Фенотип и дифференцировка стволовых клеток амниотической жидкости человека in vitro тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.03.05, кандидат биологических наук Давыдова, Дарья Александровна

• Давыдова, Дарья Александровна
• кандидат биологических наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Давыдова, Дарья Александровна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Амниотическая жидкость: происхождение, функции, состав.

1.2. Общая характеристика клеток амниотической жидкости.

1.3. Стволовые клетки из амниотической жидкости.

1.4. Потенции стволовых клеток амниотической жидкости к дифференцировке in vitro.

1.4.1. Остеогенная дифференцировка.

1.4.2. Адипогенная дифференцировка.

1.4.3. Хондрогенная дифференцировка.

1.4.4. Миогенная дифференцировка.

1.4.5. Дифференцировка в кардиомиоциты.

1.4.6. Дифференцировка в эндотелиальные клетки.

1.4.7. Кроветворные клетки.

1.4.8. Дифференцировка в гепатоциты.

1.4.9. Дифференцировка в р-клетки поджелудочной железы.

1.4.10. Нейральная дифференцировка.

1.5. Трансплантация стволовых клеток амниотической жидкости без предварительной дифференцировки in vitro.

1.5.1. Мечение клеток перед трансплантацией.

1.5.2. Интеграция клеток в ткани почки.

1.5.3. Интеграция и дифференцировка в клетки эпителия легкого.

1.5.4. Интеграция СК АЖ в ткани кишечника.

1.5.5. Интеграция СК АЖ в ткани печени.

1.5.6. Трансплантация СК АЖ при инфаркте миокарда.

1.5.7. Трансплантация СК АЖ и мионекроз.

1.5.8. Трансплантация СК АЖ при повреждении периферических нервов.

I.6. Получение индуцированных пторипотентных клеток из стволовых клеток амниотической жидкости.

II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

II.1. Культивирование клеток,из амниотической жидкости.

11.2. Сканирующая-электронная микроскопия.

11.3. Проточная цитофлуориметрия.

11.4. Иммуноцитохимия.

11.5. ОТ-ПЦР.

11.6. Клонирование стволовых клеток амниотической жидкости.

II;7. Индукция дифференцировок стволовых клеток амниотической жидкости.

11.7.1. Индукция остеогенеза.

11.7.2. Индукция адипогенеза.

11.7.3. Индукция миогенеза.47

11.7.4. Дифференцировка в гепатоциты.

И.7.5. Дифференцировка в эпидермальные клетки.

11.8. Культивирование стволовых клеток амниотической жидкости в трехмерном коллагеновом матриксе.

II.8.1. Выделение коллагена изхвостов крыс.

II.8.2 Приготовление коллагенового геля.

II.8.3. Включение BrdU.

II.8.4: Электронно-микроскопическое исследование СК АЖ, культивированных в коллагеновом геле.

11.9. Индукция экспрессии в стволовых клетках амниотической жидкости молекул главного комплекса гистосовместимости интерфероном-у.

II. 10. Трансплантация стволовых клеток амниотической жидкости иммунодефицитным животным.

III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

III. 1. Культивирование клеток из амниотической жидкости.

111.2. Сканирующая электронная микроскопия.

111.3. Характеристика фенотипа по экспрессии молекулярных маркеров.

III.3.1. Иммуноцитохимический анализ.

Ш.3.2. Проточная цитофлуориметрия.

Ш.З.З. Двойное иммуноцитохимическое окрашивание.

Ш.3.4. ОТ-ПЦР.

Ш.4. Дифференцировка стволовых клеток амниотической жидкости.

111.4.1. Остеогенная дифференцировка.

Ш.4.2. Адипогенная дифференцировка.

П1.4.3. Эпидермальная дифференцировка.

III. 5. Трансплантация стволовых клеток амниотической жидкости иммунодефицитным животным.

Ш.6. Клонирование стволовых клеток амниотической жидкости.

Ш.6.1. Морфологическая характеристика клонированных клеток.

Ш.6.2. Иммуноцитохимический анализ клонированных клеток.

Ш.6.3. Дифференцировка клонированных клеток.

Ш.6.3.1 Остеогенная дифференцировка.

III.6.3.2. Миогенез.

Ш.6.3.3. Дифференцировка в гепатоциты.

Ш.7. Стволовые клетки амниотической жидкости в трехмерном коллагеновом матриксе.!.

Ш.7.1. Культивирование СК АЖ в коллагеновом геле.

Ш.7.2. Электронно-микроскопическое исследование СК АЖ, культивированных в геле.

Ш.7.3. Иммуноцитохимический анализ СК АЖ, культивированных в геле.

III.8. Актиновые микрофиламенты в стволовых клетках амниотической жидкости.

Ш.9. Индукция интерфероном-у.

IV. ОБСУЖДЕНИЕ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фенотип и дифференцировка стволовых клеток амниотической жидкости человека in vitro»

Стволовые клетки (СК) привлекают внимание биологов многих специальностей. Это - связано с тем, что всестороннее исследование их биологии представляет большой интерес не; только, для решения таких фундаментальных проблем биологии; развития как детерминация? и дифференцировка, но и в связи с перспективами применения СК в регенеративной медицине.

В иерархии СК, построенной на основе способности дифференцироваться; в разные типы, клеток: и уровня пролиферативной активности, первое место занимают эмбриональные стволовые клетки (ЭСК), выделяемые: из ; внутренней: клеточной, массы бластоцисты. ЭСК являются; шпорипотентными, т.е. способны дифференцироваться во все типы клеток взрослого организма; включая половые. В условиях in vitro они способны к неограниченно длительной? пролиферации; сохраняют недифференцированный статус,, клоногенность и длину теломерных фрагментов} (Thomson et al., 1998; Huang et al:,. 2007): Эти< клетки: являются удобным модельным объектом, однако исследование ЭСК человека, сопряжено с рядом проблем; в том числе этических, связанных- с использованием; эмбрионов человека.

СК выделены из многих тканей* плода (фетальные СК): печени, костного мозга, селезенки, крови;, почки, и легкого- (Sessarego et al., 2008; Gucciardb et al., 2009; Pozzobon et al., 2010). Они; обладают достаточно высокой способностью к пролиферации и пластичностью. Однако исследование- фетальных СК человека встречает те же препятствия, что; и изучение ЭСК.

Фетальные СК обнаруженные в> экстраэмбриональных тканях: плаценте (Yen e/ al., 2005), амниотической мембране (Toda eí а/., 2007), амниотической жидкости (АЖ) (De Coppi et al., 2007a), пуповине (Romanov et al., 2003) и пуповинной крови (Marcus, Woodbury, 2008). Эти клетки пролиферируют активнее, чем CK тканей взрослого организма и способны дифференцироваться в производные разных зародышевых листков. Способ получения? этих клеток исключает все возможные этические проблемы: клетки; АЖ получают в ходе процедуры амниоцентеза (второй триместр беременности); либо во время кесарева сечения (третий триместр). Амниотическая мембрана, плацента, пуповина и пуповинная кровь становятся доступны сразу после родов.

