Механизмы формирования внутреннего центромерного домена кинетохора позвоночных животных тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.25, кандидат биологических наук Боярчук, Екатерина Юрьевна

• Боярчук, Екатерина Юрьевна
• кандидат биологических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Боярчук, Екатерина Юрьевна

ГЛАВА 1 ВВЕДЕНИЕ

1.1 Актуальность проблемы

1.2. Цели и задачи исследования

ГЛАВА 2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1 Цитоплазматические экстракты ооцитов шпорцевой лягушки Хепориз 1аеу1$ как модельная система изучения событий клеточного цикла

2.2 Строение и функция кинетохора позвоночных

2.2.1 Центромер

2.2.2 Наружный кинетохор

2.2.2.1 Строение наружного кинетохора

2.2.2.2 Регуляция сборки НК

2.2.2.3 Функции наружного кинетохора 24 В настоящеем разделе мы рассмотрим механизмы, отвечающие за каждую из этих функций.

2.2.3 Строение и функция внутреннего центромерного домена 33 2.2.3.1 Транзитный хромосомный комплекс

2.2.3.1.2.1. Роль ТХК в регуляции митотической конденсации и поддержании структуры хромосом

2.2.3.1.2.2 Роль ТХК в регуляции сегрегации хромосом

2.2.3.1.2.3 Роль ТХК в 8АС

2.2.3.1.2.4 Роль ТХК в формировании веретена деления

2.2.3.1.2.5 Роль ТХК в цитокинезе 45 2.2.3.3 Кинезин МСАК 46 2.2.3.3 Комплекс 51п^051ип/РР2А

2.2.3 Регуляция сборки ВЦЦ

ГЛАВА 3. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКИ

3.1. Рекомбипантые белки и антитела

3.2. Приготовление цитоплазматического экстракта из ооцитов X. 1аеУ!

3.3. Очистка хроматина 59 3.4 Клеточные линии, их культивирование, получение стабильных клеточных линий, РНК-интерференция

3.5. Иммунофлуоресценция и анализ изображений

3.6. Иммунопреципитация и гг-преципитация

3.7. Вестерн-блотинг

3.8. Киназная активность in vitro

Глава 4. Результаты

4.1 Выбор модели для изучения строения и регуляции формирования кинетохора

4. 2. Регуляция расположения транзитного хромосомного комплекса во внутреннем центромерном домене кинетохора

4.2.1. Белок Bubi контролирует расположение транзитного хромосомного комплекса во внутреннем центромерном домене в системе экстрактов ооцитов Xenopus iaevis

4.2.2. Нарушение расположения ТХК на кинетохоре в отсутствие Bubi не связано с задержкой в прохождении митоза.

4.2.3 Bubi контролирует расположение ТХК во внутреннем центромерном домене в соматических клетках

4.2.4 Киназная активность Bubi абсолютно необходима для связывания ТХК с внутренним центромерным доменом.

4.2.5 Bubi контролирует стабильность транзитного хромосомного комплекса

4.2.6 Bubi фосфорилирует INCENP 83 4.3. Регуляция расположения белка Shugoshin в ВЦД

4.3.1 Динамика xenopus Sgo в ходе клеточного цикла

4.3.2. Bubi контролирует связывание Sgo с митотическим хроматином.

4.3.3. Для связывания xSgo с митотическим хроматином не требуется накопления киназы Bubi на кинетохоре 89 4.3.4 Транзитный хромосомный комплекс необходим для правильного расположения Sgo на кинетохоре

4.4 Регуляция расположения кинезина МСАК в ВЦД

4.5 Формирование внутреннего центромерного домена и наружного кинетохора происходит независимо от митотической конденсации хроматина.

Глава 5. ОБСУЖДЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Механизмы формирования внутреннего центромерного домена кинетохора позвоночных животных»

ГЛАВА 1 ВВЕДЕНИЕ 1.1 Актуальность проблемы

Разделение генетического материала между дочерними клетками -один из важнейших шагов в ходе клеточного цикла. Для осуществления правильной сегрегации хромосом во время митоза в клетке происходят сложнейшие взаимодействия между микротрубочками (МТ) веретена деления и хроматином. Хромосомы присоединяются к микротрубочкам, растущим с противоположных полюсов митотического веретена, при помощи кинетохоров. Кинетохор представляет собой многокомпонентную белковую структуру, которая формируется на цептромерном участке каждой сестринской хромагиды. Кинетохор может быть условно разделен на 2 субдомена: внутренний центромерный домен (ВЦЦ) и наружный кинетохор (НК) (Chan et al., 2005; Cleveland et al., 2003; Meraldi et al., 2006). Компоненты наружного кинетохора участвуют в непосредственном присоединении микротрубочек к хроматину и генерируют сигнал, блокирующий начало выхода из митоза до тех пор, пока все хромосомы не будут присоединены к митотическому веретену. Внутренний центромерный домен состоит из белков, вовлеченных в удержание сестринских хроматид до наступления анафазы и в регуляцию присоединения микротрубочек. Основные компоненты ВЦЦ -транзитный хромосомный комплекс (ТХК, chromosomal passenger complex), кинезин МСАК, Когезин и комплекс Sgo/PP2a

Shugoshin/фосфатаза 2a) (Chen, 2002; Cleveland et al., 2003; Maiato et al., 2004; Rivera and Losada, 2006). Sgo в комплексе с PP2a блокирует диссоциацию комплекса Когезина в центромерном районе, предохраняя таким образом сестринские хроматиды от преждевременного расхождения. Кроме этого, Sgo регулирует динамику МТ веретена деления и стабилизирует кинетохорные МТ. ТХК состоит из киназы Aurora В и белков INCENP, Survivin и Dasra A/Borealin. ТХК фосфорилирует гистон НЗ, что является обязательным условием митотической конденсации хромосом (Goto et al., 2002); он также необходим для инициации сборки кинетохора (Ditchfield et al., 2003). Более того, ТХК регулирует активность кинезина МСАК и, таким образом, участвует в регуляции полимеризации и деполимеризации тубулиновых филаментов и контролирует формирование правильного (амфителического) присоединения МТ веретена деления к кинетохорам (Andrews et al., 2004; Lan et al., 2004).

