Иммунохимический анализ, диагностическая эффективность и протективные свойства клеточных антигенов протосколексов Echinococcus multilocularis тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.19, кандидат биологических наук Руднева, Ольга Вячеславовна

• Руднева, Ольга Вячеславовна
• кандидат биологических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Руднева, Ольга Вячеславовна

Введение.

1. Обзор литературы.

1.1 Антигены эхинококков, их характеристика, диагностическая эффективность.

1.2 Иммунопрофилактика ларвальных 22. цестодозов.

2. Собственные исследования. 2.1 Материалы и методы.

2.1.1. Подготовка к проведению культуральной работы. 43.

2.1.2. Получение инвазивного материала Е. multilocularis, 44. заражение белых крыс.

2.1.3. Получение вторичных ларвоцист Е. multilocularis 2, 4 и 6 - месячного возраста, приготовление первичной клеточной культуры протосколексов, проверка ее 48. жизнеспособности.

2.1.4. Культивирование клеток протосколексов из ларвоцист E.multilocularis разного возраста, получение клеточных метаболитов, оценка их антигенной активности. 49.

2.1.5. Контроль клеточных метаболитов на стерильность, безвредность, определение содержания белка. 53.

2.1.6. Иммунохимический анализ антигенов-метаболитов клеточной культуры протосколексов из 2, 4 и 6 - месячных ларвоцист Е. multilocularis 54. а) с кроличьей гипериммунной сывороткой к антигенам соматического экстракта протосколексов паразита; 54. б) с сывороткой человека с подтвержденным диагнозом цистного и альвеолярного эхинококкозов; 55. с) с сыворотками экспериментально зараженных Е. multilocularis белых крыс. 55.

2.1.7. Исследование антигеноактивных серий метаболитов («клеточных» антигенов) протосколексов из ларвоцист Е. multilocularis иммуноферментной реакцией 55. (ИФР). а) с сыворотками свиней; 55. б) с сыворотками людей. 55.

2.1.8 Изучение иммунопрофилактических свойств «клеточных» антигенов при экспериментальном альвеолярном эхинококкозе мышей в комплексе 56. а) с иммуномодулятором риботаном; 56. б) с полным адъювантом Фрейнда. 58.

2.1.9. Статистическая обработка результатов. 59.

2.2 Результаты исследований. 59.

2.2.1. Анализ данных по культивированию клеток протосколексов Е. multilocularis из 2, 4 и 6 - месячных ларвоцист паразита. 59.

2.2.2. Характеристика и контроль «клеточных» антигенов протосколексов из 2, 4 и 6 - месячных ларвоцист Е. multilocularis. 61.

2.2.3. Результаты иммунохимического анализа «клеточных» антигенов протосколексов. 66.

2.2.4. Оценка диагностической эффективности «клеточных» антигенов протосколексов из 2-, 4- и 6-месячных ларвоцист Е. multilocularis. 72. а) при цистном эхинококкозе свиней; 72. б) при цистном эхинококкозе людей. 75.

2.2.5. Сравнение диагностической эффективности «клеточных» антигенов протосколексов из 2, 4 и 6 - месячных ларвоцист Е. multilocularis при цистном эхинококкозе 82. человека.

2.2.6. Иммунопрофилактические свойства «клеточных» антигенов в комплексе с риботаном при экспериментальном вторичном альвеолярном эхинококкозе мышей. 86.

2.2.7. Иммунопрофилактические свойства «клеточных» антигенов в комплексе с адъювантом Фрейнда при экспериментальном вторичном альвеолярном эхинококкозе мышей. 91.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммунохимический анализ, диагностическая эффективность и протективные свойства клеточных антигенов протосколексов Echinococcus multilocularis»

Актуальность проблемы.

Цистный и альвеолярный эхинококкозы являются одними из наиболее опасных гельминтозоонозов. Распространение в России цистной и альвеолярной формы эхинококкозов за 1986-1995 годы остается примерно на одном уровне - около 1,1 случаев на 100 тысяч населения. За последние годы этот показатель может несколько увеличиться по причине усиления урбанизации, возросшей миграции населения, развала устоявшихся экономических отношений, а также в связи с ухудшением социальных условий жизни и снижения санитарно-эпидемиологического контроля (Коваленко Ф.П. и др., 2002).

Невозможность ранней клинической диагностики ларвального эхинококкоза приводит к необходимости разработки и усовершенствования иммунологических методов, так как полученная с их помощью информация имеет не только диагностическое значение, но может служить также для оценки эпидемической и эпизоотической ситуации. Немаловажное значение для успешной борьбы и профилактики ларвальных цестодозов, как эхинококкозы, приобретает разработка иммунопрофилактических средств на основе специфических антигенов паразита и неспецифических иммуностимулирующих препаратов. Применение иммунопрофилактических средств позволяет значительно повысить сопротивляемость организма, снизить, а в некоторых случаях и предотвратить заражение животных. Проведение полноценных иммунодиагностических и иммунопрофилактических исследований невозможно без наличия активных и высокоспецифичных антигенов, получение которых традиционными методами в последние годы стало достаточно проблематичным, поскольку требует значительных количеств исходного гельминтного материала. В процессе инвазии при ларвальных цестодозах, как и при других гельминтозах в организме хозяина синтезируются антитела различной специфичности, причем некоторые из них являются продуктом действия антигенных компонентов, являющихся общими для большинства гельминтов, что значительно затрудняет разработку иммунодиагностических методов. Экспериментально установлено, что диагностическая эффективность иммунореакций в большой степени зависит от качества используемых антигенов. Поэтому получение стандартизированных видоспецифичных антигенов гельминтов является одной из актуальных задач, в решении которых большое значение имеют биотехнологические методы. С развитием биотехнологии стало возможным конструирование иммунодиагностических и иммунопрофилактических препаратов нового поколения, основанных на использовании генной инженерии и гибридомной техники. Применение этих технологий позволило создать рекомбинантные пептиды, обладающие свойствами антигенов.

К числу перспективных направлений биотехнологии в получении антигеноакгивных препаратов из гельминтов относится и клеточная инженерия, которая позволяет использовать культуры клеток для решения многих научных и прикладных задач биологии, медицины и сельского хозяйства. Преимущества клеточной технологии в получении антигенов гельминтов и других биологических объектов сводятся к тому, что клеточные культуры можно приготовить из различных антигеноактивных субстанций паразитов и длительное время сохранять в функциональном состоянии в искусственных питательных средах путем их многократного пассирования. Хотя работ по культивированию клеток тканей и органов гельминтов немного, подобные исследования проводились давно и были сделаны конкретные выводы о такой возможности (Sakamoto Т. et al., 1967; Rickard M.D., Bell K.J., 1971; Sakamoto Т., 1978; Smith М.А., 1979; Fiori et al., 1988; Furuya K. et al., 1990; Feng J.-J. et al., 1992; Lu J.H. et al., 1998). Очищенные экскреторно-секреторные антигены, полученные при культивировании гельминтов рода Echinococcus, используются для изучения иммунитета и вакцинации животных (Heath D.D., 1976; Rickard M.D., 1978; Onawunmi О.А., Coles G.C., 1980; Osborn О J., Heath D.D., 1982).

