Использование мезенхимальных стволовых и прогениторных клеток костного мозга для разработки новых биотехнологий в трансплантологии: Экспериментальное исследование тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.41, кандидат биологических наук Крашенинников, Михаил Евгеньевич

• Крашенинников, Михаил Евгеньевич
• кандидат биологических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Крашенинников, Михаил Евгеньевич

Введение.

Глава I. Обзор литературы. Современные представления о возможностях применения стволовых и прогениторных клеток для восстановительного лечения поврежденных органов.

1.1. Стволовые и прогениторпые клетки как биорезерв для развития клеточных технологий.

1.2. Биологическая характеристика популяционного состава клеток костного мозга.

Глава II. Материалы и методы исследования.

2.1. Общая характеристика экспериментального материала.

2.2. Технология получения и ведения клеточных культур.

2.3. Техника моделирования повреждения органов и тканей.

2.4. Методы исследования, используемые в организме после трансплантации клеток.

2.5. Методы статистической обработки.

Глава III. Культивирование как способ выявления и реализации биологических и терапевтических эффектов клеток костного мозга

3.1. Изучение возможности предифференцировки мезенхимальных (стромальных) прогениторных клеток костного мозга.

3.2. Исследование продукции цитокинов и фенотипа клеток костного мозга человека.

Глава IV. Использование клеток костного мозга для восстановления структуры и функции поврежденных органов и тканей в эксперименте.

4.1. Характеристика функционального и морфологического состояния сердца после криодеструкции и трансплантации клеток в принекротическую зону.

4.2. Характеристика процесса регенерации кожи после термодеструкции и трансплантации клеток на ожоговую поверхность.

4.3. Характеристика процесса регенерации трубчатых костей после обширных резекций и применения имплантантов с иммобилизованными мезенхимальными прогениторными клетками костного мозга.

4.4. Использование аллогенных клеток фетальной печени и ядросодержащей фракции клеток аутологичного костного мозга для коррекции дислипидемии и ранних стадий атеросклероза.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Использование мезенхимальных стволовых и прогениторных клеток костного мозга для разработки новых биотехнологий в трансплантологии: Экспериментальное исследование»

В последние 20-30 лет в России, также как и во всем мире стали отчетливо проявляться тревожные тенденции старения населения, неуклонного роста хронических заболеваний и инвалидизации людей трудоспособного возраста (отчет ВОЗ за 2002 год). Затраты на лечение, реабилитацию и социальную поддержку такого контингента больных ложатся тяжелым бременем на государственный бюджет и поглощают значительную часть средств, ежегодно выделяемых на здравоохранение.

Указанные обстоятельства настоятельно требуют совершенствования современной системы терапии, которая в значительной степени может быть достигнута благодаря освоению и внедрению в клиническую практику новых более эффективных и доступных методов восстановительного лечения больных.

Современное развитие биотехнологии, молекулярной и клеточной биологии сделали клетку не только главным объектом лечебного воздействия, но и средством лечения многих заболеваний. Так для лечения сахарного диабета успешно используется трансплантация аллогенных фетальных и неонатальных ксеногенных культур островковых клеток поджелудочной железы (В.И.Шумаков, Н.Н.Скалецкий, 1998), для лечения различных форм печеночной недостаточности применяется экстракорпоральное подключение к протоку органа ксеногенных гепатоцитов и спленоцитов (Demetriou et.al. 1995, Н.А.Онищенко и др. 1995, В.И.Шумаков и др. 1998), терапия аллогенными фетальными клетками используется для лечения ожогов (Д.С.Саркисов, 1995), миодистрофии Дюшена (В.С.Репин, Г.Т.Сухих 1998) и др.

Между тем, острый дефицит фетального аллогенного материала, обладающего высокой биологической активностью, и существование биоэтических проблем его использования (Ю.М.Лопухин, 2002), призыв к ограничению использования ксеногенных источников из-за их более высокой антигенности, опасности заражения прионами и другими инфекциями, а также необходимость стандартизации используемых клеток и приготовления из них клеточных препаратов, обусловили в последние пять лет пробуждение повышенного интереса исследователей всего мира к проблемам стволовых клеток и, в частности, к проблемам использования аутологичных стволовых клеток костного мозга в медицине из-за безопасности их применения и отсутствия необходимости решения при этом этико-правовых проблем (Perin et.al. 2003; Assmus et. al.2002; Hess et.al. 2002; Iversen et.al. 2000; Strauer, Kornowski 2003).

Приступив в 2000 году к изучению возможности применения стволовых клеток костного мозга в восстановительной медицине, мы убедились в том, что биологические возможности клеточной терапии стволовыми клетками остаются мало изученными и поэтому нереализованными, особенно в России, так как исследования в области клеточных биотехнологий в нашей стране тогда находились на самом начальном этапе своего развития. В частности, в литературе отсутствовали четкие представления о механизмах и путях реализации терапевтических эффектов клеточных технологий, не были отработаны методы предифференцировки мезенхимальных стромальных (прогениторных) клеток (МСК) в различные типы клеток (в частности в кардиомиоцетоподобные клетки) и не использовались широко тканеспецифические маркеры предифференцировки для контроля оптимизации сроков диффренцировки МСК перед трансплантацией, не была отработана техника идентификации предифференцированных прогениторных клеток в соответствующих тканях после трансплантации, а также не проводилась количественная оценка воздействия аутологичных прогениторных клеток стромального и гемопоэтического ряда на восстановление структуры и функции соответствующих пораженных органов. Отсутствие таких данных позволило нам сформулировать следующие цели и задачи настоящего исследования.

Цель работы:

Оптимизировать технологические режимы культивирования прогениторных клеток костного мозга и предифференцировки МСК в кардиомиоцито-, остеобласте- и фибробласто-подобные клетки, а также изучить влияние этих клеток на восстановление структуры и функции соответствующих пораженных органов.

Задачи работы.

1. Отработать методику раздельного выделения из костного мозга гемопоэтических и МСК и изучить влияние процесса культивирования на функциональную активность этих клеток.

2. Отработать режимы культивирования и предифференцировки МСК костного мозга в кардиомиоцитоподобные, остеобластоподобные и фибробластоподобные клетки in vitro и подтвердить состоявшуюся кардиогенную и остеогенную предифференцировку клеток.

3. Отработать методику маркирования клеток для выявления их в соответствующих мягких тканях после трансплантации.

4. Количественно оценить регенерацию поврежденных органов (сердце) и тканей (кожа, сосуды) при трансплантации в поврежденные зоны прекультивированных аутологичных прогениторных клеток костного мозга стромального и гемопоэтического ряда и сравнить эффективность лечения с результатами трансплантации аллогенных фетальных клеток в модельных опытах на животных с криодеструкцией миокарда, с глубоким ожогом кожи и с дислипидогенным гепатозом и микроангиопатией.

5. Разработать технологию восстановления целостности длинных трубчатых костей с помощью иммобилизованных аутологичных клеток костного мозга в модельных опытах с резекцией кости.

Выполнение работы осуществлялось в рамках программы «Клеточные технологии медицине» по заданию Росздрава России (регистрационные №№ 01.2.00 305441 и 01.2.00 305442).

Научная новизна.

Установлено, что в процессе культивирования гемопоэтических и МСК костного мозга активизируются функциональные потенции этих клеток, в результате чего процедуру культивирования аутологичных клеток костного мозга следует рассматривать как необходимый этап для осуществления успешной клеточной терапии. При культивировании гемопоэтической фракции клеток костного мозга это выражается изменением фенотипического состава клеток и продукции цитокинов, для фракции стромальных клеток - их дифференцировкой и продукцией цитокинов (IL-10, G-CSF и TGFp).

В опытах in vitro отработана технология направленной дифференцировки МСК в остеобластоподобные, кардиомиоцитоподобные и колониеобразующие фибробластоподобные клетки путём создания адекватного состава культуральной среды. При дифференцировке МСК в кардиомиоцитоподобные клетки к концу 3-й недели в культуре появляются клетки (1-2%), напоминающие миотрубочки, которые обладают способностью спонтанно и ритмично сокращаться. К 4-ой неделе культивирования количество кардиомиоцитоподобных клеток достигает своего максимума - 35-40% от общего количества клеток в культуре.

