Поиск и изучение мутаций в гене BRCA1 у больных семейными формами рака молочной железы в Санкт-Петербурге тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Грудинина, Наталья Андреевна

• Грудинина, Наталья Андреевна
• кандидат биологических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Грудинина, Наталья Андреевна

1. ВВЕДЕНИЕ

1.1. Актуальность проблемы

1.2. Научная новизна

1.3. Цель работы

1.4. Задачи

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. Строение молочной железы

2.2. Формы рака молочной железы. КлассификацияИ

2.3. Статистика заболеваемости раком молочной железы

2.4. Возможные механизмы возникновения рака при мутациях в генах опухолевых супрессоров1.

2.5. Тканеспецифичность проявления мутаций в гене ВЯСА

2.6. Заболевания, связанные с мутациями в генах ВЯСА1 и ВЯСА

2.7. Наследственная предрасположенность к раку молочной железы

2.8. Структура гена и белка В11СА

2.9. Роль ВЯСА1 в регуляции транскрипции

2.9.1. С-Мус и ВЯСА

2.9.2 СйР и ВЯСА

2.9.3 ЯНА и ВЯСА

2.9.4р53 и ВЯСА

2.10. Роль ВЯСА1 в репарации ДНК

2.11. Роль ВЯСА1 в росте и дифференцировке клеток

2.12. Мутации гена ВЯСА

2.13. Спектр мутаций в гене ВЯСА1 в разных популяциях

3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

3.1. Пациенты

3.2. Выделение ДНК из свежей и замороженной крови по методу Кюнкеля 3.2.1 Выделение ДНК из свежей крови

3.2.2 Выделение ДНК из замороженной крови

3.3. Электрофорез ДНК в агарозном геле

3.4. Полимеразная цепная реакция

3.5. Электрофорез ДНК в полиакриламидном геле

3.6. Электрофорез в ПААГ в денатурирующих условиях

3.7. Гетеродуплексный анализ

3.8. SSCP-анализ

3.9. Окрашивание образцов ДНК6J

3.9.1 Окрашивание бромистым этидием

3.9.2 Окрашивание нитратом серебра

3.10. Клонирование

3.10.1 Лигирование

3.10.2. Трансформация E.coli

3.10.3. Идентификациярекомбинантных клонов путем амплификации клонированных последовательностей

3.11. Секвенирование ДНК

3.12. Статистические методы

4. РЕЗУЛЬТАТЫ

4.1. Мутация 2963del 10 (c.2963-2972del 10)

4.2. Мутация 5382insC (c.5382-5383insC)

4.3. Мутация 3819del5 (c.l234-1235del5)

4.4. Мутация 3875del4 (c.l252-1253del4)

4.5. Мутация 2274insA (c.720insA)

4.6. Мутация R1203X (c.3726C>T)НИ

4.7. Мутация E1250K (c.3867G>A)

4.8. Полиморфизм S694S (c.2201C>T)

4.9. Полиморфизм L771L (с.2430Т>С)

4.10. Полиморфизм E1038G (с. 3232A>G)П

5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

5.1. ВведениеЦ

5.2. Мутация 5382тзС - одна из наиболее распространенных в мире

5.3. Впервые обнаруженная мутация 2963с1е

5.4. Роль мутаций 3819с1е15 и 3875с1е14 в развитии предрасположенности к заболеванию

5.5. Редкая мутация 2274тзА

5.6. Нонсенс-мутация Ш203Х

5.7. Миссенс-мутация Е1250К- мутация или полиморфизм?

5.8. Полиморфизмы Е10380, Б6948 и Ь771Ь

5.9. Поиск мутаций в 5 экзоне гена ВЯСА

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Поиск и изучение мутаций в гене BRCA1 у больных семейными формами рака молочной железы в Санкт-Петербурге»

1.1. Актуальность проблемы

Достижения молекулярной генетики последних десятилетий привели к идентификации десятков тысяч генов человека. Это позволяет уже в настоящее время проводить молекулярную диагностику сотен моногенных заболеваний и определять генетические факторы риска развития распространенных болезней человека. Появился новый раздел медицины, получивший название молекулярной медицины, основанный на точном знании молекулярных механизмов возникновения наследственных заболеваний (Баранов и др., 2000). Определенные успехи достигнуты и в изучении механизмов патогенеза так называемых мультифакториальных (Горбунова и др., 1997) заболеваний, в этиологию которых наряду с факторами внешней среды значительный вклад вносят генетические составляющие.