В свете вышеизложенного актуальными представляются исследования по использованию клеточной технологии для получения антигенов протосколексов из вторичных ларвоцист E.multilocularis разного возраста, изучению идентичности «клеточных» антигенов иммунохимическим методом и оценке их диагностической и протективной эффективности.

Цели и задачи исследования.

Основной целью наших исследований было получить «клеточные» антигены из протосколексов E.multilocularis, выделенных из 2-, 4- и 6-месячных ларвоцист паразита, провести их иммунохимический анализ, оценить диагностическую эффективность и изучить протективные свойства.

Для выполнения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1) Получить 2-, 4- и 6-месячные ларвоцисты E.multilocularis, выделить клетки протосколексов и подобрать оптимальные условия их культивирования в искусственных питательных средах для получения клеточных метаболитов.

2) Провести отбор антигеноактивных серий клеточных метаболитов.

3) Собрать банк сывороток крови от животных и людей, зараженных E.granulosus, E.multilocularis, другими гельминтами и клинически здоровых.

4) Провести иммунохимический анализ полученных типов «клеточных» антигенов E.multilocularis в сравнении с соматическим экстрактом и 3-дневными экскреторно-секреторными продуктами культивируемых in vitro протосколексов E.multilocularis.

5) Оценить диагностическую эффективность иммуноферментной реакции с «клеточными» антигенами разных типов при цистном эхинококкозе человека и животных.

6) Изучить протективные свойства «клеточных» антигенов E.multilocularis разного возраста в комплексе с иммуномодулятором риботаном, и также с полным адъювантом Фрейнда при экспериментальном альвеолярном эхинококкозе.

Научная новизна

Впервые иммунохимическим анализом с различными антисыворотками установлено 1-2 идентичных антигенных компонента в «клеточных» антигенах протосколексов из 2-, 4- и 6-месячных ларвоцист E.multilocularis, соматическом экстракте и 3-дневных экскреторно-секреторных продуктах культивируемых in vitro протосколексов паразита.

Впервые на основании разработанных параметров постановки иммуноферментной реакции со всеми типами «клеточных» антигенов протосколексов E.multilocularis проведена сравнительная оценка их диагностической эффективности при цистном эхинококкозе свиней и человека. Установлена чувствительность иммунотеста при цистном эхинококкозе свиней соответственно 75,6; 73,3;73,3%; специфичность - 68,9; 72,1; 69,6%; при цистном эхинококкозе человека - 89,66; 89,66; 86,2%; и - 82,07; 86,2; 86,2%. Впервые изучены протекгивные свойства полученных «клеточных» антигенов протосколексов Е.multilocularis в комплексе с иммуномодулятором риботаном и с полным адъювантом Фрейнда при экспериментальном эхинококкозе. Эффективность защиты в первом случае составила соответственно 91,7; 91,7; 83,4%; во втором-80,0; 90,0 и 70,0%.

Практическая значимость

Материалы диссертационной работы Рудневой О.В. вошли в «Методику идентификации "клеточных" антигенов эхинококка», одобренную секцией «Инвазионные болезни животных» Отделения ветеринарной медицины РАСХН.

В заявку на изобретение «Способ профилактики вторичного альвеолярного эхинококкоза (гидатидоза)». Получено положительное решение на выдачу патента №2004129658/13(032366) от 11.10.2004г.

Установленная диссертантом иммунохимическим анализом идентичность антигенов-метаболитов культивируемых в искусственной питательной среде клеток протосколексов Е.multilocularis , выделенных из 2-, 4 - и 6-месячных ларвоцист паразита, доказывает экономическую целесообразность использования в культуральной работе для получения «клеточных» антигенов эхинококков ларвоцисты Е.multilocularis не более 3-4-месячного возраста, что позволит сократить как срок содержания инвазированных экспериментальных животных, так и затраты на их кормление.

Апробация работы.

Материалы диссертационной работы представленны и обсуждены на:

1. Научной конференции «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями» (2002-2004гг).

2. Заседаниях Ученого Совета ВИГИС (2002-2005гг)

3. Секции «Инвазионные болезни животных «Отделения ветеринарной медицины РАСХН (2005г).

Основные положения, выносимые на защиту

Культивирование клеток протосколексов, выделенных из ларвоцист Е.multilocularis 2,4 и 6 - месячного возраста, получение «клеточных» антигенов.

Иммунохимический анализ «клеточных» антигенов разного типа с использованием кроличьей гиперимунной сыворотки к соматическому экстракту протосколексов паразита, сыворотки человека с подтвержденным диагнозом цистного и альвеолярного эхинококкоза и сыворотки экспериментально зараженных E.multilocularis крыс.

Оценка диагностической эффективности ИФР с «клеточными» антигенами E.multilocularis разного типа с сыворотками людей и свиней.

Протективные свойства полученных «клеточных» антигенов при экспериментальном альвеолярном эхинококкозе.

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 6 научных работ и 2 работы приняты к публикации.

Объем и структура диссертации. Материалы диссертации изложены на страницах машинописного текста. Состоят из введения, обзора литературы, раздела собственных исследований, включающего: материалы и методы, результаты исследований и их обсуждение, выводы, практические предложения, список литературы и приложение. Список литературы включает 200 источников, в том числе 53 отечественных и 147 зарубежных авторов. Работа иллюстрирована 12 таблицами и 24 рисунками. и

1. Обзор литературы.

Заключение диссертации по теме «Паразитология», Руднева, Ольга Вячеславовна

4. Выводы

1). Проведено культивирование клеток протосколексов, выделенных из вторичных ларвоцист E.multilocularis 2-,4- и 6-месячного возраста, получены антигены клеточной культуры («клеточные» антигены) с содержанием белка 2175 мкг/мл 4600мкг/мл и 3500мкг/мл соответственно.

2). Реакцией иммунодиффузии (РИД) в агаровом геле проведен иммунохимический анализ «клеточных» антигенов протосколексов из 2, 4 и 6 - месячных вторичных ларвоцист Е. multilocularis с кроличьей гипериммунной сывороткой к антигенам экстракта протосколексов паразита, сывороткой экспериментально зараженных Е. multilocularis крыс и сывороткой человека с подтвержденным диагнозом цистного и альвеолярного эхинококкозов.

3). В гомологичной системе РИД (гипериммунная кроличья сыворотка х экстракт протосколексов Е. multilocularis) выявлено не менее 5-6 комплексов антиген-антитело; между этой же антисывороткой и антигенами клеточной культуры протосколексов из

2, 4 и 6 - месячных вторичных ларвоцист Е. multilocularis проявлялась не более 1-2 комплексов антиген-антитело, представленных в РИД идентичными полосами преципитации.

4). Установлено наличие в «клеточных» антигенах протосколексов 2, 4 и 6-месячных вторичных ларвоцист Е. multilocularis диагностического антигенного компонента, способного выявлять специфические антитела в сыворотках экспериментально зараженных E.multilocularis крыс и сыворотках больных цистной и альвеолярной формой эхинококкоз.

