Химическая модификация аналитов для анализа методом матрично-активированной лазерной десорбции/ионизации тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.03, кандидат химических наук Половков, Николай Юрьевич

• Половков, Николай Юрьевич
• кандидат химических наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат химических наук Половков, Николай Юрьевич

Содержание

Введение

Глава 1. Химическая модификация аналитов для масс-спектрометрических исследований с низкоэнергетичными («мягкими»)

методами ионизации (литературный обзор)

1.1. Низкоэнергетичные («мягкие») методы ионизации

1.1.1. Химическая ионизация (ХИ)

1.1.2. Химическая ионизация при атмосферном давлении (ХИАД)

1.1.3. Матрично-активированная лазерная десорбция/ионизация

(МАЛДИ)

1.1.4. Ионизация электрораспылением (ИЭР)

1.1.5. Масс-спектрометрия вторичных ионов (ВИМС) и бомбардировка быстрыми атомами (ББА)

1.2.Химическая модификация соединений

1.2.1. Химическая модификация соединений, содержащих амино-группу—

1.2.2. Дериватизация соединений, содержащих карбоксильную группу

1.2.3. Модификация соединений, содержащих гидроксилъную группу

1.2.4. Модификация соединений, содержащих карбонильную группу

Глава 2. Экспериментальная часть

2.1 .Оборудование и условия измерения масс-спектров

2.2 Исходные вещества и материалы

2.3 Пробоподготовка

2.4. Химическая модификация аналитов

2.4.1. Химическая модификация модельных соединений

2.4.2. Химическая модификация низкомолекулярных полиэтиленгликолей

2.4.3. Химическая модификация низкомолекулярных

полипропиленгликолей

2.4.4. Химическая модификация соолигомеров полипропилен- и полиэтиленгликолей

2.4.5. Химическая модификация алкоксилатов глицерина

2.4.6. Химическая модификация низкомолекулярных продуктов полимеризации е-капролактона

2.4.7. Химическая модификация силсесквиоксанов

2.4.8. Химическая модификация циклодекстринов

2.4.9. Химическая модификация полиэтилен и полипропиленгликолей с концевыми амино-группами

2.4.10. Химическая модификация низкомолекулярных продуктов полимеризации азиридина

Глава 3. Общие принципы использования химической модификации для определения числа свободных функциональных групп с помощью

масс-спектрометрии с МАЛДИ

Глава 4. Химическая модификация соединений со свободными гидроксильными группами

4.1. Разработка методов дериватизации модельных индивидуальных соединений

4.2. Анализ низкомолекулярных полиэтиленгликолей (ПЭГ)

4.3. Анализ низкомолекулярных полипропиленгликолей (11111)

4.4. Анализ низкомолекулярных соолигомеров полипропилен- и полиэтиленгликолей (11111/ПЭГ)

4.5. Анализ алкоксилатов глицерина

4.6. Анализ низкомолекулярных продуктов полимеризации е-капролактона

4.7. Анализ силсесквиоксанов

4.8. Анализ циклодекстринов

Глава 5. Химическая модификация соединений с первичными аминогруппами

5.1. Анализ низкомолекулярных полиэтилен- и полипропиленгликолей с концевыми амино-группами

5.2. Анализ низкомолекулярных продуктов полимеризации

азиридина

Выводы

Список литературы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Химическая модификация аналитов для анализа методом матрично-активированной лазерной десорбции/ионизации»

Введение

Актуальность темы. Масс-спектрометрия на сегодняшний день является одним из самых популярных инструментальных методов изучения, идентификации и установления строения различных органических соединений. Создание и быстрое развитие низкоэнергетических или «мягких» методов ионизации позволило использовать масс-спектрометрию в ранее недоступных областях, таких как исследование органических соединений с низкой летучестью и большими молекулярными массами. Одним из таких методов является матрично-активированная лазерная десорбция/ионизация (МАЛДИ). Однако регистрируемые с помощью этого метода ионизации масс-спектры содержат пики только протонированных или катионизированных молекул, что пригодно для определения молекулярно-массовых характеристик аналитов, однако далеко не всегда позволяет устанавливать более тонкую структуру изучаемых соединений, одним из ключевых элементов которой являются свободные функциональные группы и их число. Важность этого параметра подчеркивается тем, что от него зависят как химические, так и физические свойства соединений. В некоторых случаях функциональные группы могут быть обнаружены с применением тандемной масс-спектрометрии и распада ионов после источника, а также с использованием масс-спектрометрии ионного циклотронного резонанса с преобразованием Фурье. Однако применение этих методов в случае олигомерных систем далеко не всегда позволяет получить удовлетворительные результаты. Поэтому разработка новых

методологических принципов установления тонкой структуры аналитов остается остроактуальной задачей.