CK были выделены также из многих дифференцированных тканей: взрослого организма, в том числе из костного- мозга (Bianco et al., 2001; Mosna et al., 2010), скелетных мышц (Williams et al., 1999), жировой ткани (Киселева, Васильев, 2009); периферической крови (Zvaiflëretral., 2000); синовиальной" мембраны (De Bari- et al., 2001), надкостницы. (Ringe et al.,

2008), пульпы зуба (Ballini et al., 2007); Эти клетки обладают более ограниченной способностью к пролиферации и дифференцировке, чем ЭСК и фетальные CK. Кроме того, в организме взрослого человека CK мало (в костном мозге.они составляют всего 0,001%-0,01% от общего числа клеток) и их число уменьшается; с возрастом (Sessarego et al., 2008). Br некоторых случаях (например; при выделении клеток из костного мозга) процедура получения.материала сложна и травматична.

Несколько лет назад была разработана технология, получения плюрипотентных клеток из дифференцированных клеток взрослого организма путем генетической модификации (Takahashi, Yamanaka, 2006; Shi

2009); Такие клетки получили название клеток с индуцированной плюрипотентностью (iPS cells); Они экспрессируют спектр маркеров ЭСК и дифференцируются in vitro в производные трех зародышевых листков. Получение iPS клеток не вызывает этических споров, т.к. при; этом не происходит уничтожение эмбрионов, человека, однако, возможность их использования в клеточных технологиях, по всей видимости, ограничивается туморогенностью.

Таким* образом, клетки из экстраэмбриональных тканей являются одними из наиболее перспективных кандидатов для. использования в клеточной терапии. Тем более что в таком случае появляется возможность использования аутологичных клеток. Однако в настоящее время именно1 эти клетки, пожалуй, наименее изучены из всех типов СК. В особенности это касается клеток АЖ. Связано это с тем, что в АЖ присутствуют самые разные клетки: от терминально дифференцированных до СК. Кроме того, на протяжении беременности состав АЖ (ее клеточный компонент) может меняться. В основном в настоящее время данные получены на клетках, выделенных из образцов второго триместра беременности (16-20 нед), поскольку в это время проводится процедура пренатальной диагностики (амниоцентез) и получение АЖ является, безопасным, для матери и плода (De Coppi et al., 2007a). Данных по клеткам третьего триместра пока мало, но достоверно известно, что СК присутствуют в АЖ и на поздних сроках (You et al., 2008). Показано, что по своим свойствам такие клетки схожи с, СК АЖ второго триместра беременности. Тем не менее, природа, и дифференцировочный потенциал СК АЖ плюрипотентность/мультипотентность) в настоящее - время точно- не установлены.

Целью исследования было изучение фенотипических свойств и дифференцировки стволовых клеток амниотической жидкости человека в условиях in vitro.

Задачи исследования: Получить культуры стволовых клеток из амниотической жидкости человека второго триместра беременности:

Охарактеризовать профиль экспрессии маркеров мезенхимных, нейральных и эпителиальных клеток, а также маркеров плюрипотентности в выделенных клетках.

Провести клональный анализ и определить степень гетерогенности популяции клеток из амниотической жидкости.

Оценить потенции стволовых клеток амниотической жидкости к дифференцировке в разные типы специализированных клеток. Изучить поведение стволовых клеток амниотической жидкости в трехмерном матриксе и оценить их морфогенетический потенциал.

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Биология развития, эмбриология», Давыдова, Дарья Александровна

ВЫВОДЫ

1. Получены культуры клеток из амниотической жидкости человека второго триместра беременности. Выделенные клетки соответствуют критериям стволовых: способны к самоподдержанию, экспрессируют маркеры СК, дифференцируются в разные типы клеток.

2. В условиях in vitro стволовые клетки амниотической жидкости человека экспрессируют маркеры мезенхимного, нейрального и эпителиального типов дифференцировки, а также маркеры плюрипотентности. В культуре 4 доминируют клетки (от 60,6% до 100%), одновременно экспрессирующие маркеры мезенхимной и эпителиальной дифференцировки.

3. Клонированные клетки сохраняют способность к коэкспрессии двух типов маркеров — мезенхимных и эпителиальных. Актиновые микрофиламенты формируют в цитоплазме структуры, характерные как для мезенхимных, так и для эпителиальных клеток. Стволовые клетки амниотической жидкости обладают промежуточным эпителио-мезенхимным фенотипом.

4. Клонированные клетки способны дифференцироваться в остеогенном, миогенном и гепатоцитарном направлениях.

5. Стволовые клетки амниотической жидкости обладают морфогенетическими потенциями, ' которые проявляются при культивировании в трехмерном коллагеновом матриксе. Клетки пролиферируют в геле и формируют в нем многоклеточные цисты и тубулоподобные структуры.

6. В культуре стволовые клетки амниотической жидкости контактируют с помощью особых межклеточных соединений - нанотрубочек. Обнаруженные в них везикулярные расширения могут быть признаком межклеточного транспорта.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Культивирование клеток АЖ в настоящее время широко используется как для пренатальной диагностики различных генетических заболеваний, так и для фундаментальных исследований (Siddiqui, Atala, 2004; Баранов, Кузнецова, 2007). Было показано, что в АЖ присутствуют СК, которые экспрессируют многие маркеры мезенхимных клеток, обладают адгезией к пластику и способны дифференцироваться в разных направлениях, включая остеогенное, адипогенное и хондрогенное. В связи с этим многие исследователи относят СК АЖ к МСК. Однако происхождение этих клеток точно неизвестно, а их - дифференцировочный статус (плюрипотентность/мультипотентность) в настоящее время обсуждается. Целью нашей работы было изучение фенотипических свойств и дифференцировки СК АЖ человека.

Проведенное нами исследование показало, что СК АЖ по многим характеристикам действительно сходны с МСК, однако одновременно с этим и принципиально отличаются от них. Кроме мезенхимных эти клетки экспрессируют нейральные маркеры, что не противоречит их классификации как МСК. Однако в СК АЖ выявляются также маркеры эпителиальных ч клеток, что не характерно для МСК, выделенных из дифференцированных тканей взрослого организма. Причем по • данным проточной г цитофлуориметрии и двойного имуноцитохимического окрашивания коэкспрессия двух типов маркеров наблюдается не в единичных клетках, а в значительной части популяции (вплоть до 100% клеток). Клональный анализ подтвердил эти данные: в потомках одной клетки выявлены маркеры разных типов дифференцировки. Клонированные СК АЖ' способны дифференцироваться в производные, по меньшей мере, двух зародышевых листков - мезодермы и энтодермы.

