Патогенетически обоснованный метод стимуляции регенерации печеночной ткани при ССl#34#1-гепатите на основе модуляции функций эндогенных стволовых клеток тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.16, кандидат медицинских наук Сотникова, Наталья Владимировна

• Сотникова, Наталья Владимировна
• кандидат медицинских наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Сотникова, Наталья Владимировна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Особенности регенерации печени при ее хроническом поражении

1.2. Гепатопрокторы и ограничения в их применении при хроническом поражении печени.

1.3. Возможность применения стволовых клеток для стимуляции регенерации печени и проблемы, связанные с их использованием.

1.4. Мобилизация стволовых клеток с помощью фармакологических средств.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ.

2.1. Материал исследования.

2.2. Экспериментальная модель.

2.3. Методы исследования.

2.3.1. Биохимические исследования.

2.3.2. Морфологическое исследование.

2.3.3. Определение показателей периферической крови.

2.3.4. Выделение фракции мононуклеаров из периферической крови мышей.

2.3.5. В ыделение клеток костного мозга мышей.

2.3.6. Исследование структурно-функциональной организации костного мозга

2.3.7. Определение способности адгезирующих клеток костного мозга к связыванию стромальных предшественников (КОЕ-Ф).

2.3.8. Определение содержания КОЕ-Ф в костном мозге и периферической крови.

2.3.9. Метод количественного определения содержания мезенхимальных стволовых клеток в костном мозге и периферической крови.

2.3.10. Методика клонирования in vitro регионарных клеток-предшественников печени.

2.3.11. Обработка результатов.

3.1. Изучение особенностей поражения и регенерации печени на модели хронического поражения, вызванного CCL4.

3.1.1. Относительный прирост массы тела и весовой индекс печени.

3.1.2. Активность ферментов в сыворотке крови.

3.1.3. Морфология печени.

3.2. Изучение состояния различных пулов стволовых клеток при хроническом поражении печени CCL4.

3.2.1. Состояние периферической крови.

3.2.2. Структурно-функциональная организация костного мозга.

3.2.3. Количество мезенхимальных стволовых клеток в костном мозге и периферической крови.

3.2.4. Количество КОЕ-Ф в костном мозге и периферической крови.

3.2.5. Способность адгезирующих клеток костного мозга связывать стромальные предшественники.

3.2.6. Количество регионарных клеток-предшественников в печени.

3.3. Изучение гепатопротекторгного действия препарата анти-Г-КСФ на модели хронического поражения печени ССХ4.

3.3.1. Относительный прирост массы тела и весовой индекс печени.

3.3.2. Активность ферментов в сыворотке крови.

3.3.3. Морфология печени.

3.4. Изучение механизмов гепатопротекторного действия сверхмалых доз антител к Г-КСФ.

3.4.1. Состояние периферической крови.

3.4.2. Структурно-функциональная организация костного мозга.

3.4.3. Количество мезенхимальных стволовых клеток в костном мозге и периферической крови.

3.4.4. Количество КОЕ-Ф в костном мозге и периферической крови.

3.4.5. Способность адгезирующих клеток костного мозга связывать стромальные предшественники.

3.4.6. Количество регионарных клеток-предшественников в печени.

3.5. Изучение гепатопротекторгного действия Г-КСФ на модели хронического поражения печени ССЬ4.

3.5.1. Относительный прирост массы тела и весовой индекс печени.

3.5.2. Активность ферментов в сыворотке крови.

3.5.3. Морфология печени.

3.6. Изучение механизмов гепатопротекторного действия Г-КСФ

3.6.1. Состояние периферической крови.

3.6.2. Структурно-функциональная организация костного мозга.

3.6.3. Количество мезенхимальных стволовых клеток в костном мозге и периферической крови.

3.6.4. Количество КОЕ-Ф в костном мозге и периферической крови.

3.6.5. Способность адгезирующих клеток костного мозга связывать стромальные предшественники.

3.6.6. Количество регионарных клеток-предшественников в печени.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Патогенетически обоснованный метод стимуляции регенерации печеночной ткани при ССl#34#1-гепатите на основе модуляции функций эндогенных стволовых клеток»

Актуальность проблемы. Заболевания печени и желчевыводящих путей являются весьма распространенными во всем мире и занимают одно из ведущих мест в структуре заболеваемости и смертности населения нашей страны. Опасность для здоровья и социальная значимость патологии печени различной этиологии определяют необходимость постоянной разработки новых эффективных патогенетически обоснованных методов фармакологической терапии и профилактики данных заболеваний [Подымова С.Д., 1998; Саратиков A.C., Венгеровский А.И., 2000].

Так, хорошо известно, что хронический гепатит различной этиологии может длиться многие годы, при этом его часто диагностируют на поздних стадиях развития болезни, когда резко возрастает вероятность развития цирроза печени и хронической печеночной недостаточности [Хазанов А.И., 2002]. В связи с вышесказанным, разработка методов, способных эффективно стимулировать регенерацию печени, остается весьма актуальной.

Полученные в последние годы сведения о свойствах и закономерностях жизнедеятельности мультипотентных клеток-предшественников открыли возможность развития нового направления в медицине - клеточной терапии [Сухих Г.Т., Малайцев В.В. и др., 2002; Owen М., Friedenstein A.J., 1988; In't Anker P.S., Noort W.A., Scherjon S.A. et al., 2003]. Клеточная терапия представляет собой совокупность методических подходов, направленных на стимуляцию восстановления функционально активной здоровой ткани на месте повреждения, преимущественно, за счет активации и использования регенераторного потенциала различных типов стволовых клеток организма.

