Молекулярный анализ гена BRCA1 у больных семейными формами рака молочной железы и яичника в Санкт-Петербурге тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Тихомирова, Оксана Сергеевна

• Тихомирова, Оксана Сергеевна
• кандидат биологических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Тихомирова, Оксана Сергеевна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы

Цель работы

Задачи

Научная новизна

Теоретическая и практическая значение работы

Положения, выносимые на защиту

Апробация работы

Личный вклад диссертанта

Структура и объем диссертации

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Статистика заболеваемости раком молочной железы

1.2 Риск развития рака молочной железы у носительниц мутаций в гене 12 BRCA1 в течение жизни.

1.3 Особенности семейных форм рака молочной железы

1.4 Возможные механизмы развития рака при мутациях в генах 14 опухолевых супрессоров.

1.5 Тканеспецифичность проявления мутаций в гене BRCA

1.6 Другие заболевания, связанные с мутациями в генах BRCA 1 и 18 BRCA

1.7 Роль гена BRCA 1 в развитии рака молочной железы в 19 сопоставлении с другими генами.

1.8 Наследственная предрасположенность к раку молочной железы

1.9 Структура гена и белка BRCA

1.10 BRCA1 и репарация ДНК

1.11 Роль BRCA1 в регуляции транскрипции

1.12 Роль BRCA1 в росте и дифференцировке клеток

1.13 Мутации гена BRCA

1.14 Спектр мутаций в гене BRCA1 в разных популяциях

1.15 Поиск мутаций в гене BRCA 1 в России 41 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 47 2.1 Пациенты

2.2.1 Выделение ДНК из свежей и замороженной крови по методу 47 Кюнкеля

Выделение ДНК из свежей крови

Выделение ДНК из замороженной крови

2.2.2 Электрофорез ДНК в агарозном геле

2.2.3 Полимеразная цепная реакция

2.2.4 Электрофорез ДНК в полиакриламидном геле

2.2.5 Электрофорез в ПААГ в денатурирующих условиях

2.2.6 Гетеродуплексный анализ 56 2.2.7. Рестрикционный анализ

2.2.8 Окрашивание образцов ДНК 57 2.2.8.1 Окрашивание бромистым этидием 57 2 2.8.2 Окрашивание нитратом серебра

2.2.9 Клонирование

2.2.9.1 Лигирование

2.2.9.2 Трансформация E.coli

2.2.10 Тестирование трансформантов путём а - комплементации

2.2.11 Идентификация рекомбинантов путем амплификации 63 клонированных последовательностей.

2.2.12 Выделение плазмидной ДНК

2.2.13 SSCP-анализ (разделение в трис-глициновой системе)

2.2.14 Автоматический флуоресцентный SSCP-анализ

2.2.15 Секвенирование ДНК

2.2.16 Компьютерный анализ и статистическая обработка данных 68 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

3.1 Мутация 2761 del А (с.2761 del А)

3.2 Мутация 4146del3 (с. 4146-4148delGAT)

3.3 Мутация 5382insC (c.5381-5382insC)

3.4 Мутация A622V (с. 1984 A/G)

3.5 Полиморфизм P871L (с.2731 ОТ)

3.6 Полиморфизм S1436S (с.4427Т>С)

3.7 Полиморфизм Q356R (с.1186 A/G)

3.8 Поиск мутаций в 5, 19 и 24 экзонах гена BRCA

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Молекулярный анализ гена BRCA1 у больных семейными формами рака молочной железы и яичника в Санкт-Петербурге»

Актуальность проблемы.

Среди онкологических заболеваний рак молочной железы (РМЖ) является второй по частоте причиной смертности в развитых странах мира, в том числе и в России. Женщины в возрасте 40-59 лет чаще умирают от РМЖ, чем от других злокачественных новообразований. В нашей стране наблюдается тенденция к росту распространенности рака молочной железы из года в год и к снижению возраста, в котором возникает заболевание. Санкт-Петербург является "неблагополучным" районом России по уровню заболеваемости и смертности от данной формы онкопатологии (Аксель, Давыдов, 2002). За последние 25 лет заболеваемость РМЖ в Санкт-Петербурге возросла примерно на 150%.

