Физико-химическая характеристика клеточных антигенов эхинококков и разработка иммунопрофилактического средства тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.19, кандидат биологических наук Сасикова, Марина Руслановна

• Сасикова, Марина Руслановна
• кандидат биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Сасикова, Марина Руслановна

Введение.

Глава I. Обзор литературы.

1.1. Способы получения и характеристика антигенов эхинококков.

1.2. Иммунопрофилактика эхинококкозов.

Глава И. Собственные исследования.

2. Материалы и методы.

2.1.1. Получение вторичных ларвоцист Echinococcus multilocularis, цист Е. granulosus, приготовление первичной клеточной культуры.

2.1.2. Культивирование клеток протосколексов Е. multilocularis и Е. granulosus в синтетической питательной среде, получение клеточных метаболитов.

2.1.3. Получение 3-дневных экскреторно-секреторных продуктов протосколексов Е. multilocularis и Е. granulosus.

2.1.4. Исследование клеточных метаболитов иммуноферментной реакцией (ИФР), выделение антигеноактивных серий, определение в них антигенов паразита реакцией иммунодифузии (РИД).

2.1.5. Физико-химическая характеристика клеточных метаболитов и 3-дневных экскреторно-секреторных продуктов протосколексов Е. multilocularis и Е. granulosus электрофорезом в полиакриламидном геле (ПААГ).

2.1.6. Иммунопрофилактические свойства клеточных антигенов протосколексов Е. multilocularis в комплексе:.

2.1.6.1. с иммуномодулятором Гала-Вет.

2.1.6.2. с иммуномодулятором ронколейкином.

2.1.6.3. с противоопухолевым биопрепаратом «К».

2.1.7. Изучение иммунотерапевтического действия клеточных антигенов протосколексов Е. multilocularis при экспериментальном альвеолярном эхинококкозе в комплексе:.

2.1.7.1. с иммуномодулятором ронколейкином.

2.1.7.2. с противоопухолевым биопрепаратом «К».

2.1.8. Протективные свойства клеточных антигенов Е. multilocularis при эхинококкозе собак в комплексе с иммуномодулятором ронколейкином.

2.2. Результаты исследований.

2.2.1. Анализ данных по культивированию клеток протосколексов Е. multilocularis и Е. granulosus.

2.2.2. Характеристика и контроль метаболитов клеточных культур и 3-дневных экскреторно-секреторных продуктов протосколексов из вторичных ларвоцист Е. multilocularis и Е. granulosus.

2.2.3. Отбор и характеристика антигеноактивных клеточных метаболитов клеток протосколексов Е. multilocularis и Е. granulosus ИФР, РИД.

2.2.4. Результаты физико-химической характеристики клеточных метаболитов и экскреторно-секреторных продуктов протосколексов Е. multilocularis и Е. granulosus.

2.2.5. Оценка иммунопрофилактического действия клеточных антигенов Е. multilocularis при экспериментальном вторичном альвеолярном эхинококкозе в комплексе:.

2.2.5.1. с иммуномодулятором Гала-Вет.

2.2.5.2. с иммуномодулятором ронколейкином.

2.2.5.3. с противоопухолевым биопрепаратом «К».'.

2.2.6. Оценка иммунотерапевтического действия клеточных антигенов протосколексов Е. multilocularis при экспериментальном альвеолярном эхинококкозе в комплексе:.

2.2.6.1. с иммуномодулятором ронколейкином.

2.2.6.2. с противоопухолевым биопрепаратом «К».

2.2.7. Оценка протективного действия клеточных антигенов Е. multilocularis при эхинококкозе собак с иммуномодулятором ронколейкином.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Физико-химическая характеристика клеточных антигенов эхинококков и разработка иммунопрофилактического средства»

Актуальность темы. Эхинококкоз - это один из самых значимых и широко распространенных паразитозов в мире, представляющий серьезную проблему не только для ветеринарии, но и для медицины (Garippa et al., 2004; Budke et al., 2006).

Особенно остро эта инвазия проявляется в регионах с развитым овцеводством и скотоводством, причем не только из-за наносимого экономического ущерба животноводству, но и из-за большего риска заболевания человека, являющегося одним из промежуточных хозяев гельминта (Auer, Aspöck 1991; Kammerer, Schantz, 1993; Mandell et al., 2000; Eckert, 2000). Источником заражения человека являются дикие и в основном домашние плотоядные (Kreidl et al., 1998; Eckert, Deplazes, 2004; Deplazes, 2006; Petavy et al., 2008).

Человек заражается, употребляя в пищу загрязненные яйцами гельминта продукты, или через загрязненную воду.

Если в России заболевание людей цистной и альвеолярной формами гидатидоза за 1986-1995 годы составило около 1,1 случаев на 100 тысяч населения, то в последние годы этот показатель значительно увеличился. Ежегодно регистрируется 2500 первично выявленных больных (по данным Госсанэпиднадзора МЗ РФ, 2001). Заболеваемость эхинококкозом на территории Российской Федерации в 2008 году увеличилась по сравнению с предыдущим годом на 5,4 % (Онищенко, 2008). Доля городских жителей в последние два года составляет 48% от общего числа больных. Высокая заболеваемость эхинококкозом регистрируется, в Ямало- Ненецком (5,36 на 100 тыс.населения), Чукотском автономных округах (1,99 на 100 тыс.населения), Карачаево-Черкесской Республике (3,97 на 100 тыс.населения), республиках Алтай (1,94 на 100 тыс.населения), Калмыкия (1,40 на 100 тыс.населения),Саха (Якутия) (1,26 на 100 тыс.населения), Башкортостан (1,63 на 100 тыс.населения), Оренбургской (2,31 на 100 тыс.населения), Саратовской (1,78 на 100 тыс.населения), Курганской (1,35 на 100 тыс.населения) областях. За период с 1996 год по 2008 год зарегистрировано 109 летальных исходов от эхинококкоза, наибольшее число которых приходится на Красноярский край (21,1%) и Оренбургскую область (19,2%). Этот показатель растет как из-за усиления урбанизации, возросшей миграции населения, развала устоявшихся экономических отношений, так и в связи с ухудшением социальной жизни и снижением санитарно-эпидемиологического контроля (Маркин, 1999; Мусаев, 1999; Kovalenko et al., 2002).С другой стороны, значительно повысилась эффективность диагностических методов, особенно с внедрением в клиническую практику высокоинформативных методов диагностики этого заболевания, например таких как УЗИ и рентгеновская компьютерная томография (Kaimal, 1982, Nisenbaum, Rowling, 1995; Omac Tufekcioglu, 2007; Caremani et al., 1993; De Werra et al., 2007; Macpherson, 1992; Weill et al. 1991).