Проведена идентификация кардиомиоцитоподобных клеток по окраске на тропонин I, фибробластоподобных клеток - на коллаген I типа, виментин и CD133, а остеобластоподобных клеток - на коллаген I типа, на щелочную фосфатазу и остеопонтин. Глубокая дифференцировка клеток в культуре тормозит процесс пролиферации и понижает их жизнеспособность, делая их непригодными для трансплантации.

На моделях острого повреждения тканей у животных: кожи, сердца и трубчатых костей, а также при моделировании дислипидемии с хроническим повреждением стенки сосудов, установлены позитивные терапевтические эффекты применения прогениторных клеток костного мозга после культивирования. Показано, что трансплантация фибробластоподобных мезенхимальных стволовых клеток ауто- и аллогенного костного мозга на ожоговую поверхность кожи ускоряет процесс заживления кожных ран более интенсивно, чем трансплантация фетальных фибробластов.

Было установлено, что, кардиомиоцитоподобные клетки аутологичного костного мозга, повышают систолическую функцию левого желудочка как при воздействии на него нагрузки объемом, так и при воздействии нагрузки сопротивлением.

Показано, что дополнительная иммобилизация МСК из аутологичного костного мозга на аллогенном деминерализованном костном имплантате ускоряет процесс остеогенеза и сокращает сроки репаративной регенерации длинных трубчатых костей.

Показано, что для коррекции дислипидемии и ранних проявлений атерогенеза могут использоваться как клетки аллогенной фетальной печени, так и прогениторные клетки аутологичного костного мозга; однако эффект последних более пролонгирован по коррекции показателей микроангиопатий.

Практическая значимость работы.

Отработаны технологические режимы предифференцировки мезенхимальных (стромальных) прогениторных клеток костного мозга в колониеобразующие фибробластоподобные, кардиомиоцитоподобные и остеобластоподобные клетки. Предложено для трансплантации предифференцированных клеток использовать относительно короткие сроки предифференцировки (не более 2-х - 3-х недель для кардиомиоцито- и остеобластоподобных клеток), учитывая, что образование 75% монослоя совпадает с осуществлением начальных стадий дифференцировки в заданном направлении.

С помощью рекомбинантного аденовирусного вектора, содержащего LacZ-ген E.coli, внедренного в фетальные специализированные клетки (кардиомиоциты, фибробласты) и МСК костного мозга на этапе их культивирования, доказано присутствие и функционирование этих клеток в течение, по-крайней мере, 3-4 недель после трансплантации в зону повреждения.

Показана перспективность применения стволовых клеток аутологичного костного мозга для ускоренного и более эффективного восстановительного лечения поврежденных органов: при ожоговых ранах, при деструктивных процессах в миокарде, при дислипидемическом повреждении сосудов, печени и при нарушениях целостности трубчатых костей. Разработанный метод восстановления целостности трубчатых костей с помощью костных имплантатов, содержащих иммобилизованные аутологичные стволовые клетки костного мозга, внедрен в клиническую практику. На способ восстановления целостности трубчатых костей, предусматривающий дополнительную фиксацию дистальной и проксимальной зоны костного дефекта губчатым матриксом с адгезированными на нем аутологичными клетками костного мозга, получен патент РФ № 2240135 от 20 ноября 2004г «Культура клеток, содержащая клетки-предшественники остеогенеза, имплантат на ее основе и его использование для восстановления целостности кости».

Апробация диссертации.

Основные положения диссертации доложены:

На II Всероссийском съезде по трансплантологии и искусственным органам, Москва, октябрь, 2002.

На I Всероссийской конференции «Стволовые клетки и перспективы их использования в Здравоохранении», Москва, 22 мая, 2003.

На ХШ Международной конференции по проблеме "Перфторуглеродные соединения в медицине и биологии", 17-18 июня 2003, Пущино.

На 2-й Международной конференции "Патофизиология и современная медицина", Москва, 22-24 апреля 2004.

На Ш Российском конгрессе по патофизиологии, Москва, 9-12 ноября 2004.

На Ш Всероссийском съезде по трансплантологии и искуственным органам. Москва, 28-30 октября 2005 г.

На 12-ом Всемирном конгрессе по заболеваниям сердца (World Congress on Heart Disease «New Trends in Research Diagnosis and Treatment», to be held at the Hyatt Regency Vancouver, in Vancouver, B.C., Canada, July 16-19,2005.

Апробация работы состоялась на межлабораторной конференции ФГУ НИИ трансплантологии и искусственных органов 3 ноября 2005 г.

По теме диссертации опубликовано 21 работа, из них 16 в центральной печати, 4 в зарубежной печати и 1 патент РФ.

Заключение диссертации по теме «Трансплантология и искусственные органы», Крашенинников, Михаил Евгеньевич

Выводы.

1. Отработана методика раздельного выделения и культивирования гемопоэтических и мезенхимальных (стромальных) стволовых и прогениторных клеток костного мозга, что подтверждено фенотипическими и иммуногистохимическими исследованиями.

2. Отработаны режимы предифференцировки МСК костного мозга в кардиомиоцитоподобные, фибробластоподобные и остеобластоподобные клетки, что подтверждено иммуногистохимическими методами.

3. Маркирование клеток с помощью рекомбинантного вируса, несущего ген E.coli Lac-Z [Ad-SV40- pGal], позволяет выявлять жизнеспособные клетки после трансплантации их в мягкие ткани до 1,5 месяцев.

4. Трансплантация аутологических ПМСК костного мозга, предифференцированных в кардиомиоцитоподобные клетки, более эффективно стимулирует процессы восстановительной регенерации миокарда после криодеструкции, чем трансплантация фетальных аллогенных кардиомиоцитов.

5. Трансплантация ауто- и аллогенных фибробластоподобных МСК обеспечивает более быстрое и эффективное заживление глубоких ожоговых ран после термодеструкции, чем фетальные фибробласты. Предифференцированные МСК, также как и фетальные фибробласты способствуют заживлению ран путем ускорения разрастания сосудистой сети и формирования грануляционной ткани.

6. Применение аллогенных деминерализованных костных имплантатов с иммобилизованными на них аутологичными остеобластоподобными клетками, предифференцированными из МСК костного мозга, достоверно ускоряет процесс восстановительной регенерации костной ткани после резекции трубчатых костей.

7. Трансплантация аутологических прекультивированных клеток костного мозга обеспечивает коррекцию ранних проявлений атеросклероза и ослабление морфологических признаков микроангиопатий и жировой дистрофии печени при моделировании хронической алиментарной дислипидемии более эффективно и более длительно, чем при трансплантации клеток фетальной печени.

Практические рекомендации.

1. Для проведение клеточной терапии аутологичными прогениторными клетками костного мозга целесообразно использовать предварительное культивирование (составу культуральных сред, сроки культивирования, очистка клеток и д.р.).

2. Для трансплантации предифференцированных мезенхимальных (стромальных) прогениторных клеток (кардиомиоцито- и остеобластоподобных) следует использовать короткие сроки дифференцировки (не более 3-4 недель), когда образуется 75% монослой и начинает осуществляться дифференцировка клеток в заданном направлении.

3. Регенераторные свойства стволовых и прогениторных клеток аутологичного костного мозга могут успешно применяться при различных острых патологиях (резекция кости, ожоговые раны, острый инфаркт миокарда). При хронических патологиях применение клеточной терапии следует рекомендовать после предварительного выявления в используемых клетках регенераторных (функциональных) резервов. При отсутствии достаточного резерва - клеточная терапия может оказаться малоэффективной.