Сборка функционального кинетохора происходит заново в ходе каждого клеточного цикла. Считается, что сборка наружного кинетохора происходит в строгом иерархическом порядке; т. е. связывание одних компонентов регулируется присутствием на кинетохоре других. (Johnson et al., 2004; Sharp-Baker and Chen, 2001; Vigneron et al., 2004; Wong and Fang, 2006). Несмотря на значительные успехи в изучении строения наружного кинетохора, регуляция формирования ВЦД остается плохо изученной. Известно, что во время перехода из профазы в прометафазу ТХК переходит с плеч хромосом в ВЦД (Andrews et al., 2003). Механизм, регулирующий этот переход, неизвестен. Недавние исследования показали, что локализация белков МСАК и Sgo во внутреннем центромерном домене зависит от ТХК (Andrews et al., 2004; Lan et al., 2004; Resnick et al., 2006), но детали регуляции сборки функционального ВЦД не ясны. Поиск механизма регуляции сборки внутреннего центромерного домена и являлся предметом данной работы.

Заключение диссертации по теме «Гистология, цитология, клеточная биология», Боярчук, Екатерина Юрьевна

ВЫВОДЫ:

1. Киназа Bubi контролирует расположение транзитного хромосомного комплекса во внутреннем центромерном домене кинетохора позвоночных животных.

2. Киназа Bubi обеспечивает связывание белка xSgo с митотическим хроматином.

3. Накопление xSgo на кинетохоре требует присутствия транзитного хромосомного комплекса.

4. Процессы формирования наружного кинетохора и внутреннего центромерного домена происходят независимо от митотической конденсации хроматина

ГЛАВА 6. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Мы можем предложить следующую схему сборки кинетохора. Во время профазы митоза киназа Aurora В инициирует формирование кинетохора. Один из возможных механизмов процесса инициации -фосфорилирование некоего центромерного белка, например Сепр-А (Zeitlin et al., 2001). Это приводит к связыванию Bubi с кинетохором, а затем - к формированию субдомена наружного кинетохора, который вовлечен в регуляцию контрольной точки сборки веретена. В свою очередь, связанная с кинетохором или растворимая киназа Bubi контролирует формирование ВЦД двумя способами.

Во-первых, она способствует перемещению ТХК с плеч хромосом в

ВЦЦ. Весьма вероятно, что Bubi контролирует не только стабильность

ТХК, но и его связывание с неким не установленным в настоящее время компонентом ВЦЦ, который обеспечивает связывание ТХК с кинетохором. Это предположение отчасти подтверждается данными о невозможности устранения нарушений, возникающих при истощении

103

ТХК из экстрактов добавлением смеси рекомбинантных компонентов ТХК (Sampath et al., 2004). Исходя из этих результатов, также можно предположить существование не известных пока субъединиц ТХК, помимо четырех описанных (Aurora В, INCENP, Survivin, Dasra А).

Во-вторых, Bubi может фосфорилировать сам белок Sgo или компонент хроматина, который связывается с Sgo, и вызывать таким образом накопление Sgo на хроматине. Связавшийся с хроматином Sgo при участии ТХК накапливается в ВЦД. Затем непосредственное действие Bubi и/или опосредованное киназой Bubi накопление ТХК в ВЦД приводит к накоплению в ВЦД кинезина МСАК.

Таким образом, внутренний центромерный домен - это динамическая структура, сборка которой не зависит от многих аспектов митотической конденсации хромосом и контролируется киназой Bubi через сложную сеть взаимодействий.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Боярчук, Екатерина Юрьевна, 2007 год

1. Енукашвили Н.И; Кузнецова И.С.; Подгорная О.И. Организация центромерамлекопитающих. 2003. Цитология. Том 45. №. 3 С. 255-270.

2. Лебедева Л.И.; Федорова С.А.; Трунова С.А.; Омельянчук Л.В. 2004. Генетика.

3. Том 40. №. 12. С. 1589-1608.

4. Abrieu, A., L.Magnaghi-Jaulin, J.A.Kahanaet al. 2001. Mpsl is a kinetochore-associated kinase essential for the vertebrate mitotic checkpoint. Cell 106:83-93.

5. Adams, R.R., S.P.Wheatley, A.M.Gouldsworthyet al„ 2000. INCENP binds the Aurora-related kinase AIRK2 and is required to target it to chromosomes, the central spindle and cleavage furrow. Curr Biol 10:1075-8.

6. Ainsztein, A.M., S.E.Kandels-Lewis, A.M.Mackay, and W.C.Earnshaw. 1998. INCENP centromere and spindle targeting: identification of essential conserved motifs and involvement of heterochromatin protein HP1. J. Cell Biol. 143:17631774.

7. Alexandru, G., F.Uhlmann, K.Mechtler, M.A.Poupart, and K.Nasmyth. 2001. Phosphorylation of the cohesin subunit Sccl by Polo/Cdc5 kinase regulates sister chromatid separation in yeast. Cell 105:459-72.

8. Altieri, D.C. 2003. Validating survivin as a cancer therapeutic target. Nat. Rev. Cancer 3:46-54.

9. Altieri, D.C. 2006. The case for survivin as a regulator of microtubule dynamics and cell-death decisions. Curr. Opin. Cell Biol. 18:609-615.

10. Ambrosini, G., C.Adida, and D.C.Altieri. 1997. A novel anti-apoptosis gene, survivin, expressed in cancer and lymphoma. Nat. Med. 3:917-921.

11. Amor, DJ. and K.H.Choo. 2002. Neocentromeres: role in human disease, evolution, and centromere study. A m. J. Hum. Genet. 71:695-714.

12. Amor, D.J., P.Kalitsis, H.Sumer, and K.H.Choo. 2004. Building the centromere: from foundation proteins to 3D organization. Trends Cell Biol. 14:359-368.

13. Andreassen, P.R., F.B.Lacroix, E.Villa-Moruzzi, and R.LMargolis. 1998. Differential subcellular localization of protein phosphatase-1 alpha, gammal, and delta isoforms during both interphase and mitosis in mammalian cells. J. Cell Biol. 141:1207-1215.

14. Andrews, P.D., E.Knatko, WJ.Moore, and J.R.Swedlow. 2003. Mitotic mechanics: the auroras come into view. Curr Opin Cell Biol 15:672-83.

15. Andrews, P.D., Y.Ovechkina, N.Morrice, M.Wagenbach, K.Duncan, L.Wordeman, and J.R.Swedlow. 2004. Aurora B regulates MCAK at the mitotic centromere. Dev Cell 6:253-68.

16. Arnaoutov, A., Y.Azuma, KRibbecket al„ 2005. Crml is a mitotic effector of Ran-GTP in somatic cells. Nat Cell Biol 7:626-32.