Проблема профилактики и ликвидации гельминтозов сельскохозяйственных животных продолжает оставаться актуальной, несмотря на многочисленные разработки способов и методов борьбы с ними. Особую сложность представляют собой тканевые формы гельминтозов, как ларвальные цестодозы, паразитологическая диагностика которых не представляется возможной, а недостаток, а иногда отсутствие эффективных антигельминтных препаратов при этих гельминтозах выдвигает в качестве первоочередной задачи — изыскание и разработку иммунопрофилактических средств на основе специфических антигенов паразита и неспецифических иммуностимулирующих препаратов. Применение иммунопрофилактических средств позволяет значительно повысить сопротивляемость организма, снизить, а в некоторых случаях и предотвратить заражение животных.

В связи с вышеизложенным актуальными представляются исследования по разработке иммунопрофилактических средств против ларвального и имагинального эхинококкозов с использованием антигенов паразита различного происхождения и способов получения. В последние годы в паразитологии успешно применяются биотехнологические методы получения антигеноактивных препаратов, к числу которых относится и клеточная инженерия, которая позволяет использовать культуры клеток для решения многих научных и прикладных задач биологии, медицины и сельского хозяйства. Преимущества клеточной технологии в получении антигенов гельминтов и других биологических объектов сводятся к тому, что клеточные культуры можно приготовить из различных антигеноактивных субстанций паразитов и длительное время сохранять в функциональном состоянии в искусственных питательных средах путем их многократного пассирования. Хотя работ по культивированию клеток тканей и органов гельминтов немного, подобные исследования проводились давно и были сделаны конкретные выводы о такой возможности (Sakamoto et al., 1967; Rickard, Bell, 1971; Sakamoto, 1978; Smith, 1979; Fiori et al., 1988; Furuya et al., 1990; Furuya, 1991; Feng et al., 1992, 1993; Гламаздин, 1997, 1997; Lu et al., 1998). Очищенные экскреторно-секреторные антигены, полученные при культивировании гельминтов рода Echinococcus, используются для изучения иммунитета и вакцинации животных (Heath, 1976; Rickard, 1978; Onawunmi, Coles, 1980; Osbom, Heath, 1982).

Поэтому получение стандартизированных видоспецифичных антигенов эхинококков, эффективных в диагностике и иммунопрофилактике эхинококкозов, является одной из актуальных задач, в решении которой большое значение имеют биотехнологические методы. Для получения специфических антигенов цестод методом клеточной инженерии можно использовать как протосколексы, так и яйца паразитов, содержащие инвазионные онкосферы. Тем не менее в целях безопасности и с учетом обеспечения необходимой стерильности наиболее предпочтительным является использование протосколексов или герминативной оболочки. Яйца же с инвазионными онкосферами, хотя и обладают значительной антигенной активностью, представляют опасность для исследователей и требуют более тщательной и длительной стерилизации от микрофлоры кишечника, что может повлиять на жизнеспособность получаемых из них клеток и на процесс культивирования. В свете вышеизложенного считаем целесообразными и актуальными исследования по получению клеточных антигенов эхинококков, их физико-химической характеристики и разработки на их основе иммунопрофилактического препарата при эхинококкозе.

Цели и задачи исследования Целью работы было получить «клеточные» антигены и 3-дневные экскреторно-секреторные продукты протосколексов Е. multilocularis и Е. granulosus, провести их физико-химическую характеристику и разработать на основе клеточных антигенов эхинококков и иммуностимулирующих средств иммунопрофилактический препарат при эхинококкозе.

Для выполнения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1) получить «клеточные» метаболиты и 3-дневные экскреторно-секреторные продукты протосколексов Е. multilocularis и Е. granulosus;

2) провести отбор антигеноактивных серий «клеточных» антигенов протосколексов эхинококков иммуноферментной реакцией (ИФР);

3) установить реакцией иммунодифузии (РИД) в агаровом геле наличие антигенов паразита в антигеноактивных сериях клеточных метаболитов и 3-дневных экскреторно-секреторных продуктах культивируемых in vitro протосколексов эхинококков;

4) провести физико-химическую характеристику клеточных антигенов и 3-дневных экскреторно-секреторных продуктов протосколексов эхинококков электрофорезом в полиакриламидном геле (ПААГ);

5) изучить иммунопрофилактические свойства «клеточных» антигенов протосколексов Е. multilocularis при экспериментальном альвеолярном эхинококкозе на мышах в комплексе с:

- иммуномодулятором Гала-Вет;

- иммуномодулятором ронколейкином;

- противоопухолевым биопрепаратом «К»;

6) оценить лечебное действие клеточных антигенов . протосколексов Е. multilocularis при экспериментальном альвеолярном эхинококкозе в комплексе с:

- иммуномодулятором ронколейкином;

- противоопухолевым биопрепаратом «К»;

7) изучить протективные свойства клеточных антигенов Е. multilocularis при эхинококкозе собак в комплексе с иммуномодулятором ронколейкином

Научная новизна

Впервые проведена сравнительная физико-химическая характеристика клеточных антигенов протосколексов Е. granulosus и Е. multilocularis и 3-дневных экскреторно-секреторных продуктов культивирования протосколексов методом электрофореза в ПААГ. Установлено в белковом спектре исследуемых антигенов протосколексов Е. granulosus соответственно 18 и 9, а Е. multilocularis 16 и 8 компонентов. Наиболее четко выраженные мажорные белковые компоненты в исследуемых антигенах протосколексов обоих видов эхинококков располагались в области подвижности белков мол. массы 200; 116; 66; 45; 31 и 14,4 кДа.

Антигенные компоненты исследуемых биоматериалов выявляли антитела класса IgG в сыворотках больных цистной и альвеолярной формой эхинококкоза, что подтверждает значительную идентичность входящих в их состав белков-антигенов и возможность их взаимозаменяемости. Впервые изучены протективные свойства иммунопрофилактических препаратов на основе «клеточных» антигенов протосколексов Е. multilocularis в комплексе с иммуномодуляторами Гала-Вет, ронколейкином и противоопухолевым биопрепаратом «К» при экспериментальном альвеолярном эхинококкозе. Эффективность защиты составила соответственно: 91,7%; 83,3%; 100%. Установлено, что 2-кратная внутримышечная иммунизация собак клеточным антигеном протосколексов Е. multilocularis в комплексе с иммуномодулятором ронколейкином значительно повышает резистентность животных к заражению протосколексами Е. granulosus (количество развившихся паразитов в 6,03 раз ниже, чем в контроле, все выделенные гельминты от иммунизированных собак были без сформированного терминального членика).

Установлено, что клеточные антигены в комплексе с иммуномодулятором ронколейкином и противоопухолевым биопрепаратом^ «К» не оказывают лечебного действия при альвеолярном эхинококкозе.

Практическая значимость

Материалы диссертационной работы Сасиковой М. Р. использованы в разработке «Технологического регламента на комплексный иммунопрепарат для профилактики альвеолярного гидатидоза», одобренного секцией «Инвазионные болезни животных» Отделения ветеринарной медицины РАСХН (29.09.2007г.).

Подана заявка на изобретение «Способ профилактики ларвального альвеолярного эхинококкоза».

