Морфофункциональная характеристика эндотелиальных прогениторных клеток при хронической сердечной недостаточности тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.03.04, кандидат наук Бондаренко, Наталья Анатольевна

• Бондаренко, Наталья Анатольевна
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Бондаренко, Наталья Анатольевна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ Глава I. СОВРЕМЕННЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ ОБ

ЭНДОТЕЛИАЛЬНЫХ ПРОГЕНИТОРНЫХ КЛЕТКАХ

1.1. Васкулогенез и ангиогенез, как механизмы образования

новой сосудистой сети

1.2. Фенотипическая характеристика популяций циркулирующих эндотелиальных прогениторных клеток

1.3. Источники эндотелиальных прогениторных клеток

1.4. Участие эндотелиальных прогениторных клеток в процессах неоваску ляризации

1.5. Функциональные свойства эндотелиальных прогениторных клеток

1.5.1. Мобилизация эндотелиальных прогениторных клеток в периферическую кровь

1.5.2. Миграция и хоуминг эндотелиальных прогениторных

клеток из периферической крови в ткани

1.5.3. Цитокинпродуцирующая активность эндотелиальных прогениторных клеток

1.6. Морфологическая характеристика «ранних» и «поздних» эндотелиальных прогениторных клеток in vitro

1.7. Изучение функциональных свойств эндотелиальных прогениторных клеток и эндотелиальных клеток in vitro

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Характеристика пациентов

2.2. Мобилизация МНК периферической крови

2.3. Фенотип мобилизованных МНК, обогащенных ЭПК

2.4. Иммунноцитохимическое исследование МНК, обогащенных ЭПК, мобилизованных введением G-CSF из костного мозга

2.5. Оценка пролиферативной активности МНК МТТ-тестом

2.6. Исследование уровней цитокинов в кондиционных средах от

МНК, обогащенных ЭПК, и культур ЭПК после мобилизации

2.7. Получение культуры ЭПК из МНК после мобилизации G-CSF

от пациентов с ХСН

2.8. Культура клеток эндотелиальной линии ЕА.Ну926 человека

2.9. Оценка пролиферативной активности культуры

ЭПК, мобилизованной G-CSF, и клеток эндотелиальной линии ЕА.Ну926 на аппарате xCELLigence System

2.10. Оценка миграционной способности культуры ЭПК, мобилизованной G-CSF, и клеток эндотелиальной линии ЕА.Ну926 на аппарате xCELLigence System

2.11. Оценка миграционной способности клеток эндотелиальной линии ЕА.Ну926 на аппарате Cell-IQ

2.12. Исследование продукции стойких метаболитов оксида азота

в кондиционной среде от культуры ЭПК

2.13. Статистическая обработка полученных результатов

Глава III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Фенотипическая характеристика циркулирующих ЭПК, мобилизованных G-CSF, от пациентов с ХСН

3.2. Исследование функциональной активности МНК, обогащенных ЭПК, полученных в ходе процедуры мобилизации G-CSF от пациентов с ХСН

3.2.1. Изучение пролиферативной активности МНК, обогащенных ЭПК, в ходе мобилизации G-CSF от пациентов с ХСН

3.2.2. Изучение экспрессии рецептора хоуминга CXCR4 на ЭПК

в ходе мобилизации G-CSF от пациентов с ХСН

3.2.3. Цитокиновый профиль МНК, обогащенных ЭПК, в ходе мобилизации G-CSF от пациентов с ХСН

3.3. Изучение взаимосвязей количества циркулирующих ЭПК, мобилизованных G-CSF, с продукцией цитокинов и ростовых факторов

3.4. Оценка способности МНК, мобилизованных G-CSF,

от пациентов с ХСН дифференцироваться в ЭПК in vitro

3.5. Исследование функциональной активности культуры ЭПК периферической крови после курса мобилизации G-CSF от пациентов с ХСН

3.6. Исследование цитокинового профиля культур «ранних» и «поздних» ЭПК периферической крови после курса мобилизации G-CSF от пациентов с ХСН

ГЛАВА IV. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

УСЛОВНЫЕ ОБОЗНАЧЕНИЯ

ГСК - гемопоэтическая стволовая клетка

ЗФР - забуференный физраствор

ИБС - ишемическая болезнь сердца

ИМ - инфаркт миокарда

КИ - клеточный индекс

КОЕ - колониеобразующая единица

Кон А - конканавалин А

КС - кондиционная среда

ЛПС - липополисахарид

ММП - матриксная металлопротеиназа

МНК - мононуклеарные клетки

мРНК- матричная рибонуклеиновая кислота

МТТ- 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенил-2Н-тетразолиум бромид

ППС - полная посадочная среда

СПК - стволовая/прогениторная клетка

ХСН - хроническая сердечная недостаточность

ЭПК - эндотелиальная прогениторная клетка

CD - кластер дифференцировки

CXCR4 - хемокиновый рецептор 4 типа к SDF-1

eNOS - эндотелиальная синтаза оксида азота

Еро - эритропоэтин

FCS - фетальная телячья сыворотка

FGF- фактор роста фибробластов

G-CSF - гранулоцитарный колониестимулирующий фактор

GM-CSF - гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор

HGF - фактор роста гепатоцитов

HIF-1- индуцированный гипоксией фактор-1

IGF-1 - инсулиновый фактор роста

IL - интерлейкин

LDL - липопротеины низкой плотности MCP - белок хемоаттрактант моноцитов N0 - оксид азота

NYHA - функциональная классификация хронической сердечной

недостаточности Нью-Йоркской ассоциации кардиологов

PSGL-1 - (Р-селектин лиганд гликопротеин-1)

SDF-1 - стромальный фактор роста-1

SCF-1 - фактор стволовых клеток-1

TGF-ß - трансформирующий фактор роста-ß

TNF-a - фактор некроза опухоли -а

VEGF - фактор роста эндотелия сосудов

VEGFR2 - рецептор к фактору роста эндотелия сосудов

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Морфофункциональная характеристика эндотелиальных прогениторных клеток при хронической сердечной недостаточности»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Эндотелиальные прогениторные клетки (ЭПК) представляют собой уникальную популяцию клеток, которые, как и эмбриональные ангиобласты, способствуют формированию сосудов в постнатальном периоде как за счет ангиогенеза, так и путем васкулогенеза, когда в ответ на ангиогенные ростовые факторы ЭПК мигрируют из ниши костного мозга в кровеносное русло, циркулируют и трансформируются в тканях в локальные адгезивные ЭПК (Kawamoto А., 2003; Кескинов A.A., 2008; Плотников Е.Ю., 2009; Fadini G., 2008; Jiga J., 2013). Доступным источником аутологичных ЭПК является периферическая кровь после фармакологической мобилизации клеток костного мозга человеческим рекомбинантным гранулоцитарным колониестимулирующим фактором (G-CSF) (Дыгай A.M., 2010; Румянцев С.А., 2010).

Участие ЭПК в неоваскуляризации обусловлено не только их способностью дифференцироваться в эндотелиальные клетки, участвуя в формировании новых сосудов, но и способностью продуцировать различные регуляторные ростовые факторы и цитокины, стимулирующие васкулогенез и ангиогенез (Kinnaird Т., 2004; Kim WS., 2013).

На сегодняшний день изучение ангиогенных свойств ЭПК осуществляется с использованием клеточных линий. Так, эндотелиальные клетки человека линии ЕА.Ну926 как морфологически, так и функционально отражают свойства зрелых эндотелиальных клеток, что позволяет оценить как влияние ЭПК на зрелые эндотелиальные клетки, так и влияние зрелых эндотелиальных клеток на ЭПК, моделируя взаимодействие различных популяций клеток в организме (Bauer J., Edgell С.J., 1992).

В экспериментальных моделях ишемии тканей показано стимулирующее действие ЭПК на формирование сосудистой сети как in vitro, так и in vivo (Rafíi S., 2003). Хотя ЭПК уже используются в клеточной терапии хронической сердечной недостаточности (ХСН), их свойства у

пациентов практически не изучены. В связи с этим необходимо более полное понимание биологических свойств используемых клеток у пациентов с ХСН.

Таким образом, представляется актуальным изучение функциональных свойств, таких как пролиферация, миграция, продукция проангиогенных факторов и способность стимулировать ангиогенез, различных популяций ЭПК пациентов с ХСН.

Цель исследования. Охарактеризовать морфологические и функциональные свойства циркулирующих эндотелиальных прогениторных клеток пациентов с ХСН, мобилизованных в периферическое русло введением G-CSF, и эндотелиальных клеток, выращенных in vitro.

Задачи исследования:

1. Оценить фенотип и морфологию циркулирующих и культивируемых ЭПК при ХСН.

2. Изучить спектр продукции цитокинов и ростовых факторов ЭПК до и после мобилизации в периферическое русло введением G-CSF и с учетом условий культивирования на различных адгезионных белках и сроках культивирования.

3. Выявить тип влияния биоактивных веществ, продуцируемых ЭПК, на функциональную активность (пролиферация, миграция) клеток эндотелиальной линии человека ЕА.Ну926.

4. Изучить влияние биоактивных веществ, продуцируемых клетками эндотелиальной линии человека ЕА.Ну926, на функциональную активность (пролиферация, миграция) ЭПК пациентов с ХСН.

Научная новизна. Впервые исследован популяционный состав и функциональная активность циркулирующих ЭПК, мобилизованных введением G-CSF, пациентов с тяжелой формой ХСН. Показано, что при мобилизации G-CSF клеток из костного мозга происходит увеличение количества различных популяций ЭПК, находящихся на разных стадиях дифференцировки.

Впервые показано, что у мобилизованных G-CSF мононуклеарных клеток (МНК), обогащенных ЭПК, отмечена высокая пролиферативная активность, способность к хоумингу, продукция широкого спектра цитокинов и ростовых факторов. Показано, что циркулирующие ЭПК различной степени зрелости пациентов с ХСН сопряжены с продукцией цитокинов и ростовых факторов, продуцируемых МНК.