Одним из способов решения такой задачи представляется использование простых методов химической модификации аналитов (силилирование, ацилирование, алкилирование, образование оснований Шиффа и проч.) с последующим сравнительным анализом масс-спектров

МАЛДИ исходных веществ и полученных производных. Такие подходы

5

широко используются в практике газовой хроматографии/масс-спектрометрии. Однако в масс-спектрометрии с «мягкими» методами ионизации дериватизация в большинстве случаев используется исключительно для увеличения эффективности ионизации аналитов. Поэтому разработка методологии использования химической модификации для решения задач установления особенностей строения аналитов с помощью масс-спектрометрии с низкоэнергетическими методами ионизации является актуальной при создании экспрессных и эффективных структурно-аналитических методов современной химии.

При этом следует учитывать, что использование дериватизационного подхода в случае соединений с большим числом функциональных групп предъявляет высокие требования к количественности протекания реакций химической модификации, поскольку именно этот параметр влияет на однозначность определения числа и характера функциональных групп. Не меньшую проблему представляет и эмпирический характер подбора условий измерения масс-спектров МАЛДИ: типа используемой матрицы, соотношения матрицы и аналита, методов нанесения их на мишень, использование допантов. Поэтому особую актуальность приобретает разработка стандартных протоколов пробоподготовки для различных типов органических соединений и их производных.

Работа выполнена на экспериментальной базе Института нефтехимического синтеза им. А.В Топчиева РАН и поддержана Программой фундаментальных исследований Президиума Российской академии наук «Создание и совершенствование методов химического анализа и исследования структуры веществ и материалов».

Цель и задачи исследования. В настоящей работе поставлены цели: разработать общие подходы к применению химической модификации функциональных групп для определения тонкой структуры аналитов различного строения с помощью масс-спектрометрии МАЛДИ;

изучить возможность использования разработанных подходов для

6

определения числа и характера свободных функциональных групп (гидроксильных, первичных амино-групп) в различных типах соединений и промышленных продуктов.

Для достижения этих целей необходимо было решить следующие задачи:

-определить экспериментальные условия для измерения масс-спектров МАЛДИ различных полиалкиленгликолей, функционализированых полиалкиленгликолей, силсесквиоксанов, циклических полисахаридов и продуктов полимеризации азиридинов (полиэтилениминов): подобрать тип матрицы, определить необходимость использования допантов и условия пробоподготовки;

-разработать методики микросинтеза производных различных типов

аналитов с использование простейших дериватизирующих агентов

(ацилирующих, силилирующих, карбонильных соединений), позволяющие

получать производные с количественными выходами;

-определить экспериментальные условия для измерения масс-спектров

МАЛДИ получаемых производных, изучить влияние условий измерений

масс-спектров на их химическую устойчивость;

-разработать методики определения числа свободных гидроксильных

групп и первичных амино-групп в изучаемых соединениях путем анализа

изменения массовых чисел катионизированных или протонированных

молекул аналитов в масс-спектрах МАЛДИ;

-на основе разработанных методик определить число свободных

гидроксильных групп и первичных амино-групп в индивуальных

соединениях и олигомерах различных полиалкиленгликолей,

функционализированых полиалкиленгликолей, силсесквиоксанов,

полиэтилениминов.

Научная новизна. Впервые проведено систематическое исследование

возможности использования предварительной химической модификации в

сочетании с масс-спектрометрией МАЛДИ для определения числа и типа

7

свободных гидрокснльных и первичных амино-групп в индивидуальных олигомерах различных полиалкиленгликолей, функционализированых полиалкиленгликолей, силсесквиоксанов, циклических полисахаридов и продуктах полимеризации азиридинов (полиэтилениминах).

Показано, что применение дериватизации (силилирования и ацилирования) для характеризации полиалкиленгликолей позволяет однозначно определять число свободных гидроксильных групп в них, дифференцировать линейные и циклические олигомеры, рассчитывать число мономерных звеньев в индивидуальных олигомерах сополимеров. Выявлено проявление матричного эффекта в масс-спектрах продуктов триметисилилирования указанных соединений, заключающиеся в миграции триметилсилильной группы в процессе сокристализации матрицы и аналита на более реаакционоспособные функциональные группы матричных соединений.

Установлено, что в случае полисилсесквиоксанов использование предварительной химической модификации дает возможность устанавливать число свободных гидроксильных групп в олигомерах и дифференцировать их двухмерные и трехмерные формы.

На примере биодеградируемых продуктов полимеризации е-капролактона показано, что образующиеся в ходе химической модификации продукты деструкции дериватизирующих агентов не разрушают полимеры и не влияют на молекулярно-массовые характеристики аналитов.

Показано, что использование разработанной методики для установления числа свободных функциональных групп в полисахаридах осложнено не количественным протеканием реакций дериватизации.

Получение оснований Шиффа из соединений с первичными аминогруппами позволяет определять их число в функционализированных полиалкиленгликолях и полиэтилениминах, а также устанавливать связь между молекулярной массой, числом мономерных звеньев и количеством

первичных амино-групп в индивидуальных олигомерах.