4. Для оптимизации условий трансплантации остеобластоподобных и фибробластоподобных клеток следует использовать не клеточные суспензии, а биоконструкции, состояние из биодеградируемых материалов (типа ЭластоПОБ) или матриксов с иммобилизованными на них предифференцированными мезенхимальными (стромальными) прогениторными клетоками.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Крашенинников, Михаил Евгеньевич, 2006 год

1. Бабаева А.Г. «Единство и противоположность цитогенетической активности лимфоцитов и их антителообразующей функции при восстановительных процессах в органах». БЭБиМ. 1999, №11, с. 484-490.

2. Бабаева А.Г., Курило Л.Ф., Зотиков Е.А., и др. «Изменение антигенных свойств эритроцитов и численности хромосом метафазных пластинок клеток костного мозга при аллотрансплантации костного мозга в клинике и эксперименте». БЭБиМ. 2003. №1, с. 86-89.

3. Берсенев А.В., Крашенинников М.Е., Онищенко Н.А. «Клеточная терапия дислипидемий и атеросклероза». Вестник трансплантологии и иск. Органов. 2001. №2, 47-53.

4. Вермель А.Е. «Стволовые клетки: общая характеристика и перспективы применения в клинической практике». Клиническая медицина. 2004. №1, с.5-11.

5. Викторов И.В., Сухих Г.Т. «Медико-биологические аспекты: применения стволовых клеток». Вестник РАМН. 2002. №4, с.24-30.

6. Владимирская Е.Б., Румянцев А.Г. «Дифференцировочные потенции стволовых гемопоэтических клеток». Вопросы гематологии, онкологии и иммунопатологии в педиатрии. 2002, N1, с 7-11.

7. Волков М.В., Гудушаури О.Н., Ушакова О.А. «Ошибки и осложнения при лечении переломов костей». М. Медицина, 1970.

8. Волова Т.Г., Севастьянов В.И., Шишацкая Е.И. «Полиоксиалконоаты (ПОА) -биодеградируемые полимеры для медицины». Новосибирск, изд. СОР АН, 2003, с. 330.

9. Зотиков Е.А. «Возможен ли обмен генами между клетками донора и реципиента при аллогенной трансплантации костного мозга HLA-идентичных сибсов». Клиническая Лабораторная Диагностика. 2000. №3, с.46-47.

10. Зотиков Е.А., Бабаева А.Г., Порешина Л.П. «Клеточный хнмеризм и химернзм клетки при трансплантации костного мозга». Москва. Изд. Хризостом, 2003, с. ПО.

11. Кветной И.М., Южаков В.В., Хавинсон В.Х. «Пептидергическая регуляция гомеостаза». Изд. «Наука», Санкт-Петербург, 2003, с. 195.

12. Клименко Е.А. «Гиперлипопротеидогенная микроангнопатия в генезе органной патологии и патогенетические подходы к ее коррекции». Автореф. Дне. Докт. Мед. Наук, Москва. 1994.

13. Козуб К.Н. «Лечение ложных суставов костей голени методом чрезкостного комплексно-дистракционного остеосшггеза» в кн. «Восстановительные операции на опорно-двигательной системе.» Кишинев, Штиинца, 1989, с. 34-37.

14. Колокольчикова Е.Г., Будкевич Л.И., Боровников А.Э. и др. «Морфологические изменения ожоговых ран после пересадки аллогенных фибробластов» Бюлл. Экспер. Биол. мед. 2001, т 131, №1, с.107-111.

15. Малайцев В.В., Богданова И.М., Сухих Г.Т. «Современные представления о биологии стволовой клетки». Архив патологии. 2002. №4, с.7-11.

16. Нагорнев В.А., Назаров П.Г., Полевщиков А.В., и др. «Атерогенез и реакция "острой фазы" печени». Арх. Патол. 1998, 6, с. 67-74.

17. Онищенко Н.А., Базиева Ф.Х., Иванова-Смоленская И.А., и др. «Экстракорпоральное подключение систем биоискусственной поддержки печени в комплесном лечении гематоцеребральной дистрофии». Вестник трансплантологии и иск. Органов. 1999. №1, с. 54-59.

18. Оноприенко Г.А. «Васкуляризация костей при переломах и дефектах». М., «Медицина», 1995, с. 224.

19. Отеллин В.А. «Морфологические обоснования применения метода нейротрансплантации в клинике». Обзор. Вопросы нейрохирургии. 1999, №4, с.32-37.

20. Полтавцева Р.А., Ржанинова Р.А., Ревищин А.В., и др. «Развитие in vitro нейральных прогениторных клеток мозга эмбрионов человека». БЭБиМ. 2001, том 132, №9, с. 290-293.

21. Потапов И.В., Крашенинников М.Е., Онищенко Н.А. «Клеточная кардиомиопластика». Вестник трансплантологии и иск. Органов. 2001. №2, с. 54-62.

22. Расулов М.Ф, Хаджибаев А.М, Уразметова М.Д «Применение аллогенных фибробластов при поверхностных термических повреждениях кожи.» Мед. журнал Узбекистана 2001 №5-6, с. 87-88.

23. Расулов М.Ф. «Использование мезенхимальных стволовых клеток костного мозга и эмбриональных фибробластов в лечении ожоговых ран». Тихоокеанский мед. журнал. 2004, №1,(15), с. 7-9.

24. Ревищин А.В., Полтавцева Р. А., Марей М.В., и др. «Структура клеточных кластеров, формирующихся в культурах диссоциированного эмбрионального мозга человека». БЭБиМ. 2001. Том 132, №9, с. 285-289.

25. Репин B.C., Ржанинова А.А., Шеменков Д.А. «Эмбриональные стволовые клетки: Фундаментальная биология и медицина», изд. РеМеТекс, Москва, 2002, с. 220.

26. Репин B.C., Сухих Г.Т. «Медицинская клеточная биология», изд. БЭБиМ. 1998. с. 200.

27. Румянцев А.Г., Масчан А.А., «Трансплантация гемопоэтических стволовых клеток у детей». Изд. Медицинское информ. Агентство, Москва, 2003, с. 910.

28. Савченко В.Г. «Трансплантация костного мозга при острых лейкозах: аргументы за и против». Тер. Архив. 1993, N7, с. 7-18.

29. Саидгалин Г.З, Салистый П.В, Панова О.В и др. «Аллофиблобласты в лечении глубоких ожогов у детей» в сб. «Комбустология на рубеже веков» Мат. конгресса Москва 2000, с. 166.

30. Саркисов Д.С, Алексеев А.А, Глущенко Е.В и др. «Теоретические и практические аспекты использования культивированных фриблобластов при восстановлении целостности кожных покровов». Вестник РАМН 1996, №6, с. 6-11.

31. Севастьянов В.И., Егорова В.А., Немец Е.А., Перова Н.В., Онищенко Н.А. «Биодеградируемый биополимерный материал ЭластоПОБ™ для клеточной трансплантации». Перспективные материалы, 2004, №3, 35-41.

32. Сухих Г.Т., Малайцев В.В., Богданова И.М., Дубровина И.В. «Мезенхимальные стволовые клетки». Бюлл. Экспер. Б иол и мед. 2002, 133, 2, 124130.

33. Титов В.Н. «Общность атеросклероза и воспаления: специфичность атеросклероза как воспалительного процесса». Рос. Кард иол. Ж. 1999, 5, с. 48-56.

34. Титов В.Н., Осипов С.Г. «Атеросклероз. Роль эндогенного воспаления, белков острой фазы и жирных кислот». Москва, Изд. Фонд "Клиника XXI века"., 2004, с. 279.

35. Туманов В.П., Глушенко Е.В., Морозов С.С., Саркисов Д.С. «Использование культивированных фибробластов при лечении ожоговых ран». Бюл. экспер. биол.-1990, №4, с. 400-402.

36. Угрюмов М.В. «Экспериментальная и клиническая нейротрансплантация современное состояние и перспективы». Наука Долголетия 2001, №1, с. 9-17.

37. Чайлахян Р.К патент №2167662 от 27.07.2000.

