Молекулярно-генетическое исследование наследственной предрасположенности к раку яичников тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.15, кандидат медицинских наук Смирнова, Татьяна Юрьевна

• Смирнова, Татьяна Юрьевна
• кандидат медицинских наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Смирнова, Татьяна Юрьевна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Особенности канцерогенеза при наследственной форме рака яичников

Ген ВЯСА1 и функции кодируемого им белка ВЯСА

Ген ВЯСА2 и функции кодируемого им белка ВЯСА

Клинические особенности наследственного рака яичников

Исследование наследственной формы рака яичников

Корреляция генотип-фенотип при мутациях в гене ВЯСА и ВКСА

Однонуклеотидные полиморфизмы в генах В КС А1 и ВКСА

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Пациенты

Анализ первичной структуры генов ВКСА1 и ВЯСА

Выделение геномной ДНК

Полимеразная цепная реакция

Конформационно - чувствительный гель электрофорез

Автоматическое секвенирование

Статистический анализ

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Частота мутаций в генах ВЯСА1 и ВЯСА2 при раке яичников

Спектр мутаций в гене ВЯСА

Анализ семейной истории больных раком яичников с мутациями в генах ВЯСА1 и ВЯСА

Исследование однонуклеотидных полиморфизмов

Изучение ОНП в выборке спорадического рака яичников

Изучение ОНП в выборке ВЯСА-ассоциированного рака яичников

Изучение ОНП в выборке ВЯСА-ассоциированного рака молочной железы

Изучение ОНП в выборке спорадического рака молочной железы

Исследование влияния на риск сочетаний генотипов по ОНП

ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Молекулярно-генетическое исследование наследственной предрасположенности к раку яичников»

Актуальность темы. Проблема злокачественных новообразований яичников весьма актуальна вследствие высокой летальности и неуклонного роста их частоты. Занимая 3-е место по заболеваемости среди злокачественных опухолей женских половых органов, рак яичников (РЯ) является лидирующей причиной смертельных исходов в онкогинекологии [Давыдов М.И. с соавт., 2007]. Эпидемиологические исследования показывают, что за последние 10 лет отмечен заметный прирост заболеваемости опухолями яичников в России - на 8,5% [Жорданиа, К.И., 2004]. Основной причиной высокой смертности больных РЯ заключается в бессимптомном течении заболевания на ранних стадиях, в результате чего около 80% случаев РЯ диагностируется на III-IV стадии болезни, когда эффективность лечения крайне низка [Jacobs I.J. et al., 2004; Ozols R.F. et al., 2005]. Поэтому особенно актуальным представляется изучение возможности ранней диагностики РЯ на начальных этапах развития заболевания.

Одним из эффективных подходов, способствующих раннему выявлению РЯ, является молекулярно-генетическое исследование его наследственной формы, которая в подавляющем числе случаев развивается вследствие наследуемых мутаций в генах-супрессорах опухоли BRCA1 и BRCA2. Для определения вклада наследственной формы РЯ в общую структуру заболевания проводится скрининг выборки больных РЯ, сформированной без учета семейной истории заболевания, на наличие мутаций в генах BRCA1 и BRCA2. В выборках больных РЯ из разных популяций обнаруживают различную частоту мутаций -от 3% до 40%. В России подобные исследования ранее проведены не были. Восполнение этого пробела внесет существенный вклад в пониманиеособенностей мутационных процессов в разных популяциях. Кроме того, определение характеристик мутаций в генах ВЯСА1 и ВКСА2 в выборке российских больных РЯ необходимо для разработки практической диагностики наследственной предрасположенности к данному заболеванию. Выявление наследуемых мутаций, основанное на молекулярно-генетических данных об особенностях характеристик мутаций в генах ВЯСА1 и ВЯСА2 в России, обеспечит объективный критерий для формирования групп повышенного риска развития РЯ.

Поскольку мутации в генах ВЯСА1 и ВЯСА2 связаны с повышенным риском развития не только РЯ, но и рака молочной железы (РМЖ), весьма актуальным является изучение генетических причин модификации риска возникновения рака разной локализации. Механизмом такой модификации может быть влияние аллелей умеренного риска рака той или иной локализации. Полиморфные варианты в генах ВЯСА1 и ВЯСА2, мутации в которых обусловливают высокий риск развития РЯ и РМЖ, могут выступать в качестве таких аллелей [ВаупеБ С. е1 а1., 2007]. Несмотря на наличие ряда работ в этом направлении, исследование данного вопроса нельзя признать достаточным. В частности, отсутствует сравнительный анализ влияния на риск вариантов в генах ВЯСА1/2 при спорадических формах рака и при мутациях в указанных генах. Практически не изучено значение для модификации риска генетического взаимодействия ОНП в генах ВКСА1 и ВКСА2. Выявление корреляции генотип-фенотип существенно для углубления понимания молекулярных механизмов действия генов-супрессоров в злокачественной трансформации клеток и важнодля разработки способов прогнозирования риска возникновения рака определенной локализации.

