Особенности кальциевой сигнализации в пролиферирующих и дифференцирующихся миобластах линии C2C12 мыши тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Красный, Алексей Михайлович

• Красный, Алексей Михайлович
• кандидат биологических наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Красный, Алексей Михайлович

Введение.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Кальциевая сигнализация.

1.1.1. Поступление Са в цитоплазму клеток при стимуляции клеточных рецепторов.

1.1.2. Са - транспортирующие системы.

1.1.3. Мобилизация Са из внутриклеточных структур.

1.1.3.1. Инозитолтрифосфатный рецептор (1РзК).

1.1.3.2. Рианодиновый рецептор (КуР.).

1.1.4. Са2+-каналы плазматической мембраны.

941.1.4.1. Потенциал-управляемые Са -каналы.

1.1.4.2. Рецептор-управляемые Са -каналы плазматической мембраны.

1.1.4.3. Истинные рецептор-управляемые каналы.

941.1.4.4. Са -каналы, активируемые вторичными посредниками.

94- 94

1.1.4.5. Са -каналы, регулируемые высвобождением Са из внутриклеточные депо.

1.2. Формирование мембранного потенциала.

1.3. Кальциевая сигнализация в миобластах.

1.4. Кальциевая сигнализация и некоторые патологические состояния мышечной системы: миодистрофия Дюшенна-Беккера.

1.5. Адренергические рецепторы.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Объект исследования.

2.2. Культивирование клеток.

942.3. Оценка внутриклеточных запасов Са

2.4. Флуоресцентные исследования Са

2.5. Реактивы и концентрации, используемые при флуоресцентных исследованиях Са

942.6. Оценка концентрации Са в митохондриях.

2.7. Выделение тотальной РНК.

2.8. Определение концентрации тотРНК в пробе.

2.9. Выделение мРНК.

2.10. Синтез кДНК.

2.11. Конструирование праймеров.

2.12. Нормировка к ДНК библиотек.

2.13. ПЦР-анализ.

2.14. Выделение ДНК из агарозного геля.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Ретикулярные запасы Са в пролиферирующих миобластах.

3.2. Ретикулярные запасы Са дифференцирующихся миобластов.

3.3. Сравнение кинетики удаления Са2+ из цитоплазмы пролиферирующих и дифференцирующихся миобластов.

3.4. Роль митохондрий в регуляции концентрации Са в цитоплазме пролиферирующих миобластов.

3.5. Анализ механизмов кальциевой сигнализации в пролиферирующих миобластах.

3.5.1. Механизмы активации входа

Са в клетку.

3.5.2. Выявление каналов, проводящих в цитоплазму делящихся миобластов.

3.5.3. Выявление типа адренергических рецепторов, вызывающих поступление Са в цитоплазму миобластов.

3.5.4. Передача сигнала от адренергических рецепторов к потенциалзависимым кальциевым каналам Ь-типа.

3.6. Оценка поступления Са в цитоплазму дифференцирующихся миобластов при активации адренергических рецепторов адреналином.

3.7. Влияние деполяризации на поступление Са в цитоплазму пролиферирующих миобластов.

3.8. Экспрессия генов, кодирующих субъединицы потенциалзависимых кальциевых каналов Ь-типа в пролиферирующих и дифференцирующихся миобластах.

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

4.1. Роль опустошения ретикулярных запасов Са во внутриклеточной кальциевой сигнализации в пролиферирующих миобластах.

4.2. Роль адреналина во внутриклеточной кальциевой сигнализации в пролиферирующих миобластах.

4.3. Механизм внутриклеточной кальциевой сигнализации в пролиферирующих миобластах.

4.4. Роль и свойства кальциевого потенциалзависимого канала Ь-типа в пролиферирующих миобластах.

4.5. Особенности кальциевой сигнализации через 24 часа после начала дифференцировки миобластов.

4.6. «Кальциевые волны» в дифференцирующихся миобластах.

4.7. Возможная роль митохондрий в регуляции концентрации Са2+ в цитоплазме миобластов.