К настоящему времени получены данные о наличии во многих тканях организма мезенхимальных стволовых клеток (МСК) [Сухих Г.Т., Малайцев В.В. и др., 2002; Orlic D., Kajstura J.,Chimenti S. et al., 2001; In't Anker P.S., Noort W.A., Scherjon S.A. et al., 2003].

В недавних исследованиях была доказана способность стволовых клеток костного мозга мигрировать в область поврежденной печени [Alison M.R., Poulsom R., Jeffery R. et al., 2000; Theise N.D., Nimmakayalu M., Gardner R. et al., 2000; Körbling M., Katz R.L., Khanna A. et al., 2002].

Поскольку в литературе описаны положительные результаты при трансплантации собственных стволовых клеток костного мозга больным с циррозом печени, можно предположить, что мезенхимальные стволовые клетки в определенных условиях способны дифференцироваться в печеночные клетки [Miyazaki M., Akiyama I., Sakaguchi M. et al., 2002; Newsome P. N., 2003; Ishikawa F., 2003; Kakinuma S., Tanaka Y., Chinzei R., Watanabe M. et al., 2003; Hong S.H., Gang E.J., Jeong J.A. et al., 2005]. Одним из наиболее перспективных направлений развития метода клеточной терапии представляется мобилизация эндогенных стволовых клеток и их последующий хоминг в пораженные ткани с помощью фармакологических агентов. По данным литературы, наиболее мощным стимулятором мобилизации регенераторно-компетентных клеток считается гранулоцитарный колониестимулирующий фактор (Г-КСФ) [Козлов В.А., Сенников C.B., 2004; Theocharis S.E., Margeli А.Р., Kittas C.N., 1999; Di Campli С., Piscaglia A.C., Pierelli L. et al., 2004; Yannaki E., Athanasiou E., Xagorari A. et al., 2005].

В то же время известно, что сверхмалые дозы антител к эндогенным регуляторам физиологических функций способны оказывать эффект, аналогичный тому, который осуществляют данные биологически активные вещества in vivo [Эпштейн О.И., Штарк М.Б., Дыгай A.M. и др., 2005].

С указанных позиций несомненный теоретический и практический интерес представляет изучение возможности модуляции функций различных классов эндогенных стволовых клеток с помощью препаратов на основе Г-КСФ и сверхмалых доз антител к Г-КСФ (анти-Г-КСФ). Полученные в этом направлении данные позволили бы разработать принципиально новый патогенетически обоснованный способ стимуляции процессов регенерации в печени, в частности, при хронических гепатитах.

Цель исследования. Изучить состояние различных пулов стволовых клеток на модели ССЦ-гепатита. Разработать патогенетически обоснованный способ терапии хронического гепатита на основе модуляции функций стволовых клеток препаратами гранулоцитарного колониестимулирующего фактора и сверхмалых доз антител к гранулоцитарному колониестимулирующему фактору.

Задачи исследования:

1. Изучить состояние костномозгового и циркулирующего пулов мезенхимальных клеток-предшественников разной степени зрелости, а также регионарных стволовых клеток печени при экспериментальном хроническом гепатите.

2. Исследовать гепатопротекторную активность препарата гранулоцитарного колониестимулирующего фактора на модели хронического гепатита.

3. Исследовать гепатопротекторную активность препарата сверхмалых доз антител к гранулоцитарному колониестимулирующему фактору на модели хронического гепатита.

4. Изучить механизмы гепатопротекторного действия препаратов сверхмалых доз антител к гранулоцитарному колониестимулирующему фактору и гранулоцитарного колониестимулирующего фактора.

Научная новизна. В работе впервые всесторонне изучено состояние различных пулов мезенхимальных клеток-предшественников в костном мозге и периферической крови, а также динамика содержания регионарных клеток-предшественников в печени при экспериментальном хроническом гепатите. Выявлено участие мезенхимальных стволовых клеток костного мозга в процессах регенерации печени при ее хроническом поражении. Полученные результаты свидетельствуют о недостаточности либо несостоятельности указанных механизмов для восстановления печеночной ткани.

В эксперименте на модели СС14-гепатита изучены гепатопротекторные свойства препаратов Г-КСФ и сверхмалых доз антител к Г-КСФ. Показана высокая противосклеротическая эффективность данных средств, а также противовоспалительная активность препарата анти-Г-КСФ. Установлено, что гепатопротекторное действие обоих препаратов связано со стимуляцией, мобилизацией, миграцией и детерминированным хомингом в пораженную печень мезенхимальных стволовых клеток.

Практическая значимость. Выполненные исследования позволили разработать патогенетически обоснованные методы терапии хронического гепатита и восстановления функционально активной ткани печени, основанные на модуляции функций эндогенных пулов стволовых клеток гранулоцитарным колониестимулирующим фактором и препаратом сверхмалых доз антител к Г-КСФ. По материалам работы подготовлены отчеты о специфической активности указанных препаратов для получения разрешения на клинические исследования. Получен патент (1Ш) №2295971 от 27 марта 2007 г. «Способ терапии экспериментального хронического токсического гепатита».