Рак принадлежит к группе мультифакториальных заболеваний, хотя в некоторых случаях предрасположенность к раку наследуется по моногенному типу. Именно так наследуется предрасположенность к семейным формам рака молочной железы, вызванным мутациями в генах ВЯСА! и ВЯСА2.

Рак молочной железы является одной из наиболее часто встречающихся форм онкопатологии. В развитых странах мира около 10% женщин заболевают раком молочной железы в течение жизни. Изучение семей с несколькими случаями рака молочной железы в анамнезе позволило изолировать специфические гены предрасположенности к этому заболеванию, получившие название генов ВЯСА1 (1УП1а е1 а1.,1994) и ВЯСА2 (\Vooster а1.,1995) (ВЯеаз1 САпсег). При мутации в любом из этих генов высока вероятность развития рака молочной железы, а при мутациях в гене

ВЯСА1 возрастает вероятность развития рака яичника. Носители мутаций в этих генах имеют риск развития заболевания в течение жизни, приближающийся к 80%.

Интенсивные исследования вариабельности генов ВЯСА-семейства проводятся во всем мире. Первые популяционные исследования мутаций в гене ВЯСА1 были проведены в Канаде в 1994 году (81тагс1 а1., 1994). К настоящему времени известны около 1200 мутаций и полиморфных вариантов гена ВЯСА1 (В1С), причем набор мутаций и степень распространенности каждой из них характерен для каждой популяции и этнической группы. В связи с этим невозможно использовать данные, полученные при изучении мутаций и полиморфизмов генов ВЯСА в одних странах, для проведения ранней ДНК-диагностики предрасположенности к раку молочной железы в других. Именно этот вид диагностики позволяет выявить контингент женщин с высоким риском развития данного заболевания до возникновения клинических его проявлений. Предыдущие исследования российской популяции (вауШег а1., 1997; Мандельштам и др., 2001; ТегеБсЬепко е1 а!., 2002, Карпухин А.В. и др., 2002) показали как наличие распространенной в Европе мутации (5382 тэС), так и существенные различия спектра мутаций в гене ВЯСА1 в различных регионах (ОауШег е1 а1., 1997; Карпухин А.В. и др., 2002; ТегеБсЬепко е! а1., 2002).

Эффективность лечения рака молочной железы во многом зависит от своевременной диагностики. ДНК-диагностика позволяет выявить предрасположенность к раку молочной железы и осуществить постановку на учет к онкологу еще до возникновения клинических проявлений заболевания. В связи с постоянным увеличением заболеваемости раком молочной железы проблема ранней диагностики приобретает чрезвычайную актуальность.

1.2. Научная новизна

У больных семейными формами рака молочной железы в Санкт-Петербурге идентифицированы семь мутаций в гене ВЯСА1: 5382тБС, 2963<3е110, 3819с1е15, 3875с1е14, 2274тзА, Я1203Х и Е1250К, причем мутация 2963с1е110 является новой. Из числа выявленных пять мутаций (3875с1е14, 2274тзА, 2963с1е110, Ш203Х и Е1250К) ранее в Российской Федерации обнаружены не были. Впервые в Санкт-Петербурге обнаружен ряд сцепленных друг с другом полиморфизмов (86948, Ь771Ь и Е10380), ранее описанных во многих странах мира.

В результате работы была охарактеризована вариабельность гена ВЯСА1 у больных семейными формами рака молочной железы в Санкт-Петербурге. Разработанные для обнаруженных нами мутаций методы экспресс-диагностики могут быть использованы для генетического консультирования в семьях больных семейными формами рака молочной железы, а также для ранней диагностики предрасположенности к этому заболеванию.

1.3. Цель работы

Основной целью работы было изучение спектра мутаций гена ВЯСА1 у больных семейными формами рака молочной железы в Санкт-Петербурге.

1.4. Задачи:

1. Создать коллекцию образцов ДНК пациентов с семейными формами рака молочной железы;

2. Осуществить поиск мутаций в 5, 11 и 20 экзоне гена ВИ.СА1 этих пациентов методами гетеродуплексного анализа и анализа конформационного полиморфизма однонитевых фрагментов ДНК (88СР-анализа);

3. Идентифицировать обнаруженные мутации методом секвенирования ДНК;

4. Разработать быстрые методы идентификации обнаруженных мутаций;

5. Провести анализ ДНК родственников пациентов, у которых были обнаружены мутации, с целью проведения генетического консультирования в семьях больных.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Грудинина, Наталья Андреевна

6. выводы

1. В коллекции из 43 образцов геномной ДНК больных семейными формами рака молочной железы в Санкт-Петербурге идентифицированы семь мутаций в гене ВЯСА1: 5382твС, 2963с1е110, 3819с1е15, 3875<М4, 2274тБА, Я1203Х и Е1250К. Мутация 2963с1е110 является новой, мутация 2274шбА впервые обнаружена в Европе, а мутации 3875с1е14, Я1203Х и Е1250К впервые обнаружены в России. Таким образом была охарактеризована вариабельность гена ВЯСА1 у больных семейными формами рака молочной железы в Санкт-Петербурге.