38. Шабалин В.Н., Серова Л.Д., Шляпочникова Г.П. «Клеточная гибридизация в этиологии и патогенезе лейкозов». Гематол. и транфузиол. 1987, №8, с. 3-6.

39. Шумаков В.И., Блюмкин В.Н., Скалецкий Н.Н. «Трансплантация островковых клеток поджелудочной железы». М. Канон. 1995, с. 382.

40. Шумаков В.И., Онищенко Н.А., Крашенинников М.Е., и др. «Костный мозг как источник получения мезенхимальных клеток для восстановления терапии поврежденных органов». Вестник трансплантации и иск. органов 2002, 4, с. 3-6.

41. Шумаков В.И., Скалецкий Н.Н. «Регуляция углеводного обмена и коррекция его нарушений при сахарном диабете», в кн. «Очерки по физиологическим проблемам трансплантологии и применения иск. органов», изд. Репроникс, Тула, 1998, с. 93-118.

42. Ailhaud G. "Extracellular factors, signalling pathways and differentiation of adipose precursor cells." Curr. Opin. Cell Biol. 1990, 2: 1043-1049.

43. Akashi K., Traver D., Kondo M., Weissman I.L. "Lymphoid development from hematopoietic stem cells." Int. J. Hematol, 1999, 69, 217-226.

44. Akashi K., Traver D., Miyamoto Т., Weissman I.L. "A clonogenic common myeloid progenitor that gives rise to all myeloid lineages." Nature, 2000,404, 193-197.

45. Alison M.R., Poulsom R., Jeffery R., Dhillon A.P., Quaglia A., Jacob J., Novelli M., Prentice G., Williamsony and Wright N.A. "Hepatocytes from non-hepatic adult stem cells." Nature, 2000, 406, 257.

46. Alison, M R, Sarraf C. "Hepatic stem cells." J.Hepatol. 1998, 29, 678-683

47. Alvarez-Dolado М., Pardal R., Garcia-Verdugo J., et.al. "Fusion of bone-marrow-derived cells with Purkinje neurons, cardiomyocytes and hepatocytes." Nature 2003, 425, 968-972.

48. Anderson D.F., Gage F.H. and Weissman I.J. "Can stem cells cross lineage boundaries?" Nat. Med. 2001, 7,393-395.

49. Andrews P.W., Przyborski S., Thomson J.A. "Embryonal carcinoma cells as ESC, In: stem cell Biology, (ed, Marshak D.R., Gardner R.L., Gottlieb D.), CSH Lab. Press, 2001, 231-266.

50. Asahara Т., Murohara Т., Sullivan A. et.al. "Isolation of putative progenitor endothelial cells from angiogenesis." Science, 1997, 275, 964-967.

51. Assmus В., Schachinger V., Teupe C., et.al. "Transplantation of Progenitor cells and Regeneration Enhancement in Acute Myocardial Infarction." Circulation 2002, 206,3009-3017.

52. Awad H.A., Butler D.L., Boivin G.P., Smith F.N., Malaviya P., Huibregtse В., Caplan A.I. "Autologous mesenchymal stem cell-mediated repair of tendon." Tissue Eng. 1999, 5: 267-277.

53. Badorf C., Brandes R., Popp R., et.al. "Transdifferentiation of blood derived Human Adult Endothelial Progenitor Cells into functionally active Cardiomyocytes." Circulation, 2003,107, 1024-1032.

54. Badorff C., Brandes R., Popp R., et.al. "Transdifferentiation of blood derived Human Adult endothelial Progenitor cells into functionally active Cardiomyocytes." Circulation 2003,107,1024-1032.

55. Bae SC, Lee KS, Zhang YW, Ito Y. " Intimate relationship between TGF-beta/BMP signaling and runt domain transcription factor, PEBP2/CBF." J Bone Joint Surg Am 2001;83-A Suppl l(Pt l):S48-55

56. Balian et.al. United States Patent №6,082,364 от July 4, 2000;

57. Balsam J., Wagers A., Christensen J. et.al. "Haematopoietic stem cells adopt mature haematopoietic fates in ischemic myocardium." Nature 2004, 428, 668-673.

58. Becker A., Mc Culloch E., Till J.E. "Cytological demonstration of the clonal nature of spleen colonies derived from transplanted mouse marrow cells." Nature 1963, 197, 452-454.

59. Bernard-Beanbois K., Hecquet C., Houcine O., Hayem G., Adolphe M. "culture and characterization of juvenile rabbit tenocytes." Cell Biol. Toxicol. 1997, 13: 103-113.

60. Bjornson С., Rietze R., Reynolds В., Magli M. & Vescvi A. "Turning brain into blood: a hematopoietic fate adopted by adult neural stem cells in vivo." Science 1999, 283, 354-357.

61. Blau H.M., Brazelton T.R., Weimann J.M. "The Evolving Concept of a Stem cells: Entity or Function?" Cell. 2001, 105, 829-841.

62. Bonner-Weir S. "In vitro cultivation of human islets from expanded ductal tissue." Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2000, 97, 7999-8004.

63. Boyan B.D., Caplan A.I., Heckman J.D., Lennon D.P., Ehler W., Schwartz Z. "Osteochondral progenitor cells in acute and chronic canine nonunions." J. Orthop. Res. 1999, 17: 246-255.

64. Boyle R.J., Savulecku J. "Ethics of using preimpantation genetic diagnosis to select a stem cell donor for an existing person." BMI., 2001, 323, 1240-1243.

65. Brazelton T.R., Rossi F.M., Keshet G.I. and Blau H.M. "From marrow to brain: expression of neuronal phenotypes in adult mice." Science. 2000, 290. 1775-1779.

66. Broxmeyer H., Douglas G.W., Hangoc G et.al. "Human umbilical cord blood as a potential source of transplantable hematopoietic stem and progenitor cells." Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1989, 86, 3828-3832.

67. Bruant B.J. "Reutilization leukocyte DNA by cells of regenerating liver." Exp. Cell. Res. 1962, 27, 70-79.

68. Bruder S.P., Jaiswal N., Haynesworth S.E. "Growth kinetics, self-renewal and the osteogenic potential of purified human mesenchymal stem cells during extensive subcultivation and following cryopreservation." J. Cell Biochem. 1997, 64, 278-294.

69. Brustle O., Jones K., Lereash R et.al. "Embryonic stem cell derived glial precursors: a source of myelinating transplants." Science, 1999, 285, 754-756.

70. Buckwalter J., Clirncher M., Cooper R. et.al. "Bone biology (part II, formation, form, modelling, remodelling, and regulation of cell function). J. Bone Jt.Surgery 1995, v77-A, № 8, p 1276-1289.

71. Cairo M.S., Wagner J.E. "Placental and/or umbilical cord blood: an alternative source of hematopoietic stem sells for transplantation." Blood 1997, 90: 4665-4678.

72. Caplan A. I. Mesenchymal stem cells. J Orthop Res 1991; 9: 641-650

73. Caplon A.I. "The mesengenic process." Clin. Plast. Surg. 21: 429-435, 1994.

74. Catalin Toma, MD; Mark F. Pittenger, PhD; Kevin S. Cahill, BS.et. al. " Human Mesenchymal Stem Cells Differentiate to a Cardiomyocyte Phenotype in the Adult Murine Heart." Circulation, 2002, Jan l;105(l):93-98.

75. Cheng L, Qasba P, Vanguri P et.al. "Human mesenchymal stem cells support megakaryocyte and pro-platelet formation from CD34+ hematopoietic progenitor cells." J Cell Physiol 2000,184:58-69.

76. Chichester C.O. Fernandez M., Minguell J.J. "Extracellular matriz gene expression by human bone marrow stroma and marrow fibroblast." Cell Adhes. Commun. 1993, 1:93-99.

77. Cibelli J., Stice S.I., RobI J.M. et.al. "Transgenic bovine chimeric off springs produced from somatic cell derived stem-like cells." Nature Biotechnol. 1998, 16, 642646.

