаратов калапол и гидроксиапол для заполнения полостей после удаления радикулярных кист. / B.C. Агапов, С.А Аснина А.И. Воложин и др. // Медицинская консультация. 1996. -№ 3.- С. 44-45.

42. Применение ОСТИМ-ЮО в комплексном лечении болезней парадонта / В.П. Зуев, Л.А. Дмитриева, H.A. Филатова и др. // Новое в стоматологии.-1996,-№2. С. 15-18.

43. Применение синтетического гидроксиапатита в стоматологии, травматологии и хирургии / А.И. Воложин, В.Б. Лиханов, С.Н. Гаража и др. // Биомедицинские технологии. 1996. - Выпуск 5. - С. 27-35.

44. Равелл П.А. Патология кости.- М.: Медицина, 1993.- 354с.

45. Рыжикова Р.З. Использование костной щебенки. // Сов. стоматология. -1935.-№5.- С. 40.

46. Савельев В.И., Войтович A.B., Калинин A.B. Внедрение стандартов в деятельность тканевых банков для травматологии и ортопедии.// Симпозиум по проблемам тканевых банков с международным участием.- СПб., 2001. С. 26.

47. Соловьев М.М., Ивасенко И.Н., Алехова Т.М. Влияние гидроксиапатита на заживление лунки зуба в эксперименте. // Стоматология. 1992. - № 6. - С. 8-10.

48. Сравнительное изучение 2-х способов введения гранул гидроксиапатита / A.C. Григорьян, В.В. Паникаровский, Т.К. Хамраев и др. // Новое в техническом обеспечении стоматологии: Матер, конф. стоматологов.-Екатеринбург, 1992. С. 18-21.

49. Сравнительное морфологическое изучение использование материалов «Остеоматрик» и «Биоматрикс» при пародонтологических вмешательствах в эксперименте / Д.А. Кострюков и др. // Пародонтология.- 2007.- № 2 (43).-С. 22-27.

50. Стеклокристаллические материалы для медицины. / О.П. Чудаков, А.З. Бармуцкая, С.Д. Беззубик и др. // V Международная конференция челюстно-лицевых хирургов и стоматологов. СПб., 2000. - С. 150.

51. Стромальные клетки жировой ткани пластический тип клеток, обладающих высоким терапевтическим потенциалом. / Д.О. Трактуев и др. // Цитология.- 2006- т. 4, № 2.- С.83-94.

52. Топольницкий О.З. Обоснование выбора вида и размера аллотрансплататов при костной пластики нижней челюсти у детей: Автореф. дис. .канд. мед. наук.- М., 1994.- 26 с.

53. Франке Ю., Рунге Г. Остеопороз.- М.: Медицина, 1995.- 304с.

54. Фриденштейн А.Я., Лалыкина К.С. Индукция костной ткани и остеогенные клетки-предшественники.- М.: Медицина, 1973.-157с.

55. Хамраев Т.К. Применение гранулята керамики гидроксиапатита для замещения дефектов костной ткани челюсти : Автореф. дис. канд. мед. наук. -М., 1995.-23 с.

56. Хем А., Кормак Д. Гистология. Т. 1. М.: Мир, 1983.- С.241-262.

57. Хем А., Кормак Д. Гистология. Т. 2. М.: Мир, 1983.- С.106-126.

58. Хем А., Кормак Д. Гистология. Т. 3. Ч. III.- М.: Мир, 1983.- С.19-160.

59. Хирургическое лечение хронических очагов воспаления в тканях периодонта. / С.А. Аснина, B.C. Агапов, А.И Воложин и др. // V Международная конференция челюстно-лицевых хирургов.- СПб. 2000. -С. 22-23.

60. Штраубе Г.И. Результаты применения пористых углеродных имплантатов при лечении околокорневых кист. // V Международная конференция челюстно-лицевых хирургов и стоматологов.- СПб., 2000. С. 157.