Впервые установлено, что культура ЭПК, полученная из МНК, мобилизованных введением G-CSF при ХСН, характеризуется пролиферативной и миграционной активность. Показано, что «ранние» и «поздние» ЭПК in vitro обладают различной продуцирующей активностью цитокинов, ростовых факторов и оксида азота (N0). Впервые выявлены аутокринные и паракрин-ные взаимодействия ЭПК и зрелых эндотелиальных клеток.

Теоретическая и практическая значимость работы. Результаты, полученные в ходе исследования влияния G-CSF на мобилизацию ЭПК из костного мозга пациентов с ХСН, расширяют представления о фенотипиче-ских и таких функциональных свойствах стволовых/прогениторных клеток (СПК), как пролиферация, миграция, продукция цитокинов и ростовых факторов.

Результаты диссертационной работы учитываются при комплексной терапии пациентов с ХСН в ФГБУ «ННИИ патологии кровообращения имени академика E.H. Мешалкина» МЗ РФ (Новосибирск). Результаты диссертационной работы внедрены в учебный процесс кафедры анатомии, физиологии и безопасности жизнедеятельности ФГБОУ ВПО НГПУ (Новосибирск).

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Введение G-CSF приводит к мобилизации из костного мозга пациентов с ХСН различных популяций ЭПК, находящихся на различных этапах дифференцировки.

2. МНК, обогащенные ЭПК, периферической крови и ЭПК, полученные in vitro, обладают высоким пролиферативным потенциалом и в процессе

дифференцировки секретируют целый ряд проангиогенных цитокинов и ростовых факторов.

3. ЭПК обладают аутокринным и паракринным регуляторным потенциалом.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на конференции «Стволовые клетки и регенеративная медицина» (Москва, 2010); X Международной конференции «Фундаментальные проблемы лим-фологии» (Новосибирск, 2011); VII научных чтениях, посвященных памяти академика РАМН Е.Н.Мешалкина (Новосибирск, 2011); IV Всероссийской научной школе-конференции «Стволовые клетки и регенеративная медицина» (Москва, 2011); III Международной научно-практической конференции «Постгеномные методы анализа в биологии, лабораторной и клинической медицине» (Казань, 2012); V Всероссийском симпозиуме с международным участием «Актуальные вопросы клеточной и тканевой трансплантологии» (Уфа, 2012); Всероссийской научно-практической конференции «Технологии оптимизации процесса репаративной регенерации в травматологии, ортопедии и нейрохирургии» (Саратов, 2013); XI Международной конференции «Фундаментальные проблемы лимфологии и клеточной биологии» (Новосибирск, 2013).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 15 работ, из них 6

- в рецензируемых журналах по списку ВАК.

1. Коненков В.И., Повещенко О.В., Ким И.И., Покушалов Е.А., Романов А.Б., Гульева H.A. (Бондаренко H.A.), Бернвальд В.В., Шевченко A.B., Голованова О.В., Янкайте Е.В., Повещенко А.Ф., Караськов A.M. Влияние G-CSF на проангиогенные свойства мобилизированных клеток периферической крови у больных с хронической сердечной недостаточностью // Клеточная трансплантология и тканевая инженерия.

- 2011. - Т. 6. - № 3. - С. 71-75.

2. Коненков В.И., Покушалов Е.А., Повещенко О.В., Ким И.И., Романов А.Б., Гульева H.A. (Бондаренко H.A.), Бернвальд В.В., Соловьева

А.О., Янкайте Е.В., Повещенко А.Ф., Караськов A.M. Характеристика фенотипа мобилизованных гранулоцитарным колониестимулирующим фактором периферической крови у больных с хронической сердечной недостаточностью // Клеточные технологии в биологии и медицине. -2012. -№1.- С. 9-13.

3. Гульева H.A. (Бондаренко H.A.), Повещенко О.В., Ким И.И., Бернвальд В.В., Янкайте Е.В., Покушалов Е.А., Романов А.Б., Повещенко А.Ф., Коненков В.И.Характеристика проангиогенных свойств мононуклеарных клеток периферической крови после введения гранулоцитарного колоние-стимулирующего фактора у пациентов с ишемической болезнью сердца // В книге: Фундаментальные проблемы лимфологии и клеточной биологии X Международная конференция. Новосибирск,-2011.-С. 125-126.

4. Ким И.И., Повещенко О.В., Коненков В.И., Покушалов Е.А., Романов А.Б., Бондаренко H.A., Повещенко А.Ф., Сергеевичев Д.С., Караськов A.M. Эффективность мобилизации CD34+ прогениторных клеток препаратом g- G-CSF в зависимости от ишемического анамнеза и возраста больных с хронической сердечной недостаточностью // Патология кровообращения и кардиохирургия. — 2012. - № 1. - С. 75-78.

5. Бондаренко H.A., Повещенко О.В., Ким И.И., Хабаров Д.В., Покушалов Е.А., Романов А.Б., Повещенко А.Ф., Коненков В.И. Влияние криоконсервирования на количество эндотелиальных прогениторных клеток периферической крови после мобилизации гранулоцитарным колониестимулирующим фактором у пациентов с ишемической болезнью сердца // Вестник Уральской медицинской академической науки. - 2012. -№ 4 (41). - С. 18-19.

6. Повещенко О.В., Ким И.И., Покушалов Е.А., Романов А.Б., Бондаренко H.A., Повещенко А.Ф., Караськов A.M., Коненков В.И. Клеточные лимфотропные технологии реабилитации пациентов с хронической сердечной недостаточностью // В сборнике: Профилактическая

и восстановительная медицина Материалы научных советов ЦЭЭР, Новосибирск. - 2012. - С. 43-58.

7. Повещенко О.В., Ким И.И., Бондаренко H.A., Хабаров Д.В., Покушалов Е.А., Романов А.Б., Повещенко А.Ф., Коненков В.И. IL-10 и TNF-а после мобилизации гранулоцитарным колониестимулирующим фактором у пациентов с ишемической болезнью сердца // Вестник Уральской медицинской академической науки. - 2012. - № 4(41). - С. 148-149.

8. Лыков А.П., Повещенко О.В., Бондаренко H.A., Повещенко А.Ф., Ким И.И., Миллер Т.В., Покушалов Е.А., Романов А.Б., Коненков В.И.Оценка эффекта проангиогенных факторов на пролиферативную и миграционную активность клеток эндотелиальной линии ЕА.Ну926 // Бюллетень Сибирского отделения Российской академии медицинских наук. - 2013. -Т. 33. - № 4. - С. 23-29.

9. Гульева H.A. (Бондаренко Н.А,), Ким И.И., Повещенко О.В., Берн-вальд В.В., Повещенко А.Ф., Колесников А.П., Янкайте Е.В., Хабаров Д.В., Комбанцев Е.А., Смагин A.A., Романов А.Б., Покушалов Е.А., Коненков В.И. Возможности аутологичной клеточной терапии ишемической сердечной недостаточности // Стволовые клетки и регенеративная медицина: сборник тезисов Всероссийской научной школы-конференции. Москва, 2010. С.24-25.

10. Повещенко О.В., Ким И.И., Бондаренко H.A., Янкайте Е.В., Хабаров Д.В., Покушалов Е.А., Романов А.Б., Сергеевичев Д.С., Повещенко А.Ф., Коненков В.И. Проангиогенные свойства мобилизованных клеток периферической крови у пациентов с ишемической болезнью сердца // Стволовые клетки и регенеративная медицина: сборник тезисов IV Всероссийской научной школы-конференции. Москва, 2011. С.64-65.

11. Бондаренко H.A., Повещенко О.В., Ким И.И., Повещенко А.Ф., Хабаров Д.В., Покушалов Е.А., Романов А.Б., Караськов A.M., Коненков В.И. Влияние криоконсервации на фенотип прогениторных клеток периферической крови после мобилизации гранулоцитарным колоние-стимулирующим фактором у пациентов с ишемической болезнью сердца // Актуальные вопро-

сы клеточной и тканевой трансплантологии: сборник тезисов V Всероссийского симпозиума с международным участием. Уфа, 2012. С. 228-229.

12. Бондаренко H.A., Лыков А.П., Ким И.И., Повещенко О.В., Пове-щенко А.Ф., Коненков В.И. Изучение пролиферативного потенциалы стволо-вых/прогениторных клеток, мобилизованных введением Г-КСФ у больных с ИБС в режиме реального времени на приборе XCelligence // Постгеномные методы анализа в биологии, лабораторной и клинической медицине: сборник тезисов III международной научно-практической конференции. Казань, 2012. С.198-199.

13. Бондаренко H.A., Лыков А.П., Ким И.И., Повещенко О.В., Повещенко А.Ф., Покушалов Е.А., Романов А.Б., Коненков В.И. Исследование пролиферации и миграции стволовых/прогениторных клеток, мобилизованных введением Г-КСФ от больных с ишемической болезнью сердца // Технологии оптимизации процесса репаративной регенерации в травматологии, ортопедии и нейрохирургии: сборник тезисов Всероссийской научно практической конференции. Саратов, 2013. С. 74.

14. Бондаренко H.A., Лыков А.П., Ким И.И., Повещенко О.В., Повещенко А.Ф., Покушалов Е.А., Романов А.Б., Коненков В.И. Исследование пролиферации и миграции стволовых/прогениторных клеток, мобилизованных введением Г-КСФ больных с ишемической болезнью сердца и клеток эндотелиальной линии ЕА.Ну926 // Фундаментальные проблемы лимфологии и клеточной биологии: сборник тезисов XI международной конференции. Новосибирск, 2013. С. 50-53.

15. Лыков А.П., Бондаренко H.A., Ким И. И., Повещенко О. В., Повещенко А.Ф. Янкайте Е.В., Покушалов Е.А., Романов А.Б., Коненков В. И. Сравнительная оценка цитокинпродуцирующей активности эндотелиальных прогениторных клеток и зрелых эндотелиальных клеток человека // Фундаментальные проблемы лимфологии и клеточной биологии: сборник тезисов XI международной конференции. Новосибирск, 2013. С. 181-184.