4.8. Обсуждение механизмов кальциевой сигнализации в миобластах, выявленных в данной работе.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Особенности кальциевой сигнализации в пролиферирующих и дифференцирующихся миобластах линии C2C12 мыши»

Одним из важнейших этапов развития различных тканей и органов является переход клеток от пролиферации к дифференцировке. В этот период начинается экспрессия многих специфических генов и синтез соответствующих белков, определяющих фенотип дифференцирующихся клеток. Существенным компонентом регуляции внутриклеточных процессов служит кальциевая сигнализация, задачей которой является активация Са -зависимых белков в результате кратковременного повышения концентрации ионов Са в цитоплазме. Действие этих ионов может быть опосредовано специальными Са2+-связывающими белками, такими, как кальмодулин; кроме того кальцийзависимые ферменты могут иметь собственные сайты связывания Са2+.

Повышение концентрации ионов Са2+ в цитоплазме может происходить в результате открывания кальциевых каналов плазматической мембраны или внутриклеточных кальциевых депо. Открывание каналов может быть вызвано деполяризацией мембран или действием сигнальных веществ, нейромедиаторов (АТФ, глутамат), вторичных мессенджеров (1Р3, цАМФ).

Известно, что запасы внутриклеточных депо играют основную роль в регуляции концентрации Са2+ в цитоплазме различных типов клеток животных, однако стадия формирования механизмов высвобождения внутриклеточных запасов Са в процессе клеточной дифференцировки неизвестна.

Для понимания кальциевой сигнализации важное значение имеет изучение особенностей строения, а также регуляции функционирования специфических ионных каналов, осуществляющих поступление

Са2+ в цитоплазму. Молекулярная структура и экспрессия отдельных субъединиц кальциевых каналов, а также механизмы их регуляции установлены для многих типов клеток (Berridgt, Irvine, 1989; Авдонин, Ткачук, 1994; 6

МасЬеппап, 2002; Зинченко, Долгачева, 2003; 11осктап е1 а1., 2002; Болдырев и др., 2006), однако для миобластов подобный анализ не проводился. Таким образом, актуальной проблемой является исследование механизмов внутриклеточной кальциевой сигнализации в миобластах на стадии пролиферации и во время дифференцировки.

Фундаментальное значение этой работы состоит в обнаружении новых сигнальных путей на стадии пролиферации миобластов и описании их изменений в процессе дифференцировки.

Результаты работы могут быть использованы при чтении курсов лекций по клеточной биологии и биологии развития, а также учитываться в биомедицинских исследованиях при решении задач, связанных с патологиями, которые вызваны нарушениями механизмов кальциевой сигнализации и клеточной пролиферации.

Цели и задачи исследования

Целью работы было изучение механизмов кальциевой сигнализации, как в пролиферирующих, так и в дифференцирующихся миобластах. Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить особенности регуляции кальциевой сигнализации, вызывающей высвобождение ионов Са2+ внутриклеточных депо, в пролиферирующих и в дифференцирующихся миобластах.

2. Выяснить механизмы регуляции кальциевой сигнализации в пролиферирующих миобластах: выявить активатор поступления Са в цитоплазму этих клеток, а также рецепторы, на которые он воздействует; охарактеризовать каналы, через которые Са2+ поступает в цитоплазму клеток, а также исследовать механизм передачи сигнала от рецептора к каналу.

3. Установить особенности внутриклеточной кальциевой сигнализации, связанные с адренергическими рецепторами в пролиферирующих и дифференцирующихся миобластах.

4. Для установления специфичности потенциалзависимых кальциевых каналов в миобластах определить уровень экспрессии генов СаспаЬ, СаспаМ, Саспа1с и Саспа1/, кодирующих синтез каналообразующих субъединиц Са -каналов Ь-типа.

Научная новизна и теоретическая значимость работы

Впервые описаны особенности внутриклеточной кальциевой сигнализации в пролиферирующих и дифференцирующихся миобластах. Показано, что в пролиферирующих миобластах система, регулирующая концентрацию

Са2+ в цитоплазме путем высвобождения этих ионов из внутриклеточных депо, практически не функционирует, а ее формирование происходит в течение первых нескольких часов дифференцировки. Установлено, что поступление Са в цитоплазму пролиферирующих миобластов осуществляется через потенциалзависимые Са -каналы Ь-типа. Эти каналы играют ключевую роль в регуляции концентрации Са2+ в цитоплазме пролиферирующих миобластов. Механизм регуляции поступления Са включает в себя активацию [32-адренергических рецепторов, участие аденилатциклазы и вход Са2+ через потенциалзависимые Са -каналы Ь-типа. Показано, что после перехода клеток в состояние дифференцировки основным механизмом в регуляции концентрации Са в цитоплазме является высвобождение внутриклеточных запасов этих ионов. Впервые описано изменение уровней экспрессии отдельных субъединиц потенциалзависимых

Са2+

-каналов Ь-типа в миобластах в процессе их

2+ дифференцировки. Обнаружена нейрональная форма Са -канала Ь-типа Сау1.3 в пролиферирующих миобластах.