2. Показано, что для больных Санкт-Петербурга, имеющих семейную историю заболевания рака молочной железы, не характерно наличие мутаций в 5 экзоне гена ВЯСА1.

3. На основе метода гетеродуплексного анализа разработана методика для экспресс-тестирования на наличие новой мутации 2963с1е110 (с.2963-2972с1е110) в последовательности гена ДЯС47.

4. Анализ ДНК родственников пациентов, у которых были обнаружены мутации, позволил провести генетическое консультирование в семьях больных семейными формами рака молочной железы и яичника.

5. Впервые в Санкт-Петербурге обнаружен ряд сцепленных друг с другом полиморфизмов (86948, Ь771Ь и Е10380), ранее описанных во многих популяциях мира.

5.10. Заключение

При исследовании 5, 20 и 11 экзонов гена ВЯСА1 ДНК 43 пациентов с семейными формами рака молочной железы мы обнаружили 11 различных вариантов нуклеотидной последовательности, включая нормальную последовательность (вепВапк, и 14680). Семь из этих вариантов могут быть охарактеризованы как несущие мутации, ведущие к предрасположенности к раку молочной железы (Табл. 5.4). Три других варианта являются ранее описанными в мире полиморфизмами. Впервые в России обнаружены 5 мутаций, из них одна (2963с1е110) является новой (Табл. 5.5).

Две найденные нами у больных Санкт-Петербурга мутации (5382шзС и 3875с1е14) встречаются у больных других регионов Российской Федерации. В некоторых случаях вычисленные нами частоты встречаемости данных мутаций существенно отличаются от описанных в других регионах частот, что может быть связано с различиями выборок, анализированных авторами. Так, отличие частот встречаемости мутации 5382тБС скорее всего связано с разными критериями отбора пациентов для исследования. Например, в группе больных раком яичника, исследованных вауШег и др. в 1997, критерием отбора служило наличие у пробанда с раком яичника по крайней мере двух родственников первой степени родства с эпителиальной формой рака яичника. Группа, исследованная Карпухиным с соавторами (Карпухин и др., 2002), состояла из больных с семейными формами рака молочной железы и яичника, причем в среднем имелось 3-4 родственника 1-Н степени родства, страдающих данными заболеваниями. Частоты мутации 53821пбС в этих группах составили 47% и 33%, соответственно (Табл. 5.5). Эти данные по встречаемости мутации 5382тзС в Московском регионе наиболее близки к частотам встречаемости этой мутации в Польше (27%) (СогбИ е1 а1., 2000) и Латвии (22 %) (Сэокау е1 а1., 1999), где, видимо, использовались сходные критерии отбора пациентов. В то же время при отборе пациентов с семейными формами рака молочной железы группами исследователей из

Санкт-Петербурга и Томска (Tereshenko et al., 2002) использовались критерии, отличные от предыдущих групп исследователей, и частота мутации 5382insC составила 8% и 12%, соответственно (Табл. 5.5). Мы предполагаем, что наблюдаемое существенное различие частот встречаемости мутации 5382insC в различных регионах может быть связана как с фактическим их отличием, так и с используемыми исследователями критериями отбора. Наше предположение подтверждается, например, при сопоставлении данных относительно распространенности этой мутации в северо-восточной Польше, полученных двумя группами исследователей. Так, частота мутации 5382insC в группе из 25 больных семейными формами рака молочной железы и яичника (van der Looij et al., 2000) составила 4% в то время как в другой группе из 60 больных того же региона (Perkowska et al., 2003) составляет 10%. Проблема влияния критериев отбора больных для исследования на частоту обнаружения мутаций в гене BRCA1 подробнее обсуждается Gayther (Gayther et al., 1999).