Глава.1. СОВРЕМЕННЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ ОБ ЭНДОТЕЛИАЛЬ-НЫХ ПРОГЕНИТОРНЫХ КЛЕТКАХ

1.1. Васкулогенез и ангиогенез, как механизмы образования новой сосудистой сети

Неоангиогенез представляет собой многоступенчатый процесс, в котором взаимодействуют несколько типов клеток и медиаторов. Как правило, неоангиогенез происходит в пролиферирующих, поврежденных или ишемических тканях. Эндотелиальные прогениторные клетки представляют большой интерес для поддержания целостности эндотелия сосудов и постнатальной неоваскуляризации тканей взрослого организма.

До недавнего времени считалось, что во взрослом организме неова-скуляризация тканей осуществляется за счет двух процессов: артериогенеза — развития коллатеральных сосудов, и ангиогенеза — развития новых капилляров путем миграции, пролиферации, и дифференцировки эндотелиаль-ных клеток (Folkman J., 1992). Но Асахара в 1997 г. показал, что популяция гемопоэтических CD34+ клеток костномозгового происхождения, выделенных из периферической крови человека, способна дифференцироваться in vitro в клетки с фенотипом зрелых эндотелиальных клеток, которые в свою очередь приводят к реваскуляризации in vivo в ответ на острую тканевую ишемию (Asahara Т., 1997).

Таким образом, во взрослом организме образование новых сосудов может происходить не только путем артериогенеза, ангиогенеза, но и путем васкулогенеза.

Васкулогенез представляет собой процесс формирование in situ кровеносных сосудов из ЭПК. Изначально предполагали, что «истинный» васкулогенез происходит только в эмбриональном периоде. Однако недавно получены доказательства участия ЭПК в формировании новых сосудов во взрослом организме, что изменило взгляд на васкулогенез как на процесс, относящийся только к эмбриональному развитию (Urbich С.,2004). Васкулогенез начинается с образования кластеров, состоящих из

ангиобластов по периферии и гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) в центре. Предполагают, что ЭПК и ГСК происходят от общего предшественника гемангиобласта и несут определенные общие антигенные поверхностные маркеры, в том числе Flk-1, Tie-2 и CD34 (Timmermans F., 2008). Таким образом, васкулогенез включает в себя участие ЭПК, которые мигрируют к месту образования нового сосуда, где уже на месте дифференцируются в эндотелиальные клетки.

Ангиогенез, в свою очередь, представляет собой процесс образования новых кровеносных сосудов в органах и тканях из зрелых эндотелиальных клеток. Ангиогенез, который впервые был описан Hunter J., является комплексным процессом, включающим четыре стадии: протеолитическое разрушение базальной мембраны сосудов и межклеточного матрикса, миграцию и прикрепление эндотелиальных клеток, их пролиферацию и формирование тубулярных структур (Folkman J., 1992; Stephenson J.А., 2013)

По литературным данным известно, что ЭПК, также как и макрофаги, нейтрофилы, эндотелиальные клетки, продуцируют фактор роста эндотелия сосудов (VEGF), являющийся основным фактором, регулирующим ангиогенез (Urbich С., 2005; Sieveking D.P., 2008). На эндотелиальных клетках имеются специфические рецепторы для VEGF, взаимодействуя с которыми VEGF вызывает рост, пролиферацию, миграцию эндотелиальных клеток и их предшественников, увеличивает проницаемость сосудов, необходимую для миграции эндотелиальных клеток, индуцирует экспрессию эндотелиальной синтазы оксида азота (eNOS) и образование оксида азота (NO), что в комплексе способствует вазодилатации, направленной миграции клеток и дальнейшему сосудообразованию.

Таким образом, ЭПК, могут являться не только обязательными участниками васкулогенеза, но и стимуляторами ангиогенеза. За счет продукции цитокинов и ростовых факторов ЭПК стимулируют и поддерживают резидентные эндотелиальные клетки, и способствуют

формированию новых кровеносных сосудов при ишемии тканей. Каковы же типы ЭПК и их фенотипическая характеристика?

1.2. Фенотипическая характеристика популяций циркулирующих эндотелиальных прогениторных клеток

Изучение ЭПК началось с работы Asahara Т. (1997, 1999). Он показал возможность дифференцировки МНК периферической крови взрослого человека в эндотелиальные клетки in vitro, и способность полученных ЭПК стимулировать ангиогенез в ишемизированной ткани на экспериментальной модели у животных. Указанные работы послужили началом изучения фенотипа, источников происхождения и роли ЭПК в процессе неоангиогенеза ишемизированных тканей.

Для идентификации ЭПК Asahara Т. использовал два маркера: антиген гемопоэтических предшественников - CD34 и зрелых эндотелиальных клеток - рецептор фактора роста эндотелия сосудов (VEGFR2/KDR).

В настоящее время считается, что ЭПК должны экспрессировать по крайней мере один антиген незрелых СПК (например, CD34 или CD 133), а также один антиген эндотелиальных клеток (обычно VEGFR2, иногда CD31). Некоторые авторы выделяют «классическую» триаду маркеров ЭПК - CD34, CD 133 и VEGFR2 (Peichev М., 2000; Hristov М., 2004). В эмбриональном развитии клетки периферической крови и эндотелиальные клетки сосудов развиваются совместно, что предполагает для них наличие общего предшественника - гемангиобласта (Schatteman G.C., 2004). И очевидно, что поверхностные маркеры ГСК и ЭПК являются общими. Так, CD34 экспрессируется тканями мезодермального происхождения: клетками крови, эндотелиальными клетками, фибробластами, эпителиальными клетками (Kraus D.S., 1996).

Показано, что CD34+ клетки периферической крови способны дифференцироваться в зрелые эндотелиальные клетки - при культивировании в течение 7 дней в специальных условиях на фибронектине

они начинают экспрессировать маркеры зрелых эндотелиальных клеток -VEGFR2, CD31 и eNOS (Asahara Т, 1999). В то же время, CD34 экспрессируется в незначительном количестве и на зрелых эндотелиальных клетках.

Другим маркером ГСК и ЭПК является CD 133. Полагают, что популяция прогениторных клеток, экспрессирующих CD 133 маркер, является «незрелой» популяцией ЭПК, и более «ранним» предшественником, по сравнению с популяцией ЭПК, экспрессирующей CD34, поскольку CD 133 экспрессируется только на малодифференцированных типах клеток (Peichev и др., 2000). Соответственно популяция ЭПК, экспрессирующих поверхностные маркеры CD34+/VEGFR2+ является более «зрелой». В исследованиях Peichev М. было показано присутствие популяции ЭПК с фенотипом CD34+/VEGFR2+ в периферической крови после мобилизации в периферическое русло из костного мозга введением G-CSF, а также в пуповинной крови человека (Peichev, 2000).

Некоторые авторы считают, что ЭПК происходят от клеток не экспрессирующих CD133 (Case J., 2007; Timmermans F. 2007). Другие авторы выделяют две субпопуляции ЭПК - более примитивные CD133+/CD34+/VEGFR2+ и более зрелые CD 133-/CD34+/VEGFR2+ (Friedrich Е.В., 2006).

Также, среди циркулирующих ЭПК выделяют популяцию клеток, экспрессирующих молекулу CD31 (молекула тромбоцитарно-эндотелиальной адгезии-1). Клетки с фенотипом CD34+/CD31+ характеризуют морфо-функционально как «зрелую» популяцию ЭПК. Показано, что маркер CD31 экспрессируется как эндотелиальными клетками и ЭПК, так и кроветворными клетками, такими как моноциты, тромбоциты, нейтрофилы, натуральные киллеры, мегакариоциты и некоторые Т-клетки. Молекула CD31 участвует в адгезии как между эндотелиальными клетками, так и эндотелиальных клеток с ЭПК (Kim S.W., 2011).

Кроме того, вышеизложенные предположения подтверждаются результатами анализа экспрессии генов в популяции ЭПК с фенотипом CD451ow/CD34+/CD133+. Установлено, что интенсивность экспрессии гена маркера CD31 сохраняется до 21 дня культивирования данной популяции ЭПК, а экспрессия CD 133 выявляется на ранних сроках культивирования до 7 дня (Aoki М., 2004). В то время, как изначально слабо выраженная экспрессия VEGFR2 увеличивается к концу культивирования. Исходя из этих данных, авторы полагают, что поверхностная молекула CD 133 является «ранним» маркером идентификации ЭПК, а коэкспрессия поверхностных молекул CD34 и CD 133, предположительно, служит маркером циркулирующих ЭПК в периферической крови человека (Wu X., 2004). На основании разных сроков экспрессии генов CD 133 и VEGFR2, авторы делают вывод, что первые являются идентификаторами «ранних» ЭПК, а вторые - более «зрелых» ЭПК.

Кроме того, было показано, что периферическая кровь содержит популяцию клеток моноцитарного происхождения с фенотипом CD14+/CD34-, дающих начало ЭПК (Award О., 2006). Установлено, что клетки периферической крови моноцитарного происхождения с фенотипом CDI4+/VEGFR2+, которые экспрессируют фактор фон-Виллибранда, CD 133 и синтезируют NO, по функциональным характеристикам идентичны ЭПК и способны образовывать сосудистую сеть in vitro (Elsheikh Е., 2005; Rehman J., 2003; Urbich С., 2003).

Более того, было показано, что CD 14+, так же как и CD34+ клетки, выделенные из периферической крови и культивированные in vitro, в процессе дифференцировки в «зрелые» эндотелиальные клетки экспрессируют одинаковые маркеры, обладают идентичными функциональными характеристиками и способствуют неоваскуляризации в моделях in vivo (Aicher А., 2007).

Исходя из вышеизложенного, становится очевидным, что клетки с фенотипом CD 14+/VEGFR2+ являются «зрелой» популяцией ЭПК моноцитарного происхождения.

В настоящее время нет единой точки зрения на то, какие именно маркеры являются определяющими фенотип ЭГПС (Timmermans F., 2009; Barber С., 2006). В связи с этим на сегодняшний, день не существует уникальных поверхностных маркеров для идентификации циркулирующих ЭПК (Hirschi М., 2008). Поскольку циркулирующие ЭПК представляют собой разнородные популяции клеток, то для их фенотипической характеристики используют комбинации различных поверхностных маркеров.

1.3. Источники эндотелиальных прогениторных клеток

Первоначально ЭПК были получены из клеток костного мозга и периферической крови. Позже рядом исследователей были выявлены другие популяции клеток, способные дифференцироваться в ЭПК (Aicher А., 2007; Oswald J., 2004).