17. Arnaoutov, A. and M.Dasso. 2003. The Ran GTPase regulates kinetochore function. Dev Cell 5:99-111.

18. Arnaoutov, A. and MJDasso. 2005. Ran-GTP regulates kinetochore attachment in somatic cells. Cell Cycle 4:1161-1165.

19. Azuma, Y., A.Arnaoutov, T.Anan, and M.Dasso. 2005. PIASy mediates SUMO-2 conjugation of Topoisomerase-II on mitotic chromosomes. Embo J 24:2172-82.

20. Azuma, Y., A.Arnaoutov, and M.Dasso. 2003. SUMO-2/3 regulates topoisomerase II in mitosis. J Cell Biol 163:477-87.

21. Bernard, P., J.F.Maure, J.F.Partridge, S.Genier, J.PJaverzat, and R.C.Allshire. 2001. Requirement of heterochromatin for cohesion at centromeres. Science 294:25392542.

22. Biggins, S. and A.W.Murray. 2001. The budding yeast protein kinase Ipll/Aurora allows the absence of tension to activate the spindle checkpoint. Genes Dev. 15:3118-3129.

23. Bishop, J.D. and J.M.Schumacher. 2002. Phosphorylation of the carboxyl terminus of inner centromere protein (INCENP) by the Aurora B Kinase stimulates Aurora B kinase activity. J Biol Chem 277:27577-80.

24. Blower, M.D., T.Daigle, T.Kaufman, and G.H.Karpen. 2006. Drosophila CENP-A mutations cause a BubRl-dependent early mitotic delay without normal localization of kinetochore components. PLoS. Genet. 2:ell0.

25. Blower, M.D. and G.H.Karpen. 2001. The role of Drosophila CID in kinetochore formation, cell-cycle progression and heterochromatin interactions. Nat. Cell Biol. 3:730-739.

26. Blower, M.D., B.A.Sullivan, and G.H.Karpen. 2002. Conserved organization of centromeric chromatin in flies and humans. Dev. Cell 2:319-330.

27. Bolton, M.A., W.Lan, S.E.Powers, M.L.McCleland, J.Kuang, and P.T.Stukenberg. 2002. Aurora B kinase exists in a complex with survivin and INCENP and its kinase activity is stimulated by survivin binding and phosphorylation. Mol Biol Cell 13:3064-77.

28. Buffin, E., C.Lefebvre, J.Huang, M.E.Gagou, and R.E.Karess. 2005. Recruitment of Mad2 to the kinetochore requires the Rod/ZwlO complex. Curr. Biol. 15:856-861.

29. Carvalho, A., M.Carmena, C.Sambade, W.C.Eamshaw, and S.P.Wheatley. 2003.

30. Survivin is required for stable checkpoint activation in taxol-treated HeLa cells. J Cell Sci 116:2987-98.

31. Castro, A., C.Bernis, S.Vigneron, J.C.Labbe, and T.Lorca. 2005. The anaphase-promoting complex: a key factor in the regulation of cell cycle. Oncogene 24:314325.

32. Chan, G.K., S.T.Liu, and T.J.Yen. 2005. Kinetochore structure and function. Trends Cell Biol. 15:589-598.

33. Cheeseman, I.M., J.S.Chappie, E.M.Wilson-Kubalek, and A.Desai. 2006. The conserved KMN network constitutes the core microtubule-binding site of the kinetochore. Cell 127:983-997.

34. Cheeseman, I.M., S.Niessen, S.Anderson, F.Hyndman, J.R.Yates, III, K.Oegema, and A.Desai. 2004. A conserved protein network controls assembly of the outer kinetochore and its ability to sustain tension. Genes Dev. 18:2255-2268.

35. Chen, R.H. 2002. BubRl is essential for kinetochore localization of other spindle checkpoint proteins and its phosphorylation requires Madl. J Cell Biol 158:487-96.

36. Clarke, A.S., T.T.Tang, D.L.Ooi, and T.LOrr-Weaver. 2005. POLO kinase regulates the Drosophila centromere cohesion protein MEI-S332. Dev Cell 8:53-64.

37. Cleveland, D.W., Y.Mao, and K.F.Sullivan. 2003. Centromeres and kinetochores: from epigenetics to mitotic checkpoint signaling. Cell 112:407-421.

38. Cooke, C.A., M.M.Heck, and W.C.Earnshaw. 1987. The inner centromere protein (INCENP) antigens: movement from inner centromere to midbody during mitosis. J. Cell Biol. 105:2053-2067.

39. Dasso, M. 2002. The Ran GTPase: theme and variations. Curr. Biol. 12:R502-R508.

40. Dasso, M. 2006. Ran at kinetochores. Biochem. Soc. Trans. 34:711-715.

41. DeLuca, J.G., Y.Dong, P.Hergert, J.Strauss, J.M.Hickey, E.D.Salmon, and B.F.McEwen. 2005. Heel and nuf2 are core components of the kinetochore outer plate essential for organizing microtubule attachment sites. Mol. Biol. Cell 16:519531.

42. DeLuca, J.G., W.E.Gall, C.Ciferri, D.Cimini, A.Musacchio, and E.D.Salmon. 2006. Kinetochore microtubule dynamics and attachment stability are regulated by Heel. Cell 127:969-982.

43. DeLuca, J.G., B.J.Howell, J.C.Canman, J.M.Hickey, G.Fang, and E.D.Salmon. 2003. Nuf2 and Heel are required for retention of the checkpoint proteins Madl and Mad2 to kinetochores. Curr. Biol. 13:2103-2109.

44. DeLuca, J.G. and E.D.Salmon. 2004. Kinetochores: if you build it, they will come. Curr. Biol. 14:R921-R923.

45. Desai, A., A.Murray, T.J.Mitchison, and C.E.Walczak. 1999. The use of Xenopus egg extracts to study mitotic spindle assembly and function in vitro. Methods Cell Biol. 61:385-412.

46. Diaz-Martinez, L.A., J.F.Gimenez-Abian, Y.Azuma, V.Guacci, G.Gimenez-Martin, L.M.Lanier, and DJ.Clarke. 2006. PLASgamma Is Required for Faithful Chromosome Segregation in Human Cells. PLoS. ONE. I:e53.

47. Ditchfield, C., V.LJohnson, A.Tigheet al. 2003. Aurora В couples chromosome alignment with anaphase by targeting BubRl, Mad2, and Cenp-E to kinetochores. J. Cell Biol. 161:267-280.

48. Earnshaw, W.C. and N.Rothfield. 1985. Identification of a family of human centromere proteins using autoimmune sera from patients with scleroderma. Chromosoma 91:313-321.