От 5 до 10% всех случаев РМЖ составляют семейные формы, из которых лучше всего охарактеризованы и наиболее часто встречаются случаи, когда прослеживается связь заболевания с мутациями в генах BRCA1 и BRCA2. Несмотря на то, что частота встречаемости патологических мутаций в гене BRCA1 оценивается как 1:800 - 1:2000 (Баранов и др., 2000), эти случаи привлекают внимание онкологов как высокопенетрантные заболевания, приводящие к гибели пациентов в существенно более раннем (часто в детородном) возрасте, нежели формы рака без сильно выраженной семейной предрасположенности. Поскольку эффективность терапии и хирургии определяется в значительной степени тем, насколько рано выявлено заболевание, идентификация носителей мутаций в гене BRCA1 и последующее диспансерное наблюдение за этими лицами позволяет спасти им жизнь. Проведенные в США исследования на группе из 251 здоровых женщин с типированными мутациями в генах семейства BRCA в течение немногим более двух лет показали эффективность полугодичных осмотров для максимально раннего выявления и удаления опухолей (Scheuer et al., 2002).

В настоящее время в мире известно более 1200 мутаций в гене BRCA1 (Breast Cancer Information Core, BIC). Встречаемость вариантов последовательности гена BRCA1 сильно отличается между разными популяциями и этническими группами, и в каждом регионе есть свои наборы мажорных и минорных мутаций, предрасполагающих к заболеванию. Поэтому только знание национальных и этнических особенностей спектров мутаций может позволить наладить ДНК-диагностику для выявления группы высокого риска развития рака молочной железы. Эффективность лечения рака молочной железы во многом зависит от своевременной диагностики. ДНК-диагностика позволяет выявить предрасположенность к РМЖ и осуществить постановку на учет к онкологу еще до возникновения клинических проявлений заболевания. В связи с постоянным ростом заболеваемости РМЖ проблема ранней диагностики приобретает чрезвычайную актуальность.

Цель работы

Целью работы было изучение спектра мутаций гена BRCA1 у больных семейными формами РМЖ и РЯ из числа жителей Санкт-Петербурга.

Задачи

1. Осуществить поиск мутаций в 5-м, 11-м, 13-м, 19-м и 24-м экзонах гена BRCA1 пациентов с семейными формами РМЖ и рака яичников (РЯ) методами гетеродуплексного анализа и анализа конформационного полиморфизма однонитевых фрагментов ДНК (SSCP-анализа);

2. Изучить встречаемость мутации 5382insC в 20-м экзоне гена BRCA1 у пациентов с раком яичника.

3. Идентифицировать обнаруженные мутации методом секвенирования ДНК.

4. Разработать быстрые методы детекции обнаруженных мутаций.

Научная новизна

У больных с семейными формами рака молочной железы и яичника в Санкт-Петербурге идентифицировано четыре мутации в гене BRCA1: 5382insC, 2761 del A, 4146del3 и A622V. Мутация 5382insC выявлена более чем у трети обследованных больных с раком яичника. Две мутации 2761 del А и 4146del3, обнаруженные в настоящей работе, являются новыми, никем ранее в мире не описанными. Их идентификация свидетельствует о том, что значительная доля мутаций гена BRCA 1 в России придется на неизвестные в мире мутации. Впервые в России обнаружена миссенс-мутация Q356R и показано, что она является редким полиморфным вариантом, не ассоциированным с заболеванием. В Санкт-Петербурге впервые выявлены два сцепленных друг с другом полиморфизма (S1436S, P871L), ранее известных во многих странах мира, и определена частота аллелей этих полиморфных маркеров.

Теоретическая и практическая значение работы.

В результате работы выявлены новые мутации в гене BRCA1, характерные только для Санкт-Петербурга, а также показано, что миссенс-мутация Q356R является редким полиморфным вариантом, не ассоциированным с заболеванием. Эти данные следует учитывать при проведении ДНК - диагностики для выявления групп высокого риска развития рака молочной железы и рака яичника. Для всех обнаруженных нами мутаций разработаны методы экспресс-диагностики, которые могут быть использованы для генетического консультирования в семьях больных семейными формами РМЖ, а также для выявления предрасположенности к этому заболеванию в популяционных исследованиях. Теоретическим выводом из работы является установленная специфика спектра мутаций гена BRCA1 на Северо-Западе России.

Положения, выносимые на защиту.

1. В Санкт-Петербургской популяции в гене BRCA1 распространены как известные в других популяциях мира мутации, так и специфичные для России.

2. Значительная доля семейных случаев рака яичника в Санкт-Петербургской популяции может быть связана с носительством мутации 5382insC в 20-м экзоне гена BRCA1.

3. Из числа идентифицированных изменений последовательности гена BRCA1 некоторые, такие как 2761 del A, 4146del3, являются вероятной причиной предрасположенности к РМЖ, а другие варианты, такие как Q356R, P871L и S1436S, не ассоциированы с повышенным риском развития заболевания.