Практическая значимость. Полученные результаты существенно расширяют границы применения масс-спектрометрии МАЛДИ в области изучения особенностей строения олигомеров. Разработанные методики определения количества свободных функциональных групп в индивидуальных олигомерах различного происхождения позволяют контролировать реакции, используемые для их получения, определять характеристики синтезируемых и закупаемых материалов. На защиту выносятся следующие положения:

-методики измерения масс-спектров МАЛДИ различных

полиалкиленгликолей, функционализированых полиалкиленгликолей,

силсесквиоксанов, циклических полисахаридов и полиэтилениминов и

продуктов их химической модификации;

-методики количественного микросинтеза производных

полиалкиленгликолей, функционализированых полиалкиленгликолей,

силсесквиоксанов, циклических полисахаридов и полиэтилениминов;

-методики определения числа свободных гидроксильных групп и

первичных амино-групп в изучаемых соединениях путем анализа изменения

массовых чисел катионизированных или протонированных молекул аналитов

в масс-спектрах МАЛДИ.

Апробация работы. Основные результаты работы были доложены на

56-й конференции Американского масс-спектрометрического общества (1-5

июня 2008, США, Денвер, США), 57-й конференции Американского масс-

спектрометрического общества (1-4 июня 2009 г„ Филадельфия, США), III-

ей Всероссийской конференции с международным участием "Масс-

спектрометрия и её прикладные проблемы" (18-22 мая 2009г., Москва,

Россия), XVI Международной конференции студентов, аспирантов и

молодых ученых «Ломоносов», Секция «Химия», (14 - 17 апреля 2009 г.,

Москва, Россия), 58-й конференции Американского масс-

спектрометрического общества (23-27 мая 2010 г., Солт-Лейк-Сити, США),

XVIII Международной конференции студентов, аспирантов и молодых

9

ученых «Ломоносов», Секция «Химия», (11 - 15 апреля 2011 г., Москва, Россия), 1У-ой Всероссийской конференции с международным участием "Масс-спектрометрия и её прикладные проблемы" (05-09 сентября 2011 г., Москва, Россия), 59-й конференции Американского масс-спектрометрического общества (5-9 июня 2011 г., Денвер, США).

Публикации. По материалам работы опубликовано 5 статей (все в журналах, рекомендованных ВАК Российской Федерации) и 19 тезисов в сборниках докладов научных конференций.

Структура и объём работы. Диссертация объёмом 163 страницы, состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, трех глав обсуждения результатов работы и выводов. Содержит 17 таблиц и 55 рисунков. Библиография включает 93 названий.

Заключение диссертации по теме «Органическая химия», Половков, Николай Юрьевич

Выводы

1. Впервые показано, что использование дериватизационных методик для исследования соединений, содержащих свободные функциональные группы с активными атомами водорода, в комбинации с методом масс-спектрометрии МАЛДИ позволяет получить информацию о характере и числе таких групп. Показано, что предварительная химическая модификация аналитов может быть использована для различения циклических и линейных молекул олигомеров.

2. Разработаны методики пробоподготовки для измерения масс-спектров МАЛДИ и химической модификации различных типов аналитов, включая низкомолекулярные полиэтилен- и полипропиленгликоли, блок-соолигомеры этилен и полипропиленгликолей, этоксилированные и пропоксилированные глицерины, функционализированные полиалкиленгликоли, полиэтиленимины, замещенные силсесквиоксаны, полисахариды.

3. На основе анализа масс-спектров МАЛДИ химически модифицированных силсесквиоксанов установлено число функциональных групп в индивидуальных олигомерах, сделаны выводы об их «двухмерном» или «трехмерном» строении, обнаружены полностью конденсированные олигомеры.

4. Впервые предложено использование химической модификации путем образования оснований Шиффа для определения числа первичных амино-групп в олигомерных соединениях. Методика использована для установления зависимости между массой олигомера, количеством мономерных звеньев и числом свободных амино-групп в полиэтилениминах.

5. Обнаружен матричный эффект, связанный с возможностью протекания реакции транс-силилирования в совместном растворе модифицированного аналита и матрицы, при условии наличия в матрице функциональной группы с подвижным атомом водорода.

152

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Половков, Николай Юрьевич, 2012 год

Список литературы

1. Заикин В.Г. Масс-спектрометрия синтетических полимеров // Всероссийское масс-спектрометрическое общество, Москва, 2009.

2. Quirke J.M.E., Adams C.L.,Van Berkel G.J. // Anal. Chem. 1994. Vol. 66. P. 1302-1313.

3. Zaikin V. G., Halket J. M. Derivatization in mass spectrometry 2. Acylation // Eur. J. Mass Spectrom. 2003. Vol. 9(5). P. 421-434.

4. Furuumi N., Amano D., Xu Y.J., Samejima K., Niitsu M., Shirahata A. Ionspray ionization-mass spectrometric separation and determination of heptafluorobutyryl derivatives of polyamines // Anal. Biochem. 1998. Vol. 265. P. 253-259.