Так, были выделены резидентные стволовые клетки из сердца, которые способны дифференцироваться в клетки эндотелиальной линии (Reyes М., 2002). Также показано, что мезенхимальные клетки костного мозга способны дифференцироваться в эндотелиальные клетки и образовывать сосудистую сеть in vitro (Oswald J., 2004; Guilherme V.S., 2005; Pankajakshan D., 2012). Кроме того, жировая ткань является источником ЭПК, поскольку полученные клетки характеризуются высокой пролиферативной активностью, экспрессией ацетилированных липопротеинов низкой плотности (LDL), характерной для ЭПК, и образуют сосудистую сеть in vitro (Xue S., 2010).

Следовательно, термин ЭПК не может быть использован для определения одного типа клеток, а скорее должен использоваться для обозначения нескольких типов клеток, способных дифференцироваться в ЭПК (Khakoo A.Y., 2005).

Таким образом, на сегодняшний день выделяют несколько возможных источников эндотелиальных клеток: популяции гемопоэтических стволовых

клеток костного мозга, миелоидные клетки периферической крови, другие циркулирующие клетки-предшественницы, циркулирующие зрелые эндотелиальные клетки, которые способны покидать сосудистое русло, пролиферировать, дифференцироваться и способствовать развитию сосудистой сети в поврежденных тканях.

1.4. Участие эндотелиальных прогениторных клеток в процессах неоваскуляризации

ЭПК . представляют собой популяцию циркулирующих мононуклеарных клеток костномозгового происхождения, которые активно участвуют в ангиогенезе и в неоваскуляризации поврежденных тканей (Fadini G., 2008; Талицкий К.А., 2011; Navarro-Sobrino, 2013).

Известно, что ЭПК способны участвовать в репарации сосудов при ишемии тканей, поэтому они считаются перспективными кандидатами для стимулирования ангиогенеза при различных заболеваниях, таких как острый инфаркт миокарда (ИМ), нестабильная стенокардия, ишемическая болезнь сердца (ИБС), инсульт, легочная артериальная гипертензия, атеросклероз, ишемия нижних конечностей при диабете и ишемическая ретинопатия (Rafii S., Lyden D., 2003; Ward M., Stewart D., 2007; Seciguchi H., Li M., 2009; Jung K., Roh J., 2008; Tateishi-Yuyama E., 2002).

На сегодняшний день исследования в экспериментальных моделях на животных и клинические испытания у человека доказали, что прогениторные клетки костного мозга способны мигрировать в области ишемии, приводить к образованию кровеносных сосудов и тем самым улучшать кровоснабжение поврежденной ткани.

В экспериментальных моделях ИМ на животных было показано, что введение культивированных ЭПК значительно улучшает кровоснабжение, функцию миокарда и приводит к сокращению размера рубца левого желудочка (Kawamoto А., 2001, Kocher А.А., 2002). Кроме того, введенные клетки локализуются в области новообразованных сосудов миокарда, что

подтверждает способность ЭПК дифференцироваться в зрелые эндотелиальные клетки (Jujo К., 2008).

Yang J. (2011) показал, что популяция CD34+ ЭПК способна встраиваться в уже сформированную сосудистую сеть зрелыми эндотелиальными клетками in vitro, а также в модели ИМ у животных введение данной популяции ЭПК приводит к уменьшению зоны фиброза миокарда, значительному увеличению неоваскуляризации.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Бондаренко, Наталья Анатольевна, 2013 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Афанасьев С.А., Роговская Ю.В., Рябов В.В., др. Оценка эффективности применения гранулоцитарного колониестимулирующего фактора для лечения экспериментальной деструкции миокарда мышей // Клеточные технологии в биологии и медицине. - 2010. - №1. - С.23-26.

2. Байкова Ю.П., Фатхудинов Т.Х., Большакова Г.Б., др. Репарация миокарда при трансплантации мононуклеарных клеток костного мозга // Клеточные технологии в биологии и медицине. - 2010. - №4. - С.203-210.

3. Белевитин А.Б., Никитин А.Э., Цыган В.Н., др. // Клеточная терапия патологии миокарда (обзор литературы) // Вестник российской военно-медицинской академии. - 2010. - Том 2. - №10. - С. 194-200.

4. Беленков Ю.Н., Привалова Е.В., Чекнева И.С. Клеточная терапия в лечении хронической сердечной недостаточности: виды применяемых стволовых клеток, результаты последних клинических исследований // Kardiol. serdecno-sosud. hir. - 2008. - № 5. - С.4-18.

5. Белявская Т.М., Акчурин P.C. Интрамиокардиальная трансплантация стволовых клеток костного мозга: современное состояние проблемы // URL: http://www.evrika.ru/article/289. - 2011.

6. Буховец И.Л., Ворожцова И.Н., Лавров А.Г., др. // Клеточная кардиомиопластика в хирургическом лечении больных с ишемической болезнью сердца и постинфарктным кардиосклерозом: результат 3-летнего наблюдения // Сибирский медицинский журнал. - 2011. - Том 26. - №4. -Выпуск 1. - С.51-58.

7. Гланц С. Медико-биологическая статистика. - М: Практика. - 1999. -459с.

8. Дыгай A.M., Жданов В.В. Гранулоцитарный колониестимулирующий фактор. Фармакологические аспекты. - М.: Издательство РАМН. - 2010. -138с.

9. Захаров Ю.М. Цитопротекторные функции эритропоэтина // Клиническая нефрология. - 2009. - № 1. - С. 16-21.

10. Казанская Г.М., Малиновская Я.В., Непомнящих JI.M., Чернявский A.M., Горбатых Ю.Н.,. Бобошко А.В, Волков A.M. Особенности секреторной функции эндотелия микрососудов миокарда при хирургическом лечении ишемической болезни сердца и тетрады фалло // Патология кровообращения и кардиохирургия. - 2006. - № 1. - С. 42-48.

11. Кескинов A.A., Еремин И.И., Щербюк А.Н., др. Биологические свойства эндотелиальных клеток-предшественниц и их репаративный потенциал для клеточной терапии // Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. - 2008. - Том III. - № 4. - С. 36-40.

12. Ким И.И., Повещенко О.В., Коненков В.И. и др. Эффективность мобилизации CD34+ прогениторных клеток препаратом G-CSF в зависимости от ишемического анамнеза и возраста больных с хронической сердечной недостаточностью // Патология кровообращения и кардиохирургия. - 2012. - № 1. - С. 75-78.

13. Коненков В.И., Повещенко О.В., Ким И.И. и др. Влияние G-CSF на проангиогенные свойства мобилизованных клеток периферической крови у больных с хронической сердечной недостаточностью // Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. - 2011. - Том VI. - №3. - С.71-76.

14. Коненков В.И., Покушалов Е.А., Повещенко О.В. и др. Характеристика фенотипа мобилизованных гранулоцитарным колониестимулирующим фактором периферической крови у больных с хронической сердечной недостаточностью // Клеточные технологии в биологии и медицине. 2012. -№ 1.-С. 9-13.

15. Кочегура Т.Н., Ефименко А.Ю., Акопян Ж.А., Парфенова Е.В. Клеточная терапия сердечной недостаточности: клинический опыт, проблемы и перспективы // Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. - 2010. - Том V. - № 2. - С. 11-18.

16. Ларионов П.М., Чернявский A.M., Новрузов Р.Б., Лушникова Е.Л., Субботин Д.В., Сергеевичев Д.С., Кузнецова И.В., Караськов A.M., Непомнящих Л.М. Стимуляция ангиогенеза внутримышечной имплантацией клеток мононуклеарной фракции аутологичного костного мозга при ишемии конечностей крысы // Клеточные технологии в биологии и медицине. - 2010. -№4.-С. 211-215.

17. Лыков А.П., Повещенко О.В., Бондаренко H.A. и др. Оценка эффекта проангиогенных факторов на пролиферативную и миграционную активность клеток эндотелиальной линии ЕА.Ну926 // Бюллетень Сибирского отделения Российской академии медицинских наук. - 2013. - Т. 33. - № 4. - С. 23-29.

18. Парфенова Е.В., Ткачук В.А.Терапевтический ангиогенез: достижения, проблемы, перспективы. // Кардиологический вестник. - 2007. - № 2. - С. 2— 10.

19. Плотников Е.Ю., Зоров Д.Б., Сухих Г.Т. Стволовые клетки в регенеративной терапии сердечных заболеваний: роль межклеточных взаимодействий // Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. -2009. - Том IV. - № 1. - С. 43-49.

20. Повещенко О.В, Повещенко А.Ф.,. Коненков В.И. Эндотелиальные прогениторные клетки и неоваскулогенез // Успехи современной биологии. 2012. Т. 132, № 1.С. 69-76.

21. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA // Медиасфера., М. -2002.-312 С.

22. Рубина К.А., Мелихова B.C., Парфенова Е.В. Резидентные клетки-предшественники в сердце и регенерация миокарда // Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. - 2007. - Том II. - № 1. - С.29-35.

23. Руда М.М., Парфенова Е.В., Карпов Ю.А. Предшественники эндотелиальных клеток: роль в восстановлении функции эндотелия и перспективы терапевтического применения. // Кардиология. - 2008. №1. - С. 66-73.

24. Румянцев С.А., Балашов Д.Н., Румянцев А.Г. Механизмы мобилизации гемопоэтических предшественников гранулоцитарным колониестимулирующим фактором // Современная онкология. - 2010. - № 3. - С.84-88.

25. Седов В. М., Немков А. С., Афанасьев Б. В., др. Эффективность клеточной терапии с использованием аутологичных мононуклеаров костного мозга в комплексном лечении больных ишемической болезнью сердца // Медицинский академический журнал. - 2007. - Том. 7. - №1. - С.112-116.

26. Семенова А. Е., Сергиенко И. В., Домбровский А. Л., Рвачева А. В. Роль эндотелиальных прогениторных клеток при атеросклерозе // Атеросклероз и дислипидемии. - 2012. - №3. - С. 14-24.

27. Сергеевичев Д.С., Ларионов П.М., Субботин Д.В., др. Морфологический и молекулярный анализ ангиогенеза при интрамиокардиальной имплантации клеток мононуклеарной фракции аутологичного костного мозга // Клеточные технологии в биологии и медицине. - 2010. - №2. - С. 82-87.