Апробация работы

По теме диссертации опубликовано 13 научных работ в отечественных журналах, а также в сборниках по материалам конференций. Материалы работы докладывались на следующих конференциях: 7-ая Всероссийская медико-биологическая конференция молодых исследователей "Человек и его здоровье" (Санкт-Петербург, 2004), юбилейная научная конференция молодых ученых Северо-Западного региона, посвященная 60-летию Российской академии медицинских наук (Санкт-Петербург, 2004), Петровские чтения-2005, 2006 "Конференция по фундаментальной онкологии" (Санкт-Петербург, 2005, 2006), "Молекулярная генетика онкологических заболеваний" (Новосибирск, 2007). В полном объеме диссертация заслушана на семинаре Отдела молекулярной генетики ГУ НИИЭМ РАМН.

Личный вклад диссертанта.

Диссертантом лично выполнены все исследования, описанные в работе, за исключением секвенирования нескольких образцов, которое проводилось в фирме «Helix».

Структура и объем диссертации

Диссертационная работа изложена на 113 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, результатов и их обсуждений, выводов, списка литературы. Текст диссертации иллюстрирован 26 рисунками и 9 таблицами. Список литературы включает 119 источников, из них 13 отечественных и 106 зарубежных.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Тихомирова, Оксана Сергеевна

выводы.

1. У больных семейными формами рака молочной железы и яичника идентифицированы четыре мутации в гене BRCA1: 5382insC, 2761 del А, 4146del3 и A622V. Как вероятная причина развития РМЖ рассматриваются делеции 2761 del А и 4146del3, описанные впервые в мире.

2. При семейных формах рака яичника в Санкт-Петербурге мажорной мутацией в гене BRCA1 является мутация 5382insC в 20-м экзоне гена. Встречаемость этой мутации у больных семейными формами рака яичника выше, чем у больных семейными формами рака молочной железы.

3. Миссенс-мутация Q356R не ассоциирована с повышенным риском заболевания и должна рассматриваться как нейтральный полиморфный вариант, что показано впервые в России.

4. Варианты последовательности P871L и S1436S, обнаруженные в этом исследовании, не ассоциированы с повышенным риском развития РМЖ в Санкт-Петербургской популяции, как и в других популяциях мира.

5. Методы гетеродуплексного, рестрикционного и SSCP-анализа являются простыми и удобными для быстрого скрининга мутаций гена BRCA1, идентифицированных в данном исследовании.

3.9 Заключение.

В результате исследования было проанализировано 17 фрагментов гена BRCA1 у 43 больных с семейными формами рака молочной железы и 7 больных с раком яичника, а также в некоторых случаях, у группы контроля и идентифицировано 7 различных вариантов последовательности гена BRCA1.

Четыре варианта, исходя из их частоты встречаемости, мы охарактеризовали как мутации, остальные три являются известными ранее полиморфизмами. Две мутации (2761 delA, 4146del3) обнаружены впервые в мире и никем ранее не описаны, являются вариантами, предрасполагающими к развитию РМЖ.

В течение нескольких лет работы по изучению спектра мутаций в гене BRCA1 у больных с семейными формами рака молочной железы и яичника суммарно было идентифицировано 10 мутаций у 17 пациентов из 50 исследованных (34%) (43 пробанда с раком молочной железы и 7 с раком яичника) (Рис.3.17А). Такой результат сравним с результатами, полученными в других странах Европы и регионах России, где процент семей с функционально значимыми мутациями варьировал от 10 до 42% (Табл. 3.3). Другой аспект при рассмотрении идентифицированных мутаций - их классификация по типам (Рис.3.17Б). Большинство (64%) обнаруженных мутаций приводят к сдвигу рамки считывания и преждевременной терминации трансляции мРНК гена BRCA1. Подобные изменения последовательности гена BRCA1 связаны с повышенным риском развития рака молочной железы. Остальную часть спектра составили миссенс-мутации и неклассифицированные варианты мутаций. Полученное на основе наших российских данных распределение совпадает с распределением мутаций по типам в мире по материалам базы данных Breast Cancer Information Core (BIC).

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Тихомирова, Оксана Сергеевна, 2007 год

1. ЬАйала Ф., Кайгер Дж. Современная генетика, (в Зх томах)// (1988) Москва, Мир т.З.

2. Аксель Е.М., Давыдов М И. Статистика заболеваемости и смертности от злокачественных образований в 2000 году.// Злокачественные новообразования в России и странах СНГ в 2000 году (2002) 85-106.

3. Баранов B.C., Баранова Е.В., Иващенко Т.Э., Асеев М.В. Геном человека и гены «предрасположенности». (Введение в предиктивную медицину).// (2000) СПб:Интермедика.

4. Баранова А.В., Янковский Н.К. Гены супрессоры опухолевого роста.// Молекулярная Биология (1998) т. 32, № 2. с. 206-218.