49. Fang, G. 2002. Checkpoint protein BubRl acts synergistically with Mad2 to inhibit anaphase-promoting complex. Mol. Biol. Cell 13:755-766.

50. Ferrell, J.E., Jr. 1999. Xenopus oocyte maturation: new lessons from a good egg. Bioessays 21:833-842.

51. Foltz, D.R., L.E.Jansen, B.E.Black, A.O.Bailey, J.R.Yates, III, and D.W.Cleveland. 2006. The human CENP-A centromeric nucleosome-associated complex. Nat. Cell Biol. 8:458-469.

52. Fukagawa, T. 2004. Centromere DNA, proteins and kinetochore assembly in vertebrate cells. Chromosome. Res. 12:557-567.

53. Gadea, B.B. and J.V.Ruderman. 2006. Aurora В is required for mitotic chromatin-induced phosphorylation of Opl8/Stathmin. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A 103:44934498.

54. Gandhi, R., P.J.Gillespie, and T.Hirano. 2006. Human Wapl is a cohesin-binding protein that promotes sister-chromatid resolution in mitotic prophase. Curr. Biol. 16:2406-2417.

55. Gardner, M.K. and DJ.Odde. 2006. Modeling of chromosome motility during mitosis. Curr. Opin. Cell Biol. 18:639-647.

56. Gassmann, R., A.Carvalho, AJ.Henzinget al. 2004. Borealin: a novel chromosomal passenger required for stability of the bipolar mitotic spindle. J Cell Biol 166:179-91.

57. Gerlich, D., T.Hirota, B.Koch, J.M.Peters, and J.Ellenberg. 2006. Condensin I stabilizes chromosomes mechanically through a dynamic interaction in live cells. Curr. Biol. 16:333-344.

58. Giet, R. and D.M.Glover. 2001. Drosophila aurora B kinase is required for histone H3 phosphorylation and condensin recruitment during chromosome condensation and to organize the central spindle during cytokinesis. J. Cell Biol. 152:669-682.

59. Gillespie, P.J. and T.Hirano. 2004. Scc2 couples replication licensing to sister chromatid cohesion in Xenopus egg extracts. Curr Biol 14:1598-603.

60. Glover, D.M., M.H.Leibowitz, D.A.McLean, and H.Parry. 1995. Mutations in aurora prevent centrosome separation leading to the formation of monopolar spindles. Cell 81:95-105.

61. Gorbsky, G.J. 2004. Mitosis: MCAK under the aura of Aurora B. Curr. Biol. 14.R346-R348.

62. Goshima, G., T.Kiyomitsu, K.Yoda, and M.Yanagida. 2003. Human centromere chromatin protein hMisl2, essential for equal segregation, is independent of CENP-A loading pathway. J. Cell Biol. 160:25-39.

63. Goto, H., Y.Yasui, A.Kawajiriet al. 2003. Aurora-B regulates the cleavage furrow-specific vimentin phosphorylation in the cytokinetic process. J. Biol. Chem. 278:8526-8530.

64. Goto, H., Y.Yasui, E.A.Nigg, and M.Inagaki. 2002. Aurora-B phosphorylates Histone H3 at serine28 with regard to the mitotic chromosome condensation. Genes Cells 7:11-17.

65. Grewal, S.I. and D.Moazed. 2003. Heterochromatin and epigenetic control of gene expression. Science 301:798-802.

66. Grimes, B.R., J.Babcock, M.K.Rudd, B.Chadwick, and H.F.Willard. 2004. Assembly and characterization of heterochromatin and euchromatin on human artificial chromosomes. Genome Biol. 5:R89.

67. Guenatri, M., D.Bailly, C.Maison, and G.Almouzni. 2004. Mouse centric and pericentric satellite repeats form distinct functional heterochromatin. J. Cell Biol. 166:493-505.

68. Habu, T., S.H.Kim, J.Weinstein, and T.Matsumoto. 2002. Identification of a MAD2-binding protein, CMT2, and its role in mitosis. EMBO J. 21:6419-6428.

69. Hahnenberger, K.M., M.P.Baum, C.M.Polizzi, J.Carbon, and L.CIarke. 1989. Construction of functional artificial minichromosomes in the fission yeast Schizosaccharomyces pombe. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A 86:577-581.

70. Harel, A. and D J.Forbes. 2004. Importin beta: conducting a much larger cellular symphony. Mo/. Cell 16:319-330.

71. Hauf, S., R.W.Cole, S.LaTerraet al. 2003. The small molecule Hesperadin reveals a role for Aurora B in correcting kinetochore-microtubule attachment and in maintaining the spindle assembly checkpoint. J Cell Biol 161:281-94.

72. Hauf, S., E.Roitinger, B.Koch, CM.Dittrich, K.Mechtler, and J.M.Peters. 2005. Dissociation of cohesin from chromosome arms and loss of arm cohesion during early mitosis depends on phosphorylation of SA2. PLoS Biol 3:e69.

73. Hauf, S., I.C.Waizenegger, and J.M.Peters. 2001. Cohesin cleavage by separase required for anaphase and cytokinesis in human cells. Science 293:1320-3.

74. Honda, R., R.Korner, and E.A.Nigg. 2003. Exploring the functional interactions between Aurora B, INCENP, and survivin in mitosis. Mol Biol Cell 14:3325-41.

75. Hori, T., T.Haraguchi, Y.Hiraoka, H.Kimura, and T.Fukagawa. 2003. Dynamic behavior of Nuf2-Hecl complex that localizes to the centrosome and centromere and is essential for mitotic progression in vertebrate cells. J. Cell Sci. 116:3347-3362.

76. Howman, E.V., KJ.Fowler, A.J.Newson, S.Redward, A.C.MacDonald, P.Kalitsis, and K.H.Choo. 2000. Early disruption of centromeric chromatin organization in centromere protein A (Cenpa) null mice. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A 97:11481153.

77. Hoyt, M.A., L.Totis, and B.T.Roberts. 1991. S. cerevisiae genes required for cell cycle arrest in response to loss of microtubule function. Cell 66:507-517.

78. Hsu, J.Y., Z.W.Sun, X.Liet al. 2000. Mitotic phosphorylation of histone H3 is governed by Ipll/aurora kinase and Glc7/PPl phosphatase in budding yeast and nematodes. Cell 102:279-291.

79. Hudson, D.F., KJ.Fowler, E.Earleet al. 1998. Centromere protein B null mice are mitotically and meiotically normal but have lower body and testis weights. J. Cell Biol. 141:309-319.