61. Albrektsson Т. Repair of bone grafts // Scand. J.Plast. Reconstr. Surg.- 1980.-Vol.14.-P. 1-12.

62. Albrektsson T. The Healing of autologous bone grafts after varying degrees of surgical trauma // J. Bone Joint Surg.- 1980.- Vol.62-B.- P. 403-410.

63. Bays R.A. Current advances in oral and maxillofacial surgery. In. W. Irby, D. Shelton: Current concepts in bone grafting.- Vol.4.- Chaps.4.- Toronto, St.Louis: C.V. Morsby Co., 1983.- P. 109-124.

64. Block M.S., Kent J.V. Correction of vertical orbital dystopia with a hydroxylapatite orbital floor graft // J. Oral. Maxillofac. Surg.- 1988.- V.46.- N 5.-P. 420-425.

65. Bourgeois В., Laboux O., Obabia L. et al. Calcium-deficient apatite: a first in vivo study concerning bone ingrowth. // J Biomed Mater Res 2003.- Vol.65.-P. 402-408.

66. Branemark P.-I. et al. Repair of defects in mandible// Scand. J. Plast. Reconstr. Surg.- 1970.-Vol.4.-P. 100-108.

67. Branemark P.-I., Zarb G.A.,Albrektsson T. Tissue Integrated Prostheses. Osseointegration in clinical dentistry.- Chicago.- Quintessence Publ. Co., 1985.- P. 129-140

68. Brinks J., Brinks G. et al. Two year evaluation of a Kneadable hydroxylapatite preparation for the preservation of human maxillomandibular bone //J. Oral. Implantol.- 1987.- V.13.- №2.- P. 186-195.

69. Bukwalter J., Glimcher M., Cooper R., Recker R. Bone Biology. Part I // J.Bone Joint Surg.- 1995.- Vol.77-A.- P. 1256-1272.

70. Bukwalter J., Glimcher M., Cooper R., Recker R. Bone Biology. Part II // J.Bone Joint Surg.- 1995.- Vol.77-A.- P. 1276-1283.

71. Caplan A. Bone development and repain // Bioessays.- 1987.- Vol. 6.- P. 171175.

72. Chiapasco M., R.Drusati R., Ronchi P. // Clin Oral Implants Reg. -2007.-Vol.18, №1.- P. 74-85.

73. Conejero J. A., Lee J.R., Parrett B.M. et al. Repair of palatal bone defects using osteogenically differentiated fat derived stem cells // Plast Reconstr Surg.2006.- Vol. 117.- № 3.- P. 857-863.

74. Courpron P. Bone tissue mechanism underlying osteoporoses // Ortop. Clin. North. Amer.- 1981.- Vol. 12.- P.513-545.

75. Cowan C.M., Aalami O.O., Shi Y.Y, et al. Bone morphogenetic protein 2 and retinoic fcid accelerate in vivo bone formation, osteoclast recruitment, and bone turnover. // Tissue Eng.- 2005,- Vol. 11.- P. 645-658.

76. Cowan C.M., Shi Y.Y., Aalami O.O. et al. Adipose-derived adult stromal cells heal critical-size mouse calvarial defects. // Nat Biotechnol.- 2004.- Vol. 22.-P. 560-567.

77. Davies J.et al. Early extracellular matrix synthesis. In.: Davies J.(ed.). The bone-Biomaterials Interface.- Toronto: University of Toronto Press, 1991.- P .214228.

78. Davies J., Chernecky R., Lowenberg B., Shiga A. Deposition and resorption of calcified matrix in vitro by rat bone marrow cell // Cell Materials.- 1991.- Vol. 1.- P. 3-15.

79. Degano I.R., Vilalta M., Bago J. R.et al. Bioluminescence imaging of calvarial bone repair using bone marrow and adipose tissue-derived mesenchymal stem cells. // Biomaterials.- 2008.- Vol. 29.- № 4.- P. 427-437.