Выявление наследственной предрасположенности к РЯ на основе ДНК-диагностики обеспечит базу для развития профилактики этого заболевания на принципиально новой основе.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯЦелью настоящей работы явился молекулярно-гепетическое исследование наследственной предрасположенности к РЯ в связи с особенностями первичной структуры генов BRCA1 и BRCA2.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ1. Определить характеристики мутаций в генах BRCA1 и BRCA2 в выборке российских больных РЯ, сформированной без учета семейной истории заболевания.

2. Изучить частоты генотипов по однонуклеотидным полиморфизмам в генах BRCA1 и BRCA2 в выборке больных РЯ и в контрольной выборке.

3. Провести сравнительный анализ частот генотипов по однонуклеотидным полиморфизмам генов BRCA1 и BRCA2 у больных с разной локализацией рака: яичников и молочной железы.

Научная новизна.

Впервые на российской выборке изучен вклад наследственной формы, связанной с мутациями в генах BRCA1 и BRCA2, в общую структуру заболеваемости РЯ. Выявленная частота мутаций в генах BRCA1 и BRCA2 относится к наиболее высоким среди изученных аналогичных выборок больныхв европейских странах. Основное число мутаций у российских больных РЯ наблюдается в гене ВЯСА1. Для выявления генетических факторов модификации риска рака различной локализации впервые проведен сравнительный анализ частот генотипов по однонуклеотидным полиморфизмам в генах ВЯСА1 и ВЯСА2 в четырех выборках больных: РЯ с мутациями и без мутаций в гене ВЯСА1, РМЖ с мутациями и без мутаций в гене ВЯСА1. Впервые показано, что как при мутациях, так и без мутаций в гене ВЯСА1 одни и те же аллели ассоциированы с модификацией риска РЯ. Аллели, ассоциированные с повышенным риском, различны для РЯ и спорадического РМЖ. Изученные однонуклеотидные полиморфизмы не влияют на риск РМЖ при мутациях в гене ВЯСА1, что может указывать па отсутствие связи возникновения рака этой локализации с иными, кроме мутации, вариантами в генах ВЯСА1 и ВЯСА2. Научно-практическая значимость работы.

Установленная в ходе данной работы высокая частота мутаций в генах ВЯСА1 и ВВ.СА2 указывает на важное практическое значение ДНК-диагностики наследственной предрасположенности к РЯ. Полученные результаты о преимущественной связи наследственной формы РЯ в России с мутациями в гене ВЛСА] и характеристиках спектра, включающего несколько повторяющихся мутаций с преобладанием одной из них - 5382тБС, определяют возможность проведения скрининговых исследований на предрасположенность к данному заболеванию для формирования групп повышенного риска. Выявленные различия генотипов повышенного риска РЯ и РМЖ создают предпосылки для разработки способа идентификации предрасположенности квозникновению рака определенной локализации при наличии мутации в гене ВЯСА1.

Положения, выносимые на защиту:1. Среди российских больных РЯ установлена частота индивидуумов с мутацией в гене ВЯСА1 или ВЯСА2 (16,8%, 95%ДИ 10,7-24,9%). Обнаруженные мутации преимущественно локализованы в гене ВКСА1, с преобладанием в спектре мутации 5382тзС.

2. Генотипы по однонуклеотидным полиморфизмам в генах ВЯСА1 и ВЯСА2, ассоциированные с модификацией риска, одни и те же при РЯ с мутациями и без мутаций в указанных генах.

3. Генотипы, ассоциированные с увеличенным риском развития РЯ и спорадического РМЖ, различны. Среди больных РМЖ с мутацией в гене ВЯСА1 генотипы по исследованным ОНП не ассоциированы с модификацией риска.

4. Сниженный риск развития и РЯ, и спорадического РМЖ связан с одним и тем же генотипом.

Заключение диссертации по теме «Генетика», Смирнова, Татьяна Юрьевна

выводы

1. Определена частота мутаций в генах ВЯСА1 и ВЯСА2 в выборке случаев рака яичников, сформированной без учета семейной истории заболевания, среди российских больных, составившая 16,8% (95% ДИ 10,7-24,9%). Установленное значение относится к наиболее высоким среди подобных выборок из других европейских популяций. Большинство больных с мутацией (88%) имели отягощенный семейный анамнез РЯ и/или РМЖ.

2. Наибольшее число больных РЯ с мутациями имели мутацию в гене ВЯСА1 -88% (15/17). В спектре преобладала мутация 5382тзС (9/15, 60%). Остальную часть спектра составили 4 другие мутации - С6Ю, 185с1е1АО, 4154с1с1А, 2080ёе1А.