5). Проведена сравнительная оценка диагностической эффективности «клеточных» антигенов протосколексов из 2, 4 и 6-месячных вторичных ларвоцист Е. multilocularis иммуноферментной реакцией при цистном эхинококкозе свиней; установлена чувствительность и специфичность теста 75,6; 73,3 и 73,3% и 68,9; 72,1 и 69,6% соответственно.

6). Диагностическая эффективность ИФР с «клеточными» антигенами протосколексов из 2, 4 и 6-месячных вторичных ларвоцист Е. multilocularis при цистном эхинококкозе человека составила соответственно 89,7, 89,7 и 86,2% по чувствительности и 82,07, 86,2 и 86,2% по специфичности.

7). Изучены иммунопрофилактические свойства «клеточных» антигенов протосколексов из 2, 4 и 6-месячных вторичных ларвоцист Е. multilocularis в комплексе с иммуномодулятором риботаном и полным адъювантом Фрейнда при экспериментальном вторичном альвеолярным эхинококкозе мышей.

8). Установлено, что 3-кратная подкожная иммунизация мышей «клеточным» антигеном протосколексов из 2, 4 и 6-месячных вторичных ларвоцист Е. multilocularis в дозе 80 мкг белка и 5 мкл риботана предохраняла мышей от заражения инвазивным материалом E. multilocuiaris. Защитный эффект составил 91,7; 91,7 и 83,4%

9). Иммунизация мышей «клеточными» антигенами протосколексов из 2,4 и 6 - месячных ларвоцист E.multilocularis в комплексе с полным адъювантом Фрейнда предохраняла их от последующего заражения E.multilocularis на 80,0; 90,0 и 70,0% соответственно.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Руднева, Ольга Вячеславовна, 2006 год

1. Аделыиин Ф.К., Баллад Н.Е., Коваленко Ф.П. Оценка протекгивной активности очищенных фракций альвеококкового антигена при экспериментальном альвеококкозе линейных мышей// Мед. паразитол. и паразитарн. болезни. 1983. -Т.61, №2. -С.21-26.

2. Аделыиин Ф.К., Баллад Н.Е., Сажин В.А. Биохимический состав неочищенного альвеококкового антигена // «Фауна, сист. биол. и экол. гельминтов и их промежуточных хозяев.» Горький, 1983, с.3-5.

3. Аделыиин Ф.К., Ярулин Г.Р. Оценка иммунизирующей активности антигенов альвеококка с помощью РИГА и РИФ //Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1983. - Т.61, №6. - С.46-50.

4. Алферова М.В. Реакция сколексопреципитации при экспериментальном цистициркозе крупного рогатого скота.// «болезни с.-х. животных» труды УзНИВИ, Ташкент. 1978. -т.28, ч.1.-26-28.

5. Баллад Н.Е. Изучение антигенных компонентов цистицерков Cysticercus bovis.//Tp.Bcec. института гельминтологии.-1971.-Т.17.-С.269-270.

6. Баллад Н.Е. Иммунохимическая характеристика антигенов, выделяемых на личиночной стадии Taeniarhynchus saginatus./Яр.Всес. института гельминтологии.-1973.-№2.-С.131-136.

7. Баллад Н.Е., Шамхалов В.М., Белозеров С.Н., Клименко В.В., Шеховцов Н.В., Написанова Л.А. Изучение диагностической эффективности иммуноферментной реакциипри эхинококкозе овец в производственных условиях.//Бюлл. ВИГИС.-1991 .-Т.53.-С. 10-15.

8. Баллад Н.Е., Гаврилова Е.М., Зорихина В.И. Эффективность применения иммуноферментного метода в диагностике эхинококкоза и альвеококкоза в зависимости от степени очистки антигена. // Мед. паразитол. и паразитарн. болезни. -1979.-т.48., №2.-С. 70-76.

9. Баллад Н.Е., Гаврилова Е.М., Белова И.Н. Определение диагностического значения иммуноферментного метода (на примере определения антител к антигенам эхинококка). // Мед. паразитол. и паразитарн. болезни. 1986. - №3. - С. 2226.

10. Berezhko V.K., Klimenko V.V., Uspensky A.V., Shekhovtsov N.V. Field trials of diagnosis of hydatidoses in sheep.// Bull. Soc. fr. parasitol. 1990, 8. suppl.№2., - p.908.

11. Бережко В.К., Бессонов А.С. Изучение метаболитов клеток перевиваемой культуры метацестоды T.crassiceps.//Tp. Всес. ин-та гельминтол.-1996.-Т.32.-С. 1822.

12. Бережко В.К., Кленова И.Ф. Антигенная активность клеточных метаболитов протосколексов Coenurus cerebralis.//Tp. Всес. ин-тагельминтол.-1999.-Т.35.-С.39-45.

13. Бережко В.К., Коваленко Ф.П. Клеточные метаболиты вторичных ларвоцист Echinococcus multilocuiaris как диагностический антиген при эхинококоозах. // Матер, докл. науч. конф. «Теория и практика борьбы с празитарными болезнями». Москва. - 1999. - с.30-32.

14. Бережко В.К., Бессонов А.С./Использование клеточных метаболитов E.multilocularis в качестве диагностических антигенов./Ветеринария.-2000.-№2.-С.31 -34.

15. Бережко В.К., Кленова И.Ф. Культивирование клеток цестод в искусственных питательных средах и характеристика антигенов клеточной культуры// Материалы юбилейной конф.,посвященной 20-летию КБГСХА, секция «Зооветеринарные науки», Нальчик. 2001. - С.59-61.

16. Бережко В.К., Кленова И.Ф., Коваленко Ф.П. Иммунопрофилактические свойства антигенов клеточной культуры метацистоды Echinococcus multilocularis при экспериментальном альвеолярном гидатидозе мышей//Тр. Всесс. ин-та гельминтол.-2001. -Т.37. С. 34-41.

17. Бессонов А.С. Специфическая профилактика паразитарных болезней //Ветеринария. 2000. - №11. -С.3-6.

18. Бессонов А.С. альвеолярный эхинококкоз и гидатидоз // Из-во Россельхозакадемии. Москва. 2003.-334стр.

19. Дьяконов Л.П., Глухов В.Ф., Поздняков А.А., Денисенко Г.Ф., Гололобова М.Т., Панкова Г.Е., Камыкова Т.Т. Культура клеток и тканей животных: Учебно-методическое пособие//Ставропол ь.-1980,-112с.

20. Залаторене А.Тучноклеточная реакция в некоторых органах белых крыс при введении эхинококкоз но го антигена //В сб. "Теор. и пракг. вопр. паразитол. Материалы 8-й научной конференции по проблемакм паразитологии в Прибалтике", Тарту. 1979. - С.73-74.

21. Збарский А.И., Тумольская Н.И./Оценка состояния Т- и В -систем иммунитета у больных эхинококкозами с помощью клеточных и гуморальных тестов // Мед. паразитол. и паразитар. болезни 1983. - Т.61, №2. - С. 15-21.

22. Зорихина В.И., Баллад Н.Е./Серологические методы диагностики эхинококкоза.//Эхинококкозы. Методы исслед., леч., проф.-М.-1990.-С.49-61.

23. Зорихина В.И., Баллад Н.Е./Иммунологический метод (ELISA) в диагностике эхинококкозов.//4-я научи, конф. по паразитол.-Варна.-1983.-С.238-239.

