Исследование состава и разработка биотехнологии получения биологически активных концентратов черники обыкновенной - vaccinium myrtillus L. тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Маршанова, Лаура Муратовна

• Маршанова, Лаура Муратовна
• кандидат биологических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Маршанова, Лаура Муратовна

1 Стр.

Введение.

Глава 1. Анализ состояния проблемы и задачи исследований.

1.1. Характеристика черники обыкновенной.

1.2. Химический состав плодов черники.

1.2.1. Углеводный состав плодов черники.

1.2.2. Антоцианы плодов черники и их свойства.

1.2.3. Витаминный состав плодов черники.

1.2.4. Макро- и микроэлементный состав плодов черники.

1.3. Анализ существующих технологий получения биологически активных соединений из плодов черники и задачи исследований.

Глава 2. Методология выполнения работы.

2.1. Организация работы

2.2. Методы исследований. в 2.3. Методы математического планирования и обработки экспериментальных данных.

Глава 3. Состав углеводов и органических кислот ягод черники обыкновенной.

3.1. Состав углеводов ягод черники обыкновенной. Ф 3.2 Состав органических кислот в плодах черники.

Глава 4. Изучение антоцианов, содержащихся в плодах черники обыкновенной.

4.1. Состав антоцианов плодов черники.

4.2. Изучение кислотного гидролиза антоцианов.

4.3. Изучение влияния разных видов пчелиного меда на степень гидролиза антоцианов.

Глава 5. Разработка биотехнологии получения агликонов антоцианов с использованием высокоэффективного комплекса «черника-мед».

5.1. Анализ основных принципов создания высокоэффективных производств.

5.2. Разработка модульного алгоритма биотехнологии получения комплекса «черника-мед» с использованием высокоэффективного комплексного биокатализатора.

5.3. Обоснование технологических режимов и контроль по формированию качества готовой продукции с использованием высокоэффективного комплекса биокатализаторов по предлагаемой биотехнологии.

Глава 6. Изучение физико-химических и медико-биологических свойств комплекса «черника-мед» и оценка путей его использования.

6.1. Состав и физико-химические свойства комплекса «черника-мед».

6.2. Медико-биологические свойства биокомплекса «МиртиМед» и некоторые пути их использования.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Исследование состава и разработка биотехнологии получения биологически активных концентратов черники обыкновенной - vaccinium myrtillus L.»

Для реализации государственной политики в области здоровья необходимо производство в широком ассортименте продуктов питания нового поколения, что будет способствовать созданию условий для полноценного питания россиян в соответствии с концепцией сбалансированного питания, укрепления их здоровья и сохранения генофонда нации. Особую роль в обеспечении здорового питания играют биологически активные вещества, выделяемые из растений, и получения отдельных их компонентов с примененеием биотехнологических процессов.

В последние годы население многих стран использует достигнутые успехи в области выделения и получения различных биологически активных соединений из лекарственных растений для восстановления своего здоровья. В то же время все большее распространение получают пищевые добавки, содержащие комплекс биологически активных соединений.

Одним из наиболее перспективных лекарственных растений считается черника обыкновенная, которая используется как пищевой продукт, и как эффективное средство для профилактики многих заболеваний, в том числе и катаракты. Широкое распространение черники обыкновенной в различных сборах и лекарственных препаратах, как самостоятельно, так и в виде различных сочетаний сдерживается из-за неразработанности научных подходов к выявлению активных начал, воздействующих на биохимические процессы, протекающие при тех или иных нарушениях обмена веществ. Поэтому необходимы многосторонние исследования химического состава черники обыкновенной и выявления биологически активных соединений, воздействующих на те или иные биохимические процессы. Значительный вклад в изучение химического состава и свойств черники обыкновенной внесли отечественные и зарубежные ученые: Т.В. Ставицкая, Г. Я. Мечикова, Л.Е.Астрологова, Б. Та1ауёга, Т. кЬуаг^ и другие. Однако работы в этой области посвящены в основном частным исследованиям и отсутствуют систематизированные данные о химическом составе черники обыкновенной, характеризующих ее высокую биологическую активность, а также сведения об использовании комплексных высокоэффективных биокатализаторов в технологии получения биологически активных соединений.

Таким образом, анализ биохимических свойств черники обыкновенной, систематизации данных о ее химическом составе, прогноз возможности применения высокоэффективных биокатализаторов с целью получения биологически активных соединений оказывается возможным и крайне актуальным в современных условиях.

Целью диссертационной работы являлось проведение комплекса теоретических и экспериментальных исследований по химико-технологическим аспектам получения биологически активных соединений из черники обыкновенной с использованием биокатализаторов, разработка методов определения биологически активных соединений в многокомпонентных системах, а также вариантов использования черники обыкновенной с учетом ее медико-биологических свойств.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

- изучить физико-химические и биохимические закономерности процесса гидролиза антоцианозидов в присутствии кислот и комплексного высокоэффективного биокатализатора на основе ферментов пчелиного меда;

- исследовать динамику процесса гидролиза антоцианозидов плодов черники в присутствии комплекса ферментов, содержащегося в пчелином меде;

- разработать принципиальную технологическую схему производства биологически активного концентрата «черника-мед» с использованием высокоэффективных биокатализаторов пчелиного меда;

- изучить состав и свойства полученного биологически активного концентрата «черника-мед»;

- оценить медико-биологические свойства разработанного концентрата «черника-мед».

