Изучение клеток с микроядрами в оценке возрастных закономерностей пролиферации эпителия щитовидной железы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.25, кандидат биологических наук Кораблева, Татьяна Владимировна

• Кораблева, Татьяна Владимировна
• кандидат биологических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Кораблева, Татьяна Владимировна

ВВЕДЕНИЕ.

Глава I. ЗНАЧЕНИЕ ЦИГОГЕНЕТИЧЕСКОГО МЕТОДА ИЗУЧЕНИЯ МИКРОЯДЕР В ОЦЕНКЕ ВОЗРАСТНЫХ ЗАКОНОМЕРНОСТЕЙ ПРОЛИФЕРАЦИИ КЛЕТОЧНЫХ ПОПУЛЯЦИЙ (обзор литераторы}

1.1. Молекулярные основы возрастных вменений клеточного генома.

1.2. Свойства н механизмы образования клеток с HHtpOUplMH

1.3. Возрастные особенности ибрвЮМШШ игакронуклеированиых клеток в специализированных популяциях. . .г,,,.

1-4, Клеточное деление, соматическая полиплоидия и нарушен 11ч генома фолликулярных тироцитов в онтогенезе.

Глам II МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава Ш. АНАЛИЗ КЛЕТОК С МИКРОЯДРАМИ В ОЦЕНКЕ ОНТОГЕНЕТИЧЕСКИХ ЗАКОНОМЕР1ЮСТЕЙ ПРОЛИФЕРАЦИИ ФОЛЛИКУЛЯРНОГО ЭПИТЕЛИЯ

ЩИТОВИД НОЙ ЖЕЛЕЗЫ.

Ш-Е Микроскопически* ttpyttypa мнкроядер.

111.2. Возрастная динамика содержания микронуклеировлнных тироитов.

111.3. Морфометричеека* характеристика мнкроядер.

BL4. Плоидность тирсондной паренхимы.

111,5, Пролиферация фолликулярного эпителия в постнатииш! онтогенезе

1II 5.1 Митошчсскм ШГГИИНОСТЬ тироцитов.

IIL5.2. Синтез ДНК в фолликулярном и иигсрфоллнкуляриом эпителии.

IIL5J Формирование генетически поврежденных клеток п фолликулах р¡иного размера.

Глава IV. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изучение клеток с микроядрами в оценке возрастных закономерностей пролиферации эпителия щитовидной железы»

Люнщлежуяге яряД.-иг-чм Многие современные Молекулярные корим старения рассматривают накопление повреждений генетического аппарата соматических клеток в качестве одной vit ведущих причин развития №> цветных нарушений их структуры и функции {'L AMedvcdev,l99D, G M.Mnrlin.lWl, Physiological basis of aging aftd geriatrics, 199J; AA-Morley. 1995).

ФомшуИфИкй эпителий щитовидной жслеты (ЩЗК) хapaxTepiлустся высокой лабильностью в ответ на воздействие различных эндогенных и экзогенных факторов (Щитовидная железа: Фундаментальные аспекты, 199В), на цротнже1гаи поетниталыного онтогеием такоиомерно юнашпа основные гнстофипнолотческие ХИрбктернстикк тзгреоидной шренхкыы, в том числе и « пролнферлтнвная активность (В.Л.Быков, 1979; M Habraand.NJ,Sariis, 2003). Последний феномен проявляется не только в неодинаковой ннтсисив-itocni процессов клеточноги деления в разные возрастные периоды (Ю-А.Ромаяов с сОМт.,1%9; K Christov et al.,1973; E.Conde el al ,¡992), но н в постепенном накоплении неренарнруемых дефектов генома пгроцнтов, Прщтл'Щчл к развитию очаговых iitiiepíuiacTUHccKHX и неоцластичсских изменений органа (SAfañotti et ¡ti,1995; MTakaofca et at. [99$; KXrohn et al.JOOS).

Ассоциированные с возрастом генетические повреждения. приводящие ü развитию нестабильности хромосомного аппарата (Р A Jacobs et a] ,1961, BSGangíiJ)', J 993; A.Wojlda, М.ОДаДШЭД могут быть шауыиЯфОМШ «a свегоолтнческом уровне при метвфдзном пилим делящихся клеток или с Помощью iMtoi еретического метода анализа мнкроядер- Последний основан Ha учете в популяции количества постмитотических интерфвзных клеток с добавочными ядерными тельцами (мнкроялрамн), образующимися из ацентрических фрагментов или целых хромосом в результате воздействия генотокснческих факторов разной природы {W.Schmid,197S; J A.Hcddlc d al. ,1991, А.ДДурнев. С.Б.Середеннл,1998, M.FencchJOOO).