80. Dicker A., Blanc K., Astrom G. et al. Functional studies of mesenchymal stem cells derived from adult human adipose tissue. // Exp Cell Res.- 2005.- Vol. 308.- P. 283-290.

81. Diefenderfer D.L., Osyczka A.V., Reilly G.C., Leboy P.S., BMP responsiveness in human mesenchymal stem cells. // Connect Tissue Res.- 2003.-Vol. 44,-P. 305-311.

82. De Kok I.J., Peter S.J., Archambauli M. et al. Investigation of allogeneic mesenchymal stem cell- based alveolar bone formation: preliminary findings.// Clin Oral Implants Res.- 2003.- Vol. 14,- P. 481-489.

83. Donath K., Rother M.D., Herman B. Mobile and immobile hydroxyapatite integration and resorption and its influence on bone // J. Oral Implant. 1987. -Vol.13. -№ l.-P. 120-127.

84. Dudas J.R., Marra K.G., Cooper G.M. et al. The osteogenic potential of adipose-derived stem cells for the repair of rabbit calvarial defects.// Ann Plast Surg.- 2006.- Vol. 56.- P. 543-548.

85. Einchorn T. Enhancement of fracture healing // J. Bone Joint Surg.- 1995.-Vol. 77-A.- P. 940-948.

86. Einchorn T.A. Clinical application of recombinant human BMPs:early experience and future development. // J. Bone Joint Surg Am.- 2003.- Vol. 85.- P. 82-88.

87. Eriksson R.A., Albrektsson T., Magnusson B. Assesment of bone viability after heat trauma: A histological, histochemical and vtal microscopic stady in the rabbit // Scand. J. Plast. Reconstr. Surg.- 1984.- Vol. 18.- P. 261-268.

88. Fang B., Song Y., Lin Q. et ai.Human adipose tissue-derived mesenchymal stromal cells as salvage therapy for treatment of severe refractory acute graft-vs.-host disease in two children // Pediatr Transplant.- 2007.- Vol. 11,- № 7.- P. 814-817.

89. Fang B., Song Y.,Liao L. et al. Favorable Response to Human Adipose Tissue-Derived Mesenchymal Stem Cells in Steroid-Refractory Acute Graft-Versus-Host Disease. // Transplantation Proceedings.- 2007.- Vol. 39.- P. 33583362.

90. Fang B., Song Y., Zhao R.C. et al. Using Human Adipose Tissue-Derived M esenchymal Stem Cell as Salvage Therapy for Hepatic Graft-Versus-Host Disease Resembling Acute Hepatitis.// Transplantation Proceedings. .- 2007.-Vol. 39,- P. 1710-1713.

91. Fukada E., Yasuda I. On the piezo-electric effect of bone //J. Phys. Soc. Jpn.-1957.- Vol.10.-P. 1158-1169.

92. Gronthos S., Franklin S., Leddy H.A. et al. Surface protein characterization of human adipose tissue-derived stromal cells.// J. Cell Physiol.- 2001.- Vol. 189.- P. 54-63.

93. Hattori H., Masuoka K., Sato M. et al.Bone formation using human adipose tissue-derived stromal cells and a biodegradable scaffold // J. Biomed Mater Res B Appl Biomater.- 2006.- Vol. 76.- P. 230-239.

94. Hattori H., Sato M., Masuoka K. et al. Osteogenic potential of human adipose tissue-derived stromal cells as alternative stem cell source. // Cells Tissues Organs.- 2004.- Vol. 178.- P. 2-12.

95. Hibi H., Yamada Y., Ueda M., Endo Y. Alveolar cleft osteoplasty using tissue-engineered osteogenic materiallnt.// J.Oral Maxilofac Surg. 2006.- Vol. 35.- P. 551-555.

96. Hicok K.C., Du Laney T.V., zhou Y.S. et al. Human adipose-derived adult stem cells produce osteoid in vivo.// Tissue Eng. 2004.- Vol. 10.- № 3-4.- P. 371380.