Апробация работы

Материалы диссертационной работы представлены и обсуждены на:

1) научной конференции «Теория и практика Борьбы с паразитарными болезнями (2006-2008гг.)

2) заседаниях Ученого совета ВИГИС (2006-2008гг.)

3) секции «Инвазионные болезни животных Отделения ветеринарной медицины РАСХН (протокол № .2007г.)

Основные положения, выносимые на защиту

• Получение клеточных метаболитов и 3-дневных экскреторно-секреторных продуктов протосколексов Е. multilocularis и Е. granulosus, отбор антигеноактивных серий ИФР, иммунохимический анализ полученных биоматериалов

• Физико-химическая характеристика клеточных антигенов и 3-дневных экскреторно-секреторных продуктов протосколексов Е. granulosus и Е. multilocularis методом электрофореза в ПААГ

• Иммунопрофилактические свойства «клеточных» антигенов протосколексов Е. multilocularis при экспериментальном альвеолярном эхинококкозе в комплексе: иммуномодулятором ронколейкином

- иммуномодулятором Гала-Вет противоопухолевым биопрепаратом «К»

• Изучение лечебного действия клеточных антигенов с ронколейкином и противоопухолевым биопрепаратом «К» при экспериментальном альвеолярном эхинококкозе.

• Протективные свойства клеточных антигенов протосколексов Е. multilocularis при экспериментальном эхинококкозе собак в комплексе с ронколейкином

Публикации

По теме диссертации опубликовано 6 работ, 3 из которых в рекомендованных ВАК РФ изданиях.

Объем и структура диссертации

Материалы диссертационной работы изложены на 135 страницах компьютерного текста. Состоят из введения, обзора литературы, раздела собственных исследований, включающего: материалы и методы, результаты исследований и их обсуждение, выводы, практические предложения, список литературы и приложения. Список литературы включает 190 источников, в том числе 52 отечественных и 138 зарубежных авторов. Работа иллюстрирована 13 таблицами и 36 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Паразитология», Сасикова, Марина Руслановна

Выводы

1. Проведено культивирование клеток протосколексов Е. multilocularis и Е. granulosus в искусственной питательной среде RPMI-1640 в условиях С02-инкубатора, получено соответственно 27 и 19 серий клеточных метаболитов, из которых 19 (70,3%) и 14 (73,7%) имели в своем составе по данным иммуноферментной реакции (ИФР) паразитарные антигены.

2. Культивированием протосколексов обоих видов эхинококков в течение 3-х дней при тех же условиях получено соответственно 7 и 11 серий 3-дневных экскреторно-секреторных продуктов, из которых 7 (100%) и 9 (81,1%) по данным реакции иммунодифузии были антигеноактивными.

3. Электрофорезом в полиакриламидном геле в клеточных метаболитах Е. multilocularis и Е. granulosus проявлено соответственно 8 и 9, а в 3-дневных экскреторно-секреторных продуктах культивируемых протосколексов исследуемых паразитов по 16 и 18 белковых компонентов, располагающихся в области подвижности белков молекулярной массы от 14,4 до 200 кДа.

4. Реакцией иммунодифузии в агаровом геле с использованием сывороток больных цистной и альвеолярной формой эхинококкоза и сывороток свиней с естественной инвазией Е. granulosus в полученных биоматериалах протосколексов Е. multilocularis и Е. granulosus установлено наличие функциональных антигенов паразитов.

5. Установлено, что 3-кратная подкожная иммунизация мышей клеточным антигеном протосколексов Е. multilocularis в комплексе с иммуностимулятором Гала-Вет (доза 60 мкг белка клеточного антигена и 22 мкг иммуностимулятора Гала-Вет) предохраняла 91,7% мышей от последующего заражения Е. multilocularis.

6. Иммунизация мышей клеточным антигеном протосколексов Е. multilocularis (60 мкг белка-антигена) совместно с иммуномодулятором ронколейкином (180 МЕ) вызывала защитный эффект в пределах 83,3%.

7. Установлена наибольшая эффективность (100%) от заражения Е. multilocularis при 3-кратной подкожной иммунизации клеточным антигеном протосколексов паразита (доза 60 мкг белка-антигена) в комплексе с биопрепаратом «К» увеличивающимися дозами (в количестве 5 ЕД; 15 ЕД и 45 ЕД)

8. Клеточный антиген протосколексов Е. multilocularis, введенный зараженным мышам на 15-й день инвазии совместно с иммуномодулятором ронколейкином или противоопухолевым биопрепаратом «К», не обладал иммунотерапевтическим действием.

9. Установлен значительный протективный эффект клеточного антигена протосколексов Е. multilocularis в комплексе с иммуномодулятором ронколейкином при эхинококкозе собак. У 2-кратно иммунизированных собак с интервалом 20 дней в дозе 1500 МЕ ронколейкина и 1,7 мг белка — клеточного антигена количество выделенных паразитов было в 6,03 раза меньше, чем в контроле. Все выделенные эхинококки были без сформированного третьего членика. Эффективность защиты составила 94,5%.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Сасикова, Марина Руслановна, 2009 год

1. Аделыпин Ф. К., Баллад Н. Е., Коваленко Ф. П. Оценка протективной активности очищенных фракций альвеококкового антигена при экспериментальном альвеококкозе линейных мышей. // Мед. паразитология и паразитарные болезни.- 1983.- № 2.-21-26.

2. Аделыпин Ф. К. Подходы к иммунотерапии экспериментального альвеококкоза линейных мышей и крыс с использованием иммуномодуляторов.// Актуальн. проб. мед. и вет. паразитол тез. докл. междунар. науч. конф. Витебск,- 1993, с. 22.

3. Алферова М.В. Реакция сколексопреципитации при экспериментальном цистициркозе крупного рогатого скота.// «Болезни с.-х. животных» труды УзНИВИ, Ташкент. 1978. -т.28, ч.1.-26-28.

4. Аминжанов М. Изучение возможности иммунизации собак против Е. granulosus.// Узбекск. биол. ж., 1977, № 2. 57-59.

5. Аминжанов М. Иммунопрофилактика эхинококкоза животных.// Болезни с-х животных. Труды УзНИВИ, Ташкент, 1980, т. 30, ч. 1, с. 15-18.

6. Aminjanov М. The biological basis for prophylaxis against Echinococcus in animals in Uzbek republic.// Abst. of Papers Presented at the 9th Int. Conf. of the WAAVP, Budapest 13-17 July 1981, Hungary, 1981, p. 49.

7. Aminjanov M. Vaccine against Echinococcus.// Parassitologia, 1996, 38, № 1-2; 190

8. Аминжанов M., Аминжанов Ш. Вакцина для профилактики эхинококкоза овец в Узбекистане. МПиПБ, 1999, № 2: 58.

9. Aminjanov М., Rasulov Sh., Amaninjanov Sh. The vaccine for prevention of Echinococcosis of animals.// The 19th Int. Conf. of the WAAVP, aug. 10-14, 2003, New Orleans, Louisiana, USA, p. 80.