В серии исследований, проведенных ранее «в кафедре пимолопги Ярославской государственной медицинокоЯ академии, покатано. что микроядериый тест на модели (фЩрюМЙ стимулированных к размножению фолликулярных тироцитов в опытах ¡n vivo является информативным методом оценки интенсивности влияния гснотоксичных агентов на шреоидпу» паренхиму (АВ-Павлов с соаат-, 2001Д006; М-А.Гоисбурзский, 2005).

Однако данные о возможности использования цитогеистичсекого метода исследования мнкроядер для изучения возрастных перестроек популяции фолликулярных тироцитов в условиях естественного урони клеточного обновлен«* эпителия ЩЖ ■ литературе отсутствуют. Продолжает «таиться недостаточно Изученным ряд важных количественных характеристик проли-фератнвиой я« нвиости тиреоилиого эпителия, необходимых для понимания механизмов развитая нестабильности генома нрн старении (возрастная динамика формирования хромосомны* аберраций, величин су-точного лролмфе-ратиаиого пула и плотности паренхимы). Учтивая очаговый характер и неравномерную выраженность пролиферд! и иных процессов На уровне oprnitn (РЛГнбиулян, Ю-А-Ромаков, 1966: В.Л.Глумова с еоавт.,1980; A Faggiano ct al.,2004), существенный интерес представляет исследование возрастной динамики размножении железистых клеток в составе основных структурных компонентов тиреоидной паренхимы (фолликулы, и i гтерфодл и кулярн ы й гкпи-телнй).

Или ucc.icitf>«aNiin • анадиз возрастных закономерностей пролиферации фолликулярного эпителия щитовидной железы, приводящих к образованию клеток с мнкроядрами и проведение на зтой основе оценки развития нестабильности цкома данной клеточной линии при старении

Задачи ист. мЛошшй: 1. Изучение возрастной днианнхи величин читотического индекса и суточного проднфердтивного пула популяции фолликулярных тироцитов шн-товилиой железы лабораторных белых крыс

2- Исследование частоты патологических митозов железистых клеток в основные возрастные периоды.

3. Анализ динамики содержания клеток с микроядрами в тнреондной паренхиме на протяжении постнагалыюго онтогенеза

4. Морфомстричсскос н цигофотометрическое {содержание ДНК) изучение ядерного аппарата м нкроиуклеиромн им* тироинтов

5. Изучение особенностей возрастной динамики пролиферации железистых клеток в составе основных структурных компонентов тнреондной паре их ими

Научная пышна Вперньк к раммш »клостиого исследования детально исследована возрастная динамика формирования м нкронутспсированных тироцнтои во взаимосвязи с пролнферативиыми процессами в тнреонд-ной паренхиме. Установлен закономерный фазовый характер феномена онтогенетического накоплении тнроцнтов с микроядрамн. ьыяюена прямая корреляция между интенсивностью процессов мтфопуммоин и частотой патологических митозов желез истых клеток 1Ю мере старения организма

При цитофотометрическом и морфомстрическом анализе ядерных структур аберрантных клеток впервые установлено, что возрастное формирован}« тнроцнтов с мнкроядрами связано с активизацией кластогенных механизмов поврежден}« генетического аппарата и не соор<тождде1ся процессами их полнплондизаими

Впервые определи« величина суточного пролнфератнвного пула тироцитов на уровне тнреондной паренхимы в целом и отдельных се компонентов (фолликулы различных размерных классов, интерфолликуляриый ut и гелий) в основные шмрасшые периоды постиатадыюго рюиитня крыс Основные теоретические положения, «ыноеимые на ланиту

1. lía протяжении пoctiштильного онтогенеза крыс в фолликулярном эпителии увеличивается частота патологических митозов и клеток с микроядрамн, наиболее интенсивно эти процессы выражены при старении.

2. Сыпанное с возрастом формирование микронукленроппных тнроии-тов развивается m райках сохранения диплоидного генома.

3, В основе феномена усиленно™ формирования микроиукленрованных лгрощктов при старекин дежаг ((¡«имущественно joacroreMMUt мешинтмы повреждения генома железистых клеток

H ну чип- пгшкт и ч ескаа шачичммь Полученные результаты конкретизируют механизмы и условия формирования клеток фолликулярного эпителия щитовидной железы с ыикроялрамн а постиатадьном онтогеиеэе, как чуастаителыюго морфологического маркера развития позрастной нестабильности их генома. Оценка иитенснмюсти обраюйания гнрошгтов с чигроядрами в условиях естественного уровня клеточного обновления в тнреондной паренхиме и о жег быть использована для раннего выявления ассоциированных с возрастом нарушении пролиферации железистого эпителия в качестве ОДНОГО Hl возможных морфологических критериев оценки риска развития неоплпетических поражений Органа, a также при биомонитормпе влияния антропогенных факторов >а паренхиму щитовидной железы.