3. Частоты генотипов по трем ОНП в генах ВЯСА1 и ВЯСА2 в выборках РЯ с мутациями и без мутаций в указанных генах не отличались. В объединенной выборке рака яичников показана ассоциация генотипа 203А/А в гене ВЯСА2 с увеличенным риском развития рака яичников (011=5,8; р=0,003; 95% ДИ: 1,6-49).

4. В выборке больных РМЖ с мутацией в гене ВЯСА1 частоты генотипов по исследованным ОНП не отличались от контрольной группы. Среди больных спорадическим РМЖ найдена ассоциация с увеличенным риском генотипа Е10380 в гене ВЯСА1 (011=2,1; р=0,011; 95% ДИ 1,2-4).

5. Частота генотипа 203 С/А была снижена относительно контроля как в случае рака яичников (011=0,5; р=Ю,008; 95% ДИ 0,3+0,9), так и при спорадическом раке молочной железы (011=0,5; р=0,02; 95% ДИ 0,2 -0,8).

6. При анализе генотипов, образованных сочетаниями вариантов по всем изученным ОНП, установлено, что модифицирующее влияние на риск рака яичников генотипов 2030/А и 203А/А осуществляется в составе разных генотипов по другим ОНП.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Установленная высокая частота мутаций в генах ВЯСА1 и ВЯСА2 и наличие среди пациентов с обнаруженной мутацией в указанных генах индивидуумов без семейной истории заболевания РЯ/РМЖ позволяет рекомендовать молекулярно—генетическое исследование всех больных РЯ на наличие мутаций в указанных генах.

2. Учитывая, что доля больных РЯ с мутациями в гене ВЯСА2 невелика, оправданно первоначальное молекулярно-генетическое исследование гена ВЯСА1.

3. Установлен узкий спектр мутаций в гене ВКСА1 у российских больных, включающий пять основных мутаций (5382шзС; С6Ю, 185с1е1АО, 4154с1е1А, 2080с1е1А), определение которых при проведении скрининга обеспечит выявление группы риска с наследственной предрасположенностью к РЯ.

4. Для формирования групп риска РЯ при выявлении мутации в указанных генах у пробанда рекомендуется исследование его родственников на наличие данной мутации. Динамическое наблюдение людей с мутациями обеспечит выявление рака яичников на ранней стадии и, следовательно, эффективное лечение.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Смирнова, Татьяна Юрьевна, 2008 год

1. Давыдов, М.И. Статистика злокачественных новообразований в России и странах СНГ в 2005 г./ М.И. Давыдов, Е.М. Аксель// Вестник РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН. 2007. - Т. 18. - № 2. - Прил. 1. С.58.

2. Животовский, JI.A. Популяционная биометрия / JI.A. Животовский. Москва. -Наука.- 1991.-271 с.

3. Жорданиа, К.И. Злокачественные новообразования яичников / К.И. Жорданиа// Энциклопедия клинической онкологии. Москва. - 2004. - С. 427-442.

4. Карпухин, A.B. Частоты однонуклеотидных полиморфизмов и мутаций в гене BRCA1 при наследственно обусловленном раке молочной железы и яичников/ A.B. Карпухин, Н.И. Поспехова, JI.H. Любченко, и др.// Докл. А.II. 2002. -Т.383. - №5. - С. 706-709.

5. Копнин, Б.П. Молекулярные механизмы канцерогенеза/ Б.П. Копнин // Энциклопедия клинической онкологии. / Под ред. М.И. Давыдова. Москва. -РЛС - Пресс. - 2004. - С.34-53.

6. Копнин, Б.П. Нестабильность генома и онкогенез/ Б.П. Копнин// Молекулярная биология. 2007. - Т.41. - №2. - С.369-3 80.

7. Паниченко, И.В. Микроделеции в хромосомных локусах опухолей яичников: сопоставление с клинико-морфологическими факторами прогноза/ И.В. Паниченко, И.Б. Збровская, В.Н. Богатырев и др.// Российский онкологический журнал. 2006. - №2. - С.26-31.

8. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA/ О.Ю. Реброва. Москва.-МедиаСфера. - 2002. - 312 с.

9. Фогель Ф. Генетика человека. В трех томах. Перевод с англ./ Ф. Фогель, А. Мотульски.- Москва.- Мир.-1989.- 312 с.

10. M.Antoniou, A.C. A comprehensive model for familial breast cancer incorporating BRCA1, BRCA2 and other genes/ A.C. Antoniou, P.D.P. Pharoah, G. McMullan, et al. // British Journal of Cancer. 2002. - V.86. - P.76-83.

11. Armstrong, K. Hormone replacement therapy and life expectancy after prophylactic oophorectomy in women with BRCA1/2 mutations: a decision analysis/ K. Armstrong, J.S. Schwartz, T. Randall, et al. // J. Clin. Oncol.- 2004. V.22. -P.1045-1054.