80. Indjeian, V.B., B.M.Stern, and A.W.Murray. 2005. The centromeric protein Sgol is required to sense lack of tension on mitotic chromosomes. Science 307:130-3.

81. Johnson, V.L., M.I.Scott, S.V.Holt, D.Hussein, and S.S.Taylor. 2004. Bubl is required for kinetochore localization of BubRl, Cenp-E, Cenp-F and Mad2, and chromosome congression. J Cell Sci 117:1577-89.

82. Jones, M.H., BJ.Huneycutt, C.G.Pearsonet al. 2005. Chemical genetics reveals a role forMpsl kinase in kinetochore attachment during mitosis. Curr. Biol. 15:160165.

83. Kaitna, S., P.Pasierbek, M.Jantsch, J.Loidl, and M.Glotzer. 2002. The aurora B kinase AIR-2 regulates kinetochores during mitosis and is required for separation of homologous Chromosomes during meiosis. Curr Biol 12:798-812.

84. Katis, V.L., M.Galova, K.P.Rabitsch, J.Gregan, and K.Nasmyth. 2004. Maintenance of cohesin at centromeres after meiosis I in budding yeast requires a kinetochore-associated protein related to MEI-S332. Curr Biol 14:560-72.

85. Kelly, A.E., S.C.Sampath, T.A.Maniar, E.M.W00, B.T.Chait, and H.Funabiki. 2007. Chromosomal enrichment and activation of the aurora B pathway are coupled to spatially regulate spindle assembly. Dev. Cell 12:31-43.

86. Kerrebrock, A.W., D.P.Moore, J.S.Wu, and T.LOir-Weaver. 1995. Mei-S332, a Drosophila protein required for sister-chromatid cohesion, can localize to meiotic centromere regions. Cell 83:247-56.

87. Kitajima, T.S., S.Hauf, M.Ohsugi, T.Yamamoto, and Y.Watanabe. 2005. Human Bubl defines the persistent cohesion site along the mitotic chromosome by affecting Shugoshin localization. CurrBiol 15:353-9.

88. Kitajima, T.S., S.A.Kawashima, and Y.Watanabe. 2004. The conserved kinetochore protein shugoshin protects centromeric cohesion during meiosis. Nature 427:510-7.

89. Kitajima, T.S., T.Sakuno, K.Ishiguro, S.Iemura, T.Natsume, S.A.Kawashima, and Y.Watanabe. 2006. Shugoshin collaborates with protein phosphatase 2A to protect cohesin. Nature 441:46-52.

90. Kline, S.L., I.M.Cheeseman, T.Hori, T.Fukagawa, and A.Desai. 2006. The human Mis 12 complex is required for kinetochore assembly and proper chromosome segregation. J. Cell Biol. 173:9-17.

91. Kline-Smith, S.L., A.Khodjakov, P.Hergert, and C.E.Walczak. 2004. Depletion of centromeric MCAK leads to chromosome congression and segregation defects due to improper kinetochore attachments. Mol. Biol. Cell 15:1146-1159.

92. Kline-Smith, S.L. and C.EWalczak. 2002. The microtubule-destabilizing kinesin XKCM1 regulates microtubule dynamic instability in cells. Mol. Biol. Cell 13:27182731.

93. Kops, G.J., Y.Kim, B.A.Weaveret al. 2005. ZW10 links mitotic checkpoint signaling to the structural kinetochore. J. Cell Biol. 169:49-60.

94. Kornbluth, S.Y.J.a.P.M. 2001. Analysis of the cell cycle using Xenopus egg extratcs. In In Current Protocols in Cell Biology. 11.11.11-11.11.13.

95. Kueng, S., B.Hegemann, B.H.Peters, J.J.Lipp, A.Schleiffer, K.Mechtler, and J.M.Peters. 2006. Wapl controls the dynamic association of cohesin with chromatin. Cell 127:955-967.

96. Lan, W., X.Zhang, S.L.Kline-Smithet al. 2004. Aurora B phosphorylates centromeric MCAK and regulates its localization and microtubule depolymerization activity. Curr Biol 14:273-86.

97. LeBlanc, H.N., T.T.Tang, J.S.Wu, and T.L.Orr-Weaver. 1999. The mitotic centromeric protein MEI-S332 and its role in sister-chromatid cohesion. Chromosoma 108:401-11.

98. Lens, S.M., J.A.Rodriguez, G.Vader, S.W.Span, G.Giaccone, and R.H.Medema. 2006. Uncoupling the central spindle-associated function of the chromosomal passenger complex from its role at centromeres. Mol. Biol. Cell 17:1897-1909.

99. Lens, S.M., R.M.Wolthuis, R.Klompmakeret al. 2003. Survivin is required for a sustained spindle checkpoint arrest in response to lack of tension. EMBO J. 22:29342947.

100. Li, F., G.Ambrosini, E.Y.Chu, J.Plescia, S.Tognin, P.C.Marchisio, and D.C.Altieri. 1998. Control of apoptosis and mitotic spindle checkpoint by survivin. Nature 396:580-584.

101. Li, X., G.Sakashita, H.Matsuzakiet al. 2004. Direct association with inner centromere protein (INCENP) activates the novel chromosomal passenger protein, Aurora-C. J. Biol. Chem. 279:47201-47211.

102. Lipp, J.J., T.Hirota, I.Poser, and J.M.Peters. 2007. Aurora B controls the association of condensin I but not condensin II with mitotic chromosomes. J. Cell Sci.

103. Liu, J. and J.L.Maller. 2005. Calcium elevation at fertilization coordinates phosphorylation of XErpl/Emi2 by Plxl and CaMK II to release metaphase arrest by cytostatic factor. Curr. Biol. 15:1458-1468.

104. Liu, S.T., G.K.Chan, J.C.Hittle, G.Fujii, E.Lees, and T.J.Yen. 2003. Human MPS1 kinase is required for mitotic arrest induced by the loss of CENP-E from kinetochores. Mol. Biol. Cell 14:1638-1651.

105. Liu, S.T., J.B.Rattner, S.A.Jablonski, and T.J.Yen. 2006. Mapping the assembly pathways that specify formation of the trilaminar kinetochore plates in human cells. J. Cell Biol. 175:41-53.

106. Lohka, M.J. 1998. Analysis of nuclear envelope assembly using extracts of Xenopus eggs. Methods Cell Biol. 53:367-395.