Заключение диссертации по теме «Гистология, цитология, клеточная биология», Кораблева, Татьяна Владимировна

вы воды Пролнфсративиая активность фол л юсу л я р н ы* тироцнтов максимально у новорожденных крыс и равномерно снижается к концу периода полового созревания, У жнвощых репродуктивного нозркп и при старении суточный пролиферативный пул иселетистых клеток ставил тируется иа уровне 0,9-1.1%.

2. На протяжении поетнатального развития наблюдается шестикратное увеличение частоты форм патологн'меких митозов тироцнтов, связанных как с кластогениым (отставание и фрапленнидня хромосом в метафазе, набухание II слипание хромосом) так н ваеугеииым (рассеивание хромоеом л метафазе, трсхгрупповая метафаза. многополюсный митоз, асимметричный митоз) мехв1ппмлмн повреждена генепгчсского аппарата железистых клеток.

3- Возрастная динамика содержания мнкронукленрованиых клеток в тиреоидноП паренхиме имеет фмо«ый характер: двукратный подъем в течение первого месяца, стабилизация показателя на уровне 0,3-0.4% в ювеиильнм и репродуктивном возрасте, выраженный рост до 1,1-13% у старых животных.

4. Популяция фолликулярных троинтов на протяжешм жизни имеет преимущественно диплоидный характер, количество полиплоидных (2с х 2) клеток увеличивается с 0,12% у новорожденных до 2.2% у старых крыс Формирование мнкронукленрованиых тироиитов не с о« гро м ждается их поли плоили за циеН

5. В щитовидной железе гсмитнрондэктомироваиных половозрелых животных при моделировании кдостогенного воздействия (гамма-облучение) формируются тнроцнты только с мелкими, а анеутенного повреждения (введение колхицина) - с более крупными ыикроядрами, еостаадиющими соответственно 7.6%(!-19%}н 32%(19-43%) от суммарного объема ядерного аппарата оберршгтной клетки.

6. Средний объем мнкроялер в тирошгтах при старении уменьшаете* ни 20% по сравнению е новорожденными та счет прогрессирующего hçMTUOU частоты рммеришх классов мелких мнхроядер. Это с в ндегельсгв) ег, что и основе феномена усиленного формирования аберрантных тирощгтов у сирых животных лежит активизация шнюпшк механизмов повреждения генома железистых клеток

7. На протяжении поста зталыгого развития крыс пролиферативные процессы в тирсоидной паренхиме в большей мере обеспечиваются делением клеток в составе мелких фолликулов и, в меньшей степени, - в составе фолликул» среднею размера; патологические митозы тирощгтов наиболее часто обнаруживаются в мелких фолликулах.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Разработанная модель постановки микроядерного теста с использованием в качестве клеточной системы популяции фолликулярных тнроютов без доекммн тельной стимуляции гтроднферагивной активности тиреоидной паренхимы может был. рекомендована для углубленного морфологического анализа развития возрастной нестабильности генома тнрошгтои. раннего выявления ассоциированных с возрастом нарушений пролиферации эпителия, а также биомониторннга влияния антропогенных факторов на паренхиму щитовидной железы.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Кораблева, Татьяна Владимировна, 2007 год

1.Алешин БВ О некоторых спорных вопросах современной цитофизиологни щитовидной железы .■'.•' Успехи совр. биологии - 1982. - Т. 93. -Л 1, -С. 121-138

2. Алов НА, Цптофи-шатогия н патология митоза. М-: Медицина, 1972.-263 с.

3. Алов И-А , Казатгъев В В О судьбе отставших хромосом и микроидер И Доклады АН СССР. 1969. - Т. 187. - № I. - С. 191-192.

4. Лрхипснхо В.И. Фсдчеико Н-П, Некоторые особешюетм структурной организации щитовидной железы // Лрх.аиат. 1983- - Т, 85, -Ж 12.-С. 27-34.

5. Бродский В, Я., Урыиаева ИВ Клеточная полиплоидия Пролиферация и лнфференцнровка М. : Наука» 1981. -259 с.

6. Бродский В.Я. Полиплоидия в миокарде. Компенсаторный резерв сердил" Бгалл экстр, биод.- (995.-Т. 119.-JftS.-C-454-459.

7. Быков В.Л Гнстофи за юло г и я щитовидной железы в посткаталыюм онтогенезе // Ар*, анвт. -1979, Т. 76- - № X - С. 80-94,

8. БыковВ Л Стереологичсскяй ана/пгз щитовидной жеясш (обзор методов) Н Арх. анат. 1979а, - Т-77. - №7 -С, 124-132,

9. Быков В Л. Гетерогенность пуповидной железы млекопитающих и возрастные изменения органа // Арх. анат 1979Ь. - Т. 77. - 10. - С-61-71.

10. Гансбургский А Н,, Павлов А.В. Митоптческое происхождение двуядерных клеток в регенерирующем эндотелии Н Онтогенез, 1993. - Т. 24, - ^ 6. - С-79-82.