12. Auranen, A. BRCA2 Arg372His polymorphism and epithelial ovarian cancer risk/ A. Auranen, A.B. Spurdle, X. Chen et al. // Int. J. Cancer. 2003. - V.103. - №3.-P.427-430.

13. Baynes, C. Common variants in the ATM, BRCA1, BRCA2, CHEK2 and TP53 cancer susceptibility genes are unlikely to increase breast cancer risk/ C. Baynes, C.S. Healey, K.A. Pooley et al.// Breast Cancer Res. 2007. - V.9.- № 2.

14. Baldeyron, C. A single mutated BRCA1 allele leads to impaired fidelity of double strand break end-joining/ C. Baldeyron, E. Jacquemin, J.Smith et al. // Oncogene. -2002.-№21.-P. 1401-1410.

15. Bewtra, C. Hereditary ovarian cancer/ C. Bewtra, P. Watson, T. Conway et al. // Int. J. Gynecol. Pathol.-1992.-V.-ll,- P.180- 187.

16. Boulton, S.J. Cellular functions of the BRCA tumour-suppressor proteins./ S.J. Boulton.- Biochem Soc Trans. 2006.- V.34.- P.633-645.

17. Boyd, J. Specific keynote: hereditary ovarian cancer: what we know/ J. Boyd // Gynecol. Oncol.- 2003.-V.-88.-P.8-10.

18. Boyd, J. Clinicopathologic features of BRCA-linked and sporadic ovarian cancer/ J. Boyd, Y. Sonoda, M.G. Federici et al. //JAMA.- 2001.-V.283.-P.2260 -2265.

19. Breast Cancer Information Core (BIC). Режим доступа: http://www.nhgri.nih.gov/Intramuralresearch/Labtransfer/Bic/

20. Cass, I. Improved survival in women with BRCA-associated ovarian carcinoma/ I. Cass, R.L. Baldwin, T. Varkey, R. Moslehi et al. // Cancer.- 2003.- V. 97.-P. 21272179.

21. Chai, Y.L. The second BRCT domain of BRCA1 proteins interacts with p53 and stimulates transcription from the p21WAFl/CIPl promoter/ Y.L. Chai, J. Cui, N. Shao et al. // Oncogene.- 1999.- V.18.- №1,- P.263-268.

22. Chen, P.L. The BRC repeats in BRCA2 are critical for RAD51 binding and resistance to methyl methanesulfonate treatment./ P.L. Chen, C.F. Chen, Y. Chen// Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1998,- V.95.-№9.- P.5287-5292.

23. Dang, C.V. Function of the c-Myc oncogenic transcription factor/ C.V. Dang, L.M. Resar, E. Emison et al.// Exp. Cel.l Res. 1999.- V.253.- №1.- P.63-77.

24. David, B.Y. Effcct of BRCA mutations on the length of survival in epithelial ovarian tumors/ B.Y. David, A. Chetrit, G. Hirsh-Yechezkel et al. // J. Clin. Oncol.- 2002.-V.20.- P.463- 466.

25. Davies, J.Y. Role of BRCA2 in control of the RAD51 recombination and DNA repair protein/ A.A. Davies, J.Y. Masson, M.J. Mcllwraith ct al. // Mo. Cell. 2001 V.7.-№2. P.273-282.

26. Deng, C.X. BRCA1: cell cycle checkpoint, genetic instability, DNA damage response and cancer evolution/ C.X. Deng// Nucleic Acids Res.-2006.- V.34.-№5. -P.1416-1426.

27. Dunning, A.M. Common BRCA1 variants and susceptibility to breast and ovarian cancer in the general population/ A.M. Dunning, M. Chiano, N.R. Smith et al. // Hum. Mol. Genet. 1997,- V.6.- №2.-P.285-289.

28. Easton, D.F. Genome-wide association study identifies novel breast cancer susceptibility loci/ D.F. Easton, K.A. Poolcy, A.M. Dunning et al.// Nature.- 2007.-V.447.- №7148.-P.1087-1093.

29. Elledge, S.J. The BRCA1 suppressor hypothesis: an explanation for the tissue-specific tumor development in BRCA1 patients./ S.J. Elledge, A. Amon// Cancer Cell. 2002.-V.I.- №2.- P.129-132.

30. Esashi, F. CDK-dependent phosphorylation of BRCA2 as a regulatory mechanism for recombinational repair/ F. Esashi, N. Christ, J. Gannon et al. // Nature.- 2005.-V.434.- №7033.-P.598-604.

31. Ford, D. Genetic heterogeneity and penetrance analysis of the BRCA1 and BRCA2 genes in breast cancer families/ D. Ford, D.F. Easton, M. Stratton et al. // Am. J. Hum. Genet. 1998. - V.62. - P.676-689.

32. Foster, K. Somatic and germline mutations of the BRCA2 gene in sporadic ovarian cancer/ K. Foster, P. Harrington, J. Kerr et al. //Cancer. Res.- 1996.-V.56.-P.3622-3625.