107. Losada, A., M.Hirano, and T.Hirano. 1998. Identification of Xenopus SMC protein complexes required for sister chromatid cohesion. Genes Dev 12:1986-97.

108. Losada, A., M.Hirano, and T.Hirano. 2002. Cohesin release is required for sister chromatid resolution, but not for condensin-mediated compaction, at the onset of mitosis. Genes Dev 16:3004-16.

109. Losada, A. and T.Hirano. 2005. Dynamic molecular linkers of the genome: the first decade of SMC proteins. Genes Dev. 19:1269-1287.

110. Mackay, A.M., A.M.Ainsztein, D.M.Eckley, and W.C.Earnshaw. 1998. A dominant mutant of inner centromere protein (INCENP), a chromosomal protein, disrupts prometaphase congression and cytokinesis. J. Cell Biol. 140:991-1002.

111. Maiato, H„ J.DeLuca, E.D.Salmon, and W.C.Earnshaw. 2004. The dynamickinetochore-microtubule interface. CellSci. 117:5461-5477.

112. Mao, Y., A.Abrieu, and D.W.Cleveland. 2003. Activating and silencing the mitotic checkpoint through CENP-E-dependent activation/inactivation of BubRl. Cell 114:87-98.

113. Mapelli, M., F.V.Filipp, G.Rancatiet al. 2006. Determinants of conformational dimerization of Mad2 and its inhibition by p31 comet. EMBO J. 25:1273-1284.

114. Maresca, T.J. and R.Heald. 2006a. Methods for studying spindle assembly and chromosome condensation in Xenopus egg extracts. Methods Mol. Biol. 322:459474.

115. Maresca, T.J. and R.Heald. 2006b. The long and the short of it: linker histone HI is required for metaphase chromosome compaction. Cell Cycle 5:589-591.

116. Marston, A.L. and A.Amon. 2004. Meiosis: cell-cycle controls shuffle and deal. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 5:983-997.

117. Marston, A.L., W.H.Tham, H.Shah, and A.Amon. 2004. A genome-wide screen identifies genes required for centromeric cohesion. Science 303:1367-70.

118. Martin-Lluesma, S., V.M.Stucke, andE.A.Nigg. 2002. Role of Heel in spindle checkpoint signaling and kinetochore recruitment of Madl/Mad2. Science 297:22672270.

119. Masumoto, H., H.Masukata, Y.Muro, N.Nozaki, and T.Okazaki. 1989. A human centromere antigen (CENP-B) interacts with a short specific sequence in alphoid DNA, a human centromeric satellite. J. Cell Biol. 109:1963-1973.

120. McEwen, B.F., A.B.Heagle, G.O.Cassels, K.F.ButtIe, and C.L.Rieder. 1997. Kinetochore fiber maturation in PtKl cells and its implications for the mechanisms of chromosome congression and anaphase onset. J. Cell Biol. 137:1567-1580.

121. McGuinness, B.E., T.Hirota, N.R.Kudo, J.M.Peters, and K.Nasmyth. 2005. Shugoshin prevents dissociation of cohesin from centromeres during mitosis in vertebrate cells. PLoS Biol 3:e86.

122. Meluh, P.B., P.Yang, L.GIowczewski, D.Koshland, and M.M.Smith. 1998. Cse4p is a component of the core centromere of Saccharomyces cerevisiae. Cell 94:607-613.

123. Meraldi, P., R.Honda, and E.A.Nigg. 2004. Aurora kinases link chromosome segregation and cell division to cancer susceptibility. Curr. Opin. Genet. Dev. 14:2936.

124. Meraldi, P., A.D.McAinsh, E.Rheinbay, and P.K.Sorger. 2006. Phylogenetic and structural analysis of centromeric DNA and kinetochore proteins. Genome Biol. 7:R23.

125. Meraldi, P. and P.K.Sorger. 2005. A dual role for Bubl in the spindle checkpoint and chromosome congression. Embo J 24:1621-33.

126. Mollinari, C., C.Reynaud, S.Martineau-Thuillieret al. 2003. The mammalian passenger protein TD-60 is an RCC1 family member with an essential role inprometaphase to metaphase progression. Dev Cell 5:295-307.

127. Morrison, C., AJ.Henzing, O.N.Jensenet al. 2002. Proteomic analysis of human metaphase chromosomes reveals topoisomerase II alpha as an Aurora B substrate. Nucleic Acids Res 30:5318-27.

128. Murnion, M.E., R.R.Adams, D.M.Callister, C.D.Allis, W.C.Earnshaw, and J.R.Swedlow. 2001. Chromatin-associated protein phosphatase 1 regulates aurora-B and histone H3 phosphorylation. J. Biol. Chem. 276:26656-26665.

129. Murray, A.W. and M.W.Kirschner. 1989. Cyclin synthesis drives the early embryonic cell cycle. Nature 339:275-280.

130. Murray, A.W., M.J.Solomon, and M.W.Kirschner. 1989. The role of cyclin synthesis and degradation in the control of maturation promoting factor activity. Nature 339:280-286.

131. Nasmyth, K. 2002. Segregating sister genomes: the molecular biology of chromosome separation. Science 297:559-65.

132. Nurse, P.M. 2002. Nobel Lecture. Cyclin dependent kinases and cell cycle control. Biosci. Rep. 22:487-499.

133. Obuse, C., O.Iwasaki, T.Kiyomitsu, G.Goshima, Y.Toyoda, and M.Yanagida. 2004. A conserved Misl2 centromere complex is linked to heterochromatic HP1 and outer kinetochore protein Zwint-1. Nat. Cell Biol. 6:1135-1141.

134. Ohi, R., M.L.Coughlin, W.S.Lane, and T.J.Mitchison. 2003. An inner centromere protein that stimulates the microtubule depolymerizing activity of a KinI kinesin. Dev. Cell 5:309-321.

135. Ohi, R., T.Sapra, J.Howard, and TJ.Mitchison. 2004. Differentiation of cytoplasmic and meiotic spindle assembly MCAK functions by Aurora B-dependent phosphorylation. Mol. Biol. Cell 15:2895-2906.

136. Okada, M., I.M.Cheeseman, T.Horiet al. 2006. The CENP-H-I complex is required for the efficient incorporation of newly synthesized CENP-A into centromeres. Nat. Cell Biol. 8:446-457.

137. Peters, J.M. 2002. The anaphase-promoting complex: proteolysis in mitosis and beyond. Mol. Cell 9:931-943.

138. Peters, J.M. 2006. The anaphase promoting complex/cyclosome: a machine designed to destroy. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 7:644-656.