Наблюдаемая в данном исследовании сцепленность обнаруженных полиморфизмов согласуется с данными, полученными другими исследователями при изучении вариабельности гена BRCA1 в других популяциях (Friedman et al., 1994; Durocher et al., 1996; Карпухин и др., 2002). Хотя нам не удалось показать связь какого-либо гаплотипа с обнаруженными мутациями даже в пределах одной семьи, данные о полиморфных вариантах гена представляют определенный научный интерес, так как в ряде случаев являются удобными генетическими маркерами.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Грудинина, Наталья Андреевна, 2004 год

1. Anderson S.F., Schlegel B.P., Nakajima T., Wolpin E.S., Parvin J.D. BRCA1 protein is linked to the RNA polymerase II holoenzyme complex via RNA helicase. A. Nat. Genet. (1998) 19:254-256.

2. Arason A., Barkardottir R.B., Egilsson V. Linkage analysis of chromosome 17q markers and breast-ovarian cancer in Icelandic families, and possible relationship to prostatic cancer. Am. J. Hum. Genet. (1993) 52: 711-717.

3. Backe J., Hofferbert S., Skawran B., et al: Frequency of BRCA1 mutation 5382insC in German breast cancer patients. Gynecol. Oncol. (1999) 72:402406.

4. Balci A., Huusko P., Paakkonen K., Launonen V., Uner A., Ekmekci A., Winqvist R. Mutation analysis of BRCA1 and BRCA2 in Turkish cancer families: a novel mutation BRCA2 3414del4 found in male breast cancer. Eur. J. Cancer (1999) 35(5):707-10.

5. Bell G.I., Karam J.H., Rutter W.J. Polymorphic DNA region adjacent to the 5'-end of the human insulin gene. Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1981) 78:57595763.

6. Beller U, Halle D, Catane R et al. 1997. High frequency of BRCA1 and BRCA2 germline mutations in Ashkenazi Jewish ovarian cancer patients, regardless of family history. Gynecol. Oncol. 67(2):123-126.

7. BIC (Breast Cancer Informational Core): http://www.nhgri.nih.gov/Intramural research/Lab transfer/Bic/

8. Bork P., Hofmann K., Bucher P., Neuwald A.F., Altschul S.F., Koonin E.V. A superfamily of conserved domains in DNA damage-responsive cell cycle checkpoint proteins. FASEB J. (1997) 11:68-76.

9. Callebaut I., Mornon J.P. From BRCA1 to RAP1: a widespread BRCT module closely associated with DNA repair. FEES Lett. (1997) 400:25-30.

10. Chapman M.S., Verma I.M. Transcriptional activation by BRCA1. Nature (1996) 382:678-679.

11. Chen C.F., Li S., Chen Y., Chen P.L., Sharp Z.D., Lee W.H. The nuclear localization sequences of the BRCA1 protein interact with the importin-a subunit of the nuclear transport signal receptor. J. Biol. Chem. (1996(a)) 271:32863-32868.

12. Chen Y., Farmer A.A., Chen C.F., Jones D.C., Chen P.L., Lee W.H. BRCA1 is a 220 kDa nuclear phosphoprotein that is expressed and phosphorylated in a cell cycle dependent manner. Cancer Res. (1996(6)) 56:3168-3172.

13. Chen Y., Lee W.-H., Chew H.K. Emerging roles of BRCA1 in transcriptional regulation and DNA repair. J. of Cellular Physiology (1999) 181:385-392.

14. Claes K., Machackova E., De Vos M., et. al. Mutation analysis of the BRCA1 and BRCA2 genes in the Belgian patient population and identification of a Belgian founder mutation BRCA1 IVS5 + 3A > G. Dis. Markers (1999) 15:69-73.

15. Claus E.B.; Risch N.; Thompson W.D. Genetic analysis of breast cancer in the cancer and steroid hormone study. Am. J. Hum. Genet. (1991) 48: 232-242.

16. Claus E.B., Schildkraut J.M., Thompson W.D., Risch NJ. The genetic attributable risk of breast and ovarian cancer. Cancer (1996) 77:2318-2324.

17. Csokay B., Tihomirova L., Stengrevics A., Sinicka O., Olah E. Strong founder effects in BRCA1 mutation carrier breast cancer patients from Latvia. Human Mutation:Mutation in Brief #2585 (1999) Online.

18. Durocher F., Tonin P., Shattuck-Eidens D., Skolnick M., Narod S.A., Simard J. Mutation analysis of the BRCA1 gene in 23 families with cases of cancer of the breast, ovary, and multiple other sites. J. Med. Genet. (1996) 33(10):814-819.

19. Easton D.F., Bishop D.T., Ford D., Crockford G.P. Genetic linkage analysis in familial breast and ovarion cancer: results from 214 families. The Breast Cancer Linkage Consortium. Am. J. Hum. Genet. (1993) 52:678-701.