5. Горбунова В.Н., Баранов B.C. Введение в молекулярную диагностику и генотерапию наследственных заболеваний.// Санкт-Петербург: Специальная литература (1997) 286

6. Грудинина Н.А, Голубков В.И.,. Тихомирова О.С. и др. Преобладание широко распространенных мутаций в гене BRCA1 у больных семейными формами рака молочной железы Санкт-Петербурга.// Генетика. (2005) 41(3):405—410.

7. Карпухин А.В., Поспехова Н.И., Любченко Л.Н. и др. Частоты однонуклеотидных полиморфизмов и мутаций в гене BRCA1 при наследственно обусловленном раке молочной железы и яичников.// Доклады академии наук (2002) 383(5):706-709.

8. Лакин Г.Ф. Биометрия //(1973) Москва: Высшая школа.

9. Мандельштам М.Ю., Голубков В.И., Ламбер Е.П. и др. Поиск часто встречающихся мутаций в генах предрасположенности к раку молочной железы.// Генетика (2001) 37( 12): 1681 -1686.

10. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование.// Москва: Мир (1984) 480 с.

11. П.Остерман JI. А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот. Электрофорез и ультрацентрифугирование.// Москва:Наука (1981) с. 131-135.

12. Рыбчин В.Н. Основы генетической инженерии.// СПб: Изд-во СПбГТУ (1999) 522 с.

13. Тихомирова О.С., Грудинина Н.А., Голубков В.И., Мандельштам М.Ю., Васильев В.Б. Новые мутации в гене BRCA1 у пациентов с раком молочной железы из Санкт-Петербурга.//Л?«егаика, (2007) 43(9).

14. Anderson S.F., Schlegel В.Р., Nakajima Т., Wolpin E.S., Parvin J.D. BRCA1 protein is linked to the RNA polymerase II holoenzyme complex via RNA helicase.// A. Nat. Genet. (1998) 19:254-256.

15. Antoniou A.C., Gayther S.A., Stratton J.F. et al. Risk models for familial ovarian and breast cancer // Genet. Epidemiol. 2000. - Vol. 18, N 2. - P. 173 — 190.

16. Arason A., Barkardottir R.B., Egilsson V. Linkage analysis of chromosome 17q markers and breast-ovarian cancer in Icelandic families, and possible relationship to prostatic cancer. Am. J. Hum. Genet. (1993) 52: 711-717.

17. Arver В., Quan Du., Chen J. et al., Hereditary breast cancer: a review //Cancer biology, Vol. 10, 2000: pp. 271-288

18. Backe J., Hofferbert S., Skawran В., et al: Frequency of BRCA1 mutation 5382insC in German breast cancer patients.// Gynecol. Oncol. (1999) 72:402406.

19. Balci A., Huusko P., Paakkonen K. et al. Mutation analysis of BRCA1 and BRCA2 in Turkish cancer families: a novel mutation BRCA2 3414deI4 found in male breast cancer.// Eur. J. Cancer (1999) 35(5):707-10.

20. Baudi F., Quaresima В., Grandinetti C. et al. Evidence of a Founder Mutation of BRCA1 in a highly homogeneous population from Southern Italy with breast/ovarian cancer.// Human Mutation:Mutation in Brief #431 (2001) Online.

21. Bell G.I., Karam J.H., Rutter W.J. Polymorphic DNA region adjacent to the 5'-end of the human insulin gene.// Proc. Natl. Acad. Sci. (1981) 78: 57595763.

22. Beller U, Halle D, Catane R et al. High frequency of BRCA1 and BRCA2 germline mutations in Ashkenazi Jewish ovarian cancer patients, regardless of family history.// Gynecol. Oncol. (1997) 67(2):123-126.

23. BIC (Breast Cancer Informational Core): http://www.nhgri.nih.gov/Intramural research/Lab transfer/Bic/

24. Bork P., Hofmann K., Bucher P., Neuwald A.F., Altschul S.F., Koonin E.V. A superfamily of conserved domains in DNA damage-responsive cell cycle checkpoint proteins. UFASEB J. (1997) 11:68-76.

25. Callebaut I., Mornon J.P. From BRCA1 to RAP1: a widespread BRCT module closely associated with DNA repair. IIFEBSLett. (1997) 400:25-30;

26. Chen C.F., Li S., Chen Y., Chen P.L., Sharp Z.D., Lee W.H. The nuclear localization sequences of the BRCA1 protein interact with the importin-a subunit of the nuclear transport signal receptor. HJ. Biol. Chem. (1996(a)) 271:32863-32868.

27. Chen Y., Farmer A.A., Chen C.F., Jones D.C., Chen P.L., Lee W.H. BRCA1 is a 220 kDa nuclear phosphoprotein that is expressed and phosphorylated in a cell cycle dependent manner. I I Cancer Res. (1996(6)) 56:3168-3172.