5. Kirschbaum J., Rebscher K., Bruckner H. Liquid chromatographic determination of biogenic amines in fermented foods after derivatization with 3,5-dinitrobenzoyl chloride // J. Chromatogr. 2000. Vol. 881. P. 517-525.

6. Loukou Z., Zotou A. Determination of biogenic amines as dansyl derivatives in alcoholic beverages by high-performance liquid chromatography with fluorimetric detection and characterization of the dansylated amines by liquid chromatography-atmospheric pressure chemical ionization mass spectrometry //J. Chromatogr. 2003. Vol. A 996. P. 103-113.

7. Dalvie D.P., O'Donnell J.P. Characterization of polar metabolites by ionspray tandem mass spectrometry following dansylation // Rapid Commun. Mass Spectrom. 1998. Vol. 12. P. 419-431.

8. Feistner G.J., Liquid chromatography-electrospray tandem mass spectrometry of dansylated polyamines and basic amino acids // J. Mass Spectrom. 1995. Vol. 30. P. 1546-1560.

9. Bobeldijk I., Broess K., Speksnijder P., van Leerdam T. Determination of the herbicide amitrole in water with pre-column derivatization, liquid chromatography and tandem mass spectrometry // J. Chromatogr. 2001. Vol. A 938. P.15-23.

10. Chen S., Li K.W. Negative ion liquid secondary ion mass spectrometry and tandem mass spectrometric analysis of the molecular species of

aminophospholipids as 9-fluorenylmethyloxycarbonyl derivatives // Anal. Chim. 1996. Vol. 326. P. 127-146.

11. Blum W., Aicholz R., Ramstein P., Kuhnôl J., Froestl W., Desrayaud S. Determination of the GABAB receptor agonist CGP 44532 (3-amino-3-hydroxyprolylmethylphosphonic acid) in rat plasma after pre-column derivatization by micro-high-performance liquid chromatography combined with negative electrospray tandem mass spectrometry // J. Chromatogr. B. 2000. Vol. 748. P. 349-355.

12. Leavens W.J., Lane S.J., Carr R.M., Lockle A.M., Waterhouse I. Derivatization for liquid chromatography/electrospray mass spectrometry: synthesis of tris(trimethoxyphenyl)phosphonium compounds and their derivatives of amine and carboxylic acids // Rapid Commun. Mass Spectrom. 2002. Vol. 16. P. 433-441.

13. Lee P.J., Chen W., Gebler J.C. Qualitative and quantitative analysis of small amine molecules by MALDI-TOF mass spectrometry through charge derivatization // Anal. Chem. 2004. Vol. 76. P. 4888-4891.

14. Spikmans V., Lane S.J., Leavens B., Manz A., Smith N.W. On-line on-chip post-column derivatization reactions for pre-ionization of analytes and cluster analysis in gradient liquid chromatography/electrospray mass spectrometry // Rapid Commun. Mass Spectrom. 2002. Vol. 16. P. 1377-1390.

15. Barry S.J., Carr R.M., Lane S.J., Leavens W.J., Monté S., Waterhouse I. Derivatization for liquid chromatography/electrospray mass spectrometry: synthesis of pyridinium compounds and their amine and carboxylic acid derivatives // Rapid Commun. Mass Spectrom. 2003. Vol. 17. P. 603-611.

16. Fuchslueger U., Rissler K., Grether H.-J., Grassebauer M. High-performance liquid-chromatography-atmospheric pressure negative chemical ionization mass spectrometry of 2,4-dinitrophenyl derivatives of amines. Application in epoxy chemistry // J. Chromatogr. A. 1997. Vol. 777. P. 193.

17. Tholey A., Wittmann C., Kang M.-J., Bungert D., Hollemeyer K., E. Heinzle Derivatization of small biomolecules for optimized matrix-assisted laser desorption-ionization mass spectrometry // J. Mass Spectrom. 2002. Vol. 37. P. 963-979.

18. Suzuki Y. Derivatization reagents designed for increased ESI response // Workshop report on the 49th Conference on Mass Spectrometry and Allied Topics. Chicago. Illinois. 2001.

19. Kim B.-H., Lin S.C., Lee H.J., Ok J.H. Reversed-phase liquid chromatographic method for the analysis of aminoglycoside antibiotics using pre-column derivatization with phenylisocyanate // Biomed. Chromatogr. 2003. Vol. 17. P. 396-413.

20. Ligon W.V., Dorn S.B. Mass spectrometric determination of amines after formation of a charged surface-active derivative // Anal. Chem. 1986. Vol. 58. P. 1889-1901.

21. Song Y., Quan Z., Liu Y.M. Assay of histamine by nano-liquid chromatography/tandem mass spectrometry with a packed nanoelectrospray emitter // Rapid Commun. Mass Spectrom. 2004. Vol. 18. P. 2818-2824.

22. Deterding L.J., Gross, M.L. Tandem mass spectrometry for identifying fatty acid derivatives that undergo charge-remote fragmentations // Org. Mass Spectrom. 1988. Vol. 23. P. 169-178.