На защиту выносятся следующие основные положения:

• методики качественного и количественного определения антоцианозидов в плодах и препаратах методом высоко-эффективной жидкостной хроматографии;

• системный анализ химического состава и биологических свойств плодов Черники обыкновенной;

• оптимальные параметры для проведения кислотного и ферментативного гидролиза антоцианозидов;

• физико-химические закономерности процесса гидролиза антоцианозидов плодов черники обыкновенной в присутствии комплексного высокоэффективного биокатализатора;

• рациональная технология получения агликонов антоцианозидов с использованием высокоэффективного биокатализаторов, присутствующих в пчелином меде.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Маршанова, Лаура Муратовна

Выводы

1. Анализ известных данных по получению биологически активных концентратов из плодов черники обыкновенной, и собственные исследования автора привели к разработке принципиально новых подходов к созданию комплексного препарата на основе компонентов растительного и животного происхождения.

2. Проведенный теоретический анализ и экспериментальные исследования кислотного гидролиза антоцианов с использованием ферментов пчелиного меда, позволяют утверждать, что подобный гидролиз протекает эффективно, а получаемый гидролизат обладает высокой биологической активностью.

3. Использование методики количественного определения антоцианозидов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии позволило не только контролировать процесс гидролиза данной группы гликозидов в лабораторных условиях, но и контролировать технологические процессы, обеспечивающие формирование биологически активного концентрата «черника-мед».

4. Изучены закономерности процесса кислотного и ферментативного гидролиза антоцианов. Проведена оптимизация технологических параметров процесса гидролиза в зависимости от температуры, массовых долей в концентрате плодов черники и меда, времени термостатирования и активности ферментов пчелиного меда.

5. Разработан и утвержден технологический регламент производства биологически активного концентрата «черника-мед». Установлено, что особенностью технологического процесса является создание благоприятных условий гидролиза, как за счет действия ферментов, присутствующих в пчелином меде, так и за счет органических кислот меда. В рамках заданных технологических параметров осуществлен выбор оптимальных условий ферментативного и кислотного гидролиза антоцианозидов с накоплением максимального количества биологически активных компонентов - агликонов и минорных Сахаров.

6. На основании выполненных исследований и результатов испытаний технологии биологически активного концентрата черники разработан препарат «МиртиМед». Изучены состав, физико-химические и биологические свойства препарата.

7. Офтальмологическими клиническими исследованиями установлено, что применение препарата «МиртиМеда» у больных с центральной инволюционной хориоретинальной дистрофией приводит к улучшению функционального состояния сетчатки. «МиртиМед» может быть рекомендован для применения в комплексной терапии больных с дистрофическими заболеваниями сетчатки.

116

Заключение

Проведенные исследование показало, что применение «МиртиМеда» у больных с центральной инволюционной хориоретинальной дистрофией приводит к улучшению функционального состояния сетчатки. Положительное влияние препарата сохранялось в течение всего срока наблюдения (3 месяца). Однако усиления положительного влияния препарата на состояние функций зрительного анализатора после повторного курса терапии по сравнению с первым курса лечения выявлено не было.

В контрольной группе больных статистически значимой динамики показателей выявлено не было.

Препарат «МиртиМед» может быть рекомендован для применения в комплексной терапии больных с дистрофическими заболеваниями сетчатки.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Маршанова, Лаура Муратовна, 2006 год

1. Антоцианы черники кавказской / Мжаванадзе В.В. //В кн.: Биохимия растений.-Тбилиси, 1973.

2. Безопасность пищевого сырья и продуктов питания / JL В. Донченко, В. Д. Надыка.- М.: Пищепромиздат, 1999. 352 с.

3. Биохимия / А. Ленинджер.- М.: Мир 1974. 957 с.

4. Вопросы экологизации пищевых производств / Н. Н. Липатов, Л. Л. Лисенкова // Вестник РАСХН, №3.- М.:РАСХН, 1995. С. 22 - 23.

5. Выделение цианидин- и пеонидин-3-арабинозидов из плодов черники кавказской / В.В. Мжаванадзе // Тез. 2-го Всесоюз. симпоз. по фенольным соединениям.-Алма-Ата, 1970.

6. Исследование листьев черники / A.M. Халецкий, Е.К. Кисилева,-Аптечное дело, 1964.- №3.- С.

7. Капиллярные колонки в газовой хроматографии / К.Тесаржик, К. Комарек.- М.: Мир, 1978. 223 с.

8. Клюква: химический состав, питание и медицинские аспекты // А.Н. Зайцев, Е.Ю. Сорокина, И.Н. Аксюк, Л.Г. Левин.- Вопросы питания, 1997;(2).-С. 38-40.