28. Chen Y., Lee W.-H., Chew H.K. Emerging roles of BRCA1 in transcriptional regulation and DNA repairЛ J. of Cellular Physiology (1999) 181:385-392.

29. Claes K., Machackova E., De Vos M., et. al. Mutation analysis of the BRCA1 and BRCA2 genes in the Belgian patient population and identification of a Belgian founder mutation BRCA1 IVS5 + ЗА > G.// Dis. Markers (1999) 15:69-73.

30. Claus E.B.; Risch N.; Thompson W.D. Genetic analysis of breast cancer in the cancer and steroid hormone study.// Am. J. Hum. Genet. (1991) 48: 232242.

31. Claus E.B., Schildkraut J.M., Thompson W.D., Risch N.J. The genetic attributable risk of breast and ovarian cancer.// Cancer (1996) 77:2318-2324.

32. Csokay В., Tihomirova L., Stengrevics A., Sinicka 0., Olah E. Stron g founder effects in BRCA1 mutation carrier breast cancer patients from Latvia.// Human Mutation:Mutation in Brief #2585 (1999) Online.

33. Dufault M.R., Betz В., Wappenschmidt B. et al. Limited relevance of the СНЕК2 gene in hereditary breast cancer // Int. J. Cancer. 2004. - Vol. 110, N 3.-P. 320-325.

34. Durocher F., Tonin P., Shattuck-Eidens D., Skolnick M., Narod S.A., Simard J. Mutation analysis of the BRCA1 gene in 23 families with cases of cancer of the breast, ovary, and multiple other sites.// J. Med. Genet. (1996) 33(10):814-819.

35. Easton D.F., Bishop D.T., Ford D., Crockford G.P. Genetic linkage analysis in familial breast and ovarion cancer: results from 214 families. The Breast Cancer Linkage Consortium Л Am. J. Hum. Genet. (1993) 52:678-701.

36. Einbeigi Z., Bergman A., Kindblom L.G. et al. A founder mutation of the BRCA1 gene in Western Sweden associated with a high incidence of breast and ovarian cancer Л Eur. J. Cancer. (2001) 37(15):1904-1909.

37. Erkko H., Xia В., Nikkila J. et al. A recurrent mutation in PALB2 in Finnish cancer families.// Nature (2007) 446:316-319

38. Evans D.G., Howell A. Are BRCA1- and BRCA2-related breast cancers associated with increased mortality? // Breast Cancer Res. (2004) 6:8-17.

39. Fan S., Wang J., Yuan R., Ma Y., Meng Q., Erdos M.R., Pestell R.G., Yuan F., Auborn K.J., Goldberg I.D., Rosen E.M. BRCA1 inhibition of estrogen receptor signalling in trsncfected cells Л Science (1999) 284:1354-1356.

40. Fodor F.H., Weston A., Bleiweis I.J. et al. Frequency and carier risk associated with common BRCA1 and BRCA2 mutations in Ashkenazi Jewish breast cancer patients II Am. J. Hum. Genet. (1998) 63:45-51.

41. Friedman L.S., Ostermeyer E.A., Szabo C.I. et al. Confirmation of BRCA1 by analysis of germline mutations linked to breast and ovarian cancer in ten families.// Nature Genet. (1994) 8:399-404.

42. Gayther S.A., Harrington P., Russell P. et al. Frequently occurring germ-line mutations of the BRCA1 gene in ovarian cancer families from Russia.// Am. J. Human. Genet. (1997) 5:1239-1242.

43. Gayther S.A., Russell P., Harrington P. et al. The contribution of germline BRCA1 and BRCA2 mutations to familial ovarian cancer: no evidence for other ovarian cancer-susceptibility genes.// Am. J. Hum. Genet. (1999) 65:1021-1029.

44. Goelen G., Teugels E., Bonduelle M. et al. High frequency of BRCA1/2 germline mutations in 42 Belgian families with a small number of symptomatic subjects.// J. Med. Genet. (1999) 36(4):304-308.

45. Gorski В., Byrski Т., Huzarski T.et al. Report founder mutations in the BRCA1 gene in Polish families with breast-ovarian cancer.// Am. J. Hum. Genet. (2000) 66:1963-1968.

46. Gowen L.C., Johnson B.L., Latour A.M. et al. Brcal deficiency results in early embryonic lethality characterized by neuroepithelial abnormalities.// Nature Genet. (1996) 12:191-194.