20. Fan S., Wang J., Yuan R., Ma Y., Meng Q., Erdos M.R., Pestell R.G., Yuan F., Auborn K.J., Goldberg I.D., Rosen E.M. BRCA1 inhibition of estrogen receptor signalling in trsncfected cells. Science (1999) 284:1354-1356.

21. Fleming I.D., Cooper J.S., Henson D.E. et al. Staging Manual, 5th ed. Philadelphia, Lippincot Raven. AJCC (1997).

22. Friedman L.S., Ostermeyer E.A., Szabo C.I., Dowd P., Lynch E.D., Rowell S.E., King M.C. Confirmation of BRCA1 by analysis of germline mutations linked to breast and ovarian cancer in ten families. Nature Genet. (1994) 8:399404.

23. Gayther S.A., Harrington P., Russell P. et al. Frequently occurring germline mutations of the BRCA1 gene in ovarian cancer families from Russia. Am. J. Human. Genet. (1997) 5:1239-1242.

24. Glavac D., Dean M. Optimization of the single-strand conformational polymorphism (SSCP) technique for detection of point mutation. (1993) Hum. Mut. 2:404-414.

25. Gowen L.C., Johnson B.L., Latour A.M., Sulik K.K., Koller B.H. Brcal deficiency results in early embryonic lethality characterized by neuroepithelial abnormalities. Nature Genet. (1996) 12:191-194.

26. Gowen L.C., Avrutskaya A.V., Latour A.M., Koller B.H., Leadon S.A. BRCA1 required for transcription-coupled repair of oxidative DNA damage. Science (1998) 281:1009-1012.

27. Greenman J., Mohammed S., Ellis D. et. al. Identification of missens and truncating mutations in the BRCA1 gene in sporadic and familial breast and ovarian cancer. Genes, Chrom. and Cancer (1998) 21:244-249.

28. Hall J.M., Lee M.K., Newman B., Morrow J.E., Anderson L.A., Huey B., King M.C. Linkage of early-onset familial breast cancer to chromosome 17q21. Science (1990) 250:1684-1689.

29. Hilakivi-Clarke L. Estrogens, BRCAaal, and breast cancer. Cancer Res. (2000) 60(18):4993-5001.

30. Huusko P. Predisposing genes in hereditery breast and ovarian cancer. Oulun Yliopisto, Oulu (1999) (http://herkules.oulu.fi/issn03553221/)

31. Isaacs S.D.; Kiemeney L.A.L.M.; Baffoe-Bonnie A., Beaty T.H., Walsh P. C. Risk of cancer in relatives of prostate cancer probands. J. Nat. Cancer Inst. (1995) 87: 991-996.

32. Jasin M. LOH and Mitotic recombination. DNA Alternations in cancer. Ed. Ehrlich M. (2000) Eaton Publishing:Natick, MA.

33. Jasinska A., Krzyzosiak W.J. Prevalence of BRCA1 founder mutations in Western Poland. Human Mutation:Mutation in Brief #389 (2000) Online.

34. Jensen R.A., Thompson M.E., Jetton T.L., Szabo C.I., van der Meer R., Helou B., Tronick S.R., Page D.L., King M.-C., Holt J.T. BRCA1 is secreted and exhibits properties of a granin. Nature Genet. (1996) 12: 303-308.

35. Jensen D.E., et al. BAP1: a novel ubiquitin hydrolase which binds to the BRCA1 RING finger and enhances BRCAl-mediated cell growth suppression. Oncogene {1998) 16:1097-1112.

36. Joazeiro C.A. et. al. The tyrozine kinase negative regulator c-Cbl as a RINGtype, E2-dependent ubiquitin-protein ligase. Science (1999) 286:309-312.

37. Kiechle M., Gross E., Schwarz-Boeger U., Pfisterer J., Jonat W., Gerber W.

38. D., Albacht B., Fischer B., Schlegelberger B., Arnold N. Ten Novel BRCA1 and BRCA2 Mutations in breast and/or ovarian cancer families from Northern Germany. Human Mutation:Mutation in Brief #379 (2000) Online.

39. Konstantopoulou I., Kroupis C., Ladopoulou A., PantazidisA., Boumba D., Lianidou E.S., Petersen M.B., Florentin L., Chiotellis E., Nounesis G., Efstathiou

40. E., Skarlos D., Tsionou C., Fountzilas G., Yannoukakos D. BRCAI mutation analysis in breast/ovarian cancer families from Greece. Human Mutation:Mutation in Brief #359 (2000) Online.