33. Friedman, L.S. The search for BRCA1/ L.S. Friedman, E.A. Ostermeyer, E.D Lynch et al.// Cancer Res.- 1994.- V.54.- №24,- P.6374-6382.

34. Fukasawa K. Centrosome amplification, chromosome instability and cancer development/ K. Fukasawa// Cancer Lett. 2005.- V.230.-№l.-P.6-19.

35. Fuks, F. BRCA2 associates with acetyltransferase activity when bound to P/CAF / F. Fuks, J. Milner, T. Kouzarides// Oncogene. 1998.- V.17.- №19,- P.2531-2534.

36. Garci'a, A. Loss of heterozygosity on chromosome 17q in epithelial ovarian tumors: association with carcinomas with serous differentiation/ A. Garci'a, E. Bussaglia, P. Machin et al. // Int. J. Gynecol. Pathol.- 2000.-V.19.- P. 152 -157.

37. Gayther, S.A. Germline mutations of the BRCA1 gene in breast and ovarian cancer families provide evidence for a genotype-phenotype correlation/ S.A. Gayther, W. Warren, S. Mazoyer et al. // Nature Genet. 1995. - V.l 1. - P.428-433.

38. Gayther, S.A. The contribution of germline BRCA1 and BRCA2 mutations to familial ovarian cancer: no evidence for other ovarian cancer-susceptibility genes/ S.A. Gayther,-P. Russell, P. Harrington et al.// Am J Hum Genet. 1999.- V.65.-№4.- P.1021-1029.

39. Gayther, S.A. Variation of risks of breast and ovarian cancer associated with different germline mutations of the BRCA2 gene/ S.A. Gayther, J. Mangion, P. Russell et al //Nat. Genet. -1997.-V. 15.- P.103-105.

40. Ginolhac, S.M. BRCA1 wild-type allele modifies risk of ovarian cancer in carriers of BRCA1 germ-line mutations/ S.M. Ginolhac, S. Gad, M. Corbex et al. // Cancer Epidemiol. Biomark. Prev. -2003.- V.12.- P.90-95.

41. Godard, B. Risk factors for familial and sporadic ovarian cancer among French Canadians: a case-control study/ B. Godard, W.D. Foukes, D. Provencher et al.// Am. J. Obstet. Gynecol.- 1998.- V.179.- №2.-P.403-410.

42. Hanahan, D. The hallmarks of cancer/ D. Hanahan, RA. Weinberg // Cell.- 2000,-V.100.-№1P.57-70.

43. Hankinson, S.E. A quantitative assessment of oral contraceptive use and risk of ovarian cancer/ S.E. Hankinson, G.A. Colditz, D.J. Hunter et al.// Obstet Gynecol.-1992,- V.80.-P.708—714.

44. Healey, C.S. A common variant in BRCA2 is associated with both breast cancer risk and prenatal viability/ C.S. Healey, A.M. Dunning, M.D. Teare et al.// Nat. Genet.-2000.- V.26.-№3.-P.362-364.

45. Heintz, A.P. Carcinoma of the ovary/ A.P. Heintz, F. Odicino, P. Maisonneuve et al. J. Epidemiol. Biostat.- 2001.-V.6.-№1.-P.107-138.

46. Holt, J.T. Growth retardation and tumour inhibition by BRCA1/ J.T. Holt, M.E. Thompson, C. Szabo et al.//Nat. Genet.- 1996,- V.12.- P.298-302.

47. Hughes, D.J. Common BRCA2 variants and modification of breast and ovarian cancer risk in BRCA1 mutation earners/ D.J. Hughes, S.M. Ginolhac, I. Coupie et al.// Cancer Epidemiol Biomarkers Prev.- 2005.- V.14.- №l.-P.265-267.

48. Jacobs, I.J. Progress and challenges in screening for early detection of ovarian cancer/ I.J. Jacobs, U. Menon// Mol. Cell Proteomics.- 2004.- V.3.- №4.-P.355-366.

49. Janezic, S.A. Germline BRCA1 alterations in a population-based series of ovarian cancer cases/ S.A. Janezic, A. Ziogas, L.M. Krumroy et. al. // Hum. Mol. Genet. -1999. -V.8. №5. -P.889-897.

50. Jasin, M. Homologous repair of DNA damage and tumorigenesis: the BRCA connection/ M. Jasin.// Oncogene.- 2002.-V.21 ,-№58.-P.8981-8993.

51. Johannsson, O.T. Survival of BRCA1 breast and ovarian cancer patients: a population-based study from southern Sweden./ O.T. Johannsson, J. Ranstam, A. Borg//H. J. Clin. Oncol. -1998.-V.16.-P. 397-404.