9. Консерванты в пищевой промышленности / Э. Люк, М. Ягер.- СПб.: ГИОРД, 1998.-256 с.

10. Лекарственные растения в офтальмологии / М.Г. Марголис// Вестник офтальмологии, 1976.-№6.

11. Лекарственные средства / М.Д. Машковский: в 2-х томах. Т.2.-9-е изд.-М.:Медицина, 1984.

12. Лектины в исследовании белков и углеводов / В. М. Лахтин // Итоги науки и техники. Сер. Биотехнология. Т.2.- Под ред. А. А. Клесова.- М.: ВИНИТИ, 1987.-290 с.

13. Лечение растениями / Н.Г. Ковалева.- М.: Медицина, 1971.

14. Математические методы планирования экспериментов / Ю. П. Грачев,- М.: Пищевая промышленность, 1979. 200 с.

15. Микроэлементы в питании человека // Доклад Комитета экспертов ВОЗ. Серия технических докладов № 532.- Женева: ВОЗ, 1975.- С. 57- 58.

16. Миртикам лекарство для глаз.- КОФ, 2002.- Том 3, № 3.- С.

17. Общая химия. Биофизическая химия. Химия биогенных элементов / Под ред. Ю.А.Ершова. М.: Высшая школа, 2000 - 560 с.

18. Общая химическая технология / А. М. Кутепов, Т. И. Бондарева, М.: М. Г. Беренгартен.- М.: Высшая школа, 1985. 448 с.

19. Оптимизация эксперимента в химии и химической технологии / С. Л. Ахназарова, В. В. Кафаров.- М.: Высшая школа, 1978.- 319 с.4.

20. Органическая химия / Л. Физер, М. Физер,- М.: Химия. 1970.- 538 с.

21. Основные биохимические константы человека в норме и при патологии / Ю. В. Хмелевский, Усатенко О. К.- Киев: Здоров'я, 1987. 160 с.

22. Практикум по биохимии / Под ред. Н.П.Мешковой и С.Е.Северина.-М.:МГУ, 1979.-430 с.

23. Применение экстракта черники в офтальмологии / Т.В. Ставицкая.-Клиническая офтальмология, 2002.- Том 3 № 2.- С.

24. Руководство по методам анализа качества и безопасности пищевых продуктов.- М.: Брандес. Медицина, 1998.- 342 с.

25. Сведения о лекарственных растениях народной медицины Коми АССР / И.И. Гром. // В кн. Вопросы фармакологии. Вып. 3. Л, 1965.

26. Системный подход к проблеме развития машинных технологий в перерабатывающих отраслях / В. А. Панфилов // Изв. Вузов. Пищевая технология.- 1995.- № 1-2.- С. 98 100.

27. Справочник по аналитической химии / Ю. Ю. Лурье.- М.: Химия, 1989.-448 с.

28. Стереохимия углеводов / Д. Стоддард,- М.: Мир, 1975. 304 с.

29. Товароведение плодов и овощей / А.Ф. Джафаров.- М.: Экономика, 1985.- 280 с.

30. Унифицированные методы определения Сахаров в пищевых продуктах с помощью газовой хроматографии / С. М. Кунижев, И. П. Чепурной, О. Э. Линке // Метрология и стандартизация аналитических измерений.-Новосибирск, 1990. С. 138 - 139.

31. Фенольные соединения незрелых плодов черники кавказской / В.В. Мжаванадзе // Сообщ. АН ГССР, 1972.- №1, т. 68.

32. Фенольные соединения черники кавказской / В.В. Мжаванадзе // Автореф. дис. канд. биол. наук. Ереван, 1973. - 24 с.

33. Химия углеводов / Н. К. Кочетков, А. Ф. Бочков, Б. А. Дмитриев.- М.: Химия, 1967.-672 с.

34. Хроматографические материалы / А. Лурье.- М.: Химия, 1978. 440 с.

35. Технологические линии пищевых производств / В. А. Панфилов //Учебник.- М.: Колос, 1993. 285 с.

36. Технология лекарственных форм/Под ред. Л.А. Ивановой,- М.: Медицина, 1991.- 544 с.

37. Черника свежая // РСТ РСФСР 27-75.- М.: Госплан РСФСР, 1981

38. Чистые химические вещества / Ю. В. Карякин, И. И. Ангелов. М.: Химия, 1974.-408 с.

39. Экспертиза качества меда / И.П.Чепурной.- М.: ИТК «Дашков и К0», 2002.-112 с.

40. Экстракт черники и зрение / Жейл Гаэтан //ТАСС, Бюллетень иностранной научно-технической информации ТАСС, 1964.- 10 сентября.

41. Absorption and metabolism of cyanidin 3-0-beta-D-glucoside in rats / T. Tsuda, F. Horio, T. Osawa // FEBS Lett.- 1999.- Vol. 449.- P. 179-182.