Результаты работы могут быть использованы при чтении курсов лекций по клеточной биологии и биологии развития, а также учитываться в биомедицинских исследованиях при решении задач, связанных с патологиями, которые вызваны нарушениями кальциевой сигнализации и клеточной пролиферации.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Красный, Алексей Михайлович

Выводы

1. В пролиферирующих миобластах линии С2С12 мыши система кальциевой сигнализации, регулирующая концентрацию Са2+ в цитоплазме путем опустошения внутриклеточных депо этих ионов, практически не функционирует. Регулируемые АТФ запасы Са2+ в этих клетках незначительны.

2. В пролиферирующих миобластах поступление Са в цитоплазму регулируется адреналином через р2"аДренергические рецепторы и происходит через потенциалзависимые кальциевые каналы Ь-типа Сау1.3.

3. Передача сигнала внутриклеточной кальциевой сигнализации происходит по цАМФ-зависимому пути.

4. Формирование системы кальциевой сигнализации, регулирующей концентрацию Са2+ в цитоплазме путем опустошения запасов внутриклеточных депо, происходит на начальных этапах дифференцировки миобластов (в течение 8-10 час после переноса клеток в среду дифференцировки).

5. В дифференцирующихся миобластах поступление Са2+ при активации адренергической системы существенно ниже по сравнению с пролиферирующими клетками.

6. В процессе дифференцировки миобластов значительно возрастает уровень экспрессии гена СаспаЬ, который кодирует синтез специфической субъединицы с^Б, тогда как уровень экспрессии каналообразующей субъединицы СаспаЫ, кодирующей синтез субъединицы о^О, заметно снижается.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Красный, Алексей Михайлович, 2011 год

1. Авдонин П.В., Ткачук В.А. Рецепторы и внутриклеточный кальций. М., Наука. 1994. 288 с.

2. Авдонин П.В., Суханова И.Ф., Сурков К.В., Ruegg U.T. Экспрессия и функциональная роль белка Orai-1 в скелетных миобластах и миотубулах//Биол. мембраны. 2008. Т. 25. С. 472-479.

3. Албертс Б., Брей Д., Льюис Дж., и др. Молекулярная биология клетки, 2 изд. М. Мир. 1994. 346 с.

4. Болдырев А. А., Кяйвяряйнен Е. К, Илюш В. А. Биомембранология. Петрозаводск. КарНЦ РАН. 2006. 225с.

5. Зинченко В. П., Долгачева Л.П. Внутриклеточная сигнализация. Пущино Эл. изд. Аналитическая микроскопия. 2003. 84с.

6. Крутецкая 3. К, Лебедев О. Е., Курилова Л. С. Механизмы внутриклеточной сигнализации: Монография. СПб. Изд-во С. Петерб. Ун-та. 2003. 208с.

7. Arnaudeau S., Holzer N., Konig S., Bader C. R., Bernheim L. Calcium sources used by post-natal human myoblasts during initial differentiation // J. Cell. Physiol. 2006. V. 208. P. 435-445.

8. AhlquistR. P., A study of the adrenotropic receptors 11 Am J Physiol 1948. V. 153. P. 586-600.

9. Alderton J. M., Steinhardt R. A. How calcium influx through calcium leak channels is responsible for the elevated levels of calcium-dependent proteolysis in dystrophic myotubes // Trends Cardiovasc Med. 2000.T. 10. № 6. C. 268-72.

10. Brennesvik E. 0., Ktori C., Ruzzin J., Jebens E., Shepherd P.R., Jensen J. Adrenaline potentiates insulin-stimulated PKB activation via cAMP and Epac: implications for cross talk between insulin and adrenaline // Cell Signal. 2005. V.17. P.1551-1559.

11. Beitzel F., Gregorevic P., RyallJ., Plant D. R., Sillence M. N., Lynch G. S. (32-Adrenoceptor agonist fenoterol enhances functional repair of regenerating rat skeletal muscle after injury // J Appl Physiol. 2004. V. 96: P. 1385-1392.