52. Johnson, N. Counting potentially functional variants in BRCA1, BRCA2 and ATM predicts breast cancer susceptibility/ N. Johnson, O. Fletcher, C. Palles et al.// Hum. Mol. Genet.- 2007.-V.16.-№9.-P.1051-1057.

53. Johnson, N.C. BRCA1 zinc RING finger domain disruption alters caspase response in ovarian surface epithelial cells/ N.C. Johnson, P.A. Kruk// Cancer Cell Int. -2002.-V.2.- №1.- P.7.

54. Kauff, N.D. Risk-reducing salpingo-oophorectomy in women with BRCA-1 or BRCA-2 mutation/ N.D. Kauff, J.M. Satagopan, M.E. Robson et al. // N. Engl. Med.-2002.-V.346.-P.1609-1615.

55. Khoo, U.S. Mutational analysis of BRCA1 and BRCA2 genes in Chinese ovarian cancer identifies 6 novel germline mutations/ U.S. Khoo, H.Y. Ngan, A.N. Cheung, et al. //Hum. Mutat.-2000.-Vol.16.-P.88 89.

56. Kim, Y.T. Germline mutations of BRCA1 and BRCA2 in Korean sporadic ovarian carcinoma/ Y.T. Kim, E.J. Nam, B.S. Yoon et al.// Gynecol. Oncol.- 2005. V.99, № 3. - P.585-590.

57. Knudson, A.G. Mutation and cancer: neuroblastoma and pheochromocytoma/ A.G. Knudson, L.C. Strong // Am. J. Hum. Genet. 1972.-V.24.-№5.- P.514-532.

58. Lakhani, S.R. Pathology of ovarian cancers in BRCA1 and BRCA2 carriers/ S.R. Lakhani, S. Manek, F. Penault-Llorca et al. // Clin. Cancer Res.- 2004.- Vol.10.- P. 2473-2481.

59. Lavin, M.F. The complexity of p53 stabilization and activation/ M.F. Lavin, N. Gueven// Cell Death Differ.- 2006.-V.13.-№6.-P.941-950.

60. Levine, D.A. The androgen receptor and genetic susceptibility to ovarian cancer: results from a case series/D.A. Levine, J.Boyd//Cancer Res.-2001 .-V.61.-P.908-911.

61. Lubinski, J. Cancer variation associated with the position of the mutation in the BRCA2 gene/ J. Lubinski, C.M. Phelan, P. Ghadirian et al.// Fam. Cancer.-2004,-V.3.-P.1-10.

62. Majdak, E.J. Prognostic Impact of BRCA1 Pathogenic and BRCA1/BRCA2 Unclassified Variant Mutations in Patients with Ovarian Carcinoma/ E.J. Majdak, J. Debniak et al. // Cancer.- 2005,- Vol. 104.-P. 1004-1012.

63. Malander, S. One in 10 ovarian cancer patients cany germ line BRCAI or BRCA2 mutations: results of a prospective study in Southern Sweden/ S. Malander, M. Ridderheim, A. Masback et. al. // Eur. J. Cancer.- 2004,- Vol.40.- №3.-P.422-428.

64. Miki, Y. A strong candidate for the breast and ovarian cancer susceptibility gene BRCAI/ Y. Miki, J. Swensen, D. Shattuck-Eidens et al.// Science. 1994.- V.266.-№5182.-P.66-71.

65. Mizuta, R. RAB22 and RAB163/mouse BRCA2: proteins that specifically interact with the RAD51 protein/ R. Mizuta, J.M. LaSalle, H.L. Cheng et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. U S A.- 1997,- V.94.-№13.-P.6927-6932.

66. Monteiro, A.N. BRCAI: the enigma of tissue-specific tumor development/ A.N. Monteiro// Trends Genet.- 2003.- V.19.-№6.-P.312-315.

67. Moslehi, R. BRCAI and BRCA2 mutation analysis of 208 Ashkenazi Jewish women with ovarian cancer/ R. Moslehi, W. Chu, B. Karlan et al. // Am. J. Hum. Genet.-2000.-Vol.66.-P. 1259- 1272.

68. Narod, S.A. BRCAI and BRCA2: 1994 and beyond/ S.A .Narod, W.D. Foulkes// Nat. Rev. Cancer.- 2004.-V.4.-P.665-676.

69. Narod, S.A. Genetics of breast and ovarian cancer/ S.A. Narod// Br. Med .Bull. -1994.- V.50.- №3. P.656-676.

70. Narod, S.A. Oral contraceptives and the risk of hereditary ovarian cancer/ S.A. Narod, H. Risch, R. Moslehi et al. //N. Engl. J. Med. 1998.- V.339.-P.424-428.

71. Narod, S.A. Modifiers of risk of hereditary breast and ovarian cancer/ S.A. Narod// Nat. Rev. Cancer.- 2002.-V.2.- №2.- P.l 13-.123.