Апробация работы. Материалы диссертации докладывались и обсуждались на конференции молодых ученых «Актуальные проблемы экспериментальной и клинической фармакологии» (Томск, 2005), на конференции «Фармакологическая регуляция стволовой клетки» (Томск, 2005), на ежегодной Всероссийской и международной конференции «Стволовые клетки и перспектива их использования в здравоохранении» (Москва, 2006) и на пленуме патофизиологов Сибири, приуроченном к 50-летию кафедры патофизиологии Алтайского государственного медицинского института (Барнаул, 2006).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 4 работы, в том числе 3 - в реферируемых журналах, рекомендуемых перечнем ВАК.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 119 страницах машинописного текста и состоит из введения, 4-х глав, выводов и списка литературы. Работа иллюстрирована 7 рисунками и 15 таблицами. Библиографический указатель включает 146 источников, в том числе 54 отечественных и 92 иностранных.

Заключение диссертации по теме «Патологическая физиология», Сотникова, Наталья Владимировна

ВЫВОДЫ

1. В процессе развития СС14-гепатита у мышей линии СВА/СаЬас наблюдается повышение функциональной активности эндогенных стволовых клеток, о чем свидетельствует увеличение содержания в костном мозге и периферической крови примитивных мезенхимальных стволовых клеток и более зрелых стромальных предшественников (КОЕ-Ф).

2. При СС14-гепатите у мышей происходит снижение количества регионарных клеток-предшественников в печени (КОЕ-Печ), что указывает на несостоятельность или недостаточность механизмов компенсации, связанных со стволовыми клетками, при данной патологии.

3. Гранулоцитарный колониестимулируюий фактор (Г-КСФ) обладает выраженным гепатопротекторным действием. Его введение приводит к нормализации активности цитолитических ферментов в периферической крови, а также к регрессии соединительной ткани в печени у крыс с хроническим СС14-гепатитом.

4. В основе регенерации печеночной ткани под действием Г-КСФ лежит стимуляция функциональной активности различных пулов стволовых клеток. При его введении мышам с хроническим СС14 гепатитом происходит увеличение содержания мезенхимальных стволовых клеток в костном мозге, колониеобразующих единиц фибробластов в периферической крови и регионарных клеток-предшественников в печени.

5. Препарат сверхмалых доз антител к гранулоцитарному колониестимулирующему фактору (анти-Г-КСФ) проявляет выраженное гепатопротекторное и противовоспалительное действие, о чем свидетельствует нормализация активности цитолитических ферментов в сыворотке крови и существенное снижение относительной площади инфильтрата и соединительной ткани в печени крыс при хроническом СС14-гепатите.

6. Гепатопротекторные свойства препарата анти-Г-КСФ реализуются за счет стимуляции функциональной активности различных пулов стволовых клеток. Анти-Г-КСФ в условиях ССЦ-гепатита вызывает увеличение содержания мезенхимальных стволовых клеток и КОЕ-Ф в костном мозге и периферической крови, а также значительное повышение содержания регионарных клеток-предшественников в печени мышей.

7. Введение препаратов гранулоцитарного колониестимулирующего фактора и сверхмалых доз антител к нему мышам с СС14-гепатитом не вызывает существенных изменений способности адгезирующих клеток костного мозга связывать стромальные предшественники, а также в структурно-функциональной организации костного мозга (гемопоэтические островки).

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Сотникова, Наталья Владимировна, 2007 год

1. Блюгер А.Ф., Майоре А.Я. / Молекулярно-биологический этап изучения патологии печени // Успехи гепатологии. Рига. - 1973. - № 4. - С. 7-38.

2. Блюгер А.Ф., Майоре А.Я. / Биохимия печени в норме и патологии // Успехи гепатологии. Рига. - 1975. - №4. - С. 44-83.

3. Бобырев В.Н., Воскресенский О.Н. / Антиоксиданты в клиничекой практике // Тер. арх. 1989. - №3. - С. 122-125.

4. Богомолов П.О., Павлова Т.В. / Неалкогольный стеатогепатит: патофизиология, патоморфология, клиника и подходы к лечению // Фарматека: международный медицинский журнал. 2004. - № 10 (73). - С. 31-39.

5. Бруслик В.Г., Логинов A.C., Сперанский М.Д., Васина Н.В. / Способы применения изолированных гепатоцитов для лечения острой печеночной недостаточности // Вестн. РАМН. 1994. - № 5. - С. 8-14.

6. Буеверов А.О. / Место гепатопротекторов в лечении заболеваний печени // Росс. журн. гастроэнтерол., гепатол. и колопроктол. 2002. - 4. - С. 21-25.

7. Буеверов А.О. / Оксидативный стресс и его роль в повреждениях печени // Практикующий врач. 2002. - №1. - С. 36-38.

8. Бурлакова Е.Б., Храпова Н.Г. / Перекисное окисление липидов мембран и свободные антиоксиданты // Успехи химии. 1985 .- № 54 (9). - С. 1540-1548.

9. Владимиров Ю.А. / Свободные радикалы и антиоксиданты // Вестник РАМН. 1998. - №7. - С. 43-51.

10. Воскресенский О.Н., Бобырев В.Н. / Биоантиоксиданты -облигатные факторы питания // Вопр. мед. химии. 1992. - №4. - С. 21-26.