47. Greenman J., Mohammed S., Ellis D. et. al. Identification of missens and truncating mutations in the BRCA1 gene in sporadic and familial breast and ovarian cancer.// Genes, Chrom. and Cancer (1998) 21:244-249

48. Grzybowska E., Zientek H., Jasinska A. et al. High frequency of recurrent mutations in BRCA1 and BRCA2 genes in Polish families with breast and ovarian cancer // Hum. Mutat. (2000) 16(6):482-490.

49. Hadjisawas A., Adamou A., O'Dowdphanis C. et al. Q356R and S1512I are BRCA1 variants that may be associated with breast cancer in a Cypriot family.// Oncology reports (2002) 9:383-366.

50. Hakem R., de la Pompa J.L., Sirard C. et al. The tumor suppressor gene Brcal is required for embryonic cellular proliferation in the mouse.// Cell (1996)85:1009-1023.

51. Hall J.M., Lee M.K., Newman B. et al. Linkage of early-onset familial breast cancer to chromosome 17q21.// Science (1990) 250:1684-1689.

52. Harkin P.D., Bean J.M., Miklos D.et al. Induction of GADD45 and JNK/SAPK-dependent apoptosis following inducible expression of BRCA1.// Cell (1999) 97:575-586.

53. Hilakivi-Clarke L. Estrogens, BRCA1, and breast cancer. Cancer Res. (2000) 60(18):4993-5001.

54. Huusko P. Predisposing genes in hereditery breast and ovarian cancer.

55. Oulun Yliopisto, Oulu (1999) Сhttp://herkules.oulu.fi/issn03553221/)

56. Isaacs S.D.; Kiemeney L.A.L.M.; Baffoe-Bonnie A.et al. Risk of cancer in relatives of prostate cancer probands.// J. Nat. Cancer Inst. (1995) 87: 991-996.

57. Janezic S.A, Ziogas A, Krumroy L.M. et al. Germline BRCA1 alterations in a population-based series of ovarian cancer cases.// Hum. Molec. Genet. (1999) 8:889-897.

58. Jasin M. LOH and Mitotic recombination.// DNA Alternations in cancer. Ed. Ehrlich M. (2000) Eaton Publishing:Natick, MA.

59. Jacquemier J, Lidereau R, Birnbaum D. et al. Assessing the risk of BRCAl-associated breast cancer using individual morphological criteria // Histopathol. (2001) 38:378-379.

60. Jasinska A, Krzyzosiak W.J. Prevalence of BRCA1 founder mutations in Western Poland.// Human Mutation:Mutation in Brief #389 (2000) Online.

61. Kauff N.D, Perez-Segura P, Robson M.E. et al. Incidence of non-founder BRCA1 and BRCA2 mutations in high risk Ashkenazi breast and ovarian cancer families.///, of Medical Genet. (2002) 39:611-614.

62. King M.-C, Marks J.H., Mandell J.B, New York Breast Cancer Study Group. Breast and ovarian cancer risks due to inherited mutations in BRCA1 and BRCA2 // Science (2003) 302(5645):643-646.

63. Koonin E.V, Altschul S.F, Bork P. BRCA1 protein products: functional motifs.// Nature Genet. (1996) 13:266-267.

64. Krainer M., Silva-Arrieta S, Fitzgerald M.G. et al. Differential contributions of BRCA1 and BRCA2 to early-onset breast cancer.// New Eng. J. Med. (1997) 336:1416-1421.

65. Kunkel L.M, Smith K.D, Boyer S.H. et al. Analyses of human Y-chromosome-specific reiterated DNA in chromosome variants.// Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1977) 74:1245-1249.

66. Lakhani S.R., Jacquemier J., Sloane J.P. et al. Multifactorial analysis of differences between sporadic breast cancers and cancers involving BRCA1 and BRCA2 mutations //J. Natl. Cancer. Inst. (1998) 90(15): 1138-1145.

67. Langston, A. A.; Malone, К. E.; Thompson, J. D. et al. BRCA1 mutations in a population-based sample of young women with breast cancer.// New Eng. J. Med. (1996) 334: 137-142.

68. Levitt N.C., Hickson I.D. Caretaker tumour suppressor genes that defend genome integrity .//TRENDS in Molecular Medicine (2002) 8(4):179-186.

69. Levy-Lahad E., Catane R., Eisenberg Sh. et. al. Found er BRCA1 and BRCA2 mutations in Ashkenazi Jews in Israel: Frequency and differential penetrance in ovarian cancer and in breast-ovarian families.// Am. J. Human. Genet. (1997) 60:1059-1067.

70. Li S., Chen P.L., Subramanian T. et al. Binding of CtIP to the BRCT repeats of BRCA1 involved in transcription regulation of p21 is disrupted upon DNA damage.// J. Biol. Chem. (1999) 274:11334-11338.

