Клетки дермальной папиллы из нервного гребня в морфогенезе волосяного фолликула тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.03.04, кандидат биологических наук Гнедева, Ксения Юрьевна

• Гнедева, Ксения Юрьевна
• кандидат биологических наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Гнедева, Ксения Юрьевна

Список сокращений.

Введение.

Цель.

Задачи.

I. Обзор Литературы.

1.1. Волосяной фолликул - производное кожи.

1.1.2. Эпидермальные стволовые клетки волосяного фолликула.

1.2. Эмбриогенез и цикл роста волосяного фолликула.

1.2.1. Стадии эмбрионального развития волосяного фолликула.

1.2.2. Цикл роста волоса.

1.3. Тубулогенез.

1.3.1. Типы тубулогенеза.

1.3.2. Модели эпителиального тубулогенеза.

1.4. Мезенхимные клетки волосяного фолликула.

1.4.1 Индукция волосяных фолликулов клетками ДП при подкожных пересадках бестимусным мышам.

1.4.2 Характеристика клеток ДП в культуре.

1.4.3. Происхождение мезенхимных клеток волосяного фолликула в эмбриогенезе.

1.5. Клетки нервного гребня.

1.5.1. Четвертый зародышевый листок.

1.5.2. Отделы нервного гребня.

1.6. Плюрипотентные стволовые клетки человека и их дифференцировочный потенциал.

II. Материалы и Методы.

11.1. Материалы.

II. 1.1 Клеточные культуры.

II. 1.2. Химические реактивы.

11.2. Методы.

Ы.2.1. Выделение коллагена I типа.:.

11.2.2. Приготовление коллагенового геля.

11.2.3. Выделение первичных кератиноцитов человека.

11.2.4. Культивирование кератиноцитов в коллагеновом геле.

11.2.5. Изучение влияния различных факторов на морфогенез кератиноцитов человека.

11.2.6. Выделение ранних постнатальных первичных кератиноцитов мыши.

11.2.7. Выделение клеток ДП человека.

11.2.8. Выделение клеток ДП вибрисс взрослой крысы и эмбриона мыши

11.2.9. Выделение и культивирование постнатальных фибробластов мыши.

11.2.10. Выделение и культивирование эмбриональных фибробластов мыши.

11.2.11. Культивирование эмбриональных стволовых клеток (ЭСК) и индуцированных плюрипотентныхстволовых клеток (ИПСК) человека

11.2.12. Получение и культивация клеток нервного гребня из ЭСК и ИПСК человека.

11.2.13. Индукция нейро- и глиогенной дифференцировок клеток ДП.

11.2.14. Иммуногистохимическое исследование.

11.2.15. Выявление активности щелочной фосфатазы.

11.2.16. Количественный ПЦР в реальном времени.

11.2.17. Анализ клеточных популяций с помощью проточного флуоресцентного клеточного сортинга - FACS.

11.2.18. Мечение клеток лентивирусом.

11.2.19. Трансплантация клеток иммунодефицитным мышам.

11.2.20. Статистическая обработка результатов.

III. Результаты и Обсуждение.

111.1. Изучение эмбрионального происхождения дп волос головы мыши с использованием генномодифицированных мышей.

111.2. Изучение потенциала к нейральной дифференцировке клеток ДП вибрисс крысы.

111.3. Дифференцировка ЭСК человека в клетки нервного гребня.

111.4. Разработка протокола дифференцировки ЭСК-НГ в клетки ДП

111.5. Характеристика ЭСК-ДП клеток in vitro.

111.6. Получение ДП-подобных клеток из индуцированных плюрипотентных клеток человека.

III.7. Потенциал к индукции волосяных фолликулов у ЭСК-ДП клеток

111.8. Клетки ЭСК-ДП приобретают способность индуцировать формирование волосяных фолликулов вследствие их дифференцировки из ЭСК-НГ.

111.9. ЭСК-ДП и ИПСК-ДП входят в состав ДП образованных в трансплантатах волосяных фолликулов.

111.10. Изучение роли сигнального пути BMP в дифференцировке клеток ЭСК-НГ в ДП.