11. Венгеровский А.И., Чучалин B.C., Морокова Е.А., Прищеп Т.П., Саратиков A.C. / Гепатозащитное действие силибинина приэкспериментальной интоксикации СС14 // Фармакология и токсикология. -1987.- Т.50, №5. С. 67-69.

12. Гарбузенко Д.В., Попов Г.К. / Механизмы регуляции регенерации печени // Росс. журн. гастроэнтерол., гепатол. и колопроктол. 2001 - №1. -С. 21-23.

13. Голиков С.Н., Саноцкий И.В, Тиунов JI.A. / Общие механизмы токсического действия. Л.: Медицина, 1986. - С. 278.

14. Григорьев П.Я. / Жировой гепатоз: диагностика, лечение и профилактика // Болезни органов пищеварения. 2002. - № 4 (1). - С. 30-31.

15. Губский Ю.И. /Коррекция химического поражения печени. Киев, 1989.-347 с.

16. Достижения в лечении хронических заболеваний печени с применением эссенциальных фосфолипидов. /Материалы симпозиума 12 апреля 1997 г. Под ред. В.Т. Ивашкина. - 1997. - 100 с.

17. Дубинина Е.Е. /Роль активных форм кислорода в качестве сигнальных молекул в метаболизме ткани при состоянии окислительного стресса//Вопр. мед. хим.-2001 -№47 (6)-С. 561-581.

18. Зборовская И.А., Банникова М.В. / Антиоксидантная система в организме и ее значение в метаболизме // Вестник РАМН. 1995. - № 6 - С. 53-60.

19. Ивашкин В.Т., Шульпекова Ю.О. / Неалкогольный стеатогепатит // Болезни органовпищеварения. — 2000. № 2(2). — С. 41-45.

20. Калинин A.B. / Алкогольная болезнь печени // Фарматека: междунарожный медицинский журнал. 2005. - № 1(97). - С. 48-54.

21. Корухов Н.Ю., Полоцкий М.А. Писаревский A.A. / Первый клинический опыт применения аппарата "вспомогательная печень" // Трансплантация и искусственные органы. М., 1986. - С. 193-197.

22. Костюк В.А. / Роль ковалентного связывания и ПОЛ в повреждении печени четырехлористым углеродом // Биохимия. — 1991. — т. 56. №10. — С. 1878—1885.

23. Логинов A.C., Блок Ю.Е. / Хронические гепатиты и цирроз печени. -М.: Медицина. 1987. - 268 с.

24. М. Карнейро де Мура. / Неалкогольный стеатогепатит // Клинические перспективы гастроэнтерол. гепатол. 2001. - № 3. - С. 12-15.

25. Мазо В.К. / Глутатион как компонент антиоксидантной системы желудочно-кишечного тракта // Росс. журн. гастроэнтерол. гепатол и колопроктол. 1998. - №1 - С. 47-53.

26. Мараховский Ю.Х. / Клиническая оценка потенциальных возможностей и ограничений гепатопротекторов // Рецепт 2005. - № 1 (39). -С. 47-51.

27. Методические рекомендации. Доклиническое изучение гепатозащитных средств. - МЗ РФ. - 1999.

28. Минушкин О. Н. / Некоторые гепатопротекторы в лечении заболеваний печени. // Лечащий Врач 2002. - №06 http://www.osp.ru/doctore/2002/06/055.htm.

29. Моругова Т.В., Лазарева Д.Н. / Влияние лекарственных средств на свободно-радикальное окисление // Экспер. и клин, фармакол. 2000. - Т. 63, №1.-С. 71-76

30. Нидерау К. / Интерферон и эссенциальные фосфолипиды в лечении хронических вирусных гепатитов В и С. // Росс. ж. гастроэнтерол. гепатол. и колопроктол. 1998. - № 5. - С. 67-68.

31. Николаев С.М., Ажунова Т. А., Мункоева С.М. и др. / Экспериментальное обоснование лечебного применения экстракта горечавки жёлтой при заболеваниях гепатобилиарной системы // Химико-фармацевтический журнал.- 1992.- Т.26, №.1.- С.62-64.

32. Оковитый С. В.- / Клическая фармакология гепатопротекторов. // Гепатология. 2004. - Вып.З. -С. 32-37.

33. Островерхов Г.Е., Бруслик В.Г., Малюгин Э.Ф. / Сравнительная оценка использования клеточной взвеси аллогенной и ксеногенной печени в терапии печеночной недостаточности // Вестн. АМН СССР. 1978. - № 9. - С.56.61.

34. Панкин В.З. Биохимия липидов и их роль в обмене веществ. М., 1981. С. 75-95.

35. Петренко А.Ю., Оченашко О.В. / Влияние препаратов эмбриональных тканей человека на интенсивность ПОЛ при остром токсическом гепатите у крыс // Проблемы криобиологии. — 2001. — №2. — С. 66—71.

36. Подколзин A.A., Донцов В.И., Крутько В.Н. и др. / Антиоксидантная защита организма при старении и некоторых патологических состояниях с ним связанных // Клин, геронтол. 2001 - №3-4.-С. 50-58.