11. Гансбургский А-Н., Миро ТЛ„ Аиашкииа Е Н. Гансбургский М-А. Кинетика клеточной пролиферации в регакрирующей щитовидной железе И Морфология 2000, - Т. 117. - № 3. - С. 35.

12. Гаисбургский М.А, Анализ клеток с микроядрами в опенкепролиферации зютедн* щитовидной железы : авгореф. днсе. . канл. мед наук. / РГМУ. M , 2005. - 20 с,

13. Гнбадулнн P.A., Романов Ю.А. Щитовидная железа / Клеточное обновление / доя ред. Л.Д Лиознсра. Л. : Медицина, 1966- С 207-219.

14. Дурнев А.Д., Середении С-Б. Мута«»гы; скрининг и фармакологическая профилактика воздействий. М. : Медицина, 1998. -328 с,

15. Епифанова О.И., Тереких В В., Захаров А Ф. Радиоавтография. M, Высшая школа. 1977, - 246 с,

16. Западнюк ИЛ., Западнюк В.И., Захария Е.А. Лабораторные животные, Разведение содержание использование и эксперименте. -Киев. : Внша школа, 1974,

17. Зацепина О.В., Поляков В.Ю., Ченцов Ю.С. Образование ядерной оболочки вокруг метафазных хромосом иод действием гипотонии // Цитология. 1982. - Т. 24.- Л I.-C.S-10.

18. Захндов С,Т., Гордеем О.Ф,. Маршак ТЛ. Б|юлогнчсская модель ускоренного старения I. Динамика спонта)шых мутаций в сперматогенезе мыикй лшши SAM (ускоренно стареющих мышей) И Известия РАН : Биолога». 2001. - № I. - С. 23-30,

19. Ильнжкнх H.H., Идьниских И.Н. Бочаров Е.Ф. Цитогеиетнчсский гомеостпз и иммунитет. Новосибирск I (лука, 1986- -24« с.

20. Кирсеа ИМ., Зацепина О.В., Поляков 8.Ю., Чсндов Ю,С Ультра структура митотнческнх хромосом клеток СПЭВ при их обратимой искусственной «ЮЩМацш in vivo// Цитология. 19&8, - Т. 30.-»8.-С. 926-932.

21. Кропачова К , Мншурова Е. Продолжительность скрытого повреждения печени после окончания хронического у-облучения И Радиобиологи*, 1988. - Т.28, - AI, - С. 44-47.

22. Кропачова К , Мишурова Е. Индукция лате|гпюго повреждения печени цнклофосф амидом И Бюлп. зкегтер, биол 1989. -Т. 107. 6. С. 756-758.

23. Ликин Г.Ф. Биометрия. М. Высшая школа,! 980. -292 с.

24. Михайлова КЖ, Зацепина О-В. Структурные и имчуноиитохнмнчсс кие характеристики ядрышек, образованных в условиях трехмерно!) сепарации ядрышхового организатора хромосом И Цитология. -l993.-T.35.-te5.-C.3-9

25. Павлов A.B., Аихмшюна Е-М- Пролиферативиля активность типичных тироцитов и С- клеток в нормальной и регенерирующей щитовидной железе // Арх. анат. 1988. - Т.94. - Jftl. - С JM-99.

26. Павлов A.B. Пролиферагивная и функциональная активность парзтирощгтоя и иярофолликулярных (С-) клеток в регенерирующих околошнтовидных и щитовидной железах : лис доктора мед. наук. -Ярославль, 1990.

27. Федченхо Н П Некоторые проблемы структурной организации шитоаиляюй железы И Арх, аият, 1986 - Т,90, - Л 6, - С, Й2-89.

28. Хмельницкий О,К, Цитологическая и гистологическая диагностика заболеваний щитовидной железы. Руководство. Санкт-Петербург: СОТИС, 2002- 288 с,44. 1Цнтовидная железа: Фундаментальные аспекты > Рел А Н Кубарко и С-Яыаснта-- Минск-Нагасаки, 1998- -398 с,

29. Alben МП, Bücher N L R Laien! injury and repair in rat Нч-сг induced 10 regenerate at intervals after y-irnndiation U Cancer Res, 1960, - Vol-20.-P. 1514.

30. Allen J.W., Collins B.W„ Setzer R.W. Spermatid nticiwoclcus analysis of aging effects in hamsters 0 Mutet. Res, 1996. - Vol, 316 - N 5-6. -P. 261-266.

31. Arnes B.N. Shigenaga M.K. Oxidants are a major contributor to aging- HAaa- N Y. Acad. Sei. 1992- - Vol-663. - P. 85-96.

32. Auer G.U., liackdahl M„ Forsshmd GM, Askensten U.G. Plotdy levels in nonneoplastic and neoplastic thyroid cells И Anal Quant Cylol Hisiol -1985. Vol. 7. - N 2. - P. 97-106.