97. Hong L.,Tabata Y., Miyamoto S. et al. Bone regeneration at rabbit skuil defe cts treated with transforming growth factor-beta I incorporated hyd rogels with different levels of biodegradability.// J.Neurosurg.- 2006.- Vol. 92,- P. 315-325.

98. Hoogduijn M., Gojup E., Genever P.G. Comparative characterization of hair follicle dermal stem cells and bone marrow mesenchymal stem cells. // Stem. Cell. Dev.- 2006,- Vol. 15.- № 1.- P. 49-60.

99. Huang J.I., Beanes S.R.,Zhu M., Lorens H.P., Hedrick M.H., Benhaim P.//Rat extramedullar adipose tissue as a source of osteochondrogenic progenitor cells. // Plast. Reconstr. Surg.- 2002,- Vol. 109,- P. 1033.

100. Iatrou J.A., Legakis N. et. al. Anaerobic bacteria in jaw cysts // Brin. J. Oral. Maxillofac. Surg.- 1988.- V. 26,- № 1.- P. 62-69.

101. Jaworski Z. Physiology and pathology of bone remodeling // Orthop. Clin. North. Amer.- 1981.- Vol. 12.- P. 485-512.

102. Jiang Y., Vaessen B., Lenvik T., Blackstad M.,Reyes M., Verfaillie C.M. Multipotent progenitor cells can be isolated from postnatal murine bone marrow, muscle, and brain // Exp. Hematol.- Vol. 30.- P. 896.

103. Jensen O.T. Combined hydroxylapatite augmentabion and lip-switch uestibuloplasty in the mandible // Oral. Surg.- 1985.- V. 60.- № 4. p. 349-355.

104. Kale S., Biermann S., Edwards C. et al. Three-dimensional cellular development is essential for ex vivo formation of human bone.// Nat Biotechnol.-2000.- Vol. 18.-P. 954-958.

105. Lanyon L., Rub C. Static vs dynamic loads as an influence on bone remodeling // J.Biomech.- 1984,- Vol. 17.- P. 897-905.

106. Lee R.H., Kim B.C., Choi I.S. et al. Characterization and Expression Analysis of Mesenchymal Stem Cells from Human Bone Marrow and Adipose Tissue.// Cell Physiol Biochem.- 2004.- Vol. 14.- P. 311-324.

107. Leong D.T., Abraham M.C., S.N.Rath S.N.et al. Investigating the effects of preinduction on human adipose-derived precursor cells in an athymic rat model. // Differentiation.- 2006.- Vol. 74.- P.519-529.

108. Leong D.T., Khor W.M., Chew F.T.et al. Characterization of osteogenically induced adipose tissue-derived precursor cells in 2-dimensional and 3-dimensional environments.// Cells Tissues Organs.- 2006.- Vol. 182.- P. 1-11.

109. Lendeskel S., Jodicke A., Christophis P. et al.// J. Craniomaxillofac Surg.-2004,- Vol. 32.- № 6,- P. 370-373.

110. Li X., Jin L., Balian G. et al // Biomaterials.- 2006.- Vol. 27.- № 11.- p. 2426-2433.

111. Lynch S., Genco R.,Marx R. Tissue Engineering. Application in Maxillofacial Surgery and Periodontics.- Chicago: Quintessence Publ. Co. Inc., 1999.- 285 p.

112. Liu H., Mao J., Yao K., Yang G., Cui L., Cao Y. A study on a chitosan-gelatin-hyaluronic acid scaffold as artificial skin in vitor and its tissue engineering applications.// J.Biomater. Sci. Polym.- 2004.- Vol. 15.- P. 25-40.

113. Lin G., Garcia M., Ning H., Banie L., Guo Y.L., Lue T.F., Lin C.S. Defining stem and progenitor cells within adipose tissue.// Stem Cells Dev. 2008- Vol.1 7.-P. 1053-1063.