37. Подымова С.Д. / Болезни печени: руководство для врачей 3-е изд., переработанное и дополненное. -М.: Медицина, 1998. - С. 704

38. Подымова С.Д. / Хронический гепатит. М.: Медицина, 1975. - С. 279.

39. Ратькин A.B., Саратиков A.C., Чучалин B.C., Буркова В.Н., Фролов В.Н. / Гепатопротекторы препятствуют токсическому действию циклофосфана на печень крыс при СС14-гепатите. // Эксперим. и клин, фармакол. 2005. - т. 68, № 2. - С. 47-50.

40. Рябинин В.Е. / Использование методов клеточной и эфферентной терапии при лечении печеночной недостаточности. // Вестник трансплантологии и искусственных органов. 2002. - №1. — С. 42-49.

41. Саратиков A.C., Венгеровский А.И., Чучалин B.C. / Экстракт солянки холмовой (лохеин) эффективная защита печени. - Томск: STT. -2000.-С. 114.

42. Саратиков A.C., Венгеровский А.И., Батурина Н.О., Чучалин B.C. / Эффективность гепатозащитных средств при экспериментальном хроническом гепатите. // Экспериментальная и клиническая фармакология. -1996.-№ 1.-С. 24-26

43. Саратиков A.C., Венгеровский А.И. / Новые гепатопротекторыприродного происхождения. // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1995 - № 1. - С. 8-11.

44. Саратиков A.C., Венгеровский А.И., Паульс О.В., Седых И.М. / Влияние эплира на токсическое поражение печени в эксперименте. // Фармакология и токсикология. 1990. - № 5. - С. 42-^45.

45. Саратиков A.C., Венгеровский А.И., Чучалин B.C. / Гепатозащитные свойства солянки холмовой. // Химико-фармацевтический журнал. — 1990. -№ 6. С. 38-40.

46. Система цитокинов. Теоретические и клинические аспекты / под ред. Козлова В.А., Сенникова C.B. Новосибирск: - 2004. - С. 324.

47. Сорокина И.В., Крысин А.П., Хлебникова Т.Б. и др. Роль фенольных антиоксидантов в повышении устойчивости органических систем к свободно-радикальному окислению. Новосибирск, РАН - 1997.

48. Тимен JI. Я., Шерцингер А. Г., Чичук Т. В. и др. / Аскорбиновая кислота и глюкоза в коррекции процессов свободнорадикального окисления (экспериментальное исследование. // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. 2005. - № 5. - С. 74-78.

49. Ушкалова Е.А / Место эссенциальных фосфолипидов в современной медицине. // Гастроэнтерология. 2004. - №10 (73). - С. 35-42.

50. Хазанов А.И. Болезни печени и желчевыводящих путей. Под редакцией В.Т.Ивашкина. - 2002.- С. 111.

51. Шульпекова Ю.О. / Флавоноиды расторопши пятнистой в лечении заболеваний печени. // Русский Медицинский Журнал. 2004. - Т. 12, № 5. -С. 248-250.

52. Шумаков В.И., Арзуманов B.C., Онищенко H.A. и др. / Лечениетяжелой печеночной недостаточности перфузией крови больного через взвесь криоконсервированных гепатоци-тов // Хирургия. 1990. - № 2. - С. 113-116.

53. Яковенко Э. П., Яковенко А. В., Григорьев П. Я. и др. / Роль альфа-липоевой кислоты (Тиоктацида) в терапии метаболических заболеваний печени // Фарматека: международный медицинский журнал. 2005. - №3. - С. 42-46.

54. Alison M.R., Poulsom R., Forbes S.J. / Update on hepatic stem cells. // Liver.- 2001.-№12.-P. 367-73.

55. Alison M.R., Poulsom R., Jeffery R., Dhillon A.P., Quaglia A., Jacob J., Novelli M., Prentice G., Williamson J., Wright N.A. / Hepatocytes from non-hepatic adult stem cells. // Nature. 2000. - № 7. - P. 257.

56. Alison M.R., Vig P., Russo F., Bigger B.W., Amofah E., Themis M., Forbes S. / Hepatic stem cells: from inside and outside the liver? // Cell Prolif. — 2004.- №37(1) P. 1-21.

57. Aoki Т., Jin Z., Nishino N., Kato H., Shimizu Y., Niiya Т., Murai N, Enami Y., Mitamura K., Koizumi Т., Yasuda D., Izumida Y., Avital I., Umehara

58. Arehakov A.I., Uvarov V. Yu. / Phosphotidylcholine (Polyenephosphatidyleholine PPC): Effects on cell membranes and transport of cholesterol / Eds. A.I. Arehakov, K.,1. Gundermann. Wbn. Verlag, Bingen. Rhein, 1989.-P. 127-136.

59. Balladur P., Crema E., Honiger J., Calmus Y., Baudrimont M., Delelo R., Capeau J, Nordlinger B. / Transplantation of allogeneic hepatocytes without immunosuppression: long-term survival. // Surgery. 1995. - № 117(2). - P. 18994.

60. Bass N.M. / Interaction of fatty acid-binding proteins (FABP) with the peroxisome proliferator-activated receptor alpha. In: Frontiers in Bioactive // Lipids. Plenum Press. - 1996. - P.67-72.

61. Beaune P., Pessayre D., Dansette P., Mansuy D., Manns M. / Autoantibodies against cytochromes P450: role in human diseases. // Adv Pharmnacol. -1994. -№ 30. P. 199-245.