33. Bohr V.A. DNA repair fine structure and its relations to genomic Instability // Carcinogenesis. 1995. - Vol. 16. - P. 2885-2892.

34. Bolognesi C„ Abfoondwdolo A„ Swale R, |rt at,. Age-related increase of baseline frequencies of sister chromatid exchanges, chromosome aberrations, and MN in human lymphocytes // Cancer Epidemiol, Biomarkers, Prev. 1997. - Vo1.6. - P. 249-256.

35. Bolognesi C-, Lando C, Forni A. ct at.. Chromosomal damage and ageing: effect on tmcfomiclei frequency in peripheral blood lymphocytes // Age Ageing 1999 - Vol, 28. - N 4. - P 393-397

36. Brands R,F.,Sullivan L.M., O'Neil J.P. el al.| Measuremen to iHPRT mutant frequencies in T-lymphocytcs from healthy human population II MuiSL Re» 1993. - Vol. 285. - P. 267-279.

37. Bradsky V.Ya-, Uryvaeva 1,V. Genome Multiplication in Growths and Development- Biology of Polyploid and Polytene Cells, ■ Cambridge Cambridge University Press. I9S5. - 305 p.

38. Brooks A.L., Mead D.K., Peters R.T. Effect of aging on tlw frequency of metaphase chromosome aberrations in liver of the Chinese hamster //J. Gerontol. 1973 - Vol, 28 - P, 452-454.

39. Camargo R.S., Maeda M.Y, di Loreto C, (el al). Is agNOR and DNA ploidy analysis useful for evaluating thyroid neoplasms? ti Anal Quant Cytol Hisiol. 2005. - Vol. 27, - N 3, - P, 157-61

40. Castedo M-. Perfettini J.L, Roumier T fd al |. Cell death by mitotic catastrophe, a molecular defmiCiOtW Oncogene 2004, - VolJL3. -N 16.-P. 2825-2837.

41. Catalan J., Surrallesi J. Falck G.C.M ct al.. Segregation of sex chromosomes in human lymphocytesII Mutagenesis 2000. - Vol. 15. - P. 251255.

42. ChriHov К, lîollmm R-. ТЬоовд С. Thyroid follicular coll proliferation as function of age// Beilr. Pathol 1973. - Vol. 14«. - P. 152-154.

43. Conde E-, Martin-LaCBVe Ц Utrilla J.C. fct at. J. Mitotic activity of the endocrine ceiís m rat thyroid glands tfonrig postnitfal life // Endocrinology. -1992.-Vol.131. NI - P. 436-440.

44. Crowley C-, Curtis HJ The development of lomaik mutation in mice with age I/ Proc. Nat , Acad, Sel- USA, 1963. - Vol. 49 - P- 626*28.

45. Curtis H.J, Biological mechanisms underlying the aging processes ¡i Science, 1963. - Vol. 163. - P, 686-694.

46. Das N.K. Synthetic capacities of chromosome fragments correlated with their ability to maintain nucleolar material !/ J. Cell. Biol. 1962. - Vol. 15. -NI, -P. 121-130,

47. Dass S.B„ Ali S.F. Höflich RH-, Casciano DA, Frequency of iponlaneous and induced micronuclei in the peripheral blood of aging mice, // Mutai Res. 1997.-Vol. 381.-N l.-P, 105-110,

48. Faggiano A-. Coulot J., Bellon N, (d al . Age-dependent variation of follicular îi/.e and expression of iodine transporters in human thyroid tissue U J Nucl. Med 2004 - Vol. 45--N2.-P- 232-237.

49. Fenech M. Motley A- The efTect of donor age on spontaneous and induced micronuclei /I Mutat. Res. 1985.-Vol. 148. - P. 99-105.

50. Fenech M The cytokinesis-block micronuclcus technique: a detailed descripiion of the method and its application to gcnotoxicity studies in human populations // Mutat Res, 1993, - Vol, 2*5, - N I. - P. 35-44.

51. Fenech M. The in vitro micronucleus technique I/ Mutat. Res. 2000. - VoL 455. - N 1-2.-P-81-95.

52. Ganguly В В Cell division, chromosomal damage and mieronueleus formation in peripheral lymphocyte» of healthy donors: related to donor's age I/ Миш. Res. 1993. - Vol. 295. - P, 135-148.

53. Genskr H.L. Bcmsiain II. DMA damage as the primary cause of aging If Quart Rev Biot. -1984. VoL 56. - N 3. - P. 279-303.

54. Gilbert P. Pfitzer P. Facultative polyploidy in endocrine tissues ii Virehows Arch B Cell Pathol 1977. - Vol 25.- N3. - P. 233-242

55. Goldberg M,T Chidioe P. .An in vivo assay for small intestine genotoxicity H Mutat. Res. 1986. - Vol. 164.-N 4. - P. 209-215.