По результатам ОТ-ПЦР анализа в СК АЖ обнаружены не только маркеры мезенхимных (77/7-7), нейральных (TUBB3, NESTIN, NS, РАХб) и эпителиальных клеток (KRT19, Р63), но и некоторые из маркеров плюрипотентности (ОСТ4, NANOG, REX1). При этом в отличие от ЭСК, СК АЖ не формируют тератомы при трансплантации in vivo.

Мы впервые получили данные о морфогенетических потенциях СК АЖ, проявляющихся при культивировании в трехмерном коллагеновом матриксе. Клетки сохраняют в геле пролиферативную активность и способны формировать многоклеточные цисто- и тубулоподобные структуры — это свойственно эпителиальным клеткам. Кроме того между СК АЖ выявляются типичные для эпителиев адгезивные соединения. При этом в трехмерном матриксе сохраняется экспрессия маркеров мезенхимных клеток и происходит значительная контракция (сокращение диаметра) коллагенового геля.

Мы также провели исследование особенностей цитоскелета СК АЖ и выявили в них как характерные для мезехимных клеток стресс-фибриллы актина, так и типичный для эпителиальных клеток кольцевой пучок микрофиламентов под плазматической мембраной. Впервые было показано, что СК АЖ в культуре соединяются нанотрубочками, которые обеспечивают тесную взаимосвязь клеток в условиях in vitro.

При проведении клонального анализа мы наблюдали интересное явление изменения морфологических характеристик СК АЖ. Клетки с многочисленными отростками (мезенхимной морфологии) в ходе культивирования становились эпителиоподобными, что сопровождалось резким снижением их пролиферативной активности. В течение нескольких суток они пребывали в таком состоянии, после чего вновь меняли свою морфологию и начинали активно делиться. Таким образом, наблюдаемый нами процесс был обратимым. При этом клонированные клетки разной морфологии экспрессировали маркеры как мезенхимного, так и эпителиального типов дифференцировки. Предположительно СК АЖ могут находиться в состоянии ЭМП, который активно протекает в эмбриогенезе.

Полученные нами результаты в целом противоречат существующему мнению о том, что СК АЖ являются МСК. Эти клетки проявляют многие свойства мезенхимных клеток, в том числе экспрессируют специфические маркеры и способны дифференцироваться в соответствующих направлениях. Однако СК АЖ демонстрируют и свойства эпителиальных клеток. В них выявляются маркеры эпителиального типа дифференцировки, адгезивные соединения, они проявляют морфогенетические потенции эпителиальных клеток в 3D условиях. Кроме того, мы обнаружили, что в условиях культуры СК АЖ способны изменять свою морфологию. Таким образом, выделенные нами клетки обладают особым переходным эпителио-мезенхимным фенотипом и не могут быть отнесены к одному из типов тканей: По всей видимости, эти клетки возникают на самых ранних этапах эмбриогенеза, могут сохраняться в АЖ и в условиях культуры проявлять свою двойственную природу. В свете полученных данных интересным представляется изучение возможной физиологической роли этих клеток, например, в поддержании иммунотолерантности и обеспечении нормального течения беременности.

Клетки, способные к длительной пролиферации in vitro и обладающие широкими дифференцировочными потенциями, являются перспективными для исследований в области клеточных технологий. Высокая эффективность трансфекции свидетельствует о возможности использования СК АЖ для генной терапии. Получение клеток в середине беременности открывает перспективы лечения некоторых заболеваний in utero или сразу после рождения, что предотвращает развитие вторичных повреждений. Таким образом, исследования СК, выделенных из АЖ, важны, не только для решения фундаментальных вопросов биологии развития, таких как детерминация и дифференцировка, они имеют и прикладное значение.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Давыдова, Дарья Александровна, 2012 год

1. Анфиногенов В.А., Мымрина H.A., Терских В.В. Взаимодействие эпидермальных кератиноцитов и фибробластов в процессе формирования живого эквивалента кожи // Цитология. 1992. Т. 34. № 11/12. С. 60-65.

2. Баранов B.C., Кузнецова Т.В. Цитогенетика эмбрионального развития человека. С.-Петербург: H.-JL, 2007. 639 с.

3. Васильев Ю.М. Клетка как чудо архитектуры. Ч. 5: Клетка перестраивает архитектуру // Соросовский образовательный журнал. 2001. Т. 7. № 11. С.2-6.

4. Васильев Ю.М. Перестройки молекулярной морфологии эпителиальных и соединительно-тканных клеток в нормальных морфогенезах и при канцерогенезе // Биохимия. 2008. Т. 73. № 5. С. 656-660.

5. Воротеляк Е.А., Чермных Э.С., Васильев A.B., Терских В.В: Экспрессия Кератина 19 в культуре эпидермальных кератиноцитов человека // Доклады Акад. Наук. 2006. Т. 408. № 6. С. 835-837.

6. Киселева Е.В., Васильев A.B. Биология стволовых клеток и клеточные технологии // Мультипотентные клетки стромы жировой ткани/ Москва: издательство "Медицина", 2009. Т. 2. С. 124-162.

7. Миронов A.A., Комиссарчик Я.Ю., Миронов В.А. Методы электронной микроскопии в биологии и медицине: методическое руководство. С.Петербург: Наука, 1994. 400 с.

8. Роговая О.С., Васильев А.В., Киселев И.В., Терских В.В. Использование фибробластов человека, выращенных на микроносителях, для формирования эквивалентов соединительной ткани // Онтогенез. 2004. Т. 35. №2. С. 105-109.

9. П.Руднева С.В., Голубков С.П., Гаряев А.А., Терских В.В., Дудкин С.М. Контракция коллагенового геля фибробластами эмбриона человека: влияние факторов роста // Биол. мембраны. 1990. Т. 7. № 12. С. 12831288.

10. Abdulrazzak H., Moschidou D., Jones G., Guillot P.V. Biological characteristics of stem cells from foetal, cord blood and extraembryonic tissues // J. R. Soc. Interface. 2010. V. 7. Suppl 6. P. 689-706.

11. Antonucci I., Pantalone A., De Amicis D., D'Onofrio S., Stuppia L., Palka G., Salini V. Human amniotic fluid stem cells culture onto titanium screws: a new perspective for bone engineering // J. Biol. Regul. Homeost. Agents. 2009b. V.23.№4. P. 277-279.

12. Arnhold S., Post C., Gliier S., Hoopmann M., Wenisch S., Volpers C., Addicks K. Neuronal characteristics of amniotic fluid derived cells after adenoviral transformation// Cell Biol. Int. 2008. V. 32. № 12. P. 1559-1566.