10. Ашмарин И. П. Быстрые методы статистической обработки и планирования экспериментов.// Издательство ЛГУ,-1975 г.

11. Бережко В. К., Бессонов А. С. Получение метаболитов перевиваемой культуры клеток метоцестоды Taenia crassiceps.// Тр. Всес. ин-та гельминтол. 1996, т.32, с. 18-22

12. Бережко В. К., Кленова И. Ф. Антигенная активность клеточных метаболитов протосколексов Coenurus cerebralis.// Тр. Всес. ин-та гельминтол.-1999.-Т.35.-С.39-45.

13. Berezhko V.K., Bessonov A. S. Cell metabolites of Echinococcus multilocularis application as diagnostic antigens.// XXXIII Archivos Internacionales de la Hydatidosis, 1999, 286.

14. Бережко В.К., Сивкова Т. Н. Антигены клеточной культуры и их использование в иммунодиагностике и иммунопрофилактике.// Тезисы IT Международ, научн. конф. «Биотехнология в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии» М., 2000, с.21-22.

15. Бережко В. К., Бессонов А. С. Использование клеточных метаболитов Е. multilocularis в качестве диагностических антигенов.// Ветеринария.-2000.-№2.-С.31 -34.

16. Гламаздин И.Г. Культивирование отдельных клеток гельминтов и получение диагностически ценных антигенов.// Актуальные проблемы ветсанконтроля сельскохозяйственной продукции.- М.-МГУПБ.- 1997.

17. Гламаздин И.Г., Радина О.В. Первичная клеточная культура D.caninum.// Сб. к 100-летию со дня рождения И.В. Орлова.-МГУ ПБ.-1999.

18. Гребенщикова В. И., Роскин Г. И. Противораковый антибиотик круцин.// М.: МГУ, 1968. С. 57-65.

19. Гусев А. И., Цветков В. С. К технике постановки реакции микропреципитации в агаре.// Лаб. Дело.- 1961, № 2, 43-45.

20. Далаева И. Б., Бережко В. К. Методический подход к типированию культивируемых клеток протосколексов Echinococcus multilocularis. // Материалы научн. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями».- 2005.- вып. 6.- с. 97-99

21. Зильберблат Г. С. Противораковый антибиотик круцин.//М.: МГУ, 1968. С. 220-234.

22. Ибрагимов P.M. Получение и биохимическая характеристика атигенных (аллергенных) фракций эхинококка.// Автореф. дисс. канд. биол. наук Алма-Ата.-1970.- С.98-99.

23. Каллиникова В. Д. Противораковые свойства жгутикового простейшего Trypanosoma cruzi.// Тула: Гриф и К, 2004.- 280с.

24. Клименко В. В., Сазанов А. М. Перекрестореагирующие антигены у Fasciola hepatica и F. gigantica// Тр. Всес. ин — та гельминтол.-1975.-Т. 22.-е. 85-91.

25. Кленова И.Ф. Разработка клеточной технологии получения антигенов цестод (на примере Coenurus cerebralis и Echinococcus multilocularis): Дис. канд. вет. наук. М.-1999.-125с.

26. Kovalenko F. et al. Hydatid diseases of human (cystic and alveolar) in Russia (1983 1997).// Acta Parasitológica, VIII Europ. Multicolloquiym of Parasitol., July, 2002. - 2002. - V. 45. - № 3. -P. 241-242.

27. Kosminkov N. Immunization as a prophylactic method against bovine cysticercosis//c 2-nd Int. Symp. Taeniasis (Cysticercosis and Hydatidosis) Echinococcosis, Ceske Budejovice, 1985, Proc. Ceske Budejovice.- 1986.- P. 35-39.

28. Косминков И. E. Диагностика и профилактика цистицеркозов и ценуроза жвачных // Дисс. д-ра вет. наук. М. — 1990.

29. Красюкова JI.C. Культивирование клеток ларвоцист эхинококка и использование его протосколексов для отбора антгельминтных препаратов: Дисс.канд. биол. наук. М.-1987.-184с.

30. Красюкова J1.C. Получение клеточной суспензии из ткани эхинококкового пузыря // 10 конф. Укр. об-ва паразитол., Одесса, 1986. - ч.З. матер, конф. Киев. - 1988 - с.21-22.

31. Курбанов А. Т., Степанковская Л. П. Сравнительная оценка антигенной активности эхинококковых жидкостей от различных видов животных.// Возбудители и переносчики паразитов и меры борьбы с ними. 1988.

32. Курочкина К. Г. Специфическая профилактика диктиокаулеза, фасциолеза и эхинококкоза сельскохозяйственных животных.// Дис. док. вет. наук. М.-1999.-с.220.

33. Leykina E.S., Dalin M.V., Ballad N.E., Tchebyshev N.V., Zorikhina V.l., Poletaeva O.G. Isolation of diagnostical helminth antigens and their use in serodiagnosis.// Helmintologia.-1981.-V.18.-P.273-280.

34. Маркин А. В. Эпидемическая ситуация по гельминтозам в России (1986-1995).// Материалы докл. науч. конф. «Теор. и практ. борьбы с паразитарн. болезнями».-1999.-С.152-154

35. Мусаев Г. X. Эпидемиологические аспекты развития эхинококкоза.// Материалы докл. науч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями», М., 18-20 мая, 1999, с.170-171

36. Онищенко Г. Г. О заболеваемости эхинококкозом в Российской Федерации в 2008 году.// Письмо №01/12554-9-23 от 31.08.2009

37. Пинаев Г. П. Методы культивирования клеток, «Наука», 1988.-319 с.

38. Плиева А. М. Эколого эпизоотологические особенности эхинококкоза животных в регионе Центрального Кавказа.// Дис. док. биол. наук. М.- 2007.- с. 320

39. Руднева О.В. Культивирование клеток цестод, как способ получения диагностических антигенов// Материалы докл. науч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарн. болезнями»-2004, вып.5. с.336-339.

40. Руднева О.В. Диагностическая эффективность клеточных метаболитов-антигенов протосколексов ларвоцист Echinococcus multilocularis при цистном эхинококкозе.// Тр. Всес. ин-та гельминтол. — 2005. т.41. - с.305-311.

41. Руднева О.В., Бережко B.K. Иммунопрофилактические свойства «клеточных» антигенов протосколексов Echinococcus multilocularis разного возраста. // Материалы докл. науч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарн. болезнями»-2005. -вып.6 с.306-306.

42. Сивкова Т.Н. Диагностическая эффективность антигенов клеточной культуры при цистном гидатидозе животных // Материалы докл. науч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарн. болезнями» Москва, 2002. вып. 3. - с.305-307.

43. Сивкова Т.Н. Диагностическая эффективность антигенов клеточной культуры протосколексов Echinococcus granulosus при цистном гидатидозе животных // Труды ВИГИС, т.38, -Москва, 2002. - с. 278-284.