56. Goodman J.M. Ward R.A., Squire M.B. et al.. Neoplastic and nonneoplastic lesion» in aging Osbom-Mcndel nils U Toxicol Appt, Pharmacol- -1980.-Vol. 55. P 433-447.

57. Grawe J., Zcttcrbcrg G., Amneus H. DNA content determination of mieronucleated polychromatic erythrocyte» induced by claatogens and sptndle poison* in mouse bone marrow and peripheral Wood U Mutagenesis. 1993. -Vol. 8,-N3.-P. 249-255.

58. Gudi R., Sandhu S.S., Athwal R.S. Kinetochore identification in miefonuctei in mouse bone-marrow erythrocytes an assay for the detection of ancuploidy-inducing agents /' Mutot, Res. 1990, Vol. 234, - N 5. - 1'. 263 -268.

59. Guttcnbach M, Sehakowski R. Sclutiid M. Ancuplotdy and ageing: sex chromosome exclusion into micromnciei // Hum. Genet. 1994. - Vol. 94. -P. 295-298,

60. Hondo J , Nath J.,Tucker J. Sex chromosomes, microfiuchH and aging in women H Chromosonm. 1994 - Vol. 103. - P. 186-192.

61. Hamada S-, Naluyima K-, Serikawa Т., Hayashi M. The effect of aging on the results of the rat micronucleus assay II Mutagenesis. 2003, - Vol, 18.-N3.-P. 273-275.

62. Heddle J A., Cimino M.C, Hayashi M. ei al.. Mieronuelei as an index of cytogenetic damage: past, present, and future II Environ Mol. Mutagen. -1991, -Vol 18.- P 277-291.

63. Hogstedt B„ Kartsson A. The size of mieronuelei in human lymphocytes varies according to inducing agent used It Mutat, Res. 1985. -Vol 156. - N 3. - P. 229-232.

64. Jacobs P.A-r Court Brown W.M., Doll R- Distribution of human chromosome counts in retulion to age // Nature, 1961, - Vol. 193. - P, 11781180.

65. Kammori M, Nakamura K., Kasvohara M. et al., Telomere shortening with aging in human thyroid and parathyroid ti.«ue II Exp Gerontol -2002. Vol, 37. - N 4. - p- 513-521.

66. Kaneko T , Tahora S, Malsuo M. Non-linear accumulation of 8-hydroxy-2-deoxyguanosine. a marker of oxidized DNA damage, during aging // Mutat. Res, 1996. - Vol. 316. - P. 277-285.

67. KaihulgO M.S, A model for ageing // J. Theor. Biol. 1975. - VoL53. -P. 253-261.

68. Kalo It-. Sandberg A. Chromosome pulverization in human cells with micronuclri l/I. Nat, Cancer In«.-196«. Vol. 40.-N I.- P. 165-179.

69. Krohn K„ Fuhrer D„ Bayer Y el al-J- Molecular pathogenesis of euthyroid and toxic multinodular goiter H Endocr. Rev 20Q5. Vol. 26. - N 4.- P. 504-524.

70. Komae N. Nanta H-, Hibino Y-. Sugano N. Morphology and origin of nucnwtuelei induced by mitotic inhibitors // Yukugako Zasshi. 1997. - Vol 117. —N I,-P. 49-58.

71. Konopacka M. Effect of smoking and aging on micronudeus frequencies in human exfoliated buccal cells // Ncoplastna. 2003. - Vol. 50, — N 5.-P-380-382

72. Labidi B. Cregoire M-. Hernandez,-Verdun D. Bouteille M Procedure for isolating micronuclet from nit kangaroo cultured cells containing individualized chromosomes U Eur. J. Cell. Biol- 1985. - Vol. 38. - N t. - P. 165-170.

73. I.each T„ Jackson-Cook C. The application of spectral karyotyping {SKY) and fluorescent in situ hybridization (FISH) technology to determine the chromosomal contends) of miertxuicfei U Mutat. Res. 2001. - Vol. 49J. -P.l 1-19.

74. Lcaroyd DJ-„ Messina M, Zedenius J-, Robinson B.Cj. Molecular genetics of thyroid tumors and surgical decision-making H World, J, Surg. -2000. Vol. 24. - N 8. - P. 923- 933.

75. LebUrnd C-P. Classification of cell populations on d>c basis of their proliferative behavior// Not- Cancer Inst, Moflogr. 1964. - VoLM - p U9-150.

76. Lowe X„ Collins B., Allen J, et »!.. Aneuploidics and nucroiutcld tn the germ cells of mate mke of advanced age // Mutat. Res. 1995. - Vol, 338. -N 1-6. -P. 59-76.

77. Mariotli S., Fronccschi C. Cossorizza A. Pinchera A. The Aging Thyroid t' Endocrine Review. 1995, - Vol.16. - N 6. - P. 686-715.