13. Augello A., Kurth T.B., De Bari C. Mesenchymal stem cells: a perspective from in vitro cultures to in vivo migration and niches // Eur. Cell. Mater. 2010. V. 20. P. 121-133.

14. Baghaban Eslaminejad M., Jahangir S., Aghdami N. Mesenchymal stem cells from murine amniotic fluid as a model for preclinical investigation // Arch. Iran. Med. 2011. V. 14. № 2. P. 96-103.

15. Benson P.F. Antenatal detection of genetic enzyme defects // Proc. R. Soc. Med. 1971. V. 64. № 11. P. 1137-1139.

16. Bertani N., Matatesta P., Volpi G., Sonego P., Perris R. Neurogenic potential of human mesenchymal stem cells revisited: analysis by immunostaining, timelapse video and microarray // J. Cell Sci. 2005. V. 118. P. 3925-3936.

17. Bianco P., Riminucci M., Gronthos S., Robey P.G. Bone marrow stromal stem cells: nature, biology, and potential applications // Stem Cells. 2001. V. 19. № 3.P. 180-192.

18. Bobrow M., Evans C.J., Noble J., Patel C. Cellular content of amniotic fluid as predictor of central nervous system malformations // J. Med. Genet. 1978. V. 15. №2. P. 97-100.

19. Brinkmann V., Foroutan H., Sachs M., Weidner K.M., Birchmeier W. Hepatocyte growth factor/scatter factor induces a variety of tissue-specific morphogenic programs in epithelial cells. J. Cell Biol. 1995. V. 131. № 6 (Pt 1). P. 1573-1586.

20. Chamberlain G., Fox J., Ashton B., .Middleton J. Concise review: mesenchymal stem cells: their phenotype, differentiation capacity,immunological features, and potential for homing // Stem Cells. 2007. Y. 25. № 11. P. 2739-2749.

21. Chang F. Desmoplastic small round cell tumors: cytologic, histologic, and immunohistochemical features // Arch. Pathol. Lab. Med. 2006. V. 130. № 5. P. 728-732.

22. Chang C.-J., Yen M.-L., Chen Y.-C., Chien C.-C., Huang H.-I., Bai C.-H., Yen

23. B.L. Placenta-derived multipotent cells exhibit immunosuppressive properties that are enhanced in the presence of interferon-y // Stem Cells. 2006. V. 24. P. 2466-2477.

24. Chen F.H., Tuan R.S. Mesenchymal stem cells in arthritic diseases // Arthritis Res. Ther. 2008. V. 10. № 5. P. 223.

25. Chen J., Lu Z., Cheng D., Peng S., Wang H. Isolation and characterization of porcine amniotic fluid-derived multipotent stem cells // PLoS One. 2011. V. 6. №5. P. 19964-19973.

26. Chen M.-L., Lee K.-D., Huang H.-C., Tsai Y.-L., Wu Y.-C., Kuo T.-M., Hu

27. C.-P., Chang C. HNF-4a determines hepatic differentiation of human mesenchymal stem cells from bone marrow // World J. Gastroenterol. 2010a. V. 16. №40. P. 5092-5103.

28. Chen Q., Xiao P., Chen J.N., Cai J.Y., Cai X.F., Ding H., Pan Y.L. AFM studies of cellular mechanics during osteogenic differentiation of human amniotic fluid-derived stem cells // Anal. Sci. 2010b. V. 26. № 10. P. 10331037.

29. Chen W.Q., Siegel N., Li L., Pollak A., Hengstschlager M., Lubec G. Variations of protein levels in human amniotic fluid stem cells CD 117/2 over passages 5-25 //J. Proteome Res. 2009. V. 8. № 11. P. 5285-5295.

30. Cremonesi F., Corradetti B., Lange Consiglio A. Fetal adnexa derived stem cells from domestic animal: progress and perspectives // Theriogenology. 2011. V. 75. №8. P: 1400-1415.

31. Crouch E., Balian G., Holbrook K., Duksin D., Bornstein P. Amniotic fluid fibronectin. Characterization and synthesis by cells in culture // J. Cell Biol. 1978. V. 78. №3. P. 701-715.

32. Dahlstrand1 J., Zimmerman L.B., McKay R.D., Lendahl U. Characterization of the human nestin gene reveals a close evolutionary relationship to neurofilaments // J. Cell Sci. 1992. V. 103 (Pt 2). P .589-597.

33. Dai W., Kloner R.A. Myocardial regeneration by human amniotic fluid stem cells: Challenges to be overcome // J. Mol. Cell. Cardiol. 2007. V. 42., P. 730732.

34. De Ban C., DellAccio F., Tylzanowski P., Luyten F.P. Multipotent mesenchymal stem cells from adult human synovial membrane // Arthritis Rheum. 2001. V. 44. № 8. P. 1928-1942.

35. De Coppi P., Soker S., Atala A. Stem cells derived from amniotic fluid and placenta // In: Principles of Regenerative Medicine. Burlington, Elsevier Academic press. 2008. P. 226-237.

36. Dejana E. Endothelial cell-cell junctions: happy together // Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2004. V. 5. № 4. P. 261-270.

37. Dejana E., Corada M., Lampugnani M.G. Endothelial cell-to-cell junctions // FASEB J. 1995. V. 9. № 10. P. 910-918.

38. Delo D.M., De Coppi P., Bartsch G., Jr, Atala A. Amniotic fluid and placental stem cells // In: Methods in Enzymology. Burlington, Elsevier Academic press. 2006. V. 419. P. 426-438.

39. Delo D.M., Guan X., Wang Z., Groban L., Callahan M., Smith T., Sane D.C., Payne R.M., Atala A., Soker S. Calcification» after myocardial' infarction is independent of amniotic fluid stem cell injection // Cardiovasc. Pathol. 2011. V. 20. № 2. P. 69-78.

40. Delo D.M., Olson J., Baptista P.M., D'Agostino R.B. Jr., Atala A., Zhu J.M., Soker S. Non-invasive longitudinal tracking of human amniotic fluid stem cells in the mouse heart// Stem Cells Dev. 2008. V. 17. № 6. P. 1185-1194.

41. Donaldson A.E, Cai J., Yang M., Iacovitti L. Human amniotic fluid stem cells do not differentiate into dopamine neurons in vitro or after transplantation invivo // Stem Cells Dev. 2009. V. 18. № 7. p. 1003-1012.

42. Ferdaos N., Nathan S., Nordin N. Prospective full-term-derived pluripotent amniotic fluid stem (AFS) cells // Med. J. Malaysia. 2008. V. 63. Suppl A. P. 75-76.