42. Absorption of anthocyanins from blueberries and serum antioxidant status in human subjects / G. Mazza, C. D. Kay, T. Cottrell, B. J. Holub // J. Agric. Food Chem.- 2002.- Vol. 50.- P. 7731-7737.

43. Accelerated dehardening in bilberry (Vaccinium myrtillus L.) induced by a small elevation in air temperature / K. Taulavuori, K. Laine, E. Taulavuori, T. Pakonen, E. Saari // Environ Pollut.- 1997.- Vol. 98, N 1.- P. 91-95.

44. Acid mediated hydrolysis of blueberry anthocyanins / T. Ichiyanagi, K. Oikawa, C. Tateyama, T. Konishi // Chem Pharm Bull (Tokyo).- 2001.- Vol. 49, N 1.- P. 114-117.

45. Activation of flavonoid biosynthesis by solar radiation in bilberry ( Vaccinium myrtillus L) leaves / L. Jaakola, K. Maatta-Riihinen, S. Karenlampi, A. Hohtola // Planta.- 2004.- Vol. 218, N 5.- P. 721-728.

46. Activity of Myrtocyan, an anthocyanoside complex from Vaccinium myrtillus (VMA), on platelet aggregation and adhesiveness / P. Morazzoni, M. J. Magistretti //Fitoterapia.- 1990.- Vol. 61.- P. 13-21.

47. Analysis and biological activities of anthocyanins / J.-M. Kong, L.-S. Chia, N.-K. Goh, T.-F. Chia, R. Brouillard // Phytochemistry.- 2003.- Vol. 64.- P. 923-933.

48. Analysis of anthocyanins in rat intestinal contents—impact of anthocyanin chemical structure on fecal excretion / J. He, B. A. Magnuson, M. M. Giusti // J Agric Food Chem.- 2005.- Vol. 53, N 8,- P. 2859-2866.

49. Anthocyanins and glutathione S-transferase activities in response to low temperature and frost hardening in Vaccinium myrtillus (L.) / E. Taulavuori, M. Tahkokorpi, K. Taulavuori, K. Laine // J Plant Physiol.- 2004.- Vol. 161, N 8.- P. 903-911.

50. Anthocyanins are efficiently absorbed from the small intestine in rats / S. Talavera, C. Felgines, O. Texier, C. Besson, C. Manach, J.L. Lamaison, C. Remesy // J Nutr.- 2004.- Vol. 134, N 9.- P. 2275-2279.

51. Anthocyanins are efficiently absorbed from the stomach in anesthetized rats / S. Talavera, C. Felgines, O. Texier, C. Besson, J.L. Lamaison, C. Remesy // J Nutr.- 2003.- Vol. 133, N 12.- P. 4178-4182.

52. Anthocyanins in Fruits, Vegetables, and Grains / G. Mazza, E. Miniati.-CRC Press Boca Raton, FL.- 1993.- 126 p.

53. Anthocyanins protect against A2E photooxidation and membrane permeabilization in retinal pigment epithelial cells / Y.P. Jang, J. Zhou, K. Nakanishi, J.R. // Sparrow Photochem Photobiol.- 2005.- Vol. 81, N 3.- P. 529-536.

54. Anthocyanosides and Microcirculation / J. M. Coget, J. F. Merlen // J Mai Vase.- 1980.-Vol. 5.-P. 43-46.

55. Anthocyanosides in the Treatment of Retinopathies / A. Scharrer, M. Ober // Klin Monatsbl Augenheilkd.-1981.- Vol. 178.- P. 386-389.

56. Anthocyanosides of Vaccinium myrtillus (bilberry) for night vision~a systematic review of placebo-controlled trials / P. H. Canter, E. Ernst // Surv Ophthalmol.- 2004.- Vol. 49, N 1.- P.38-50.

57. Anthocyanosides of Vaccinium myrtillus (bilberry) for night vision a systematic review of placebo-controlled trials / J.H. Kramer // Surv Ophthalmol.-2004.- Vol. 49, N6,- P. 618.

58. Anti-angiogenic, antioxidant, and anti-carcinogenic properties of a novel anthocyanin-rich berry extract formula / D. Bagchi, C.K. Sen, M. Bagchi, M. Atalay //Biochemistry (Mosc).- 2004.- Vol. 69, N 1.- P.75-80.

59. Anti-angiogenic property of edible berries / S. Roy, S. Khanna, H.M. Alessio, J. Vider, D. Bagchi, M. Bagchi, C.K. Sen // Free Radic Res.- 2002.- Vol. 36, N9.- P. 1023-1031.

60. Antioxidant properties of prepared blueberry (Vaccinium myrtillus) extracts // A. Faria, J. Oliveira, P. Neves, P. Gameiro, C. Santos-Buelga, V. de Freitas, N. Mateus //J Agric Food Chem.- 2005.- Vol. 53, N 17.- P. 6896-6902.

61. Berry phenolics and their antioxidant activity / M.P. Kahkonen, A.I. Hopia, M. Heinonen //J Agrie Food Chem.- 2001.- Vol.49, N 8.- P. 4076-4082.