12. Berridge M. J., Irvine R. F. Inositol phosphates and cell signalling // Nature. 1989. V. 341. P. 197-205.

13. Berridge M. J. Inositol trisphosphate and calcium signaling. Nature. 1993. V. 361. P. 315-325.

14. Bootman M. D., Berridge M. J., Lipp P. Cooking with calcium: the recipes for composing global signals from elementary events. Cell. 1997. V. 91. P. 367373.

15. Baylor S. M., Hollingworth S. Measurement and interpretation of cytoplasmic Ca signals from calcium-indicator dyes // News Physiol. Sci. 2000. V. 15: P. 19-26.

16. Bezprozvanny I., Ehrlich B. E. Inositol (l,4,5)-trisphosphate (lnsP3)-gated

17. Ca channels from cerebellum: conduction properties for divalent cations and regulation by intraluminal calcium.//J. Gen. Physiol. 1994.V.104. P. 521-568.

18. Cornell R., MacLennan D. H., Independent synthesis of phospholipid and the intrinsic proteins of the sarcoplasmic reticulum // J Biol Chem. 1985. V. 260. № 2. P. 1290-1295.9+

19. Chen Z, Li Z, Peng G., et al. Extracellular ATP-induced nuclear Ca transient is mediated by inositol 1,4,5-trisphosphate receptors in mouse pancreatic beta-cells // Biochem Biophys Res Commun. 2009. V. 382. P. 381384.

20. Duranti G., La Rosa P., Dimauro I. et al. Effects of Salmeterol on Skeletal Muscle Cells: Metabolic and Pro-Apoptotic Features // Med Sci Sports Exerc. 2011. V. 4.

21. DeLisle S., Marksberry E. W., Bonnett C. et al. Adenophostin A can stimulate94. • 94

22. Ca influx without depleting the inositol 1.4,5-trisphosphate-sensitive Ca stores in the Xenopus oocyte //J. Biol Chem. 1997. V. 272. P. 9956-9961.

23. Darbellay B., Arnaudeau S., Konig S. et al. STIM1- and Orail-dependent store-operated calcium entry regulates human myoblast differentiation // J Biol Chem. 2009. V. 284. P. 5370-5380.

24. Feske S., Gwack Y., Prakriya M. et al. A mutation in Orail causes immune deficiency by abrogating CRAC channel function // Nature. 2006. V. 441. P. 179-185.

25. Galvan D. L., Borrego-Diaz E., Perez P. et al Subunit oligomerization, and topology of the inositol 1,4,5-trisphosphate receptor// J. Biol. Chem. 1999. V. 274.29483-29492.

26. Grynkiewicz G., Poenie M., Tsien R. A new generation of Cal" indicators with greatly improved fluorescence properties // J. Biol. Chem. 1985. V. 260. p. 3440-3450.

27. Gukovskaya A. S., Zinchenko V.P. Mechanisms of receptor mediated generation of ionic signals in rat thymocytes and Ehrlich ascites tumour cells f/Phys. Chem. Biol. 1990. V. 10. P. 1—98.

28. Hinkle R., Hodge K., Cody D. et al. Skeletal muscle hypertrophy and anti-atrophy effects of clenbuterol are mediated by the p2-adrenergic receptor. // Muscle Nerve. 2002. V. 25. P. 729-734.

29. Konig, S., Beguet, A., Bader, C. R., andBernheim, L. The calcineurin pathway links hyperpolarization (Kir2.1)-induced Ca2+ signals to human myoblast differentiation and fusion // Development 2006. V. 133. P. 3107-3114.

30. Kao J. Practical aspects of measuring Ca ., with fluorescent indicators // Methods in cell biology. 1994.V. 40. P. 155-181.

31. Liu J.H., Konig S., Michel M. et al. Acceleration of human myoblast fusion by depolarization: graded Ca2+ signals involved // Development. 2003. V. 130. P. 3437-3446.

32. Lynch G. S., SchertzerJ. D., Ryall J. G. Therapeutic approaches for muscle wasting disorders // Pharmacol Ther. 2007. P. 113. V. 461-487.

33. Liou J., Kim M. L,, Heo W. D., et al, STIM is a Ca sensor essential for Ca -store-depletion-triggered Ca2+ influx// CurrBiol. 2005. V. 15. P. 1235-1241.