78. Clarke D.F., Johansson C.B., Wilbertz J., Veress В., Nilsson E., Karestom H., Fendahi U. and Frisen J. (2000). Generalised potential of adult neural stem cells. Science. 288, 1660-1663.

79. Colter, D. C., Class, R., Digirolamo, С. M., Prockop, D. J. "Rapid expansion of recycling stem cells in cultures of plastic-adherent cells from human bone marrow." Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A 2000, 97:3213-3218

80. Conget P.A., Minguell J.J. "Phenotypical and functional properties of human bone marrow mesenchymal progenitor cells." J. Cell Physiol. 1999, 181:67-73,.

81. Dabeva M,. Hwang S.G. Rao G. Vasa et.al. "Differentiation of pancreatic epithelial progenitor cells into hepatocytes following transplantation into rat liver." Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1997, 94, 7356- 7361.

82. Dani C., Smith A.G., Dessolin S et.al. "Differentiation of ESC into adipocytes in vitro." J. Cell. Sci., 1997, 110, 1279-1285.

83. Demetriou A.A., Rozga J, Podesta L. et.al. "Early clinical experience with a hybrid bioartificial liver". Scand J. Gastroenterol. 1995, 30, suppl. 208., 111-117.

84. Dennis J.E., Merriam A., Awadallah A et.al. "A quadripotential mesenchymal progenitor cell isolated from the marrow of an adult mouse." J. Bone Miner Res. 1999, 14, 700-709.

85. Doevendans P. A., Kubalak S.W., An R.H. et.al. "Differentiating cardiomyocytes in floating embryoid bodies is comparable to fetal cardiomyocytes." J. Moll. Cell. Cardiol., 2000, 32, 839-851.

86. Eglitis M.A., Mezey E. "Hematopoietic cells differentiate into both microglia and macroglia in the brains of adult mice". Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1997, 94, 8: 40804085.

87. Ferrari G, Cusella-De Angeles G., Coletta M., Paolucci E., Stornainolo A., Cossu G., Mavilio F. "Muscle regeneration by bone marrow-derived myogenic progenitors." Science. 1998, 279: 1528-1530.

88. Fibbe W.E. "Mesenchymal stem cells. A potential source for skeletal repair." Ann Reum Dis 2002, 61: II 29-31.

89. Frankel M.S. "In search of stem cell policy." Science 2000,298, 1397.

90. Freedman S.B., Isner J.M. "Therapeutic angiogenesis for coronary artery disease." Ann. Int. Med., 2002, 136, 54-71.

91. Friedenstein A.I., Chailakhjan R.K., Lalykina K.S. "The development of fibroblast colonies in monolayer cultures of guinea-pig bone-marrow and spleen cells." Cell Tissue Kinet., 1970, 3, 393-403.

92. Friedenstein A.I., Piatetzky-Shapiro 1.1., Petrakova K.V. "Osteogenesis in transplants of bone marrow cells." J. Embryol. Exp. Morphol. 1966, 16, 381-390.

93. Friedenstein A.J. "Osteogenic stem cells in the bone marrow. " Bone Min Res 1990, 7:243-272

94. Friedenstein A.J., Gorskaja J.E., Kulagina N.N. "Fibroblast precursors in normal and irradiated mouse hematopoietic organs "Exp. Hematol. 1976, 4: 207-274.

95. Frondoza, Carmelita G. et.al. United States Patent №20010051834 от December 2001, 13.

96. Gage F. "Mammalian CNS" Science, 2000, 287, 1433-1438.

97. Gage F.H., Ray J., and Fisher J.F. "Isolation, characterization and use of stem cells from the CHS." Annu. Rev. Neurosci. 1995, 18, 159-192.

98. Galli R, Borello U, Gritti A et.al. "Skeletal myogenic potential of human and mouse neural stem cell". Nat. Neurosci, 2000, 3,10: 986-991.

99. Galmiche M.C, Koteliansky V.E, Briere J. et.al. "Stromal cells from human long-term marrow cultures are mesenchymal cells that differentiate following a vascular smooth muscle differentiation pathway." Blood 1993, 82:66-76.

100. Geiger H., Sick S., Bonifers C. et.al. "Globin gene expression is reprogrammed in chimeras generated by injecting adult haemopoietic stem cells into mouse blastocytes." Cell, 1998, 93, 1055-1065.

101. Germain J., Noce M., Gourdeau H., and Marcean N. "Promotion of growth and differentiation of rat ductalar oval cells in primary culture." Cancer Res., 1988, 48, 368378.

102. Gluckman E., Broxmeyer H., Auerbach A.D et.al. "Hematopoietic reconstitution in a recipient with Fanconi anemia by means of umbilical cord blood from HLA identical sibling" N. Engl. J. Med. 1989, 321, 174-1189.

103. Gluckman E., Rocha V., Boyer-Chammard A et.al. "Outcome of cord-blood transplantation from related and unrelated donors." N. Engl. J. Med. 1997, 337, 373-381.

104. Gmyr V., Kerr-Conte J., Belaich S. Et.al. "Adult Human Cytokeratin 19-positive cells re-ekspress insulin promoter Factor-1 in vitro." Diabetes 2000, 49, 16711680.

105. Goodwin H., Bicknese A., Chien S et.al. "Multilineage differentiation activity by cells isolated from umbilical cord blood: expression of bone, fat, and neural markers." Biol. Blood Marrow Transplant. 2001, 7(11), 581-588.

106. Goshima J., Goldbery V.M., Caplan A.I. "The origin of bone formed in composite grafts of porous calcium phosphate ceramic loaded with marrow cells." Clin. Orthop. 1991, 269: 274-283.

107. Goto H.,Shuler FD.,Lamsam C. et.al. Transfer of lacZ marker gene to the meniscus.//J.Bone Joint Surg.Am. 1999, V.81. P.918-925.

108. Graf T. "Differentiation plasticity of hematopoietic cells." Blood 2002, 99, 3089-3101

109. Gronthos S, Simmons PJ. "The growth factor requirements of STRO-1-positive human bone marrow stromal precursors under serum-deprived conditions in vitro." Blood 1995, 85:929-940.

110. Guenechea G., Gan O.I., Dorrel C., Dick J.E. "Distinct classes of human stem cells that differ in proliferative and self-renewal potential." Nat. immunol. 2001, 2, 75-82.

111. Gussoni E., Soneoka Y., Strickland C., et.al. "Dystrophin expression in the mdx mouse restored by stem cells transplantation." Nature, 1999,401, 390-394.

112. Haynesworth S.E., Baber M.A., Caplan A.I. "Cytockin expression by hyman marrow-derived mesenchymal progenitor cells in vitro: Effects of dexamethasone and IL-1 alpha." J. Cell Physiol. 1996, 166: 585-592.

113. Haynesworth SE. Baber MA. Caplan A1 "Cell surface antigens on human marrow-denved mesenchymal stem cells are detected by monoclonal antibodies". Bone 1992, 1369.

114. Hill J.M., Zalos G., Halcox J.P et.al. "Circulating endothelial progenitor cells, vascular functions and cardiovascular risk". New. Engl. J.of Medicine., 2003, v 348, p 593-600.

115. Holtmaat AJ.,Hermens WT., Oestreicher AB et.al. "Efficient adenoviral vector-directed expression of a foreign gene to neurons and sustentacular cells in the mouse olfactory neuroepithelium. " Btain Res. Mol. Brain Res. 1996, V.2. P.248.

116. Holtzer H. "Cell lineages, stem cells and the "quantal" cell cycle consent, in Stem cells and tissue homeostasis." Eds. В. I. Lord., C. S. Potten, R. J. Cole (Cambridge, New York, Cambridge University Press), 1978, 1-28.

117. Hunt P., Robertson D., Weiss D et.al. "A single bone-marrow-derived stromal cell type supports the in vitro growth of early lymphoid and myeloid cells." Cell, 1987, 48, 997-1007.

118. Jackson K., Majka S, Wang H., et.al. "Regeneration ischemic cardiac muscle and vascular endothelium by adult a stem cells." J. Clin. Invest, 2001, 107, 1395-1402.