43. Gallagher K.L., Benfey P.N. Not just another hole in the wall: understanding intercellular protein trafficking // Genes Dev. 2005. V. 19. № 2. P. 189-195.

44. Gekas J., Walther G., Skuk D., Bujold E., Harvey I., Bertrand O.F. In vitro and in vivo study of human amniotic fluid-derived stem cell differentiation into myogenic lineage // Clin. Exp. Med. 2010. V. 10. № 1. P. 1-6.

45. Ghionzoli M., Cananzi M., Zani A., Rossi C.A., Leon F.F., Pierro A., Eaton S., De Coppi P. Amniotic fluid stem cell migration after intraperitoneal injection in pup rats: implication for therapy // Pediatr. Surg. Int. 2010. V. 26. № 1. P. 79-84.

46. Gosden C.M. Amniotic fluid cell types and culture // Br. Med. Bull. 1983. V. 39. № 4. P. 348-354.

47. Guan X., Delo D.M., Atala A.,, Soker S. In vitro cardiomyogenic potential of human amniotic fluid'stem cells // J. Tissue Eng. Regen. Med. 2011. V. 5: № 3. P. 220-228.

48. Gucciardo E., EoriesR., Ochsenbein-Kolble N., Done E., Zwijsen. A., Deprest J. Fetal mesenchymal stem cells: isolation, properties and potential use in perinatology and regenerative medicine// BJOG. 2009. V. 116: №-2. P. 166: 172. '

49. I Iauser P.V., De Fazio R:, Bruno S., Sdei S., Grange C., Bussolati B., Benedetto C., Camussi G. Stem' cells derived1 from human, amniotic fluid contribute to acute kidney injury recovery // Am. J. Pathol. 2010. V. 177. № 4. P. 2011-2021.

50. He X.-Y., Zheng Y.-M., Qiu S., Qi Y.-P:, Zhang Y. Adipogenic differentiation and EGFP gene transfection of amniotic fluid-derived; stem, cells from: goat fetus at terminal gestational age // Cell Biol. Int. 2011. V. 35. № 8. P; 789-792.

51. Higuchi A., Shen P.Y., Zhao J.K., Chen C.W., Ling Q.D., Chen H:, Wang H.C., Bing J.T., Hsu S.T. Osteoblast differentiation of amniotic fluid-derived stem cells- irradiated with visible light // Tissue Eng. Part A. 2011. V. 17. № 21-22. P: 2593-2602.

52. Hipp J.A., Hipp J.D., Atala A., Soker S. Ethanol alters the osteogenic differentiation of amniotic fluid-derived stem, cells // Alcohol: Clin:. Exp. Res. 2010. V. 34. № 10. P. 1714-1722.

53. Hoehn H., Bryant E.M., Karp L.E., Martin G.M. Cultivated cells from diagnostic amniocentesis in second trimester pregnancies. I. Clonal morphology and growth potential // Pediat. Res. 1974. V. 8. P. 746-754.

54. Hsiao Y.-H., Su Y.A., Tsai. H.-D., Mason J.T., Chou M.-C., Man Y.-G. Increased invasiveness and aggressiveness in breast epithelia with cytoplasmic p63 expression // Int. J. Biol. Sci: 2010. V. 6. № 5. P. 428-442.

55. Jezierski A., Gruslin A., Tremblay R., Ly D., Smith C., Turksen K., Sikorska M:5 Bani-Yaghoub M. Probing sternness and neural commitment in human amniotic fluid cells // Stem Cell'Rev. 2010.' V. 6. № 2. P. 199-214.

56. Jiang T.M., Yang Z.J., Kong C.Z., Zhang H.T. Schwann-like cells can be induction from human nestin-positive amniotic fluid mesenchymal stem cells // In Vitro Cell. Dev. Biol. Anim. 2010. V. 46. № 9. P. 793-800.

57. Kalluri R. EMT: when epithelial cells decide to become mesenchymal-like cells//J. Clin. Invest. 2009. V. 119. № 6. P. 1417-1419.

58. Kalluri R., Weinberg R.A. The basics of epithelial-mesenchymal transition // J. Clin. Invest. 2009. V. 119. № 6. P. 1420-1428.

59. Kim Y.W., Kim H.J., Bae S.M., Kim Y.J., Shin J.C., Chun H.J., Rhie J.W., Kim J., Kim H., Ahn W.S. Time-course Transcriptional Profiling of Human Amniotic Fluid-derived Stem Cells Using Microarray // Cancer Res. Treat. 2010. V. 42. №2. P. 82-94. ' :

60. Klein J.D., Turner C.G., Ahmed A., Steigman S.A., Zurakowski D., Fauza D.O. Chest wall repair with engineered fetal bone grafts: an efficacy analysis inan autologous leporine model // J. Pediatr. Surg. 2010. V. 45. № 6. P. 13541360.

61. Klein J.D., Turner C.G., Steigman S.A., Ahmed A., Zurakowski D., Eriksson E., Fauza D.O. Amniotic mesenchymal stem cells enhance normal fetal wound healing // Stem Cells Dev. 2011. V. 20. № 6. P. 969-976.

62. Klemmt P.A., Vafaizadeh V., Groner B. Murine amniotic fluid stem cells contribute mesenchymal but not epithelial components to reconstituted mammary ducts // Stem Cell Res. Ther. 2010. V. 1. № 3. P. 20.

63. Kolambkar Y.M., Peister A., Ekaputra A.K., Hutmacher D.W., Guldberg R.E. Colonization and osteogenic differentiation of different stem cell sources on electrospun nanofiber meshes // Tissue Eng. Part A. 2010. V. 16. № 10. P. 3219-3230.

64. Kolambkar Y.M., Peister A., Soker S., Atala A., Guldberg R.E. Chondrogenic differentiation of amniotic fluid-derived stem cells // J. Mol. Histol. 2007. V. 38. № 5. P. 405-413.

65. Kunisaki S.M., Armant M., Kao G.S., Stevenson K., Kim H., Fauza D.O. Tissue engineering from human mesenchymal amniocytes: a prelude to clinical trials // J. Pediatr. Surg. 2007a. V. 42. № 6. P. 974-979.

66. Kunisaki S.M., Freedman D.A., Fauza D.O. Fetal tracheal reconstruction with cartilaginous grafts engineered from mesenchymal amniocytes // J. Pediatr. Surg. 2006a. V. 41. P. 675-682.

67. Kunisaki S.M., Fuchs J.R., Steigman S.A., Fauza D.O. A comparative analysis of cartilage engineered from different perinatal mesenchymal progenitor cells // Tissue Eng. 2007b. V. 13. № 11. P. 2633-2644.

68. Kunisaki S.M., Jennings R.W., Fauza D.O. Fetal cartilage engineering from amniotic mesenchymal progenitor cells // Stem Cells Dev. 2006c. V. 15. P. 245-253.