72. Narod, S.A. Ovarian cancer, oral contraceptives and BRCA mutations/ S.A. Narod, P. Sun, H.A. Risch // N. Engl. J. Med. 2001.-V.345.- P. 1706-1707.

73. Pal, T. BRCA1 and BRCA2 mutations account for a large proportion of ovarian carcinoma cases/ T. Pal, J. Permuth-Wey, J.A. Betts et al. // Cancer.- 2005,-Vol.104. P.2807-2816.

74. Pejovic, T. Genetic changes in ovarian cancer/T. Pejovic // Ann. Med. 1995.-V.27. -№1.- P.73-78.

75. Perkowska, M. BRCA1 and BRCA2 mutation analysis in breast-ovarian cancer families from northeastern Poland/ M. Perkowska, I. BroZek, B. Wysocka et al. // Hum. Mutat. -2003. V.21.-№5. -P.553-554.

76. Petalcorin, M.I. Stabilization of RAD-51-DNA filaments via an interaction domain in Caenorhabditis elegans BRCA2/ M.I. Petalcorin, V.E. Galkin, X. Yu , E.H. Egelman, S.J. Boulton // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 2007.- V.104. №20.-P.8299-8304

77. Pharoah, P.D. The genetics of ovarian cancer/ P.D. Pharoah, B.A. Ponder // Best Pract. Res. Clin. Obstet. Gynaecol.- 2002.- Vol.16.-P.449- 468.

78. Pharoah, P.D. Association between common variation in 120 candidate genes and breast cancer risk/ P.D. Pharoah, J. Tyrer, A.M. Dunning et al.// PLoS Genet. -2007.- V.3.- №3.- P.42.

79. Piver, M.S. Familial ovarian cancer. A report of 658 families from the Gilda Radner Familial Ovarian Cancer Registry 1981-1991/ M.S. Piver, T.R. Baker, M.F. Jishi et al. //Cancer. 1993.- V.71.-P.582-588.

80. Prat, J. Hereditary ovarian cancer/ J. Prat, A. Ribe, A. Gallardo //Human Pathology.2005.- Vol.36. P.861-870.

81. Rebbeck T.R. Prophylactic oophorectomy in earners of BRCA1 mutations/ T.R. Rebbeck, H.T. Lynch, S.L. Neuhausen et al. // N. Engl. J. Med.- 2002,- Vol.346.-P.1616- 1622.

82. Rebbeck, T.R. Modification of BRCA1-associated breast cancer risk by the polymorphic androgenreceptor CAG repeat/ T.R. Rebbeck, P.W. Kantoff, K. Krithivas et al.// Am. J. Hum. Genet. 1999.- V.64. - P. 1371-1377.

83. Risch H.A. Parity, contraception, infertility and the risk of pithelial ovarian cancer/ H.A. Risch, L.D. Marrett, G.R. Howe// Am. J. Epidemiol.-1994.-V.140.-P.585-597.

84. Risch, H.A. Prevalence and penetrance of germline BRCA1 and BRCA2 mutations in a population series of 649 women with ovarian cancer/ H.A. Risch, J. McLaughlin,

85. D. Cole et al. //Am. J. Hum. Genet.- 2001.- Vol.68.-P.700- 710.

86. Rosen, E.M. BRCA1 in hormonal carcinogenesis: basic and clinical research/ E.M. Rosen, S. Fan, C. Isaacs// Endocr. Relat. Cancer.- 2005,- V.12.- №3.- P.533-548.

87. Sambrook, J. Molecular cloning: a laboratory manual 2nd edn. / Sambrook J., Fritch

88. E.F., Maniatis T. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, NY. 1989.

89. San Filippo, J. Recombination mediator and Rad51 targeting activities of a human BRCA2 polypeptide/ J. San Filippo, P. Chi, M.G. Sehorn et al. // J Biol Chem.2006. V.281. -№17. - 1649-1657.

90. Sankaran, S. Identification of domains of BRCA1 critical for the ubiquitin-dependent inhibition of centrosome function/ S. Sankaran, L.M. Starita, A.M. Simons et al. //Cancer Res. 2006.- V.66. - № 8. - P.4100-4107.

91. Sharan, S.K. Identification and characterization of a microsatellite marker within murine BRCA2 gene/ S.K. Sharan, A. Bradley // Mamm. Genome. 1997. - V.8. -№1. -P.79.

92. Shaw, P.A. Histopatologic feature of genetically determined ovarian canccr/ P.A. Shaw, J. McLaughlin, R.P. Zweemer et al. // Int. J Gynecol. Pathol.- 2002.- V.21.-P.407 411.

93. Shin, S. BRCA2 cooperates with histone acetyltransferases in androgen receptor-mediated transcription/ S. Shin, I.M. Verma// Proc. Natl. Acad. Sei. USA.- 2003. -V.100. -№12. P.7201-7206.