62. Bioactive berry compounds-novel tools against human pathogens / R. Puupponen-Pimia, L. Nohynek, H.L. Alakomi, K.M. Oksman-Caldentey // Appl Microbiol Biotechnol.- 2005.- Vol. 67, N 1.- P. 8-18.

63. Characterization of phenolic profiles of Northern European berries by capillary electrophoresis and determination of their antioxidant activity / S. Ehala, M. Vaher, M. Kaljurand // J Agrie Food Chem.- 2005.- Vol. 53, N 16.- P. 6484-90.

64. Chemical investigation of Vaccinium myrtillus L. / E. Ramstad // J Am Pharm Assoc Am Pharm Assoc (Baltim).- 1954.- Vol. 43, N 4.- P. 236-240.

65. Chicoric and chlorogenic acids in various plants growing in Georgia /1. D. Chkhikvishvili, G.I. Kharebava // Prikl Biokhim Mikrobiol.- 2001.- Vol. 37, N 2.-P.214-217.

66. Chronic fatigue syndrome: oxidative stress and dietary modifications / A.C. Logan, C. Wong // Altern Med Rev.- 2001.- Vol. 6, N 5.- P. 450-459.

67. Clinical and Electroretinographic Study on Activity of Anthocyanosides / L. Caselli // Arch Med Int.- 1985.- Vol. 37.- P. 29-35

68. Comparison of anthocyanin distribution in different blueberry sources by capillary zone electrophoresis / T. Ichiyanagi, C. Tateyama, K. Oikawa, T. Konishi // Biol Pharm Bull.- 2000.- Vol. 23, N 4.- P. 492-497.

69. Comparison of HPLC methods for determination of anthocyanins and anthocyanidins in bilberry extracts / Z. Zhang, X. Kou, K. Fugal, J. McLaughlin // J

70. Agric Food Chem.- 2004.- Vol. 52, N 4.- P. 688-691.

71. Comparison of the scavenger effect of bilberry anthocyanosides with various flavonoids / R. Salvayre, P. Braquet, et al. // Proceed Intl Bioflavonoids, Symposium, Munich.-1981.- P. 437-442.

72. Complex approach to evaluation of natural quality of coloured juices / K.I. Eller, V.V. Pimenova, L.G. Levin, M. G. Kiseleva //Vopr Pitan.- 2003.- Vol. 72, N2.- P.28-35.

73. Consumption of black currants, lingonberries and bilberries increases serum quercetin concentrations /1. Erlund, J. Marniemi, P. Hakala, G. Alfthan, E. Meririnne, A. Aro // Eur J Clin Nutr.- 2003.- Vol. 57, N 1.- P. 37-42.

74. Content of the flavonols quercetin, myricetin, and kaempferol in 25 edible berries / S. H. Hakkinen, S.O. Karenlampi, I. M. Heinonen, H. M. Mykkanen, A. R. Torronen // J Agric Food Chem.- 1999.- Vol. 47, N 6.- P. 2274-2279.

75. Contrasting strategies for UV-B screening in sub-Arctic dwarf shrubs / S.I. Semerdjieva, E. Sheffield, G.K. Phoenix, D. Gwynn-Jones, T.V. Callaghan, G.N. Johnson // Plant Cell Environ.- 2003.- Vol. 26, N 6.- P. 957-964.

76. Densities of Ixodes ricinus ticks (Acari: Ixodidae) on moorland vegetation communities in the UK / B.J. Sheaves, R.W. // Brown Exp Appl Acarol.- 1995.- Vol. 19, N9.- P. 489-497.

77. Determination of anthocyanidins in berries and red wine by highperformance liquid chromatography / N.A. Nyman, J.T. Kumpulainen // J Agric Food Chem.- 2001.- Vol. 49, N 9 P. 4183-4187.

78. Dietary cyanidin 3-0-beta-D-glucoside increases ex vivo oxidation resistance of serum in rats / T. Tsuda, F. Horio, T. Osawa // Lipids.- 1998,- Vol. 33.-P. 583-588.

79. Direct intestinal absorption of red fruit anthocyanins, cyanidin-3-glucoside and cyanidin-3,5-diglucoside, into rats and humans / T. Miyazawa, K. Nakagawa, M. Kudo, K. Muraishi, K. Someya // J. Agric. Food Chem.- 1999.- Vol. 47.- P. 1083-1091.

80. Dietary supplementation with bilberry extract prevents macular degeneration and cataracts in senesce-accelerated OXYS rats // A. Zh. Fursova, O. G. Gesarevich, A. M. Gonchar, N. A. Trofimova, N. G. Kolosova // Adv Gerontol.-2005.- Vol.16.- P. 76-79.

81. Do multitrophic interactions override N fertilization effects on Operophtera larvae? / J. Strengbom, J. Witzell, A. Nordin, L. Ericson // Oecologia.-2005.- Vol. 143, N2.-P. 241-250.