34. Lee S. J., Lee Y. H., Kim Y. S. et al Transcriptional regulation of phospholipase C-gamma 1 gene during muscle differentiation // Biochem Biophys Res Commun. 1995. V. 206. P. 194-200.

35. MacLennon D. H., Rice W. J., Green N. M. The mechanism of Ca transportiby sarco(endo) plasmic reticulum Ca -ATPases // J. Biol. Chem. 1997. V. 272. P. 28815-28818.

36. MacLennon D. H. Ca2+ signalling and muscle disease // Eur J Biochem. 2000. V. 267. P. 5291-5297.

37. Marshall I., Taylor C. W. Regulation of inositol 1,4,5-trisphosphate receptors //J. Exp. Biol. 1993. V. 184. P. 161-182.

38. MendellJ., Campbell K, Rodino-Klapac L. et al. Dystrophin immunity in Duchenne's muscular dystrophy// N Engl J Med. 2010. V.363. P.1429-1437.

39. Mignery G. A., SudhofT. C. The ligand binding site and transduction mechanism in the inositol 1,4,5-trisphosphate receptor // EMBO J. 1990. V. 9. P. 3893-3898.

40. Marks A. R. Intracellular calcium-release channels: regulators of cell life and death // Amer. J. Physiol. 1997. V. 272. P. 597- 605.

41. Missiaen L, De SmedtH., Droogmans G. and Casteels R. Ca2+ release induced by inositol-l,4,5-trisphosphate is a steady-state phenomenon controlled by luminal Ca2+ in permeabilized cells //Nature. 1992. V. 3570. P. 599-602.

42. Missiaen .L, Taylor C. W, Berridge M. J. Spontaneous calcium release from inositol trisphosphate-sensitive calcium stores ///Nature. 1991. V. 352. P. 241-244

43. Mercer J. C., Dehaven W. I., Smyth J. Large store-operated calcium selective currents due to co-expression of Orail or 0rai2 with the intracellular calcium sensor, Stiml // J Biol Chem 2006. V.281. P. 24979-24990.

44. Martonosi A., Roufa D., Ha D. B.,and Boland R. The biosynthesis of sarcoplasmic reticulum // Fed Proc. 1980. V.39. P. 2415-21.

45. Naro F., De Arcangelis V., Coletti D. Increase in cytosolic Ca induced by elevation of extracellular Ca2+ in skeletal myogenic cells // J Physiol Cell Physiol. 2003. V. 284. P. 969 976.

46. Nilius B., Owsianik G., Voets T. and Peters J. A. Transient receptor potential cation channels in disease // Physiol Rev. 2007. V. 87. P. 165-217.

47. Navarro J. Dihydropyridine methyl-3H.PN 200-110 binding and myogenesis in intact muscle cells in vitro // J. Neurochem. 1986. V. 46.P.1166-1179

48. Opas M., Dziak E., Fliegel L. and Michalak M. Calcium regulation of skeletal myogenesis. II. Extracellular and cell surface effects // Cell Calcium. 1994. V. 15. P. 132-42.

49. Oestr-eich E. A., Malik S., Goonasekera S. A. Epac and phospholipase Cepsilon regulate Ca2+ release in the heart by activation of protein kinase Cepsilon and calcium-calmodulin kinase II // J Biol Chem. 2009. V. 284. P. 1514-1522.

50. Peinelt C., VigM., Koomoa D. L. et al. Amplification of CRAC current by STIM1 and CRACM1 (Orail) //Nat Cell Biol. 2006. V.8. P. 771-773.

51. Pinset C., Whalen R. G. Manipulation of medium conditions and differentiation in the rat myogenic cell line L6. Dev. Biol. 1984. V. 102. P. 269-277.

52. Powell J. A., Molgo J., Adams D. S., et al. IP3 receptors and associated Ca signals localize to satellite cells and to components of the neuromuscular junction in skeletal muscle // J Neurosci. 2003. V. 23. P. 8185-8192.

53. Pearen M. A., Ryall J. G., Lynch G. S. et al. Expression profiling of skeletal muscle following acute and chronic beta2-adrenergic stimulation: implications for hypertrophy, metabolism and circadian rhythm. // BMC Genomics. 2009. V.10. P. 448.