23. Chang S. and Watson J.T. Charge-remote fragmentation during FAB-CAD-B/E linked scan mass spectrometry of aminoethyl-triphenylphosphonium derivatives of fatty acids // J. Am. Soc. Mass Spectrom. 1992. Vol. 3. P. 769-779.

24. Cartwright A.J., Jones P., Wolff J.-C., Evans E.H. Derivatization of carboxylic acid groups in pharmaceuticals for enhanced detection using liquid chromatography with electrospray ionization tandem mass spectrometry // Rapid Commun. Mass Spectrom. 2005. Vol. 19. P. 1058-1071.

25. Halket J.M., Waterman., D., Przyborowska A.M., Patel R.K.P., Fraser P.D., Bramley P.M Chemical derivatization and mass spectral libraries in metabolic profiling by GC/MS and LC/MS/MS // J. Experiment. Botany. 2005. Vol. 56. P. 219-225.

26. Yang Y., Griffiths W.J., Lindgren J.A., Sjovall J. Liquid-chromatography mass-spectrometry with collision-induced dissociation of arachidonic acid metabolites derivatized with aminobenzenesulphonic acid // Rapid Commun. Mass Spectrom. 1995. Vol. 9. P. 289-299.

27. Griffiths W.J., Brown A., Reimendal R., Yang Y., Zhang J., Sjovall J. A comparison of fast atom bombardment and electrospray as methods of ionization in the study of sulphated- and sulphonated-lipids by tandem mass spectrometry // Rapid Commun. Mass Spectrom. 1996. Vol. 10. P. 1169-1181.

28. Griffiths W.J. Tandem mass spectrometry in the study of fatty acids, bile acids, and steroids // Mass Spectrom. Rev. 2003. Vol. 22. P. 81-93.

29. Johnson D.W. Dimethylaminoethyl esters for trace, rapid analysis of fatty acids by electrospray tandem mass spectrometry // Rapid Commun. Mass Spectrom. 1999. Vol. 13. P. 2388-2399.

30. Zaikin V. G., Halket J. M. Derivatization in mass spectrometry. 3. Alkylation(arylation) // Eur. J. Mass Spectrom. 2004. Vol. 10 (1). P. 1-19.

31. Voyksner R.D., Bush E.D., Brent D. Derivatization to improve thermospray HPLC/MS sensitivity for the determination of prostaglandins and thromboxane B2 // Biomed. Environ. Mass Spectrom. 1987. Vol. 14. P. 523-231.

32. Johnson D.W. Alkyldimethylaminoethyl ester iodides for improved analysis of fatty acids by electrospray ionization tandem mass spectrometry // Rapid Commun. Mass Spectrom. 2000. Vol. 14. P. 2019-2026.

33. Johnson D.W., Trinh M.-U. Analysis of isomeric long-chain hydroxyl fatty acids by tandem mass spectrometry: application to the diagnosis of long-cahin 3-hydroxyacyl CoA dehydrogenase deficiency // Rapid Commun. Mass Spectrom. 2003. Vol. 17. P. 171-179.

34. Kushnir M.M., Komaromy-Hiller G., Shushan B., Urry F.M., Roberts W.L. Analysis of dicarboxylic acids by tandem mass spectrometry. High-throught quantitative measurement of methylmalonic acid in serum, plasma, and urine // Clin. Chem. 2001. Vol. 47. P. 1993-2001.

35. Magera M.J., Helgenson J.K., Matern D., Rinaldo P. Methylmalonic acid measurement in plasma and urine by stable-isotope dilution and electrospray tandem mass spectrometry // Clin. Chem. 2000. Vol. 46. P. 1804-1817.

36. Chace D.H., Diperna J.C., Kalas T.A., Johnson R.W., Naylor E.W. Rapid diagnosis of methylmalonic and propionic acidemias: quantitative tandem mass spectrometric analysis of propionylcarnitine in filter-paper blood specimens obtained from newborns // Clin. Chem. 2001. Vol. 47. P. 2040-2049.

37. Carvalho V.M., Kok F. Extractive alkylation associated to APCI for analysis of methylmalonic acid in serum // Proceedings of the 53rd ASMS Conference. San Antonio. 2005.

38. Kim, H-Y., Sawazaki, S. Structural analysis of hydroxy fatty acids by thermospray liquid chromatography/tandem mass spectrometry // Biol. Mass Spectrom. 1993. Vol. 22. P. 302-310.

39. Lee S.H., Williams M.V., Dubois R.N. and Blair I.A. Target lipidomics using electron capture atmospheric pressure chemical ionization mass spectrometry // Rapid Commun. Mass Spectrom. 2000. Vol. 17. P. 2168-2177.

40. Bartok T., Komoroczy R., Borcsok G., Sag F., Hegyes P., Bartok M. A new derivatization reaction for the identification and determination of organic acids by positive-ion electrospray mass spectrometry // Rapid Commun. Mass Spectrom. 1998. Vol. 11. P. 133-141.