111.11. Изучение влияния факторов роста на начальные этапы развития волосяных фолликулов.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клетки дермальной папиллы из нервного гребня в морфогенезе волосяного фолликула»

Волосяной фолликул является уникальной структурой и играет важнейшую роль в процессе роста волос и поддержании гомеостаза эпидермиса. В эмбриогенезе волосяные фолликулы формируются из клеток эпидермиса и подлежащей дермы. Постнатально, волосяные фолликулы подвержены циклическим изменениям, в ходе которых они проходят этапы активного роста (анаген), регрессии (катаген) и покоя (телоген). При переходе от стадии телогена к стадии анагена волосяной фолликул полностью регенерирует. Основы такой регенерации лежат в особенностях эпителиального и мезенхимного компонентов фолликула. Как и в развитии, в цикле роста волоса реорганизация волосяного фолликула происходит в результате серии индукционных взаимодействий между клетками мезенхимы и эпителия. Популяцией мезенхимных клеток, обладающих индукционной способностью, являются клетки дермальной папиллы (ДП). Они индуцируют переход от стадии телогена к стадии анагена и закладку волосяных фолликулов de novo при подкожных пересадках. Также клетки ДП способны дифференцироваться в адипо-, остео- и хондрогенном направлениях in vitro, что делает их изучение важной и актуальной задачей. Наряду с широким спектром мезенхимных дифференцировок клетки ДП способны дифференцироваться в нейроны и глию периферической нервной системы. Подобные данные существуют для ДП мыши и человека, но исследований потенциала к нейральной дифференцировке у клеток ДП крысы проведено не было. Между тем, это могло бы показать универсальность феномена нейральной дифференцировки клеток ДП для млекопитающих.

Мезенхимные клетки ДП разных участков тела имеют различное происхождение в эмбриогенезе. Так, долго было известно, что дерма и ДП волосяного покрова дорсальной и вентральной стороны туловища имеют мезодермальное происхождение. Дорзальная часть происходит от дерматома сомитов, вентральная - от висцерального листка спланхнотома. В тоже время, происхождение ДП волосяного покрова головы у млекопитающих в эмбриогенезе не было изучено до последнего времени.

Нервный гребень — транзиторная клеточная популяция, мигрирующая из дорсальной части нервной трубки и дающая начало самым разнообразным тканям в развитии. Такими тканями являются нейроны и глия периферической нервной системы, гладкомышечные клетки и клетки проводящей системы сердца, а также, мезенхимные компоненты головного отдела, включая костную, хрящевую и жировую ткани. Недавние исследования с использованием генетического маркирования показали, что клетки нервного гребня дают начало дерме и ДП волосяного покрова головы. Однако неизвестно, принимают ли клетки нервного гребня участие в формировании дермальных конденсатов или мигрируют в дермальную папиллу вибрисс на более поздних этапах. Изучение механизмов, вовлеченных в формировании волосяного покрова головы, и роли клеток нервного гребня в этом процессе - актуальная задача. Подходом к её решению в применении к человеку является культура эмбриональных стволовых клеток (ЭСК). На данный момент возможно получение клеток нервного гребня из ЭСК. Исследование потенциала этих клеток к дифференцировке в клетки дермы и ДП могло бы стать альтернативным подходом к изучению процессов фолликулогенеза у человека. Более того, клетки ДП способны индуцировать формирование волосяных фолликулов при подкожных трансплантациях. Использование этих клеток является перспективным направлением в биомедицине. Применение клеток ДП может со временем решить проблемы восстановления волосяного покрова головы у людей с заболеваниями волосяного фолликула или потерей его функции.

Цель

Целью работы стало изучение роли клеток дермальной папиллы из нервного гребня в морфогенезе волосяного фолликула.

Задачи

1. Проследить судьбу клеток, производных нервного гребня, в морфогенезе вибрисс мыши.

2. Изучить потенциал к нейральной дифференцировке клеток ДП крысы.

3. Охарактеризовать дифференцировку ЭСК клеток человека в клетки нервного гребня и ДП.

4. Изучить способность клеток ДП, полученных из ЭСК, индуцировать рост волосяных фолликулов при подкожных пересадках in vivo.

5. Изучить роль сигнального пути BMP в формировании клеток ДП человека.

6. Изучить роль факторов роста в начальных этапах формирования волосяных фолликулов на модели морфогенеза кератиноцитов человека in vitro. расположенной в толще кожи (Рис.1). Утолщенное основание корня волоса называют волосяной луковицей. Корень волоса вместе с луковицей заключен в волосяной фолликул. Фолликул волоса (за исключением фолликула щетинистых волос) снабжен пучком гладких мышц, обеспечивающих пиломоторную реакцию. При сокращении мышечных волокон происходит выделение кожного сала, которое смазывает кожу и способствует сохранению Teroia(Poblet, Jimenez et al. 2004).

Волосяной фолликул образован внутренним и наружным корневыми влагалищами (Рис. 1). В волосяной луковице объединяются корневые влагалища, эту область называют матриксом волоса, здесь происходит постоянное размножение клеток, из которых формируется волос. В волосяную луковицу вдается соединительно-тканный сосочек, или дермальная папилла (ДП), снабженная кровеносными сосудами и нервными волокнами (Рис. 1). Волосяной фолликул окружен соединительно-тканной оболочкой - дермальной капсулой волоса. ДП и дермальная капсула связаны друг с другом, и их клетки имеют сходные свойства (Chiu, Chang et al. 1996; Jahoda and Reynolds 2001; McElwee, Kissling et al. 2003).