24. Зорихина В.И., Баллад Н.Е., Кишинян А.Ш./Сравнительная эффективность ИФР и РИГА в диагностике эхинококкоза.// Мед.паразитол. и паразитарн. бол.-1982.-№2.-С.21-24.

25. Ибрагимов P.M. Получение и биохимическая характеристика атигенных (аллергенных) фракций эхинококка. //Автореф. дисс. канд. биол. наук Алма-Ата.-1970.- С.98-99.

26. Кленова И.Ф. Разработка клеточной технологии получения антигенов цестод (на примере Coenurus cerebralis и Echinococcus multilocularis): Дисс.канд. вет. наук. М.-1999.-125с.

27. Коваленко Ф.П. и др. «Способ моделирования ларвального альвеококкоза» А.с. СССР № 991485 // Бюл. «Открытия и изобретения». 1983. - № 3. - С. 238.

28. Kovalenko F. et al. «Hydatid diseases of human (cystic and alveolar) in Russia (1983 1997)» // Acta Parasitologica, VIII Europ. Multicolloquiym of Parasitol., July, 2002. - 2002. - V. 45. -№ 3.-P. 241-242.

29. Косминков И.Е. Диагностика и профилактика цистицеркозов и ценуроза жвачных //Дисс. д-ра вет. наук. М. -1990.

30. Красюкова Л.С. Культивирование клеток ларвоцист эхинококка и использование его протосколексов для отбора антгельминтных препаратов: Дисс.канд. биол. наук. М.-1987.-184с.

31. Красюкова Jl.С. Получение клеточной суспензии из ткани эхинококкового пузыря //10 конф. Укр. об-ва паразитол., Одесса, -1986. ч.З. матер, конф. Киев. - 1988 - с.21-22.

32. Михайлов С.Н., Тротт В.Ф./ Об иммунных реакциях больных альвеококкозом печени// Гельминтозы человека. Респ. сб. научн. трудов. Ленинград. 1987. - С. 177-181.

33. Новак М.Д./Иммунодиагностика эхинококкоза овец и крупного рогатого скота.//Мат. докл. научи, конф. «Актуальн. вопр. теор. и прикл. тремат-ии и цестод-ии».-М.-1997.-С. 104106.

34. Одоевская И.М., Бенедиктов И.И., Опыт получения рекомбинантных белков-антигенов Echinococcus granulosus. //Труды ВИГИС, т.40, - Москва, 2004. - с. 256-275.

35. Петров П., Юрупова Д., Ешкенази M./ELISA в диагностике трихинеллеза и эхинококкоза.//Эпидемиол., микробиол. и инфекц. Болезни.-1981 .-Т. 18.-№2.-С. 178-181.

36. Пинаев Г. П. «Методы культивирования клеток», 1989.

37. Подопригора Г.И., Збарский А.И. Перспективы развития иммунодиагностического и иммунопрофилактического направления в паразитологии.//Мед. паразитол. и паразитарн. болезни,-1990.-№5.-С.26-30.

38. Подопригора Г.И., Старкова Т.В., Эккерт Д., Готстейн Б. Сравнительная эффективность коммерческих тестов (российского и швейцарского производства) иммуноферментного анализа на эхинококкоз.// Мед. паразитол. и паразитарн. болезни.- 1994.-№3.-С.51-52.

39. Раззаков Ш.А. Выявление видоспецифических и перекрестно реагирующих антигенных компонентовэхинококка и альвеококка.//Мед. паразитол. и паразитарн. болезни,-1975.-Т.44.-№4.-С. 118-155.

40. Разаков Ш. А. Получение сывороток узкой специфичности и их использование для идетнификации антигенных компонентов эхинококка и альвеококка. // Мед. паразитол. и паразитарн. болезни. 1976. -Т.45, №2, - С.148-150.

41. Раззаков Ш.А. Сравнительная антигенная характеристика разных образцов эхинококковой жидкости и экстрактов альвеококковых узлов.// Мед. паразитол. и паразитарн. болезни.- 1975.-№2.-С. 137-142.

42. Сивкова Т.Н. Диагностическая эффективность антигенов клеточной культуры при цистном гидатидозе животных // В сб. «Теория и практика борьбы с паразитарн. болезнями (зоонозы).» Москва, 2002. вып. 3. - с.305-307.

43. Сивкова Т.Н. Диагностическая эффективность антигенов клеточной культуры протосколексов Echinococcus granulosus при цистном гидатидозе животных // Труды ВИГИС, т.38, -Москва, 2002. - с. 278-284.

44. Сивкова Т.Н., Бережко В.К. Эффективность антигенов клеточной культуры протосколексов Echinococcus granulosus и Echinococcus multilocularis в диагностике цистного гидатидоза свиней. // Ветеринария. 2002. - №8. - с.7.

45. Спиер Р.Е. и Гриффите Дж. Б. «Биотехнология клеток животных», 1989.

46. Тумольская Н.И., Збарский А.И., Кудряшова Н.М. Некоторые показатели иммунитета у больных эхинококкозом и альвеококкозом в зависимости от особеностей течения заболевания. // Мед. паразитол. и паразитар. болезни 1983. -Т.61, №5. - С. 10-16.

47. Шумова Н.С. Разработка специфической профилактики тенуикольного цистицеркоза овец // Дисс. канд. вет. наук. Москва. 1994. - 133с.

48. Ali-Khan Z. Host-parasite relationship in echinococcosis. I. Parasite biomass and antibody response in three strains of inbred mice against graded doses of Echinococcus multilocuiaris cysts.//J.Parasitol.-1974.-V.60.-P.231-235.

49. Ali-Khan Z., Siboo R. Echinococcus multilocuiaris immunoglobulin and antibody response in C57BL/6S mice. // «Exp. Parasitol». 1982, - V.53., №1. - P.97-104.

50. Ali-Khan Z., Siboo R. Immune complexes experimental alveolar hydatidosis. // «Tropenmed und Parasitol». 1983, -V.34., №3.-P. 187-192.

51. Allintas N., Ozensoy S. Application of biotin-avidin system: determination of antybody response in hydatidosis. // 6th Int. Helminthol. Simposium the High Tatras, CSFR., sept. 23-27, Progr. and Abstr. -1991. P.93.

52. Auer H., Hermentin K., Aspock H. In vitro production of Echinococcus antigens for diagnosis. // «Progr. and Abstr. of the V Europ. Multicolloq. of Parasitol., sept. 4-9, 1988, Budapest, Hungary», 1988. P.10-6.

53. Bareja U.K., Basak S., Thusoo Т.К. Immunodiagnosis of human hydatiddisease.//J.Commun.Diseases.-1997.-N4.-P.313-319.

54. Brandonisio O., Greco В., Panaro M., Altamura M., Jarillo E. Antiparasite immutity and evasion strategies from the host. // Biomed. Lett. 1993. - V.48, №191. - P.235-246.

55. Bout D., Fruit J., Capron A. Purification d'un antigene specifique de liquide hydatique.//Anns Immunol.Inst.Pasteur.-1974.-V.125C.-P.775-788.