41. Zaikin V. G., Halket J. M. Derivatization in mass spectrometry. 5. Specific Derivatization of Monofunctional Compounds // Eur. J. Mass Spectrom. 2005. Vol. 37 (11). P. 127-160.

42. Vetter W., Meister W., Oesterhelt G. 2-Alkylamidazoline derivative to control fatty acid fragmentation upon electron impact and electrospray ionization // J. Mass Spectrom. 1998. Vol. 33. P. 461-475.

43. Griffiths W.J., Zhang J., Sjovall J. Charge-remote fragmentation of bile acids derivatized with aminosulphonic acids // Rapid Commun. Mass Spectrom. 1993. Vol. 7. P. 235-247.

44. Peters R., Hellenbrand J., Mengerink Y., Van der Wal Sj. On-line determination of carboxylic acids, aldehydes and ketones by high-performance liquid chromatography-diode array detection-atmospheric pressure chemical ionization mass spectrometry after derivatization with 2-nitrophenylhydrazine // J. Chromatogr. 2004. Vol. 1031. P. 35-41.

45. Nakamura T., Takazawa T., Maruyama-Ohkai Y., Nagaki H., Kinoshita T. Location of double bonds in unsaturated fatty alcohols by microderivatization and liquid secondary ion tandem mass spectrometry // Anal. Chem. 1993. Vol. 65. P. 837-748.

46. Singh G., Gutierrez A., Xu K., Blair I.A. Liquid chromatography/electron capture atmospheric pressure chemical ionization/mass spectrometry: analysis of pentafluorobenzyl derivatives of biomolecules and drugs in the attomole range // Anal. Chem. 2000. Vol. 72 P. 3007-3014.

47. Johnson D.W., ten Brink H.J., Jakobs C. A rapid screening procedure for cholesterol and dehydrocholesterol by electrospray ionization mass spectrometry // J. Lipid Res. 2001. Vol. 42. P. 1699-1710.

48. Creasy W.R. Postcolumn derivatization liquid chromatography/mass spectrometry for detection of chemical-weapons-related compounds // J. Am. Soc. Mass Spectrom. 1999. Vol. 10. P. 440-453.

49. Astot C., Dolezal K., Moritz T., Sandberg G. Precolumn derivatization and capillary liquid chromatographic/frit-fast atom bombardment mass spectrometric analysis of cytokinins in Arabidopsis thaliana // J. Mass Spectrom. 1998. Vol. 33. P. 892-901.

50. Nordstrom A., Tarkowski P., Tarkowska D., Dolezal K., Asatot C., Sandberg G., Moritz T. Derivatization for LC-electrospray ionization-MS: a tool for improving reversed-phase separation and ESI responses of bases, ribosides, and intact nucleotides // Anal. Chem. 2004. Vol. 76. P. 2869-2878.

51. Van Berkel G.J., McLuckey S.A., Glish G.L. Electrochemical origin of radical cations observed in electrospray ionization mass spectra // Anal. Chem. 1992. Vol. 64. P. 1586-1595.

52. Van Berkel G.J., Quirke J.M.E, Tigani R.A., Dilley A.S., Covey T.R. Chemical derivatization for electrospray ionization mass spectrometry. 3. Electrochemically ionizable derivatives // Anal. Chem. 1998. Vol. 70. P. 15441555.

53. Quirke J.M.E., Hsu Y.-L., Van Berkel G.J., Ferrocene-based electroactive derivatizing reagents for the rapid selective screening of alcohols and phenols in natural products mixtures using electrospray-tandem mass spectrometry // J. Nat. Prod. 2000. Vol. 63. P. 230-241.

54. Hayen H., Karst U. Strategies for the liquid chromatographic-mass spectrometric analysis of non-polar compounds // J. Chromatogr. A. 2003. Vol. 1000. P. 549-561.

55. Quirke J.M.E., Van Berkel G.J. Electrospray tandem mass spectrometric study of ferrocene carbamate ester derivatives of saturated primary, secondary and tertiary alcohols // J. Mass Spectrom. 2001. Vol. 36. P. 179-188.

56. Diehl G., Liesener A., Karst U. Liquid chromatography with post-column electrochemical treatment and mass spectrometric detection of non-polar compounds // Analyst 2001. Vol. 126. P. 288-300

57. Diehl G., Karst U. Fast liquid chromatography-electrochemistry-mass spectrometry of ferrocenecarboxylic acid esters // J. Chromatogr. A. 2002. Vol. 974. P. 103-113/

58. Van Berkel G.J, Quirke J.M.E, Tigani R.A, Dilley A.S, Covey T.R. Chemical derivatization for electrospray ionization mass spectrometry. 3. Electrochemically ionizable derivatives // Anal. Chem. 1998. Vol. 70. P. 15441551.

59. Young M.K, Williams D, Dinh N, Lee T.D. // Proceedings of the 47th ASMS Conference on Mass Spectrometry and Allied Topics (Dallas). 1999. P. 1825-1831.