28. Старикова Э.А., Амчиславский Е.И., Соколов Д.И. и др. Изменения поверхностного фенотипа эндотелиальных клеток под влиянием провоспалительных и противовоспалительных цитокинов // Медицинская иммунология. - 2003. - Том. 5, №1-2. - С.39-48.

29. Талицкий К. А. Циркулирующие эндотелиальные клетки-предшественники и коллатеральный ангиогенез при хронической ишемической болезни сердца и ишемии нижних конечностей: Автореф. дис. канд. мед. наук. - Москва: ФГБУ «Российский кардиологический научно-производственный комплекс» МЗ РФ, -2012.-20 с.

30. Талицкий К.А. и соавт. Эффективность терапевтического ангиогенеза у больных с хронической ишемией нижних конечностей// КТТИ - 2011 - Том. VI, №3 - С.89-98.

31. Фатхудинов Т.Х., Байкова Ю.П., Большакова Г.Б., др. Влияние трансплантации мононуклеаров красного костного мозга на ангиогенез у

крыс // Клеточные технологии в биологии и медицине. - 2011. - №3. - С.132-135.

32. Шевченко О.П., Орлова О.В., Макарова JI.B. Предикторы и маркеры эффективности трансплантации клеток костного мозга больным сердечной недостаточностью // Клиническая лабораторная диагностика. - 2008. — №9. — С. 18-26.

33. Abdel-Latif A., Bolli R, Zuba-Surma Е.К. et al. Granulocyte colony-stimulating factor therapy for cardiac repair after acute myocardial infarction: a systematic review and meta-analysis of randomized controlled trials // Am. Heart J. -2008.-Vol. 156.-P. 216-226.

34. Adams G.B, Scadden D.T. A niche opportunity for stem cell therapeutics // Gene Ther. - 2008. - Vol. 15. - P. 96-99.

35. Adams R.H., Alitalo K. Molecular regulation of angiogenesis and lymphangiogenesis //Nat. Rev. Mol. Cell Biol. - 2007. - Vol. 8. - 464-478.

36. Aicher A., Rentsch M., Sasaki K. et al. Nonbone marrow-derived circulating progenitor cells contribute to postnatal neovascularization following tissue ischemia // Circ. Res. - 2007. - V. 100. - P. 581-589

37. Aicher A., Zeiher A.M., Dimmeler S. Mobilizing endothelial progenitor cells // Hypertension. - 2005. Vol. 45. - P. 321-325.

38. Amin M.A., Rabquer B.J., Mansfield P.J. et al. Interleukin 18 induces angiogenesis in vitro and in vivo via Src and Jnk kinases // Ann. Rheum. Dis. -2010.-Vol. 12.-P. 2204-2212.

39. Aoki M., Yasutake M., Murohara T. Derivation of functional endothelial progenitor cells from human umbilical cord blood mononuclear cells isolated by a novel cell filtration device // Stem Cells. - 2004. - Vol. 22. - P. 994-1002.

40. Asahara Т., Masuda H., Takahashi T. et al. Bone marrow origin of endothelial progenitor cells responsible for postnatal vasculogenesis in physiological and pathological neovascularization // Circ. Res. - 1999. - Vol. 85. -P. 221-228.

41. Asahara T., Murohara T., Sullivan A. et al. Isolation of putative progenitor endothelial cells for angiogenesis // Science. - 1997. - Vol. 275. - P. 964-967.

42. Askari A.T., Penn M.S. Stromal cell-derived factor-1 mediates stem cell homing and tissue regeneration // Discov. Med. - 2003. - Vol. 3. - P. 46-47.

43. Assmus B., Schochinger V., Teupe C. et al. Transplantation of Progenitor Cells and Regeneration Enhancement in Acute Myocardial Infarction (TOPCARE-AMI) // Circulation. - 2002. - Vol. 106. - P. 3009-3017.

44. Award O., Dedkov E., Jiao C. et al. Differential Healing Activities of CD34+ and CD 14+ Endothelial Cell Progenitors // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2006. -Vol. 26. - P. 758-769.

45. Bahlmann F.H., De Groot K., Spandau J.M. et al. Erythropoietin regulates endothelial progenitor cells // Blood. - 2004. - Vol. 103. - P. 921-926.

46. Balconi G., Lehmann R., Fiordaliso F. et al. Levels of circulating pro-angiogenic cells predict cardiovascular outcomes in patients with chronic heart failure // J. Card. Fail. - 2009. - Vol. 15. - P. 747-755.

47. Barber C.L., Iruela-Arispe M.L. The ever-elusive endothelial progenitor cell: identities, functions and clinical implications // Pediatr. Res. - 2006. - Vol. 59. -P. 26R-32R.

48. Bauer J., Margolis M., Schreiner C., Edgell C.J. et al. In vitro model of angiogenesis using a human endothelium-derived permanent cell line: contributions of induced gene expression, G-proteins, and integrins // J. Cell Physiol. - 1992.-Vol. 153.-P. 437-449.

49. Brunner S., Engelmann M.G., Franz W.M. Stem cell mobilisation for myocardial repair // Expert. Opin. Biol. Ther. - 2008. - Vol. 8. - P. 1675-1690.

50. Burchfield J.S., Iwasaki M., Koyanagi M. et al. Interleukin-10 from transplanted bone marrow mononuclear cells contributes to cardiac protection after myocardial infarction // Circ. Res. - 2008. - Vol.103. - P. 203-211.

51. Calvillo L., Latini R., Kajstura J., Leri A. et al. Recombinant human erythropoietin protects the myocardium from ischemia-reperfusion injury and

promotes beneficial remodeling // Proc. Natl. Acad. Sci. - 2003. - Vol. 100. - P. 4802-4806.

52. Case J., Mead L.E., Bessler W.K. et al. Human CD34+AC133+VEGFR-2+ cells are not endothelial progenitor cells but distinct, primitive hematopoietic progenitors // Exp. Hematol. - 2007. -Vol. 35. - P. 1109-1118.

53. Chang, S. A., Kang H. J., Lee H.Y. et al. Peripheral blood stem cell mobilisation by granulocyte-colony stimulating factor in patients with acute and old myocardial infarction for intracoronary cell infusion // Heart. - 2009. - Vol. 16.-P. 1326-1330.

54. Crosby J.R., Kaminski W.E., Schatteman G. et al. Endothelial cells of hematopoietic origin make a significant contribution to adult blood vessel formation // Circ. Res. - 2000. - Vol. 87. - P. 728-730.

55. Dimmeler S., Leri A. Aging and disease as modifiers of efficacy of cell therapy//Circ. Res.-2008.-Vol. 102.-P. 1319-1330.

56. Dobert N., Britten M., Assmus B. et al. Transplantation of progenitor cells after reperfused acute myocardial infarction: evaluation of perfusion and myocardial viability with FDG-PET and thallium SPECT // Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging. -2004. - Vol. 31. - P. 1146-1151.

57. Duda D.G., Fukumura D., Jain R.K. Role of eNOS in neovascularization: NO for endothelial progenitor cells // Trends Mol. Med. - 2004. - Vol. 10. - P. 143-145.

58. Duong Van Huyen J.P., Smadja D.M., Bruneval P. et al. Bone marrow-derived mononuclear cell therapy induces distal angiogenesis after local injection in critical leg ischemia // Mod. Pathol. - 2008. - Vol. 21. - P. 837-846.

59. Elsheikh E., Uzunel M., He Z. et al. Only a specific subset of human peripheral-blood monocytes has endothelial-like functional capacity // Blood. -2005. - Vol. 106. - P. 2347-2355.

60. Fadini G.P., Agostini C., Sartore S., Avogaro A. Endothelial progenitor cells in the natural history of atherosclerosis // Atherosclerosis. - 2008. - Vol. 194. - P. 46-54.

61. Fadini G.P., Avogaro A. Potential manipulation of endothelial progenitor cells in diabetes and its complications // Diabetes Obes. Metab. - 2010. - Vol. 12. -P. 570-583.

62. Fang D., Xiao-qin H. Effect of endothelial progenitor cells in neovascularization and their application in tumor therapy // Chin. Med. J. - 2010. -Vol. 123.-P. 2454-2460.

63. Fernandez P.B., Lucibello F.C., Gehling U.M., Lindemann K. et al. Endothelial-like cells derived from human CD 14 positive monocytes // Differentiation. - 2000. - Vol. 65. - P. 287-300.

64. Feygin J., Mansoor A., Eckman P., Swingen C., Zhang J. Functional and bioenergetic modulations in the infarct border zone following autologous mesenchymal stem cell transplantation // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. -2007. - Vol. 293. - P. H1772-H1780.

65. Fiordaliso F., Chimenti S., Staszewsky L.A. et al. Nonerythropoietic derivative of erythropoietin protects the myocardium from ischemia-reperfusion injury // Proc. Natl. Acad. Sci. - 2005. - Vol. 102. - P. 2046-2051.

66. Fischer-Rasokat U., Assmus B., Seeger F.H. A pilot trial to assess potential effects of selective intracoronary bone marrow-derived progenitor cell infusion in patients with nonischemic dilated cardiomyopathy: final 1-year results of the transplantation of progenitor cells and functional regeneration enhancement pilot trial in patients with nonischemic dilated cardiomyopathy // Circ. Heart. Fail. -2009.-Vol. 2.-P. 417-423.

67. Folkman J., Shing Y. Angiogenesis // J. Biol. Chem. -1992. - Vol. 267. - P. 10931-10934.

68. Friedrich E.B, Walenta K., Scharlau J. et al. CD34-/CD133+/VEGFR-2+ endothelial progenitor cell subpopulation with potent vasoregenerative capacities // Circ. Res.- 2006. - Vol. 98. - P. e20-e25.

69. Fuchs S., Motta A., Migliaresi C., Kirkpatrick C.J. Outgrowth endothelial cells isolated and expanded from human peripheral blood progenitor cells as a

potential source of autologous cells for endothelialization of silk fibroin biomaterials // Biomaterials. - 2006. - Vol. 27. - P. 5399-5408.