62. Bunout D., Hirsch S., Petermann M., de la Maza M.P., Silva G., Kelly M., Ugarte G., Iturriaga H. / Controlled study of the effect of Silymarin on alcoholic liver disease. // Rev Med Chil. 1992. - №12. - P. 1370-5.

63. Bustos M., Sangro B., Alzuguren P., Gil A.G., Ruiz J., Beraza N., Qian C., Garcia-Pardo A., Prieto J. / Liver damage using suicide genes. A model for oval cell activation. // Am J Pathol.- 2000. № 157(2). - P. 549-59.

64. Camargo F.D., Finegold M., Goodell M.A. / Hematopoieticmyelomonocytic cells are the major source of hepatocyte fusion partners. // J Clin Invest. 2004 - №113(9). - P. 1266-70.

65. Chatellier G., Lacomblez L. / Tacrine (tetrahydroaminoacridine; THA) and lecithin in senile dementia of the Alzheimr type: a multicentre trial. Groupe Français d'Etude de la Tetrahydroaminoacridine // BMJ. 1990 - № 2. - P. 67- 73.

66. Complementary and Alternative Medicine. American Association for the Study of Liver Diseases &AASLD meeting 2002.

67. Detry O., Arkadopoulos N., Ting P., Kahaku E., Watana-be F.D., Rozga J., Demetriou A.A. / Clinical use of a bioartificial liver in the treatment of acetaminophen-induced fulminant hepatic failure. // American Surgeon. 1999. -№ 65. - P. 934-938.

68. Dhawan A., Mitry R.R., Hughes R.D., Lehec S., Terry C., Bansal S., Arya R., Wade J.J., Verma A., Heaton N.D., Rela M., Mieli-Vergani G. / Hepatocyte transplantation for inherited factor VII deficiency. // Transplantation. -2004.-№78(12).-P. 1812-4.

69. Diehl A.M. / Nonalcoholic steatosis and steatohepatitis IV.Nonalcoholic liver disease abnormalities in macrophage function and cytokines. // Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 2002. - №282. - P. 21-5.

70. Eagger S.A., Levy R., Sahakian B.J. / Tacrine in Alzheimer's disease. // Lancet. 1991.- № 27.-P. 989-92.

71. Fang B., Shi M., Liao L., Yang S., Liu Y., Zhao R.C. / Systemic infusion of FLK1(+) mesenchymal stem cells ameliorate carbon tetrachloride-induced liver fibrosis in mice. // Transplantation. 2004. № 78(1). - P. 83-8.

72. Fausto N., Campbell J.S. / The role of hepatocytes and oval cells in liver regeneration and repopulation. // Mech Dev. 2003. - № 120. - P. 117-130;

73. Crosby H.A., Hubscher S.G., Joplin R.E., Kelly D.A., Strain A.J. / Immunolocalization of OV-6, a putative progenitor cell marker in human fetal and diseased pediatric liver. // Hepatology. 1998. - № 28(4). - P. 980-5

74. Fausto N. / Liver regeneration // Hepatology. — 2000. — № 32( 1). — P. 19—31.

75. Fausto N. / Liver regeneration: from laboratory to clinic.// Liver Transpl. 2001.-№7(10).-P. 835-44.

76. Forbes S., Vig P., Poulsom R., Thomas H., Alison M. / Hepatic stem cells. // J Pathol. 2002. - №197(4). - P. 510-8.

77. Fox I.J., Chowdhury J.R., Kaufman S.S., Goertzen T.C., Chowdhury N.R., Warkentin P.I., Dorko K., Sauter B.V., Strom S.C. / Treatment of the Crigler-Najjar syndrome type I with hepatocyte transplantation. // N Engl J Med . -1998.- № 338.-P. 1422-142.

78. Fromenty B., Berson A., Pessayre D. / Microvesicular steatosis and steatohepatitis: role of mitochondrial dysfunction and lipid peroxidation. // Hepatology. 1997. - №26 (suppl.l). - P. 13-22.

79. Fujii H., Hirose T., Oe S., Yasuchika K., Azuma H., Fujikawa T., Nagao M., Yamaoka Y. / Contribution of bone marrow cells to liver regeneration after partial hepatectomy in mice.//J Hepatol. 2002.-№ 36.-P. 653-659.

80. Gerlach J. C. / Long-term liver cell cultures in bioreactors and possible application for liver support. // Cell Biol Toxicol. 1997. - №13. - P. 349-355.

81. Gorczynski R.M., Bessler W.G., Chung S. et al. / A fetal sheep liver extract reverses age-related increments in spontaneous and induced cytokine production by indirect environmental effects // Immunology Letters. —1998. —60, N2—3.—P. 157—164

82. Gordon G.J., Coleman W.B., Hixson D.C., Grisham J.W. / Liver regeneration in rats with retrorsine-induced hepatocellular injury proceeds through a novel cellular response. // Am J Pathol. 2000. - №156(2). - P. 607-19.

83. Guan R., Ho K.Y., Kang J.Y., Yap I., Gwee K.A., Tan C.C. / The effect of polyunsaturated phosphatidyl choline in the treatment of acute viral hepatitis. //

84. Aliment Pharmacol Ther. 1995. - № 9(6). - P. 699-703.

85. Horiike N., Masumoto T., Nakanishi K., Michitaka K., Kurose K., Ohkura I., Onji M. / Interferon therapy for patients more than 60 years of age with chronic hepatitis C. // J. Gas-troenterol., Hepatol. 1995. - №10. - P. 246-249.