119. Jaiswal R.K., Jaiswal N, Bruder S.P. et.al. "Adult human mesenchymal stem cell differentiation to the osteogenic or adipogenic lineage is regulated by mitogen-activated protein-kinase." J. Biol. Chem. 2000, 275, 13, p 9645-9652.

120. Jiang Y, Jahagirdar BN, Reinhardt RL et al. "Pluripotency of mesenchymal stem cells derived from adult marrow. " Nature 2002, 418, 41-49.

121. Johanson C.B., Momma S., Clarke D. F., Risling M., Fendahi U., and Frisen J. "Identification of a neural stem cells in the adult mammalian central nervous system." Cell. 1999, 96, 25-34.

122. Juan G., Darzynkilwier Z. "Cell cycle analysis by flow and laser dcanning cytometry." Cell Biol. 1998, 1: 161-274.

123. Juskin M. B. "Restricted proliferation and migration of postnataly generated neurons derived from the forebrain subventrcular zone." Neuron. 1993, 11, 173-189.

124. Kadiyala S., Young R.G., Thiede M.A., Bruder S.P. "Culture expanded canine masenchymal stem cells possess osteochondrogenic potential in vivo and in vitro." Cell Transplant. 1997, 6: 125-134.

125. Kataoka H, Urist M.R. "Transplant of bone marrow and muscle-derived connective tissue cultures in diffusion chambers for biossay of bone marrow orphogenetic ptotein." Clin. Orthop. 1993, 286: 262-270.

126. Kato V., Tani Т., Sotomaru V. et.al. "8 calves cloned from somatic cells of single adult." Science, 1999,288,2095-2098.

127. Kawazaki H., Suemori H., Mizuseku K. et.al. "Generation of DOPA neurons and pigmented epithelia from primate ESC by stromal cell-derived in ducking activating." Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2002, 99 1580-1585.

128. Kehat I., Kenyadin Karsenti D., Snirm et.al. "Human embryonic stem cells can differentiate into myocytes with structural and functional properties of cardiomyocytes." J. Clin. Invest., 2001, 108, 407-414.

129. Keller G. "The hemangioblast." Cold Spring Harbon, New York: Cold Spring Harbon Laboratory Press, 2001, p 329-348.

130. Kirshenbaum LA, MacLennanWR,Mazur VV. et.al. "Highly efficient gene transfer into adult ventricular myocytes by recombinant adenovirus." J.Clin.invest. 1993, V.92(l). P.381-387.

131. Kishimoto Т., Kikutani G. "Leukocyte Typing VI white cell differentiation antigens." Garland Publishing Inc. NY. London. 1997.

132. Klein, G, "The extracellular matrix of the hematopoietic microenvironment." Experientia 1995, 51:914-926.

133. Koper G.C., Procop D.J., Phinney.D.G. "Marrow stromal cells migrate throughout forebrain and cerebellum, and they differentiate into astrocytes after injection into neonatal mouse brains." Proc. Nate. Acad. Sci. U.S.A. 1999, 96: 10711-10716.

134. Korbling M, Katz R.L., Khanna A et.al. "Hepatocytes and epithelial cells of donor origin in recipients of peripherial-blood stem cells". N. Engl. J. Med. 2002, 346, 10: 738-746.

135. Kramer J., Hegert C., Guan K. et.al. "ESC derived chondrogenic differentiation in vitro the roll of BMP 2 and BMP 4." Mech. Dev., 2000, 92, 193-205.

136. Krause D.S., Theise N.D., Collector M.J. Henegariu O., Hwang S., Gardner R., Neutzel S., and Shrkis S.J., "Multi-Organ, multi-Lineage engraftment by a single bone marrow-derived stem cells." Cell. 2001, 105, 369-377.

137. Kuznetsov S.A., Friedenstein A.I., Robey P.G. "Factors reguired for bone marrow fibroblast colony formation in vitro." Br. J. Haematolo. 1997,97: 561-570.

138. Kuznetsov S.A., Mankani M.N., Gronthos S. et.al. "Circulating skeletal stem cells." J. Cell Biology 2001, v 153, 5, p 1133-1140.

139. Lafferty K.J. "Islet cell transplantation as a therapy for type 1 diabetes mellitus". Diabetes Nutr. Metab. 1989, 2, p 323-332.

140. Lagasse E., Connors H., A1 Ghalimg M., Aeltsma M., Dohse M., Osborne L., Wang X., Finegold M., Wissman J.L., and Grompe M. "Purified hematopoietic stem cells can differentiate into hepatocytes in vivo." Nat. Med. 2000, 6. 1229-1234.

141. Lazaro C.A., Rhim J.A., Yamada Y., Fausto N. "Generation of hepatocytes from oval cell precursors in culture". Cancer Res. 1998, 58, p 5514-5522.

142. Lee O.K., Kuo Т.К., Chen Weiming et.al. "Isolation of multipotent mesenchymal stem cells from umbilical cord blood." Blood, 2004, V103, N5, p. 16691675.

143. Li RK, Tumiati LC, Weisel RD, Mickle DAG. "Isolation of cardiomyocytes from human myocardium for primary cell cultures." J Tissue Cult Methods. 1993, Vol. 15. P. 147-154.

144. Liechty K.W., Mac-Kenzie Т. C., Shaaban A. et.al. "Human mesenchymal stem cells engraft and demonstrate site-specific differentiation after in utero transplantation in sheep." Nature medicine 2000, 6, 11, p 1282-1286.

145. Liu S., Qu V., Stewart T. J. et.al. "Embryonic stem cells differentiate into oligodendrocytes and myelinate in culture and after spinal cord transplantation." Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2000,97, 6126-6131.

146. Lumelsky N., Blondel O., Laeng P. et.al. "Differentiation of Embryonic Stem cells to insulin secreting structures similar to Pancreatic islets." Science. 2001, 292, 1309-1599.

147. Mac Gregor G.R. "Gene Transfer and Expression Protocols." In: Methods in Molecular Biology. ed.Murphy E.J. The Humana Press, Inc. Clofton, N-Y. 1991, V.7. P. 217.

148. Majumdar M.K., Thiede M.A., Mosca J.D., et.al. "Phenotypic and functional comparison of cultures of marrow-derived mesenchymal stem cells (MSCs) and stromal cells." J. Cell Physiol. 1998, 176, 57-66.

149. Malouf N.N., Coleman W.B., Grisham W et.al. "Adult derived stem cells from the liver become myocytes in the heart in vivo". Am. J. Pathol. 2001, 158: 19291935.

150. Mareschi K., Biasin E., Piacibello W et.al. "Isolation of human mesenchymal stem cells: bone marrow versus umbilical cord blood." Haematologia, 2001, 86, 10991100.

151. Mc. Kay R. "Stem cells in the central Nervous System." Science, 1997, 276, 66-71.

152. Meyts E.R., Iorgensen N., Muller I., Shakkeback N.E. "Prolonged expression of the c-kit receptor in germ cells of intersex fetal testes." J. Pathol. 1996,178: 166-169,.

153. Mezey E., Chandross K.J., Hazta G et.al. "Turning blood into brain: cells bearing neuronal antigens generated in vivo from bone marrow." Science, 2000, 290, 1779-1782.

154. Midy V, Plouet J. "Vasculotropin/vascular endothelial growth factor induces differentiation in cultured osteoblasts." Biochem Biophys Res Commun 1994, Feb 28;199(l):380-386

155. Minguell J.J. "Is hyaluronic acid the "organizer" of the extracellular matrix in marrow stroma?" Exp. Hematol. 1993, 21: 7-8.

156. Minguell J.J., Erices A., Conget P. "Mesenchymal stem cells". Exp. Biol. Med., 2001, 226(6), 507-520.

157. Morrison S.J., Weissman I.L. "The long-term repopulating subset of hematopoietic stem cells is deterministic and isolable by phenotype." Immunity, 1994, 1, 661-673.