56. Bhattacharya A., Bhattacharya S., Sehgal D. Molecular basis of immune response against parasites. // Curs. Sci India. 1991. -V.60, №9-10.-P.569-580.

57. Bruschi Fabrizio Nodulazione delle cellule intflammatorie nelle infezione da elminti // Ann. 1st. Super. Sanita. 1997. - 33, №4. -c.541-549.

58. Capron A., Biguet S., Vernes A. Le diagnostic immunoelectrophoretique de l'hydatidose.//J. dvHydatidiogie Sim. ed. Lion.-1967.-P.27-40.

59. Capron A., Biguet S., Vernes A., Afchain E. Structural antigenique des helminthes. Aspects immunologigues. Des relations hoste-parasite // Pathol. Bid. 1968, V.16. - P.121-138.

60. Capron A., Wakelin D., Tsuji M., Antigenic character of parasitic organisms VI Final remarks.// Rew. Adv. Parasitic. Proc. 4 Int. Congr. Parasitol КОРА IV, Warszawa, 19-26 Aug. 1978, Warszawa, 1981. P.618-621.

61. Capron A., Dessaint J.P. Molecular basis of host-parasite relationship: towards the definition of protective antigens. // Immunol. Rev. 1989. -V. 112. - P.27-48.

62. Capron A., Dessaint J. Immunologic aspects of schistosomasis. //Annu. Rev. Med.: Select. Top. Clin. Sci. 1992. — V.43. - P.209-218.

63. Capron A., Yarzabal L., Vernes A.,Fruit J. Le diagnostique immunologique de ehcinococcose humaine.//Path. Bid.-1970.-V.18.-N 7-8.-P.357-365.

64. Chordi A., Kagan ^Identification and characterization of antigenic components of sheep hydatid fluid by immunoelectrophoresis.//J. Parasit.-1965.-V.51 .-NI.-P.63-71.

65. Contreras M., Del, Gallo S., Salinas Sapunar J., Sandoval L., Solis F. Evaluation of ELISA IgG, using a piorified antigen in thediagnosis of human hydatidosis. // Bol. Chileno Parasitol., 1994. — V.49, №1/2,-P. 24-30.

66. Craig P.S., Rickard M.D. Anti-oncospheral antibodies in the serum of lambs experimentally infected with either Taenia ovis and Taenia hydatygena.// «Z.Parasitenk».-1981.-V.64.№2.-P.169-177.

67. Cuesta Bandera C., Guillen Liera J.L., Casado escribano N. Diagnostico de la hydatidosis natural у experimental. Analisis de las resultados obtenidos por diversas pruebas.//Rev.iber. Parasitol.-1982.-P.359-365.

68. Dieckmann-Schuppert A., Ruppel A., Burger R., frank W. Echinoccoccus multilocularis: in vitro secretion of antigen by hybridomas from metacestode germinal cells and murine tumor cells//Experimental Parasitology.-1989,- V.29.- P. 186-191.

69. Dixon J.В., Jenkins P., Carter S.D., Craig P.S. Abnormal immunoregulation in metacestode infection.//16th. Int. Congr. of Hydatidology, Beijing, China, 1993. V.30. - P.290.

70. Dottorini S., Sparvoli M., Baldelli F., Fiorio M., Tassi C. Echinococcus granulosus: diagnosis of hydatid disease in sheep.//Riv. Parasitol.-1984.-V.45.-N2.-P.333-340.

71. Dottorini S., Tassi C. Echinococcus granulosus: comparison between antigens in scolices and hydatid fluid.//lnt.J.Parasitol.-1978.-V.8.-P.259-265.

72. Dottorini S., Tassi C. Echinococcus granulosus: characterisation of the main antigenic component (Arc 5) of hydatid fluid.//Exp.Parasitol.-1977.-V.43. №2 -P.307-314.

73. Eckert J., Jacquiler P., Baumann D., Raeber P.A. Echinokokkose des Menschen in der Schweiz,1984-1992.//Schweiz. med. Wochenschr. 1995. - 125. - №42. - 19891998.

74. Edwards G.T., Herbert J.V. Preliminary investigations into the immunization of lambs against infection with Taenia multiceps metacestodes. /Л/et. Parasitol. 1982. - V.9, №3-4. - P. 193199

75. Faubert G. M. Antigenic character of parasitic organisms. Ill Parasite products in the regulation of the immune response. // Rev. Adv. Parasitol. Proc. 4-th Int. Congr. Parasitol., Warszawa, 19-26 aug. 1978. Warszawa, 1981. P. 604-608.

76. Felleisen R., Gottstein B. Comparative analysis of fullength antigen 11/3 from Echinococcus multilocularis and Echinococcus granulosus . // Parasitology, 1994. -V. 109, №2: 223-232.

77. Felleisen R., Zimmermann V., Muller N., Gottstein B. Cellular immunerresponse in alveolar echinococcosis to recombinant antigens. // 8th Int. Congr. of Parasitol., 10-14 Oct. 1994. Izmir-Turkey, Abstr., V.1.-P.155.

78. Feng J.J., Wang J.Y., Qu J.A., Xiao S.H. ELIB of specific antigens in vitro cultivated cultivated germinal cells of Echinococcus granulosus. .//Chin. J. Parasitol. and Parasit. Diseases.-1993.-V.ll, №1.- P.63-65.

79. Feng J.-J., Xiao S.-H., Guo H.-F., Shen B.-G., Jiao W. Screening antyhydatid drugs using cultivated germinal cells of Echinococcus granulosus.//Chin. J. Parasitol. and Parasit. Diseases.-1993.-11 (№1): 12-6.

80. Fiori P.L., Monaco G., Scappaticcis S., Pugliese A., Canu N., Cappuccinelli P. Establishment of cell cultures from hydatid cysts of Ehinococcus granulosus. // Int. J. Parasitol. 1988. - V.18. -P.297-305.

81. Fischman A./A new whole-scolex complement-fixation test for hydatid disease.//Bull.Wld. Hlth. Org.- 1968.-T.39.-№l.-P.43-48.

82. Frosch P., Hartmann M., Muhlschlegol F., Frosch M. Sequence heterogeneity of the echinococcae antigen B. // Mol. and Biochem. Parasitol. 1994.- V.64, №1: 171-175.

83. Furuya К., Honnra H., Kumagai M. A cell line derived from larvae Echinococcus multilocuiaris. // Bull. Soc. Fr. Parasitol. -1990. -V.8, suppl. №1. P.159.

84. Garabedian J.A./Evaluation of the reactivity of hydatid whole-scolex antigen in hydatid disease serology.//Ann. Trop. Med. Parasit.-1971.-V.65.-N3.-P.385-391.

85. Gemmell M.A., Johnstone P.D. Factors regulating tapeworm populations: estimation of the duration of asquired immutity by sheep to Taenia hydatigena. //Research in Veterinary Science, -1981.-V.30, №1. P.53-56

86. Gonzalez G., Nieto A., Fernandez C., Orn A., Wernstedt Ch., Hellman U. Two different 8 kDa monomers are involved in the oligomeric organization of the native Echinococcus granulosus antigen B. // Parasite Immunol. 1996. - V.18, №12. - P.587-596.