69. Lanfranchi A., Porta F., Chirico G. Stem cells and the frontiers of neonatology // Early Hum. Dev. 2009. V. 85. № 10. Suppl. P. 15-18.

70. Lee J.M., Dedhar S., Kalluri R., Thompson E.W. The epithelial-mesenchymal transition: new insights in signaling, development, and disease // J. Cell. Biol. 2006. V. 172. № 7. P. 973-981.

71. Lee K.D., Kuo T.-K., Whang-Peng J., Chung Y.-F., Lin C.-T., Chou S.-H., Chen J.-R., Chen Y.-P., Lee O.K. In vitro hepatic differentiation of human mesenchymal stem cells //Hepatology. 2004. V. 40. № 6. P. 1275-1284.

72. Levinson H., Peled Z., Liu W., Longaker M.T., Allison G.M., Ehrlich H.P.i

73. Fetal rat amniotic fluid: transforming growth factor beta and fibroblast collagen lattice contraction // J. Surg. Res. 2001. V. 100. № 2. P. 205-210.

74. Li C., Zhou J., Shi G., Ma Y., Yang Y., Gu J., Yu H., Jin S., Wei Z., Chen F., Jin Y. Pluripotency can be rapidly and efficiently induced in human amniotic fluid-derived cells //Hum. Mol. Genet. 2009. V. 18. № 22. P. 4340-4349.

75. Liu Z.S., Xu Y.F., Feng S.W., Li Y. Yao X.L., Lu X.L., Zhang C. Baculovirus-transduced mouse amniotic fluid-derived' stem cells maintain differentiation potential // Ann. Hematol. 2009. V. 88. № 6. P. 565-572.

76. Lovati A.B., Corradetti B., Lange Consiglio A., Recordad C., Bonacina E., Bizzaro D., Cremonesi F. Comparison of equine bone marrow-, umbilical cord matrix and amniotic fluid-derived progenitor cells // Vet. Res. Commun. 2011. V. 35. №2. P. 103-121.

77. Marcus A.J., Woodbury D. Fetal stem cells from extra-embryonic tissues: do not discard // J. Cell. Mol. Med. 2008. V. 12. № 3. P. 730-742.

78. Mauro A., Turriani M., Ioannoni A., Russo V., Martelli A., Di Giacinto O., Nardinocchi D., Berardinelli P. Isolation, characterization, and in vitro differentiation of ovine amniotic stem cells // Vet. Res. Commun. 2010. V. 34. Suppl l.P. 25-28.

79. Mazzucchelli I., Avanzini M.A., Ciardelli L., Pagani S., Greco R., Belloni C., Castellazzi A., Marconi M., Rondini G., Polatti F. Human amniotic fluid cells are able to produce IL-6 and IL-8 // Am. J. Reprod. Immunol. 2004. V. 51. №3. P. 198-203.

80. Megaw J.M., Priest J.H., Priest R.E., Johnson L.D. Differentiation in human amniotic fluid cell cultures: II: Secretion of an epithelial basement membrane glycoprotein//J. Med. Genet. 1977. V. 14. № 3. P. 163-167.

81. Mihu C.M., Mihu D., Costin N., Rus Ciuca D., Su§man S., Ciortea R. Isolation and characterization of stem cells from the placenta and the umbilical cord // Rom. J. Morphol. Embryol. 2008. V. 49. № 4. P. 441-446.

82. Miki T., Lehmann T., Cai H., Stolz D.B., Strom S.C. Stem cell characteristics of amniotic epithelial cells // Stem Cells. 2005. V. 23. № 10. P. 1549-1559.

83. Mirebella T, Poggi A, Scaranari M, Mogni M, Lituania M, Baldo C, Cancedda R, Gentili C. Recruitment of host's progenitor cells to sites of human amniotic fluid stem cells implantation // Biomaterials. 2011. V. 32. № 18. P. 4218-4227.

84. Moore K.L., Persaud T.V.N. Before we are born: essentials of embryology and birth defects. Philadelphia, Saunders Elsevier. 2008. P. 84-86.

85. Moorefield E.C., McKee E.E., Solchaga L., Orlando G., Yoo J.J., Walker S., Furth M.E., Bishop C.E. Cloned, CD117 selected human amniotic fluid stemcells are capable of modulating the immune response // PLoS One. 2011. V. 6. * № 10. P. e26535.

86. Mosna F., Sensebé L., Krampera M. Human bone marrow and adipose tissue mesenchymal stem cells: a user's guide // Stem Cells Dev. 2010. V. 19. № 10. P. 1449-1470.

87. Nadri S., Soleimani M. Comparative analysis of mesenchymal stromal cells from murine bone marrow and amniotic fluid // Cytotherapy. 2007. V. 9. № 8. P. 729-737.

88. Natalwala A., Spychal R., Tselepis C. Epithelial-mesenchymal transition mediated- tumourigenesis in the gastrointestinal tract // World J. Gastroenterol. 2008. V. 14. № 24. P. 3792-3797.

89. Pan H.-C., Yang D.-Y., Chiu Y.-T., Lai S.-Z., Wang Y.-C., Chang M.-H., Cheng F.-C. Enhanced regeneration in injured sciatic nerve by human amniotic mesenchymal stem cell // J. Clin. Neurosci. 2006. V. 13. P. 570-575.

90. Pappa K.I., Anagnou N.P. Novel sources of fetal stem cells: where do they fit on the developmental continuum? // Regen. Med. 2009. V. 4. № 3. P. 423433.

91. Park S.-B., Seo M.-S., Kang J.-G., Chae J.-S., Kang K.-S. Isolation and characterization of equine amniotic fluid-derived multipotent stem cells // Cytotherapy. 2011b. V. 13. № 3. P. 341-349.

92. Peister A., Deutsch E.R., Kolambkar Y., Hutmacher D.W., Guldberg R.E. Amniotic fluid stem cells produce robust mineral deposits on biodegradable scaffolds // Tissue Eng. Part A. 2009. V. 15. № 10. P. 3129-3138.

93. Perm L., Giuliani S., Sedrakyan S., Da Sacco S., De Filippo R.E. Stem cell and regenerative science applications in the development of bioengineering of renal tissue 11 Pediat. Res. 2008a. V. 63. № 5. p. 467-471.

94. Perin L., Sedrakyan S., Da Sacco S., De Filippo R. Characterization of human amniotic fluid stem cells and their pluripotential capability // In: Methods in Cell Biology. Burlington, Elsevier Academic Press. 2008b. V. 86. P. 85-99.

95. Phermthai T., Odglun Y., Julavijitphong S., Titapant V., Chuenwattana P., Vantanasiri C., Pattanapanyasat K. A novel method to derive amniotic fluid stem cells for therapeutic purposes // BMC Cell Biol. 2010. V. 11. P. 79.