139. Petersen, J. and I.M.Hagan. 2003. S. pombe aurora kinase/survivin is required for chromosome condensation and the spindle checkpoint attachment response. Curr. Biol. 13:590-597.

140. Pinsky, B.A. and S.Biggins. 2005. The spindle checkpoint: tension versus attachment. Trends Cell Biol. 15:486-493.

141. Qi, W„ Z.Tang, and H.Yu. 2006. Phosphorylation- and Polo-Box-dependent Binding of Plkl to Bubl Is Required for the Kinetochore Localization of Plkl. Mol. Biol.1. Cell.

142. Rabitsch, K.P., J.Gregan, A.Schleiffer, J.P.Javerzat, F.Eisenhaber, and K.Nasmyth. 2004. Two fission yeast homologs of Drosophila Mei-S332 are required for chromosome segregation during meiosis land II. CurrBiol 14:287-301.

143. Rauh, N.R., A.Schmidt, J.Bormann, E.A.Nigg, and T.U.Mayer. 2005. Calcium triggers exit from meiosis II by targeting the APC/C inhibitor XErpl for degradation. Nature 437:1048-1052.

144. Regnier, V., P.Vagnarelli, T.Fukagawaet al. 2005. CENP-A is required for accurate chromosome segregation and sustained kinetochore association of BubRl. Mol. Cell Biol. 25:3967-3981.

145. Resnick, T.D., D.LSatinover, F.MacIsaac, P.T.Stukenberg, W.C.Earnshaw, T.LOrr-Weaver, and M.Carmena. 2006. INCENP and Aurora B promote meiotic sister chromatid cohesion through localization of the Shugoshin MEI-S332 in Drosophila. Dev. Cell 11:57-68.

146. Riedel, C.G., V.LKatis, Y.Katouet al. 2006. Protein phosphatase 2A protects centromeric sister chromatid cohesion during meiosis I. Nature 441:53-61.

147. Rieder, C.L. 2005. Kinetochore fiber formation in animal somatic cells: dueling mechanisms come to a draw. Chromosoma 114:310-318.

148. Rivera, T. and A.Losada. 2006. Shugoshin and PP2A, shared duties at the centromere. Bioessays 28:775-779.

149. Roberts, B.T., K.A.Farr, and M.A.Hoyt. 1994. The Saccharomyces cerevisiae checkpoint gene BUB1 encodes a novel protein kinase. Mol Cell Biol 14:8282-91.

150. Rubin, C.I. and G.F.Atweh. 2004. The role of stathmin in the regulation of the cell cycle. J. Cell Biochem. 93:242-250.

151. Saffery, R., D.V.Irvine, B.Griffiths, P.Kalitsis, LWordeman, and K.H.Choo. 2000. Human centromeres and neocentromeres show identical distribution patterns of >20 functionally important kinetochore-associated proteins. Hum. Mol. Genet. 9:175-185.

152. Saitoh, H„ C.A.Cooke, W.H.Burgess, W.C.Earnshaw, and M.Dasso. 1996. Direct and indirect association of the small GTPase ran with nuclear pore proteins and soluble transport factors: studies in Xenopus laevis egg extracts. Mol Biol Cell 7:1319-34.

153. Salic, A., J.C.Waters, and T.J.Mitchison. 2004. Vertebrate shugoshin links sister centromere cohesion and kinetochore microtubule stability in mitosis. Cell 118:56778.

154. Sampath, S.C., R.Ohi, O.Leismann, A.Salic, A.Pozniakovski, and H.Funabiki. 2004. The chromosomal passenger complex is required for chromatin-induced microtubulestabilization and spindle assembly. Cell 118:187-202.

155. Sandall, S., F.Severin, I.X.McLeod, J.R.Yates, III, K.Oegema, A.Hyman, and A.Desai. 2006. A Birl-Slil5 complex connects centromeres to microtubules and is required to sense kinetochore tension. Cell 127:1179-1191.

156. Sawin, K.E. and T.J.Mitchison. 1991. Mitotic spindle assembly by two different pathways in vitro. J. Cell Biol. 112:925-940.

157. Schwab, M.S., B.T.Roberts, S.D.Gross, BJ.Tunquist, F.E.Taieb, A.L.Lewellyn, and J.L.Maller. 2001. Bubl is activated by the protein kinase p90(Rsk) during Xenopus oocyte maturation. Curr Biol 11:141-50.

158. Sharp, D.J., G.C.Rogers, and J.M.Scholey. 2000. Microtubule motors in mitosis. Nature 407:41-47.

159. Sharp-Baker, H. and R.H.Chen. 2001. Spindle checkpoint protein Bubl is required for kinetochore localization of Madl, Mad2, Bub3, and CENP-E, independently of its kinase activity. J Cell Biol 153:1239-50.

160. Skoufias, D.A., C.Mollinari, F.B.Lacroix, and R.L.Margolis. 2000. Human survivin is a kinetochore-associated passenger protein. J. Cell Biol. 151:1575-1582.

161. Smythe, C. and J.W.Newport. 1991a. Systems for the study of nuclear assembly, DNA replication, and nuclear breakdown in Xenopus laevis egg extracts. Methods Cell Biol. 35:449-468.

162. Smythe, C. and J.W.Newport. 1991b. Systems for the study of nuclear assembly, DNA replication, and nuclear breakdown in Xenopus laevis egg extracts. Methods Cell Biol. 35:449-468.

163. Sullivan, B.A. and G.H.Karpen. 2004. Centromeric chromatin exhibits a histone modification pattern that is distinct from both euchromatin and heterochromatin. Nat. Struct. Mol. Biol. 11:1076-1083.

164. Sumara, I., E.Vorlaufer, C.Gieffers, B.H.Peters, and J.M.Peters. 2000. Characterization of vertebrate cohesin complexes and their regulation in prophase. J Cell Biol 151:749-62.

165. Sun, X., H.D.Le, J.M.Wahlstrom, and G.H.Karpen. 2003. Sequence analysis of a functional Drosophila centromere. Genome Res. 13:182-194.

166. Sun, X., J.Wahlstrom, and G.Karpen. 1997. Molecular structure of a functional Drosophila centromere. Cell 91:1007-1019.

167. Tamm, I., Y.Wang, E.Sausville, D.A.Scudiero, N.Vigna, T.Oltersdorf, and J.C.Reed. 1998. lAP-family protein survivin inhibits caspase activity and apoptosis induced by Fas (CD95), Bax, caspases, and anticancer drugs. Cancer Res. 58:5315-5320.