41. Koonin E.V., Altschul S.F., Bork P. BRCA1 protein products: functional motifs. Nature Genet. (1996) 13:266-267.

42. Kunkel L.M., Smith K.D., Boyer S.H. et. al. Analyses of human Y-chromosome-specific reiterated DNA in chromosome variants. Proc. Natl. Acad. Sei. USA (1997) 74:1245-1249.

43. Langston, A. A.; Malone, K. E.; Thompson, J. D.; Daling, J. R.; Ostrander, E. A. BRCA1 mutations in a population-based sample of young women with breast cancer. New Eng. J. Med. (1996) 334: 137-142.

44. Levy-Lahad E., Catane R., Eisenberg Sh. et. al. Founder BRCA1 and BRCA2 mutations in Ashkenazi Jews in Israel: Frequency and differential penetrance in ovarian cancer and in breast-ovarian families. Am. J. Human. Genet. (1997) 60:1059-1067.

45. Liu C.Y., Flesken- Nikitin A., Li S., Zeng Y.Y., Lee W.H. Inactivation of the mouse Brcal gene leads to failure in the morphogenesis of the egg cylinder in early postimplantation development. Genes Dev. (1996) 10:1835-1843.

46. Lorick K.L., Jensen J.P., Fang S., Ong A.M., Hatakeyama S., Weissman A.M. 1999. RING fingers mediate ubiquitin-conjugating enzume (E2)-dependent ubiquitination. Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1999) 96:11364-11369.

47. Lu M., Conzen S.D., Cole C.N., Arrick A. Characterization of functional messenger RNA splice variants of BRCA1 expressed in nonmalignant and tumor-derived breast cells. Cancer Res. (1996) 56:4578-4581.

48. Machackova E., Damborsky J., Valik D., Foretova L. Novel germline BRCA1 and BRCA2 mutations in breast and breast/ovarian cancer families from the Czech Republic. Human Mutation:Mutation in Brief #459 (2001) Online.

49. Manguoglu E.A., Luleci G., Ozcelik T., Colak T., Schayek H., Akaydin M., Friedman E. Germline mutations in the BRCA1 and BRCA2 genes in Turkish breast/ovarian cancer patients. Human Mutation (2003) 21(4):444-445.

50. Markoff A., Savov A., Vladimirov V., Bogdanova N., Kremensky I., Ganav V. Optimization of single-strand conformational polymorphism analysis in the presence of polyethylene glycol. Clin. Chem. (1997) 43:30-33.

51. Maza J.E., et.al. Mapping the functional domains of BRCA1. Interaction of the ring finger domains of BARD1. J. Biol. Chem. (1999) 274:5659-5665.

52. Meyer P., Voigtlaender T., Bartram C.R., Klaes R. Twenty-three novel BRCA1 and BRCA2 sequence alterations in breast and/or ovarian cancer families in Southern Germany. Human Mutation:Mutation in Brief #645 (2003) Online.

53. Monteiro A.N.A., August A., Hanafusa H. Evidence for a transcriptional activation function of BRCA1 C-terminal region. Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1996) 93:13595-13599.

54. Nastiuk K.L., Mansukhani M., Terry M.B., Kularatne P., Rubin M.A., Melamed J., Gammon M.D., Ittmann M., Krolewski J.J. Common mutations in BRCA1 and BRCA2 do not contribute to early prostate cancer in Jewish men. Prostate (1999) 40: 172-177.

55. Neuhausen S., Gilewski T., Nortron L. et. al. Recurrent BRCA2 6174delT mutations in Ashkenazi Jewish women affected by breast cancer. Nature Genet. (1996) 13:126-128.

56. Oddoux C., Struewing J.P., Clayton C.M. et al. The carrier frequency of the BRCA2 6174delT mutation among Ashkenazi Jewish individuals is approximately 1%. Nature Genet. (1996) 14:188-190.

57. Ouchi T., Monteiro A.N.A., August A., Aaronson S.A., Hanafusa H. BRCA1 regulates p53-dependent gene exspression. Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1998) 95:2302-2306.

58. Ozcelic H., Antebi Y. J., Cole D.E.C., Andrulis I.L. Heteroduplex and protein truncation analysis of the BRCA1 185delAG mutation. Hum. Genet. (1996)98:310-312.

59. PCR Technology. Principles and Applications for DNA Amplification.

60. Ed. Erlich H.A. Stocktons New York and MCMilan London (1989) P. 7-16.

61. Peelen T., van Vliet M., Petrij-Bosch A., et al: A high proportion of novel mutations in BRCA1 with strong founder effects among Dutch and Belgian hereditary breast and ovarian cancer families. Am. J. Hum. Genet. (1997) 60:1041-1049.