Заключение диссертации по теме «Клеточная биология, цитология, гистология», Гнедева, Ксения Юрьевна

Заключение

Волосяной фолликул - уникальный объект, позволяющий исследовать биологические процессы, являющиеся основой формирования многих органов. Его эпителиальный и мезенхимный компоненты служат источником стволовых клеток. В культуре, выделенные из ДП мезенхимные стволовые клетки человека способны индуцировать морфогенез кератиноцитов в коллагеновом геле, а при трансплантациях ДП мыши и крысы способны индуцировать de novo формирование волосяных фолликулов. В клинической практике применение клеток ДП -перспективное решением проблем потери волосяного покрова у людей с заболеваниями волосяного фолликула и потерей его функции. Также, клетки ДП обладают широким дифференцировочным потенциалом. Возможно их применение в тканевой инженерии для восстановления мезенхимных и нейральных тканей. Изучение факторов роста и сигнальных путей, принимающих участие в начальные этапы развития волосяных фолликулов, а также поиск методов получения клеток ДП в культуре с использованием ЭСК представляют как фундаментальный, так и прикладной интерес.

С использованием WntlCre/ZEG мышей мы проследили судьбу клеток нервного гребня и их производных в морфогенезе вибрисс мыши. Впервые показали, что клетки нервного гребня дают начало дерме лица мыши и могут быть найдены в дермальных конденсатах - предшественниках ДП с начала их формирования на 12-ти сутках эмбрионального развития.

При изучении нейрального дифференцировочного потенциала клеток ДП вибрисс крысы, мы показали, что они способны дифференцироваться в нейроны и глию периферической нервной системы. Потенциал к нейральной дифференцировке клеток ДП мыши и человека ранее был продемонстрирован. В совокупности эти данные подтверждают нейральное происхождении клеток ДП волосяного покрова головы, поскольку клетки периферической нервной системы - потомки клеток нервного гребня в развитии.

Практическое применение клеток ДП ограничено сложностью их выделения и потерей индукционных свойств в культуре. Разработанный нами протокол с использованием ЭСК-НГ человека позволяет получать большое количество клеток ДП человека, что решает проблему ограниченного доступа к нативным ДП. Более того, ЭСК-ДП способны индуцировать формирование волосяных фолликулов при пересадках бестимусным мышам, а значит, являются первым шагом в решении проблем облысения. Мы показали, что получение ДП клеток возможно при дифференцировке ИПСК, которые могут быть специфичны для пациента. Модель дифференцировки клеток нервного гребня в клетки ДП в культуре позволяет изучать сигнальные пути спецификации ДП. Такая возможность уникальна, поскольку доступ к нативным эмбриональным тканям человека весьма ограничен.

Совместное культивирование в составе эпителио-мезенхимного эквивалента клеток ДП волосяного фолликула и эпидермальных кератиноцитов позволяет моделировать процессы межклеточного взаимодействия при формировании и циклировании волосяных фолликулов. Моделирование процессов эпителиального морфогенеза в культуре является актуальным направлением современной клеточной биологии, которое пока слабо развито. Использование разработанной нами модели морфогенеза кератиноцитов человека позволило нам выявить ростовые факторы, положительно стимулирующие этот процесс.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Гнедева, Ксения Юрьевна, 2011 год

1. Васильев A.B., Волошин A.B., Воротеляк Е.А., Терских В.В. (1993). Миграция колоний эпидермальных кератиноцитов человека в культуре. Докл. РАН, 329, 2, 232-235.

2. Воротеляк Е.А., Шихвердиева А.Ш., Васильев A.B., Терских В.В. (2002). Фибробласты стимулируют эпителизацию коллагенового геля. Известия РАН, 4, 421-426.

3. Терских В.В., Васильев А.В. (1995). Эпидермальные кератиноциты человека и животных: проблемы культивирования и трансплантации. М.: Наука,. 103.

4. Терских В.В., Васильев А.В., Воротеляк Е.А. (2003). Структурно-функциональные единицы эпидермиса. Известия АН. Сер. Биол., 6, 645-649.

5. Терских В.В., Васильев А.В., Воротеляк Е.А. (2007). Ниши стволовых клеток. Известия АН Сер Биол 3, 261-272.

6. Bockman, D. E. and M. L. Kirby (1984). "Dependence of thymus development on derivatives of the neural crest." Science 223(4635): 498500.

7. Borghese, E. (1950). "The development in vitro of the submandibular and sublingual glands of Mus musculus." J Anat 84(3): 287-302.