82. Effects of anthocyanins and other phenolic compounds on the production of tumor necrosis factor alpha in LPS/IFN-gamma-activated RAW 264.7 macrophages / J. Wang, G. J. Mazza // Agric. Food Chem.- 2002.- Vol. 50.- P. 41834189.

83. Effect of Anthocyanosides on the Performance of Dark Adaptation / D. Sala, M. Rolando, P.L. Pissarello // Minerva Oftalmologica.- 1979.- Vol. 21.- P. 263265.

84. Effect of aronia berry honey syrup used for sweetening jams on their quality / W. Kmiecik, Z. Lisiewska, G. // Jaworska Nahrung.- 2001.- Vol. 45, N 4.- P. 273-279.

85. Effects of commercial anthocyanin-rich extracts on colonic cancer and nontumorigenic colonic cell growth / C. Zhao, M.M. Giusti, M. Malik, M.P. Moyer, B.A. Magnuson // J Agric Food Chem.- 2004.- Vol. 52, N 20.- P. 6122-6128.

86. Effect of lyophilised Vaccinium berries on memory, anxiety and locomotion in adult rats / M.R. Ramirez, I. Izquierdo, M.D. Raseira, J.A. Zuanazzi, D. Barros, AT. Henriques // Pharmacol Res.- 2005.- N 9.- P. 5-9.

87. Effects of Vaccinium myrtillus anthocyanosides on arterial vasomotion / A. Colantuoni, S. Bertuglia, M. J. Magistretti, L. Donato //Arzneim. Forsch.-1991.-Vol.41.- P. 905-909.

88. Effect of various thawing techniques on the quality of small fruit frozen products / W. Kmiecik, G. Jaworska, A. // Budnik Rocz Panstw Zakl Hig.- 1995.-Vol. 46, N 2.- P.135-143.

89. Experimental phytotherapy of tick-borne encephalitis / G.I. Fokina, T. V. Frolova, V. M. Roikhel, V. V. // Pogodina Vopr Virusol.-1991.- Vol. 36 , N 1.- P. 1821.

90. Flavonoids and Bioflavonoids, 1985-Proceeding of the 7th Hungarian Bioflavonoid symposium. Szeged, Hungary, May 16-18,1985,-Academiai Riado,Budapest, 1986.

91. Fruit juice malabsorption: not only fructose / J. H. Hoekstra, J. H. van den Aker, R. Hartemink, C. M. // Kneepkens Acta Paediatr.- 1995.- Vol. 84, N 11.- P. 1241-1244.

92. Fruit polyphenolics and brain aging: nutritional interventions targeting age-related neuronal and behavioral deficits / R. L. Galli, B. Shukitt-Hale, K. A. Youdim, J. A. Joseph // Ann. N.Y. Acad. Sci.- 2002,- Vol. 959.- P. 128-132.

93. Gene expression of the ericoid mycorrhizal fungus Oidiodendron maius in the presence of high zinc concentrations / M. Vallino, V. Drogo, S. Abba, S. Perotto // Mycorrhiza.- 2005.- Vol. 15, N 5.- P. 333-344.

94. Green tea polyphenols inhibit metalloproteinase activities in the skin, muscle, and blood of rainbow trout / M. Saito, K. Saito, N. Kunisaki, S. Kimura // J Agric Food Chem.- 2002.- Vol. 50, N 24.- P. 7169-7174.

95. Herbal medication: potential for adverse interactions with analgesic drugs / W. Abebe // J Clin Pharm Ther.- 2002,- Vol.27, N 6.- P.391-401.

96. Herbal Prescription for Better Health / D.J. Brown // Rocklin, CA:Prima Publishing.- 1996.- Vol. 41, N7.

97. Honey quality, methods of analysis and International regulatory standarts: review of the work of the International Honey Commission // Mitt. Lebensm. Hyg.- 1999.- Vol. 90.- P.108-125.

98. Impact of ice ages on circumpolar molecular diversity: insights from an ecological key species / I.G. Alsos, T. Engelskjon, L. Gielly, P. Taberlet, C. Brochmann //Mol Ecol.- 2005.- Vol.14, N 9.- P. 2739-53.

99. Identification of anthocyanins in berries by narrow-bore highperformance liquid chromatography with electrospray ionization detection / P. Dugo,

100. Mondello, G. Errante, G. Zappia, G. Dugo //J Agric Food Chem.- 2001.- Vol. 49, N 8.- P. 3987-3992.

101. Induction of apoptosis in cancer cells by Bilberry (Vaccinium myrtillus) and the anthocyanins / N. Katsube, K. Iwashita, T. Tsushida, K. Yamaki, M. Kobori //J Agric Food Chem.- 2003,- Vol. 51, N 1.- P. 68-75.

102. Influence of domestic processing and storage on flavonol contents in berries / S. H. Hakkinen, S. O. Karenlampi, H. M. Mykkanen, A. R. Torronen // J Agric Food Chem.- 2000.- Vol. 48, N 7.- P. 2960-2965.