94. Sowter, H.M. BRCA1 and BRCA2 as ovarian cancer susceptibility genes/ H.M. Sowter, A. Ashworth// Carcinogenesis. 2005.- V.26.- №10. - P. 1651-1656.

95. Spurdle, A.B. The BRCA2 372 HH genotype is associated with risk of breast cancer in Australian women under age 60 years/ A.B. Spurdle, J.L. Hopper, X. Chen et al.// Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 2002.- V. 11. - №4. - P.413-416.

96. Stoppa-Lyonnet, D. BRCA1 sequence variations in 160 individuals referred to a breast/ovarian family cancer clinic/ D. Stoppa-Lyonnet, P. Laurent-Puig, E. Laurent et al. // Am. J. Hum. Genet. 1997. - V.60. - P.1021-1030.

97. Tavtigian, S.V. The complete BRCA2 gene and mutations in chromosome 13q-linked kindreds/ S.V. Tavtigian, J. Simard, J. Rommens et al. // Nat Genet. 1996. -V.12. - №3. —P.333-337.

98. Thompson, D. Breast Cancer Linkage Consortium. Variation in BRCA1 cancer risks by mutation position/ D. Thompson, D. Easton //Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev. 2002. - V.l 1. - № 4. - P. 329-336.

99. Turner, N. Targeting the DNA repair defect of BRCA tumours/ N. Turner, A. Tutt, A. Ashworth // Curr Opin Pharmacol.- 2005. V.5. - №4. - P.388-393.

100. Verhoog, L.C. Large regional differences in the frequency of distinct BRCA1/BRCA2 mutations in 517 Dutch breast and/or ovarian cancer families/ L.C. Verhoog, A.M.W. Van den Ouweland, E. Berns et. al. // Eur. J. of Can. 2001. -V.37. - P.2082-2090.

101. Vogelstein, B. Cancer genes and the pathways they control/ B. Vogelstein, K.W. Kinzler. Nat. Med. 2004. - V. 10. - №8. - P.789-799.

102. Wenham, R.M. Polymorphisms in BRCA1 and BRCA2 and risk of epithelial ovarian cancer/ R.M. Wenham, J.M. Schildkraut, K. McLean et al. // Clin Cancer Res. 2003. - V.9. -№12. - P.4396-4403.

103. Werness, B.A. Altered surface and cyst epithelium of ovaries removed prophylactically from women with a family history of ovarian cancer/ B.A. Werness, A.M. Afify, K.L. Bielat et al. // Hum. Pathol. 1999,- V.30.-P.151-157.

104. Werness, B.A. Familial ovarian cancer and early ovarian cancer: biologic, pathologic, and clinical features/ Werness B.A., Eltabbakh G.H. // Int. J. Gynecol. Pathol.- 2001,- V.20.-P.48 63.

105. Wilson, K. Localization of human BRCA1 and its loss in high-grade, non-inherited breast carcinomas/ K. Wilson, L. Ramos, M.R. Villasenor et al. // Nat. Genet.-1999.- V.21.-P.236- 240.

106. Wong, A.K. RAD51 interacts with the evolutionarily conserved BRC motifs in the human breast cancer susceptibility gene BRCA2.I A.K. Wong, R. Pero, P.A. Ormonde et al. J Biol Chem. 1997. - V.272. - №51. - P.31941 -31944.

107. Wooster, R. Identification of the breast cancer susceptibility gene BRCA2/ R. Wooster, G. Bignell, J. Lancaster et al.//Nature. -1995. -V.378.- №6559.-P.789-792

108. Wooster, R. Breast and ovarian cancer. Genomic medicine/ R. Wooster, B.L. Weber//N. Engl. J. Med.- 2003.- Vol.348.-P.2339 2347.

109. Wu, L.C. Identification of a RING protein that can interact in vivo with the BRCA1 gene product/ L.C. Wu, Z.W. Wang, J.T. Tsan ct al. // Nat Genet.- 1996 V.14. -№4. -P.430-440.

110. Yang, H. The BRCA2 homologue Brh2 nucleates RAD51 filament formation at a dsDNA-ssDNA junction/ H. Yang, Q. Li, J. Fan et al. // Nature. 2005. - V.433. -№7026. - P.653-657.

111. Yang, H. BRCA2 function in DNA binding and recombination from a BRCA2-DSSl-ssDNA structure / H. Yang, P.D. Jeffrey J. Miller et al. // Science. 2002. -13,-V.297. -№5588.-P. 1837-1848.

112. Zikan, M. Mutational analysis of the BRCA1 gene in 30 Czech ovarian cancer patients/ M. Zikan, P. Pohlreich, J. Stribrna // J. Genet.-2005.-V.84. № 1.- P.63-67.

113. Zweemer, R.P. Clinical and genetic evaluation of thirty ovarian cancer families/ R.P. Zweemer, R.H. Verheijen, J.J. Guille et al. // Am. J. Obstet. Gynecol.-1998.-V.178.-P.85-90.