158. Morrison S.J., White P.M., Zockc., and Anderson D.J., "Prospective indentificantion, isolation by flow cytometry and in vivo self- renewal of multipotent mammalian neural crest cells." Cell, 1999, 96, 737-749.

159. Morshead C.M., Reynolds B.A., Craig C.G et.al. "Neural stem cells in the adult mammalian forebrain: a relatively quiescent subpopulation of subependymal cells." Neuron, 1994, 13,1071-1082.

160. Muramatsu M, Mizutani Y, Ohmori Y, Okumura J-i. "Comparison of three nonviral transfection methods for foreign gene expression in early chicken embryos in ovo." Biochem.Biophys.Res.Comm. 1997, V.230. P.376-38041(1-2).P.148-156.

161. Murry CH., Soonpaa M., Reinecke H et.al. "Haematopoietic stem cells do not trans-differentiate into cardiac myocytes in myocardial infarcts." Nature. 2004, 428, 664668.

162. Nygren J., Jovinge S., Breitbach M., et.al. "Bone-marrow-derived hematopoietic cells generate cardiomyocytes at a low frequency through cell fusion, but not trans-differentiation." Nature Medicine 2004, 105, 494-501.

163. Odorico Y. S., Kanfman D. S., Thomson Y. A. "Multilineage differentiation from human ESC lines." Stem Cells. 2001, 19, 193-204.

164. Okamoto R., Yajima Т., Yamazaki M et.al. "Damaged epithelia regenerated by bone marrow derived cells in the human gastrointestinal tract". Nat. Med. 2002, 8, 10111017.

165. Orlic D., Kajstura J., Chimenti S., Jakonjuk J., Anderson S.M., Si В., Pickel J., McKey R, Nadal-Ginard В., Bodine DM., Jere A., and Anversa P. "Bone marrow cells regenerate infarcted myocardium." Nature. 2001, 410, 701-705.

166. Owen M, Friedenstein A. "Stromal stem cells: marrow-derived osteogenic precursors". Cells and Molecular Biology of vertebrate Hard Tissues, Ciba Found Symp. 1988, 136: 42-60

167. Pera M.F. "Human pluripotent stem cells a progress report." Curr. Opin. Genet. Dev., 2001, 11,595-599.

168. Perm E.C., GengY.-J., Willerson J.T. "Adult stem cell therapy in perspective." Circulation 2003,107, 935-938.

169. Phinney D. G., Ropen G., Righter W., Webster S., Tremain , Prockop D. J. "Donor variation in the growth propierties and osteogenic potential of human marrow stromal cells." J. Cell biochem. 1999, 75: 424-436.

170. Pittenger M.F., Mackay A.M., Beck S.C. et.al. "Multilineage potential of adult human mesenchymal stem cells." Science, 1999, 284, p 143-146.

171. Poole T.Y., Finkelstein EB., and Cox CM "The role of FGF and VEGF in angioblast induction and migration during vascular development." Dev. Dyn. 2001, 220, 117.

172. Potten C. "Stem cells in gastrointestinal epithelium: numbers, characteristics and death." Phil. Trans. R. Soc. Lond. B. 1998, 353, 821-830.

173. Poulsom R., Forbes S.J., Hodivala-Dilke К et.al. "Bone marrow contributes to renal parenchymal turnover and regeneration". Pathology 2001, 195: 229-235.

174. Prockop, D.J. "Marrow stromal cells as stem cells for non-hematopoietic tissues." Science 1997, 276: 71-74,.

175. Reese J.S., Кос O.N., Geson S.L. "Human mesenchymal stem cells provide stromal support for efficient CD34T transduction." J. Hematother Stem Cell. Res. 1999, 8: 515-523.

176. Reinecke H., Minami E., Poppa V., Murry C. "Evidence for fusion between Cardiac and Skeletal Muscle cells." Circul. Res. 2004, 94, 56-60.

177. Reisner et.al. United States Patent 1998, №5, 806,529 от September 15.

178. Reyes M, Lund T, Lenvik T et al. "Purification and ex vivo expansion of postnatal human marrow mesodermal progenitor cells. " Blood 2001, 98, 2615-2625.

179. Reynolds В A., and Weiss S., "Generation of neurons and astrocytes from isolated cells of the adult mammalian central nervous system." Scence. 1992, 255, 17071710.

180. Richards M., Huibregtse B.A, Caplan А.1., Goulet J.A., Goldstein S.A. "Marrow-derived progenitor cell injections enhance new bone formation during distraction." J. Orthop. Res. 1999, 17: 900-908.

181. Ron Zohar, Jaro Sodek, and Christopher A.G. McCulloch. "Characterization of Stromal Progenitor Cells Enriched by Flow Cytometry". Blood, 1997, Vol. 90, 9 (November 1), 3471-3481.

182. Rust EM, West fall MV, Metzger JM. "Stability of the contractile assembly and Ca2+ activated tension in adenovirus infected adult cardiac myocytes." Moll.Cell Biochem. 1998, V.181(l-2). P.143-155.

183. Salvatori G, Lattanzi L, Coletta M. et.al. "Myogenic conversion of mammalian fibroblasts induced by differentiating muscle cells." J.Cell Sci. 1995, V.108. P.2733-2739.

184. Salven P, Mustjoki S, Alitalo R et. al. "VEGFR-3 and CD133 identify a population of CD34+ lymphatic/vascular endothelial precursor cells." Blood 2003, Jan l;101(l):168-72.

185. Satomura K., Derubeis A.R., Fedarko N.S., Ivaraki-O'Connor K., Kuznetsov S.A., Rowe D.W., Young M.F., Gehron Robey P. "Receptor tyrosine kinase expression in human born marrow stromal cells." J. Cell Physiol. 1998, 177:426-438.

186. Schaison G., Eden O.B., Henze G et.al. "Recommendations on the use of colony-stimulating factors in children: Conducion of European panel." Euro. J. Pediatr. 1998, 157, 955-966.

187. Schultz E. "Satellite cell proliferative Compartments in growing skeletal muscles." Dev. Biol. 1996, 175, 84-94.

188. Seshi В., Kumar S., Selers D. "Human bone marrow stromal cell: coexpression of markers specific for multiple mesenchymal cell lineages." Blood cells, Molecules and Diseases, 2000, 26(3), 234-246.

189. Shaked A, Csete ME, Drazan KE et.al. "Adenovirus -mediated gene transfer in the transplant setting.II.Successful expression of transferred cDNA in syngenic liver grafts." Transplantation. 1994, V.57(10). P.1508-1511.

190. Shamblott M.J., Axelman J. Gaerhart I. D. et.al. "Derivation of pluripotent stem cells from cultured primordial germ cells." Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998, 95, 13726-13731.

191. Shapiro F., Koide S., Glimcher M.J. "Cell origin and differentiation in the repair of full-thickness defects of articular cartilage." J. Bone Joint Surg. Am. 1993, 75: 532-553.

192. Shen J, Taylor N, Duncan L. et.al. "Ex vivo adenovirus mediated gene transfection of human conjunctival epithelium." Br. J.Ophthalmol. 2001, V.85. P.861-867.

193. Shi Q., Rafii S., Wu M. H et.al. "Evidence for circulating bone-marrow-derived endothelial cells." Blood, 1998, 92, 362-367.

194. Simmons PJ, Torok-Storb B. "Identification of stromal cell precursors in human bone marrow by a novel monoclonal antibody, STRO-1." Blood 1991, 78:55-62.

195. Slack J.M. "Stem cells in epithelial tissues." Science 2000, 287, 1431-1433.

196. Soonpaa MH, Koh GY, Klug GM, Field LJ. "Formation of nascent intercalated disks between grafted fetal cardiomyocytes and host myocardium." Scince. 1994, V. 263. P98-101.

197. Soria В., Roche E., Bema G. et.al. "Insulin secreting cells derived from ESC normalize glycemia in diabetic rats." Diabetes, 2000, 49, 157-162.