103. Inhibition of Helicobacter pylori in vitro by various berry extracts, with enhanced susceptibility to clarithromycin / A. Chatterjee, T. Yasmin, D. Bagchi, S. J. Stohs // Mol Cell Biochem.- 2004.- Vol. 265, N 1-2.- P.19-26.

104. Inhibition of protein and lipid oxidation in liposomes by berry phenolics / K. Viljanen, P. Kylli, R. Kivikari, M. Heinonen // J Agric Food Chem.- 2004.- Vol. 52, N24.- P. 7419-7424.

105. Isolation of high quality RNA from bilberry (Vaccinium myrtillus L.) fruit / L. Jaakola, A.M. Pirttila, M. Halonen, A. Hohtola // Mol Biotechnol.- 2001.-Vol. 19, N2,-P. 201-203.

106. Isolation of two anthocyanin sambubiosides from bilberry (Vaccinium myrtillus) by high-speed counter-current chromatography / Q. Du, G. Jerz, P. Winterhalter // J Chromatogr A.- 2004,- Vol. 1045, N 1-2.- P.59-63.

107. In vitro anticancer activity of fruit extracts from Vaccinium species / J. Bomser, D. L. Madhavi, K. Singletary, M.A. Smith // Planta Med.- 1996.- Vol. 62, N 3.- P.212-216.

108. LC/PDA/ESI-MS Profiling and Radical Scavenging Activity of Anthocyanins in Various Berries / J.I. Nakajima, I. Tanaka, S. Seo, M. Yamazaki, K. Saito // J Biomed Biotechnol.- 2004.- Vol. 2004, N 5.- P. 241-247.

109. Method of assessment of 137Cs biological availability in forest soil / I.V. Konopleva, R. Avila, A.A. Bulgakov, K. Johanson, A.V. Konoplev, V.E. Popov // Radiats Biol Radioecol.- 2002.- Vol. 42, N 2.- P. 204-210.

110. Natural therapies for ocular disorders, part two: cataracts and glaucoma / K. A. Head // Altern Med Rev.- 2001.- Vol. 6, N 2.- P. 141-166.

111. Nitrate reductase activity in some subarctic species and UV influence in the foliage of Betula pendula Roth, seedlings / M. Krywult, M. Turunen, M.L. Sutinen, K. Derome, Y. Norokorpi // Sci Total Environ.- 2002.- Vol. 284, N 1-3.- P. 149-155.

112. Nitrogen acquisition from inorganic and organic sources by boreal forest plants in the field / J. Persson, P. Hogberg, A. Ekblad, M.N. Hogberg, A. Nordgren, T. Nasholm // Oecologia.- 2003.- Vol. 137, N 2.- P. 252-257.

113. Nitrogen-induced changes in phenolics of Vaccinium myrtillus--implications for interaction with a parasitic fungus / J. Witzell, A. Shevtsova // J Chem Ecol.- 2004.- Vol. 30, N 10.- P. 1937-1956.

114. Nutritional supplements in the prevention of age-related macular degeneration / B. A. Blodi // Insight.- 2004.- Vol. 29, N 1.- P. 15-16.

115. Oribatid mites (Acariformes, Oribatei) as an index of postpyrogenous changes in podzol and peat soils of boreal forest / I.V. Kudriasheva, L.M. Laskova // Izv Akad Nauk Ser Biol.- 2002.- N 1.- P. 106-113.

116. Oxygen radical absorbing capacity of anthocyanins / H. Wang, G. Cao, R. L. Prior//J. Agric. Food Chem.- 1997.- Vol. 45.- P. 304-309.

117. Pharmacological Properties of Myrtillus anthocyanosides: correlation with results of treatment of diabetic microanginopathy / R. Boniface, M. Miskulin, L.

118. Robert, A.M. Robert // Proceeding of the 7th Hungarian Bioflavonoid symposium. Szeged,Hungary, May 16-18, 1985-Budapest: AcademiaiRiado,1986.

119. Polyamine profiles of healthy and parasite-infected Vaccinium myrtillus plants under nitrogen enrichment / J. Witzell, T. Kuusela, T. Sarjala //J Chem Ecol.-2005. Vol. 31, N 3.- P. 561-575.

120. Polyphenolic composition of the leaf of bilberry / D. Fraisse, A. Carnat, J.L. Lamaison // Ann Pharm Fr.- 1996.- Vol. 54, N 6.- P. 280-283.

121. Potential mechanisms of cancer chemoprevention by anthocyanins / D.X. Hou // Curr Mol Med.- 2003.- Vol. 3, N 2.- P. 149-159.

122. Potential role of dietary flavonoids in reducing microvascular endothelium vulnerability to oxidative and inflammatory insults / K. A. Youdim, J. McDonald, W. Kalt, J. A. Joseph // J. Nutr. Biochem.- 2002.- Vol. 13.- P. 282-288.

123. Preventive medical treatment of senile cataract with vitamin E and anthocyanosides: clinical evaluation / G. Bravetti // Ann Ottamol Clin Ocul.- 1989.-Vol.115.- P.109.