8. Botchkarev, V. A. and J. Kishimoto (2003). "Molecular control of epithelial-mesenchymal interactions during hair follicle cycling." J Investig Dermatol Svmp Proc 8(1): 46-55.

9. Botchkarev, V. A. and R. Paus (2003). "Molecular biology of hair morphogenesis: development and cycling." J Exp Zool B Mol Dev Evol 298(1): 164-180.

10. Bronner-Fraser, M. (1986). "Analysis of the early stages of trunk neural crest migration in avian embryos using monoclonal antibody HNK-1." Dev Biol 115(1): 44-55.

11. Chambers, S. M., C. A. Fasano, et al. (2009). "Highly efficient neural conversion of human ES and iPS cells by dual inhibition of SMAD signaling." Nat Biotechnol 27(3): 275-280.

12. Chermnykh, E. S., E. A. Vorotelyak, et al. (2010). "Dermal papilla cells induce keratinocyte tubulogenesis in culture." Histochem Cell Biol 133(5): 567-576.

13. Chiu, H. C., C. H. Chang, et al. (1996). "Human hair follicle dermal papilla cell, dermal sheath cell and interstitial dermal fibroblast characteristics." J Formos Med Assoc 95(9): 667-674.

14. Cimadamore, F., K. Fishwick, et al. (2011). "Human ESC-derived neural crest model reveals a key role for SOX2 in sensory neurogenesis." Cell Stem Cell 8(5): 538-551.

15. Colas, J. F. and G. C. Schoenwolf (2001). "Towards a cellular and molecular understanding of neurulation." Dev Dvn 221(2): 117-145.

16. Curchoe, C. L., J. Maurer, et al. (2010). "Early acquisition of neural crest competence during hESCs neuralization." PLoS One 5(11): el3890.

17. Danielian, P. S., D. Muccino, et al. (1998). "Modification of gene activity in mouse embryos in utero by a tamoxifen-inducible form of Cre recombinase." Curr Biol 8(24): 1323-1326.

18. DasGupta, R. and E. Fuchs (1999). "Multiple roles for activated LEF/TCF transcription complexes during hair follicle development and differentiation." Development 126(20): 4557-4568.

19. Dhouailly, D. (1973). "Dermo-epidermal interactions between birds and mammals: differentiation of cutaneous appendages." J Embryo 1 Exp Morphol 30(3): 587-603.

20. Dugina, V., A. Alexandrova, et al. (1998). "Rat fibroblasts cultured from various organs exhibit differences in alpha-smooth muscle actin expression, cytoskeletal pattern, and adhesive structure organization." Exp Cell Res 238(2): 481-490.

21. Erickson, C. A., T. D. Duong, et al. (1992). "Descriptive and experimental analysis of the dispersion of neural crest cells along the dorsolateral path and their entry into ectoderm in the chick embryo." Dev Biol 151(1): 251-272.

22. Fernandes, K. J., N. R. Kobayashi, et al. (2006). "Analysis of the neurogenic potential of multipotent skin-derived precursors." Exp Neurol 201(1): 32-48.

23. Fernandes, K. J., I. A. McKenzie, et al. (2004). "A dermal niche for multipotent adult skin-derived precursor cells." Nat Cell Biol 6(11): 10821093.

24. Galbraith, C. G. and M. P. Sheetz (1998). "Forces on adhesive contacts affect cell function." Curr Opin Cell Biol 10(5): 566-571.

25. Graham, A., P. Francis-West, et al. (1994). "The signalling molecule BMP4 mediates apoptosis in the rhombencephalic neural crest." Nature 372(6507): 684-686.

26. Graham, A., I. Heyman, et al. (1993). "Even-numbered rhombomeres control the apoptotic elimination of neural crest cells from odd-numbered rhombomeres in the chick hindbrain." Development 119(1): 233-245.

27. Greco, V., T. Chen, et al. (2009). "A two-step mechanism for stem cell activation during hair regeneration." Cell Stem Cell 4(2): 155-169.

28. Guenther, M. G., G. M. Frampton, et al. (2010). "Chromatin structure and gene expression programs of human embryonic and induced pluripotent stem cells." Cell Stem Cell 7(2): 249-257.

29. Hardy, M. H. (1992). "The secret life of the hair follicle." Trends Genet 8(2): 55-61.

30. Helbling, P. M., C. T. Tran, et al. (1998). "Requirement for EphA receptor signaling in the segregation of Xenopus third and fourth arch neural crest cells." MechDev 78(1-2): 63-79.

31. Hood, L. C. and T. H. Rosenquist (1992). "Coronary artery development in the chick: origin and deployment of smooth muscle cells, and the effects of neural crest ablation." Anat Rec 234(2): 291-300.