96. Polgar K., Adany R., Abel G., Kappelmayer J., Muszbek L., Papp Z.

97. Characterization of rapidly adhering amniotic fluid cells by combined immunofluorescence and phagocytosis assays // Am. J. Hum. Genet. 1989. V. 45. № 5\ P. 786-792.

98. Pozzobon M., Ghionzoli M., De Coppi P. ES, iPS, MSC, and AFS cells. Stem cells exploitation for Pediatric Surgery: current research and perspective //Pediatr. Surg. Int. 2010. V. 26. № 1. P. 3-10.

99. Priest R.E., Marimuthu K.M., Priest J.H. Origin of cells in human amniotic fluid cultures: ultrastructural features // Lab. Invest. 1978. V. 39. № 2. P. 106109.

100. Priest R.E., Priest J.H., Moinuddin J.F., Keyser A.J. Differentiation in human* amniotic fluid cell cultures: I: Collagen production // J. Med. Genet. 1977. V. 14. №3. P. 157-162.

101. Prusa A.-R., HengstschlDger M. Amniotic fluid cells and human stem cell research a new connection // Med. Sci. Monit. 2002. V. 8. № 11. P. 253-257.

102. Reima I. Maintenance of compaction and adherent-type junctions in mouse morula-stage embryos // Cell Differ. Dev. 1990. V. 29. № 2. P. 143-153.

103. Reynolds E.S. The use of lead citrate at high pH as an electron-opaque stain in electron microscopy // J. Cell Biol. 1963. V. 17. P. 208-212.

104. Rittenberg T., Longaker M.T., Adzick N.S., Ehrlich H.P. Sheep amniotic fluid has a protein factor which stimulates human fibroblast populated collagen lattice contraction // J. Cell. Physiol. 1991. V. 149. № 3. P. 444-450.

105. Romanov Y.A., Svintsitskaya V.A., Smirnov V.N. Searching for alternative sources of postnatal human mesenchymal stem cells: candidate MSC-like cells from umbilical cord // Stem Cells. 2003. V. 21. P. 105-110.

106. Rustom A., Saffrich R., Markovic I., Walther P., Gerdes H.-H. Nanotubular highways for intercellular organelle transport // Science. 2004. V. 303. P. 10071010.

107. Savtchenko E.S., Schiff T.A., Jiang C.K., Freedberg I.M., Blumenberg M. Embryonic expression of the human 40-kD keratin: evidence from a processed pseudogene sequence // Am. J. Hum. Genet. 1988. V. 43. № 5. P. 630-637.

108. Schmelz M., Franke W.W. Complexus adhaerentes, a new group of desmoplakin-containing junctions in ' endothelial, cells: the syndesmos connecting retothelial cells of lymph nodes // Eur. J. CellBiol. 1993. V. 61. № 2. P. 274-289.

109. Seo J.M., Sohn M.Y., Suh J.S., Atala A., Yoo J.J., Shon Y.H. Cryopreservation of amniotic fluid-derived stem cells using' natural cryoprotectants and low concentrations of dimethylsulfoxide // Cryobiology. 2011. V. 62. №3. P. 167-173.

110. Sessarego N., Parodi A., Podesta M., Benvenuto F., Mogni M., Raviolo V., Lituania M., Kunkl A., Ferlazzo G., Bricarelli F.D., Uccelli A., Frassoni F.

111. Multipotent mesenchymal stromal cells from amniotic fluid: solid perspectives for clinical application // Haematologica. 2008. V. 93. № 3. P. 339-346.

112. Sherer N.M., Mothes W. Cytonemes and tunneling nanotubules in cell-cell communication and viral-pathogenesis // Trends Cell Biol. 2008. V. 18. № 9. P. 414-420.

113. Shi Y. Induced pluripotent stem cells, new tools for drug discovery and new hope for stem cell therapies // Curr. Mol. Pharmacol. 2009. V. 2. № 1. P. 1518.

114. Siddiqui M.M., Atala A. 2004. Amniotic fluid-derived pluripotential* cells // In: Handbook of Stem Cells. Burlington, Elsevier Academic press. V. 2. P. 175-179.

115. Siegel N., Valli A., Fuchs C., Rosner M., Hengstschlàger M. Induction of mesenchymal/epithelial marker expression in human amniotic fluid stem cells // Reprod. Biomed. Online. 2009. V. 19. № 6. P. 838-846.

116. Simionescu-Ml, Simionescu N. Endothelial transport'of macromolecules: transcytosis and endocytosis. A look from cell biology // Cell Biol. Rev. 1991. V. 25. № i.p. 1-78.

117. Stadtfeld M., Nagaya M., Utikal J., Weir G., Hochedlinger K. Induced pluripotent stem cells generated without viral integration // Science. 2008. V. 322. № 5903. P. 945-949.

118. Steigman S.A., Ahmed A., Shanti R.M., Tuan R.S., Valim C., Fauza D.O. Sternal repair with bone grafts engineered from amniotic mesenchymal stem cells // J. Pediatr. Surg. 2009. V. 44. P. 1120-1126.

119. Steigman S.A., Armant M., Bayer-Zwirello L., Kao G.S., Silberstein L., Ritz J., Fauza D.O. Preclinical regulatory validation of a 3-stage amniotic mesenchymal stem cell manufacturing protocol // J. Pediatr. Surg. 2008. V. 43. №6, P. 1164-1169.

120. Sun H., Feng K., Hu J., Soker S., Atala A., Ma P.X. Osteogenic differentiation of human amniotic fluid-derived stem cells induced by bone morphogenetic protein-7 and' enhanced by nanofibrous scaffolds // Biomaterials. 2010. V. 31. № 6. P. 1133-1139.

121. Syed S., Haque A.K., Hawkins H.K., Sorensen P.H., Cowan D.F. s Desmoplastic small round cell tumor of the lung // Arch. Pathol. Lab. Med. 2002. V. 126. № 10. P. 1226-1228.

122. Takahashi K., Yamanaka S. Induction of pluripotent stem cells from mouse embryonic and adult fibroblast cultures by defined factors // Cell. 2006. V. 126. № 4. P. 663-676.

123. Thomson J.A., Itskovitz-Eldor J., Shapiro S.S., Waknitz M.A., Swiergiel J.J., Marshall V.S., Jones J.M. Embryonic stem cell lines derived from human blastocysts // Science. 1998. V. 282. P. 1145-1147.

124. Toda A., Okabe M., Yoshida T., Nikaido T. The potential of amniotic membrane/amnion-derived cells for regeneration of various tissues // J. Pharmacol. Sci. 2007. V. 105. P. 215-228.