87. Gottstein В., Eckert J., Fey H. Serological differentiation between Echinococcus granulosus, Echinococcus multilocuiaris in man.//Z. Parasitenk.-1983.-V.69.-N3.-P.347-356.

88. Gottstein В., Tshudi K., Eckert J.,Ammann R. Em-2-ELISA for the follow-up of alveolar echinococcosis after complete resection of liver lesions.//Trans.Roy.Soc.Trop.Med.andHyg.-1989.-V.83.-N3.-P.389-393.

89. Gottstein В., Schantz P.M., Todorov Т., Saimot A.G., Jacquier P. An internation study on the serological differential diagnosis ofhuman cystic and alveolar echinococcosis.//Dull.W.H.0.-1986.-V.64.-NI.-P.101-105.

90. Gottstein B. Immunodiagnosis of human infection by larval cestodes.//Progr. and Abstr. of the V-th Europ. Multicollog. of Parasitol., sept. 4-9., 1988., - Budapest, Hungary. Budapest. -1988.-10-15.

91. Gottstein В., Schantz P.M., Wilson J.F. Serological screening for Echinococcus multilocularis infections with ELISA//Lancet, 1985, V.1, №8437, P. 1097-1098.

92. Haernander A., Nieto A. //Parasite Immunol. 1994. - V.16, №10. - P.537-544

93. Hariri M.N., Schvabe C.W., Koussa M. Host-parasite relationships in echinococcosis.XI. The antigens in the indirect hemagglutination test for hydatid disease.//Am.J.Trop.Med.-1965.-V.14.- P.592-604.

94. Harrison J.S., Parkhouse R.M.E. Antigens of Taeniid cestodes in protection, diagnosis and escapl. // Parasite Antigens Protect. Diagn. And Esape. 1985. - P. 159-172.

95. Heath D.D. Resistance of Taenia pisiformis iarvae in rabbits: Immunisation against infection using non-living antigens from in vitro culture.//lntern.J.Parasitology.-1976.-V.6.-P. 19-24.

96. Heath D.D., Holeman В., Shaw P.J. Echinococcus granulosus: the mechanism of oncosphere lysis by sheepcomplement and antibody. //Int. J. Parasitol. 1994. - V.24, №7. - P.929-935.

97. Helbig M., Frosch P., Kern P., Frosch M. Serological differentiation between cystic and alveolar echinococcosis by use of recombinant larval antigens.// J. Clin. Microbiol. 1993. - V.31, №12. -P.3211-3215.

98. Hilwing R.W., Cramer J.D./ln vivo cross-creactivity of Taenia saginata and Taenia crassiceps antigens in bovine cysticercosis. /Л/et. Parasitol. 1983. - V. 12, №2. - P. 155-164.

99. Hira P.R., Bahr G.M., Shweiki H.M., Behlehani K. An-enzyme-linked immunosorbent assay using an are 5 antigen for the diagnosis of cystic hydatid disesse. // Ann. Trop. Med. and Parasitol., 1990. V.84., № 2. - P. 157-162.

100. Hulsmeier A.J., Gehrid P.M., Geyer R., Sack R., Gottstin В., Deplaces P., Kohler P. A major Echinococcus multilocularis antigen is mucin-type glycoprotein.//J. Biol. Chem. 2002. -V.277,№8. - P.5742-5748.

101. Ito A. Evaluation of alveolar and cystic echinococcosis by immunoblot analisis.//Arch. Int. de la hydatidosis., V. 52.-XVIII Int.Congr.Hydatidol.-Lisboa Portugal.-1997.-P. 217.

102. Ito A. Serodiagnosis of echinococcosis in humans and animals. // 16th Int. Conf. of the WAAVP. Progr. and Abstr. 10-15 Aug. 1997. - Sun. City, South Africa. - 1997. - P.42.

103. Jong W. K., Heath D. D. «Ars 3» antibodies in mera of sheep infected with Echinococcus granulosus, Taenia hydatigena and Taenia ovis. //Parasite Immunology. 1979. - P.27-38.

104. Kagan I., Norman L.Antigenic analisis of Echinococcus antigens by agar diffusion techniques.// Amer. J. Trop. Med. a Hyg.-1961.- V.10.- N5.-P.727-734.

105. Kagan I., Norman L. Analisis of helminth antigens (Echinococcus granulosus and Shistosoma mansoni) by agar gel methods.//Ann. N. Y. Acad. Sci.-1963.-V.113.-P. 130-53.

106. Kamiya M. Workshop summary: Zoonosis environmental transmission as exemplified by echinococcosis. // Vet. Parasitol. -1996.-V.64., № 1-2. -P.149-151.

107. Kanwar J.R., KanwarR. Purification and partial immunochemical characterization of low molecular mass diagnostic Echinococcus granulosus immunogen for sheep hydatidosis.//FEMS Immunol, and Med. Microbiol.-1994.-V.9.-N2.-P.101-108.

108. Kassai T. Die immunologische Reaktivitat des Wirtes als Umveltfaktor und ihre Bedeutung fur die Entwicklung des Parasitismus. //Angew. Parasitol. 1979. - V.20, №3. - P. 123131.

109. Knobloch I., Lederer I., Mannweiler E. Species-specific immunodiagnosis of human Echinococcus with grude antigens.//Eur. I.Clin. microbial.-1984.-V.3,№6.-554-555.

110. Kudrna К., Procopic J. Chalone-like inhybition of DNA syntesis in helminths, //folia Parasitologca. 1985. - V.35, №2. -P.145-149.

111. Kudrna K., Procopic J. Vaccination against cestodes review and prospect. //2nd Int. Symp. Taeniasis, 2-7 Dec., Ceske Budejovice. - 1986. - P.46-55.

112. Kumar D., Gaur S.N.S., Pathak K.M.Z., Pant G.B. factional and characterisation of the cystecercus of Taenia solium.// Res. Vet. Sc., -1987. V.43., №3. - P. 395-397.

113. Lauriola L., Piantelli M., Pozzuoli R., Arm E., Musiani P. Echinococcus granulosus: preparation of specific antisera against antigens in sheep hydatid fluid.//Zbl.Bakt.ParasitKde Abt I, Abt.Orig. A.-1978.-V.240.-P.251 -257.

114. Leykina E.S., Dalin M.V., Ballad N.E., Tchebyshev N.V., Zorikhina V.I., Poletaeva O.G. Isolation of diagnostical helminth antigens and their use in serodiagnosis.//Helmintologia.-1981.-V. 18.-P.273-280.

115. Lightowlers M.W. Cestode infections in animals: Immunological diagnosis and vaccination.//Rev. Sci.et ted. off. Int. Episoot.-1990.-V.9.-N2.-P.463-467.

116. Lightowlers M.W., Ganci C.G., Heath D., Muller V. Echinococcus granulosus EG95 vaccine clon belongs to a multigene family with homologenes in E.multilocularis //17th Jnt

117. Congr. Hydatidol., 6-10 Nov. 1995, Limassol Cyprus. Abstracts. - 1995.-P.197.

118. Lightowlers M.W., Roife R., Ganci Ch. G. Taenia saginata: vaccination against cysticercosis in cattle with recombinant oncosphere antigens// Exp. Parasitol. 1996. - V.84, №3. -P.330-338.