32. Hoogduijn, M. J., E. Gorjup, et al. (2006). "Comparative characterization of hair follicle dermal stem cells and bone marrow mesenchymal stem cells." Stem Cells Dev 15(1): 49-60.

33. Home, K. A., C. A. Jahoda, et al. (1986). "Whisker growth induced by implantation of cultured vibrissa dermal papilla cells in the adult rat." J Embryo 1 Exp Morphol 97: 111-124.

34. Huelsken, J., R. Vogel, et al. (2001). "beta-Catenin controls hair follicle morphogenesis and stem cell differentiation in the skin." Cell 105(4): 533545.

35. Ito, M., Y. Liu, et al. (2005). "Stem cells in the hair follicle bulge contribute to wound repair but not to homeostasis of the epidermis." Nat Med 11(12): 1351-1354.

36. Jahoda, C. A. (1992). "Induction of follicle formation and hair growth by vibrissa dermal papillae implanted into rat ear wounds: vibrissa-type fibres are specified." Development 115(4): 1103-1109.

37. Jahoda, C. A., K. A. Home, et al. (1984). "Induction of hair growth by implantation of cultured dermal papilla cells." Nature 311(5986): 560-562.

38. Jahoda, C. A., R. F. Oliver, et al. (2001). "Trans-species hair growth induction by human hair follicle dermal papillae." Exp Dermatol 10(4): 229-237.

39. Jahoda, C. A. and A. J. Reynolds (2001). "Hair follicle dermal sheath cells: unsung participants in wound healing." Lancet 358(9291): 1445-1448.

40. Jamora, C., R. DasGupta, et al. (2003). "Links between signal transduction, transcription and adhesion in epithelial bud development." Nature 422(6929): 317-322.

41. Jandial, R. and M. L. Levy (2011). "Cellular alchemy: induced pluripotent stem cells retain epigenetic memory." World Neurosurg 75(1): 5-6.

42. Jiang, T. X., H. S. Jung, et al. (1999). "Self-organization of periodic patterns by dissociated feather mesenchymal cells and the regulation of size, number and spacing of primordia." Development 126(22): 4997-5009.

43. Jinno, H., O. Morozova, et al. (2010). "Convergent genesis of an adult neural crest-like dermal stem cell from distinct developmental origins." Stem Cells 28(11): 2027-2040.

44. Johnston, M. C. (1966). "A radioautographic study of the migration and fate of cranial neural crest cells in the chick embryo." Anat Ree 156(2): 143-155.

45. Kaufman, D. S., E. T. Hanson, et al. (2001). "Hematopoietic colony-forming cells derived from human embryonic stem cells." Proc Natl Acad Sei US A 98(19): 10716-10721.

46. Kehat, I., A. Gepstein, et al. (2002). "High-resolution electrophysiological assessment of human embryonic stem cell-derived cardiomyocytes: a novel in vitro model for the study of conduction." Circ Res 91(8): 659-661.

47. Kim, K., A. Doi, et al. (2010). "Epigenetic memory in induced pluripotent stem cells." Nature 467(7313): 285-290.

48. Kirby, M. L. (1989). "Plasticity and predetermination of mesencephalic and trunk neural crest transplanted into the region of the cardiac neural crest." Dev Biol 134(2): 402-412.

49. Kirby, M. L. and K. L. Waldo (1990). "Role of neural crest in congenital heart disease." Circulation 82(2): 332-340.

50. Kishimoto, J., R. E. Burgeson, et al. (2000). "Wnt signaling maintains the hair-inducing activity of the dermal papilla." Genes Dev 14(10): 11811185.

51. Kodaira, K., M. Imada, et al. (2006). "Purification and identification of a BMP-like factor from bovine serum." Biochem Biophvs Res Commun 345(3): 1224-1231.

52. Kuratani, S. C. and M. L. Kirby (1992). "Migration and distribution of circumpharyngeal crest cells in the chick embryo. Formation of thecircumpharyngeal ridge and E/C8+ crest cells in the vertebrate head region." Anat Rec 234(2): 263-280.

53. Lako, M., L. Armstrong, et al. (2002). "Hair follicle dermal cells repopulate the mouse haematopoietic system." J Cell Sci 115(Pt 20): 3967-3974.

54. Lavoie, J. F., J. A. Biernaskie, et al. (2009). "Skin-derived precursors differentiate into skeletogenic cell types and contribute to bone repair." Stem Cells Dev 18(6): 893-906.

55. Le Lievre, C. S. and N. M. Le Douarin (1975). "Mesenchymal derivatives of the neural crest: analysis of chimaeric quail and chick embryos." J Embryo 1 Exp Morphol 34(1): 125-154.