44. Сивкова Т.Н., Бережко В.К. Эффективность антигенов клеточной культуры протосколексов Echinococcus granulosus и Echinococcus multilocularis в диагностике цистного гидатидоза свиней. // Ветеринария. 2002. - №8. - с.7.

45. Судьина Т. И. (Скрынникова) Иммуногенная активность вакцины, полученной на основе культивирования онкосфер Multiceps multiceps in vitro при экспериментальном ценурозе овец.//Бюл. Всес. ин-та гельминтол,- 1990.- вып 54.- с. 103-104.

46. Скрынникова Т. И. Онкосферальный секреторный антиген Multiceps multiceps для профилактики ценуроза овец.// Дис. канд. вет. наук. М.-1993.- 134с.

47. Цэцэгсайхан Батмоих, Каллиникова В. Д., Карпенко П. П.// Сб. трудов московской научной, теоретико — практической конф. Монгольских студентов, магистрантов, аспирантов и докторантов, обучающихся в ВУЗАХ Р.Ф. Москва.- 2004.- вып. 1.- С.15-17;

48. Шакаров А. Г. , Зубицкая М. А., Буриев А. П., Рахимов А. Т. Сравнительная оценка антигенов (АГ) однокамерного эхинококка в диагностических тест-системах. 1-й иммунол. съезд, Сочи, 15-17 ноября 1989г.: Тез. секц. и стенд, сооб. Т.1, М, 1989, с. 183

49. Шумова Н.С. Разработка специфической профилактики тенуикольного цистицеркоза овец // Дисс. канд. вет. наук. Москва. 1994.- 133с.

50. Adams А. М. Growth rates of germinal cells of Echinococcus multilocularis and E. vogeli.// Bull. Soc. fr. Parasitol. 1990- v8 suppl № l-p.148.

51. Ali-Khan Z. Host-parasite relationship in Echinococcosis. I. Parasite biomass and antibody response in three strains of inbred mice against graded doses of Echinococcus multilocularis cysts.//J.Parasitol.-1974.-V.60.-P.231-235.

52. Ali-Khan Z., Siboo R. Immune complexes experimental alveolar hydatidosis. // «Tropenmed und Parasitol». — 1983, V.34., №3. -P.187-192.

53. Al-Yaman F. M., Knobloch J. Isolation and partial characterization of species-specific and cross-reactive antigenc of Echinococcus granulosus cyst fluid.// Mol. And Biochem Parasitol., 1989., 37,№ 1, 101-107.

54. Auer H, Aspöck H. Incidence, prevalence and geographic distribution of human alveolar echinococcosis in Austria from 1854 to 1990.//Parasitol Res 1991, 77: 430^136.

55. Bouchara J. P., Robert R., Senet J. M., Leynia de la Jairige P.// Luse en evidence de communautés antigeniques hote-parasite dans l'hydatidose.//Bull. Soc. pathol. exot.// 1985, 78, № 5 Bis, 707-711.

56. Budke CM, Deplazes P, Torgerson PR. Global socioeconomic burden of cystic echinococcosis.// Emerg. Inf. Dis. (2006), 12: 296303.

57. Capron A., Biguet S., Vemes A. Le diagnostic immunoelectrophoretique de l'hydatidose.// J. dyliydatidiogie Sim. ed. Lion.-1967.-P.27-40.

58. Capron A., Yarzabal L., Vernes A., Fruit J. Le diagnostique immunologique de ehcinococcose humaine.//Path. Bid.-1970.-V.18.-N 7-8.-P.357-365.

59. Caremani, M., R. Maestrini, U. Occhini, S. Sassoli, A. Accorsi, A. Giorgio, and C. Filice. Echographic epidemiology of cystic hydatid disease in Italy.//Eur. J. Epidemiol. 1993. 9:401-404.

60. Chordi A., Kagan ITIdentification and characterization of antigenic components of sheep hydatid fluid by immunoelectrophoresis.//J. Parasit.-1965.-V.51 .-N1.-P.63-71.

61. Craig P.S., Rickard M.D. Anti-oncospheral antibodies in the serum of lambs experimentally infected with either Taenia ovis and Taenia hydatygena.// «Z.Parasitenk».-1981.-V.64.№2.-P.169-177.

62. D'Amelio R.; Pontsilli O:; Dayal R.; De Rosa F.; Barnet M.; Teggi A.; Brighouse G.; Lambert P. H. Characterization of parasite antigens from human hydatid cyst fluid by SDS-PAGE and IEF.// Medical microbiology and Immunology.- 1985.-1.- 43-50

63. Dada, B. J., and E. D. Belino. Immunization of sheep against cystic hydatidosis with homologous and heterologous metacestode antigens.// Int. J. Zoonoses.- 1981.-8:20-25.

64. De Werra C, Condurro S, Tramontano S, Perone M, Donzelli I, Di Lauro S, Di Giuseppe M, Di Micco R, Pascariello A, Pastore A, Diamantis G, Galloro G. Hydatid disease of the liver: thirty years of surgical experience.// Chir Ital. 2007; 59: 611-625

65. Deplazes P. Ecology and epidemiology of Echinococcus multilocularis in Europe.// Parassitologia 2006, 48: 37-39

66. Dieckman A., Frank W.// Isolation of viable germinal cells from Echinococcus multilocularis.// Parasitol Res.// 1988, 74, № 3, 297298.

67. Dieckmann-Schuppert A., Ruppel A., Burger R., frank W. Echinoccoccus multilocularis: in vitro secretion of antigen by hybridomas from metacestode germinal cells and murine tumor cells//Experimental Parasitology.- 1989,- V.29.- P. 186-191.

68. Digenis G. A., Konyalian A., Thorson R. In vivo transfer 14C-4-cholesterol from mouse host to encapsulated Trichinella soiralis larvae.// Lipids.- 1970.- V. 5.- N 2.- P. 282-283.

69. Dixon J.B., Jenkins P., Carter S.D., Craig P.S. Abnormal immunoregulation in metacestode infection.//16th. Int. Congr. of Hydatidology, Beijing, China, 1993. V.30. -P.290.

70. Dottorini S., Tassi C. Echinococcus granulosus: characterisation of the main antigenic component (Arc 5) of hydatid fluid.// Exp.Parasitol.-1977.-V.43. №2 -P.307-314.

71. Dottorini S., Tassi C. Echinococcus granulosus: comparison between antigens in scolices and hydatid fluid.// Int.J.Parasitol.-1978.-V.8.-P.259-265.

72. Dottorini S., Sparvoli M., Baldeiii F., Fiorio M., Tassi C. Echinococcus granulosus: diagnosis of hydatid disease in sheep.// Riv. Parassitol.-1984.-V.45.-N2.-P.333-340.

73. Dumon H. N'Doundou M. Y., Mary Ch., Toga J., Gambarelli F., Franck J., Faugere B., Quilici M. Obtention d'antigens metaboliques d Echinococcus granulosus par culture de scolex, resultants préliminaires.// Bull. Soc. fr. parasitol.- 1984, № 3, 123-125.