119. Lightowlers M.W., Lawrence S.B., Gauci C.G., Young j., Ralston M.J., Maas D. Vaaccination against hydatidosis using a defined recombinant antigen.// parasite Immunology. 1996. -V.18, №9. - P.457 - 462.

120. Lu J.H., Cheng W.X., Guo J.M. et al./ Cultivation of an Echinococcus granulosus larvae cell line// Chin. J. vet. Sci.-1998.-V.18, №5.-P.479-482.

121. Lu J.H., Cheng W.X., Guo Z.M., Kong Ch.Q., Feng D.U., Li D.Ch., Guo J.M. Культивирование линии клеток из личинок Ecinococcus granulosus. // Chin. J. vet. Sci.-1998.-V.18, №5,-P.479-482.

122. Lu J.H., Li D.Ch., Guo Z.M., Zhang S.Z., Feng D.U., Guo J.M., Иммуногенность и реакгогенность экскреторных антигенов из клеточной линии Ecinococcus granulosus. // Chin. J. vet. Sci.-1999.-V.19, №6.-P.566-568.

123. Lu J.H., Guo Z.M., Yu X.B., Feng D.U., Li D.Ch., Cheng W.X./ The cell line establishment and immunogenic study of Echinococcus granulosus//Acad. J. Sun Yal-Sen Univ. Med. Sci.,-2001.-№2 (22),- P. 81-84.

124. Luffau G., Pery P. /Antigenic structure of nematodes and prospects for vaccination on against helminth infections // Vet. Sc. Communic. 1978. - №2, №1, P.11-22

125. Machnicka В. The common antigens of Cysticercus bovis and Taenia saginata. // Bull. Acad. Pol. Sci. Ser. Sci. Biol. 1974. -V.22, №3. - P.197-199.

126. McLaren D. Disquse as an evasiwe stratagem of parasitie organisns. //Parasitology. 1984. - V.88, №4,- P.597-611.

127. McManus D.F. Characterization of taeniid cestodes by DNA analysis. // Rev. sci. et tech. off int epizool. 1990. - P.489-510.

128. Meriona A., Bout D., Capron A. Evaluation of ELISA and RAST using purified antigens for diagnosis of hydatidosis. // Pathol. biol. - 1984. - V.32, №1. - P. 15-22.

129. Mitchell G.F. Problems specific to parasite vaccines.// Parasitology. -1989. V.98. - P. 19-28.

130. Musiani P., Piantelli M., Lauriola L., Pozzuoli R. Echinococcus granulosus: specific quantification of the two most immunoreactive antigens in hydatid fluids.//J.CIin.Path.-1978.-V.31.-P.475-478.

131. Musoke A.J., Williams J.F./lmmunoglobulins associated with passive transfer of resistance to Taenia taeniaeformis in the mouse. //Immunology. 1975.-V.28, №1/3.-P. 97-101

132. Norman L., Kagan I., Chordi A./Further studies on the analisis of sheep hydatid fluid by agar gel methods.//Amer. J. Trop. Med. a Hyg.-1964.-V. 13.-N6.-P.816-821.

133. Onawunmi O.A., Coles G.C. Attempt tu immunise sheep with culture antigens of Taenia hydatigena.//Res. In. Veter. Sc.-1980.-V.29.-№1 .-P. 102-103.

134. Onawunmi O., Coles G. Attempt tu immunise sheep with culture antigens of Taenia hydatigena.// Res. vet. Sci. 1980. -V.29, №1. - P.122-123.

135. Oriol R., Williams J.F., Perez Esandi M.V., Oriol C./Purification of lipoprotein antigens of Echinococcus granulosusfrom sheep hydatid fluid.//Amer. J. Trop. Med. a Hyg.-1971.-V.20.-P.569-574.

136. Osborn P.J., Heath D.D./ Immunisation of lambs against Echinococcus granulosus using antigens obtained by incubation of oncospheres in vitro// Res.Vet. Sci.-1982.-V.33.-P. 132-133.

137. Osborn О J., Heath D.D., Roberts M.G. Vaccination of sheep against Taenia ovis. The response to various dose rates of antigens obtained by incubation of oncosperes in vitro. // Res. Vet. Sci., 1982, 32, №3,-P. 351-353.

138. Piantelli M., Pozzuoli R., Arm E., Musiani P./ Echinococcus granulosus: identification of subunits of the maior antigens.// J. lmmunoL-1977.-V.119.-P. 1382-1386.

139. Playford M., Kamiya M. Immune response to Echinococcus multilocularis infection in the mouse model: a review //Jap. J. Vet. Res.- 1992.-V.40, №2-3,-P. 113-130

140. Playford M.C., Ooi H.K., Oku Y., Kamiya M. Immunology: rodent intermediate Host models for alveolar echinococcus: biology and immunology // Alveolar Echinococcosis Liver -Sapporo. 1993. - P. 33-49.

141. Pozzuoli R., Musiani P., Arm E., Piantelli M., Mazzarella R./Echinococcus granulosus: Isolation and characterization of sheep hydatid fluid antigens.//Exp.Parasitol.-1972.-V.32.-P.45-55.

142. Pozzuoli R., Musiani P., Arm E., Patrono C., Piantelli M./ Echinococcus granulosus: evaluation of purified antigens' immunoreactivity.//Exp.Parasitol.-1974.-V.35.-P.52-60.

143. Pozzuoli R., Piantelli M., Perucci C., Arm E., Musiani P./lsolation of the most immunoreactive antigens of Echinococcus granulosus from sheep hydatid fluid.//J.lmmunol.-1975.-V.115.-P. 1459-1463.

144. Rau M.E., Tanner C.E. BCG supresses growth and metastasis og hydatid infections. //Int. J. Parasitol. 1975. -V.256, №5515. - P.318-319.

145. Rau M.E., Tanner C.E. Echinococcus multilocularis in the cotton rat: growth of intrathoracie metastases following surgical removal of subcutaneous cysts //Int. J. Parasitol. 1976. - V.6, №2. - P.151-153

146. Reuben J.M., Tanner C.E. Immunoprophylaxis with BCG of experemental Echinococcus multilocularis infections.// «4th Int. Congr. Parasitol. Warszawa. 1978. Shot Commun. Sec. E.»,lodz, - P. 51-52.

147. Reuben J.M., Tanner C.E., Rau M.E. Immunoprophylaxis with BCG of experemental Echinococcus multilocularis infections.// Infect, and Immun. 1978. - V.21, №1.-P. 135-139.

148. Rhoads M.L., Murrel K.D., Dilling G.W., Wong W.M., Baker N.F. A potential diagnostic reagent for bovine Cysticercosis.// J. Parasitol., -1985. V.71,№6, - P.779-787.

149. Rickard M.D. The use of in vitro culture of Taeniid cestode larvae to collect antigens for immunization against infection. //4-th Intern.Congr. Parasitol. 19-26 Aug. 1978. Warsawa. Short Commun. Sect.-P.67.

150. Rickard M.D. Vaccination of calves against Taenia saginata infection using antigens collected in vitro cultivation of larvae cestodes.// 4th Inter. Congr. Parasitology. 19-26 aug. 1978, Warszawa.- Shot Commun. Sec. E. P. 134-135

151. Rickard M.D., White J.В., Boddington E.B. Vaccination of lambs against infection with Taenia ovis. // Austr. Vet. J. 1976. -V.52.№5. - P.209-214.