78. Martin G.M. Genetic and environmental modulations of chromosomal stability: their roles in aging and oncogenesis // Ann. N.Y.: Acad. Seu-1991.-Vol.621.-P. 401-417.

79. Mazzucchelh L., Bwekhardt E. Hirsiger H. e4 at,., Interphase cytogenetics in oncocytic adenomas and carcinomas of the thyroid gland Hum Pathol. 2000. - Vol. 31. - N 7. - P. 854-859,

80. Medvcdcv Z.A. DNA-infarmalion and aging- The balance between alteration and repair t! Gerontology / Ed. D. Plan Berlin -Heidelberg: Springer Verlog - 1989, - P. 3-29.

81. Medvcdcv ZA, An attempt at a rational classification oF theories of ageing /' Biol. Rev. 1990. - Vol. 65 - P. 375-398

82. Messier В. Leblond C.P. Cell proliferation and migration as revealed by radioautography after injection of thymidine-1!! into male cat and mice // Amcr. An«. I960, - Vol-106. - P. 247-285,

83. Miller B.M. Adlcr I D. Application of anttkinetochore antibody staining (CREST staining) to micranuelci in erythrocytes induced in vivo H Mutagenesis, 1990. - Vol, 5. - N 4. - P 4 H -415.

84. Mullaari E, Lohman P.H.M., Berends F,, Vijg J. DNA damage metabolism and aging // Mutat Res. 1990. - Vol.237, - N 5-6, - P, 189-210.

85. I. Nilo S.t Ariyuki F., Ofcantwa A. Spontaneous expulsion of mieronuetei by enucleation in the micronucleus assay II MutaL Res, 1988, — Vol. 207. - N 3*4. - P. 185-192.

86. N'orppa H , Luomahaara S. Heikanen H. et al . Mtcronucleus assay in lymphocytes as a tool to biomomtor human exposure to anevploidogens and clastogens II Environ, Heallh Perspect 1993, - Vol, 101, - Suppl, 3 P 139143.

87. Panoo J.W., Ganriott M.L., Beyers J.E, Expulsion of demecolclno-induced micronuclei from mouse bone morrow polychromatic erythrocytes it Environ.Mol.Mutagen.- 1991.-Vol. 17.-N2.-P. 79-83,

88. Physiological basis of aging and geriatrics / ed P.S, Timiras. CRC Press Inc. - Roca Baton-Ann Arbor-London-Tokyo, 1994. - 326 p.

89. Pieroui M.A. Chromosomal rearrangements in thyroid carcinomas; a recombination or death dilemma H Cancer Lett, 2001 Vol. 166. — N L-P. 1-7,

90. Ramire/. A , Saldanha P I. Micronucleus investigation of alcoholic patients with oral carcinoma // Gencücs und Mol- Res. 2002- - Vol. I. - N 3- -P, 246-260.

91. Ramsey MJ. Moore 11 D.H., Brined. et id.. The effects of age and life style factors on the accumulation of cytogenetic damage as measured by chromosome painting H Mutât. Res. 1995 . - Vol- 338. - p. 95-106.

92. Rao-Rupanagudi R., Hcywood R. Gopinath С Age-related changes in thyroid structure and function in Spragwe-Dawley rats Ц Vet. Pathol, 1992. -Vol. 29.-P. 55-63.

93. Redmond O. Tuffeiy A.R. Mitotic rate of thyroid follicular celts in untreated and goitrogcn-trcated rats: variation with time of day II J.Anat. 1979. - Vol. 133. - P- 37-47.

94. Saad л <3-, Kumar S. Ron E, et a.]. Proliferative activity ofhünan thyroid cells in various age groups and its correlation with the risk of thyroid cancer afler radiation exposure H У Oin. Endocrinol. Metab. 2006. - Vol, 9]. — N7.-P. 2672-2677.

95. Sandberg A.A The Chromosomes in Human Cancer and Leukemia, 21*1 edition. New York : Elsevier, 1990.

96. Sanum A-, Bounaccr A-, Lepage F {et at.. Mechanisms of mutagenesis in mammalian cdis. Application to human thyroid tumours H С, R.

97. Acad, Sei. III- 1999. - Vol. 322. -N 2-3. - P. 145-149.

98. Shcline G-E. Thyroid proliferative potential as a function of age If Cell risa. К inet. 1969. - Vol. 2. - P. 123-132

99. Shimizu N , Itoh N„ Utiyarna H., Wnhl G.M, Selective Entrapment of Extrachromosotnally Amplified DNA by Nuclear Budding and MicronuCtelion during S Phase // J. Cell Biol. 1998.-Vol. 140.-N6. - P. 1307-1320.