114. Llames S.G., Del Rio M., Larcher F., Garcia M., Escamez M.J. et al. Human plasma as a dermal sccaffold for the generation of a completely autologous bioengineere skin.// Transplantaion.- 2004.- Vol. 77.- P. 350-355.

115. Mankani M.H., Kuznetsov S.A., Wolfe R.M. et al. In vivo bone formation by human bone marrow stromal cells: reconstruction of the mouse calvarium and mandible.// Stem Cells.- 2006.- Vol. 24,- P. 2140-2149.

116. Marx R.E. Clinical applications of bone biology to mandibular and maxillary reconstruction // Clin. Plast. Surg.- 1994.- Vol. 21.- P. 377-392.

117. Martin-Rendon E., Hale S.J., Ryan D. et al. Transcriptional profiling of human cord blood CD 133+ and cultured bone marrow mesenchymal stem cells in response to hypoxia. // Stem Cells.- 2007,- Vol. 25.- P. 1003-1012.

118. Mazlyzam A.L., Aminuddin B.S., Lokman B.S., Isa M.R., Fuzina H., Fauziah O., et al. Quantity evaluation analysis of bioengineered human skin.// Med. J.Malaysia.- 2004.- Vol. 59-B.- P. 39-40.

119. Mazlyzam A.L., Aminuddin B.S., Lokman B.S., Ruszymah B.H.I. Human serum is an advantageous supplement for human dermal fibroblast expansion: clinical implications for tissue engineering of skin. // Arch. Med. Res.- 2008.- Vol. 39,- P. 743-752.

120. Mcintosh K., Zvonik S., Garrett S.et al. The immunogenicity of human adipose derived cells ¡temporal changes in vitro.// Stem Cells.- 2006.- Vol. 24.- P. 1245-1253/

121. Meijers W.G., Jansen H. W. P. Porous Hydroxylapatite as bone substitute in the subchondral layer // Acta Orthopaed. Scand.- 1984.- V. 8.- № 6.- P. 662-665.

122. Mercier P. Ridge reconstruction with hydroxylapatite. Part 1. Anatomy of the residual ridge // J. Oral. Surg.- 1988.- V.65- № 5.- P. 505-510.

123. Nombela-Arrieta C., Ritz, J., Silberstein, L.E. The elusive nature and function of mesenchymal stem cells. //Nat Rev Mol Cell Biol.- 2011.- V.l 2.- P. 126-31.

124. Ohnishi S., Yasuda T., Kitamura S. et al. Effect of hypoxia on gene expression of bone marrow-derived mesenchymal stem cells and mononuclear cells. // Stem cells.- 2007.- Vol. 25.- P. 1166-1177.

125. Okumura A., Goto M., Goto T. et al. Substrate affects the initial attachment and subsequent behavior of human osteoblastic cell (Saos-2).// Biomaterials.-2001,- V. 22.-P. 2263-2271.

126. Ozerdem U., Grako K.A., Dahlin-Huppe K., Monosov E., Stallcup W.B. NG2 proteoglycan is expressed exclusively by mural cells during vascular morphogenesis // Dev. Dyn.- 2001,- V. 222.- P. 218-227.

127. Rah D.K. Art of replacing Craniofacial bone defects. // J.Yonsi Med. 2000-Vol. 41.-P. 756-765.

128. Rehman J., Traktuev D., Li J. et al. Secretion of angiogenic and antiapoptotic factors by human adipose stromal cells. // Circulation.- 2004.- Vol. 109.- P. 12921298.

129. Rey C., Hina A., Tofighi A. et al. Maturation of poorly crystalline apatites: Chemical and structurae aspects in vivo and in'vitro // Cells Mater.- 1995. Vol. 5. - № 4.- P. 345-356.

130. Rodan G. Introduction to bone biology // Bone.- 1992.- Vol. 13 (suppl.l).- P. 3-6.

131. Rhinelander F. The normal circulation of bone and its response to surgical intervention // J. Biomed. Mater. Res.- 1974.- Vol. 8.- P. 87-95.