56. Lee, G., H. Kim, et al. (2007). "Isolation and directed differentiation of neural crest stem cells derived from human embryonic stem cells." Nat Biotechnol 25(12): 1468-1475.

57. Lee, J., A. Ishihara, et al. (1993). "How do cells move along surfaces?" Trends Cell Biol 3(1 IV 366-370.

58. Lichti, U., W. C. Weinberg, et al. (1993). "In vivo regulation of murine hair growth: insights from grafting defined cell populations onto nude mice." J Invest Dermatol 101(1 Suppl): 124S-129S.

59. Liu, G. H., B. Z. Barkho, et al. (2011). "Recapitulation of premature ageing with iPSCs from Hutchinson-Gilford progeria syndrome." Nature.

60. Loring, J. F. and C. A. Erickson (1987). "Neural crest cell migratory pathways in the trunk of the chick embryo." Dev Biol 121(1): 220-236.

61. Lumsden, A. and S. Guthrie (1991). "Alternating patterns of cell surface properties and neural crest cell migration during segmentation of the chick hindbrain." Development Suppl 2: 9-15.

62. Mayer, T. C. (1973). "The migratory pathway of neural crest cells into the skin of mouse embryos." Dev Biol 34(1): 39-46.

63. McElwee, K. J., S. Kissling, et al. (2003). "Cultured peribulbar dermal sheath cells can induce hair follicle development and contribute to the dermal sheath and dermal papilla." J Invest Dermatol 121(6): 1267-1275.

64. McKenzie, I. A., J. Biernaskie, et al. (2006). "Skin-derived precursors generate myelinating Schwann cells for the injured and dysmyelinated nervous system." J Neurosci 26(24): 6651-6660.

65. Mecklenburg, L., M. Nakamura, et al. (2001). "The nude mouse skin phenotype: the role of Foxnl in hair follicle development and cycling." Exp Mol Pathol 71(2Y. 171-178.

66. Melnick, M. and T. Jaskoll (2000). "Mouse submandibular gland morphogenesis: a paradigm for embryonic signal processing." Crit Rev Oral Biol Med 11(2): 199-215.

67. Messenger, A. G. (1985). "Hair follicle tissue culture." Br J Dermatol 113(6): 639-640.

68. Messenger, A. G., H. J. Senior, et al. (1986). "The in vitro properties of dermal papilla cell lines established from human hair follicles." Br J Dermatol 114(4): 425-430.

69. Metzger, R. J. and M. A. Krasnow (1999). "Genetic control of branching morphogenesis." Science 284(5420): 1635-1639.

70. Mishina, Y., A. Suzuki, et al. (1995). "Bmpr encodes a type I bone morphogenetic protein receptor that is essential for gastrulation during mouse embryogenesis." Genes Dev 9(24): 3027-3037.

71. Mizuseki, K., T. Sakamoto, et al. (2003). "Generation of neural crest-derived peripheral neurons and floor plate cells from mouse and primate embryonic stem cells." Proc Natl Acad Sci U S A 100(10): 5828-5833.

72. Montesano, R., K. Matsumoto, et al. (1991). "Identification of a fibroblast-derived epithelial morphogen as hepatocyte growth factor." Cell 67(5): 901908.

73. Morris, R. J. and C. S. Potten (1999). "Highly persistent label-retaining cells in the hair follicles of mice and their fate following induction of anagen." J Invest Dermatol 112(4): 470-475.

74. Mould, A. P., J. A. Askari, et al. (1994). "Integrin alpha 4 beta 1-mediated melanoma cell adhesion and migration on vascular cell adhesion molecule1 (VCAM-1) and the alternatively spliced IIICS region of fibronectin." J Biol Chem 269(44): 27224-27230.

75. Murphy, G. and J. Gavrilovic (1999). "Proteolysis and cell migration: creating a path?" Curr Opin Cell Biol 11(5): 614-621.

76. Nagoshi, N., S. Shibata, et al. (2008). "Ontogeny and multipotency of neural crest-derived stem cells in mouse bone marrow, dorsal root ganglia, and whisker pad." Cell Stem Cell 2(4): 392-403.

77. Nanba, D., Y. Hieda, et al. (2000). "Remodeling of desmosomal and hemidesmosomal adhesion systems during early morphogenesis of mouse pelage hair follicles." J Invest Dermatol 114(1): 171-177.

78. Noden, D. M. (1983). "The role of the neural crest in patterning of avian cranial skeletal, connective, and muscle tissues." Dev Biol 96(1): 144-165.

79. Ohyama, M., Y. Zheng, et al. (2010). "The mesenchymal component of hair follicle neogenesis: background, methods and molecular characterization." Exp Dermatol 19(2): 89-99.