100. Shirokawa J.M., Elisci R., Kuauf J.A. et al.| Conditional Apoptosis Indueed by Oncogenic Ras in Thyroid Celb // Mol. Endocrinol- 2000. - Vol. I4.-NII.-P. 1725-1738,

101. Schmid W. The mkronuclei lest // Mutm. Res 1975. - Vol, 31, - P, 9 -15.

102. Schneidcr B.M. Wurgfer F-E.4 Romagna F. Distinct area distribution differences of micronuclci induced by elastogcntc and «neuploidogenic chemicals in the bone marrow of the CD-1 mouse fi Mutm. Res. 1995. - Vol. 334. - N L -P. 81-89.

103. Singh N.P., Danncr D.B., Ticc RR. et al.. DNA damage and repair with age in individual human lymphocytes H MutaL Res. 1990. - Vol. 237, - P. 123-130.

104. Singh S.M , Tote J.F-, Resume J, Genotype- and age-associnled in vivo cytogenetic alterations following mutagenic exposures in mice // Can J Genet Cytol. -1986. Vol. 28. - N 2. - P. 286-293.

105. Slagbroom P-E. Vigg J. Genetic instability and aging: theories, facts and future perspectives U Genome. 1989, - Vol, 31. - P. 373-85.

106. Soares S,R„ Bucno-Guimnraes RM., Fcrreira C.M. ct al.- Urban air pollution induces micronuclci in peripheral erythrocytes of mice in vivo H Environ. Res--2003, Vol. 92, - N 3. -P. 191-1%,

107. Suaiez H.G. Molecular basis of epithelial thyroid tumors // C.R. : Acad Sci, 111 - 2000. - Vol. 323. - N 6. - P. 519-528.

108. Suzuki T.( Fujii M. Ayusawu D. Dcmcthvlation of classical satellite 2 and 3 DNA with chromosomal instability in senescent human fibroblasts // Exp-GcroiMol. -2002 Vol. 37. - N 8-9. - P 1005-1014

109. Takaoka M., Teranishi M r Furukawa T. et al,. Age-related changes in thyroid lesions and function in F344/DuCrj rats H Exp.Antm, 1995- - Vol. 44.-N I. - P. 57-62.

110. TaJlini 0. Molecular palhobiology of thyroid neoplasms // Endocrinol. Pathol. 2002. - Vol. 13, - N 4, - P. 271-38«.

111. Tanaka T. Shtmtiu N. Induced detachment of acentric chromatin from mitotic chromosomes leads to their cytoplasmic localization at Gland the micronucleaiion by lamin reorganisation at S phase // J. Celt Sei. 2000. - Vol. 113. - N 6- - P- 697-707

112. Tasevsfct V., Bom D-, Peters G, et al.. The Fischer rat thyroid cell line FRTL-5 exhibits a nondipkiid kaiyoiype //Thyroid, 1998, - Vol, 8- - N 7. -P.623-626.

113. Tates A D ,Van Dam F J., Van Mossel H. et al.}. Use of the clonal assay for the measurement of frequencies of HPR T mutants in T-lymphocytes from five oontrof populations// Mutai, Res 1991, - Vol. 253, - P. 199-213.

114. Tinwell H., Ashby J. Mi его nucleus morphology as a means to distinguish aneugens and clastogens in the mouse bone marrow micronucleus assay // Mutagenesis. 1991. - Vol. 6, - N 3. - P.193-198

115. Tucker J.D., Moore D.H. The importance of age and smoking in evaluating adverse cytogenetic effects of exposure to environmental agents // Environ Health Perspect- 1996. - Vol. 104. - P. 489-192.

116. Vandcrkcrken Vanparys P., Verschacvc L-, Kirsch-Volders M. The mouse bone marrow micronucleus assay can be used to distinguish aneugens from clastogens Я Mutagenesis 1989, - Vol. 4.-N I.-P. 6-11.

117. Von Hoff D. D. McGtll 3. R Forseth В. J. et al.. Elimination of cxtrachromosomally amplified MYC genes from human tumor cells reduces their tumorigetticrty H Píoc. Natl. Acad. Sei. USA. 1992. - Vol. 80. - P. 8165-8169.

118. Xing M. BRAF mutation in thyroid cancer H Endocnne-Related Cancer -2005.-Vol. 12. P. 245-262,

119. Xu X. Quiros R.M , Gattuso P et al.f, High prevalence of BRAF gene mutation m papillary thyroid carcinomas and thyroid tumor cell lines II Cancer Res. 2003, - Vol, 63. - N 13. - P. 4561-4367,

120. Weirich-Schwaiger R, Gniber В., Schweiger M. Htrsch-Kauffmann M Correlation between senescence and DNA repair in cells from young and old individúala and in premature aging syndromes. H Mulat. Res. 1994. - Vol. 316. - P. 37-48.

121. Wojda A, Witt M. Manifestations of ageing at the cytogenetic level. tl J. Appl. Genet 2003. - Vol. 44. - N 3. - P. 383-399.