71. Liu C.Y., Flesken- Nikitin A., Li S. et al. Inactivation of the mouse Brcal gene leads to failure in the morphogenesis of the egg cylinder in early postimplantation development.// Genes Dev. (1996) 10:1835-1843.

72. Lu M., Conzen S.D., Cole C.N., Arrick A. Characterization of functional messenger RNA splice variants of BRCA1 expressed in nonmalignant and tumor-derived breast cells.// Cancer Res. (1996) 56:4578-4581.

73. Machackova E., Damborsky J., Valik D., Foretova L. Novel germline BRCA1 and BRCA2 mutations in breast and breast/ovarian cancer families from the Czech Republic.// Human Mutation:Mutation in Brief #459 (2001) Online.

74. Machackova E., Navratilova M., Pavlu H. et al. Germline mutations in BRCA1 and BRCA2 genes in the Czech hereditary forms of breast/ovarian cancer.// Abstract book of 11th international Congress of Human Genetics. Stratsburg, France (2002).

75. Mandelshtam M.Ju., Chakir Kh., Shevtsov S.P. et al. Prevalence of Lithuanian mutation among St.Petersburg Jews with familial hypercholesterolemia // Hum. Mutat. (1998) 12(4):255-258.

76. Manguoglu A.E., Luleci G., Ozcelik T. et al. Germline mutations in the BRCA1 and BRCA2 genes in Turkish breast/ovarian cancer patients.// Hum. Mutat. (2003) 21(4):444-445.

77. Meijers-Heijboer H., van den Ouweland A., Klijn J. et al. Low-penetrance susceptibility to breast cancer due to CHEK2 * llOOdelC in noncarriers of BRCA1 or BRCA2 mutations.//Ata. Genet. (2002) 31(l):55-59.

78. Miki Y., Swensen J., Shattuck-Eidens D. et al. A strong candidate for the breast and ovarian cancer susceptibility gene BRCA1.// Science (1994) 266:6671.

79. Nadeau G., Boufaied N., Moisan A., et al. BRCA1 can stimulate gene transcription by a unique mechanism Л EMBO Reports. (2000) l(3):260-265.

80. Narod S.A., Foulkes D.W. BRCA1 and BRCA2:1994 and beyond.// Nature Reviews. Cancer. (2004)4:665-676.

81. Nastiuk K.L., Mansukhani M., Terry M.B. et al. Common mutations in BRCA1 and BRCA2 do not contribute to early prostate cancer in Jewish men.// Prostate (1999) 40: 172-177.

82. Neuhausen S., Gilewski Т., Nortron L. et. al. Recurrent BRCA2 6174deIT mutations in Ashkenazi Jewish women affected by breast cancer.// Nature Genet. (1996) 13:126-128.

83. Peelen Т., van Vliet M., Petrij-Bosch A., et al: A high proportion of novel mutations in BRCA1 with strong founder effects among Dutch and Belgian hereditary breast and ovarian cancer families.// Am. J. Hum. Genet. (1997) 60:1041-1049.

84. Perkowska M., Brozek I., Wysocka B.et al. BRCA1 and BRCA2 mutation analysis in breast-ovarian cancer families from Northeastern Poland.// Human Mutation:Mutation in Brief #610 (2003) Online.

85. Petrij-Bosch A., Peelen Т., van Vliet M., et. al. BRCA1 genomic deletions are major founder mutations in Dutch breast cancer patients.// Nat. Genet. (1997) 17:341-345.

86. Phelan C.M., Kwan E., Jack E. et al. A low frequency of non-founder BRCA1 mutations in Ashkenazi Jewish breast-ovarian cancer families.// Human Mutat. (2002) 20(5):352-357.

87. Roa B.B., Boyd A.A., Volcik K., Richards C.S. Ashkenazi Jewish population frequencies for common mutation in BRCA1 and BRCA2.// Nature Genet. (1996) 14:185-187.

88. Robson M.E., Boyd J., Borgen P.I., Cody H.S. Hereditary breast cancer.// Curr. Probl. Surg. (2001) 38:387-480.

89. Sanger F., Nicklen S., Coulson A.R. DNA sequencing with chain-terminating inhibitors.//Proc. Natl. Acad. Sci. USA. (1977) 74: 5463-5467.

90. Seen. D., Wu. Y., Chillar R., Vadgama J.V. Missense alterations of BRCA1 gene detected in diverse cancer patients.// Anticancer Res. (2000) 20(2B): 1129-32.

91. Scheuer L., KauffN., Robson M.et al. Outcome of preventive surgery and screening for breast and ovarian cancer in BRCA mutation carriers.// J. Clin. Oncol. (2002) 20(5):1260-1268.