86. Horslen S.P., McCowan T.C., Goertzen T.C., Warkentin P.I., Cai H.B., Strom S.C., Fox I.J. / Isolated hepatocyte transplantation in an infant with a severe urea cycle disorder. // Pediatrics. 2003. - № 111. - P. 1262-1267.

87. Ise H., Nikaido T., Negishi N., Sugihara N., Suzuki F., Akaike T., Ikeda U. / Effective hepatocyte transplantation using rat hepatocytes with low asialoglycoprotein receptor expression. // Am J Pathol. 2004. - № 165(2). - P. 501-10.

88. Ishikawa F. / Transplanted human cord blood cells give rise to hepatocytes in engrafted mice. // Ann N Y Acad Sci. 2003. - № 996. - P. 174185.

89. Jang Y.Y., Sharkis S.J. / Metamorphosis from bone marrow derived primitive stem cells to functional liver cells. // Cell Cycle. 2004. - №3(8). - P. 980-2.

90. Kaplowitz M.D. / Biochemical and cellular mechanisms of toxic liver injury // Semin Liver Dis. —2002. —№4. —P. 137—144.

91. Kobayashi N., Ito M., Nakamura J., Cai J., Gao C., Hammel J.M., Fox I.J. / Hepatocyte transplantation in rats with decompensated cirrhosis. // Hepatology. 2000. - № 31(4). - P. 851-7.

92. Korbling M., Katz R.L., Khanna A., Ruifrok A.C., Rondon G., Albitar M., Champlin RE., Estrov Z. / Hepatocytes and epithelial cells of donor origin in recipients of peripheral-blood stem cells/ NEGM. 2002.- N.10,V.346. - P. 738746

93. Kruglov E.A., Jain D., Dranoff J.A. / Isolation of primary rat liver fibroblasts. // J Investig Med. 2002. - № 50(3). - P. 179-84.

94. Lagasse E., Connors H., Al-Dhalimy M., Reitsma M., Dohse M., Osborne L., Wang X., Finegold M., Weissman I.L., Grompe M. / Purified hematopoietic stem cells can differentiate into hepatocytes in vivo. // Nat Med. -2000.-№6(1 l).-P.1229-34.

95. Levesque J.P., Hendy J., Takamatsu Y., Simmons P.J., Bendall L.J. / Disruption of the CXCR4/CXCL12 chemotactic interaction during hematopoietic stem cell mobilization induced by GCSF or cyclophosphamide. // J Clin Invest. -2003.-№111.-P. 187-196.

96. Liu H., Jones B.E., Bradham C., Czaja M.J. / Increased cytochrome P-450 2E1 expression sensitizes hepatocytes to c-Jun-mediated cell death from TNF-alpha. // Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 2002. -№282. - P. 257-66.

97. Mavrelis P.G., Ammon H.V., Gleysteen J J., Komorowski R.A., Charaf U.K. / Hepatic free fatty acids in alcoholic liver disease and morbid obesity. // Hepatology. 1983. №3.-P. 223-6.

98. Mitaka T. / Hepatic stem cells: from bone marrow cells to hepatocytes. // Biochem Biophys Res Commun. 2001. - № 281(1). - P. 1-5.

99. Miyazaki M., Akiyama I., Sakaguchi M., Nakashima E., Okada M., Kataoka K., Huh N.H. / Improved conditions to induce hepatocytes from rat bone marrow cells in culture. // Biochem Biophys Res Commun. 2002. - № 298(1). -P. 24-30.

100. Muraca M., Gerunda G., Neri D., Vilei M.T., Granato A., Feltracco P., Meroni M., Giron G., Burlina A.B. / Hepatocyte transplantation as a treatment for glycogen storage disease type la. // Lancet. 2002. - № 359.- P. 317-318.

101. Mylonas C., Kouretas D. / Lipid peroxidation and tissue damage. // In Vivo.- 1999. № 13. -P. 295-309.

102. Nagata H., Ito M., Cai J., Edge A.S., Piatt J.L., Fox I.J. / Treatment of cirrhosis and liver failure in rats by hepatocyte xenotransplantation. // Gastroenterol. 2003. - №124. - P. 422-431.

103. Newsome P.N. / Human cord blood-derived cells can differentiate into hepatocytes in the mouse liver with no evidence of cellular fusion. // Gastroenterol.- 2003. №124. - P. - 1891-1900.

104. Pessayre D., Berson A., Fromenty B., Mansouri A. / Mitochondria in steatohepatitis. // Semin Liver Dis. 2001. - № 21. P. - 57-69.

105. Petersen B.E., Bowen W.C., Patrene K.D., Mars W.M., Sullivan A.K., Murase N., Boggs S.S., Greenberger J.S., Goff J.P. / Bone marrow as a potential source of hepatic oval cells. // Science. 1999. - № 284. - P. 1168 -1170.

106. Poupon R.E. / Management of primary biliary cirrhosis resistant to UDCA therapy. // J. Hepatol. 2000. - № 32, suppl. 2 . - P. 19-20.