62. Petrij-Bosch A., Peelen T., van Vliet M., et. al. BRCA1 genomic deletions are major founder mutations in Dutch breast cancer patients. Nat. Genet. (1997) 17:341-345.

63. Perrin-Vidoz L., Sinilnikova O.M., Stoppa-Lyonnet D., Lenoir G.M., Mazoyer S. The nonsense-mediated mRNA decay pathway triggers degradation of most BRCA1 mRNAs bearing premature termination codons. Human Mol. Genet. (2002) Vol. 11, 23:2805-2814.

64. Phelan C.M., Kwan E., Jack E., Li S., Morgan S., Aube J., Hanna D., Narod S.A. A low frequency of non-founder BRCA1 mutations in Ashkenazi Jewish breast-ovarian cancer families. Human Mutation (2002) 20(5):352-357.

65. Pohlreich P., Stribrna J., Kleibl Z., Zikan M., Kalbacova R., Petruzelka L., Konopasek B. Mutations of the BRCA1 gene in hereditary breast and ovarian cancer in the Czech Republic. Med. Princ. Pract. (2003) 12(l):23-9.

66. Roa B.B., Boyd A.A., Volcik K., Richards C.S. Ashkenazi Jewish population frequencies for common mutation in BRCA1 and BRCA2. Nature Genet. (1996) 14:185-187.

67. Sanger F., Nicklen S., Coulson A.R. DNA sequencing with chain-terminating ingibitors. PNAS{\911) 74:5463-5467.

68. Scully R., Chen J.J., Ochs R.L., Keegan K., Hoekstra M., Feunteun J., Livingston D.M. Dynamic changes of BRCA1 subnuclear location and phosphorylation state are initiated by DNA damage. Cell (1997(a)) 90:425-435.

69. Scully R., Anderson S.F., Chao D.M., Wei W., Ye L., Young R.A., Livingston D.M., Parvin J.D. BRCA1 is a component of the RNA polymerase II holoenzyme. Proc. Nat. Acad. Sci. (1997(6)) 94: 5605-5610.

70. Scully R., Chen J.J., Plug A., Xiao Y.H., Weaver D., Feunteun J., Ashley T.,Livingston D.M. Assosiation of BRCA1 with Rad51 in mitotic and meiotic cells. Cell (1997(c)) 88:265:275.

71. Seen. D., Wu. Y., Chillar R., Vadgama J.V. Missense alterations of BRCA1 gene detected in diverse cancer patients. Anticancer Res. (2000) 20(2B): 1129-32.

72. Smith T.M., Lee M.K., Szabo C.I., Jerome N., McEuen M., Taylor M., Hood L., King M.C. Complete genomic sequence and analysis of 117 kb of human DNA containing the gene BRCA1. Genome Res. (1996) 6(11):1029-49.

73. Tereshenko I.V., Basham V.M., Ponder B.A.J., Pharoah P.D.P. BRCA1 and BRCA2 mutations in russian familial breast cancer. Human Mutation:Mutation in Brief #479 (2002) Online.

74. Thomas J.E., Smith M., Tonkinson J.L., Rubinfeld B., Polakis P. Induction of phosphorylation on BRCA1 during the cell cycle and after DNA damage. Cell Growth Differ. (1997) 8:801-809.

75. Thompson M.E., Jensen R.A., Obermiller P.S., Page D.L., Holt J.T. Decreased expression of BRCA1 accelerates growth and is often present during sporadic breast cancer progression. Nature Genet. (1995) 9:444-450.

76. Venkitaraman A.R. Cancer susceptibility and the functions of BRCA1 and BRCA2. Cell (2002) 108:171-182.

77. Wang Q., Zhang H., Kajino K., Greene M.I. BRCA1 binds c-Myc and inhibits its transcriptional and transforming activity in cells. Oncogene (1998) 17:1939-1948.

78. Welch P.L., Owens K.N., King M.-C. Insights into the functions of BRCA1 and BRCA2. TIG (2000) 16(2).

79. White M.B., Carvalho M., Derse D. et. al. Detecting single base substitutions as heteroduplex polymorphisms. Genomics (1992) Vol. 12, p. 301306.

80. Wong A.K., Ormonde P.A., Pero R., Chen Y., Lian L., Salada G., Berry S., Lawrence Q., Dayananth P., Ha P., Tavtigian S.V., Teng D.H., Bartel P.L. Characterization of a carboxy-terminal BRCA1 interacting protein. Oncogene (1998) 17:2279-2285.