168. Tanaka, T.U., N.Rachidi, CJankeet al. 2002. Evidence that the Ipll-SH15 (Aurora kinase-INCENP) complex promotes chromosome bi-orientation by altering kinetochore-spindle pole connections. Cell 108:317-329.

169. Tang, C.J., C.Y.Lin, and T.K.Tang. 2006a. Dynamic localization and functional implications of Aurora-C kinase during male mouse meiosis. Dev. Biol. 290:398-410.

170. Tang, Z., H.Shu, D.Oncel, S.Chen, and H.Yu. 2004a. Phosphorylation of Cdc20 by Bubl provides a catalytic mechanism for APC/C inhibition by the spindle checkpoint. Mol Cell 16:387-97.

171. Tang, Z., H.Shu, W.Qi, N.A.Mahmood, M.C.Mumby, and H.Yu. 2006b. PP2A Is Required for Centromeric Localization of Sgol and Proper Chromosome Segregation. Dev. Cell 10:575-585.

172. Tang, Z., Y.Sun, S.E.Harley, H.Zou, and H.Yu. 2004b. Human Bubl protects centromeric sister-chromatid cohesion through Shugoshin during mitosis. Proc Natl AcadSciUSA 101:18012-7.

173. Taylor, S.S. and F.McKeon. 1997. Kinetochore localization of murine Bubl is required for normal mitotic timing and checkpoint response to spindle damage. Cell 89:727-35.

174. Terada, Y., M.Tatsuka, F.Suzuki, Y.Yasuda, S.Fujita, and M.Otsu. 1998. AIM-1: a mammalian midbody-associated protein required for cytokinesis. EMBO J. 17:667676.

175. Tutter, A.V. and J.C.Walter. 2006. Chromosomal DNA replication in a soluble cellfree system derived from Xenopus eggs. Methods Mol. Biol. 322:121-137.

176. Uhlmann, F., F.Lottspeich, and K.Nasmyth. 1999. Sister-chromatid separation at anaphase onset is promoted by cleavage of the cohesin subunit Sccl. Nature 400:3742.

177. Uhlmann, F. and K.Nasmyth. 1998. Cohesion between sister chromatids must be established during DNA replication. CurrBiol 8:1095-101.

178. Uren, A.G., L.Wong, M.Pakusch, K.J.Fowler, FJ.Burrows, D.L.Vaux, and K.H.Choo. 2000. Survivin and the inner centromere protein INCENP show similar cell-cycle localization and gene knockout phenotype. Curr. Biol. 10:1319-1328.

179. Vader, G., J.J.Kauw, R.H.Medema, and S.M.Lens. 2006a. Survivin mediates targeting of the chromosomal passenger complex to the centromere and midbody. EMBO Rep. 7:85-92.

180. Vader, G., R.H.Medema, and S.M.Lens. 2006b. The chromosomal passenger complex: guiding Aurora-B through mitosis. J. Cell Biol. 173:833-837.

181. Vagnarelli, P. and W.C.Eamshaw. 2004. Chromosomal passengers: the four-dimensional regulation of mitotic events. Chromosoma 113:211-222.

182. Vaisberg, E.A., M.P.Koonce, and J.R.Mcintosh. 1993. Cytoplasmic dynein plays a role in mammalian mitotic spindle formation. J. Cell Biol. 123:849-858.

183. Van Hooser, A., D.W.Goodrich, C.D.Allis, B.R.Brinkley, and M.A.Mancini. 1998. Histone H3 phosphorylation is required for the initiation, but not maintenance, of mammalian chromosome condensation. J. Cell Sci. 111 (Pt 23):3497-3506.

184. Vigneron, S., S.Prieto, C.Bemis, J.C.Labbe, A.Castro, and T.Lorca. 2004. Kinetochore localization of spindle checkpoint proteins: who controls whom? Mol Biol Cell 15:4584-96.

185. Vong, Q.P., K.Cao, H.Y.Li, P.A.Iglesias, and Y.Zheng. 2005. Chromosome alignment and segregation regulated by ubiquitination of survivin. Science 310:14991504.

186. Warburton, P.E., C.A.Cooke, S.Bourassaet al. 1997. Immunolocalization of CENP-A suggests a distinct nucleosome structure at the inner kinetochore plate of active centromeres. Curr. Biol. 7:901-904.

187. Watanabe, Y. and T.S.Kitajima. 2005. Shugoshin protects cohesin complexes at centromeres. Philos. Trans. R. Soc. Lond B Biol. Sci. 360:515-21, discussion.

188. Wei, R.R., J.A1 Bassam, and S.C.Harrison. 2007. The Ndc80/HEC1 complex is a contact point for kinetochore-microtubule attachment. Nat. Struct. Mol. Biol. 14:5459.

189. Wheatley, S.P., A.Carvalho, P.Vagnarelli, and W.C.Earnshaw. 2001. INCENP is required for proper targeting of Survivin to the centromeres and the anaphase spindle during mitosis. Curr Biol 11:886-90.

190. Wong, O.K. and G.Fang. 2006. Loading of the 3F3/2 Antigen onto Kinetochores Is Dependent on the Ordered Assembly of the Spindle Checkpoint Proteins. Mol. Biol. Cell.

191. Wood, V., R.Gwilliam, M.A.Rajandreamet al. 2002. The genome sequence of Schizosaccharomyces pombe. Nature 415:871-880.

192. Xia, G., X.Luo, T.Habu, J.Rizo, T.Matsumoto, and H.Yu. 2004. Conformation-specific binding of p31(comet) antagonizes the function of Mad2 in the spindle checkpoint. EM BO J. 23:3133-3143.

193. Yan, X., L.Cao, Q.Liet al. 2005. Aurora C is directly associated with Survivin and required for cytokinesis. Genes Cells 10:617-626.

194. Yang, C.H., J.Tomkiel, H.Saitoh, D.H.Johnson, and W.C.Earnshaw. 1996. Identification of overlapping DNA-binding and centromere-targeting domains in the human kinetochore protein CENP-C. Mol. Cell Biol. 16:3576-3586.

195. Yu, H. 2006. Structural activation of Mad2 in the mitotic spindle checkpoint: the two-state Mad2 model versus the Mad2 template model. J. Cell Biol. 173:153-157.

196. Zeitlin, S.G., R.D.Shelby, and K.F.Sullivan. 2001. CENP-A is phosphorylated by Aurora B kinase and plays an unexpected role in completion of cytokinesis. J. Cell Biol. 155:1147-1157.