54. Rockman H. A., Koch W. J., Lefkowitz R. J. Seven-transmembrane-spanning receptors and heart function //Nature. 2002. V. 415. P. 206-212.

55. Roos J, DiGregorio P. J., Yeromin A. V. STIM1 an essential and conserved component of store-operated Ca2+ channel function // J Cell Biol. 2005.V.169. p. 435-445.

56. Sham J. S., Jones L. R., Morad M. Phospholamban mediates the P-adrenergic-enhanced Ca uptake in mammalian ventricular myocytes. Am J Physiol Heart Circ Physiol 261: 1344-1349,1991.

57. Supattapone S., WorleyP. F., BarabanJ. M, Snyder S. H. Solubilization, purification and characterization of an inositol trisphosphate receptor// J. Biol. Chem. 1988. V. 263. P. 1530-1534.

58. SoboloffJ., Spassova M. A., TangX. Orail and STIM reconstitute store-operated calcium channel function // J Biol Chem 2006. V. 281. P. 2066120665.

59. SchmidA., RenaudJ. F., Fosset M., MeataJ. P. an, Lazdunski M. The nitrendipine-sensitive Ca2+ channel in chick muscle cells and its appearance during myogenesis in vitro and in vivo // J Biol Chem. 1984. V. 259. P. 11366-11372.

60. Stokes L., Gordon J., Grafton G. Non-voltage-gated L-type Ca2+ channels in human T cells: pharmacology and molecular characterization of the major alpha pore-forming and auxiliary beta-subunits // J. Biol. Chem. 2004.V. 279. P. 19566-19573.

61. Shin D.H., Lee K.S., Lee E. et al. Pax-7 immunoreactivity in the post-natal chicken central nervous system // Anat Histol Embryol. 2003. V. 32. P. 378383.

62. Suh P. G., Park J. I., ManzoliL., et al. Multiple roles of phosphoinositide-specific phospholipase C isozymes // BMB Rep. 2008. V. 41. P. 415-434.

63. Tsien R. Y., Pozzan T., Rink T. J. Measuring and manipulating cytosolic Ca with trapped indicators // Trends Biochem. Sci. 1984. V. 9. P. 263-266.

64. Takahashi A., Camacho P., LechleiterJ. D., et al. Measurement of intracellular calcium. Physiol. Rev. 1999. V.79. V.1089-1125.

65. Takeshima H., Nishimura S., Matsumoto T. Primary structure and expression from complementary DNA of skeletal muscle ryanodine receptor // Nature. 1989. V. 339. P. 439-445.

66. Varadi G., OrlowskiJ., Schwartz A. Developmental regulation of expression of the alpha 1 and alpha 2 subunits mRNAs of the voltage-dependent calcium channel in a differentiating myogenic cell line // FEBS Lett 1989. V. 250. P. 515-518.

67. VigM, Peinelt C, Beck A, et al. CRACM1 is a plasma membrane protein essential for store-operated Ca2+ entry // Science. 2006.V. 312. P1220-1223.

68. Worley P.F., Zeng W., Huang G. N., et al. TRPC channels as STIM1-regulated store-operated channels // Cell Calcium. 2007. V. 42. P. 205-211.

69. Xiao R. P., Avdonin P, Zhou Y. Y. et. al. Coupling of p2-adrenoceptor to Gi proteins and its physiological relevance in murine cardiac myocytes // Circ Res. 1999. V. 84. C. 43-52.

70. Xiao R. P., Cheng H., Zhou Y. Y. et al. Recent advances in cardiac 02-adrenergic signal transduction. Circ Res 85: 1092-1100, 1999.

71. Xiao R. P., Hohl C., Altschuld R. et al (32-Adrenergic receptor-stimulated increase in cAMP in rat heart cells is not coupled to changes in Ca dynamics, contractility, or phospholamban phosphorylation. J Biol Chem 269: 19151-19156, 1994.

72. XiaS. L., WangL., CashM. N. etal. Extracellular ATP-induced calcium signaling in mIMCD-3 cells requires both P2X and P2Y purinoceptors //Am J Physiol Renal Physiol. 2004.V. 287. P. 204-214.

73. Zhang S. L., YerominA. V., Zhang X. H. etal. Genome-wide RNAi screen of Ca2+ influx identifies genes that regulate Ca2+ release-activated Ca2+ channel activity // PNAS 2006. V. 103. C. 9357-9362.