74. Dumon H., Gambarelli F., Doumbo O., Quilici M. Hydatidose chez l'enfant en Bovence. Mise en evidence de foyers urbains.// Bull, Soc. pathol, exot.- 1986, 79,№ 5 664-669

75. Dusanic D. G. Serologic and enzymatic investigations of Trichinella spiralis. 2. Characterization of larva lactic dehydrogenase.// Exp. Parasitol.- 1967.- V. 20.- N 3.- P. 288-294.

76. Eckert J, Conraths FJ, Tackmann K. Echinococcosis: an emerging or re-emerging zoonosis.// Int. J. Parasitol. 2000; 30:1283-94

77. Eckert J, Deplazes P. Biological, epidemiological, and clinical aspects of echinococcosis, a zoonosis of increasing concern.// Clin Microbiol Rev 2004; 17:107-35.

78. Façon B., Chamekh M., Dissons C., Capron A. Molecular cloning of an E. granulosus protein expressing an immunogenetic epitope of antigen 5. //Mol. and Biochem. Parasitol. -1991. v. 45, N 2. -p. 233-240.

79. Faubert G. M. Antigenic character of parasitic organisms. Ill Parasite products in the regulation of the immune response. // Rev. Adv. Parasitol. Proc. 4-th Int. Congr. Parasitol., Warszawa, 19-26 aug. 1978. Warszawa, 1981.-P. 604-608.

80. Feng J.-J., Xiao S.-H., Guo H.-K, Shen B.-G., Xue H.-C. Isolation of germinal cells from the secondary cysts of Echinococcus granulosus harbored in mice.// Chin. J. Parasitol. and Parasit. Diseases.-1992.-V.10,№2.-P.86-89.

81. Feng J.J., Wang J.Y., Qu J. A., Xiao S.H. ELIB of specific antigens in vitro cultivated cultivated germinal cells of Echinococcus granulosus.// Chin. J. Parasitol. and Parasit. Diseases.-1993.-V.ll, №1.- P.63-65.

82. Feng J.-J., Xiao S.-H., Guo H.-F., Shen B.-G., Jiao W. Screening antyhydatid drugs using cultivated germinal cells of Echinococcus granulosus.// Chin. J. Parasitol. and Parasit. Diseases.-1993.-1 l(№l):12-6.

83. Fiori P.L., Monaco G., Scappaticcis S., Pugliese A., Canu N., Cappuccinelli P. Establishment of cell cultures from hydatid cysts of Ehinococcus granulosus. // Int. J. Parasitol. 1988. - V. 18. - P.297-305.

84. Furuya K., Honnra H., Kumagai M. A cell line derived from larvae Echinococcus multilocularis. // Bull. Soc. Fr. Parasitol. 1990. -V.8, suppl. №>1. — P. 159.

85. Furuya K.// An istablished cell line of larval Echinococcus multilocularis.// Int. J. Parasitol., 1991,21,№ 2, 233-240

86. Garippa G., Varcasia A., Scala A. Cystic echinococcosis in Italy from the 1950s to present.// Parassitologia 2004, 46: 387-391,

87. Gonzalez G., Nieto A., Fernandez C., Om A., Wernstedt Ch., Hellman U. Two different 8 kDa monomers are involved in the oligomeric organization of the native Echinococcus granulosus antigen B. // Parasite Immunol. 1996. - V. 18, №12. - P.587-596.

88. Gottstein B., Eckert J., Fey H. Serological differentiation between Echinococcus granulosus, Echinococcus multilocularis in man.// Z. Parasitenk.-1983.-V.69.-N3 .-P.347-3 56.

89. Haernandez A., Nieto A. Inducion of protective immunity against murine secondary hydatidosis.// Parasite Immunol. 1994. -V.16,№ 10. - P.537 - 544

90. Hariri M. N., Schvabe C. W., Koussa M. Host-parasite relationships in echinococcosis.XI. The antigens in the indirect hemagglutination test for hydatid disease.// Am.J.Trop.Med.-1965.-V.14.- P.592-604.

91. Harrison J.S., Parkhouse R.M.E. Antigens of Taeniid cestodes in protection, diagnosis and escapl. // Parasite Antigens Protect. Diagn. And Esape. 1985. — P.159-172.

92. Harrison L.J. & Parkhouse R.M.- Antigens of taeniid cestodes in protection. Curr. Top. Microbiol. Immunol., 1985, 120, 159-172.

93. Heath D.D. Resistance of Taenia pisiformis larvae in rabbits: Immunisation against infection using non-living antigens from in vitro culture.// Intern .J.Parasitology.-1976.-V.6.-P. 19-24.

94. Heath D.D. Immunobiology of Echinococcus infections. In The biology of Echinococcus and hydatid disease.// Allen & Unwin, London.-1986.- 164-188.

95. Heath D.D., Holeman B., Shaw P.J. Echinococcus granulosus: the mechanism of oncosphere lysis by sheep complement and antibody. // Int. J. Parasitol. 1994. - V.24, №7. - P.929-935.

96. Heath D.D., Lawrence S. B. Definition of a protective molecule against infection of sheep with Echinococcus granulosus.// 8th Int. Congr. Of Parasitol. 10-14 oct. 1994. Izmir-Turkey. Abstracts, V.l: 213.

97. Heath D.D. Immunology of Echinococcus infections. In Echinococcus and hydatid disease. // CAB International, Wallingford, Oxon.- 1995.- 183-232.

98. Heath D.D. & Holeman B- Vaccination against Echinococcus in perspective. // Acta trop., 1997. 67, 37-41.

99. Hughes D. L., Hanna R. E., Symonds H. W. Fasciola hepatica: IgG and IgA levels in the serum and bile of infected cattle// Exp. Parasitol.- 1981.- V. 52.- № 2.- P. 271-279.

100. Kagan I., Norman L. Antigenic analisis of Echinococcus antigens by agar diffusion techniques.// Amer. J. Trop. Med. a Hyg.-1961.- V. 10.- N5.-P.727-734.

101. Kagan I., Norman L. Analisis of helminth antigens . (Echinococcus granulosus and Shistosoma mansoni) by agar gel methods.// Ann. N. Y. Acad. Sci.-1963.-V.l 13.-P.130-53.

102. Kagan I., Agosin M. Echinococcus Antigens.// Bull. Wed. Heth Org. 1968, 39, 1, 13-24.

103. Kagan I., Norman L. Evaluation of Echinococcus antigens for the diagnosis of hidatid disease.// Rev. Iber. Parasitol., 1979, 39, № 14, 153-164.

104. Kaimal KP. Computed tomography in the diagnosis of pericardial cyst.// Am. Heart J. 1982; 103: 566-7.

105. Kammerer WS, Schantz PM. Echinococcal disease.// Infect Dis Clin North Am 1993;7:605-18.

106. Kanwar J.R., Kanwar R. Purification and partial immunochemical characterization of low molecular mass diagnostic Echinococcus granulosus immunogen for sheep hydatidosis.// FEMS Immunol, and Med. Microbiol.-1994.-V.9.-N2.-P.101-108.