92. Schorge J.O., Muto M.G., Welch W.R.et al. Molecular evidence for multifocal papillary serous carcinoma of the peritoneum in patients with germline BRCA1 mutations.// J. Nat. Cancer Inst. (1998) 90: 841-845.

93. Schutte M., Seal S., Barfoot R. et al. Variants in CHEK2 other than llOOdeIC do not make a major contribution to breast cancer susceptibility.// Am. J. Hum. Genet. (2003) 72(4):1023-1028.

94. Scully R., Chen J.J., Ochs R.L. et al. Dynamic changes of BRCA1 subnuclear location and phosphorylation state are initiated by DNA damage.// Cell (mi) 90:425-435

95. Shiri-Sverdlov R., Oefner P., Green L. et al. Mutational analyses of BRCA1 and BRCA2 in Ashkenazi and non-Ashkenazi Jewish women with familial breast and ovarian cancer.// Human Mutation (2000) 16, 6:491-501.

96. Smith T.M., Lee M.K., Szabo C.I. et al. Complete genomic sequence and analysis of 117 kb of human DNA containing the gene BRCA1.// Genome Res. (1996) 6(ll):1029-49.

97. Struewing J.P., Hartge P., Wacholder S. et al. The risk of cancer associated with specific mutations of BRCA1 and BRCA2 among ashkenazi jews.// The New England Journal of Medicine (1997) 336(20):1401-1408.

98. Tereshenko I.V., Basham V.M., Ponder B.A.J., Pharoah P.D.P. BRCA1 and BRCA2 mutations in russian familial breast cancer.// Human Mutation:Mutation in Brief #479 (2002) Online.

99. Thompson M.E., Jensen R.A., Obermiller P.S. et al. Decreased expression of BRCA1 accelerates growth and is often present during sporadic breast cancer progression.// Nature Genet. (1995) 9:444-450.

100. Tobias D.H., Eng C., McCurdy L.D. et al. Founder BRCA 1 and 2 mutations among a consecutive series of Ashkenazi Jewish ovarian cancer patients Л Gynecol Oncol. (2000) 78(2): 148-51.

101. Vehmanen P., Friedman L.S., Eerola H. et al. Low proportion of BRCA1 and BRCA2 mutations in Finnish breast cancer families: evidence for additional susceptibility genes Л Hum. Mol. Genet. (1997) 6(13):2309-2315.

102. Venkitaraman A.R. Cancer susceptibility and the functions of BRCA1 and BRCA2.// Cell (2002) 108:171-182.

103. Wang Q., Zhang H., Kajino K., Greene M.I. BRCA1 binds c-Myc and inhibits its transcriptional and transforming activity in cells.// Oncogene (1998) 17:1939-1948.

104. Wang Y., Cortez D., Yazdi P. et al. BASC, a super complex of BRCA1-associated proteins involved in the recognition and repair of aberrant DNA structures.// Genes Dev. (2000) 14(8):927-939.

105. Wilson C.A., Payton M.N., Elliott G.S. et al. Differential subcellular localization, expression and biological toxicity of BRCA1 and the splice variant BRCAl-Dllb.// Oncogene (1997) 14: 1-16.

106. Wong A.K., Ormonde P.A., Pero R. et al. Characterization of a carboxy-terminal BRCA1 interacting protein.// Oncogene (1998) 17:2279-2285.

107. Wooster R., Bignell G., Lancaster J. et al. Identification of the breast cancer susceptibility gene BRCA2.// Nature (1995) 378(6559):789-792.

108. Wooster R., Weber B.L. Breast and ovarian cancer.// New Engl. J. Med. (2003) 348(23):2339-2347.

109. Wooster R., Bignell G., Lancaster J. et al. Identification of the breast cancer susceptibility gene BRCA2Л Nature (1995) 378:789-792.

110. Xu C.-F., Brown M.A., Chambers J.A. et al. Distinct transcription start sites generate two forms of BRCA1 mRNA.// Hum. Mol. Genet. (1995) 4:22592264.

111. Xu C.-F., Chambers J.A., Nicolai H. et al. Mutations and alternative splicing of the BRCA1 gene in UK breast/ovarian cancer families.// Genes Chrom. Cancer (1997) 18:102-110.

112. Yu X., Wu L.C., Bowcock A.M. et al. The C-terminal (BRCT) domains of BRCA1 interact in vivo with CtIP, a protein implicated in the CtBP pathway of transcriptional repression.// J. Biol. Chem. (1998)273:25388-25392.

113. Zheng L., Annab L.A., Afshari C.A. et al. BRCA1 mediates Iigand-independent transcriptional repression of the estrogen receptor.// /W^S^OOl) 98( 17):95 87-9592.