107. Preston S.L., Alison M.R., Forbes S.J., Direkze N.C., Poulsom R., Wright N.A. / The new stem cell biology: something for everyone. // Molecular Pathology.- 56.-2003.- №2.- P. 86-96.

108. Rambaldi A., Gluud C. / S-adenosyl-L- methionine for alcoholic liver diseases // Cochrane Review. In: The Cochrane Library. - Issue 1. - 2003.

109. Rao M.S., Reddy J.K. / Peroxisomal beta-oxidation and steatohepatitis. // Semin Liver Dis. 2001. - №21. -P.43-55.

110. Reddy J.K. / Nonalcoholic steatosis and steatohepatitis III. Peroxisomal b-oxidation, PPAR-a and steatohepatitis. // Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 2001. -№ 282. - P. 1333-9.

111. Robertson G., Leclercq I., Farrell G.C. / Nonalcoholic steatosis and steatohepatitis II. Cytochrome P450 and oxidative stress. // Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 2001. - №282. - P. 1135-9.

112. Rodez J., eds / Oxford textbook of clinical hepatotology. Oxford University Press. - 1991. - № 2. - P. 875-902.

113. Rozga J., Holzman M.D., Ro M.S., Griffin D.W., Neuzil D.F., Giorgio T., Moscioni A.D., Demetriou A.A. / Development of a hybrid bioartificial liver. // Ann Surg. 1993. - № 217(5). - P. 502-9; discussion. - P. 509-11.

114. Schabitz W.R.; Kollmar R., Schwaninger M., Juettler E., Bardutzky J.,; Scholzke M.N., Sommer C., Schwab S. / Neuroprotective Effect of Granulocyte Colony-Stimulating Factor After Focal Cerebral Ischemia. // Stroke. 2003. - № 34.-P. 745-53.

115. Schuppan D. / Recent Advances in the Pathophysiology of Gastrointestinal and Liver Diseases. 1997 P. 257.

116. Seo M.J., Suh S.Y., Bae Y.C., Jung J.S. / Differentiation of human adipose stromal cells into hepatic lineage in vitro and in vivo. // Biochem Biophys Res Commun. -2005. № 328(1). - P. 258-64.

117. Sokal E.M., Veyckemans F., de Ville de Goyet J., Moulin D., Van Hoorebeeck N., Alberti D., Buts J.P., Rahier J., Van Obbergh L., Clapuyt P. / Liver transplantation in children less than 1 year of age. // J Pediatr. 1990. - № 117(2 Ptl).-P. 205-10.

118. Sover R., Pousoda X., Fabra R. / S-adenosil-L-methionine prevents intracellular glutathione depletion by GSH-depleting drugs in rat and human hepatocytes. // Drug Invest. 1992. - № 4, suppl. 4. - P. 46-53.

119. Stefan A.M., Coulter S., Gray B., LaMorte W., Nikelaeson S., Edge A.S., Afdhal N.H. / Xenogeneic transplantation of porcine hepatocytes into the CC14 cirrhotic rat model. // Cell Transplant. 1999 . - № 8(6). P. 649-59.

120. Sussman N.L., Kelly J.H. / Extracorporeal liver support: cell-based therapy for the failing liver. // Am J Kidney Diseases. 1997. - №30, Suppl. 4. - P. 66-71.

121. Sussman N.L., Kelly J.H. / Improved liver function following treatment with an extracorporeal liver assist device. // Artif Organs. 1993. - № 17(1). - P. 27-30.

122. Tang D.G. / FA oxidation and signaling in apoptosis. // Biol Chem. -2002.-№383.-P. 425-42.

123. Tateno C., Takai-Kajihara K., Yamasaki C., Sato H., Yoshizato K. / Heterogeneity of growth potential of adult rat hepatocytes in vitro. // Hepatology.2000.-№31(1).-P. 65-74.

124. Theise N.D., Nimmakayalu M., Gardner R., Illei P.B., Morgan G., Teperman L., Henegariu O., Krause D.S. / Liver from bone marrow in humans. // Hepatology. 2000. - № 32(1). - P. 11-6.

125. Tresco P.A., Biran R., Noble M.D. / Cellular transplants as sources for therapeutic agents // Adv. Drug Deliv. Rev. —2000. —42, N1—2. —P. 3—27.

126. Trinchet J.C., Coste T., Levy V.G., Vivet F., Duchatelle V., Legendre C., Gotheil C., Beaugrand M. / Treatment of alcoholic hepatitis with silymarin. A double-blind comparative study in 116 patients. // Gastroenterol Clin Biol. 1989. - № 13.-P. 120-4.

127. Wang X., Willenbring H., Akkari Y., Torimaru Y., Foster M., Al-Dhalimy M., Lagasse E., Finegold M., Olson S., Grompe M. / Cell fusion is the principal source of bone-marrow-derived hepatocytes. // Nature. 2003. - № 422(6934).-P. 897-901.

128. Yavorkovsky L., Lai E., Ilic Z., Sell S. / Participation of small intraportal stem cells in the restitutive response of the liver to periportal necrosis induced by allyl alcohol. // Hepatology. 1995. - № 21(6). - P. 1702-12

129. Zhang Y., Bai X.F., Huang C.X. / Hepatic stem cells: existence and origin. // World J Gastroenterol. 2003. -№ 9(2). - P.201-4.