80. Oliver, R. F. (1966). "Whisker growth after removal of the dermal papilla and lengths of follicle in the hooded rat." J Embryol Exp Morphol 15(3): 331-347.

81. Oliver, R. F. (1967). "The experimental induction of whisker growth in the hooded rat by implantation of dermal papillae." J Embryol Exp Morphol 18(1): 43-51.

82. Paus, R. and G. Cotsarelis (1999). "The biology of hair follicles." N Engl J Med 341(7): 491-497.

83. Paus, R., S. Muller-Rover, et al. (1999). "A comprehensive guide for the recognition and classification of distinct stages of hair follicle morphogenesis." J Invest Dermatol 113(4): 523-532.

84. Pittenger, M. F., A. M. Mackay, et al. (1999). "Multilineage potential of adult human mesenchymal stem cells." Science 284(5411): 143-147.

85. Poblet, E., F. Jimenez, et al. (2004). "The contribution of the arrector pili muscle and sebaceous glands to the follicular unit structure." J Am Acad Dermatol 51(2): 217-222.

86. Pomp, O., I. Brokhman, et al. (2005). "Generation of peripheral sensory and sympathetic neurons and neural crest cells from human embryonic stem cells." Stem Cells 23(7): 923-930.

87. Rawles, M. E. (1948). "Origin of melanophores and their role in development of color patterns in vertebrates." Physiol Rev 28(4): 383-408.

88. Rendl, M., L. Lewis, et al. (2005). "Molecular dissection of mesenchymal-epithelial interactions in the hair follicle." PLoS Biol 3(11): e331.

89. Rendl, M., L. Polak, et al. (2008). "BMP signaling in dermal papilla cells is required for their hair follicle-inductive properties." Genes Dev 22(4): 543-557.

90. Reubinoff, B. E., M. F. Pera, et al. (2000). "Embryonic stem cell lines from human blastocysts: somatic differentiation in vitro." Nat Biotechnol 18(4): 399-404.

91. Reynolds, A. J. and C. A. Jahoda (1991). "Hair follicle stem cells? A distinct germinative epidermal cell population is activated in vitro by the presence of hair dermal papilla cells." J Cell Sci 99 ( Pt 2): 373-385.

92. Rickmann, M., J. W. Fawcett, et al. (1985). "The migration of neural crest cells and the growth of motor axons through the rostral half of the chick somite." J Embryol Exp Morphol 90: 437-455.

93. Rinn, J. L., J. K. Wang, et al. (2008). "A dermal HOX transcriptional program regulates site-specific epidermal fate." Genes Dev 22(3): 303-307.

94. Ronfard, V., J. M. Rives, et al. (2000). "Long-term regeneration of human epidermis on third degree burns transplanted with autologous cultured epithelium grown on a fibrin matrix." Transplantation 70(11): 1588-1598.

95. Rufaut, N. W., N. T. Goldthorpe, et al. (2006). "Myogenic differentiation of dermal papilla cells from bovine skin." J Cell Physiol 209(3): 959-966.

96. Sariola, H. and K. Sainio (1997). "The tip-top branching ureter." Curr Opin Cell Biol 9(6): 877-884.

97. Sauer, B. (1987). "Functional expression of the cre-lox site-specific recombination system in the yeast Saccharomyces cerevisiae." Mol Cell Biol 7(6): 2087-2096.

98. Sauer, B. and N. Henderson (1988). "Site-specific DNA recombination in mammalian cells by the Cre recombinase of bacteriophage PI." Proc Natl Acad Sci U S A 85(14): 5166-5170.

99. Sauka-Spengler, T. and M. Bronner-Fraser (2006). "Development and evolution of the migratory neural crest: a gene regulatory perspective." Curr Opin Genet Dev 16(4): 360-366.

100. Schneider, M. R., R. Schmidt-Ullrich, et al. (2009). "The hair follicle as a dynamic miniorgan." Curr Biol 19(3): R132-142.

101. Schulz, T. C., G. M. Palmarini, et al. (2003). "Directed neuronal differentiation of human embryonic stem cells." BMC Neurosci 4: 27.

102. Sechrist, J., G. N. Serbedzija, et al. (1993). "Segmental migration of the hindbrain neural crest does not arise from its segmental generation." Development 118(3): 691-703.

103. Sieber-Blum, M. and M. Grim (2004). "The adult hair follicle: cradle for pluripotent neural crest stem cells." Birth Defects Res C Embryo Today 72(2): 162-172.

104. Smith, A., V. Robinson, et al. (1997). "The EphA4 and EphBl receptor tyrosine kinases and ephrin-B2 ligand regulate targeted migration of branchial neural crest cells." Curr Biol 7(8): 561-570.