107. Kreidl P, Allerberger F, Judmaier G, Auer H, Aspöck H, Hall AJ, Domestic pets as risk factors for alveolar hydatid disease in Austria. // Am. J. Epidemiol.- 1998.- 147: 978-981.

108. Kudrna K., Procopic J. Vaccination against cestodes review and prospect. // 2nd Int. Symp. Taeniasis, 2-7 Dec., Ceske Budejovice. - 1986. -P.46-55.

109. Lightowlers M.W. Cestode infections in animals: Immunological diagnosis and vaccination.// Rev. Sei.et ted. off. Int. Episoot.-1990.-V.9.-N2.-P.463-467.

110. Lightowlers M.W., Roife R., Ganci Ch. G. Taenia saginata: vaccination against cysticercosis in cattle with recombinant oncosphere antigens// Exp. Parasitol. 1996. - V.84, №3. - P.330-338.

111. Lightowlers M.W., Lawrence S.B., Gauci C.G., Young j., Ralston M.J., Maas D. Vaaccination against hydatidosis using a defined recombinant antigen.// Parasite Immunology. 1996. - V. 18, №9. - P.457 -462.

112. Lightowlers M.W., Heath D.D. Immunity and vaccine control of Echinococcus granulosus infection in animal intermediate hosts Parassitologia.- 2004.- 46: 27-31.

113. Lu J.H., Cheng W.X., Guo Z. M., Kong Ch. Q., Feng D.U., Li D.Ch., Guo J.M. et al. Cultivation of an Echinococcus granulosus larvae cell line// Chin. J. vet. Sci.-1998.-V.18, №5.-P.479-482.

114. Machnicka B. The common antigens of Cysticercus bovis and Taenia saginata. // Bull. Acad. Pol. Sei. Ser. Sei. Biol. 1974. - V.22, №3.-P. 197-199.

115. Macpherson CNL, Use of ultrasound in the diagnosis of parasitic disease.// Trop Doct 1992, 22: 14-20.

116. Mc Laren D. J. Disquse as an evasiwe stratagem of parasitie organisns. // Parasitology. 1984. - V.88, №4,- P.597 -611.

117. Mc Laren D. J., Terry R. J. Antiparasite vaccines.// Trans Roy. Soc. Trop. Med. Hyd., 1989, 83, № 2, 145-146

118. Mc Manus D.P. Characterization of taeniid cestodes by DNA analysis. // Rev. sei. et tech. off int epizool. 1990. - P.489-510.

119. Mandell GL, Douglas RG, Bennett JE, Dolin R. In: Mandell, Douglas, and Bennett's Principles and practice of infectious diseases.// 5th ed. Philadelphia: Churchill Livingstone, 2000:2956-65.

120. Manweiler E., Thöle A., Leberer I. Beiträge zur Immundiagnostik der Echinokokkose des Menschen.// Zbl.

121. Bakteriol.// Paraziten K. Intektions Kraiikh und Hyg.// 1977.ABt. 1-Orig, A. 238, № 4, c.494-502.

122. Marcos Cidrera E., Torres Rodrigues J. M., Amaral Olivera M. Reacciones cruzadas entre sueros de enfermos de hidatidosis y un antigeno soluble de T. saginata; estidio inmunoelectro foretico.// Rev. Iber. Parasitol., 1984, 44, № 3, 253-263.

123. Mitchell G. H. A vaccine for ovine cysticercosis.// Vaccine, 1989, v 7, №5, 379

124. Mitchell G. F. Problems specific to parasite vaccines.// Parasitology.-1989. v 98.- p. 9-28

125. Monzon C. M., Coltorti E. A., Varela-Diaz V. M. Application of antigens from T. hydatigena cyst fluid for the immunodiagnosis of human hydatidosis.// Z. Parasitenk, 1985, 71, № 4, 533-537.

126. Movsesijan, M., and Z. Mladenovic. Active immunisation of dogs against Echinococcus granulosus.// Vet. Glas. -1970. -24:189193.

127. Movsesijan, M., A. Sokolic, and Z. Mladenovic. Studies on the immunological potentiality of irradiated Echinococcus granulosus forms: immunization experiments in dogs. // Br. Vet. J. -1968.-124: 425-432.

128. Murrell K. D., Despommier D. D. Immunization of swine against Trichinella spiralis.// Vet. Parasitol.- 1984.- V.15.- N 3/4.- P. 263-270.

129. Nisenbaum HL, Rowling SE. Ultrasound of focal hepatic lesions.// Semin Roentgenol. 1995.-30: 324-3346.

130. Onawunmi O.A., Coles G.C. Attempt tu immunise sheep with culture antigens of Taenia hydatigena.// Res. In. Veter. Sci.-1980.-V.29.-№ 1 .-P. 102-103.

131. Oriol R., Williams J.F., Perez Esandi M.V., Oriol C. Purification of lipoprotein antigens of Echinococcus granulosus from sheep hydatid fluid.//Amer. J. Trop. Med. a Hyg.-1971.-V.20.-P.569-574.

132. Osborn O J., Heath D.D., Roberts M.G. Vaccination of sheep against Taenia ovis. The response to various dose rates of antigens obtained by incubation of oncosperes in vitro. // Res. Vet. Sei., 1982,V. 32, №3,-P. 351-353.

133. Osborn P.J., Heath D.D. Immunisation of lambs against Echinococcus granulosus using antigens obtained by incubation of oncospheres in vitro//Res.Vet. Sci.-1982.-V.33.-P.132-133.

134. Pery P., Luffau G., Petit A., Charley J. Immunogenicity of phosphorylcholine bearing antigens.// 4th Inter. Congr. Parasitology, 19-26 aug.- 1978. Warshaw.-P. 130.

135. Play ford M.C., Ooi H.K., Oku Y., Kamiya M. Immunology: rodent intermediate Host models for alveolar echinococcus: biology and immunology.// Alveolar Echinococcosis Liver — Sapporo. 1993. -P. 33-49.

136. Pozzuoli R., Musiani P., Arm E., Piantelli M., Mazzarella R./Echinococcus granulosus: Isolation and characterization of sheep hydatid fluid antigens.//Exp.Parasitol.-1972.-V.32.-P.45-55.

137. Pozzuoli R., Musiani P., Arm E., Patrono C., Piantelli M. Echinococcus granulosus: evaluation of purified antigens' immunoreactivity.// Exp.Parasitol.-1974.-V.35.-P.52-60.

138. Pozzuoli R., Piantelli M., Perucci C., Arm E., Musiani P.// Isolation of the most immunoreactive antigens of Echinococcus granulosus from sheep hydatid fluid.// J.Immunol.-1975.-V.115.-P.1459-1463.