152. Rickard M.D., Adolph A.J. Vaccination of calves against Taenia saginata infection using a «parasite-free» vaccine. // Vet. Parasitology. 1976. - №1. - P.389.

153. Rickard M.D., Adolph A.J. Vaccination of lambs against infection with Taenia ovis using antigens collected during short-term in vitro incubation of activated T. ovis oncospheres. //Parasitology. 1977. -V.75, №2. - P. 183-188.

154. Rickard M.D., Arundel J.H., Adolph A.J. A preliminary field trial to evaluate the use of immunization for the control of naturally asquired Taenia saginata infection in cattle. // Res. vet. Sci.1981. V.30, №1. - P. 104-108.

155. Rickard M.D., Bell K.J. Successful vaccination of lambs against infection with Taenia ovis using antigens produced during in vitro cultivation of the larval stages.//Res.Vet.Sc.-1971 (.-V.12.-N4.-P.401-402.

156. Rickard M.D., Harrison G.B.J., Heath D.D., Lightowlers M.W. Taenia ovis recombinant vaccine-«quo vadit».// Parasitology. -1995.-V.110.-P.5-9.

157. Rickard M.D., Williams J. Hydatidosis cysticercosis: immune mechanisms and immunisation against infection.// Adv. Parasitol.1982.-V.21 .-P.229-296.

158. Riley E.M., Dixon J.В., Jenkins P., Ross G. Echinococcus granulosus infection in mice: host responses during primary andsecondary infection // Parasitology. 1986. - V.92, №2. - P.391-403.

159. Ris D.R., Hamel K.L., Mackle Z.M./ Evaluation of ELISA test for the diagnosis of cystic hydatid disease in sheep.//Res.Vet.Sci.-1987.-V.43.-N2.-P.257-269.

160. Sakamoto Т., Yamashita J., Ohbayashi M. Studies of echinococcosis, XVIII, Observations on tissue cultured germinal cells of larval Echinococcus multilocularis.//Jpn. J. Vet. Res.-1967.-V.15-P. 75-83.

161. Sakamoto T. Development of echinococcal tissue cultured in vitro and in vivo.//Mem.Fac.Agric.Kagoshima Univ.-1978.-V. 14. №23-P. 109-113.

162. Silverman P.H., Poynter D., Podger K.R. Studies on larval antigens derived by cultivation of some parasitic nematodes in simple media: protection tests in laboratory animals. // J. Parasitol. 1962. - V.48, №4. - P.562 -571.

163. Smith M.A. Echinococcus granulosus and Echinococcus multilocularis: in vitro Culture of the Strobilar stages from Protoscoleces.//Angew.Parasit.-1979.-V.20.-P.137-147.

164. Soulsby E.J.L. Mechanism of immunity to Helminths. // J. of Amer. Vet Med. Ass. 1961. - V. 138, №7. - P. 355-362.

165. Soulsby E.J.L. Systeme immunitaire et parasites gastro-intestinaux: guels sont les obstacles a la production de vaccins. // Ann. med. vet. 1988.- V.132, №3. - P.227-230.

166. Svilenov D., Heymer В., Haferkamp O. Immunomorphology and pathogenesis of echinococcosis. Ill Microscopic immunofluorescence studies in experimental alveolar echinococcosis. //Infection. 1978. -V.6, №1. - P. 12-15.

167. Tassi C., Dottorini S., Tolu A.G., De Rosa F. Diagnosis of hydatid disease in sheep by indirect hemagglutination test.//Rev.Parasitol.-1980.-V.41.-P.61-66.

168. Tassi C, Dottorini S., Scalise G., Geranio N. Echinacoccus granulosus: diagnosis of human hydatid disease by the indirect hemagglutination reaction with antigens from hydatid fluid and scoleces.//lnt. J.Parasitol.-1981 .-V.II.-P.85-88.

169. Taylor M.G. Irradiation-attenuated antiparasitic vaccines in ruminants. Present status and future prospects. //Isot. and Radiat Parasitol. IV Proc. Adv. Group Meet., Cambridge., 1979., Vienna. — 1981. P.83-89.

170. Tuerhong Ha.J., Zhang Z.Z., Zhang W.B., Hasyet Qi.P.S. Studies on immunization of sheep hydatidosis. //16th Int. Congr. of Hydatidol., Beijing, oct. 12-16, 1993. Beijing, China. 1993. -P.302.

171. Turcecova L., Kolarova L., Dubinsky P., Martinek K. Characteristics of antigens in tapeworms of the genus Echinococcus. //Helmintilogia.-1997.-V.34.- N3.- P. 188189.

172. Varela-Diaz V., Coltorti E., Ricardes M.I., Guisantes J.A., Yarsabal L.A. The immunoelectrophoretic characterisation ofsheep hydatid cyst fluid antigens.//Am.J.Trop.Med.Hyg.-1974,-V.23.- P. 1092-1096.

173. Varela-Diaz V., Coltorti E./Techniques for the immunodiagnosis of human hydatid disease .//Buenos Aires: Pan American Zoonosis Center.-1976.

174. Varela-Diaz V. M.f Coltorti E. A., Rickard M. D., Torres J. M. Comparative antigenic characterisation of Echinococcus granulosus and Taenia hydatigena cyst fluids by immunoelectrophoresis. // Res. Vet. Sci. 1977. - V.23, №2.-P.213-216.

175. Varela-Diaz V.M., Eckert J., Rausch R.L., Coltorti E.A., Hess H. Detection of the Echinococcus granulosus diagnostic arc 5 in sera from patients with surgically-confirmed E. multilocularis infection. //Z.Parasitenk, 1977. - V.53, №2, - P. 183-188.

176. Varela-Diaz V.M., Guarnera E.A., Coltorti E. A., et al. Significance of hydatid immunodiagnostic surveys to health care and estimation of prevalence in the argentine province of chubut. //"Tropen. Med and Parasutol" 1983. - V.34, №2, - P.98-104.

177. Vogel M., Gottstein В., Muller N., Seebeck T. Production of a recombinant antigen of Echinococcus multilocularis with high immunodiagnostic sensitivity and specificity. // Mol. and Biochem. Parasitol. 1988. - V.31, №2. - 117-126.

178. Voller A., Bidwell D., Huldt G., Engvall E. A microplate method of enzyme-linked immunosor bent assay and it's application to malaria. // Bull. Wld. Hlth. Org.-1974.-V.I, №2.P.209-211.

179. Wikerhauser Т., Zukovic M., Dzakula N. Taenia saginata and Taenia hydatigena. Intramuskula vaccination of calves with oncospheres. // Exp. Parasitol. -1971. V.30, №1. - P.36-40.

180. Zhu H.X., Don L.Q., Shi X.H., Sun X.Q., Wang X.H., Niu B.H. Stadies on excretory-secretory (ES) antigens of Echinococcus granulosus: the immunogenicity of ES antigens of the protoscolex. // Chin. J. Vet. Sci a Technol., -1991. V.21, №11. - P. 8-10.