105. Smith, A. G. (2001). "Embryo-derived stem cells: of mice and men." AnnuRev Cell Dev Biol 17: 435-462.

106. Song, H. K. and R. H. Sawyer (1996). "Dorsal dermis of the scaleless (sc/sc) embryo directs normal feather pattern formation until day 8 of development." DevDyn 205(1): 82-91.

107. St-Jacques, B., H. R. Dassule, et al. (1998). "Sonic hedgehog signaling is essential for hair development." Curr Biol 8(19): 1058-1068.

108. Stojkovic, M., M. Lako, et al. (2004). "Derivation, growth and applications of human embryonic stem cells." Reproduction 128(3): 259267.

109. Stossel, T. P. (1993). "On the crawling of animal cells." Science 260(5111): 1086-1094.

110. Takahashi, K., K. Tanabe, et al. (2007). "Induction of pluripotent stem cells from adult human fibroblasts by defined factors." Cell 131(5): 861-872.

111. Takahashi, K. and S. Yamanaka (2006). "Induction of pluripotent stem cells from mouse embryonic and adult fibroblast cultures by defined factors." Cell 126(4): 663-676.

112. Tan, S. S. and G. Morriss-Kay (1985). "The development and distribution of the cranial neural crest in the rat embryo." Cell Tissue Res 240(2): 403-416.

113. Taylor, L. A., M. J. Harris, et al. (2000). "Whiskers amiss, a new vibrissae and hair mutation near the Krtl cluster on mouse chromosome 11." Mamm Genome 11(4): 255-259.

114. Teillet, M. A., C. Kalcheim, et al. (1987). "Formation of the dorsal root ganglia in the avian embryo: segmental origin and migratory behavior of neural crest progenitor cells." Dev Biol 120(2): 329-347.

115. Thiery, J. P. and B. Boyer (1992). "The junction between cytokines and cell adhesion." Curr Opin Cell Biol 4(5): 782-792.

116. Thomson, J. A., J. Itskovitz-Eldor, et al. (1998). "Embryonic stem cell lines derived from human blastocysts." Science 282(5391): 1145-1147.

117. Thorogood, P. (1989). "The Neural Crest. Including a Facsimile Reprint of The Neural Crest by Sven Horstadius. Brian K. Hall. Oxford University Press, New York, 1988. viii, 303 pp., illus. $60." Science 246(4936): 1503.

118. Toma, J. G., M. Akhavan, et al. (2001). "Isolation of multipotent adult stem cells from the dermis of mammalian skin." Nat Cell Biol 3(9): 778-784.

119. Weinberg, W. C., L. V. Goodman, et al. (1993). "Reconstitution of hair follicle development in vivo: determination of follicle formation, hair growth, and hair quality by dermal cells." J Invest Dermatol 100(3): 229236.

120. Wessells, N. K. and K. D. Roessner (1965). "Nonproliferation in dermal condensations of mouse vibrissae and pelage hairs." Dev Biol 12(3): 419-433.

121. Weston, J. A. (1963). "A radioautographic analysis of the migration and localization of trunk neural crest cells in the chick." Dev Biol 6: 279310.

122. Winnier, G., M. Blessing, et al. (1995). "Bone morphogenetic protein-4 is required for mesoderm formation and patterning in the mouse." GenesDev9(17): 2105-2116.

123. Wolff, J. R. and T. Bar (1972). '"Seamless' endothelia in brain capillaries during development of the rat's cerebral cortex." Brain Res 41(1): 17-24.

124. Wong, C. E., C. Paratore, et al. (2006). "Neural crest-derived cells with stem cell features can be traced back to multiple lineages in the adult skin." J Cell Biol 175(6): 1005-1015.

125. Wu, J. J., R. Q. Liu, et al. (2005). "Enzyme digestion to isolate and culture human scalp dermal papilla cells: a more efficient method." Arch Dermatol Res 297(2): 60-67.

126. Xu, C., M. S. Inokuma, et al. (2001). "Feeder-free growth of undifferentiated human embryonic stem cells." Nat Biotechnol 19(10): 971974.

127. Yang, C. C. and G. Cotsarelis (2010). "Review of hair follicle dermal cells." J Dermatol Sci 57(1): 2-11.

128. Yu, P. B., C. C. Hong, et al. (2008). "Dorsomorphin inhibits BMP signals required for embryogenesis and iron metabolism." Nat Chem Biol 4(1): 33-41.

129. Zhang, P., J. Li, et al. (2008). "Short-term BMP-4 treatment initiates mesoderm induction in human embryonic stem cells." Blood 111(4): 19331941.

130. Zuk, P. A., M. Zhu, et al. (2001). "Multilineage cells from human adipose tissue: implications for cell-based therapies." Tissue Eng 7(2): 2112281. Благодарности