139. Rafiei A., Craig P. S. The immunodiagnostic potential of protoscolex antigens in human cystic echinococcosis and the possible influence of parasitic strain.// Ann. Trap. Med and Parasitol; 2002, 96, №4,383-389.

140. Rickard M.D., Bell K.J. Successful vaccination of lambs against infection with Taenia ovis using antigens produced during in vitro cultivation of the larval stages.// Res.Vet.Sc.-1971 (.-V.12.-N4.-P.401-402.

141. Rickard M.D., Adolph A.J. Vaccination of calves against Taenia saginata infection using a «parasite-free» vaccine. // Vet. Parasitology. 1976. - №1. - P.389.

142. Rickard M.D., White J.B., Boddington E.B. Vaccination of lambs against infection with Taenia ovis. // Austr. Vet. J. — 1976. -V.52.№5. -P.209-214.

143. Rickard M.D., Adolph A.J. Vaccination of lambs against infection with Taenia ovis using antigens collected during short-term in vitro incubation of activated T. ovis oncospheres. // Parasitology. -1977. V.75, №2. - P. 183-188.

144. Rickard M.D. The use of in vitro culture of Taeniid cestode larvae to collect antigens for immunization against infection. //4-th Intern.Congr. Parasitol. 19-26 Aug. 1978. Warsawa. Short Commun. Sect.-P.67.

145. Rickard M.D., Harrison G.B.J., Heath D.D., Lightowlers M.W. Taenia ovis recombinant vaccine-«quo vadit».// Parasitology.-1995.-V.110.-P.5-9.

146. Rothwell T. L. W., Merrit G. C. Vaccination against the nematode Trichostrongylus colubriformis. 2. Attempts to protect guinea pigs with worm acetylcholinesterase.// Inter. J. Parasitol.-1975. V. 5.-P. 453-460.

147. Sakamoto T., Yamashita J., Ohbayashi M. Studies of echinococcosis, XVIII, Observations on tissue cultured germinal cells of larval Echinococcus multilocularis.//Jpn. J. Vet. Res.-1967.-V.15-P. 75-83.

148. Sakamoto T. Development of echinococcal tissue cultured in vitro and in vivo.//Mem. Fac. Agric. Kagoshima Univ.-1978.-V.14.№23-P.109-113.

149. Sakamoto T., Kotani T.// Stadies on Echinococcus. XX. Preliminary observation of the in vitro cultivation of larval tissues of Echinococcus multilocularis in culture chamber of porous membrane.// Jap.J.Vet.Res.-l 967.-V. 15.-N4.-P. 165-170.

150. Sakamoto T. Observation on hystogenesis and serial passages of larval Echinococcus multilocularis in diffusion chamber inserted into the abdominal cavity.// XVII. Int. Congr. Of Hydatidology, 1995.-P.133.

151. SHI Zhiyun, WANG Yana, LI Zongji, MA Rui, ZHAO Wei.// Cloning, Expression, and Protective Immunity in Mice of a Gene Encoding the Diagnostic Antigen P-29 of Echinococcus Granulosus.// ActaBiochim Biophys Sin .-2009, 41: 79-85

152. Smith M.A. Echinococcus granulosus and Echinococcus multilocularis: in vitro Culture of the Strobilar stages from Protoscoleces.//Angew.Parasit.-1979.-V.20.-P.137-147.

153. Smithers S., Terry R. The immunology of Schistosomiasis.// J. Parasitol.- 1969.- V. 7.- P. 41-95.

154. Stromberg B., Soulsby E. J. L. Heterologous helmunth induced resistance to Ascaris suum in guinea pigs.// Vet. Parasitol.- 1977.- V. 3.-№2.- P. 169-175.

155. Su D. M., Cao H. X., Wen B. I. Immunochemical analysis of hydatid fluid from different sources as diagnostic antigen in human hydatidosis.// Chinese Journal of Parasitic Diseasen Control, 1988, 1, № 1,29-31.

156. Tuerhong Ha. J., Zhang Z.Z., Zhang W.B., Hasyet Qi.P.S. Studies on immunization of sheep hydatidosis. //16th Int. Congr. of Hydatidol., Beijing, oct. 12-16, 1993. Beijing, China. 1993. -P.302.

157. Turcecova L., Kolarova L., Dubinsky P., Martinek K. Characteristics of antigens in tapeworms of the genus Echinococcus. //Helmintilogia.-1997.-V.34.- N3,- P. 188-189.

158. Turcecova L., Snabel V., Beladicova V., Dubinsky P. Genetic diversity of Echinococcus spp. In Slovakia.// Helminthologia, 2000, 37., 3: 178.

159. Varela-Diaz V. M., Coltorti E. A., Rickard M. D., Torres J. M. Comparative antigenic characterisation of Echinococcus granulosus and Taenia hydatigena cyst fluids by Immunoelectrophoresis. // Res. Vet. Sci.- 1977.- V.23, №2.-P.213-216.

160. Voller A., Bidwell D., Huldt G., Engvall E. A microplate method of enzyme-linked immunosor bent assay and it's application to malaria. // Bull. Wld. Hlth. Org.-1974.-V.l, №2.P.209-211.

161. Wang P., Feng X. H. Analysis of antigenicity of Echinococcus granulosus cyst fluid from different hosts in Xinjiang.// 16th Int. Congr. of Hydatidology, Beijing, Oct. 12-16, 1993. Beiging, China, 1993:300.

162. Yarzabal L. A., Bout D. T., Naguira F. R., Capron A. R. Further observation on the specificity of antigen 5 of Echinococcus granulosus.// J. Parasitol., 1977, 63, № 3, 495-499.

163. Zhang L. H., Mc Manus D. P. Purification and N-Terminal amino acid sequencing of Echinococcus granulosus antigen 5.// Parasite Immunology, 1996, 18,№ 12: 597-606.

164. Zhang W, Zhang Z, Shi B, Li J, et al. Vaccination of dogs against Echinococcus granulosus, the cause of cystic hydatid disease in humans. Infect Dis 2006, 194(7): 966-974.

165. Zhu X. Q., Don L.Q., Shi X.H., Sun X.Q., Wang X.H., Niu B.H. Stadies on excretory-secretory (ES) antigens of Echinococcus granulosus: the immunogenicity of ES antigens of the protoscolex. // Chin. J. Vet. Sci a Technol., 1991(a).-V.21, №11.-P. 8-10.

166. Zhu X. Q., Don L.Q., Shi X.H., Sun X.Q., Wang X.H., Niu B.H. Stadies on excretory-secretory (ES) antigens of Echinococcus granulosus: the immunogenicity of ES antigens from oncosphere.// Chin. J. Vet. Sci a Technol., 1991(6). - V.21, №9. - P. 6-9.

167. Zhu X. Q., Dou L.Q., Shi X.H., Sun X.Q., Wang X.Q, Niu B.H. Stadies on excretory-secretory antigens of Echinococcus granulosus.// Int. Conf. on Parasitic Zoonoses, Sept. 20-24, 1994. Changchun, China, Abstracts 1994; 18-19.