70. Fujiyama S., Amano K., Uehira K. et al. Bone marrow monocyte lineage cells adhere on injured endothelium in a monocyte chemoattractant protein-1-dependent manner and accelerate reendothelialization as endothelial progenitor cells // Circ. Res. - 2003. - Vol. 93. - P. 980-989.

71. Gill M., Dias S., Hattori K. et al. Vascular trauma induces rapid but transient mobilization of VEGFR2+AC133+ endothelial precursor cells // Circ. Res.- 2001. -Vol. 88.-P. 167-174.

72. Goon P.K., Lip G.Y., Boos C.J., Stonelake P.S., Blann A.D. Circulating endothelial cells, endothelial progenitor cells, and endothelial microparticles in cancer // Neoplasia. - 2006. - Vol. 8. - P. 79-88.

73. Gu Y.Q., Zhang J., Guo L.R. et al. Transplantation of autologous bone marrow mononuclear cells for patients with lower limb ischemia // Chin. Med. J. -2008. - Vol. 121.-P. 963-967.

74. Guilherme V.S. Litovsky S., Joao A.R. et al. Mesenchymal Stem Cells Differentiate into an Endothelial Phenotype, Enhance Vascular Density, and Improve Heart Function in a Canine Chronic Ischemia Model // Circulation. -2005.-Vol. 111.-P. 150-156.

75. Hamed S., Brenner B., Roguin A. Nitric oxide: a key factor behind the dysfunctionality of endothelial progenitor cells in diabetes mellitus type-2 // Cardiovasc. Res. -2011.

76. Harada M., Qin Y., Takano H. et al. G-CSF prevents cardiac remodeling after myocardial infarction by activating the Jak-Stat pathway in cardiomyocytes // Nat. Med. - 2005. - Vol. 11. - P. 305-311.

77. Hattori K., Heissig B., Tashiro K. et al. Plasma elevation of stromal cell-derived factor-1 induces mobilization of mature and immature hematopoietic progenitor and stem cells // Blood. - 2001. - Vol. 97. - P. 3354-3360.

78. Hattori K., Heissig B., Wu Y. et al. Placental growth factor reconstitutes hematopoiesis by recruiting VEGFR2+ stem cells from bone-marrow microenvironment // Nat. Med. - 2002. - Vol. 8. - P. 841-849.

79. Heeschen C., Aicher A., Lehmann R. et al. Erythropoietin is a potent physiological stimulus for endothelial progenitor cell mobilization // Blood. -2003.-Vol. 102.-P. 1340-1346.

80. Hess D.C., Hill W.D., Martin-Studdard A. et al. Bone marrow as a source of endothelial cells and NeuN-expressing cells After stroke // Stroke. - 2002. -Vol.33. -P. 1362-1368.

81. Hill J.M., Syed M.A., Arai A.E. et al. Outcomes and risks of granulocyte colony-stimulating factor in patients with coronary artery disease // J. Am. Coll. Cardiol. -2005. - Vol. 46. - P. 1643-1648.

82. Hill J.M., Zalos G., Halcox J.P. et al. Circulating endothelial progenitor cells, vascular function, and cardiovascular risk // N. Engl. J. Med. - 2003. -Vol. 348.-P. 593-600.

83. Hirschi K.K., Ingram D.A., Yoder M.C. Assessing identity, phenotype, and fate of endothelial progenitor cells // Arterioscle.r Thromb. Vase. Biol. - 2008. -Vol. 28.-P. 1584-1595.

84. Honold J., Fischer-Rasokat U., Lehmann R. et al. G-CSF stimulation and coronary reinfusion of mobilized circulating mononuclear proangiogenic cells in patients with chronic ischemic heart disease: five-year results of the TOPCARE-G-CSF trial // Cell Transplant. - 2012. - Vol. 21. - P. 2325-2337.

85. Honold J., Lehmann R., Heeschen C. et al. Effects of granulocyte colony stimulating factor on functional activities of endothelial progenitor cells in patients with chronic ischemic heart disease // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2006. -Vol. 26.-P. 2238-2243.

86. Hristov M., Fach C., Becker C. et al. Reduced numbers of circulating endothelial progenitor cells in patients with coronary artery disease associated with long-term statin treatment // Atherosclerosis. - 2007. - Vol. 192. - P. 413-420.

87. Hristov M., Weber C. Endothelial progenitor cells: characterization, pathophysiology, and possible clinical relevance // J. Cell. Mol. Med. - 2004. -Vol. 8.-P. 498-508.

88. Hu X., Dai S., Wu W.J. et al. Stromal cell derived factor-1 alpha confers protection against myocardial ischemia/reperfusion injury:, role of the cardiac stromal cell derived factor-1 alpha CXCR4 axis // Circulation. - 2007. - Vol. 116. -P. 654-663.

89. Hu Y., Zhang Z., Torsney E. et al. Abundant progenitor cells in the adventitia contribute to atherosclerosis of vein grafts in ApoE-decient mice // J. Clin. Invest.-2004.-Vol. 113.-P. 1258-1265.

90. Hur J., Yoon C.H., Kim H.S. et al. Characterization of two types of endothelial progenitor cells and their different contributions to neovasculogenesis // Arterioscler. Thromb. Vase .Biol. - 2004. - Vol. 24. - P. 288-293.

91. Ito H., Rovira I.I., Bloom M.L. et al. Endothelial progenitor cells as putative targets for angiostatin // Cancer Res. - 1999. -Vol. 59. - P. 5875-5877.

92. Iwakura A., Luedemann C., Shastry S. et al. Estrogen-mediated, endothelial nitric oxide synthase-dependent mobilization of bone marrow-derived endothelial progenitor cells contributes to reendothelialization after arterial injury // Circulation. -2003. Vol. 108. - P. 3115-3121.

93. Janic B., Guo A.M., Iskander A.S. et al. Human cord blood-derived AC 133+ progenitor cells preserve endothelial progenitor characteristics after long term in vitro expansion // PLoS One. - 2010. - Vol. 5. - P. e9173. doi: 10.137 l/journal.pone.0009173.

94. Jiga J., Hoinoiu B., Stoichitoiu T. et al. Induction of therapeutic neoangiogenesis using in vitro-generated endothelial colony-forming cells: an autologous transplantation model in rat // J. Surg. Res. - 2013. - Vol. 181. - P. 359-368.

95. Jung K.H., Roh J.K. Circulating endothelial progenitor cells in cerebrovascular disease // J. Clin. Neurol. - 2008. - Vol. 4. - P. 139-147.

96. Kalka C., Masuda H.s Takahashi T. et al. Transplantation of ex vivo expanded endothelial progenitor cells for therapeutic neovascularization // Proc. Nat.l Acad. Sei. - 2000. - Vol. 97. - P. 3422-3427.

97. Kalka C., Masuda H., Takahashi T. et al. Vascular endothelial growth factor (165) gene transfer augments circulating endothelial progenitor cells in human subjects // Circ. Res. - 2000. - Vol. 86. - P. 1198-1202.

98. Kang H.J., Kim H.S., Koo B.K. et al. Intracoronary infusion of the mobilized peripheral blood stem cell by G-CSF is better than mobilization alone by G-CSF for improvement of cardiac function and remodeling: 2-year follow-up results of the Myocardial Regeneration and Angiogenesis in Myocardial Infarction with G-CSF and Intra-Coronary Stem Cell Infusion (MAGIC Cell) 1 trial // Am. Heart J. - 2007. - Vol.153. -P. 237.el-237.e8.

99. Kaplan R.N., Psaila B., Lyden D. Niche-to-niche migration of bone-marrow-derived cells // Trends Mol. Med. - 2007. - Vol. 13. - P. 72-81.

100. Kawamoto A., Gwon H.C., Iwaguro H. et al. Therapeutic potential of ex vivo expanded endothelial progenitor cells for myocardial ischemia // Circulation. -2001.-Vol. 103.-P. 634-637.

101. Kawamoto A., Katayama M., Handa N., Asahara T. et al. Intramuscular transplantation of G-CSF-mobilized CD34 (+) cells in patients with critical limb ischemia: a phase I/IIa, multicenter, single-blinded, dose-escalation clinical trial // Stem Cells. - 2009. - Vol. 27. - P. 2857-2864.

102. Kawamoto A., Tkebuchava T., Yamaguchi J. et al. Intramyocardial transplantation of autologous endothelial progenitor cells for therapeutic neovascularization of myocardial ischemia // Circulation. - 2003. - Vol. 107. - P. 461-468.

103. Khakoo A.Y., Finkel T. Endothelial progenitor cells // Annu. Rev. Med. -2005.-Vol. 56.-P. 79-101.

104. Kim S.W., Kim H., Yoon Y.S. Advances in bone marrow-derived cell therapy: CD31-expressing cells as next generation cardiovascular cell therapy // Regen. Med. - 2011. - Vol. 3. - P. 335-349

105. Kim W.S., Lee S., Yoon Y.S. Cardiovascular repair with bone marrow-derived cells // Blood Res. - 2013. -Vol. 48. - P. 76-86.

106. Kinnaird T., Stabile E., Burnett M.S., et al. Local delivery of marrow-derived stromal cells augments collateral perfusion through paracrine mechanisms // Circulation. - 2004. - Vol. 109. - P. 1543-1549.

107. Kissel C.K., Lehmann R., Assmus B. et al. Selective functional exhaustion of hematopoietic progenitor cells in the bone marrow of patients with postinfarction heart failure // J. Am. Coll. Cardiol. - 2007. - Vol. 49. - P. 23412349.

108. Kocher A.A., Schuster M.D., Szabolcs M.J. Neovascularization of ischemic myocardium by human bone-marrow-derived angioblasts prevents cardiomyocyte apoptosis, reduces remodeling and improves cardiac function // Nat. Med. - 2002. -Vol. 7.-P. 430-436.

109. Kollet O., Dar A., Shivtiel S. et al. Osteoclasts degrade endosteal components and promote mobilization of hematopoietic progenitor cells // Nat. Med. - 2006. - Vol. 12. -P. 657-664.

110. Komorowski J., Jerczyñska H., Siejka A., Baranska P. et al. Effect of thalidomide affecting VEGF secretion, cell migration, adhesion and capillary tube formation of human endothelial EA.hy 926 cells. // Life Sci. - 2006. - Vol. 78. -P. 2558-2563.