60. Svatos A, Antonchik A, Schneider B. Determination of brassinosteroids in the sub-femtomolar range using dansyl-3-aminophenylboronate derivatization and electrospray mass spectrometry // Rapid Commun. Mass Spectrom. 2004. Vol. 18. P. 816-820.

61. Anari M.R, Bakhtiar R, Zhu B, Huskey S, Franklin R.B, Evans D.C. Derivatization of ethinylestradiol with dansyl chloride to enhance electrospray ionization: application in trace analysis of ethinylestradiol in rhesus monkey plasma // Anal. Chem. 2002. Vol. 74. P. 4136-4147.

62. Shou W.Z, Jiang X, Naidong W. Development and validation of a high-sensitivity liquid chromatography/tandem mass spectrometery (LC/MS/MS) method with chemical derivatization for the determination of ethinyl estradiol in human plasma // Rapid Commun. Mass Spectrom. 2004. Vol. 18. P. 414-427.

63. Zhang F, Bartels M.J, Brodeur J.C, McClymont E.L, Woodburn K.B. Quantitation of 17a-ethinylestradiol in aqueous samples using liquid-liquid phase extraction, dansyl derivatization, and liquid chromatography/positive electrospray tandem mass spectrometry // Rapid Commun. Mass Spectrom. 2004. Vol. 18. P. 2739-2750.

64. Nelson R., Singh R., O'Kane D. Simultaneous determination of estradiol and estrone in human serum by LC-MS/MS following derivatization with dansyl chloride // Proceedings of the 51st ASMS Conference on Mass Spectrometry and Allied Topics. Montreal. 2003.

65. Xia Y.-Q., Chang S.W, Patel S, Bakhtiar R, Karanam B., Evans D.C. Trace level quantification of deuterated 17(3-estradiol and estrone in ovariectomized mouse plasma and brain using liquid chromatography/tandem mass spectrometry following dansylation reaction // Rapid Commun. Mass Spectrom. 2004. Vol. 18. P. 1621-1635.

66. Dunphy J.C., Pessler D.G., Morrall S.W., Evans A., Robaugh D.A., Fujimoto G., Negahban A. Derivatization LC/MS for the simultaneous determination of fatty alcohols and alcohol ethoxylate surfactants in water and wasterwater samples // Environ. Sci. Technol. 2001. Vol. 35. P. 1223-1235.

67. Nakagawa Y., Hashimoto Y. Polar derivatization of 5a-dihydrotestosterone and sensitive analysis by semimicro-LC/ESI-MS // J. Mass Spectrom. Soc. Jpn. 2002. Vol. 50. P. 330-338.

68. Chatman K., Hollenbeck T., Hagey L., Vallee M., Purdy R., Weiss F., Siuzdak G. Nanoelectrospray mass spectrometry and precursor ion monitoring for quantitative steroid analysis and attomole sensitivity // Anal. Chem. 1999. Vol. 71. P. 2358-2364.

69. Ostah N., Lawson G., Zafar S., Harrington G., Hicks J. Investigation of amine and polyol functionality in extracts of polyurethane wound management using MALDI-MS//Analyst 2000. Vol. 125. P. 111-121.

70. Liu S., Sjovall J. and Griffiths W.J. Analysis of oxosteroids by nanoelectrospray mass spectrometry of their oximes // Rapid Commun. Mass Spectrom. 2000. Vol. 14. P. 390-400.

71. Noben P., Gielen B., Royackers E., Missoten M., Jacobs A., Raus J. A highperformance liquid chromatography/tandem mass spectrometric screening method for eight synthetic corticosteroids in bovine feces and the simultaneous differentiation between dexamethasone and betamethasone // Rapid Commun. Mass Spectrom. 2002. Vol. 16. P. 1590-1597.

72. Shimada K. and Mukai Y. Studies on neurosteroids. VII. Determination of pregnenolone and its 3-stearate in rat brain using high-performance liquid

chromatography-atmospheric pressure chemical ionization mass spectrometry // J. Chromatogr. 1998. Vol. B 714. P. 153-159.

73. Kolliker S, Oehme M. Structure elucidation of 2,4-dinitrophenylhydrazone derivatives of carbonyl compounds in ambient air by HPLC/MS and multiple MS/MS using atmospheric chemical ionization in the negative ion mode // Anal. Chem. 1998. Vol. 70. P. 1979-1986.

74. Grosjean E, Green P.G. Grosjean D. Liquid chromatography analysis of carbonyl (2,4-dinitrophenyl)hydrazones with detection by diode array ultraviolet spectroscopy and by atmospheric pressure negative chemical ionization mass spectrometry // Anal. Chem. 1999. Vol. 71. P. 1851-1864.

75. Zurek G, Luftmann H, Karst U. HPLC-APCI-MS with calibration based on stable isotope-labelled internal standards for the quantification of carbonyls in air samples // Analyst 1999. Vol. 124. P. 1291-1298.