81. A., Stratton M.R. Identification of the breast cancer susceptibility gene BRCA2. Nature (1995) 378:789-792.

82. Wu L.C., Wang Z.W., Tsan J.T., Spillman M.A., Phung A., Xu X.L., Yang M.C., Hwang L.Y., Bowcock A.M., Baer R. Identification of a RING protein that can interact in vivo with BRCA1 gene product. Nat. Genet. (1996) 14:430440.

83. Xu C.-F., Brown M.A., Chambers J.A., Griffiths B., Nicolai H., Solomon E. Distinct transcription start sites generate two forms of BRCA1 mRNA. Hum. Mol. Genet. (1995)4:2259-2264.

84. Yossepowitch O., Olvera N., Satagopan J.M., Huang H., Jhanwar S., Rapaport B., Boyd J., Offit K. BRCA1 and BRCA2 germline mutations in lymphoma patients. Leuk Lymphoma (2003) 44(1): 127-31.

85. Yu X., Wu L.C., Bowcock A.M., Aronheim A., Baer R. The C-terminal (BRCT) domains of BRCA1 interact in vivo with CtIP, a protein implicated in the CtBP pathway of transcriptional repression. J. Biol. Chem. (1998) 273:25388-25392.

86. Zhang H., Somasundaram K., Peng Y., Tian H., Bi D., Weber B.L., Eldiery W.S. BRCA1 physically associates with p53 and stimulates its transcriptional activity. Oncogene {1998) 16:1713-1721.

87. Zheng L., Annab L.A., Afshari C.A., Lee W.-H., Boyer T.G. BRCA1 mediates ligand-independent transcriptional repression of the estrogen receptor. PNAS (2001) 98(17):9587-9592.

88. Айала Ф., Кайгер Дж. Современная генетика, (в Зх томах) (1988) Москва, Мир т.З.

89. Аксель Е.М., Двойрин В.В. Статистика злокачественных новообразований: заболеваемость, смертность, тенденции, социально-экономический ущерб, продолжительность жизни. Москва (1992).

90. Баранов B.C., Баранова Е.В., Иващенко Т.Э., Асеев М.В. Геном человека и гены «предрасположенности». (Введение в предиктивную медицину). (2000) СПб:Интермедика.

91. Баранова A.B., Янковский Н.К. Гены супрессоры опухолевого Роста. Молекулярная Биология (1998) т. 32, № 2. с. 206-218

92. Глотов Н.В., Животовский JI.A., Хованов Н.В., Хромов-Борисов H.H. Биометрия. (1982) Ленинград, Ленинградский университет.

93. Горбунова В.Н., Баранов B.C. Введение в молекулярную диагностику и генотерапию наследственных заболеваний. Санкт-Петербург: Специальная литература (1997) 286 с.

94. Калинин B.JI. Транскрипция и регуляция экспрессии генов. СПб: Изд-во СПбГТУ (2001) 247с.

95. Льюин Б. Гены. Москва: Мир (1987) 647 с.

96. Мандельштам М.Ю., Голубков В.И., Ламбер Е.П., Шапиро И.М., Брежнева Т.В., Семиглазов В.Ф., Липовецкий Б.М., Хансон К.П., Гайцхоки

97. B.C. Поиск часто встречающихся мутаций в генах предрасположенности к раку молочной железы. Генетика (2001) 37(12): 1681-1686.

98. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование. Москва: Мир (1984) 480 с.

99. Остерман JI. А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот. Электрофорез и ультрацентрифугирование. Москва:Наука (1981) с. 131-135.

100. Рыбчин В.Н. Основы генетической инженерии. СПб: Изд-во СПбГГУ (1999) 522 с.

101. Скрябин О.Н., Роман Л.Д., Богородский Ю.П. Современные тенденции хирургического лечения больных раком молочной железы. СПб: Журнал акушерства и женских болезней (2000) т. XLIX, вып. 1.

102. Трапезников Н. Н., Аксель Е. М. Заболеваемость злокачественными новообразованиями и смертность от них населения стран СНГ в 1996 г. М. ОНЦ РАМН (1997).

103. Тюрин Ю.Н., Макаров A.A. Статистический анализ данных на компьютере. Под редакцией В.Э. Фигурнова. (1998) Москва, Инфра М.

104. Хайленко В.А. Ранняя диагностика рака молочной железы. VI ежегодная Российская Онкологическая конференция (2002).