125. Trounson A. A fluid means of stem cell generation // Nat. Biotechnol. 2007. V. 25. № l.p. 62-63.

126. Tsai M.-S., Hwang S.-M., Tsai Y.-L., Cheng F.-C., Lee J.-L., Chang Y.-J. Clonal amniotic fluid-derived stem cells express characteristics of both mesenchymal and neural stem cells // Biol. Reprod. 2006. V. 74. P. 545-551.

127. Tsai M.-S., Lee J.-L., Chang Y.-J., Hwang S.-M. Isolation of human multipotent mesenchymal stem cells from second-trimester amniotic fluidusing a novel two-stage culture protocol // Hum. Reprod. 2004. V. 19. № 6. P. 1450-1456.

128. Valli A., Rosner M., Fuchs C., Siegel N., Bishop C.E.", Dolznig H., Mädel U., Feichtinger W., Atala A., Hengstschläger M. Embryoid body formation of human amniotic fluid stem cells depends on mTOR // Oncogene. 2010. V. 29. № 7. P. 966-977.

129. Veranic P., Lokar M., Schütz G J., Weghuber J., Wieser S., Hägerstrand H., Kralj-Iglic Y., Iglic A. Different types of cell-to-cell connections mediated by nanotubular structures // Biophys. J. 2008. V. 95. № 9. P. 4416-4425.

130. Walther G., Gekas J., Bertrand O.F. Amniotic stem cells for cellular cardiomyoplasty: promises and premises // Catheter. Cardiovasc. Interv. 2009. V. 73. P. 917-924.

131. Wang H., Ghen S., Cheng X:, Dou Z., Wang H. Differentiation of human amniotic fluid stem cells into cardiomyocytes through embryonic body formation. Chinese journal of biotechnology. 2008. V. 24. № 9. P: 1582-1587.

132. Watkins S.C., Salter R.D. Functional connectivity between immune cells mediated by tunneling nanotubules // Immunity. 2005. V. 23. № 3. P. 309-318.

133. Williams J.T., Southerland S.S., Souza J:, Calcutt A.F., Cartledge R.G. Cells isolated from adult human skeletal muscle capable of differentiating into multiple mesodermal phenotypes // Am. Surg. 1999. V. 65. № 1. P. 22-26.

134. Wislet-Gendebien S., Bruyère F., Hans G., Leprince P., Moonen G., Rogister B. Nestin-positive mesenchymal stem cells favour the astroglial lineage in neural progenitors and stem cells by releasing active BMP4 // BMC Neuroscience. 2004. V. 5. P. 33.

135. Wu I-I.-W., Lin X.-Z., Hwang S.-M., Lee G.-B. The culture and differentiation of amniotic stem cells using a microfluidic system // Biomed. Microdevices. 2009. V. 11. № 4. P. 869-881.

136. Xu R., Wu C, Tao Y., Yi J., Yang Y., Zhang X., Liu R. Nestin-positive cells in the spinal cord: a potential source of neural, stem cells // Int. J. Dev. Neurosci. 2008. V. 26. № 7 P: 813.-820:

137. Yadav P., Mann A., Singh V., Y ash veer S., Sharma R., Singh I. Expression of pluripotency genes in buffalo (Bubalus bubalis) amniotic fluid cells // Reprod. Domest.Anim. 2011. V. 46. № 4. P. 705-711.

138. Yager J.S., Hugo N;E., Ehrlich HP; Inhibition of iibroblast-populated collagen lattice contraction by an albumin-bound lipid fraction in human amniotic fluid //Plast. Reconstr. Surg: 1998í V. 1 OK №4. P; 6-m.

139. Yan W.H., Lin A., Chen X.J., Dai M.Z., Xu H.H., Chen B.G., Gan L.H., Shi W.W. Immunological aspects of human amniotic fluid cells: implication for. normal pregnancy // CettBiol. Int. 2008. V. 32. № 1. P. 93-99.

140. Ye L., Chang J.C., Lin C., Qi Z., Yu J., Kan Y.W. Generation of induced plüripotent stem- cells using site-specific, integration with phage1 integrase // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2010. V. 107. № 45. P. 19467-19472.

141. You Q., Cai L., Zheng J., Tong X., Zhang D., Zhang Y. Isolation of human mesenchymal stem cells from third-trimester amniotic fluid // Int. J. Gynecol. Obstet. 2008. V. 103. № 2. P. 149-152.

142. You Q., Tong X., Guan Y., Zhang D., Huang M., Zhang Y., Zheng J. The biological characteristics of human third trimester amniotic fluid stem cells // J. Int. Med. Res. 2009. V. 37. P. 105-112.

143. Zani A., Cananzi M., Eaton S., Pierro A., De Coppi P. Stem cells as a potential treatment of necrotizing enterocolitis // J. Pediatr. Surg. 2009. V. 44. № 3. P. 659-660.

144. Zeisberg M., Neilson E.G. Biomarkers for epithelial-mesenchymal transitions // J. Clin. Invest. 2009. V. 119. № 6. P. 1429-1437.

145. Zhang L., Zhang X.H., Liang M.Y., Ren M.H. Prenatal cytogenetic diagnosis study of 2782 cases of high-risk pregnant women // Chin. Med. J. (Engl). 2010a. V. 123. № 4. P. 423-430.

146. Zhang P., Baxter J., Vinod K., Tulenko T.N., Dimuzio P. Endothelial differentiation of amniotic fluid-derived stem cells: synergism of biochemical and shear force stimuli // Stem Cells Dev. 2009. V. 18. № 9. P. 1299-1308.

147. Zhang S., Geng H., Xie H., Wu Q., Ma X., Zhou J., Chen F. The heterogeneity of cell subtypes from a primary culture of human amniotic fluid // Cell. Mol. Biol. Lett. 2010b. V. 15. №-3. P. 424-439.

148. Zheng Y.-M., Zheng Y.-L., He X.Y., He X.-N., Zhao X., Sai W.-J. Multipotent differentiation of the EGFP gene transgenic stem cells derived from amniotic fluid of goat at terminal gestational age // Cell Biol. Int. 2011b. V. 35. № 12. P. 1243-1246.

149. Zvaifler N.J., Marinova-Mutafchieva L., Adams G., Edwards C.J., Moss J., Burger J.A., Maini R.N. Mesenchymal precursor cells in the blood of normal individuals // Arthritis Res. 2000. V. 2. № 6. P. 477-488.1. БЛАГОДАРНОСТИ

150. Отдельно хочется поблагодарить Смирнову Юлию Анатольевну (ИБР РАН,г *3

151. Отдельную признательность автор выражает оппонентам и рецензентам данной работы.n

152. Искреннюю благодарность автор выражает свои родным и друзьям запонимание и поддержку, оказанные при выполнении этой работы.