76. Kolliker S, Oehme M, Merz L. Unusual MSn fragmentation patterns of 2,4-dinitrophenylhydrazine and its propanone derivative // Rapid Commun. Mass Spectrom. 2001. Vol. 15. P. 2117-2121.

77. Brombacher S, M. Oehme, Dye C. Qualtitative and quantitative analysis of carbonyl compounds in ambient air samples by use of an HPLC-MSn method // Anal. Bioanal. Chem. 2002. Vol. 372. P. 622-630.

78. Nagy K, Pollreisz F, Takats Z, Vekey K. Atmospheric pressure chemical ionization mass spectrometry of aldehydes in biological matrices // Rapid Commun. Mass Spectrom. 2004. Vol. 18. P. 2473-2488.

79. Van den Bergh V, Vanhees I, De Boer R, Compernolle F, Vinckier C. Identification of the oxidation products of the reaction between D-pinene and hydroxyl radicals by gas and high-performance liquid chromatography with mass spectrometric detection//J. Chromatogr. A. 2000. Vol. 896. P. 135-140.

80. Van den Bergh V, Coeckelberghs H, Vanhees I, De Boer R, Compernolle F, Vinckier C. HPLC-MS determination of the oxidation products of the reaction between alpha- and beta-pinene and OH radicals // Anal. Bioanal. Chem. 2002. Vol. 372. P. 630-637.

81. Andreoli R, Manini P, Corradi M, Mutti A, Niessen W.M.A. Determination of patterns of biologically relevant aldehydes in exhaled breath

condensate of healthy subjects by liquid chromatography/atmospheric pressure chemical ionization mass spectrometry. // Rapid Commun. Mass Spectrom. 2003. Vol. 17. P. 637-645.

82. Zwiener C., Glauner T., Frimmel F.H. Method optimization for the determination of carbonyl compounds in disinfected water by DNPH derivatization andLC-ES-MS-MS //Anal. Bioanal. Chem. 2002. Vol. 372. P. 615-921.

83. Griffiths W.J., Liu S., Alvelius G., Sjovall J. Derivatization for the characterization of neutral oxosteroids by electrospray and matrix-assisted laser desorption ionization tandem mass spectrometry: the Girard P derivative // Rapid Commun. Mass Spectrom. 2003. Vol. 17. P. 924.

84. Shackleton C.H.L., Chuang H., Kim J., de la Torre X., Segura J. Electrospray mass spectrometry of testosterone esters: Potential for use in doping control // Steroids. 1997. Vol. 62. P. 523-519.

85. Griffiths W.J., Alvelius G., Sjovall J. High-energy collision-induced dissociation of oxosteroids derivatized to Girard hydrazones // Eur. J. Mass Spectrom. 2004. Vol. 10. P. 63-74.

86. Johnson D.W. Ketosteroid profiling using Girard T derivatives and electrospray ionization tandem mass spectrometry: direct plasma analysis of androstenedione, 17-hydroxyprogesterone and Cortisol // Rapid Commun. Mass Spectrom. 2005. Vol. 19. P. 193-201.

87. Dunaway C.M., Dirr M.K., Stoffolano P.J., Wehmeyer K.R., Baker T.R. Derivatization of the biomarker corticosterone to obtain a lower limit of quantitation using HPLC/ESI-MS/MS // Proceedings of the 48th ASMS Conference on Mass Spectrometry and Allied Topics. 2000. Long Beach. MPD 155.

88. Lai C.C., Tsai C.H., Tsai F.J., Lee C.C., Lin W.-D. Rapid monitoring assay of congenital hyperplasia with microbore high performance liquid chromatography/electrospray ionization tandem mass spectrometry from dried blood spots // Rapid Commun. Mass Spectrom. 2001. Vol. 15. P. 2145-2159.

89. Lai C.C., Tsai C.H., Tsai F.J., Wu J.Y., Lin W.D., Lee C.C. Monitoring of congenital adrenal hyperplasia by microbore HPLC-electrospray ionization tandem mass spectrometry of dried blood spots // Clin. Chem. 2002. Vol. 48. P. 354-364.

90. O'Brien-Coker J.C, Perkins G, Mallet A.I. Aldehyde analysis by high performance liquid chromatography/tandem mass spectrometry // Rapid Commun. Mass Spectrom. 2001. Vol. 15. 920-931.

91. Dharmasiri K.A.N, Huang Z.-H, Watson J.T. Derivatives for detection of anabolic ketosteroids by positive electrospray mass spectrometry // Proceedings of the 41st ASMS Conference on Mass Spectrometry and Allied Topics. San Francisco. 1993. P.541a.

92. Higashi T, Takido N, Shimada K. Detection and characterization of 20-oxosteroids in rat brains using LC-electron capture APCI-MS after derivatization with 2-nitro-4-trifluoromethylphenylhydrazine // Analyst 2003. Vol. 128. P.130-143.

93. Zaikin V. G, Halket J. M. Derivatization in mass spectrometry 1. Silylation //Eur. J. Mass Spectrom. 2003. Vol. 9(1). P. 1-21.