198. Spradling A., Drummond Barbosa D., Kai Th., 2001. Цит. По В.В.Малайцев, И.М.Богданова, Г.Т.Сухих. "Современные представления о биологии стволовой клетки" Архив патологии 2002, №4, с. 7-11.

199. Stamm С, Westphal В, Kleine HD et. al. "Autologous bone-marrow stem-cell transplantation for myocardial regeneration." Lancet. 2003, Jan 4;361(9351):11-12.

200. Strauer BE., Kornowski R. "Stem cell Therapy in perspective." Ciculation 2003, 107, 929-934.

201. Szmitko P.E., Fedak P.W., Weisel R.D. et.al. "Endothelial progenitor cells: new hope for broken hearts". Citculation, 2003, v 107, p. 3093-3100.

202. Talbot N. C, Carret W. M. "Ultrastructure of ESC the 8 day pig blastocyst before and after manipulation." The Anat. Rec., 2001, 264, 101-113.

203. Temple S., and Alvares-Buylla A. "Stem cells in the adult mammalian central nervous system." Curr. Opin. Neurobio Pathol. 1999, 9, 135-141.

204. Teramoto S.,Ito H.,Ouchi Y. "Variables affecting the transduction efficiency of adenovirus vectors in bovine aortic endothelial cells." Thromb.Res. 1999, V93(l). P.35-42.

205. Theise N.D., Saxena R., Portmann B. et. al. "The canals of Hering and hepatic stem cells in humans." Hepatology, 1999, 30, 1425-1433.

206. Theise ND., Nimmakayaln M., Gardner R., Jllei PB., Morgon G., Teperman F., Henegorin O., and Krause D.S. "Liver from bone marrow in humans." Hepatology. 2000, 32. 11-16.

207. Thomson J.A., Itskovitz-Eldor J., Shapiro S. S. et.al. "Embryonic stem lines derived from human blastocyst." Science, 1998, 282, 1145-1147.

208. Thorgeirsson S.S. "Hepatic stem cells." Am. J. Pathol. 1993, 142, 1331-1333.

209. Till J.E., and McCullough EA. "A direct measurement of the radiation sensitivity of normal mouse bone marrow cells." Radiat. Res. 1961, 19,213-222.

210. Till J.E., Mc.Culloch E. "A direct measurement of the radiation sensitivity of normal mouse bone marrow cells." Radit. Res. 1961, 14, 1419-1430.

211. To L.B., Haylock D.H., Simmons P.J., Juttner C.A. "The biology and clinical used of blood stem cells." Blood, 1997, 89, 2233-2258.

212. Tomita S, Li RK, Jia ZQ et.al. "Bone Marrow Cells Transplanted in a Cardiac Scar Induced Cardiomyogenesis and Angiogenesis and Improved Damaged Heart Function." Circulation. 1999, Vol. 100(suppl I). P1-91-1-92.

213. Toyoda M., Takayama H„ Horignchi N. et.al. "Overexpression of HGFISCF promotes vascularization and granulation tissue formation in vivo." FEBS Letters, 2001, 509, 95-100.

214. Urist M.R., terashima Y, Nakagawa M, Stamos C. "Cartilage tissue differentiation from mesenchymal cells derived from mature muscle in tissue culture." In Vitro. 1978, 14: 697-706.

215. Vamada Т., Voshikava M. et.al. "In vitro Functional Gut Like Organ Formation from Mouse ESC." Stem cells, 2002, 20, 41-49.

216. Vamada Т., Voshikava M.,Kanda S. et.al. "In vitro Differentiation of ESC identified by cellular Uptake of Indocyanin Green." Stem Cells. 2002,20, 146-154.

217. Vasa M., Fichtscherer S., Aicher A et.al. "Number and migratory activity of circulating endothelial progenitor cells inversely correlate with risk factors for CAD". Circ. Res., 2001, v89, p.el-e7.

218. Vassilopolos G., Wang P.-R., Russel D. "Transplanted bone marrow regenerates liver by cell fusion." Nature 2003, 422, 901-904.

219. Verfaillie C.M. "Adhesion receptors as regulators of the hematopoietic process." Blood, 1998, 92, 2609-2612.

220. Vescovi AJ., Gritti A., Galli R., and Parati E.A. "Isolation and intracerebral grafting of nontransformed multipotential embryonic human CNS stem Cells." J. Neurotrauma. 1999,16, 689-693.

221. Wang X., Willenbring H., Akkari Y et.al. "Cell fusion is the principal source of bone-marrow derived hepatocytes." Nature 2003,422, 897-901.

222. Watt E. "Epidermal stem cells: markers pattering and the control of stem cell fate." Phil. Trans. R. Soc. Lond. B. 1997, 353, 831.

223. Weissman I.L. "Translating stem and progenitor cell biology to the clinic: barrier and opportunities." Science. 2000, 287, 1442-1446.

224. Weissman J.F. "Stem cells: units of development, units of regeneration and units in evolution." Cell. 2000, 100, 157-168.

225. Whitlock C.A, Tidmarsh G.F, Muller-Sieburg C., Weissman I.L. "Bone marrow stromal cell line with lymphopoietic activity express high levels of a pre-B neoplasia-associated molecule." Cell, 1987, 48, 1009-1021.

226. Williams BP., Read J., and Price J. "The generation of neurons and oligodendrocytes from a common precursor cell." Neuron, 1991, 7, 685-693.

227. Williams J.T., Southerland S.S., Souza J., Calcutt A.F., Cartledge R.G. "Cells isolated from adult human skeletal muscle capable of differentiating into multiple mesodermal phenotypes." Am. Surg. 1999, 65: 22-26.

228. Wolf N.S., Kone A., priestley G.V., Bartelmez S.H. "In vivo and in vitro characterization of long-term repopulating primitive hematopoiectic cells isolated by sequential Hoechst 33342-rhodamine 123 FACS selection." Exp. Hematol. 1993, 21: 614622.

229. Wu A., Till J.E., Simonovitch L., Mc Culloch E. "Cytological evidence for a relationship between normal hematopoietic colony-forming cells of the lymphoid system." J. Exp. Med. 1968, 127, 455-467.

230. Xu C., Inokuma M. S., Denham J. Et.al. "Feeder free growth of undifferentiated human ESC." Nature Biotechnol., 2001, 19, 971-974.

231. Yamazaki M., Nakajima F., Ogasawara A., Moriga H., majeska R.J., Einhorn T.A. "Spatial and distribution of CD44 and asteopontin in fracture callus." J. Bone Joint Surg. Br. 1999,81:508-515.

232. Yau T.M., Tomita SH., Weisel RD., et.al. "Beneficial effect of autologous cell Transplantation on infarcted Heart function: comparison between bone marrow sromal cells and Heart Cells." Ann. Thorac. Surg. 2003, 75, 169, 177.

233. Young DC, Kingsley SD, Ryan KA, Dutko FJ. "Selective inactivation of eucariotic beta-galactosidase in assays for inhibitors of HIV-1 TAT using bacterial beta-galactosidase as a reporter enzyme." Analytical Biochemistry. 1993, V.215. N1.P.24-30.

234. Young R.G., Butler D.L., Weber W., Caplan A.I, Gordon S.L, Fnk D.J. "Ise of mesenchymal stem cells in a collagen matrix for Achilles tendon repair." J. Ortho. Res. 1998, 16:406-413.

235. Zandstra P.W, Lauffenburger D.A, Eaves C.Y. "A ligand-receptor signaling threshold model of stem cell differentiation control: a biologically conserved mechanism applicable to hematopoiesis." Blood. 2000, 96, 1215-1222.

236. Ziegelhoeffer T, Fernandez B, Kostin S. et al Bone "Marrow derived Cells do not incorporate into the adult growing Vasculature." Circul. Res. 2004, 94, 230-238.

237. Zuk P.A., Min Zhu, Mizuno H., et.al. "Multilineage cells from human adipose tissue: implications for cell-based therapies." Tissue Engineering, 2001, V7, N2, 211-228.