111. Krishnamurthy P., Thai M., Verma S. et al. Interleukin-10 deficiency impairs bone marrow-derived endothelial progenitor cell survival and function in ischemic myocardium // Circ. Res. - 2011. - Vol. 109. - P. 1280-1289.

112. Kureishi Y, Luo Z, Shiojima I. et al. The HMG-CoA reductase inhibitor simvastatin activates the protein kinase Akt and promotes angiogenesis in normocholesterolemic animals //Nat. Med. -2001. - Vol. 6. - P. 1004-1010.

113. Lapidot T., Dar A., Kollet O. How do stem cells find their way home? // Blood.-2005.-Vol. 106.-P. 1901-1910.

114. Lapidot T., Petit I. Current understanding of stem cell mobilization: the roles of chemokines, proteolytic enzymes, adhesion molecules, cytokines, and stromal cells // Exp. Hematol. - 2002. - Vol.30. - P. 973-981.

115. Larochelle A., Krouse A., Metzger M. et al. AMD3100 mobilizes hematopoieticstem cells with long-term repopulating capacity in nonhuman primates // Blood. -2006. -Vol. 107. - P. 3772-3778.

116. Lasala G.P., Minguell J.J. Bone marrow-derived stem/progenitor cells: their use in clinical studies for the treatment of myocardial infarction // Heart Lung Circ. - 2009. - Vol. 18. -P. 171-180.

117. Laufs U., Wassmann S., Schackmann S. et al. Beneficial effects of statins in patients with non-ischemic heart failure // Z. Kardiol. - 2004. - Vol. 93. - P. 103108.

118. Le Bousse-Kerdilés MC. Primary myelofibrosis and the "bad seeds in bad soil" concept // Fibrogenesis Tissue Repair. - 2012. - Vol. 5. - P. S20.

119. Lenk K., Adams V., Lurz P. et al. Therapeutical potential of blood-derived progenitor cells in patients with peripheral arterial occlusive disease and critical limb ischaemia // Eur. Heart J. - 2005. - Vol. 26. - P. 1903-1909.

120. Lerman A., Zeiher A.M. Endothelial function: cardiac events // Circulation. -2005.-Vol. 111.-P. 363-368.

121. Li A., Dubey S., Varney M.L., Dave B.J., Singh R.K. IL-8 directly enhanced endothelial cell survival, proliferation, and matrix metalloproteinases production and regulated angiogenesis // J. Immunol. - 2003. - Vol. 170. - P. 3369-3376.

122. Lipinski M.J., Biondi-Zoccai G.G., Abbate A. et al. Impact of intracoronary cell therapy on left ventricular function in the setting of acute myocardial infarction: a collaborative systematic review and meta-analysis of controlled clinical trials // J. Am. Coll. Cardiol. - 2007. - Vol. 18. - P. 1761-1767.

123. Losordo D.W., Schatz R.A., White C.J. et al. Intramyocardial transplantation of autologous CD34 stem cells for intractable angina: a phase I/IIa double-blind, randomized controlled trial // Circulation. - 2007. - Vol. 115. - P. 3165-3172.

124. Machein M.R., Renninger S., de Lima-Hahn E., Plate K.H. Minor contribution of bone marrow-derived endothelial progenitors to the vascularization of murine gliomas // Brain Pathol. - 2003. - Vol. 13. - P. 582-597.

125. Martin-Rendon E., Brunskill S.J., Hyde C.J. et al. Autologous bone marrow stem cells to treat acute myocardial infarction: a systematic review // Eur. Heart J. -2008.-Vol. 29.-P. 1807-1818.

126. Maurice S., Srouji S., Livne E. Isolation of progenitor cells from cord blood using adhesion matrices // Cytotechnology. - 2007. - Vol. 54. - P. 121-133.

127. Michel J.B. Anoikis in the cardiovascular system: known and unknown extracellular mediators // Arterioscler Thromb Vase Biol. - 2003. - Vol. 23. - P. 2146-2154.

128. Moazzami K., Majdzadeh R., Nedjat S. Local intramuscular transplantation of autologous mononuclear cells for critical lower limb ischaemia // Cochrane Database Syst. Rev. -2011. - Vol. 12. - P. CD008347

129. Muller W.A. Mechanisms of transendothelial migration of leukocytes // Circ. Res. -2009. - Vol. 105. - P. 223-230.

130. Mund J.A., Ingram D.A., Yoder M.C., Case J. Endothelial progenitor cells and cardiovascular cell-based therapies // Cytotherapy. - 2009. - Vol. 11. - P. 103113

131. Murohara T., Ikeda H., Duan J. et al. Transplanted cord blood-derived endothelial precursor cells augment postnatal neovascularization // J. Clin. Invest. -2000.-Vol. 105.-P. 1527-1536.

132. Muscari C., Gamberini C., Basile I. et al. Comparison between Culture Conditions Improving Growth and Differentiation of Blood and Bone Marrow Cells Committed to the Endothelial Cell Lineage // Biol. Proced. Online. -2010. -Vol. 12.-P. 9023-9035.

133. Navarro-Sobrino M., Hernández-Guillamon M., Fernandez-Cadenas I. et al. The angiogenic gene profile of circulating endothelial progenitor cells from ischemic stroke patients // Vase. Cell. - 2013. - Vol. 5. - P. 3-18.

134. Oliveras A., de la Sierra A., Martinez-Estrada O.M. et al. Putative endothelial progenitor cells are associated with flow-mediated dilation in refractory hypertensives // Blood Press. - 2008. - Vol.17. - P. 298-305.

135. Orlic D., Kajstura J., Chimenti S. Mobilized bone marrow cells repair the infarcted heart, improving function and survival // Proc. Natl. Acad. Sei. - 2001. -Vol. 98.-P. 10344-10349.

136. Oswald J., Soxberger S., Jshrgensen B. et al. Mesenchymal Stem Cells Can Be Differentiated Into Endothelial Cells in vitro // Stem cells. - 2004. - Vol. 22. -P. 377-384.

137. Pankajakshan D., Kansal V., Agrawal D.K. In vitro differentiation of bone marrow derived porcine mesenchymal stem cells to endothelial cells // J. Tissue Eng. Regen. Med. - 2012. http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/term.1483

138. Park C., Ma Y.D., Choi K., et al. Evidence for the hemangioblast // Exp. Hematol. - 2005. - Vol. 33. P. 965-970.

139. Park C.C., Morel J.C., Amin M.A. et al. Evidence of il-18 as a novel angiogenic mediator // J. Immunol. - 2001. - Vol. 167. - P. 1644-1653.

140. Pasquet S., Sovalat H., Henon P. et al. Long-term benefit of intracardiac delivery of autologous granulocyte-colony-stimulating factor-mobilized blood CD34+ cells containing cardiac progenitors on regional heart structure and function after myocardial infarct // Cytotherapy. - 2009. - Vol. 11. - P. 1002-1015.

141. Peichev M., Naiyer A.J., Pereira D. et al. Expression of VEGFR-2 and AC 133 by circulating human CD34(+) cells identifies a population of functional endothelial precursors // Blood. - 2000. - Vol. 95. - P. 952-958.

142. Perin E.C., Dohmann H.F., Borojevic R. et al. Transendocardial, autologous bone marrow cell transplantation for severe, chronic ischemic heart failure // Circulation. - 2003. - Vol. 107. - P. 2294-2302

143. Petit I., Szyper-Kravitz M., Nagler A. et al. G-CSF induces stem cell mobilization by ecreasing bone marrow SDF-1 and up-regulating CXCR4 // Nat. Immunol. -2002. -Vol. 3. - P. 687-694.

144. Pitchford S.C., Furze R.C., Jones C.P., Wengner A.M., Rankin S.M. Differential mobilization of subsets of progenitor cells from the bone marrow // Cell Stem Cell. -2009. - Vol. 4. - P. 62-72.

145. Powell T.M., Paul J.D., Hill J.M. et al. Granulocyte colony-stimulating factor mobilizes functional endothelial progenitor cells in patients with coronary artery disease // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2005. - Vol. 25. - P. 296-301.

146. Rafii S., Lyden D. Therapeutic stem and progenitor cell transplantation for organ vascularization and regeneration // Nat. Med. - 2003. - Vol. 9. - P. 702-712.

147. Razmkhah M., Jaberipour M., Hosseini A., Safaei A., Khalatbari B., Ghaderi A. Expression profile of IL-8 and growth factors in breast cancer cells and adipose-derived stem cells (ASCs) isolated from breast carcinoma // Cell Immunol. - 2010. -Vol. 5. -P. 80-85.

148. Rehman J., Li J., Orschell C.M., March K.L. Peripheral blood "endothelial progenitor cells" are derived from monocyte/macrophages and secrete angiogenic growth factors // Circulation. - 2003. - Vol.5. - P. 1164-1169.

149. Reyes M., Dudek A., Jahagirdar B., et al. Origin of endothelial progenitors in human postnatal bone marrow // J. Clin. Invest. - 2002. - Vol. 109. - P. 337346.

150. Ribatti D. History of research on tumor angiogenesis // Edited by Dordrecht, Springer Netherlands. - 2009. - P. 125-137.

151. Sasaki M., Kashima M., Ito T. et al. Differential regulation of metalloproteinase production, proliferation and chemotaxis of human lung fibroblasts by PDGF, interleukin-lbeta and TNF-alpha // Mediators Inflamm. -2000.-Vol. 9. P. 155-160.

152. Schatteman G.C., Awad O. Hemangioblasts, angioblasts, and adult endothelial cell progenitors //Anat. Rec. A Discov. Mol. Cell Evol. Biol. - 2004. -Vol. 276. — P.13-21.

153. Schdchinger V., Assmus B., Britten M.B. et al. Transplantation of progenitor cells and regeneration enhancement in acute myocardial infarction: anal one-year

results of the TOPCARE-AMI Trial // J. Am. Coll. Cardiol. - 2004. - Vol. 44. - P. 1690-1699.