124. Radiation preservation of foods of plant origin. Part V. Temperate fruits: pome fruits, stone fruits, and berries / P. Thomas // Crit Rev Food Sci Nutr.- 1986.-Vol. 24, N4.- P. 357-400.

125. Resveratrol in raw and baked blueberries and bilberries / M.M. Lyons, C. Yu, R.B. Toma, S.Y. Cho, W. Reiboldt, J. Lee, R.B. van Breemen // J Agric Food Chem.- 2003.- Vol. 51, N 20.- P. 5867-5870.

126. Resveratrol, pterostilbene, and piceatannol in vaccinium berries / A.M. Rimando, W. Kalt, J.B. Magee, J. Dewey, J.R. Ballington // J Agric Food Chem.-2004.- Vol. 52, N 15.- P. 4713-4719.

127. Simultaneous comparison of relative reactivities of twelve major anthocyanins in bilberry towards reactive nitrogen species / T. Ichiyanagi, Y. Hatano, S. Matsuo, T. // Konishi Chem Pharm Bull (Tokyo).- 2004.- Vol. 52, N 11.- P. 13121315.

128. Spectrophotometric and chromatographic investigation of bilberry anthocyanins for qualification purposes / G. Petri, U. Krawczyk, A. Kery // Acta Pharm Hung.- 1994.- Vol. 64, N 4.- P. 117-122.

129. Studies on Vaccinium myrtillus anthocyanosides. I. Vasoprotective and antiinflammatory activity / A. Lietti, A. Cristoni, M. Picci // Arzneim. Forsch.- 1976.-Vol. 26.-P. 829-832.

130. Study concerning the action of anthocyanoside extracts of Vaccinium myrtillus on night vision / G.E. Jayle, M. Aubry, H. Gavini, et al.// Ann Ocul.- 1965.-Vol. 198.- 556-562 (in French).

131. Structural dependence of HPLC separation pattern of anthocyanins from Bilberry (Vaccinium myrtillus L.) / T. Ichiyanagi, Y. Hatano, S. Matsugo, T. Konishi // Chem Pharm Bull (Tokyo).- 2004.- Vol.52, N 5.- P. 628-630.

132. Structural aspects of antioxidant activity of flavonoids / S.A. Van Acker, D.J. van den Berg, M.N. Tromp, et al. // Free Rad Biol Med.-1996.- Vol. 20.- P. 331342.

133. Suppression of tumor cell growth by anthocyanins in vitro / H. Kamei, T. Kojima, M. Hasegawa, T. Koide, T. Umeda, T. Yukawa, K. Terabe // Cancer Invest.-1995.-Vol. 13.- P. 590-594.

134. Systematic reviews of herbal medicines / E. Ernst // Am J Med.- 2004.-Vol.117, N 7.- P. 533.

135. Tannin-producing substances in the leaves and fruits of the bilberry / H. Friedrich, J. Schonert // Arch Pharm (Weinheim).- 1973.- Vol. 306, N 8.- P. 611-618.

136. Tart cherry anthocyanins inhibit tumor development in Apc(Min) mice and reduce proliferation of human colon cancer cells / S. Y. Kang, N. P. Seeram, M. G. Nair, L. D. Bourquin // Cancer Lett.- 2003.- Vol. 194.- P. 13-19.

137. The effect of bilberry nutritional supplementation on night visual acuity and contrast sensitivity / E.R. Muth, J.M. Laurent, P. Jasper // Altern Med Rev.-2000.- Vol. 5, N2.- P. 164-173.

138. The effect of extremely low doses of the novel regulatory plant proteins / M.S. Krasnov, D.V. Margasiuk, I.A. Iamskov, V.P. Iamskova // Radiats Biol Radioecol.- 2003.- Vol. 43, N 3.- P. 269-272.

139. The flavonoids. A class of semi-essential food components: their role in human nutrition / J. Kiihnau // World Rev. Nutr. Diet.- 1976.- Vol. 24.- P. 117-191.

140. The stomach as a site for anthocyanins absorption from food / S. Passamonti, U. Vrhovsek, A. Vanzo, F. Mattivi // FEBS Lett.- 2003,- Vol. 544.- P. 210-213.

141. Vaccinium Myrtillus anthocyanosides Pharmacokinetics in Rats / P. Morazzoni, M. J. Magistretti // Arzneim.-Forsch. Drug Res.-1991.- Vol. 41, NI.-132-136.

142. What do herbalists suggest to diabetic patients in order to improve glycemic control? Evaluation of scientific evidence and potential risks / A. F. Cicero, G. Derosa, A. Gaddi //ActaDiabetol.- 2004.- Vol. 41, N3.- P.91-98.

143. Wine, alcohol, platelets, and the French paradox for coronary heart disease/ S. Renaud, M. de Lorgeril//Lancet.- 1992.- Vol. 339.- P. 1523-1526.157. www.medpeterburg.ru/news/81222200.html158. www.eyenews.ru/statiterap20.htm