132. Rudelt H.G. Das Keimspektrum der infezierten Zyste // Dtsch. Zahn.- 1985.-Bd. 40.-6.- S. 590-591.

133. Rosa A.L., Belot M.M., Van Noort R. et al. R. Surface topography of hydroxyl apatite affects ROS 17/2.8 cells response. // Pesqui Odontol Bras 2002.-Vol. 16- P. 209-215.

134. Sadat S., Gehmert S., Song Y.-H. et al. The cardioprotective effect of mesenchymal stem cells is mediated by IGF-I and VEGF.// Biochem Biophys Res Com.- 2007.- P. 363-674.

135. Stenderup K., Justesen J., Clausen C., Kassem M. Aging is associated with decreased maximal life span and accelerated senescence of bone marrow stromal cells.// Bone.- 2003.- Vol.33-6.- P. 919-926.

136. Stosich M.S., Mao J.J. Adipose tissue engineering from human adult stem cells: clinical implications in plastic and reconstructive surgery // Plast Reconstr Surg.- 2007.- Jan.- Vol. 26.- №7,- P. 8-421.

137. Tuan R.S., Boland G., Tuli R. Adalt mesenchymal stem cells and cell-based tissue engineering. // Arthritis Res Ther.- 2003.- Vol. 5.- P. 32.

138. Urist M.R. et al. Inductive substrates for bone formation // Clin. Orthop.-1968,- Vol. 59.- P. 59-96.

139. Urist M.R. Bone morphogenic protein: The molecularization of the skeletal system // J.Bone Mineral. Res.- 1997.- Vol. 12.- P. 343-352.

140. Urist M.R., Strates B.S. Bone morphogenic protein // J. Dent. Res.- 1971.-Vol. 50.- P. 1392-1394.

141. Van Harmelen V., Rohrig K., Hauner H.Comparison of proliferation and differentiation capacity of human adipocyte precursor cells from the omental and subcutaneous adipose tissue depot of obese subjects. // Metabolism.- 2004.- Vol. 53-5.- P. 632-637.

142. Weinzierl K., Hemprich A., Frerich B.Bone engineering with adipose tissue derived stromal cells. // J. Craniomaxillofac Surg.- 2006.- Vol. 34.- № 8.- P. 466471.

143. Wijelath ES, Rahman S, Murray J, Patel Y, Savidge G, Sobel M Fibronectin promotes VEGF-induced CD34 cell differentiation into endothelial cells. // J Vase Surg.- 2004.- Vol. 39.- P. 655.

144. Yamashita J., Itoh H., Hiroshima M., Nishikawa S., Yurugi T., Naito M.,Nakao K. Flkl-positive cells derived from embryonic stem cells serve as vascular progenitors. // Nature.- 2000.- Vol. 92.- P. 408.

145. Yuan H., Van Den Doel M., Li S.et al.A comparison of the osteoinductive potential of two calcium phosphate ceramics implanted intramuscularly in goats. // J.Mater Sci Mater Med.- 2002.- Vol.13.- P. 1271-1275.

146. Zhao Y, Glesne D, Huberman E A human peripheral blood monocyte-derived subset acts as pluripotent stem cells. // Proc Natl Acad Sci U S A.- 2003.- Vol. 100,- P. 2426.

147. Zhou S., Greenberger J.S., Epperly M.W.et al. Age-retated intrinsic changes in humfn bone-marrow-derived mesenchymal stem cells and their differentiation to osteoblasts. //Aging Cell.- 2008.- Vol. 7-3.- P. 335-343.

148. Zuk P.A., Zhu M., Ashjian P., De Ugarte D.A., Huang J.I., Mizuno H., Alfonso Z.C., Fraser J.K., Benhaim P., Hedrick M.H. Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells. // Mol Biol Cell.- 2002.- Vol. 13- P. 4279.