154. Schmeisser A., Garlichs C.D., Zhang H. et al. Monocytes coexpress endothelial and macrophagocytic lineage mar kers and form cord-like structures in Matrigel under angiogenic conditions // Cardiovasc. Res. - 2001. - Vol. 49. - P. 671-680.

155. Schmeisser A., Graffy C., Daniel W.G., Strasser R.H. Phenotypic overlap between monocytes and vascular endothelial cells // Adv. Exp. Med. Biol. - 2003. -Vol. 522.-P. 59-74.

156. Schmidt-Lucke C., Fichtlscherer S., Aicher A., Dimmeler S. Quantification of circulating endothelial progenitor cells using the modified ISHAGE protocol // PLoS One. - 2010. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2972200/

157. Schmidt-Lucke C., Rossig L., Fichtlscherer S., et al. Reduced number of circulating endothelial progenitor cells predicts future cardiovascular events: proof of concept for the clinical importance of endogenous vascular repair // Circulation. -2005.-Vol. 111.2981-2987.

158. Schomig K., Busch G., Steppich B. et al. Interleukin-8 is associated with circulating CD 133+ progenitor cells in acute myocardial infarction // Eur. Heart J. -2006.-Vol. 27.-P. 1032-1037.

159. Schulz C., von Andrian U.H., Massberg S. Hematopoietic stem and progenitor cells: their mobilization and homing to bone marrow and peripheral tissue // Immunol. Res. - 2009. - Vol. 44. - P. 160-168.

160. Schuster M.D., Kocher A.A., Seki T. et al. Myocardial neovascularization by bone marrow angioblasts results in cardiomyocyte regeneration // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. - 2004. - Vol. 287. - P. H525-H532.

161. Sekiguchi H., Ii M., Losordo D.W. The relative potency and safety of endothelial progenitor cells and unselected mononuclear cells for recovery from myocardial infarction and ischemia // J. Cell Physiol. - 2009. - Vol. 219. - P. 235242.

162. Sen S., McDonald S.P., Coates P.T., Bonder C.S. Endothelial progenitor cells: novel biomarker and promising cell therapy for cardiovascular disease // Clin. Sci. - 2011. - Vol. 120. - P. 263-283.

163. Sieveking D.P., Buckle A., Celermajer D.S., Ng M.K. Strikingly different angiogenic properties of endothelial progenitor cell subpopulations: insights from a novel human angiogenesis assay //J. Am. Coll. Cardiol. - 2008. -Vol. 51.-P. 660-668.

164. Smythe J., Fox A., Fisher N. et al. Measuring Angiogenic Cytokines, Circulating Endothelial Cells, and Endothelial Progenitor Cells in Peripheral Blood and Cord Blood: VEGF and CXCL12 Correlate with the Number of Circulating Endothelial Progenitor Cells in Peripheral Blood // Tissue Engineering Part C: Methods. - 2008. - Vol. 14. - P. 59-67.

165. Stephenson J. A., Goddard J. C., Al-Taan O., Dennison A. R., Morgan B. Tumour Angiogenesis: A Growth Area—From John Hunter to Judah Folkman and Beyond // Journal of Cancer Research. - 2013. http://dx.doi.org/10.1155/2013/895019

166. Sugiyama T., Kohara H., Noda M., Nagasawa T. Maintenance of the hematopoietic stem cell pool by CXCL12-CXCR4 chemokine signaling in bone marrow stromal cell niches // Immunity. - 2006. - Vol. 25. - P. 977-988.

167. Takahashi T., Kalka C., Masuda H. et al. Ischemia- and cytokine-induced mobilization of bone marrow-derived endothelial progenitor cells for neovascularization // Nat. Med. - 1999. - Vol. 5. - P. 434-438.

168. Tateishi-Yuyama E., Matsubara H., Murohara T. et al. Therapeutic angiogenesis for patients with limb ischaemia by autologous transplantation of bone-marrow cells: a pilot study and a ran- domised controlled trial // Lancet. -2002. - Vol. 360. - P. 427-435

169. Tateno K., Minamino T., Toko H. et al. Critical roles of muscle-secreted angiogenic factors in therapeutic neovascularization // Circ. Res. - 2006. - Vol. 9. -P. 1194-202.

170. Theiss H.D., Brenner C., Engelmann M.G. et al. Safety and efficacy of SITAgliptin plus Granulocyte-colony-stimulating factor in patients suffering from Acute Myocardial Infarction (SITAGRAMI-Trial)—Rationale, design and first interim analysis // Int. J. Cardiol. - 2010. - Vol. 145. - P. 284-284.

171. Thum T., Fraccarollo D., Schultheiss M., et al. Endothelial nitric oxide synthase uncoupling impairs endothelial progenitor cell mobilization and function in diabetes // Diabetes. - 2007. - Vol. 56. - P. 666-674.

172. Timmermans F., Hauwermeiren F.V., Smedt M.D. Endothelial Outgrowth Cells Are Not Derived From CD133+ Cells or CD45+ Hematopoietic Precursors // Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. - 2007. - Vol. 27. - P. 15721579.

173. Timmermans F., Plum J., Yoder M.C. et al. Endothelial progenitor cells: identity defined? // J. Cell Mol. - 2009. - Vol. 13. - P. 87-102.

174. To W.S., Midwood K.S. Plasma and cellular fibronectin: distinct and independent functions during tissue repair // Fibrogenesis Tissue Repair. -2011. -Vol. 4. http://www.fibrogenesis.eom/content/4/l/21

175. Turan .RG., Bozdag-Turan I., Ortak J. et al. Improved mobilization of the CD34 (+) and CD133(+) bone marrow-derived circulating progenitor cells by freshly isolated intracoronary bone marrow cell transplantation in patients with ischemic heart disease // Stem Cells Dev. - 2011. - Vol. 20. - P. 1491-1501.

176. Urbich C., Dimmeler S. Endothelial progenitor cells functional characterization // Trends Cardiovasc. Med. - 2004. - Vol. 14. - P. 318-322.

177. Urbich C., Heeschen C., Aicher A. et al. Relevance of monocytic features for neovascularization capacity of circulating endothelial progenitor cells // Circulation. -2003. - Vol. 108. - P. 2511-25116.

178. Valgimigli M., Rigolin G.M., Fucili A., et al. CD34 +and endothelial progenitor cells in patients with various degrees of congestive heart failure // Circulation.-2004.-Vol. 110.-P. 1209-1212.

179. Walther C., Adams V., Bothur I. et al. Increasing physical education in high school students: effects on concentration of circulating endothelial progenitor cells // Eur. .J Cardiovasc. Prev. Rehabil. - 2008. - Vol. 15. - P. 416-422.

180. Wang M., Crisostomo P., Herring C. et al. Human progenitor cells from bone marrow or adipose tissue produce VEGF, HGF and IGF-1 in response to TNF by a p38 mitogen acivated protein kinase dependent mechanism //Amer. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. - 2006. - Vol. 291. - R880-R884.

181. Ward M.R., Stewart D.J., Kutryk M.J. Endothelial progenitor cell therapy for the treatment of coronary disease, acute MI, and pulmonary arterial hypertension: current perspectives // Catheter. Cardiovasc. Interv. - 2007. - Vol.

p 70.-P. 983-998.

Í

182. Werner N., Wassmann S., Ahlers P., et al. Endothelial progenitor cells correlate with endothelial function in patients with coronary artery disease // Basic. Res. Cardiol.-2007.-Vol. 102.-P. 565-571.

183. Wu X., Rabkin-Aikawa E., Guleserian K.J. Tissue-engineered microvessels on three-dimensional biodegradable scaffolds using human endothelial progenitor cells // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. - 2004. - Vol. 287. -H480-H487.

184. Wyderka R., Wojakowski W., Jadczyk T. et al. Mobilization of CD34+CXCR4+ stem/progenitor cells and the parameters of left ventricular function and remodeling in 1-year follow-up of patients with acute myocardial infarction // Mediators Inflamm. -2012. - Vol. 2012. - P. 564027. doi: 10.1155/2012/564027.

185. Xue S., Zhang H.T., Zhang .P et al. Functional endothelial progenitor cells derived from adipose tissue show beneficial effect on cell therapy of traumatic brain injury // Luo. J. Neurosci. Lett. - 2010. - Vol. 473. - P. 186-191.

186. Yang J., Ii M., Kamei N. et al. CD34+ cells represent highly functional endothelial progenitor cells in murine bone marrow // PLoS One. - 2011. http://www.plosone.org/article/info%3Adoi%2F 10.1371 %2Fjournal.pone.0020219

187. Yin T., Li L. The stem cell niches in bone // J. Clin. Invest. - 2006. - V. 116. -P. 1195-1201.

188. Yin T., Ma X., Zhao L., Cheng K., Wang H. Angiotensin II promotes NO production, inhibits apoptosis and enhances adhesion potential of bone marrow-derived endothelial progenitor cells // Cell Res. - 2008. - Vol. 18. - P. 792-799.

189. Yoder M.C., Mead L.E., Prater D., et al. Redefining endothelial progenitor cells via clonal analysis and hematopoietic stem/progenitor cell principals // Blood. -2007.-Vol. 109. - P. 1801-1809.

190. Yoon C.H., Hur J., Park K.W. et al. Synergistic neovascularization by mixed transplantation of early endothelial progenitor cells and late outgrowth endothelial cells // Circulation. - 2005. - Vol. 112. - P. 1618-1627.

191. Zampetaki A., Kirton J.P., Xu Q. Vascular repair by endothelial progenitor cells // Cardiovasc. Res. - 2008. - Vol. 78. - P. 413-421.

192. Zaruba M.M., Theiss H.D., Vallaster M. et al. Synergy between CD26/DPP-IV inhibition and G-CSF improves cardiac function after acute myocardial infarction // Cell Stem Cell. - 2009. - Vol. 4. - P. 313-323.

193. Ziegelhoeffer T., Fernandez B., Kostin S. et al. Bone marrow-derived cells do not incorporate into the adult growing vasculature // Circ. Res. - 2004. - Vol. 94.-P. 230-238.

194. Zonneveld A.J., Rabelink T.J. Endothelial progenitor cells: biology and therapeutic potential in hypertension // Curr. Opin. Nephrol. Hypertens. - 2006. -Vol.15.-P. 167-172.